CN105343184A - 一种组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于制药领域,公开了一种组合物及应用。本发明所述组合物包括火麻仁油和藻油,所述火麻仁油和藻油的质量比为(20-60):(30-70)。本发明通过大量的配伍筛选研究发现火麻仁油和藻油按质量比为(20-60):(30-70)的比例组合,具有协同作用,对高脂血症动物模型大鼠的体重增加有明显的抑制作用,可显著提高降血脂的功效,同时具有抗氧化作用。此外本发明所述组合物还具有提高学习记忆能力、改善便秘、保护肝脏的功效。由本发明所述组合物制备的药物和功能食品生产工艺简单,产品质量稳定,功能因子清晰,保健功效突出,服用剂量小,使用安全,无毒副作用,适宜广大人群食用。
Description
技术领域
本发明属于制药领域,具体涉及一种组合物及其应用,尤其是涉及一种包含火麻仁油和藻油的组合物及其应用。
背景技术
随着生活水平的不断提高,人们在日常生活中膳食结构不平衡,摄入过多的精加工食品,而蔬菜、水果摄入量减少,饮食结构改变的同时又缺乏足够的运动,高血脂症的发病率逐年升高。近年来,由高血脂症诱发的动脉粥样硬化、冠心病、心肌梗死、高血压等心脑血管疾病发病率逐年升高,死亡率占总死亡率近位居第一,严重危害人类的健康。全球每年约有1200万人死于心血管病和脑中风,而高脂血症引起的动脉粥样硬化是造成冠心病、高血压和脑血管疾病的主要原因。
高脂血症是一种全身性的疾病,现代医学称之为血脂异常。它既可以由于遗传与环境因素,尤其是膳食不当所引起以,也可因糖尿病、肥胖症,以及肝、胆和肾脏等疾病所诱发。目前降脂的途径主要有①合理调理饮食②加强运动锻炼③适当的理疗包括血浆净化治疗④药物治疗。
目前主要有4大类降脂药物用于高脂血症的治疗,如他汀类、贝特类、胆酸鳖合剂和烟酸类,患者需根据不同情况合理选用降血脂药物治疗。然而多数合成药基于单靶点的作用机制,对如高脂血症等病因复杂的现代疾病很难得到满意的疗效,然而相关临床报告指出,长期大量使用他汀类药物等化学类降血脂药物会产生不良反应,因此研究和发展新型降血脂药物具有重大的社会效益和经济效益。
发明内容
鉴于此,本发明的一个目的在于提供一种组合物。
本发明所述组合物,包括火麻仁油和藻油,所述火麻仁油和藻油的质量比为(20-60):(30-70)。
火麻仁系桑科大麻属植物大麻CannabissativaL.的干燥成熟果实。《中华人民共和国药典》记载火麻仁甘、平,归脾、胃、大肠经,有润肠通便功能,主治血虚津亏、肠燥便秘。《神农本草经》将其列为上品,属滋补性润燥中药。火麻仁又是常用药食同源中药。现代药理研究表明火麻仁油以脂肪酸为主,其中饱和脂肪酸为4.9%~9.5%;不饱和的脂肪酸中,油酸约为12%、亚油酸53%、18%的α-亚麻酸和3.4%的γ-亚麻酸。
藻油来源于海洋微藻,经藻种纯化、扩大培养、萃取油脂、物理精炼等工序加工而成。藻油富含多不饱和脂肪酸,属于Omega-3不饱和脂肪酸家族中的重要成员。
本发明通过大量的配伍筛选研究发现火麻仁油和藻油按质量比为(20-60):(30-70)的比例组合具有协同作用,对高脂血症动物模型大鼠的体重增加有明显的抑制作用,可显著提高降血脂的功效,同时具有抗氧化作用。
作为优选,本发明所述组合物中所述火麻仁油和藻油的质量比为(35-60):(35-65)。
在一些优选实施方案中,本发明所述组合物中所述火麻仁油和藻油的质量比为47:53。
在一些另优选实施方案中,本发明所述组合物中所述火麻仁油和藻油的质量比为36:64。
本发明所述组合物中所述藻油包含EPA。
优选的,本发明所述组合物中所述藻油中EPA含量≥12%,DHA含量≥24%。
在一个具体实施方案中,本发明通过比较火麻仁油、藻油和本发明所述组合物对混合型高脂血症大鼠血脂及抗氧化作用的影响试验,证明本发明所述组合物可显著降低大鼠体重、睾脂肪垫重、肾周脂肪垫重、脂体比、血清TG含量、血清TC含量、MDA含量,而大鼠血清HDL-C含量、SOD、GSH、GSH-Px含量显著升高;且火麻仁油与藻油组合物降血脂、抗炎的综合功效强于单用火麻仁油或藻油,表明本发明所述火麻仁油与藻油组合物具有协同增效的降血脂、抗炎作用。
在另一个具体实施方案中,本发明通过比较火麻仁油、藻油和本发明所述组合物对高胆固醇血症动物模型血脂及抗氧化作用的影响试验,证明本发明所述组合物可显著降低高胆固醇血症动物大鼠的Lee’s指数、总脂体比、血清TG含量、血清TC含量、MDA含量,减少大鼠附睾及肾脏周围脂肪组织的增加和体质量,而大鼠血清HDL-C含量、SOD含量显著升高;且火麻仁油与藻油组合物降血脂、抗炎的综合功效强于单用火麻仁油或藻油,表明本发明所述火麻仁油与藻油组合物具有协同增效的降血脂、抗炎作用。因此本发明提供了所述组合物在制备具有降血脂功能的药物或功能食品中的应用。
本发明通过比较火麻仁油、藻油和本发明所述组合物对D-半乳糖诱导衰老模型小鼠学习记忆能力的影响试验,证明与火麻仁油、藻油相比,本发明所述组合物能明显缩短Morris水迷宫实验逃避潜伏期和第1次到达原平台时间,增加穿越原平台次数和逗留时间;延长跳台实验的跳台潜伏期,减少错误次数;延长避暗实验的潜伏期,减少错误次数。表明本发明所述火麻仁油与藻油组合物提高学习记忆能力的功效强于火麻仁油或藻油。
因此本发明提供了所述组合物在制备提高学习记忆能力的药物中的应用。
在一个具体实施方案中,本发明通过比较火麻仁油、藻油和本发明所述组合物对小鼠排便功能的影响试验,证明本发明所述组合物可缩短首次排便时间,增加排便量,增强小肠蠕动,具有促进排便、增大肠容积的功效,表明本发明所述火麻仁油与藻油组合物具有改善便秘的功效,且在增加小肠蠕动方面,火麻仁油与藻油组合物效果优于单用火麻仁油和藻油,即本发明所述火麻仁油与藻油组合物在增加小肠蠕动方面具有协同增效的作用。
因此本发明提供了所述组合物在制备改善便秘的药物中的应用。
本发明通过比较火麻仁油、藻油和本发明所述组合物对大鼠肝脏保护的影响试验,证明与火麻仁油、藻油相比,本发明所述组合物能显著降低血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量和丙二醛(MDA)含量,显著增加肝组织中超氧化物岐化酶(SOD)的含量,表明本发明所述火麻仁油与藻油组合物保护肝细胞,减少肝脏的损伤的功效强于火麻仁油或藻油。
因此本发明提供了所述组合物在制备保护肝脏的药物中的应用。
本发明还提供了一种药物制剂,包括治疗有效量的本发明所述组合物和药学上可接受的辅料。本领域技术人员可将本发明所述组合物直接或间接加入制备不同剂型时所需的药学上可接受的各种常用辅料,如填充剂、崩解剂、润滑剂、粘合剂等,以常规药物制剂方法,制成常用制剂如片剂、胶囊剂、注射液、口服液、颗粒剂、丸剂、散剂和滴丸剂等。其中,填充剂如淀粉,乳糖,蔗糖,葡萄糖,甘露醇和硅酸;崩解剂如琼脂,碳酸钙,土豆淀粉或木薯淀粉,海藻酸,某些硅酸盐和碳酸钠,低取代羟丙基纤维素;润滑剂如滑石粉,硬脂酸钙,硬脂酸镁,固体聚乙二醇,月桂硫酸钠;粘合剂如羧甲基纤维素,藻酸盐,明胶,聚乙烯吡咯酮,蔗糖和阿拉伯胶。
优选的,本发明所述药物制剂为片剂、软胶囊、硬胶囊、颗粒剂或蜜膏。
本发明所述组合物还可以制备成功能食品。本发明所述功能食品包含包括治疗有效量的本发明所述组合物和可接受的辅料。功能食品是指适宜特定人群食用,具有调节机体功能,不以治疗疾病为目的,并且对人体不产生任何急性、亚急性或慢性危害的食品。本发明所述功能食品可以为普通食品形态,也可为药品形态如硬胶囊、软胶囊、片剂、口服液、酒剂、颗粒剂、粉剂、袋茶等。
优选的,本发明所述功能食品为片剂、软胶囊、硬胶囊、颗粒剂或蜜膏。
本发明提供了一种组合物及应用。本发明所述组合物包括火麻仁油和藻油,所述火麻仁油和藻油的质量比为(20-60):(30-70)。本发明通过大量的配伍筛选研究发现火麻仁油和藻油按质量比为(20-60):(30-70)的比例组合,具有协同作用,对高脂血症动物模型大鼠的体重增加有明显的抑制作用,可显著提高降血脂的功效,同时具有抗氧化作用。此外本发明所述组合物还具有提高学习记忆能力、改善便秘、保护肝脏的功效。由本发明所述组合物制备的药物和功能食品具有生产工艺简单,产品质量稳定,功能因子清晰,保健功效突出,服用剂量小,使用安全,无毒副作用等优点,适宜广大人群食用。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
为了进一步理解本发明,下面结合实施例对本发明提供进行详细说明。如无特殊说明,所述火麻仁油功效成分含量为,α-亚麻酸含量为10-25%,亚油酸含量为45%-60%;所述藻油功效成分含量为,EPA含量≥12%,DHA含量≥24%。
实施例1:对混合型高脂血症大鼠血脂及抗氧化作用的影响
1、材料与方法
1.1、实验动物及药物
Wistar雄性大鼠70只,SPF级,体重200±20g。实验动物质量合格证:第420006000000710,许可证号:SCXK(鄂)2008-0005,湖北省实验动物研究中心提供。
受试物:火麻仁油、藻油及火麻仁油与藻油组合物(质量比为47:53)低、中、高剂量组。各受试物临用前均溶于1mL聚山梨酯80,根据大鼠给药容积为1mL/100g配置混悬液。
1.2、实验分组及给药
实验设置空白对照组、模型对照组、火麻仁油组(320mg/kg)、藻油组(320mg/kg)、火麻仁油与藻油组合物(质量比为47:53)的低剂量组(160mg/kg)、火麻仁油与藻油组合物(质量比为47:53)的中剂量组(320mg/kg)、火麻仁油与藻油组合物(质量比为47:53)的高剂量组(640mg/kg),共7组。
1.3、实验方法
本实验采用在维持饲料中添加20.0%蔗糖、15%猪油、1.2%胆固醇、0.2%胆酸钠,适量的酪蛋白、磷酸氢钙、石粉等。除了粗脂肪外,模型饲料的水分、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、粗灰分、钙、磷、钙:磷均要达到维持饲料的国家标准。
大鼠喂饲维持饲料观察5天,按体重随机分成2组,10只大鼠给予维持饲料作为空白对照组,60只给予模型饲料作为模型对照组。每周称量体重1次。模型对照组给予模型饲料2周后,空白对照组和模型组大鼠不禁食采血(眼内眦),采血后尽快分离血清,测定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。根据TC水平将模型组随机分成6组,分组后各模型对照组比较TC、TG、LDL-C、HDL-C差异均无显著性。分组后,连续灌胃3周各受试物,空白对照组和模型对照组同时给予同体积的蒸馏水灌胃,空白对照组继续给予维持饲料,模型对照组及各给药组继续给予模型饲料,并定期称量体重,于实验结束时不禁食采血,采血后尽快分离血清,测定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。测定血清丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。观察实验动物体重,剥离附睾脂肪垫和肾周脂肪垫,置于滤纸上吸去组织液,称重,按下列公式计算脂/体比:脂体比=(附睾脂肪垫重量+肾周脂肪垫重量)/体重×100%。
1.4、数据处理
计量资料用表示,用SPSS19.0统计软件进行分析,组间比较采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2、实验结果
2.1、各组大鼠体重、体重增加量、脂体比的比较
表1各组体重、睾脂肪垫重、肾周脂肪垫重、脂体比比较(n=10)
注:与空白对照组比较,★P<0.05,★★P<0.01;与模型对照组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01
表1结果显示,与空白对照组比较,模型对照组大鼠体重、睾脂肪垫重、肾周脂肪垫重、脂体比显著增加(P<0.01或P<0.05),表明高脂血症动物模型复制成功。与模型对照组比较,火麻仁油藻油组合物(质量比为47:53)高、中、低剂量组大鼠体重、睾脂肪垫重、肾周脂肪垫重、脂体比显著降低(P<0.01或P<0.05);单方火麻仁油组大鼠体重、睾脂肪垫重、肾周脂肪垫重、脂体比显著降低(P<0.01);单方藻油组大鼠体重、睾脂肪垫重、肾周脂肪垫重、脂体比显著降低(P<0.01或P<0.05)。表明火麻仁油组、火麻仁油与藻油组合物(质量比为47:53)组对高脂血症动物模型大鼠的体重增加有明显的抑制作用,且火麻仁油组和火麻仁油藻油组合物(质量比为47:53)组抑制高脂血症动物模型大鼠体重增加的作用显著优于藻油组。
2.2、各组大鼠血脂生化指标的比较
表2各组血脂生化指标的比较(n=10)
注:与空白对照组比较,★P<0.05,★★P<0.01;与模型对照组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01
表2结果显示,与空白对照组比较,模型对照组大鼠血清TG、TC含量显著升高,HDL-C显著降低(P<0.01或P<0.05)。与模型对照组比较,火麻仁油藻油组合物(质量比为47:53)高、中、低剂量组大鼠血清TG、TC含量显著降低,HDL-C含量显著升高(P<0.01或P<0.05);火麻仁油组大鼠血清TG含量显著降低,HDL-C含量显著升高(P<0.05);藻油组大鼠血清TG、TC含量显著降低,HDL-C含量显著升高(P<0.01或P<0.05)。上述结果说明火麻仁油组、藻油组及火麻仁油藻油组合物(质量比为47:53)组对高血脂症动物模型大鼠均有一定的降血脂作用,从各受试物降低TC、TG和升高HDL-C的结果可知,火麻仁油藻油组合物中剂量组(320mg/kg)降血脂效果明显优于单方火麻仁油组(320mg/kg)及单方藻油组(320mg/kg)。表明本发明所述火麻仁油与藻油组合物(质量比为47:53)组对高脂血症动物模型大鼠具有协同增效的降血脂作用。
2.3各组大鼠MDA、SOD、GSH、GSH-Px活性的影响
表3各组MDA、SOD、GSH、GSH-Px活性的比较(n=10)
注:与空白对照组比较,★P<0.05,★★P<0.01;与模型对照组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01
表3结果显示,与空白对照组比较,模型对照组大鼠MDA显著升高,SOD、GSH、GSH-Px显著降低(P<0.01)。与模型对照组比较,火麻仁油藻油组合物(质量比为47:53)高、中、低剂量组大鼠MDA含量显著降低,SOD、GSH、GSH-Px含量显著升高(P<0.01或P<0.05);火麻仁油组大鼠MDA含量显著降低,SOD、GSH-Px含量显著升高(P<0.05);藻油组大鼠MDA含量显著降低,SOD、GSH、GSH-Px含量显著升高(P<0.05)。结果表明火麻仁油、藻油、火麻仁油与藻油组合物(质量比为47:53)组对高脂血症动物模型大鼠有一定的抗氧化作用,且相同剂量的单方与复方抗氧化效果比较,火麻仁油与藻油组合物(质量比为47:53)组的抗氧化效果显著优于单方火麻仁油组及藻油组,即火麻仁油与藻油组合物(质量比为47:53)具有协同增效抗氧化作用。
实施例2:对高胆固醇血症动物模型血脂及抗氧化作用的影响
1、材料与方法
1.1、实验动物及药物
Wistar雄性大鼠70只,SPF级,体重200±20g。实验动物质量合格证:第420006000000710,许可证号:SCXK(鄂)2008-0005,湖北省实验动物研究中心提供。
受试物:火麻仁油、藻油及火麻仁油与藻油组合物(36:64)低、中、高剂量组。各受试物临用前均溶于1ml聚山梨酯80,根据大鼠给药容积为1ml/100g配置混悬液。
1.2、实验分组及给药
实验设置空白对照组、模型对照组、火麻仁油组(170mg/kg)、藻油组(170mg/kg)、火麻仁油与藻油组合物(质量比为36:64)的低剂量组(85mg/kg)、火麻仁油与藻油组合物(质量比为36:64)的中剂量组(170mg/kg)、火麻仁油与藻油组合物(质量比为36:64)的高剂量组(340mg/kg),共7组。
1.3、实验方法
本实验所用高胆固醇饲料由普通鼠饲料88.7%、胆固醇1%、猪油10%和胆酸钠0.3%组成,模型饲料的水分、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、粗灰分、钙、磷、钙:磷均要达到维持饲料的国家标准。
大鼠喂饲维持饲料观察5天,按体重随机分成2组,10只大鼠给予维持饲料作为空白对照组,60只给予模型饲料作为模型对照组。每周称量体重1次。模型对照组给予模型饲料2周后,空白对照组和模型组大鼠不禁食采血(眼内眦),采血后尽快分离血清,测定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。根据TC水平将模型组随机分成6组,分组后各模型对照组比较TC、TG、LDL-C、HDL-C差异均无显著性。分组后,连续灌胃3周各受试物,空白对照组和模型对照组同时给予同体积的蒸馏水灌胃,空白对照组继续给予维持饲料,模型对照组及各给药组继续给予模型饲料,并定期称量体重,于实验结束时不禁食采血,采血后尽快分离血清,测定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。测定血清和肝脏丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性。3%戊巴比妥钠麻醉,测量大鼠体长,计算Lee’s指数,取肝脏、肾周及附睾周围脂肪组织,称重。
1.4、数据处理
计量资料用表示,用SPSS19.0统计软件进行分析,组间比较采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2、实验结果
2.1、各组大鼠体质量、Lee’s指数、脂体比的比较
表4各组大鼠体质量、Lee’s指数、脂体比的比较(n=10)
注:与空白对照组比较,★P<0.05,★★P<0.01;与模型对照组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01
表4结果显示,与正常组相比,模型对照组大鼠的体质量、Lee’s指数明显增高且肾及附睾周围脂肪组织显著增多(P<0.05,P<0.01)。与模型对照组相比,火麻仁油组、火麻仁油与藻油组合物(质量比为36:64)中、高剂量组均可显著降低高胆固醇血症动物大鼠的Lee’s指数、总脂体比和减少大鼠附睾周围脂肪组织的增加(P<0.05,P<0.01)。火麻仁油与藻油组合物(质量比为36:64)中、高剂量组减少高胆固醇血症动物大鼠体质量和肾脏周围脂肪组织的增加及降低总脂体比作用显著(P<0.05,P<0.01)。火麻仁油组、火麻仁油与藻油组合物(质量比为36:64)中剂量组在抑制高胆固醇大鼠体重及脂肪增加的各指标均显著优于藻油组。
2.2对各组大鼠血脂生化指标的影响
表5各组血脂生化指标的比较(n=10)
注:与空白对照组比较,★P<0.05,★★P<0.01;与模型对照组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01
表5结果显示,与空白对照组比较,模型对照组大鼠血清TG、TC含量显著升高,HDL-C显著降低、LDL-C显著增高(P<0.01或P<0.05)。与模型对照组比较,火麻仁油藻油组合物(质量比为36:64)中、高剂量组大鼠血清TC、TG、LDL-C含量显著降低,HDL-C含量显著升高(P<0.01或P<0.05);火麻仁油组大鼠血清LDL-C显著降低(P<0.05);藻油组大鼠血清TC、TG、LDL-C含量显著降低,HDL-C含量显著升高(P<0.01或P<0.05)。结果表明藻油组、火麻仁油与藻油组合物(质量比为36:64)组对高胆固醇血症动物模型大鼠有一定的降血脂作用;与模型对照组比较,藻油组、火麻仁油与藻油组合物(质量比为36:64)中剂量组在降低高胆固醇血症动物模型大鼠血清TC、TG和LDL-C含量水平相当,在升高HDL-C水平方面火麻仁油与藻油组合物组优于藻油组,即火麻仁油与藻油组合物(质量比为36:64)对高胆固醇血症动物模型大鼠的降血脂功效具有协同增效作用。
2.3对各组大鼠MDA、SOD的影响
表6各组MDA、SOD的比较(n=10)
注:与空白对照组比较,★P<0.05,★★P<0.01;与模型对照组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01
由表6结果可见,模型对照组血清与肝脏MDA均高于空白对照组,而SOD活力均降低,有显著性差异(p<0.05,p<0.01)。与模型对照组比较,火麻仁油藻油组合物(质量比为36:64)中、高剂量组大鼠MDA含量显著降低,SOD含量显著升高(P<0.01或P<0.05);火麻仁油组大鼠肝脏MDA含量显著降低,血清和肝脏SOD显著升高(p<0.05,p<0.01);藻油组大鼠MDA含量显著降低,SOD含量显著升高(P<0.01或P<0.05)。结果表明火麻仁油组、藻油组、火麻仁与藻油组合物(质量比为36:64)组具有抗氧化作用。
实施例3:对混合型高脂血症大鼠降脂及抗氧化作用研究
1、材料与方法
1.1、实验动物及药物
Wistar雄性大鼠70只,SPF级,体重200±20g。实验动物质量合格证:第420006000000710,许可证号:SCXK(鄂)2008-0005,湖北省实验动物研究中心提供。
受试物:火麻仁油、藻油及火麻仁油和藻油组合物(质量比为63:37)低、中、高剂量组。各组临用前均溶于1mL聚山梨酯80,根据大鼠给药容积为1mL/100g配置混悬液。
1.2、实验分组
设置空白对照组、模型对照组、火麻仁油组(340mg/kg)、藻油组(340mg/kg)、火麻仁油藻油组合物(质量比为63:37)低剂量组(170mg/kg)、火麻仁油藻油组合物(质量比为63:37)中剂量组(340mg/kg)、火麻仁油藻油组合物(质量比为63:37)高剂量组(510mg/kg),共7组。
1.3、实验方法
本实验采用在维持饲料中添加20.0%蔗糖、15%猪油、1.2%胆固醇、0.2%胆酸钠,适量的酪蛋白、磷酸氢钙、石粉等。除了粗脂肪外,模型饲料的水分、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、粗灰分、钙、磷、钙:磷均要达到维持饲料的国家标准。
大鼠喂饲维持饲料观察5天,按体重随机分成2组,10只大鼠给予维持饲料作为空白对照组,60只给予模型饲料作为模型对照组。每周称量体重1次。模型对照组给予模型饲料2周后,空白对照组和模型组大鼠不禁食采血(眼内眦),采血后尽快分离血清,测定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。根据TC水平将模型对照组随机分成6组,分组后各模型对照组比较TC、TG、LDL-C、HDL-C差异均无显著性。分组后,连续灌胃3周各受试物,空白对照组和模型对照组同时给予同体积的蒸馏水灌胃,空白对照组继续给予维持饲料,模型对照组及各给药组继续给予模型饲料,并定期称量体重,于实验结束时不禁食采血,采血后尽快分离血清,测定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。测定血清丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。观察实验动物体重,剥离附睾脂肪垫和肾周脂肪垫,置于滤纸上吸去组织液,称重,按下列公式计算脂/体比:脂体比=(附睾脂肪垫重量+肾周脂肪垫重量)/体重×100%。
1.4、数据处理
计量资料用表示,用SPSS19.0统计软件进行分析,组间比较采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2、实验结果
2.1各组大鼠体重、睾脂肪垫重、肾周脂肪垫重、脂体比的比较
表7各组体重、睾脂肪垫重、肾周脂肪垫重、脂体比比较(n=10)
注:与空白对照组比较,★P<0.05,★★P<0.01;与模型组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01
表7结果显示,与空白对照组比较,模型组大鼠体重、睾脂肪垫重、肾周脂肪垫重、脂体比显著增加(P<0.01或P<0.05),表明高脂血症动物模型复制成功。与模型组比较,火麻仁油组、火麻仁油与藻油组合物(质量比63:37)高、中、低剂量组大鼠体重、睾脂肪垫重、肾周脂肪垫重、脂体比显著降低(P<0.01或P<0.05);藻油组大鼠体重、睾脂肪垫重、肾周脂肪垫重显著降低(P<0.05)。表明火麻仁油组、藻油组及火麻仁油与藻油组合物(质量比63:37)对高脂血症动物模型大鼠的体重增加有明显的抑制作用,且,火麻仁油与藻油组合物(质量比63:37)组抑制高脂血症动物模型大鼠的体重增加的作用显著优于藻油组。
2.2各组大鼠血脂生化指标的比较
表8各组血脂生化指标的比较(n=10)
注:与空白对照组比较,★P<0.05,★★P<0.01;与模型组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01
与空白对照组比较,模型组大鼠血清TG、TC含量显著升高,HDL-C显著降低(P<0.01或P<0.05);与模型组比较,藻油组、火麻仁油藻油组合物(质量比为63:37)高、中、低剂量组大鼠血清TG、TC含量显著降低,HDL-C含量显著升高(P<0.01或P<0.05);火麻仁油组大鼠血清TG含量显著降低,HDL-C含量显著升高(P<0.05)。提示火麻仁油组、藻油组、火麻仁油藻油组合物(质量比为63:37)对高脂血症动物模型大鼠有一定的降血脂作用,且,从各组降低TC、TG及升高HDL-L的指标可看出,火麻仁油藻油组合物(质量比为63:37)降血脂效果显著优于单方火麻仁油组、藻油组,即,火麻仁油藻油组合物(质量比为63:37)具有协同增效降血脂作用。
2.3各组大鼠MDA、SOD、GSH、GSH-Px活性的影响
表9各组MDA、SOD、GSH、GSH-Px活性的比较(n=10)
注:与空白对照组比较,★P<0.05,★★P<0.01;与模型组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01
与空白对照组比较,模型组大鼠MDA显著升高,SOD、GSH、GSH-Px显著降低(P<0.01);与模型组比较,藻油组、火麻仁油藻油组合物(质量比为63:37)高、中、低剂量组大鼠MDA含量显著降低,SOD、GSH、GSH-Px含量显著升高(P<0.01或P<0.05);火麻仁油组大鼠MDA含量显著降低,SOD、GSH-Px含量显著升高(P<0.05)。提示火麻仁油、藻油、火麻仁油藻油组合物(质量比为63:37)对高脂血症动物模型大鼠有一定的抗氧化作用,且,从各组降低MDA,升高SOD、GSH、GSH-Px的指标可看出,火麻仁油藻油组合物(质量比为63:37)抗氧化效果显著优于单方火麻仁油组、藻油组,即火麻仁油藻油组合物(质量比为63:37)具有协同增效的抗氧化作用。实施例4、对小鼠排便功能的影响
1、试验材料
SPF级小鼠,雌雄各半,体重18-22g,实验动物质量合格证:第420006000000710,许可证号:SCXK(鄂)2008-0005,湖北省实验动物研究中心提供;SPF级动物房分笼饲养,饲养SPF级小鼠维持饲料,自由饮用无菌饮用水,环境温度20±2℃,相对湿度45~70%。
受试物:火麻仁油、藻油及火麻仁油与藻油不同质量比复配的组合物。各受试物临用前均溶于1ml聚山梨酯80。
复方苯乙哌啶片:焦作博爱药业有限公司,每片含盐酸地芬诺酯2.5mg,硫酸阿托品0.025mg。
2、实验方法及结果
2.1、对便秘模型小鼠排便功能的影响
取小鼠80只,随机分正常对照组、模型对照组、火麻仁油组、藻油组和不同质量比的火麻仁油与藻油组合物组,各组动物数均为10只,雌雄各半。各组禁食不禁水12h后,除正常对照组外,其余各组均给予复方苯乙哌啶50mg/Kg灌胃。30min后,各组动物灌胃给予受试物(剂量见表10),便秘模型对照组和正常对照组分别给予等体积生理盐水灌胃。给药体积为0.4mL/10g体重,药物和生理盐水中均含有0.2%的墨汁。在给药后5h内观察各组小鼠首次排黑便时间、粪便粒数和重量。
表10对便秘模型小鼠排便的影响
注:与模型对照组比较,*P<0.05,与空白对照组比较,▽P<0.05
由表10结果可见,与空白对照组相比,模型组第一次排黑便时间延长,粪便次数和粪便干重减低,差异具有显著性(P<0.05)。与模型组相比,火麻仁油组、火麻仁油与藻油不同配比组合物组均可显著性降低便秘模型小鼠第一次排黑便时间,增加排便粒数和粪便干重(P<0.05)。本发明所述不同质量比火麻仁油与藻油组合物具有润肠通便作用。
2.2、本发明中药组合物对小鼠胃肠蠕动的影响
取健康小鼠80只,随机分为8组,每组雌雄各半。禁食20-24h后,灌胃给予墨汁(含有5%的活性炭粉和10%的阿拉伯胶),后立即分别灌胃给予受试物,正常对照组给予等体积生理盐水。给药30min后用颈椎脱臼的方法将动物处死,打开肠腔分离肠系膜,剪开上端至幽门,下端至回盲部的小肠,轻轻拉成直线,测量小肠全长以及墨汁在小肠内的推进距离,按下式计算墨汁推进率,试验结果见表11。
墨汁推进率(%)=墨汁推进长度/小肠总长度×100%。
表11对小鼠小肠墨汁推进的影响
组别 | 剂量(g/kg·d) | 推进率(100%) |
空白对照组 | - | 62.44±1.03 |
模型对照组 | - | 28.43±4.15▽ |
火麻仁油组 | 200 | 37.30±5.08* |
藻油组 | 200 | 32.70±2.15 |
火麻仁油与藻油组合物组(2:7) | 200 | 38.91±0.83* |
火麻仁油与藻油组合物组(47:53) | 200 | 46.25±7.42* |
火麻仁油与藻油组合物组(36:64) | 200 | 50.69±6.30* |
火麻仁油与藻油组合物组(6:3) | 200 | 52.23±4.67* |
注:与模型对照组比较,*P<0.05,与空白对照组比较,▽P<0.05
由表11结果可见,与空白对照组相比,模型组小鼠小肠墨汁推进率显著降低(P<0.05)。与模型组比较,火麻仁油组、火麻仁油与藻油不同配比组合物组可显著提高便秘模型小鼠的小肠墨汁推进率(P<0.05)。表明本发明所述不同质量比火麻仁油与藻油组合物可使小肠蠕动明显增强,具有促进排便的功效,且火麻仁油与藻油组合物各组对小鼠小肠墨汁推进率高于单方火麻仁油组和藻油组,即火麻仁油与藻油组合物在增加小肠蠕动方面具有协同增效作用。
实施例5、毒性研究
1、急性毒性研究
取小鼠,按6g/kg灌胃给予本发明所述不同质量比的火麻仁油与藻油组合物(a、火麻仁油与藻油组合物(质量比为47:53);b、火麻仁油与藻油组合物(质量比为36:64);c、火麻仁油与藻油组合物(质量比为63:37)),1天连续给药4次,每次间隔6h,然后给予正常饮食,连续观察14天,对各个器官进行病理性检查,未发现脏器病变。
2、长期毒性研究
取小鼠灌胃给予本发明所述不同质量比的火麻仁油与藻油组合物,每天2次,连续给药14天后,测定小鼠体重、心功能、肝功能、肾功能、心电图等指标,给药组分别与对照组比较,未见明显异常。病理学检查心、肝、肾、脾、肺、胃、十二指肠、大肠、小肠、肾上腺和生殖器等脏器,给药组分别与对照组比较,均未见明显中毒性改变。
以上结果表明本发明所述不同质量比的火麻仁油与藻油组合物安全无毒,可用于临床。
Claims (10)
1.一种组合物,包括火麻仁油和藻油,所述火麻仁油和藻油的质量比为(20-60):(30-70)。
2.根据权利要求1所述组合物,所述火麻仁油和藻油的质量比为(35-60):(35-65)。
3.根据权利要求1所述组合物,所述火麻仁油和藻油的质量比为47:53、63:37或36:64。
4.根据权利要求1-3任意一项所述组合物,所述藻油包含EPA。
5.根据权利要求4所述组合物,所述藻油中EPA含量≥12%,DHA含量≥24%。
6.权利要求1-6任意一项所述组合物在制备具有降血脂功能的药物或功能食品中的应用。
7.一种药物制剂,包含有效剂量的权利要求1-6任意一项所述组合物和药学上可接受的辅料。
8.根据权利要求7所述药物制剂,其为片剂、软胶囊、硬胶囊、颗粒剂或蜜膏。
9.一种功能食品,包含有效剂量的权利要求1-6任意一项所述组合物和可接受的辅料。
10.根据权利要求9所述功能食品,其为片剂、软胶囊、硬胶囊、颗粒剂或蜜膏。
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