CN101912527A - 一种用于治疗风寒痹阻症的药剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于治疗风寒痹阻症的药剂及其制备方法，属于中药制剂技术，旨在提供一种药效高、适应面广、用药安全、质量标准高的风湿治疗药剂，该药剂是以冯了性风湿跌打药酒的27味原料药材作为原料，经醇提制成的药物干膏与药剂学能接受的基质材料制成的巴布剂。

Description

一种用于治疗风寒痹阻症的药剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种中药制剂，更具体地说，它涉及一种用于治疗风寒痹阻症的药剂，本发明还涉及上述药剂的制备方法。

背景技术

风湿病是指一大类目前病因与发病机制尚未研究清楚，以损害滑膜、软骨、骨、关节、肌肉、韧带等为主，且可侵犯多个系统的全身性疾病。我国对于风湿病的研究工作起步较晚，始于70年代末，1985年成立中华医学会风湿病学学会，1988年正式加入亚洲及太平洋地区抗风湿病联盟。

风湿类疾病一直是我国高发病之一。据中华医学会风湿病分会副主任委员栗占国提供的数据，目前国内类风湿、系统性红斑狼疮、干燥综合征、强直性脊柱炎患者达到1970万人左右，骨关节炎患者约有3000万人，其中类风湿性关节炎和强直性脊柱炎已经成为我国人群丧失劳动力和致残的第二大病因。有关研究显示，75％的类风湿关节炎(RA)患者在发病两年内即可出现骨破坏，高达80％的患者在患病20年后出现残疾；有工作能力患者中，有1/3的RA患者在发病之后2年内丧失劳动能力，而强直性脊椎炎(AS)患者的平均退休年龄为39.4岁。

冯了性风湿跌打药酒是明代万历年间由佛山著名老中医冯炳阳创制，经其子冯了性的潜心研究和临床观察，药酒的配方及制作工艺日臻完善。药方由二十多种药材组成，主药丁公藤祛风胜湿，舒筋活络，消肿止痛；黄精、补骨脂、菟丝子、山药、白术益精滋肾，健脾去湿；辅以麻黄、桂枝、杏仁、羌活、白芷、苍术、泽泻、蚕砂祛风解表散寒，利水祛湿，通络止痛；配以牡丹皮凉血活血行瘀；猪牙皂祛风除痰；香附、厚朴、木香、陈皮、小茴香、枳壳利气止痛；诸药配伍，能驱风除湿，活血散瘀，理气止痛。因此在治疗风湿骨痛、手足麻木、四肢酸软、腰腿痛、跌打撞伤及积瘀肿痛，内服与外用、效果显著。在古藉《验方新编》上有过很生动的记载：“有人瘫痪一身，四体不能转动，百药不效，后服冯了性药酒一钱，浑身出汗，上吐下泻，半日后行动如常，再用药调理，霍然痊愈，神验非常……”。现代中药药理研究的成果也有同样的结论：君药丁公滕中的两种有效成份东莨菪素及东莨菪素-7-葡萄糖甙均有明显的抗炎作用，踝关节的肿胀减轻，消退加快并具一定的镇痛作用。

冯了性风湿跌打药酒具有祛风除湿，消肿止痛之功效，用于治疗风湿痹(风寒湿阻证)和急性软组织损伤，临床试验结果及临床用药观察经验均显示，其疗效肯定，毒副作用小，其Ⅲ期临床研究结果显示，治疗风寒湿阻证风湿痹疾病疗效治疗组愈显率、总有效率分别为47.3％、98％；对照组(祛风湿药酒)愈显率、总有效率分别为35％、96.7％。中医证候疗效治疗组愈显率、总有效率分别为35.3％、96.7％；对照组愈显率、总有效率分别为30％、93.3％。

但冯了性风湿跌打药酒在长期的使用中，还存在下述问题：(1)适用范围窄。由于是酒剂(含酒精35-45％)，对患有高血压、糖尿病、冠心病、肝肾功能障碍等不宜饮酒病症的患者，服用冯了性风湿跌打药酒受到限制；另外对驾驶机、车、船或从事高空作业、机械作业及操作精密仪器等、以及酒精过敏或抗拒饮酒的不能使用。(2)毒副作用。酒精本身对肝肾有一定的毒副作用。(3)质量标准低，冯了性风湿跌打药酒的处方中包含丁公藤等共27味中药，虽然功效显著，但物质基础不明，作用机理亦不明，且现有的质量标准体系不能很好的控制产品的质量。

综上所述，冯了性风湿跌打药酒的剂型限制了相当部分的风湿病患者使用，另外，质量控制标准较低，药效物质基础不明确，无法更好地适合现代中药的发展，迫切需要对其进行技术改造，提高药品的质量标准和安全性，开发成符合现代中药研究的药物，所以我们将对其进行传统品种的二次开发，在确保安全和有效的前提下，采用新的剂型和结合现代中药的研制方法，开发新一代治疗风湿痹证的冯了性巴布剂。

发明内容

本发明要解决的技术问题是针对现有技术的上述不足，提供一种药效高、适应面广、用药安全、质量标准高的用于治疗风寒痹阻症的药剂。

本发明要解决的另一个技术问题是提供一种上述药剂的制备方法。

本发明的前一技术方案是这样的：一种用于治疗风寒痹阻症的药剂，所述的药剂是由下述原料药材的醇提取物与药剂学能接受的基质材料制成的巴布剂；各原料药材的重量份为：丁公藤10000±500.0份、桂枝300±15.0份、麻黄375.2±18.5份、羌活30±1.5份、当归30±1.5份、川芎30±1.5份、白芷30±1.5份、补骨脂30±1.5份、乳香30±1.5份、猪芽皂30±1.5份、陈皮132.4±6.6份、苍术30±1.5份、厚朴30±1.5份、香附30±1.5份、木香30±1.5份、枳壳200±10.0份、白术30±1.5份、山药30±1.5份、黄精80±4.0份、菟丝30±1.5份、小茴香30±1.5份、苦杏仁30±1.5份、泽泻30±1.5份、五灵脂30±1.5份、蚕沙64.8±3.2份、牡丹皮30±1.5份、没药30±1.5份。

进一步，上述的一种用于治疗风寒痹阻症的药剂，所述的原料药材重量份优选为：丁公藤10000份、桂枝300份、麻黄375.2份、羌活30份、当归30份、川芎30份、白芷30份、补骨脂30份、乳香30份、猪芽皂30份、陈皮132.4份、苍术30份、厚朴30份、香附30份、木香30份、枳壳200份、白术30份、山药30份、黄精80份、菟丝30份、小茴香30份、苦杏仁30份、泽泻30份、五灵脂30份、蚕沙64.8份、牡丹皮30份、没药30份。

上述的一种用于治疗风寒痹阻症的药剂中，所述的提取物干膏粉与基质材料的重量比约为1∶5～6。

上述的一种用于治疗风寒痹阻症的药剂中，所述的基质材料是由下述重量份的原料混合而成，聚丙烯酸钠570～630份、甘羟铝21.5～23.5份、1，2-丙二醇105～120份、0.3％酒石酸水溶液4630～5120份、甘油2135～2350份、氮酮210～240份。

本发明的后一技术方案是这样的：一种用于治疗风寒痹阻症的药剂的制备方法，包括(1)药材提取物的制备和(2)巴布剂的制备，其中(1)药材提取物的制备方法是先将丁公藤用水闷润后与当归、川芎、补骨脂、陈皮、苍术、厚朴、香附、枳壳、白术、山药、黄精、菟丝、苦杏仁、泽泻、五灵脂、蚕沙、牡丹皮混匀，蒸1.5～3小时，将药材取出后再与乳香、五灵脂、木香、没药、麻黄、桂枝、白芷、小茴香、羌活、猪牙皂混合用乙醇回流提取3次，每次提取2～4小时，合并三次醇提取液，浓缩、干燥成干膏粉，备用；(2)巴布剂的制备，将聚丙烯酸钠，甘羟铝和甘油混匀，加入氮酮和丙二醇，搅拌均匀，加入干膏粉搅拌均匀，最后加入酒石酸水溶液再搅拌均匀即可，然后进行涂铺，覆盖上保护膜，切片，包装即得。

上述的一种用于治疗风寒痹阻症的药剂的制备方法，步骤(1)中丁公藤闷润时的加水量为0.5～0.8倍药材量，闷润时间为3～6小时；醇提时采用40～60％乙醇，加入量为8～12倍药材量。

本发明与现有技术相比，具有下述优点：

(1)药效优于冯了性风湿跌打药酒

针对风湿痹证的发病机制，本发明从祛风、散寒、除湿、温经止痛、活血通络等方面研究了其药效作用，对风寒痹阻症具有良好的治疗效果，可以作用风寒痹阻症病人的临床治疗用药。同时动物体内试验对比研究证实本品种的药效优于原剂型-冯了性风湿跌打药酒。以上可以保证该品种的有效性。

(2)提高了用药安全性

本品种的动物试验表明，该药物安全性较好，毒性低于冯了性风湿跌打药酒，无毒副作用，对皮肤无刺激性和过敏性。以上可以保证该品种的安全性。

(3)提高了质量标准

主要体现两个方面：一是提高了药材的质量标准，通过建立药物中君药丁公藤中的两个主要活性成分东莨菪苷和东莨菪内酯的含量测定方法，在原药材标准基础上进一步提高了药材的标准，从源头加强冯了性复方的质量可控性；二是提高制剂的质量标准，从含量测定方面进行比较：原剂型冯了性风湿跌打药酒为酒剂，质量标准中没有化学指标的控制，本发明的巴布剂建立了东莨菪苷和东莨菪内酯两个化学成分作为制剂的指标成分，通过控制两个化学成分的含量对制剂进行控制；从检查项目进行比较：原药酒只建立丁公藤药材和麻黄中麻黄碱的薄层鉴别方法，本发明巴布剂建立了丁公藤、麻黄、陈皮、枳壳四味药的薄层鉴别，通过增加化学指标的含量测定控制和增加处方中药味的薄层鉴别进一步增加了本发明巴布剂的质量控制。

(4)增加临床适应性，扩大适用人群

采用巴布剂形式给药，持续缓释时间长，不必频繁给药，容易为患者接受和长期坚持；对精神病人、儿童等一些不能配合用药的病人也适用。与冯了性风湿跌打药酒相比拓宽了临床用药人群，除与冯了性风湿跌打药酒的适用人群一致外，可多增加三类适用人群，一类是患有高血压、糖尿病、冠心病、肝肾功能障碍等不宜饮酒疾病的患者，另一类是驾驶机、车、船、从事高空作业、机械作业及操作精密仪器不能饮酒的患者，还有一类是酒精过敏或抗拒饮酒等不愿饮酒的患者，拓宽了市场适用范围。

具体实施方式

实施例1

本发明药剂的制备之一

(1)原料药材组分：丁公藤10500g、桂枝315g、麻黄393.7g、羌活31.5g、当归31.5g、川芎31.5g、白芷31.5g、补骨脂31.5g、乳香31.5g、猪芽皂31.5g、陈皮139g、苍术31.5g、厚朴31.5g、香附31.5g、木香31.5g、枳壳210g、白术31.5g、山药31.5g、黄精84g、菟丝31.5g、小茴香31.5g、苦杏仁31.5g、泽泻31.5g、五灵脂31.5g、蚕沙68g、牡丹皮31.5g、没药31.5g。

(2)提取物的制备方法：将丁公藤加0.5倍量水闷润，闷润时间6小时，然后与当归、川芎、补骨脂、陈皮、苍术、厚朴、香附、枳壳、白术、山药、黄精、菟丝、苦杏仁、泽泻、五灵脂、蚕沙、牡丹皮混匀，蒸3小时，将药材取出后与乳香、五灵脂、木香、没药、麻黄、桂枝、白芷、小茴香、羌活、猪牙皂混合用40％乙醇8倍量回流提取3次，每次提取4小时，合并三次醇提取液，浓缩、减压干燥成干膏粉，重量约1575g，备用。

(3)基质材料组分：聚丙烯酸钠630g、甘羟铝23.5g、1，2-丙二醇120g、0.3％酒石酸水溶液5120g、甘油2350g、氮酮240g。

(4)药剂的制备：将聚丙烯酸钠，甘羟铝和甘油混匀，加入氮酮和丙二醇，搅拌均匀，加入干膏粉搅拌均匀，最后加入酒石酸水溶液再搅拌均匀即可，然后进行涂铺，覆盖上保护膜，切成1000片，包装即得。

(5)用法与用量：贴于患处，每天一贴。

实施例2

本发明的药剂制备之二

(1)原料药材组分：丁公藤10000g、桂枝300g、麻黄375.2g、羌活30g、当归30g、川芎30g、白芷30g、补骨脂30g、乳香30g、猪芽皂30g、陈皮132.4g、苍术30g、厚朴30g、香附30g、木香30g、枳壳200g、白术30g、山药30g、黄精80g、菟丝30g、小茴香30g、苦杏仁30g、泽泻30g、五灵脂30g、蚕沙64.8g、牡丹皮30g、没药30g。

(2)提取物的制备方法：将丁公藤加0.6倍量水闷润，闷润时间4小时，然后与当归、川芎、补骨脂、陈皮、苍术、厚朴、香附、枳壳、白术、山药、黄精、菟丝、苦杏仁、泽泻、五灵脂、蚕沙、牡丹皮混匀，蒸2小时，将药材取出后与乳香、五灵脂、木香、没药、麻黄、桂枝、白芷、小茴香、羌活、猪牙皂混合用50％乙醇10倍量回流提取3次，每次提取3小时，合并三次醇提取液，浓缩、喷雾干燥成干膏粉，重量约1500g，备用。

(3)基质材料组分：聚丙烯酸钠600g、甘羟铝22.5g、1，2-丙二醇112.5g、0.3％酒石酸水溶液4875g、甘油2250g、氮酮225g。

(4)药剂的制备：将聚丙烯酸钠，甘羟铝和甘油混匀，加入氮酮和丙二醇，搅拌均匀，加入干膏粉搅拌均匀，最后加入酒石酸水溶液再搅拌均匀即可，然后进行涂铺，覆盖上保护膜，切成1000片，包装即得。

(5)用法与用量：贴于患处，每天一贴。

实施例3

本发明的药剂制备之三

(1)原料药材组分：丁公藤9500g、桂枝285g、麻黄356.7g、羌活28.5g、当归28.5g、川芎28.5g、白芷28.5g、补骨脂28.5g、乳香28.5g、猪芽皂28.5g、陈皮125.8g、苍术28.5g、厚朴28.5g、香附28.5g、木香28.5g、枳壳190g、白术28.5g、山药28.5g、黄精76g、菟丝28.5g、小茴香28.5g、苦杏仁28.5g、泽泻28.5g、五灵脂28.5g、蚕沙61.6g、牡丹皮28.5g、没药28.5g。

(2)提取物的制备方法：将丁公藤加0.8倍量水闷润，闷润时间3小时，然后与当归、川芎、补骨脂、陈皮、苍术、厚朴、香附、枳壳、白术、山药、黄精、菟丝、苦杏仁、泽泻、五灵脂、蚕沙、牡丹皮混匀，蒸1.5小时，将药材取出后与乳香、五灵脂、木香、没药、麻黄、桂枝、白芷、小茴香、羌活、猪牙皂混合用60％乙醇12倍量回流提取3次，每次提取2小时，合并三次醇提取液，浓缩、喷雾干燥成干膏粉，重量约1425g，备用。

(3)基质材料组分：聚丙烯酸钠570g、甘羟铝21.5g、1，2-丙二醇105g、0.3％酒石酸水溶液4630g、甘油2135g、氮酮210g。

(4)药剂的制备：将聚丙烯酸钠，甘羟铝和甘油混匀，加入氮酮和丙二醇，搅拌均匀，加入干膏粉搅拌均匀，最后加入酒石酸水溶液再搅拌均匀即可，然后进行涂铺，覆盖上保护膜，切成1000片，包装即得。

(5)用法与用量：贴于患处，每天一贴。

实验例

本发明药剂的药理毒理主要研究结果及评价

1.本发明巴布剂非临床药效学研究结果及评价

(1)本发明巴布剂非临床药效学研究结果

①本发明巴布剂祛风除湿的药效学研究结果

本课题采用Wistar大鼠，利用皮内注射角叉菜胶的方法诱导大鼠急性足肿胀模型，考察本发明巴布剂对角叉菜胶致大鼠急性足肿胀的影响，实验结果显示本发明巴布剂(10cm²/贴/天、20cm²/贴/天)连续给药7天具有抑制大鼠急性足肿胀的作用。

本课题采用皮内注射弗氏完全佐剂的方法制备大鼠佐剂性关节炎模型，完全弗氏佐剂注入大鼠足跖内可引起全身多处关节肿胀，是典型的免疫性炎症模型，利用此模型考察本发明巴布剂对大鼠佐剂性关节炎的影响，实验结果显示本发明巴布剂(10cm²/贴/天、20cm²/贴/天)能够明显抑制佐剂所致大鼠原发性及继发性足肿胀。

本课题采用皮内注射鸡Ⅱ型胶原的方法制备大鼠胶原性关节炎模型，此模型临床表现、组织病理变化、体液和细胞免疫应答与人类风湿性关节炎的特征接近，目前被认为是最适合类风湿研究的动物模型，利用此模型进一步考察本发明巴布剂对免疫性关节炎的影响，实验结果显示本发明巴布剂(5cm²/贴/天、10cm²/贴/天、20cm²/贴/天)对Ⅱ型胶原性关节炎的关节炎指数和平均足肿胀度均有不同程度的抑制作用。

②本发明巴布剂免疫调节的药效学研究结果

本课题采用ICR小鼠，体外无菌条件下分离脾淋巴细胞，将刀豆蛋白与不同浓度的本发明中间体共同作用于脾淋巴细胞48小时，以MTT法检测脾淋巴细胞增殖的情况，实验结果显示本发明中间体各剂量组均能够抑制小鼠脾淋巴细胞增殖，进而减轻过度炎症反应对机体造成的损伤。

③本发明巴布剂温经止痛的药效学研究结果

本课题采用物理(热板法)和化学(腹腔注射乙酸法)两种实验方法，观察本发明中间体对小鼠扭体反应的影响，实验结果显示本发明中间体腹腔注射能够抑制热板法所致的小鼠扭体反应次数，也能够明显抑制乙酸法所致的小鼠扭体反应次数，通过以上两个实验可以看出，本发明中间体能够通过中枢和外周2条途径发挥镇痛的作用。

④本发明巴布剂活血通络的药效学研究结果

根据炎症过程的特点，本课题选用炎性渗出和结缔组织增生两个阶段模型，考察本发明巴布剂活血通络的作用，采用清洁级昆明种小鼠，连续腹腔注射冯了性中间体7天，于第7天给小鼠尾静脉注射伊文思蓝生理盐水溶液，随即注射1％冰醋酸诱导腹腔毛细血管通透性增加，实验结束时将小鼠断头处死收集腹腔液，测吸光度值，实验结果显示本发明中间体腹腔注射给药具有抑制醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加的作用。

本课题采用给Wistar大鼠皮下植入棉球诱发肉芽组织增生的肉芽肿模型，考察本发明巴布剂对大鼠棉球肉芽肿的影响，实验结果显示本发明巴布剂(5cm²/贴/天、10cm²/贴/天、20cm²/贴/天)经皮给药7天对大鼠棉球肉芽肿的增生具有明显的抑制作用。

(2)本发明巴布剂有效性的评价

①药效结果确切，用于风寒痹阻症病人的临床治疗用药

中医理论认为，风寒湿痹证是风寒痹阻证和风湿痹阻证的兼夹证，具有风寒痹阻证和风湿痹阻证的特点，针对本病的症状，临床常用的治疗方法是祛风、散寒、除湿、温经止痛、活血通络，我们在开展本发明巴布剂的药效学实验研究时，主要是进行了祛风除湿、免疫调节、温经止痛、活血通络4个方面的药效学实验设计，考察本发明巴布剂是否具有祛风、散寒、除湿、温经止痛、活血通络的作用，实验结果显示本发明巴布剂可以明显抑制角叉菜胶所致大鼠急性足肿胀，能够抑制佐剂性关节炎大鼠原发性和继发性足肿胀，对Ⅱ型胶原性关节炎大鼠的足肿胀具有明显抑制作用，疗效确切，本发明巴布剂能够抑制小鼠脾淋巴细胞的增殖，对物理法(热板法)及化学法(乙酸法)所致的疼痛小鼠具有良好的镇痛作用，能够减轻小鼠腹腔毛细血管通透性，抑制大鼠棉球肉芽肿模型肉芽组织的增生，药效结果确切，综合以上的药效实验结果，本发明巴布剂具有祛风、除湿、止痛、活血通络的药理作用，对风寒痹阻症具有良好的治疗效果，可以作用风寒痹阻症病人的临床治疗用药。

②本发明巴布剂治疗风寒痹阻症具有良好的量效关系，起效缓和，药效维持时间长

从本课题的药效学研究结果可看出，本发明巴布剂对于各种急性炎症、慢性炎症及免疫性炎症具有良好的治疗效果，药效学结果显示良好的剂量效应关系，在大鼠佐剂性关节炎模型中，本发明巴布剂在给药18h后即对大鼠原发性足肿胀具有明显的抑制作用，在造模后第12天显著抑制大鼠继发性足肿胀，药效维持至给药后第30天，表明本发明巴布剂起效速度缓和，但药效维持时间较长，适合临床用药。

③本发明中间体与冯了性药酒药效相当

本发明巴布剂是由冯了性风湿跌打药酒中的27味中药经精制纯化等现代中药提取手段制备出本发明中间体，本发明中间体再与一定量的基质和促渗剂混合后，均匀涂抹在无纺布上而成，故本发明中间体的制备工艺与冯了性风湿跌打药酒有一定的区别，本课题对本发明中间体与冯了性风湿跌打药酒的药效进行比较，采用灌胃给药和腹腔注射两种给药途径，在大鼠佐剂性关节炎模型上进行药效对比，分别进行“本发明中间体与冯了性药酒灌胃给药对大鼠佐剂性关节炎的药效对比”和“本发明中间体与冯了性药酒腹腔注射给药对大鼠佐剂性关节炎的药效对比”，实验结果均表明本发明中间体与冯了性药酒均有明显抑制大鼠原发性与继发性足肿胀的作用，且药效结果相当。

2.本发明巴布剂一般药理学研究结果及评价

(1)本发明巴布剂一般药理学研究结果

因本发明巴布剂的给药途径为经皮给药，一定程度上限制了实验中动物的给药剂量而不能充分地体现一般药理学实验的目的，为最大限度地暴露本发明巴布剂的毒性情况，本次实验中利用本发明中间体代替其巴布剂，通过腹腔注射给药途径进行一般药理实验，考察本发明中间体对中枢神经系统、呼吸系统和循环系统的影响

①本发明中间体对小鼠精神、神经系统的影响

本课题采用昆明种小鼠，运用腹腔注射的给药途径，主要通过镇静实验法(对自发活动的影响)、行为学实验法(对共济协调运动的影响)、催眠作用实验法(对戊巴比妥钠阈下催眠剂量的影响)共3个实验来考察本发明中间体腹腔注射给药后对小鼠中枢神经系统的影响，实验结果显示：本发明中间体腹腔注射给药在18g生药/kg(药效学有效剂量的9倍)对小鼠自主活动、协调运动及催眠实验无明显影响，但在实验中观察到腹腔注射本发明中间体后，大剂量组个别小鼠在观察时间内出现间断的扭体运动，说明本发明中间体可能存在一定的腹膜刺激症。

②本发明中间体对麻醉犬心血管系统、呼吸系统的影响

本课题采用麻醉犬为研究对象，以麻醉犬呼吸(呼吸频率和呼吸深度)、血压(收缩压、舒张压和平均动脉压)和心电图为观测指标，观察本发明中间体腹腔注射给药后对麻醉犬心血管系统和呼吸系统的影响，实验结果显示本发明中间体在3.6g生药/kg(相当于药效学有效剂量的13倍)剂量范围内腹腔注射给药对麻醉犬呼吸系统、心血管系统无明显影响。

(2)本发明巴布剂一般药理学研究评价

本课题采用昆明种小鼠和犬作为研究对象，用本发明中间体代替本发明巴布剂作用研究对象，考察本发明巴布剂对精神、神经、呼吸、循环系统的影响，实验结果显示，本发明中间体代替本发明巴布剂的给药途径能增加给药量，在药效学有效剂量的9倍情况下，本发明中间体对小鼠精神、神经系统无任何影响，在药效学有效剂量13倍的情况下，本发明中间体对麻醉犬呼吸系统、心血管系统无明显影响，但在“本发明中间体腹腔注射对小鼠精神、神经系统的影响”实验中观察到，本发明中间体腹腔注射后大剂量组个别小鼠出现扭体反应，可能与采用腹腔注射的给药途径有关，本发明中间体进入腹腔后刺激腹膜产生疼痛，表现出腹膜刺激症的症状，与供试品本发明中间体的毒性无关。

3.冯了性巴布剂毒理学研究结果及评价

(1)本发明巴布剂毒理学研究结果

因本发明巴布剂的给药途径为经皮给药，一定程度上限制了实验中动物的给药剂量而不能充分地体现毒理学实验的目的，为最大限度地暴露本发明巴布剂的毒性情况，在本发明巴布剂的急性毒性实验中利用本发明中间体代替其巴布剂，通过腹腔注射给药途径进行急毒实验，考察本发明中间体对小鼠、大鼠的毒性情况；在长期毒性实验中，采用巴布剂长期贴敷给药不仅能暴露本发明中间体本身药物的毒性，而且能暴露本发明巴布剂作为一种经皮给药制剂，自身对皮肤的毒性情况，故在长期毒性实验中采用的是本发明巴布剂经皮给药途径，并与冯了性药酒进行毒性对比，体现剂型改变后是否有利于降低毒性反应；在本次毒理学研究中还考察了本发明巴布剂对皮肤的刺激和过敏情况，评价本发明巴布剂是否是较安全的外用制剂。

①本发明中间体腹腔注射给药对小鼠的急性毒性实验

本实验采用昆明种小鼠，分别进行预实验和正式实验，正式试验在给药后24小时内严密观察、记录动物反应情况，然后每天上、下午各观察1次，连续观察14天，实验结果显示本发明中间体腹腔注射给药对小鼠的LD₅₀值为27.22g生药/kg，95％可信限为24.17～30.64g生药/kg，小鼠在给药之后出现自发活动明显减少，静卧，呼吸频率减慢，部分动物小鼠明显的扭体反应，严重者呼吸极度困难，出现喘息，惊厥抽搐而死亡。毒性症状随剂量增大而加重。死亡小鼠及存活小鼠解剖未见组织脏器异常，从小鼠的死亡情况推断，本发明中间体可能影响动物中枢神经系统和呼吸系统、消化系统，最终导致动物呼吸功能衰竭而死亡。

②本发明中间体腹腔注射给药对大鼠的急性毒性实验

本实验采用Wistar大鼠，分别进行预实验和正式实验，正式试验在给药后24小时内严密观察、记录动物反应情况，然后每天上、下午各观察1次，连续观察14天，实验结果显示本发明中间体腹腔注射对大鼠的LD₅₀值为17.63g生药/kg，95％可信限为13.51～23.02g生药/kg，大鼠在给药后出现自发活动明显减少，静卧，呼吸频率减慢，部分大鼠出现明显的扭体反应，严重者呼吸极度困难，出现喘息，惊厥抽搐而死亡。毒性症状随剂量增大而加重。死亡大鼠及存活大鼠解剖未见组织脏器异常，从大鼠的死亡情况推断，本发明中间体可能影响大鼠中枢神经系统、呼吸系统和消化系统，最终导致动物呼吸功能衰竭而死亡。

③本发明巴布剂对大鼠的长期毒性实验

取健康Wistar大鼠100只，按体重随机分为空白对照组，本发明中间体小(20g生药/kg)、中(33g生药/kg)、大(55g生药/kg)剂量组，冯了性药酒组(40g生药/kg)，每组20只，雌雄各半。本发明中间体各组采用巴布剂敷贴给药，冯了性药酒组采用灌胃给药。各组每日给药1次，一周给药6天，本发明中间体组每次持续给药24小时。连续给药13周，停药观察2周。观察本发明中间体连续敷贴给药对大鼠一般情况、体重、摄食量、血液学及血生化、尿常规等指标的影响，并于给药6周、13周及停药2周取每组部分动物进行系统解剖，计算脏器系数，并进行病理学检查。结果显示，在给药13周后本发明中间体小、中剂量组动物无异常状况，本发明中间体大剂量组、冯了性药酒组大鼠的自发活动有所减少，但无其它明显毒性症状。各个给药组动物的体重均有增长，但与空白对照组相比，本发明中间体大剂量组较低(P＜0.05)，冯了性药酒组(雄性)体重较低(P＜0.05)，其余给药组与空白对照组比较差异无显著性。

(2)本发明巴布剂对家兔正常皮肤的刺激性实验

本课题采用日本大耳白家兔，贴片前24h将家兔背脊两侧剔毛，剔毛24h后，脊柱左侧剔毛区贴敷冯了性巴布剂，脊柱右侧贴敷空白贴片，贴敷固定6h后，除去贴片并用温水清洁给药部位，在每次除去药物1h及再次贴敷前观察并记录贴敷部位有无红斑及红肿情况等情况，并进行评分。每日贴敷1次，连续7天。末次贴敷后，除去受试物残留后1h、24h、48h、72h肉眼观察并记录贴敷部位有无红斑及红肿等情况。对出现中度及中度以上皮肤刺激性的动物在观察期结束时对给药局部进行组织病理学检查，并提供病理照片，实验结果显示本发明巴布剂与空白巴布剂对家兔正常皮肤均无刺激性，提示本发明巴布剂是较安全的外用制剂。

①本发明巴布剂对家兔破损皮肤的刺激性实验

采用日本大耳白家兔，贴片前24h将家兔背脊两侧剔毛，然后将家兔用药部位皮肤先用75％乙醇进行消毒，再用无菌注射器针头划破皮肤，以有渗血为度。24h后，脊柱左侧剔毛破损区贴敷本发明巴布剂，脊柱右侧剔毛破损区贴敷空白贴片，进行家兔自身对比研究。贴敷固定6h后，除去贴片并用温水清洁给药部位，在每次除去药物1h及再次贴敷前观察并记录贴敷部位有无红斑及红肿情况，并进行评分。每日贴敷1次，连续7天，每天敷贴时间和部位均一致。末次贴敷后，除去受试物残留后1h、24h、48h、72h肉眼观察并记录贴敷部位有无红斑及红肿情况等情况。对出现中度及中度以上皮肤刺激性的动物在观察期结束时对给药局部进行组织病理学检查，并提供病理照片。实验结果显示本发明巴布剂与空白巴布剂对家兔破损皮肤均无刺激性，提示本发明巴布剂是较安全的外用制剂。

②本发明巴布剂对豚鼠的皮肤过敏性实验

采用白色豚鼠，将豚鼠背部脊柱两侧去毛，去毛后24小时，在豚鼠的左侧脱毛区，本发明巴布剂组及空白巴布剂组分别贴敷相应的贴剂，阳性对照组涂抹1％的2，4-二硝基氯苯，各组均固定6小时。在第7天和第14天，重复给药一次，共计3次。于末次给受试物致敏后14天，在豚鼠的右侧脱毛区，本发明巴布剂组及空白巴布剂组再分别贴敷相应的贴剂，阳性对照组涂抹0.1％的2，4-二硝基氯苯，6小时后去掉受试物，即刻观察。然后于24、48、72小时再次观察皮肤过敏反应情况。记录各时间点过敏反应分值，并按公式计算各组豚鼠反应平均分值，同时注意观察豚鼠是否有哮喘、站立不稳或休克等严重的全身过敏反应，实验结果显示本发明巴布剂贴敷给药对豚鼠皮肤无过敏反应，提示本发明巴布剂是较安全的外用制剂。

4.本发明巴布剂毒理学研究评价

①本发明巴布剂毒性低于冯了性药酒，用药较安全

②本发明巴布剂对皮肤无刺激性和过敏性，是较安全的外用制剂

本课题所研究的本发明巴布剂是一种经皮给药制剂，根据《中药、天然药物刺激性和溶血性研究的技术指导原则》和《中药天然药物免疫毒性(过敏性和光过敏反应)技术指导原则》，本课题进行了本发明巴布剂的皮肤刺激性和皮肤过敏性考察，分别进行了本发明巴布剂多次给药对家兔正常皮肤和破损皮肤的刺激性考察，进行了本发明巴布剂对豚鼠皮肤过敏性的考察，实验结果均显示本发明巴布剂多次给药对家兔正常皮肤和破损皮肤均无刺激性，多次给药对豚鼠也无过敏反应，是较安全的外用制剂，临床用药安全。

Claims (7)

1.一种用于治疗风寒痹阻症的药剂，其特征是，所述的药剂是由下述原料药材的醇提取物与药剂学能接受的基质材料制成的巴布剂；各原料药材的重量份为：丁公藤10000±500.0份、桂枝300±15.0份、麻黄375.2±18.5份、羌活30±1.5份、当归30±1.5份、川芎30±1.5份、白芷30±1.5份、补骨脂30±1.5份、乳香30±1.5份、猪芽皂30±1.5份、陈皮132.4±6.6份、苍术30±1.5份、厚朴30±1.5份、香附30±1.5份、木香30±1.5份、枳壳200±10.0份、白术30±1.5份、山药30±1.5份、黄精80±4.0份、菟丝30±1.5份、小茴香30±1.5份、苦杏仁30±1.5份、泽泻30±1.5份、五灵脂30±1.5份、蚕沙64.8±3.2份、牡丹皮30±1.5份、没药30±1.5份。

2.根据权利要求1所述的一种用于治疗风寒痹阻症的药剂，其特征是，所述的原料药材重量份为：丁公藤10000份、桂枝300份、麻黄375.2份、羌活30份、当归30份、川芎30份、白芷30份、补骨脂30份、乳香30份、猪芽皂30份、陈皮132.4份、苍术30份、厚朴30份、香附30份、木香30份、枳壳200份、白术30份、山药30份、黄精80份、菟丝30份、小茴香30份、苦杏仁30份、泽泻30份、五灵脂30份、蚕沙64.8份、牡丹皮30份、没药30份。

3.根据权利要求1或2所述的一种用于治疗风寒痹阻症的药剂，其特征是，所述的提取物干膏粉与基质材料的重量比约为1∶5～6。

4.根据权利要求3所述的一种用于治疗风寒痹阻症的药剂，其特征是，所述的基质材料是由下述重量份的原料混合而成，聚丙烯酸钠570～630份、甘羟铝21.5～23.5份、1，2-丙二醇105～120份、0.3％酒石酸水溶液4630～5120份、甘油2135～2350份、氮酮210～240份。

5.权利要求4所述一种用于治疗风寒痹阻症的药剂的制备方法，其特征是包括(1)药材提取物的制备和(2)巴布剂的制备，其中(1)药材提取物的制备方法是先将丁公藤用水闷润后与当归、川芎、补骨脂、陈皮、苍术、厚朴、香附、枳壳、白术、山药、黄精、菟丝、苦杏仁、泽泻、五灵脂、蚕沙、牡丹皮混匀，蒸1.5～3小时，将药材取出再与乳香、五灵脂、木香、没药、麻黄、桂枝、白芷、小茴香、羌活、猪牙皂混合用乙醇回流提取3次，每次提取2～4小时，合并三次醇提取液，浓缩、干燥成干膏粉，备用；(2)巴布剂的制备，将聚丙烯酸钠，甘羟铝和甘油混匀，加入氮酮和丙二醇，搅拌均匀，加入干膏粉搅拌均匀，最后加入酒石酸水溶液再搅拌均匀即可，然后进行涂铺，覆盖上保护膜，切片，包装即得。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征是，步骤(1)中丁公藤闷润时的加水量为0.5～0.8倍药材量，闷润时间为3～6小时。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征是，步骤(1)中醇提时采用40～60％乙醇，加入量为8～12倍药材量。