CN102727474A - L-半胱氨酸在制备解酒药物、保护肝脏及肾脏药物中的应用 - Google Patents
L-半胱氨酸在制备解酒药物、保护肝脏及肾脏药物中的应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种L-半胱氨酸用于降低细胞乙醛氧化损伤的用途,L-半胱氨酸可应用在解酒药物、保护肝脏药物及保护肾脏药物中的制备。本发明L-半胱氨酸用于降低细胞乙醛氧化损伤的用途可为新型解酒产品的开发提供理论基础和依据,为饮酒者提供一个保障。
Description
技术领域
本发明属于药物化学领域,涉及一种L-半胱氨酸,尤其是一种L-半胱氨酸在制备解酒药物、保护肝脏及肾脏药物中的应用。
背景技术
人体内摄入的酒精仅有5%会无变化的排出体外,其余95%则会在体内(主要是肝脏)被代谢为乙醛,乙醛在乙醛脱氢酶(ALDH)的催化下转化成乙酸,乙酸进一步转化成乙酰辅酶A,乙酰辅酶A可进入三羧酸循环进一步产生二氧化碳、水和能量。香烟也是乙醛的一大来源,长期吸烟会改变口腔菌群,这些微生物产生乙醛,但转化乙醛能力很低,使乙醛积累。人体内的ALDH含量极低,不能及时地将乙醛转化为乙酸,导致乙醛在体内(尤其是口腔和肝脏等)积累,对机体各器官组织造成巨大的伤害。
乙醛的一般毒性主要表现为对皮肤、眼睛和上呼吸道粘膜的直接刺激作用,使痰增多,眼充血红肿,引起过敏、头痛等。吸入高浓度的乙醛则会引起窒息,甚至呼吸麻痹而死亡。研究表明,乙醛可引起线粒体的功能障碍,使线粒体的呼吸功能、脂肪酸氧化能力受到损伤;乙醛还影响胚胎的发育;此外,乙醛能够与DNA共价结合形成加合物,引起DNA链间交联及DNA断裂,导致细胞癌变。鉴于乙醛的种种危害,对乙醛的消除及降低其引起的氧化损伤是非常有必要的。
目前市场上关于解酒的药物有很多,但大多都是只注重加快酒精向乙醛的转化,而并未注意到乙醛的去路问题,同时也并未注意到乙醛对机体的隐形危害。酒精对人体的伤害只是短暂性的,乙醛才是危害机体健康的罪魁祸首,因此对乙醛的消除及降低其造成的伤害是非常有必要的。
通过检索,尚未发现与本专利申请相关的专利公开文献。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足,提供一种L-半胱氨酸在制备解酒药物、保护肝脏及肾脏药物中的应用,为新型解酒产品及保护肝脏及肾脏药物的开发制备提供理论基础和依据。
本发明实现目的的技术方案是:
一种L-半胱氨酸用于降低细胞乙醛氧化损伤的用途。
一种L-半胱氨酸在制备解酒药物中的应用。
一种L-半胱氨酸在制备保护肝脏药物中的应用。
一种L-半胱氨酸在制备保护肾脏药物中的应用。
本发明的优点和有益效果为:
1、本发明L-半胱氨酸在制备解酒药物、保护肝脏及肾脏药物中的应用可为新型解酒产品及保护肝脏及肾脏药物的开发制备提供理论基础和依据,为饮酒者提供一个保障。
2、本发明L-半胱氨酸在制备解酒药物、保护肝脏及肾脏药物中的应用,由于L-半胱氨酸具有可用于降低细胞乙醛氧化损伤的作用,L-半胱氨酸能消除乙醛,加快乙醛消除从而有效地促进酒精代谢,降低酒精产生的各种不良症状,如头痛、头晕、恶心、呕吐、烦渴等,因而可用于制备解酒药物,在喝酒前或喝酒中饮用可增加酒量,此种解酒药物可保护肝脏。L-半胱氨酸可以清除人体胃肠道存留的乙醛毒素,减轻人体解毒排毒的重要器官—肝脏、肾脏的解毒负担而保肝护肾,从而可应用在保护肝脏及肾脏药物的制备。
附图说明
图1为乙醛对A549细胞生长活性的影响图;
图2为本发明L-半胱氨酸对A549细胞生长活性的影响图;
图3为本发明L-半胱氨酸对乙醛损伤A549细胞生长活性的影响图;
图4为乙醛对A549细胞上清液中NO含量的影响图;
图5为本发明L-半胱氨酸对乙醛损伤A549细胞上清液中NO活力的影响图;
图6为乙醛对A549细胞中MDA含量的影响图;
图7为本发明L-半胱氨酸对乙醛损伤A549细胞中MDA含量的影响图。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明作进一步详述,以下实施例只是描述性的,不是限定性的,不能以此限定本发明的保护范围。
本发明通过建立细胞模型,检测L-半胱氨酸降低乙醛氧化损伤危害的效果,主要从L-半胱氨酸对乙醛损伤A549细胞增殖、一氧化氮(NO)含量和丙二醛(MDA)含量的影响来验证L-半胱氨酸降低乙醛氧化损伤危害的效果。
本实施方式中所使用的各种物质如无特殊说明,均为市售产品。
数据处理方式为:数据结果以平均值±标准差表示,以P<0.05为有统计学意义,记为“*”,P<0.01为极显著意义,记为“**”;采用SPSS19.0统计软件包作为统计工具,全部数据采用单因素方差分析(ANOVA)。
实施例1
MTT法检测细胞生长活性
用含10%胎牛血清的1640培养基稀释细胞至6×104个/mL,并接种至96孔培养板,每孔加入100μL细胞悬液(空白孔不加细胞,只加培养基)培养24h,待细胞长满80%左右,换成无血清培养基继续培养24h,使细胞同步化;然后分别加入L-半胱氨酸、乙醛等处理因素,每个剂量重复3孔,置培养箱中孵育24h后进行检测。吸弃上清液20μL,每孔加入20μL浓度为5mg/mL MTT(终浓度为0.5mg/mL),继续孵育4h后弃培养基,每孔加入150μL DMSO终止反应,避光低速振摇10min使深紫色沉淀溶解,于酶标仪570nm处测定OD值,实验重复多次。
实施例2
细胞上清液中NO活性测定
将细胞制成密度为6×104个/mL的细胞悬液,接种在24孔培养板中进行培养,待细胞长满80%时,按上面分组处理,每组设3个复孔。每孔取上清液100μL,按照南京建成试剂盒要求测定NO含量,NO含量计算参见公式1。实验重复多次。
实施例3
细胞内MDA含量测定
将细胞制成密度为6×104个/mL的细胞悬液,接种在24孔培养板中进行培养,待细胞长满80%时,按上面分组处理,每组设3个复孔。终止培养后,加入细胞裂解液,4°C裂解30min,12000rpm,离心15min,取上清BCA法测定蛋白浓度,同时按照南京建成试剂盒要求测定MDA含量,MDA含量计算参见公式2。实验重复多次。
(公式2)
实验结果与讨论:
(一)MTT法检测细胞生长活性
乙醛对A549细胞生长活性的影响见图1;L-半胱氨酸对A549细胞生长活性的影响见图2;L-半胱氨酸对乙醛损伤A549细胞生长活性的影响见图3。
图1、图2及图3中的实验结果表明:
①随着乙醛浓度增大,A549细胞的生长活性明显下降;
②L-半胱氨酸浓度在0-640μmol/L范围内,对A549细胞的生长无抑制作用,且在0-160μmol/L范围内,随着浓度增大,L-半胱氨酸对A549细胞生长起到增值作用;
③L-半胱氨酸浓度在0-160μmol/L范围内,其浓度与A549细胞生长活性呈正相关,表明在该浓度范围内L-半胱氨酸浓度对受损A549细胞的保护作用呈浓度依赖性。
(二)细胞上清液中NO活性测定
乙醛对A549细胞上清液中NO含量的影响见图4;L-半胱氨酸对乙醛损伤A549细胞上清液中NO活力的影响见图5。
图5及图6的结果表明:
①随着乙醛浓度增大,A549细胞上清液中NO含量逐渐上升,说明乙醛能够诱导或促进NO的释放;
②L-半胱氨酸浓度为0-160μmol/L范围内,其浓度与A549细胞上清液中NO含量呈负相关,表明在该浓度范围内L-半胱氨酸对乙醛诱导或促进NO释放起到抑制或修复的作用,说明L-半胱氨酸对乙醛损伤A549细胞具有保护作用。
(三)细胞内MDA含量测定
乙醛对A549细胞中MDA含量的影响见图6;L-半胱氨酸对乙醛损伤A549细胞中MDA含量的影响见图7。
图6及图7的结果表明:
①随着乙醛浓度增大,A549细胞内MDA含量逐渐上升,说明乙醛能够诱导或促进MDA的产生;
②L-半胱氨酸浓度为0-160μmol/L范围内,随着L-半胱氨酸浓度的增加,MDA的含量逐渐降低,表明在该浓度范围内L-半胱氨酸对乙醛诱导或促进MDA产生起到抑制或修复的作用,说明L-半胱氨酸对乙醛损伤A549细胞具有保护作用。
综上:
细胞存在助氧化或活性氧族(Reactive Oxygen Species,ROS)系统,如氧自由基等,同时细胞也存在抗氧化系统,如超氧化物歧化酶等。在正常情况下,无论在极性氧化或还原条件下,体内自身助氧化系统和抗氧化系统可保持机体动态平衡。
乙醛是一种氧化剂,对生物大分子有直接的氧化作用,打破动态平衡,使其抗氧化能力降低,体内自由基不能及时清除,对组织细胞间接地造成氧化损伤。本发明使用不同浓度乙醛与A549细胞共培养24h后发现,A549细胞生长活性呈下降趋势,而细胞内的MDA含量呈上升趋势,上清液中的NO含量也呈上升趋势,说明乙醛可以使A549细胞产生氧化损伤并诱导或促进MDA和NO产生。而L-半胱氨酸与乙醛同时处理A549细胞24h后发现,A549细胞生长活性呈上升趋势,而细胞内的MDA含量和上清液中的NO含量呈下降趋势,说明L-半胱氨酸对乙醛损伤A549细胞具有保护作用。
由以上的实验结果可见,L-半胱氨酸可应用在解酒药物、保护肝脏药物及保护肾脏药物中的制备。
Claims (4)
1.一种L-半胱氨酸用于降低细胞乙醛氧化损伤的用途。
2.一种L-半胱氨酸在制备解酒药物中的应用。
3.一种L-半胱氨酸在制备保护肝脏药物中的应用。
4.一种L-半胱氨酸在制备保护肾脏药物中的应用。
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