CN108785357A - 一种乳香酸与没药萜配伍组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

一种乳香酸与没药萜配伍组合物及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种乳香酸与没药萜配伍组合物，以乳香酸类、没药萜类为基本活性成分，配伍应用具有显著抗炎镇痛作用的药物组合物，且优于乳香酸、没药萜各自单独使用效果，并公开了其制备方法，本发明还涉及药物组合物在炎性疼痛、癌性疼痛、神经性疼痛等慢性疼痛疾病中的应用，该药物组合物作为镇痛剂使用，其除兼有抗炎、抗肿瘤作用外，还具有长期使用不产生依赖、不产生戒断反应的优点。

Description

一种乳香酸与没药萜配伍组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于一种天然组合物镇痛剂制备及其应用技术领域，具体涉及一种由乳香酸与没药萜配伍组合物，及其在制备预防或治疗慢性疼痛疾病或保健品中的应用和制备方法。
背景技术
慢性疼痛是指疼痛时间持续3个月以上，疼痛频率每周至少1次，伴随不愉快的感觉和情绪，可能伴随有现存的或潜在的组织伤害。慢性疼痛是疼痛的常见类型，是临床上最为常见疾病，也是严重影响人类健康的疾病之一。流行病学研究显示，遭受慢性疼痛的人群占人口比例高达约20％～30％。研究表明，一部分慢性疼痛由急性创伤发展而来，例如慢性手术后疼痛、幻肢痛、神经病理性疼痛等。慢性疼痛也常伴有神经系统致炎细胞因子异常升高，在外周神经或中枢施以致炎细胞因子可模拟神经损伤引起的慢性疼痛和记忆情感障碍。根据世界卫生组织(WHO)所制定的国际疾病分类(ICD)将慢性疼痛分为以下几大类：慢性原发性疼痛、慢性癌性疼痛、慢性术后痛和创伤后疼痛、慢性神经病理性疼痛、慢性头部和颔面部疼痛、慢性内脏疼痛、慢性骨骼肌疼痛等。临床常用的药物包括以下几类：阿片类药物、非甾体类解热镇痛药、抗癫痫药、抗抑郁药等。但这些药物具有成瘾性、耐受性、或对胃肠系统、也血管系统、凝血系统及肝脏和肾脏产生不良影响、或对部分患者无效等负面特征。
中医对慢性疼痛病症的认识和治疗有着独特的优势。中医认为，痛症产生的原因甚多，如邪气外侵，七情、饮食、劳倦内伤以及跌扑损伤、虫兽咬伤等，最终均可引起慢性疼痛。慢性疼痛的病机主要为“不通则痛”、“不荣则痛”两方面。中医对慢性疼痛的治法较成熟，且方法多样，根据疼痛产生的病因病机,本着治病求本的治疗原则,对于疼痛的治疗通过对机体中表现出的“不通”和“不荣”采取相应的“疏通”和“滋补”的方法进行治疗。具体治疗方法包括疏风止痛、散寒止痛、清热止痛、理气止痛、活血止痛、益气止痛和补血止痛等。
乳香(Frankincense)为橄榄科植物乳香树BoswelliacarteriiBirdw.及同属植物BoswelliabhaurdajianaBirdw.树皮渗出的树脂。乳香辛温香窜，善透穷以理气，能于血中行气，舒筋活络，消肿止痛。乳香中主要含有α-乳香酸、β-乳香酸、和3α-羟基甘遂-8,24-二烯-21-酸等乳香酸类三萜类化合物，该类成分具有抗肿瘤、抗菌、抗炎、镇痛、抗氧化等。
没药(Myrrha)为橄榄科植物没药树(Commiphoramyrrha Engl.)及同属它种植物的树干皮部渗出的胶状树脂。没药味辛性温，擅化瘀理血，消肿痛，以活血散瘀为主。没药中主要含有挥发油类和二萜酸类成分：挥发油类成分包括单萜烯、倍半萜，具有抗炎、镇痛活性；二萜酸类包括枞酸、香松胶酯酸等，具有抗肿瘤、抗菌、镇痛、抗炎等多种生物活性。
发明内容
发明目的：本发明的目的是针对现有药物对慢性疼痛治疗的不足，提供一种新的由乳香酸、没药萜配伍组成的天然来源的小分子有效组合物，对各种原因导致的疼痛具有显著的镇痛、抗炎以及抗肿瘤等多种生物活性，从而为新型镇痛剂的创制提供技术支撑。
技术内容：
一种乳香酸与没药萜配伍组合物，乳香酸与没药萜两者重量配比范围为1:1～10:1。
所述乳香酸与没药萜配伍组合物，乳香酸、没药萜分别从乳香、没药药材中经提取、纯化富集制备获得，其中乳香酸纯度达40％～60％，没药萜纯度达30％～50％。
所述乳香酸与没药萜配伍组合物，乳香酸成分为α-乳香酸、β-乳香酸、3-乙酰基-11-酮基-β-乳香酸、3-羟基甘燧烷-8,24-二烯-21-酸、3α-乙酰基-甘燧-7,24二烯-21-酸同一结构母核的化合物，其重量比例为1.5-2.5：1.5-2.5：2.5-3.5：5.5-6.5：3.5-4.5，没药萜类成分为倍半萜的2-甲氧基-5-乙酰基-呋喃吉玛-1(10)-烯-6–酮、二萜的松胶酯酸，其重量比例为1:1～1:5。
所述乳香酸与没药萜配伍组合物，制备方法，包括以下步骤：
(1)提取制备：分别称取乳香、没药药材各50份，粉碎成粗粉，以药材10倍重量份的60％～95％乙醇回流提取2～3次，每次1～2h，合并滤液，浓缩，分别获得乳香酸粗提物、没药萜粗提物；
(2)纯化制备：取(1)中乳香酸粗提物、没药萜粗提物分别用乙酸乙酯萃取，反复三次，合并乙酸乙酯部位提取液，减压浓缩，得乙酸乙酯部位浓缩液；乳香乙酸乙酯部位、没药乙酸乙酯部位分别通过干法或湿法上样，经硅胶柱分离，洗脱，分别收集乙酸乙酯:甲醇(2:1)洗脱液3～5倍柱体积，得乳香酸部位，乳香酸所含有的α-乳香酸、β-乳香酸、3-乙酰基-11-酮基-β-乳香酸、3-羟基甘燧烷-8,24-二烯-21-酸、3α-乙酰基-甘燧-7,24二烯-21-酸，其重量比例为1.5-2.5：1.5-2.5：2.5-3.5：5.5-6.5：3.5-4.5；收集乙酸乙酯:甲醇(10:1)洗脱液3～5倍柱体积，得没药萜，没药萜所含有的2-甲氧基-5-乙酰基-呋喃吉玛-1(10)-烯-6–酮、松胶酯酸，其重量比例为1:1～1:5；
(3)制剂：所述的提取纯化后的乳香酸、没药萜按照纯化物总重量的1:1～10:1配伍，制备成口服给药剂型、注射给药剂型、粘膜给药剂型或者经皮给药剂型，口服给药剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液；经皮给药剂型为贴剂或者凝胶剂。
所述乳香酸与没药萜配伍组合物在制备预防或治疗慢性疼痛疾病的药物或保健品中的应用。
所述乳香酸与没药萜配伍组合物在制备预防或治疗慢性疼痛疾病的药物或保健品中的应用，慢性疼痛包含炎性疼痛、癌性疼痛、神经性疼痛。
乳香酸与没药萜配伍组合物通过抑制炎症因子在制备预防或治疗炎性疼痛药物或保健品中的应用。
乳香酸与没药萜配伍组合物通过抑制IL-6、VEGF、TNF-α和IGF-1等细胞因子在制备预防或治疗癌性疼痛药物或保健品中的应用。
乳香酸与没药萜配伍组合物通过直接抑制疼痛反应在制备预防或治疗神经性疼痛药物或保健品中的应用。
有益效果：
本发明提供的乳香酸与没药萜配伍组合物显示出较好的镇痛、抗炎、抗肿瘤等效果，其镇痛抗炎效果优于各自单独使用效果。且属非甾体激素类，不产生成瘾性、不产生戒断反应。可作为包括炎性疼痛、肿瘤引起的疼痛、神经性疼痛以及跌打损伤疼痛等慢性疼痛疾病患者的药品、保健功能产品等短期或长期应用。应用途径可为口服给药、或皮下注射给药、或粘膜给药或者经皮给药等。所采用产品剂型可为片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、贴剂或者凝胶剂等。
具体实施方式
根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的具体的物料配比、工艺条件及其结果仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
实施例1：乳香酸与没药萜配伍组合物的制备
a：乳香酸、没药萜的提取制备
分别称取乳香、没药药材各50g，粉碎成粗粉，以药材10倍重量95％乙醇回流提取2次，每次2h，合并滤液，浓缩，分别获得乳香酸粗提物27.8g、没药萜粗提物24.9g。
b:乳香酸、没药倍半萜的纯化制备
取乳香酸粗提物、没药倍半萜粗提物分别用乙酸乙酯萃取，反复三次，合并乙酸乙酯部位提取液，减压浓缩，得乙酸乙酯部位浓缩液。乳香乙酸乙酯部位、没药乙酸乙酯部位分别通过干法拌样上样，经硅胶柱分离，洗脱，分别收集乙酸乙酯:甲醇(2:1)洗脱液3倍柱体积，得乳香酸部位，纯度为60.8％，所含有的α-乳香酸、β-乳香酸、3-乙酰基-11-酮基-β-乳香酸、3-羟基甘燧烷-8,24-二烯-21-酸、3α-乙酰基-甘燧-7,24二烯-21-酸，其重量比例为1.5：2.5：2.5：6.5：3.5，收集乙酸乙酯:甲醇(10:1)洗脱液3倍柱体积，得没药萜，纯度为38.9％，所含的2-甲氧基-5-乙酰基-呋喃吉玛-1(10)-烯-6–酮与松胶酯酸重量比例为1:1.5。
c:所述的提取纯化后的乳香酸、没药倍半萜按照纯化物总量的1:1配伍，得配伍天然组合物，添加辅料，制备成片剂。
实施例2：乳香酸与没药萜配伍组合物的制备
a：乳香酸、没药萜的提取制备
分别称取乳香、没药药材各50g，粉碎成粗粉，以药材10倍重量60％乙醇回流提取2次，每次2h，合并滤液，浓缩，分别获得乳香酸粗提物28.5g、没药萜粗提物23.4g。
b:乳香酸、没药倍半萜的纯化制备
取乳香酸粗提物、没药倍半萜粗提物分别用乙酸乙酯萃取，反复三次，合并乙酸乙酯部位提取液，减压浓缩，得乙酸乙酯部位浓缩液。乳香乙酸乙酯部位、没药乙酸乙酯部位分别通过干法拌样上样，经硅胶柱分离，洗脱，分别收集乙酸乙酯:甲醇(2:1)洗脱液3倍柱体积，得乳香酸部位，纯度为60.8％，所含有的α-乳香酸、β-乳香酸、3-乙酰基-11-酮基-β-乳香酸、3-羟基甘燧烷-8,24-二烯-21-酸、3α-乙酰基-甘燧-7,24二烯-21-酸，其重量比例为2:2:3:6:4，收集乙酸乙酯:甲醇(10:1)洗脱液3倍柱体积，得没药萜，纯度为38.9％，所含的2-甲氧基-5-乙酰基-呋喃吉玛-1(10)-烯-6–酮与松胶酯酸重量比例为1:1.2。
c:所述的提取纯化后的乳香酸、没药倍半萜按照纯化物总量的10:1配伍，得配伍天然组合物，添加辅料，制备成胶囊剂。
实施例3：乳香酸与没药萜配伍组合物的制备
a：乳香酸、没药萜的提取制备
分别称取乳香、没药药材各50g，粉碎成粗粉，以药材10倍重量75％乙醇回流提取2次，每次2h，合并滤液，浓缩，分别获得乳香酸粗提物29.1g、没药萜粗提物25.3g。
b:乳香酸、没药倍半萜的纯化制备
取乳香酸粗提物、没药倍半萜粗提物分别用乙酸乙酯萃取，反复三次，合并乙酸乙酯部位提取液，减压浓缩，得乙酸乙酯部位浓缩液。乳香乙酸乙酯部位、没药乙酸乙酯部位分别通过干法拌样上样，经硅胶柱分离，洗脱，分别收集乙酸乙酯:甲醇(2:1)洗脱液3倍柱体积，得乳香酸部位，纯度为60.8％，所含有的α-乳香酸、β-乳香酸、3-乙酰基-11-酮基-β-乳香酸、3-羟基甘燧烷-8,24-二烯-21-酸、3α-乙酰基-甘燧-7,24二烯-21-酸，其重量比例为2.5：1.5：3.5：5.5：4.5，收集乙酸乙酯:甲醇(10:1)洗脱液3倍柱体积，得没药萜，纯度为38.9％，所含的2-甲氧基-5-乙酰基-呋喃吉玛-1(10)-烯-6–酮与松胶酯酸重量比例为1:1.2。
c:所述的提取纯化后的乳香酸、没药倍半萜按照纯化物总量的5:1配伍，得配伍天然组合物，添加辅料，制备成凝胶剂。
实施例4：乳香酸与没药倍半萜配伍组合物抑制佐剂型关节炎大鼠导致的炎性疼痛
1.材料与试剂
1.1动物
SD大鼠，雄性，体质量(220±20)g，购自浙江省实验动物中心，动物许可证号：SCXK(浙2014-0001)，动物房温度(22±2)℃，湿度(55±10)％，12h明暗交替。
1.2佐剂型关节炎大鼠模型建立
实验大鼠在造模前首先进行7天适应性喂养，扣除空白对照组，其余大鼠均进行造模处理。造模方法参照经典的弗氏完全佐剂法稍作改良。具体步骤如下，将实验动物固定，吸取0.1mL弗氏完全佐剂注射入实验动物右后足趾皮内，迅速诱发以肿胀为主要表现形式的局部炎症反应，7天后，再次使用弗氏完全佐剂尾根部皮下注射，加强免疫，空白组大鼠采用同体积的生理盐水进行同步处理。造模后第13天，测量每只大鼠左右足跖容积，模型组足跖容积与空白组比较有显著差异，并观察发现足跖红肿明显提示造模成功。
1.3分组及给药
按上述实施例1方法制备乳香酸与没药倍半萜配伍组合物(下同)，初次免疫后大鼠按体质量和足肿胀程度随机分为AA模型组(M)、阳性对照组(Y)(吲哚美辛，IMT)(10mg/Kg·d)、乳香酸与没药倍半萜配伍组合物组(RM)(10mg/Kg·d)、乳香酸组(R)(10mg/Kg·d)、没药倍半萜组(M)(10mg/Kg·d，每组8只。大鼠2次免疫刺激后第二天开始灌胃给药，每天一次，连续给药21天，空白对照组与模型组大鼠每天以生理盐水进行灌胃，阳性药对照组每天灌胃3mg/kg吲哚美辛，2次免疫当天记为day0。
2.实验结果
2.1致炎后各组大鼠不同时间体重的变化
致炎后各组大鼠不同时间体重的变化，见表1。造模前各组大鼠体重与模型组体重比较，正常组体重与模型组体重有显著性差异(P≤0.05)，其余各组与模型组比较差异均无统计学意义(P＞0.05)。造模后第13d、第20d、第24d、第27d、第30d与模型组比较，体重增加值差异均无统计学意义(P＞0.05)。
表1每组大鼠体重变化的比较(n＝8)
注：与正常组比较，*P≤0.05表示有显著性差异
2.2致炎后各组大鼠不同时间右足跖肿胀程度的影响
致炎后各组大鼠不同时间右足跖肿胀程度的影响，见表2。造模前，正常组、IMT组、RM组、R组、M组大鼠右足跖容积均与模型组无显著性差异(P＞0.05)；造模后第13d，正常组与模型组比较有极显著性差异(P＜0.001)，其余各组与模型组比较均无显著性差异(P＞0.05)；造模后第20d，正常组、IMT组、RM组与模型组比较有极显著性差异(P＜0.001)，R组、M组与模型组比较有非常显著性差异(P＜0.01)；造模后第24d，RM组与模型组比较有非常显著性差异(P＜0.01)，其余各组与模型组比较均有极显著性差异(P＜0.01)；造模后第27d、第30d各组大鼠右足跖容积与模型组比较均有极显著性差异(P＜0.01)。提示，RM组优于R组、M组治疗效果。
表2每组大鼠右足跖肿胀程度的变化(n＝8)
注：与正常组比较，###P＜0.001极显著性差异；与模型组比较，**P＜0.01非常显著性差异，***P＜0.001极显著性差异
2.3对各组大鼠右足跖肿胀组织中NO、MDA、IL-2、PGE2、TNFα的影响
各组大鼠右足跖肿胀组织中NO、MDA、IL-2、PGE2、TNFα的影响见表3。RM组大鼠右足跖肿胀组织中MDA含量与模型组比较有非常显著差异(P＜0.01)，其余各组与模型组比较有极显著差异(P＜0.001)；RM组大鼠右足跖肿胀组织中IL-2含量与模型组比较有非常显著差异(P＜0.01)；RM组大鼠右足跖肿胀组织中NO、PGE2、TNFα的含量与模型组比较均有极显著差异(P＜0.001)。提示，RM组优于R组、M组治疗效果。
表3对大鼠血浆中NO、MDA、IL-2、PGE2、TNFα含量的影响(n＝8)
注：与正常组比较###P＜0.001极显著性差异；与模型组比较，*P＜0.05有显著性差异，***P＜0.001有极显著性差异
实施例5：乳香酸与没药萜配伍组合物对热板所致小鼠疼痛反应的影响
1.实验方法
小鼠先用热板测痛仪器(55.5℃)分别测定每只小鼠的正常痛阈值：从小鼠放于热板上至出现舔后足的所需时间作为痛阈值(秒)，连续2次，间隔30分钟，以2次痛阈值的平均值作为该小鼠给药前的正常痛阈值。将舔后足时间小于5秒或大于30秒，或跳跃者弃之不用。取痛阈值筛选合格的雌性小鼠50只，根据其正常阈值大小随机搭配分成5组，模型对照组、阳性药物对照组(杜冷丁)、RM组、R组、M组，每组10只，模型对照组给予等体积生理盐水，阳性药物对照组给予2.5mg/mL浓度的杜冷丁0.2mL。连续给药3日，末次给药后30、60、90、120min分别测定阈值。
2.实验结果
由表4可看出，乳香酸与没药萜配伍组合物显示出显著的镇痛作用，且优于R组和M组。提示，乳香酸与没药萜配伍组合物在伤害性热痛测定试验中，表现出良好的时间依赖的镇痛作用，灌胃处理30min后即出现明显的镇痛作用抑制持续到5小时。
表4对小鼠热板致痛的影响
与给药前比较，**P<0.01，*P<0.05；与生理盐水组比较，△△P<0.01，△P<0.05。
实施例6对醋酸所致小鼠疼痛扭体反应的影响
1.实验方法
将小鼠随机分成模型对照组、阳性药物对照组(杜冷丁)、RM组、R组、M组。模型对照组给予等体积生理盐水，阳性药物对照组给予2.5mg/mL浓度的杜冷丁0.2mL，连续给药3日，末次给药后0.5h，每只小鼠腹腔注射0.6％冰醋酸0.1ml/10g，同时用秒表计时，记录20min内小鼠扭体次数。
2.实验结果
由表5可见，RM组与生理盐水组比较，具有显著的镇痛效果(p<0.05)，且优于R组和M组。RM组扭体抑制率达82％。
表5对醋酸致小鼠扭体的影响(n＝10)
实施例7乳香酸与没药萜配伍组合物抑制癌性疼痛
1.动物
6-8周龄雌性NOD-SCID小鼠70只，SPF环境中饲养，体重17-20g。适应性喂养1周，期间自由采食饮水，室内通风条件良好，昼夜变化正常，相对湿度50％～70％，室温20～25℃。
2.人骨髓瘤移植动物模型的建立
将2×106U266细胞重悬于100uLPBS，皮下注射于NOD-SCID小鼠左前肢腋下。待肿瘤体积长到100mm3时，表示造模成功，空白组注射等量PBS。
3.分组及给药
将造模成功的小鼠随机分为5组，每组10只，其中4只观察生存期，6只观察其他指标：空白对照组、模型组、RM组、R组、M组。空白对照组和模型组以生理盐水灌胃(0.1mL/l0g)；以灌胃给药，每日1次。连续给药4周。
4.实验结果
4.1小鼠的一般状况和抑瘤率
观察裸鼠的一般状况，包括精神状态、活动、反应灵敏度及饮食等。每3天测量1次小鼠体重、瘤体长径、短径，计算移植瘤体积和抑瘤率。结果显示，RM组、R组、M组均具有一定的抑制肿瘤生长(P<0.05或P<0.01)，且RM组抑瘤率优于R组和M组，抑瘤率达85.89％。
表6各组小鼠皮下注射U266细胞后第36天瘤体体积(n＝10)
4.2对血液中IL-6、VEGF、IGF-1、TNF-α的影响
由表7可看出，乳香酸与没药萜配伍组合物显示出显著的降低异常的IL-6、VEGF、IGF-1、TNF-α表达水平，且优于R组和M组。提示，乳香酸与没药萜配伍组合物在肿瘤模型中除表现出良好的抑制肿瘤生长外，尚能够抑制异常表达的细胞因子，这些因子与炎症、血管生长及疼痛密切相关。
表7对大鼠血浆中IL-6、VEGF、IGF-1、TNF-α含量的影响(n＝10)
注：与正常组比较###P＜0.001极显著性差异；与模型组比较，*P＜0.05有显著性差异，***P＜0.001有极显著性差异
实施例8乳香酸与没药萜配伍组合物抑制神经性疼痛
1.实验动物
雄性C57BL/6小鼠(SPF级)60只，8-10周龄，体重25克左右，饲养于南京中医药大学实验动物中心，饲养于专用鼠笼里，可自由饮水和进食。室温20-24℃恒温，45％-65％的湿度，12小时白昼和12小时黑夜交替循环。提前一周饲养于本实验行为学房间，以适应实验环境。
2.坐骨神经慢性压迫模型制备
假手术组暴露坐骨神经后缝合，其佘各组按Bennett等的方法分别进行CCI造模，术后放回鼠笼，等待苏醒，醒后正常饲养。假手术组不给药，其余组小鼠从术后第7天开始灌胃给药，连续10天，到第16天结束，同组小鼠每天灌胃给药的体积是等量的，且同一人操作。
3.实验分组
60只小鼠随机分为6组：①空白组：正常野生型小鼠+蒸馏水；②假手术组：假手术小鼠+蒸馏水；③坐骨神经慢性压迫模型组：CCI小鼠+蒸馏水；④RM组；⑤R组；⑥M组。每组10只。
3.1 VonFreyF实验
6组小鼠分别于实验前1天、术后第1、3、5、7、10、13、16天称体重，然后将钢丝网置于一定高度(一般从网下方刺激小鼠),在钢丝网上放置20立方厘米的正方体鼠盒(四周面密封不可见，上面有孔透明，下空直接扣于网上)，将小鼠放入上述鼠盒内适应1小时。实验时使用VonFrey纤维丝接触刺激小鼠，采取upF-FandF-Fdown方法测定小鼠模型侧后爪50％缩爪阈值。依次使用0.008、0.02、0.04、0.07、0.16、0.40、0.60、1.0、1.4、2.0Fg的力度刺激小鼠后爪。一般先使用0.4Fg的VonFrey丝刺激后爪，若小鼠没有缩爪反应，就换上一个力度即0.6g纤维丝刺激后爪；此时小鼠若出现缩足反应，再选择其下面一个力度即0.16g刺激小鼠后爪。按照这个方法，当出现一次与前一次不同的反应时(无缩爪反应至有缩爪反应或者有缩爪反应至无缩爪反应)时，继续按上述方法刺激4次,加上前2次，一共6次有效刺激，同只小鼠同足每次刺激要间隔20秒，即可完成50％缩腿阈值的测定。
3.2热辐射实验
与VonFrey实验相似，同样在辐射热测痛仪的玻璃板上放置同样的正方体鼠盒，先将实验小鼠放进去适应半小时以上，使用热辐射仪照射小鼠后脚掌正中，记录从开始照射到出现缩爪反应的时间，即缩腿潜伏期。
4.实验结果
神经病理性模型下，乳香酸与没药萜配伍组合物显示出较好的镇痛效果，表现出与加巴喷汀相当的镇痛效果。CCI模型与给药不明显影响小鼠体重，但给药10天后显著延长小鼠热辐射缩足时间，显著提高小鼠机械刺激缩足反应阈值。
模型小鼠对伤害性热刺激的缩脚时间从8.3秒下降到3.4秒，造模16天缩脚时间为3.0秒。小鼠对机械刺激的缩脚强度从1.5下降到0.1，造模16天机械刺激的缩脚强度为0.02，结果表明造模成功。模型组和对照组相比第7天和第16天伤害性热刺激的缩脚时间和机械刺激的缩脚强度都有显著性的下降。
灌胃给药10天后小鼠对热刺激的缩脚时间恢复到6.6秒(p<0.001)，小鼠对机械刺激的缩脚强度恢复到0.56(p<0.01)，与模型组比较均有显著性的改善。小鼠对热刺激的阈值恢复到7.6秒(p<0.001)，小鼠对机械刺激的阈值恢复到0.34(p<0.001)，与模型组比较均有显著性的改善。
由以上表的实验结果表明，本发明提供的乳香酸与没药萜配伍组合物显示出较好的镇痛、抗炎、抗肿瘤等效果，且属非甾体激素类，不产生成瘾性、不产生戒断反应。可作为包括炎性疼痛、肿瘤引起的疼痛、神经性疼痛以及跌打损伤疼痛等慢性疼痛疾病患者的药品、保健功能产品等短期或长期应用。应用途径可为口服给药、或皮下注射给药、或粘膜给药或者经皮给药等。所采用产品剂型可为片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、贴剂或者凝胶剂等。
显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而这些属于本发明的实质精神所引伸出的显而易见的变化或变动仍属于本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种乳香酸与没药萜配伍组合物，其特征在于，乳香酸与没药萜两者重量配比范围为1:1～10:1。
2.根据权利要求1所述乳香酸与没药萜配伍组合物，其特征在于，乳香酸、没药萜分别从乳香、没药药材中经提取、纯化富集制备获得，其中乳香酸纯度达40％～60％，没药萜纯度达30％～50％。
3.根据权利要求2所述乳香酸与没药萜配伍组合物，其特征在于，乳香酸成分为α-乳香酸、β-乳香酸、3-乙酰基-11-酮基-β-乳香酸、3-羟基甘燧烷-8,24-二烯-21-酸、3α-乙酰基-甘燧-7,24二烯-21-酸同一结构母核的化合物，其重量比例为1.5-2.5：1.5-2.5：2.5-3.5：5.5-6.5：3.5-4.5，没药萜类成分为倍半萜的2-甲氧基-5-乙酰基-呋喃吉玛-1(10)-烯-6–酮、二萜的松胶酯酸，其重量比例为1:1～1:5。
4.根据权利要求3所述乳香酸与没药萜配伍组合物，其特征在于，制备方法包括以下步骤：
(1)提取制备：分别称取乳香、没药药材各50份，粉碎成粗粉，以药材10倍重量份的60％～95％乙醇回流提取2～3次，每次1～2h，合并滤液，浓缩，分别获得乳香酸粗提物、没药萜粗提物；
(2)纯化制备：取(1)中乳香酸粗提物、没药萜粗提物分别用乙酸乙酯萃取，反复三次，合并乙酸乙酯部位提取液，减压浓缩，得乙酸乙酯部位浓缩液；乳香乙酸乙酯部位、没药乙酸乙酯部位分别通过干法或湿法上样，经硅胶柱分离，洗脱，分别收集乙酸乙酯:甲醇(2:1)洗脱液3～5倍柱体积，得乳香酸部位，乳香酸所含有的α-乳香酸、β-乳香酸、3-乙酰基-11-酮基-β-乳香酸、3-羟基甘燧烷-8,24-二烯-21-酸、3α-乙酰基-甘燧-7,24二烯-21-酸，其重量比例为1.5-2.5：1.5-2.5：2.5-3.5：5.5-6.5：3.5-4.5；收集乙酸乙酯:甲醇(10:1)洗脱液3～5倍柱体积，得没药萜，没药萜所含有的2-甲氧基-5-乙酰基-呋喃吉玛-1(10)-烯-6–酮、松胶酯酸，其重量比例为1:1～1:5；
(3)制剂：所述的提取纯化后的乳香酸、没药萜按照纯化物总重量的1:1～10:1配伍，得配伍天然组合物，添加辅料，制备成口服给药剂型、注射给药剂型、粘膜给药剂型或者经皮给药剂型，口服给药剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液；经皮给药剂型为贴剂或者凝胶剂。
5.根据权利要求1所述乳香酸与没药萜配伍组合物在制备预防或治疗慢性疼痛疾病的药物或保健品中的应用。
6.根据权利要求5所述乳香酸与没药萜配伍组合物在制备预防或治疗慢性疼痛疾病的药物或保健品中的应用，其特征在于，慢性疼痛包含炎性疼痛、癌性疼痛、神经性疼痛。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，乳香酸与没药萜配伍组合物通过抑制炎症因子在制备预防或治疗炎性疼痛药物或保健品中的应用。
8.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，乳香酸与没药萜配伍组合物通过抑制IL-6、VEGF、TNF-α和IGF-1等细胞因子在制备预防或治疗癌性疼痛药物或保健品中的应用。
9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，乳香酸与没药萜配伍组合物通过直接抑制疼痛反应在制备预防或治疗神经性疼痛药物或保健品中的应用。
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