CN102666537A - 治疗黄病毒科病毒感染的氮杂吲唑 - Google Patents
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Abstract
氮杂吲唑化合物可用于治疗黄病毒科病毒感染,包括HCV感染。
Description
相关申请的交叉引用
本申请要求2009年10月20日提交的美国临时专利申请第61/253296号、2010年1月15日提交的美国临时专利申请第61/295612号、2010年3月12日提交的美国临时专利申请第61/313641号、2010年9月14日提交的美国临时专利申请第61/382853号和2010年9月14日提交的美国临时专利申请第61/382874号的优先权,所述每个美国临时专利申请均以全文引用方式并入本文。
发明领域
本发明提供用于治疗病毒感染的组合物和方法,因此涉及生物学、化学、药物化学、医学、分子生物学和药理学领域。
发明背景
全世界有超过一亿五千万人感染丙型肝炎病毒(HCV)。遗憾的是,这些个体中有许多不能用当前的护理标准清除其感染,所述护理标准由使用干扰素和利巴韦林(ribavirin)的组合的治疗组成。此外,该治疗与显著的副作用相关,妨碍了许多个体使用该治疗。因此,当前的治疗对于大部分患者是不够的,并且迫切需要治疗HCV感染的新药物(参见,Annals Internal Med.132:296-305(2000))。
9.6-kb正单链RNA HCV基因组编码3,000-氨基酸多蛋白,所述多蛋白经蛋白水解加工成为成熟病毒组分的结构蛋白和参与复制病毒基因组的非结构蛋白(NS)(Curr Top Microbiol Immunol 242,55-84(2000))。如同其它正链RNA病毒(Fields等(编),Fields Virology.(Lippincott-Raven Publications,Philadelphia,PA,1996,在“The virusesand their replication”中)),HCV的复制似乎与细胞内膜结构相关。就HCV而言,所述结构称为膜状网(membranous web)(J Virol 76,5974-5984(2002))并且被认为是由NS4B蛋白所诱导。在RNA复制的明显位置内组装其它病毒NS蛋白也需要NS4B(J Virol 78,11393-11400(2004))。
虽然基于抑制HCV蛋白(如NS4B)功能的化合物来用于HCV感染的有前景的新疗法正在开发中(参见,例如PCT公布第2009/038248号;第2010/107739号和第2010/107742号,每个PCT公布以全文引用方式并入本文),但是仍对基于更有活性的化合物和/或具有较少副作用或副作用严重程度较低的化合物的新疗法仍有需要。本发明满足这该需求。
发明概述
在一个方面中,本发明提供式I化合物:
或其药学上可接受的盐,其中
R1是氢;C1-C6烷基;被取代的或未取代的C3-C8环烷基、5-8元杂环基或6元芳基取代的C1-C6烷基;C2-C6烯基;取代的或未取代的C3-C8环烷基、-CO-(C3-C8环烷基)、-CO-(C1-C6烷基)、-CO-芳基、-CO-杂芳基-、-CO-杂环基-、-SO2-(C1-C6烷基)或-SO2-(C3-C8环烷基)基团;或R1和R2一起形成12-25元杂环,或R1和R5一起形成12-25元杂环;
L是键、-CONH-、-NH-CO-、取代的或未取代的C1-C5亚烷基、取代的或未取代的C2-C5杂亚烷基、取代的或未取代的5元杂芳基或其组合;
R2是-NH2、-NHR’、-NR’R’、-NHCOR’、-NR’COR’、-NHSO2R’、-NR’SO2R’、-NHSO2NH2、-NHSO2NHR’、-NHC(O)NH2、-NHC(O)NHR’、-N(R’)SO2NH2、-N(R’)SO2NHR’、-N(R’)C(O)NH2和-N(R’)C(O)NHR’,或取代的或未取代的5-7元杂环基、C5-C7环烷基、5-6元杂芳基或6元芳基;
R3、R4和R5独立地是氢、卤代、-OH、-OR’、-NH2、-NHR’、-NR’R’、-NHCOR’、-NR’COR’、-NHSO2R’、-NR’SO2R’、-NHSO2NH2、-NHSO2NHR’、-NHC(O)NH2、-NHC(O)NHR’、-N(R’)SO2NH2、-N(R’)SO2NHR’、-N(R’)C(O)NH2、-N(R’)C(O)NHR’、-SO2R’、-SO2NH2、SO2NHR’、SO2NR’R’、-CONH2、-CONHR’、-CONR’R’、-CO2H、-CO2R’,或取代的或未取代的C1-C6烷基、C3-C8环烷基、芳基、杂芳基或杂环基;以及
R’是取代的或未取代的C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C8环烷基、芳基、杂芳基或杂环基,或两个R’基团与其所键合的氮原子一起形成杂环。
在另一个方面中,本发明提供包含本发明化合物和药学上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂,基本上由本发明化合物和药学上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂组成或由本发明化合物和药学上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂组成的药物组合物。本发明的化合物和组合物可用于治疗黄病毒科病毒感染,包括但不限于HCV感染。因此,在另一个方面中,本发明提供用于治疗黄病毒科病毒感染的方法,包括用于治疗HCV感染的方法。在各个实施方案中,所述病毒是HCV,包括各种基因型中任意一种,如(不限于)基因型4、2a、1b和1a。本发明的药学上可接受的组合物可用于这些方法。在此类治疗方法中,使病毒或感染病毒(包括但不限于HCV)的细胞与本发明化合物接触并且病毒的复制被减少或抑制。所述接触可以在体外或体内。在某些实施方案中,所述细胞是肝细胞。当在体外时,所述方法可被用作用于检测其它抗病毒化合物或检测组合疗法的效果的比较。当在非人患者的患者中在体内进行时,所述方法可作为用于临床前研究的动物模型或作为类似于体外使用的比较。在某些实施方案中,特别是在施用本发明的组合物的人患者的实施方案中,病毒感染(如HCV感染)通过对需要此治疗的患者(例如感染所述病毒的患者)施用治疗有效量的本发明的化合物或药物组合物来治疗。
在另一个方面中,本发明提供用于制备本发明的化合物和组合物的方法。
发明详述
仅为了读者的方便将详细描述分成多个部分,存在于任何部分中的公开内容可与存在于另一部分中的公开内容组合。在第I部分中,提供了本文中使用的术语的定义。在第II部分中,描述了对本发明的方法有用的各种化合物。在第III部分中,描述了可根据本发明的方法治疗的感染。在第IV部分中,描述了药物组合物、单位剂型和施用根据本发明的方法有用的化合物、药物组合物和单位剂型的方法。在第V部分中,描述了本发明的组合疗法。第VI部分说明如何可测定可用于本发明方法中的各种示例性化合物的抗病毒活性的实施例。
I.定义
本文中使用的术语仅是为了描述具体实施方案,而并不意图进行限制,因为本发明的范围仅受所附权利要求限制。提供以下定义是为了辅助读者。除非另外定义,否则本文中使用的所有技术术语、注释和其它科学或医学术语或命名意在具有化学和医学领域的技术人员通常所理解的意思。在某些情况下,为了清楚起见和/或供即时参考,本文中定义了具有通常所理解的含义的术语,本文中包含这些定义不应该被理解为相对本领域中通常所理解的术语的定义体现本质的不同。
所有数字标识,例如pH、温度、时间、浓度和分子量(包括范围)应视为近似值,例如,其可视情况以例如0.1或1.0的增量进行变化(+)或(-)。虽然不一定总是明确地说明,但是所有数字标识应当作前面有术语“约”。本文中描述的试剂应该视为是示例性的,因为大部分试剂的等同物是本领域已知的。本文中引用的所有技术和专利公布均以全文引用方式并入本文。本文中的任何内容均不应被理解为承认本发明无权早于根据先前发明的公开。
除非上下文明确地另外规定,否则单数形式“一个”、“一种”和“所述”包括多个指示物。因此,例如,对“一种化合物”的提及包括多种化合物。
术语“施用”是指将药剂引入宿主中。施用药剂的优选途径包括口服施用和静脉内施用。施用可由治疗医师等判定的有效量。可以使用任何施用途径,如局部、皮下、腹膜、动脉内、吸入、阴道、直肠、鼻、引入脑脊髓液或灌注到身体的腔室或部位(body compartment)中。当连同化合物或药物组合物(和语法上的等同物)使用时,相关术语和短语“施用”和“施用…”均指直接施用(其可以由医学专业人员对患者施用或由患者自行施用),和/或指间接施用(其可以是开药物处方的行为)。例如,指导患者自行施用药物和/或提供患者药物处方的医师对所述患者施用所述药物。
术语“烷基”是指具有1至12个(或按指定的更多个)碳原子的直链或支链烃基团,包括但不限于选自1至8个碳原子的基团,如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基(pentyl)、己基、庚基、正辛基、十二烷基、十八烷基、戊基(amyl)、2-乙基己基等。“C1-C6烷基”是指具有1-6个碳原子的取代的或未取代的直链或支链烷基。术语“取代的烷基”是指被一个或多个基团取代的烷基,包括但不限于选自以下的基团:烷氧基(例如C1至C7)、取代的烷氧基、烷酰基、取代的烷酰基、烷氧基氨基、取代的烷氧基氨基、烷基酯、取代的烷基酯、烷硫基、取代的烷硫基、氨基、取代的氨基、(单取代的)氨基、(二取代的)氨基、受保护的氨基、酰胺基、芳硫基、取代的芳硫基、芳氧基(例如C1至C7)、取代的芳氧基、芳基酯、取代的芳基酯、芳酰基、取代的芳酰基、芳基、取代的芳基、叠氮基、碳环基、取代的碳环基、羧基、受保护的羧基、氰基、环烷氧基、取代的环烷氧基、环烷硫基、取代的环烷硫基、卤代、杂芳氧基、取代的杂芳氧基、杂芳硫基、取代的杂芳硫基、杂环基、取代的杂环基、杂环基氧基、取代的杂环基氧基、杂环基硫基、取代的杂环基硫基、羟基、保护的羟基、羟氨基、肼基、取代的肼基、胍基、取代的胍基、内酰胺、硝基、氧代、磺酰基、取代的磺酰基、磺酰基氧基、取代的磺酰基氧基、-SO3H、硫代酰基、硫代氰酸酯、硫醇、硫酮、脲、尿烷等。
术语酰基是指“烷酰基”、“取代的烷酰基”、“芳酰基”或“取代的芳酰基”。
术语“芳氧基”是指-O-芳基,术语“取代的芳氧基”是指-O-取代的芳基。
术语“烷基酯”是指-O-CO-烷基,术语“取代的烷基酯”是指-O-CO-取代的烷基。
术语“芳基酯”是指-O-CO-芳基,术语“取代的芳基酯”是指-O-CO-取代的芳基。
术语“烷酰基”是指与羰基连接的烷基或取代的烷基(即-C(O)-烷基或-C(O)-取代的烷基)。类似地,术语“芳酰基”是指与羰基连接的芳基或取代的芳基(即-C(O)-芳基或-C(O)-取代的芳基)。
术语“烯基”是指具有2至12个(或按指定的更多)碳原子(包括但不限于具有2至4个碳原子的基团)和至少一个碳碳双键(顺式或反式)的直链或支链烃基团,如乙烯基。烯基可以是单或多不饱和的。实例包括但不限于乙烯基、-CH=C(H)(CH3)、-CH=C(CH3)2、-C(CH3)=CH2、-C(CH3)=C(H)(CH3)、C(CH2CH3)=CH2和丁二烯基。术语“取代的烯基”是指被一个或多个基团取代的烯基,包括但不限于选自以下的基团:烷氧基(例如C1至C7)、取代的烷氧基、烷酰基、取代的烷酰基、烷氧基氨基、取代的烷氧基氨基、烯基酯、取代的烯基酯、烷硫基、取代的烷硫基、氨基、取代的氨基、(单取代的)氨基、(二取代的)氨基、保护的氨基、酰胺基、芳硫基、取代的芳硫基、芳氧基(例如C1至C7)、取代的芳氧基、芳基酯、取代的芳基酯、芳酰基、取代的芳酰基、芳基、取代的芳基、叠氮基、碳环基、取代的碳环基、羧基、保护的羧基、氰基、环烷氧基、取代的环烷氧基、环烷硫基、取代的环烷硫基、卤代、杂芳氧基、取代的杂芳氧基、杂芳硫基、取代的杂芳硫基、杂环基、取代的杂环基、杂环基氧基、取代的杂环基氧基、杂环基硫基、取代的杂环基硫基、羟基、保护的羟基、羟氨基、肼基、取代的肼基、胍基、取代的胍基、内酰胺、硝基、氧代、磺酰基、取代的磺酰基、磺酰基氧基、取代的磺酰基氧基、-SO3H、硫代酰基、硫代氰酸酯、硫醇、硫酮、脲、尿烷等。
术语“烷氧基”是指O-烷基。例如,甲氧基CH3O-是烷氧基。“C1-C6烷氧基”是指具有1-6个与氧原子共价结合的碳原子的取代的或未取代的烷基。换言之,C1-C6烷氧基具有一般结构-O-(C1-C6)烷基。C1-C6烷氧基包括例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、2-戊氧基、3-戊氧基、异戊氧基、新戊氧基、己氧基、2-己氧基、3-己氧基和3-甲基戊氧基。术语“取代的烷氧基”是指-O-取代的烷基。
术语“烷氧基氨基”是指-NH-烷氧基。术语“取代的烷氧基氨基”是指-NH-取代的烷氧基。
术语“亚烷基”是指直链饱和二价烃基或支链饱和二价烃基。类似地,C1-C10亚烷基是指具有1-10个碳原子的对应亚烷基。C1-C6亚烷基包括(例如)不限于亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基、2-甲基亚丙基和亚戊基。术语“取代的亚烷基”是指被一个或多个基团取代的烷基,包括但不限于选自以下的基团:烷氧基(例如C1至C7)、取代的烷氧基、烷酰基、取代的烷酰基、烯基、取代的烯基、烷氧基氨基、取代的烷氧基氨基、烷基酯、取代的烷基酯、烷硫基、取代的烷硫基、炔基、取代的炔基、氨基、取代的氨基、(单取代的)氨基、(二取代的)氨基、保护的氨基、酰胺基、芳硫基、取代的芳硫基、芳氧基(例如C1至C7)、取代的芳氧基、芳基酯、取代的芳基酯、芳酰基、取代的芳酰基、芳基、取代的芳基、叠氮基、碳环基、取代的碳环基、羧基、保护的羧基、氰基、环烷氧基、取代的环烷氧基、环烷硫基、取代的环烷硫基、卤代、杂芳氧基、取代的杂芳氧基、杂芳硫基、取代的杂芳硫基、杂环基、取代的杂环基、杂环基氧基、取代的杂环基氧基、杂环基硫基、取代的杂环基硫基、羟基、保护的羟基、羟氨基、肼基、取代的肼基、胍基、取代的胍基、内酰胺、硝基、氧代、磺酰基、取代的磺酰基、磺酰基氧基、取代的磺酰基氧基、-SO3H、硫代酰基、硫代氰酸酯、硫醇、硫酮、脲、尿烷等。
术语“烷硫基”是指-S-烷基。术语“取代的烷硫基”是指-S-取代的烷基。
术语“炔基”是指具有2至12个碳原子(包括但不限于具有2至4个碳原子的基团)和至少一个碳碳三键的直链或支链烃基团,如乙炔基。炔基可以是单或多不饱和的,具有指定的碳原子数目。实例包括但不限于乙炔基、1-丙炔基、-CC(CH2CH3)、-C(H2)CC(H)、-C(H)2CC(CH3)和-C(H)2CC(CH2CH3)。术语“取代的炔基”是指被一个或多个基团取代的炔基,包括但不限于选自以下的基团:烷氧基(例如C1至C7)、取代的烷氧基、烷酰基、取代的烷酰基、烷氧基氨基、取代的烷氧基氨基、烷基酯、取代的烷基酯、烷硫基、取代的烷硫基、氨基、取代的氨基、(单取代的)氨基、(二取代的)氨基、受保护的氨基、酰胺基、芳硫基、取代的芳硫基、芳氧基(例如C1至C7)、取代的芳氧基、芳基酯、取代的芳基酯、芳酰基、取代的芳酰基、芳基、取代的芳基、叠氮基、碳环基、取代的碳环基、羧基、受保护的羧基、氰基、环烷氧基、取代的环烷氧基、环烷硫基、取代的环烷硫基、卤代、杂芳氧基、取代的杂芳氧基、杂芳硫基、取代的杂芳硫基、杂环基、取代的杂环基、杂环基氧基、取代的杂环基氧基、杂环基硫基、取代的杂环基硫基、羟基、受保护的羟基、羟氨基、肼基、取代的肼基、胍基、取代的胍基、内酰胺、硝基、氧代、磺酰基、取代的磺酰基、磺酰基氧基、取代的磺酰基氧基、-SO3H、硫代酰基、硫代氰酸酯、硫醇、硫酮、脲、尿烷等。
术语“氨基”是指一价基团-NH2。术语“烷基氨基”是指基团-NRaRb,其中Ra是烷基或环烷基并且Rb是H。术语“二烷基氨基”是指基团-NRaRb,其中Ra和Rb独立地是烷基或环烷基,其中所述烷基部分可以相同或不同并且还可以与其每个所连接的氮原子组合形成3元至9元环。因此,表示为-NRaRb的二烷基氨基表示包括哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、氮杂环丁烷基、氮杂环庚烷基等。
术语“芳基”是指含有芳香族同素环状的(即烃)单、双或三环环的基团,包括但不限于具有6至12个元的基团,如苯基、萘基和联苯基。术语“取代的芳基”是指被一个或多个基团取代的芳基,包括但不限于选自以下的基团:烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、烷氧基(例如C1至C7)、取代的烷氧基、烷酰基、取代的烷酰基、烷氧基氨基、取代的烷氧基氨基、烷基酯、取代的烷基酯、烷硫基、取代的烷硫基、氨基、取代的氨基、(单取代的)氨基、(二取代的)氨基、受保护的氨基、酰胺基、芳硫基、取代的芳硫基、芳氧基(例如C1至C7)、取代的芳氧基、芳基酯、取代的芳基酯、芳酰基、取代的芳酰基、芳基、取代的芳基、叠氮基、碳环基、取代的碳环基、羧基、受保护的羧基、氰基、环烷氧基、取代的环烷氧基、环烷硫基、取代的环烷硫基、卤代、杂芳氧基、取代的杂芳氧基、杂芳硫基、取代的杂芳硫基、杂环基、取代的杂环基、杂环基氧基、取代的杂环基氧基、杂环基硫基、取代的杂环基硫基、羟基、受保护的羟基、羟氨基、肼基、取代的肼基、胍基、取代的胍基、内酰胺、硝基、氧代、磺酰基、取代的磺酰基、磺酰基氧基、取代的磺酰基氧基、-SO3H、硫代酰基、硫代氰酸酯、硫醇、硫酮、脲、尿烷,其中任选一或多对取代基与它们连接的原子一起形成3至7元环。
术语“芳硫基”是指-S-芳基。术语“取代的芳硫基”是指-S-取代的芳基。
术语“甲酰胺”或“酰胺基”是指-CON(Ry)2,其中每个Ry独立地是氢或取代的或未取代的烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、酰基、磺酰基、磺酰基氧基或受保护的羧基,或两个Ry基团与其所键合的氮原子一起形成取代的或未取代的杂环或杂芳基。
术语“羧基”是指-CO2H。
术语“(Cm-Cn)”、“Cm-Cn”和“Cm-n”是指前面放有这些术语之一的某些基团中的碳原子的数目的范围(从“m”至“n”)。例如,C1-C6烷基是指含有1至6个碳原子的烷基。
术语“包含”表示与之一起提到的化合物、组合物和/或方法包括所述术语之后列举的要素,但是可以包括或可以不包括(或排除)其它要素。短语“大体上由…组成”表示与之一起提到的化合物、组合物和/或方法包括所述术语之后的列举的要素,但是排除实质上会影响主张的发明的基本特性的其它要素。短语“由…组成”表示与之一起提到的化合物、组合物和/或方法包括所述术语之后的列举的要素但是排除所有其它要素。由每个这些术语和短语定义的实施方案由每个本发明的不同方面提供。
术语“环烷基”或“碳环基”是指完全饱和或部分不饱和的单、双或三环饱和环。因此,除非另外说明,否则“环烷基”是指其中所有环原子是碳的“烷基”、“烯基”和“炔基”的环状形式。环烷基可以形成桥环或螺环。环烷基可以具有一个或多个双键或三键。典型的环烷基具有3至9个环原子。此类基团的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、1-环己烯基、3-环己烯基、环庚基、金刚烷基、环辛基、顺式或反式十氢化萘、双环[2.2.1]庚-2-烯、环己-1-烯基、环戊-1-烯基、1,4-环辛二烯基等。术语“取代的碳环基”是指被一个或多个基团取代的碳环基,包括但不限于选自以下的基团:取代的烯基、炔基、取代的炔基、烷氧基(例如C1至C7)、取代的烷氧基、烷酰基、取代的烷酰基、烷氧基氨基、取代的烷氧基氨基、烷基酯、取代的烷基酯、烷硫基、取代的烷硫基、氨基、取代的氨基、(单取代的)氨基、(二取代的)氨基、受保护的氨基、酰胺基、芳硫基、取代的芳硫基、芳氧基(例如C1至C7)、取代的芳氧基、芳基酯、取代的芳基酯、芳酰基、取代的芳酰基、芳基、取代的芳基、叠氮基、碳环基、取代的碳环基、羧基、受保护的羧基、氰基、环烷氧基、取代的环烷氧基、环烷硫基、取代的环烷硫基、卤代、杂芳氧基、取代的杂芳氧基、杂芳硫基、取代的杂芳硫基、杂环基、取代的杂环基、杂环基氧基、取代的杂环基氧基、杂环基硫基、取代的杂环基硫基、羟基、受保护的羟基、羟氨基、肼基、取代的肼基、胍基、取代的胍基、内酰胺、硝基、氧代、磺酰基、取代的磺酰基、磺酰基氧基、取代的磺酰基氧基、-SO3H、硫代酰基、硫代氰酸酯、硫醇、硫酮、脲、尿烷,其中任选地一或多对取代基与其所键合的原子一起形成3至7元环。
术语“(环烷基)烷基”是指被烷基取代的环烷基。实例包括(环己基)甲基、3-(环丙基)-正丙基、5-(环戊基)己基、6-(金刚烷基)己基等。
术语“环烷基氧基”是指-O-环烷基。术语“取代的环烷基氧基“是指-O-取代的环烷基。
术语“环烷基硫基”是-S-环烷基。术语“取代的环烷基硫基”是指-S-取代的环烷基。
术语“黄病毒科病毒”表示黄病毒科的任何病毒,包括感染人和非人动物的那些病毒。编码这些病毒的多核苷酸和多肽序列在本领域是熟知的,并且可以在NCBI的GenBank数据库中找到,例如Genbank登录号NC_004102、AB031663、D11355、D11168、AJ238800、NC_001809、NC_001437、NC_004355、NC_004119、NC_003996、NC_003690、NC_003687、NC_003675、NC_003676、NC_001563、NC_000943、NC_003679、NC_003678、NC_002657、NC_002032和NC_001461,这些数据库条目的内容以全文引用方式并入本文。
术语“胍基”或胍是指基团-NHC(=NH)NH2。术语“取代的胍基”是指-NRC(=NR)N(R)2,其中每个R独立地是氢、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基或取代的杂环基,或其中与共同胍基氮原子连接的两个R基团可与和其结合的氮连接在一起形成杂环或取代的杂环基,条件是至少一个R不是氢。
术语“卤代”和“卤素”是指氟代、氯代、溴代或碘代基团。在一种化合物中可以有一个或多个卤素或可以有一个或多个卤素与化合物的部分连接,它们可以是相同或不同的卤素基团。
术语“杂亚烷基”是指其中所述直链饱和二价烃基或支链饱和二价烃基中的1-3个碳原子被杂原子替换的亚烷基。C1-C6杂亚烷基包括例如-O-CH2-、-CH2CH2-O-CH2CH2-、-CH2CH2-NH-CH2CH2-、-CH2-O-CH2-、-CH2-NH-CH2-和-CH2CH2-S-CH2CH2-。术语“取代的杂亚烷基”是指被一个或多个基团取代的杂亚烷基,包括但不限于选自以下的基团:烷氧基(例如C1至C7)、取代的烷氧基、烷酰基、取代的烷酰基、烷氧基氨基、取代的烷氧基氨基、烷基酯、取代的烷基酯、烷硫基、取代的烷硫基、氨基、取代的氨基、(单取代的)氨基、(二取代的)氨基、受保护的氨基、酰胺基、芳硫基、取代的芳硫基、芳氧基(例如C1至C7)、取代的芳氧基、芳基酯、取代的芳基酯、芳酰基、取代的芳酰基、芳基、取代的芳基、叠氮基、碳环基、取代的碳环基、羧基、受保护的羧基、氰基、环烷氧基、取代的环烷氧基、环烷硫基、取代的环烷硫基、卤代、杂芳氧基、取代的杂芳氧基、杂芳硫基、取代的杂芳硫基、杂环基、取代的杂环基、杂环基氧基、取代的杂环基氧基、杂环基硫基、取代的杂环基硫基、羟基、受保护的羟基、羟氨基、肼基、取代的肼基、胍基、取代的胍基、内酰胺、硝基、氧代、磺酰基、取代的磺酰基、磺酰基氧基、取代的磺酰基氧基、-SO3H、硫代酰基、硫代氰酸酯、硫醇、硫酮、脲、尿烷等。
术语“杂芳基”是指具有1至4个杂原子(如氧、硫和/或氮原子)的任选取代的芳香族环。具体来讲,杂芳基通常含有氮,单独的或与硫或氧环原子一起,并且常常含有1-3个五元或六元环。此外,以上任选取代的五元或六元环可任选地与芳香族5-元或6-元环系统稠合。例如,所述环可以任选地与芳香族5元或6元环系统稠合,如吡啶或三唑系统或苯环。因此,杂芳基可以指具有5或6个环原子的单环芳香族系统,或指具有8-20个原子的稠环二环芳香族系统,其中所述环原子是C、O、S、SO、SO2或N,并且至少一个环原子是杂原子,即O、S、SO、SO2或N。以下环系统是由术语“杂芳基”表示的基团的实例:吖啶基、吖辛基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并硫代-呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、苯并咪唑基、咔唑基、NH-咔唑基、咔啉基、苯并二氢吡喃基、色满基、噌啉基、二噻嗪基、呋喃基、呋咱基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、吲唑基、吲哚烯基(吲哚烯基)、二氢吲哚基、吲嗪基、吲哚基、异苯并呋喃基、异苯并二氢吡喃基、异吲唑基异二氢吲哚基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异噁唑基、萘啶基、八氢异喹啉基、噁二唑基、噁唑烷基、噁唑基、噁唑烷基、嘧啶基、菲啶基、啡啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁噻基(phenoxathiinyl)、吩噁嗪基、酞嗪基、哌嗪基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑基、哒嗪基、吡啶噁唑基、吡啶咪唑基、吡啶噻唑基、吡啶基(pyridinyl)、吡啶基(pyridyl)、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹噁啉基、奎宁环基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、四唑基、噻二嗪基、噻二唑基、噻蒽基、噻唑基、噻吩基、噻吩并噻唑基、噻吩并噁唑基、噻吩并咪唑基、苯硫基、三嗪基和呫吨基。除非另外指出,否则在环内的杂原子的排列可以是组成环原子的成键特性所允许的任何排列。术语“取代的杂芳基”是指被一个或多个基团杂芳基,包括但不限于选自以下的基团:取代的烯基、炔基、取代的炔基、烷氧基(例如C1至C7)、取代的烷氧基、烷酰基、取代的烷酰基、烷氧基氨基、取代的烷氧基氨基、烷基酯、取代的烷基酯、烷硫基、取代的烷硫基、氨基、取代的氨基、(单取代的)氨基、(二取代的)氨基、受保护的氨基、酰胺基、芳硫基、取代的芳硫基、芳氧基(例如C1至C7)、取代的芳氧基、芳基酯、取代的芳基酯、芳酰基、取代的芳酰基、芳基、取代的芳基、叠氮基、碳环基、取代的碳环基、羧基、受保护的羧基、氰基、环烷氧基、取代的环烷氧基、环烷硫基、取代的环烷硫基、卤代、杂芳氧基、取代的杂芳氧基、杂芳硫基、取代的杂芳硫基、杂环基、取代的杂环基、杂环基氧基、取代的杂环基氧基、杂环基硫基、取代的杂环基硫基、羟基、受保护的羟基、羟氨基、肼基、取代的肼基、胍基、取代的胍基、内酰胺、硝基、氧代、磺酰基、取代的磺酰基、磺酰基氧基、取代的磺酰基氧基、-SO3H、硫代酰基、硫代氰酸酯、硫醇、硫酮、脲、尿烷,其中任选一或多对取代基与它们连接的原子一起形成3至7元环。在一些实施方案中,取代的杂芳基环的取代基可以包括一至三个酰基、卤代、硝基、氰基、三卤代甲基、氨基、受保护的氨基、酰胺基、氨基盐、取代的氨基、单取代的氨基、二取代的氨基、羧基、受保护的羧基、羧酸盐、羟基、受保护的羟基、羟基的盐、低级烷氧基、低级烷硫基、烷基、取代的烷基、环烷基、取代的环烷基、(环烷基)烷基、取代的(环烷基)烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、烷基酯、芳基酯、苯基、取代的苯基、苯基烷基和(取代的苯基)烷基、磺酰基(任选取代的)、磺酰基氧基(任选取代的)等。杂芳基的取代基如此前定义,或就三卤代甲基而言可以是三氟甲基、三氯甲基、三溴甲基或三碘甲基。与以上杂芳基环的取代基一起使用时,“低级烷氧基”表示C1至C4烷氧基;类似地,“低级烷硫基”表示C1至C4烷硫基。
术语“杂芳氧基”是指-O-杂芳基。术语“取代的杂芳氧基”是指-O-取代的杂芳基。
术语“杂芳硫基”是指-S-杂芳基。术语“取代的杂芳硫基”是指-S-取代的杂芳基。
术语“杂环基”、“杂环”、“杂环基”或“杂环基”是指其中在环系统中的一个或多个碳原子被选自O、S、SO、SO2、P或N的杂原子替换的单环或稠环多环环烷基,其中所述氮和硫杂原子可以任选被氧化并且所述氮杂原子可以任选被季铵化。杂环包括3至13元单环、7至17元双环或10至20元三环环系统,通常含有总共3至10个环原子。杂环基的实例包括但不限于氮杂环庚烷基、咪唑啉基、吗啉基、哌啶基、哌啶-2-酮基、哌嗪基、吡咯烷基、吡咯烷-2-酮基、四氢呋喃基和四氢咪唑并[4,5-c]吡啶基。术语“取代的杂环”、“取代的杂环基”是指被一个或多个基团取代的杂环和杂环基,包括但不限于选自以下的基团:烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、烷氧基(例如C1至C7)、取代的烷氧基、烷酰基、取代的烷酰基、烷氧基氨基、取代的烷氧基氨基、烷基酯、取代的烷基酯、烷硫基、取代的烷硫基、氨基、取代的氨基、(单取代的)氨基、(二取代的)氨基、受保护的氨基、酰胺基、芳硫基、取代的芳硫基、芳氧基(例如C1至C7)、取代的芳氧基、杂环酯、取代的杂环酯、芳酰基、取代的芳酰基、芳基、取代的芳基、叠氮基、碳环基、取代的碳环基、羧基、受保护的羧基、氰基、环烷氧基、取代的环烷氧基、环烷硫基、取代的环烷硫基、卤代、杂芳氧基、取代的杂芳氧基、杂芳硫基、取代的杂芳硫基、杂环基、取代的杂环基、杂环基氧基、取代的杂环基氧基、杂环基硫基、取代的杂环基硫基、羟基、受保护的羟基、羟氨基、肼基、取代的肼基、胍基、取代的胍基、内酰胺、硝基、氧代、磺酰基、取代的磺酰基、磺酰基氧基、取代的磺酰基氧基、-SO3H、硫代酰基、硫代氰酸酯、硫醇、硫酮、脲、尿烷,其中任选一或多对取代基与它们连接的原子一起形成3至7元环。杂环和杂芳基的实例包括以下单环、双环和三环环系统:吡咯烷基、吡咯基、吡唑基、氧杂环丁烷基、吡唑啉基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、噁唑基、噁唑烷基、异噁唑烷基、异噁唑基、噻唑基、噻二唑基、噻唑烷基、异噻唑基、异噻唑烷基、呋喃基、四氢呋喃基、噻吩基、噁二唑基、哌啶基、哌嗪基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧代氮杂卓基、氮杂卓基、4-哌啶酮基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、三嗪基、四氢吡喃基、四唑基、三唑基、吗啉基、硫杂吗啉基、硫杂吗啉基亚砜、硫杂吗啉基砜、1,3-二氧戊环和四氢-1,1-二噁噻吩基等。示例性的此类双环基团包括吲哚基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并噻吩基、奎宁环基、喹啉基、四氢异喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并吡喃基、吲嗪基、苯并呋喃基(benzofuryl)、苯并呋喃基(benzofuranly)、二氢苯并呋喃基、色酮基(chromonyl)、香豆素基(coumarinyl)、苯并二氧杂环戊烯基(benzodioxolyl)、二氢苯并二氧杂环戊烯基(dihydrobenzodioxolyl)、苯并二氧杂环己二烯基(benzodioxinyl)、噌啉基、喹噁啉基、吲唑基、吡咯并吡啶基、呋喃并吡啶基(如呋喃并[2,3-c]吡啶基、呋喃并[3,2-b]吡啶基]或呋喃并[2,3-b]吡啶基)、二氢异吲哚基、二氢喹唑啉基(如3,4-二氢-4-氧代-喹唑啉基)、四氢喹啉基、氮杂双环烷基(如6-氮杂二环[3.2.1]辛烷)、氮杂螺烷基(如1,4二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷)、咪唑并吡啶基(如咪唑并[1,5-a]吡啶-3-基)、三唑并吡啶基(如1,2,4-三唑并[4,3-a]吡啶-3-基)和六氢咪唑并吡啶基(如1,5,6,7,8,8a-六氢咪唑并[1,5-a]吡啶-3-基)等。示例性的此类三环基团包括咔唑基、苯并吲哚基、啡啉基、吖啶基、菲啶基、呫吨基等。
术语“杂环基氧基”是指-O-杂环基。术语“取代的杂环基氧基”是指-O-取代的杂环基。
术语“杂环基硫基”是指-S-杂环基。术语“取代的杂环基硫基”是指-S-取代的杂环基。
术语“宿主”、“个体”、“受试者”、“患者”或“有机体”包括人和哺乳动物(例如小鼠、大鼠、猪、猫、犬和马)。可以对其施用本公开化合物的典型宿主是哺乳动物,特别是灵长类,尤其是人。对于兽医学应用,多种受试者将是合适的,例如家畜如牛、绵羊、山羊、奶牛、猪等;禽类如鸡、鸭、鹅、火鸡等;和家养动物特别是宠物如犬和猫。对于诊断或研究应用,多种哺乳动物将是合适的受试者,包括啮齿类动物(例如小鼠、大鼠、仓鼠)、兔、灵长类和猪如近交猪等。术语“活宿主”是指以上列出的任何哺乳动物或其它动物或是活的任何其它有机体。术语“活宿主”是指整个宿主或有机体并且不仅是从所述活宿主切除的部分(例如肝脏或其它器官)。
术语“肼基”是指基团-NHNH2。术语“取代的肼基”是指基团-NRNR2,其中每个R独立地是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、羧基酯、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环、取代的杂环、SO2-烷基、-SO2-取代的烷基、-SO2-烯基、-SO2-取代的烯基、-SO2-环烷基、-SO2-取代的环烷基、-SO2-芳基、-SO2-取代的芳基、-SO2-杂芳基、-SO2-取代的杂芳基、-SO2-杂环或-SO2-取代的杂环,或其中两个R基团可以与其结合的氮连接在一起形成杂环或取代的杂环基,条件是并非所有三个R基团都是氢。
术语“分离的化合物”表示化合物已经大体上与(例如)在合成制备中或(如果是天然存在的化合物)在自然界中产生的其它化合物分离。在另一个实施方案中,所述分离的化合物是至少约80重量%、至少约90重量%纯、至少约98重量%纯或至少约99重量%纯。本文中的纯度百分数还可以指存在于制剂中的其它化合物的纯度,其中,例如80%纯的分离的化合物含有80份所述化合物(和20份某些其它指定或未指定的化合物或材料)。本公开还包括非对应异构体、外消旋的和拆分的、对映体纯的形式和其药学上可接受的盐。
“任选取代的”是指“取代的或未取代的”。
术语“药物组合物”是指适于对受试者如哺乳动物(尤其是人)施用的组合物。一般来讲,“药物组合物”是无菌的,并且不含能够在受试者内引起不所需的反应的污染物(例如在药物组合物中的所述化合物是药用等级的)。药物组合物可以设计成经由许多不同施用途径对受试者或有需要的患者施用,这些施用途径包括口、静脉内、口腔、直肠、肠胃外、腹膜内、皮内、气管内、肌内、皮下、吸入等。
术语“药学上可接受的赋形剂”、“药学上可接受的稀释剂”、“药学上可接受的载体”或“药学上可接受的佐剂”表示对制备药物组合物有用的通常安全、无毒以及既不是生物学上又不是其它方面上不所需的赋形剂、稀释剂、载体和/或佐剂,并且包括对于兽医学使用和/或人药用使用可接受的赋形剂、稀释剂、载体和佐剂。如在说明书和权利要求书中使用的“药学上可接受的赋形剂、稀释剂、载体和/或佐剂”包括一种和/或一种以上此类赋形剂、稀释剂、载体和佐剂。
术语“药学上可接受的盐”是指保持游离碱或酸的生物有效性和任选的其它性质并且通过与无机或有机酸反应获得的盐,这些无机或有机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸、苹果酸、马来酸、琥珀酸、酒石酸、柠檬酸等,或无机碱或有机碱。如果公开的药剂的实施方案形成盐,那么这些盐在本公开的范围之内。除非另外指出,否则引用本文中任何式的药剂应理解为包括引用其盐。本文中使用的术语“盐”表示与无机和/或有机酸和碱形成的酸式和/或碱式盐。此外,当药剂同时含有碱性部分和酸性部分时,可以形成两性离子(“内盐”)并且包括在本文中使用的术语“盐”之内。虽然其它盐也是有用的,例如在可能在制备期间使用的分离或纯化步骤中,但是药学上可接受的(例如无毒的、生理学上可接受的)盐是优选的。药剂的化合物的盐可以例如通过使所述药剂与一定量的酸或碱(如等量的)在介质(如所述盐在其中析出的介质)中或在水介质中(随后冻干)反应来形成。含有碱性部分的药剂的实施方案可以与多种有机和无机酸形成盐。示例性酸加成盐包括乙酸盐(如与乙酸或三卤代乙酸(例如三氟乙酸)形成的那些)、己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐(glucoheptanoate)、甘油磷酸盐、半硫酸盐(hemisulfate)、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐(与盐酸形成)、氢溴酸盐(与溴化氢形成)、氢碘酸盐(hydroiodide)、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐(与马来酸形成)、甲磺酸盐(与甲磺酸形成)、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、草酸盐、果胶酯酸盐(pectinate)、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐(如与硫酸形成的那些)、磺酸盐(如本文中提到的那些)、酒石酸盐、硫代氰酸盐、甲苯磺酸盐如甲苯磺酸盐、十一烷酸盐等。含有酸性部分的药剂的实施方案可以与多种有机和无机碱形成盐。示例性碱式盐包括铵盐、碱金属盐如钠、锂和钾盐、碱土金属盐如钙和镁盐、与有机碱(例如有机胺)如二苄基乙二胺(benzathine)、双环己基胺、哈胺(hydrabamine)(与N,N-双(去氢枞基)乙二胺形成)、N-甲基-D-葡糖胺、N-甲基-D-葡糖酰胺、叔丁基胺的盐和与氨基酸如精氨酸、赖氨酸的盐等。含有碱性氮的基团可以用试剂如低级烷基卤(例如甲基、乙基、丙基和丁基氯、溴和碘化物)、二烷基硫酸酯(例如二甲基、二乙基、二丁基和二戊基硫酸酯)、长链卤化物(例如癸基、十二烷基、十四烷基和十八烷酰氯化物、溴化物和碘化物)、芳烷基卤(例如苄基和苯乙基溴)和其它来季铵化。本文中也涵盖本公开药剂的溶剂化物。
术语“前药”是指在体内转化成生物学活性形式的药剂的无活性前体。前药往往是有用的,因为在某些情况下,它们比母体化合物更易于施用。例如,它们可通过口服施用而可生物利用,而母体化合物并非如此。前药相对母体药物可能在药物组合物中也具有改善的溶解度。前药可以通过各种机制转化成母体药物,包括酶催化过程和代谢水解。Harper,N.J.(1962).Drug Latentiation in Jucker编.Progress in DrugResearch,4:221-294;Morozowich等(1977).Application of PhysicalOrganic Principles to Prodrug Design in E.B.Roche编,Design ofBiopharmaceutical Properties through Prodrugs and Analogs,APhA;Acad.Pharm.Sci.;E.B.Roche编.(1977).Bioreversible Carriers inDrug in Drug Design,Theory and Application,APhA;H.Bundgaard编.(1985)Design of Prodrugs,Elsevier;Wang等,(1999)Prodrugapproaches to the improved delivery of peptide drug,Curr.Pharm.Design.5(4):265-287;Pauletti等,(1997).Improvement in peptidebioavailability:Peptidomimetics and Prodrug Strategies,Adv.Drug.Delivery Rev.27:235-256;Mizen等(1998).The Use of Esters asProdrugs for Oral Delivery ofβ-Lactam antibiotics,Pharm.Biotech.11,:345-365;Gaignault等(1996).Designing Prodrugs and BioprecursorsI.Carrier Prodrugs,Pract.Med.Chem.671-696;M.Asgharnejad(2000).Improving Oral Drug Transport Via Prodrugs,in G.L.Amidon,P.I.Lee和E.M.Topp编,Transport Processes in PharmaceuticalSystems,Marcell Dekker,185-218页;Balant等(1990)Prodrugs for theimprovement of drug absorption via different routes of administration,Eur.J.Drug Metab.Pharmacokinet.,15(2):143-53;Balimane and Sinko(1999).Involvement of multiple transporters in the oral absorption ofnucleoside analogues,Adv.Drug Delivery Rev.,39(1-3):183-209;Browne(1997).Fosphenytoin(Cerebyx),Clin.Neuropharmacol.20(1):1-12;Bundgaard(1979).Bioreversible derivatization of drugs--principleand applicability to improve the therapeutic effects of drugs,Arch.Pharm.Chemi.86(1):1-39;H.Bundgaard编.(1985)Design of Prodrugs,New York:Elsevier;Fleisher等(1996).Improved oral drug delivery:solubility limitations overcome by the use of prodrugs,Adv.DrugDelivery Rev.19(2):115-130;Fleisher等(1985).Design of prodrugs forimproved gastrointestinal absorption by intestinal enzyme targeting,Methods Enzymol.112:360-81;FarquharD等,(1983).BiologicallyReversible Phosphate-Protective Groups,J.Pharm.Sci.,72(3):324-325;Han,H.K.等,(2000).Targeted prodrug design to optimize drug delivery,AAPS PharmSci.,2(1):E6;Sadzuka Y.(2000).Effective prodrugliposome and conversion to active metabolite,Curr.Drug Metab.,1(1):31-48;D.M.Lambert(2000)Rationale and applications of lipids asprodrug carriers,Eur.J.Pharm.Sci.,11Suppl 2:S 15-2;Wang,W.等,(1999)Prodrug approaches to the improved delivery of peptide drugs.Curr.Pharm.Des.,5(4):265-87。
术语“预防性治疗”是指完全或部分地预防疾病或其症状和/或就疾病和/或归因于所述疾病副作用的部分或完全治愈而言可以是治疗性的。
术语“受保护的氨基”是指式-NHRy或-N(Ry)2的“取代的氨基”,其中所述Ry部分可以通过氢解或通过酸、碱或本领域技术人员熟知的其它化学转化除去以提供-NH2基团或-NHRy基团。
术语“受保护的羟基”是指-O-Rz或-OCORz,或对于酚羟基,也是指O-SO2Rz,其中Rz是取代的或未取代的烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基,并且所述Rz部分可以通过氢解或通过酸、碱或本领域技术人员熟知的其它化学转化除去以提供-OH基团。
术语“受保护的羧基”是指式-CO2-Rx的羧基酯,其中Rx是取代的或未取代的烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基,并且Rx可以通过氢解或通过酸、碱或本领域技术人员熟知的其它化学转化转化成H以提供-CO2H基团。
与症状(和该短语语法上的等同物)一起使用的术语“减轻”是指降低所述症状的严重程度或频率或消除所述症状。
术语“取代的”是指本文所定义的基团中与碳或氢连接的一个或多个键被与非氢的键和非碳原子“取代基”(如但不限于卤素原子;在基团如羟基、烷氧基、芳氧基和酰氧基中的氧原子;在基团如硫醇基、烷基和芳基硫基团、砜基团、磺酰基和亚砜基团中的硫原子;在基团如氨基、烷基胺、二烷基胺、芳基胺、烷基芳基胺、二芳基胺、烷氧基氨基、羟氨基、酰胺基、磺酰基氨基、N-氧化物、酰亚胺和烯胺中的氮原子和在各种其它基团中的其它杂原子)替换。任何取代的基团可以被这些官能团取代,其中许多是除了定义特定的“取代的基团”的具体公开的那些之外的。“取代基”还包括其中与碳或氢连接的一个或多个键被与杂原子(如在氧代、酰基、酰胺基、烷氧羰基、氨基羰基、羧基和酯基中的氧;在基团如亚胺、肟、腙和腈中的氮)的高次键(例如双键或三键)替换的基团。“取代基”进一步包括其中与碳或氢原子键合的一个或多个键被与环烷基、杂环基、芳基和杂芳基的键替换的基团。另一种代表性的“取代基”是三氟甲基和含有三氟甲基的其它基团。通常,特定的基团可具有0、1、2或3个取代基。
本文中使用的例如“取代的或未取代的烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基或杂环基”是指取代的或未取代的烷基、取代的或未取代的烯基、取代的或未取代的炔基、取代的或未取代的环烷基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的杂芳基或取代的或未取代的杂环基。
术语“取代的苯基”是指被一个或多个部分取代的苯基,并且在一些情况下是一个、两个或三个部分,选自由以下组成的组:卤代、羟基、受保护的羟基、氰基、硝基、三氟甲基、C1至C7烷基、C1至C7烷氧基、C1至C7酰基、C1至C7酰氧基、羧基、氧基羧基、受保护的羧基、羧甲基、受保护的羧甲基、羟甲基、受保护的羟甲基、氨基、受保护的氨基、(单取代的)氨基、受保护的(单取代的)氨基、(二取代的)氨基、甲酰胺、N-(C1至C6烷基)甲酰胺、受保护的N-(C1至C6烷基)甲酰胺、N,N-二(C1至C6烷基)甲酰胺、三氟甲基、N-((C1至C6烷基)磺酰基)氨基、N-(苯磺酰基)氨基或苯基,取代的或未取代的,以致(例如)产生联苯基或萘基。术语“取代的苯基”的实例包括单或二(卤代)苯基如2、3或4-氯苯、2,6-二氯苯基、2,5-二氯苯基、3,4-二氯苯基、2、3或4-溴苯基、3,4-二溴苯基、3-氯-4-氟苯基、2、3或4-氟苯基等;单或二(羟基)苯基如2、3或4-羟基苯基、2,4-二羟苯基、其羟基受保护的衍生物等;硝基苯基如2、3或4-硝基苯基;氰基苯基,例如2、3或4-氰基苯基;单或二(烷基)苯基如2、3或4-甲基苯基、2,4-二甲基苯基、2、3或4-(异丙基)苯基、2、3或4-乙基苯基、2、3或4-(正丙基)苯基等;单或二(烷氧基)苯基,例如2,6-二甲氧基苯基、2、3或4-(异丙氧基)苯基、2、3或4-(叔丁氧基)苯基、3-乙氧基-4-甲氧基苯基等;2、3或4-三氟甲基苯基;单或二羧基苯基或(羧基受保护的)苯基如2、3或4-羧基苯基或2,4-二(羧基受保护的)苯基;单或二(羟甲基)苯基或(羟甲基受保护的)苯基如2、3或4-(羟甲基受保护的)苯基或3,4-二(羟甲基)苯基;单或二(氨基甲基)苯基或(氨基甲基受保护的)苯基如2、3或4-(氨基甲基)苯基或2,4-(氨基甲基受保护的)苯基;或单或二(N-(甲基磺酰基氨基))苯基如2、3或4-(N-(甲基磺酰基氨基))苯基。此外,术语“取代的苯基”表示其中所述取代基不同的二取代苯基,例如3-甲基-4-羟基苯基、3-氯-4-羟基苯基、2-甲氧基-4-溴苯基、4-乙基-2-羟苯基、3-羟基-4-硝基苯基、2-羟基-4-氯苯基等。
术语“取代的氨基”是指单取代的氨基(或(单取代的)氨基或其语法上的变型),-NHRy,或二取代的氨基(或(二取代的)氨基或其语法上的变型),-N(Ry)2,其中Ry是取代的或未取代的烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基杂芳基、酰基、磺酰基、磺酰基氧基或保护的羧基,或两个Ry基团与其所键合的氮原子一起形成取代的或未取代的杂环或杂芳基。
术语“(取代的苯基)烷基”是指与烷基连接的取代的苯基。此类基团的实例包括2-苯基-1-氯乙基、2-(4'-甲氧基苯基)乙基、4-(2',6'-二羟基苯基)正己基、2-(5'-氰基-3'-甲氧基苯基)正戊基、3-(2',6'-二甲基苯基)正丙基、4-氯-3-氨基苯基、6-(4'-甲氧基苯基)-3-羧基(正己基)、5-(4'-氨基甲基苯基)-3-(氨基甲基)正戊基、5-苯基-3-氧代-正戊-1-基、(4-羟基萘-2-基)甲基等。
术语“磺酰基”是指-SO2Rx,其中Rx是取代的或未取代的烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基。
术语“磺酰基氧基”是指-SO3Rx,其中Rx是取代的或未取代的烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基。
术语“硫代酰基”是指-S-酰基。
本文中使用的术语“治疗有效量”是指所施用药剂(其可称为化合物、抑制剂和/或药物)的实施方案使所治疗的疾病(即感染)的一种或多种症状减轻至一定程度的量和/或在一定程度上预防治疗中的或处于发展危险中的宿主的疾病(即感染)的一种或多种症状的量。因此,“治疗有效量”是足以引起有益的或所需的结果的对患有疾病(例如HCV感染)的患者施用的量。治疗有效量可以以一种或多种施用方法、应用或剂量来施用。
术语“治疗”定义为用药剂对疾病、病症或病状作用以减少或改善疾病、病症或病状和/或其症状的有害的或任何其它不所需的影响。本文中使用的“治疗”包括宿主(例如哺乳动物,通常是人或兽医学上关注的非人动物)中的疾病的任何治疗,并且包括:(a)降低确定易感染疾病但是并未诊断感染疾病的受试者中的所述疾病发生的风险,(b)阻止疾病的发展,和/或(c)减轻疾病,即引起疾病退化和/或减轻一种或多种疾病症状,例如病毒感染。“治疗”还涵盖给予抑制剂以提供药理学作用,即使在没有疾病或病状的情况下。例如,“治疗”涵盖给予提供受试者中的增强或所需的作用的疾病或病原体抑制剂(例如预防感染,减少病原体载量,减少疾病症状等)。因此,病状或患者的“治疗”是指采取措施以得到有益的或所需的结果,包括临床结果如症状的减少。为了本发明的目的,有益的或所需的临床结果包括但不限于HCV感染的一种或多种症状的减轻或改善;HCV感染的预防;HCV感染程度的减轻;疾病发展的延缓或减慢;HCV感染的改善、缓和或稳定或其它有益的结果。
本文中使用的术语“单位剂型”是指适合作为用于人和/或动物受试者的单一剂量的形体上可分开的单位,每个单位含有预定量的以足以产生所需作用的量计算的化合物(例如如本文所述的抗病毒化合物),以及药学上可接受的稀释剂、载体或媒介物。单位剂型的规格取决于使用的特定化合物、施用的途径和频率和要达到的效果以及与宿主中的各种化合物相关的药效学。
术语“脲”是指-NRCONR2,其中每个R独立地是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、羧基酯、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环、取代的杂环、SO2-烷基、-SO2-取代的烷基、-SO2-烯基、-SO2-取代的烯基、-SO2-环烷基、-SO2-取代的环烷基、-SO2-芳基、-SO2-取代的芳基、-SO2-杂芳基、-SO2-取代的杂芳基、-SO2-杂环或-SO2-取代的杂环,或其中2个R基团可以与其结合的氮连接在一起形成杂环或取代的杂环基。
术语“尿烷”是指-O-CONR2,其中每个R独立地是氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、羧基酯、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环或取代的杂环。
II.本发明的化合物
在一个方面中,本发明提供式I化合物:
或其药学上可接受的盐,其中
R1是氢;C1-C6烷基;被取代的或未取代的C3-C8环烷基、5-8元杂环基或6元芳基取代的C1-C6烷基;C2-C6烯基;取代的或未取代的C3-C8环烷基、-CO-(C3-C8环烷基)、-CO-(C1-C6烷基)、-CO-芳基、-CO-杂芳基-、-CO-杂环基-、-SO2-(C1-C6烷基)或-SO2-(C3-C8环烷基)基团;或R1和R2一起形成12-25元杂环,或R1和R5一起形成12-25元杂环;
L是键、-CONH-、-NH-CO-、取代的或未取代的C1-C5亚烷基、取代的或未取代的C2-C5杂亚烷基、取代的或未取代的5元杂芳基或其组合;
R2是-NH2、-NHR’、-NR’R’、-NHCOR’、-NR’COR’、-NHSO2R’、-NR’SO2R’、-NHSO2NH2、-NHSO2NHR’、-NHC(O)NH2、-NHC(O)NHR’、-N(R’)SO2NH2、-N(R’)SO2NHR’、-N(R’)C(O)NH2和-N(R’)C(O)NHR’,或取代的或未取代的5-7元杂环基、C5-C7环烷基、5-6元杂芳基或6元芳基;
R3、R4和R5独立地是氢、卤代、-OH、-OR’、-NH2、-NHR’、-NR’R’、-NHCOR’、-NR’COR’、-NHSO2R’、-NR’SO2R’、-NHSO2NH2、-NHSO2NHR’、-NHC(O)NH2、-NHC(O)NHR’、-N(R’)SO2NH2、-N(R’)SO2NHR’、-N(R’)C(O)NH2和-N(R’)C(O)NHR’、-SO2R’、-SO2NH2、SO2NHR’、SO2NR’R’、-CONH2、-CONHR’、-CONR’R’、-CO2H、-CO2R’,或取代的或未取代的C1-C6烷基、C3-C8环烷基、芳基、杂芳基或杂环基;以及
R’是取代的或未取代的C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C8环烷基、芳基、杂芳基或杂环基,或两个R’基团与其所键合的氮原子一起形成杂环。
如果本发明化合物及其盐可以以它们的互变异构形式存在,那么所有这些互变异构形式均是本公开的部分。所述药剂的所有立体异构体,如可能由于在各种取代基上的不对称碳而存在的那些,包括对映体形式(即使不存在不对称碳也可能存在)和非对映体形式,均在本公开的范围之内。本发明化合物的个别的立体异构体可能(例如)实质上没有其它异构体,或可能(例如)作为外消旋体混合或与所有其它或某些其它立体异构体混合。
在一个实施方案中,R3是氢,并且R4和R5均独立地是非氢取代基。在另一个实施方案中,R3和R5是氢,并且R4是非氢取代基。
在另一个实施方案中,本发明提供其中R3和R4是氢并且R5是非氢取代基的化合物。因此,在一个实施方案中,所述化合物具有式IA:
其中L是-CO-NH-、-NH-CO-、-CO-NH-CH2-和-CH2-Y-(CH2)p-,其中p是0或1至4的整数,并且Y是键、-O-或-NH-,其中每个L部分的右侧连接至R2。在一个实施方案中,L是-CO-NH-。在一个实施方案中,L是-NH-CO-。在一个实施方案中,L是-CO-NH-CH2-。在一个实施方案中,L是-CH2-Y-(CH2)p-,其中p是1或1至4的整数并且Y是-O-或-NH-。在一个实施方案中,Y是-O-。在一个实施方案中,Y是-NH-。在一个实施方案中,p是0。在一个实施方案中,p是1。在一个实施方案中,p是2。在一个实施方案中,p是3。在一个实施方案中,p是4。
在另一个实施方案中,所述化合物具有式IB:
其中:
R1是氢;C1-C6烷基;被取代的或未取代的C3-C8环烷基、5-8元杂环基或6元芳基取代的C1-C6烷基;C2-C6烯基;取代的或未取代的C3-C8环烷基、-CO-(C3-C8环烷基)、-CO-(C1-C6烷基)、-CO-(C3-C8环杂烷基)、-CO-(C1-C6杂烷基)、-SO2-(C1-C6环烷基)或-SO2-(C3-C8环烷基)基团;
L是键、-CONH-、-NH-CO-、取代的或未取代的C1-C5亚烷基、取代的或未取代的C2-C5杂亚烷基或其组合;
R2是取代的或未取代的5-7元杂环基、C5-C7环烷基、5-6元杂芳基或6元芳基;
R5是R51R52N-、R53(MeSO2)N-、R54O-或取代的或未取代的C1-C6烷基;
R51是氢或C1-C3烷基;
R52是C1-C3烷基、取代的或未取代的环烷基、芳基、杂环基或杂芳基,其中每个环烷基、芳基、杂环基或杂芳基含有6-8个环原子,或R51和R52与其所键合的氮原子一起形成被苄基、酰基或磺酰基取代的含有最多3个杂原子的6、7、8或9元杂环基环;
R53是取代的和未取代的C1-C6烷基;以及
R54是氢、取代的或未取代的苄基、支链C3-C8烷基、未取代的C5-C8环烷基或被一个或多个直链或支链C1-C4烷基取代的C5-C8环烷基。
在其它实施方案中,本发明提供式IC和ID的化合物:
其中R1、R22、R23、R24、R51和R52如以上(或以下)任何方面或实施方案定义。
在另一个实施方案中,R1是氢、C1-C5烷基或-(CH2)k-R11;k是1或2;并且R11是C3-C8环烷基或取代的或未取代的芳基或杂芳基。在另一个实施方案中,R1是C1-C5烷基。在另一个实施方案中,R1是氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基、环丙基甲基或4-氯苄基。在另一个实施方案中,R1是甲基。在另一个实施方案中,R1是4-氯苄基。在另一个实施方案中,R1是氢、甲基或4-氯苄基。在另一个实施方案中,R1是氢或甲基。在另一个实施方案中,R1是氢。
在另一个实施方案中,L是-CONH-并且-CO-NH-的碳原子与氮杂吲唑环键合。
在另一个实施方案中,L是取代的或未取代的C1-C5亚烷基或C2-C5杂亚烷基。在另一个实施方案中,L是-(CH2)n-、-O-(CH2)n-或-CH2-O-(CH2)n-,其中L的左侧与氮杂吲唑部分键合;并且n是1、2、3或4。在另一个实施方案中,L是-(CH2)n-。在另一个实施方案中,L是-O-(CH2)n-。在另一个实施方案中,L是-CH2-O-(CH2)n-。在另一个实施方案中,n是3或4。在另一个实施方案中,n是3,其中L是-(CH2)n-。在另一个实施方案中,R1是4-氯苄基,其中L是-CH2-O-(CH2)n-并且n是2或3。
在另一个实施方案中,R2是取代的或未取代的哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基或氮杂环庚烷基。在另一个实施方案中,R2是取代的或未取代的哌啶-3-基或哌啶-4-基基团。在另一个实施方案中,所述取代的哌啶-4-基基团是:
其中R22是取代的或未取代的C2-C3烷基。在另一个实施方案中,R22是C2-C3烷基。在另一个实施方案中,R22是取代的乙基。在另一个实施方案中,R22是-CH2CH2-NR23R24并且R23和R24独立地是C1-C3烷基或被C3-C4环烷基环取代的C1-C3烷基,或R23和R24与其所键合的氮原子一起形成取代的或未取代的5-8元杂环。5-8元杂环的合适的取代基包括(不限于)1或2个甲基、羟甲基、甲氧基甲基或羟基。在另一个实施方案中,所述5-8元杂环是吡咯烷基、哌啶基或氮杂环庚烷基环,它是取代的或未取代的。在该实施方案内,在一个实施方案中,L是-CO-NH-,其中所述NH部分与哌啶基部分键合。在另一个实施方案中,R2是-NR23R24并且R23和R24独立地是C1-C3烷基或被C3-C4环烷基环取代的C1-C3烷基,或R23和R24与其所键合的氮原子一起形成取代的或未取代的5-8元杂环。5-8元杂环的合适的取代基包括(不限于)1或2个甲基、羟甲基、甲氧基甲基或羟基。在另一个实施方案中,所述5-8元杂环是吡咯烷基、哌啶基或氮杂环庚烷基环,它是取代的或未取代的。在该实施方案内,在一个实施方案中,L是-(CH2)n-、-O-(CH2)n-或-CH2-O-(CH2)n-,其中L的左侧与氮杂吲唑部分键合并且n是1、2、3或4。
在其它实施方案中,R2可以是4-哌啶基,即:
其中R25是H或取代基,即取代碳或氮原子的取代的或未取代的C1-C3烷基。在另一个实施方案中,R2是下式的哌啶基:
其中R22是C3-C15烯基、任选被哌啶或环己基部分取代的C1-C4烷基、取代的或未取代的苄基或C5-C8环烷基。
在另一个实施方案中,R2是取代的或未取代的噻吩基。
在另一个实施方案中,NR23R24是:
在另一个实施方案中,NR23R24是:
在另一个实施方案中,NR23R24是:
在另一个实施方案中,R5是-NR51R52,其中R51是H、甲基或乙基并且R52是乙基、异丁基、环己基、环庚基、环辛基或环己基甲基,或-NR51R52是:
在另一个实施方案中,-NR51R52是:
在另一个实施方案中,R5是-NR51R52,它是:
在另一个实施方案中,R53是HOCH2CH2(MeSO2)N-。
在另一个实施方案中,R5是-OR54,它是:
在另一个实施方案中,在本发明化合物当中,针对其显著的体外和体内性质特别选择(例如)但不限制的是式IC的化合物,其中R51R52N-是氮杂环庚烷基或类似的中环(含有7-8个环原子)杂环,R1是甲基或密切相关的低碳烷基(如C2-C3烷基),并且R22是乙基、异丙基或被含有碱性氮原子的5或6元杂环环取代的乙基。示例性的此类化合物包括不限于EBP 1047、EBP 1595、EBP 1597和EBP 1604。
在另一个实施方案中,本发明提供分离的化合物,它是EBP841、EBP1310、EBP1047、EBP1489、EBP1597、EBP1452、EBP1172或EBP1456(它们的结构展示如下),或其中每个的药学上可接受的盐或前药。
在一个实施方案中,此类本发明化合物可用于抑制丙型肝炎病毒(HCV),包括不限于HCV的基因型4、2a和/或1b。
在另一个实施方案中,对于在式I、IA和IB范围内的每个化合物,R5是R51R52N-或R54O-;R51是H或取代的或未取代的C1-C3烷基;R52是C6-C8环烷基、取代的或未取代的直链C1-C3烷基或支链C4-C5烷基或R51和R52与其所键合的氮原子一起形成总共含有1个氮原子的7、8或9元杂环基环并且R54是H、取代的或未取代的苄基、支链C3-C8烷基、未取代的C5-C8环烷基或被一个或多个直链或支链C1-C4烷基取代的C5-C8环烷基。
在一个实施方案中,本发明提供以下所示的式II化合物:
其中,R1是氢、支链或直链C1-C5烷基、C2-C15烯基、未取代或取代的环烷基、-CO-(环烷基)、-SO2-(环烷基)基团或-(CH2)n-R11,或R5和R1一起形成12-18元杂环;n是1或2;R2是取代的或未取代的哌啶基、4-吡啶基、吡咯烷基、哌嗪基、苄基、取代的苯基或吡唑基;R5是R51R52N-或R54O-;R51是H或取代的或未取代的C1-C3烷基;R52是C6-C8环烷基、取代的或未取代的直链C1-C3烷基或支链C4-C5烷基,或R51和R52与其所键合的氮原子一起形成含有最多3个杂原子的任选被(除了其已经连接的氮杂吲唑部分)取代的或未取代的苄基酰基或磺酰基取代的6、7、8或9元杂环基环;R54是H、取代的或未取代的苄基、支链C3-C8烷基、未取代的C5-C8环烷基或被一个或多个直链或支链C1-C4烷基取代的C5-C8环烷基;R11是C5-C8环烷基或取代的或未取代的芳基或取代的或未取代的杂芳基。在多种实施方案中,式II的化合物可具有如以下定义的R1、R2和R3基团。
在式II的另一个实施方案中,R1是C1-C3烷基。在一个实施方案中,R1是甲基。在一个实施方案中,R11是环己基。在一个实施方案中,R11是卤素取代的苯基。在一个实施方案中,R11是2-氯苯基或3-氯苯基。
在式II的另一个实施方案中,R1是取代的或未取代的4-哌啶基或3-哌啶基。在多种实施方案中,R2是4-哌啶基,即:
其中R25是H或取代基,即取代碳或氮原子的取代的或未取代的C1-C3烷基。在另一个实施方案中,R2是下式的哌啶基:
其中R22是C3-C15烯基、任选被哌啶或环己基部分取代的C1-C4烷基、取代的或未取代的苄基或C5-C8环烷基。
在另一个实施方案中,R2是:
在另一个实施方案中,R2是:
在另一个实施方案中,R2是取代的或未取代的噻吩基。
在式II的另一个实施方案中,R5是R51R52N-或R54O-;R51是H或取代的或未取代的C1-C3烷基;R52是C6-C8环烷基、取代的或未取代的直链C1-C3烷基或支链C4-C5烷基或R51和R52与其所键合的氮原子一起形成总共含有1个氮原子的7、8或9元杂环基环并且R23是H、取代的或未取代的苄基、支链C3-C8烷基、未取代的C5-C8环烷基或被一个或多个直链或支链C1-C4烷基取代的C5-C8环烷基。
在一个实施方案中,本发明提供以下所示的式IIA化合物:
其中R2和NR51R52如以上式II中定义。在另一个实施方案中,R2是取代的或未取代的3-哌啶基或4-哌啶基。在另一个实施方案中,R2是4-吡啶基。在另一个实施方案中,-NR51R52是
在另一个实施方案中,本发明提供以下所示的式IIB的化合物:
其中R2如以上式II定义。
在另一个实施方案中,本发明提供以下所示的式IIC化合物:
其中R1如以上式II定义。
在另一个实施方案中,本发明提供以下所示的式IID化合物:
其中R2是取代的或未取代的4-哌啶基或3-哌啶基;R1如以上式II中定义;并且R54是取代的或未取代的苄基、3-戊基、环戊基或被最多2个支链或直链C1-C3烷基取代的环己基,或环庚基。在式IID的另一个实施方案中,R54是苯基、环戊基、环己基或环庚基。
在另一个实施方案中,本发明提供以下所示的式IIE化合物:
其中R54如以上式II定义。
在另一个实施方案中,本发明提供以下所示的式IIF化合物:
其中R55是取代的或未取代的苯基。在一个实施方案中,R55是苯基。在另一个实施方案中,R55是邻或2-取代的苯基,被卤素或取代的或未取代的芳基或杂芳基取代。
在另一个实施方案中,本发明提供以下所示的式IIG化合物:
其中NR51R52如以上式IB或II定义或是1-氮杂环庚烷基或式
在另一个实施方案中,本发明提供具有以下所示的式IIH结构的化合物:
其中NR51R52如以上式IB或II定义或是1-氮杂环庚烷基,并且R22是氢或取代的或未取代的C1-C6烷基。
在另一个实施方案中,本发明提供以下所示的式II-I化合物:
其中NR21R22如以上式IB或II定义,或是1-氮杂环庚烷基。
在另一个实施方案中,本发明提供以下所示的式IIJ化合物:
其中NR51R52如以上式IB或II定义,或是1-氮杂环庚烷基。
在另一个实施方案中,本发明提供以下所示的式IIK化合物:
其中R22是氢或取代的或未取代的C1-C6烷基。在另一个实施方案中,R22取代基是-COR26,其中R26是取代的或未取代的烷基、芳基、环烷基、杂芳基或杂环基。
在另一个实施方案中,本发明提供以下所示的式III和IIIA化合物:
其中R2是3-吡啶基或4-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基独立地被氯、苯基、单取代的苯基、取代的或未取代的噻吩基或-(CH2)q-R27取代,其中q是0或1;R27是未取代的环己基、被氨基取代的环己基或哌啶基;R1是甲基、氢或4-氯苄基;然而条件是当R1是4-氯苄基或氢时,则q是0并且R5是3-哌啶基或4-哌啶基。
在另一个实施方案中,本发明提供以下所示的式IV化合物:
其中R2是含有1个氮原子的取代的或未取代的5-8元杂环基;Y是氧、NH或键;p是0或1-4的整数;R5是-NR51R52或-OR54,其中R51-R52如以上任一式定义;并且R1是甲基或4-氯苄基。在另一个实施方案中,R2是哌啶基;Y是氧或NH;p是0或1-4的整数,R5是或-O-R54;R54是3-戊基;并且R3是甲基或4-氯苄基。在另一个实施方案中,R2是1-、3-或4-哌啶基。
在另一个实施方案中,本发明提供具有以下式的式IV的化合物,其中n和m是1-4:
在另一个实施方案中,本发明提供以下所示的式V和VA的化合物:
其中R2是哌啶基或被C1-C3烷基或哌啶基甲基取代的哌啶基(3-或4-);R5是Me(Me2CHCH2)N-、环己基-O-或3-戊基-O-,并且r是0或1。在另一个实施方案中,R2是3-或4-哌啶基。在另一个实施方案中,R2是被最多3个C1-C3烷基取代的3-或4-哌啶基。
在另一个实施方案中,本发明提供以下所示的式VB化合物:
其中R54如以上式IB、II或IID中定义。
在这些和其它实施方案之内,在一个实施方案中,R1是氢,在另一个实施方案中,R1是甲基,在另一个实施方案中,R1是4-氯苄基,在另一个实施方案中,R1是3-戊基,在又一个实施方案中,R1是-CO-环己基。在这些和其它实施方案之内,在一个实施方案中,L是-CO-NH-、-NH-CO-、-CO-NH-CH2-和-CH2-Y-(CH2)p-,其中p是1或1至4的整数并且Y是-O-或-NH-,其中每个L部分的右侧连接至R2。在一个实施方案中,L是-CO-NH-。在一个实施方案中,L是-NH-CO-。在一个实施方案中,L是-CO-NH-CH2-。在一个实施方案中,L是-CH2-Y-(CH2)p-,其中p是1或1至4的整数并且Y是-O-或-NH-。在一个实施方案中,Y是-O-。在一个实施方案中,Y是-NH-。在一个实施方案中,p是0。在一个实施方案中,p是1。在一个实施方案中,p是2。在一个实施方案中,p是3。在一个实施方案中,p是4。在其中R1如该段落中定义的各种实施方案中,-L-是其中L的-NH-部分连接至是取代的或未取代的4-哌啶基或3-哌啶基的R1基团的-CO-NH-。在各种实施方案中,所述4-哌啶基是
其中R25是H或取代基,即取代碳或氮原子的取代的或未取代的C1-C3烷基。在其它实施方案中,所述3-哌啶基基团是
在另一个实施方案中,本发明提供式VI、VIA和VIB的化合物:
其中R1和R51如以上式IB或II中定义并且R22是氢或取代的或未取代的C1-C6烷基。
在另一个实施方案中,本发明提供式VII和VIIA的化合物:
其中R1如以上式I或II中定义并且R22是氢或取代的或未取代的C1-C6烷基。
在另一个实施方案中,本发明提供式VIII和VIIIA的化合物:
其中R1如以上式I或II中定义并且R22是氢或取代的或未取代的C1-C6烷基。
在另一个实施方案中,本发明提供式IX的化合物:
其中L1是含有最多3个选自由O、N和S组成的组的杂原子的5元杂芳基;L2是其中所述碳原子连接至L1的-CO-NH-;L3是取代的或未取代的C1-C3亚烷基;p1是0或1;p2是0、1或2;R2是3-或4-哌啶基;R5是-NR51R52或-OR54,其中R51、R52和R52如以上任一式定义;并且R1是甲基。在另一个实施方案中,P1是1并且P2是0或1。在另一个实施方案中,P1是0并且P2是0或1。在另一个实施方案中,P2是0。在另一个实施方案中,P2是1。在另一个实施方案中,L3是-CH2-。在其它实施方案中,式IX的化合物具有以下式,其中R7、R8和R9独立地是氢或取代的或未取代的C1-C3烷基:
在另一个实施方案中,本发明提供是分离的化合物的化合物。在另一个实施方案中,所述分离的化合物是至少约80%、至少约90%纯、至少约98%纯或至少约99%纯。
在另一个实施方案中,本发明提供在以下表中展示的化合物及其药学上可接受的盐或前药。如果可用,还展示这些化合物的抗HCV活性(通过它们对HCV基因型1b的EC50测量)和其hERG活性(“ND”表示可能未进行测量)。本发明的优选化合物包括具有小于约4微摩尔(“μM”)的抗HCV 1b活性(如表中所示)的化合物,包括但不限于具有小于约1μM的EC50、大于约10μM的hERG活性、渗透率Papp(A-B)>5μM和Papp(B-A)/Papp(A-B)的流出/渗透率比<3的化合物。用于证明化合物对HCV基因型1b和2a和hERG的活性的方法描述于以下实施例部分。用于测定化合物对HCV基因型2a和hERG的活性的方法通常也是本领域已知的。
在一个实施方案中,本发明提供包括在表1中的化合物,它们在HCV 1b复制子试验中具有或预期具有小于或等于25微摩尔的EC50值。
表1
在一个实施方案中,本发明提供以下展示的化合物,它们在HCV2a感染性克隆试验中具有或预期具有小于或等于25微摩尔的EC50值,但是在以下实施例中描述的HCV 1b复制子试验中具有(或预期具有)大于25微摩尔的EC50值。
本发明化合物可通过以下示意性描述的方法以及通过在以下实施例中提供的说明性合成方法来制备,按具体目标化合物的需要适当地替换起始物质。
向6.1的溶液添加烷基卤R1X以提供6.2。使用Suzuki偶联(Suzukicoupling)条件偶联芳基或烷基硼酸以提供6.3。对叔丁酯进行标准酸脱保护,随后进行酰胺偶联以提供6.5。
使用Buchwald偶联条件将6.2与芳基或烷基胺偶联以提供7.1。对叔丁酯进行标准酸脱保护,随后进行酰胺偶联以提供7.3。R41和R42是本文中(例如式I中)公开的胺取代基。
用二苯基磷酰叠氮化物(DPPA)处理6.4或7.2提供8.1。酰胺偶联提供8.2。
用LiAlH4处理6.4或7.2提供9.1。去保护,随后进行烷基化以提供9.2。
用MsCl处理9.1,随后用HNR23R24(其中N、R23和R24一起形成由如在上文定义(例如在式I、IA和IB中)的R2定义的基团)取代提供10.1。醇如R2-OH、R2CH2OH等可同样用于制备例如式I、IA和IB中的化合物。
用MsCl处理9.1,随后用HO-R2取代以提供11.1。
向12.1的溶液添加烷基卤R1X以提供12.2。使用“SNAr”条件用胺取代氟以提供12.3。对叔丁酯进行标准酸脱保护,随后进行酰胺偶联提供12.5。
用4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯与12.4酰胺偶联,随后进行叔丁酯的标准酸去保护以提供12.6。用2-溴乙醇进行烷基化提供12.7。12.7的甲磺酰化,随后进行胺取代提供12.8。
或者,当R22是取代的或未取代的烷基时,12.6可经由标准烷基化或还原胺化进行烷基化以提供12.9。
向12.2的溶液添加醇以取代氟从而提供13.1。对叔丁酯进行标准酸脱保护,随后进行酰胺偶联以提供13.3。
用4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯与13.2酰胺偶联提供13.4。对叔丁酯进行标准酸脱保护,随后进行烷基化或酰化以提供13.5。
用DPPA处理12.4或13.2提供14.1。酰胺偶联提供14.2。
用LiAlH4处理12.3提供15.1。甲磺酰化,随后用HNR24R23(其中N、R24和R23一起形成如在上文定义(例如在式IA或IC中)的R2)取代以提供15.2。
用MsCl处理15.1,随后用HO-R2或HO-CH2-R2取代以提供16.1或其同系物。
向12.1的溶液添加烷基卤R1X以提供17.1。使用SNAr条件用苯甲醇取代氟以提供17.2。使用烯烃复分解提供环化的产物17.3。对叔丁酯进行标准酸脱保护,随后进行酰胺偶联和氢化以提供17.4。
向12.4的溶液添加草酰氯以提供18.1。用重氮甲烷处理,随后用HBr处理提供18.2。R2COOH的酯化,随后加热提供咪唑18.4。烷基化提供18.5。
用醋酸铵处理18.3提供19.1。
溴代甲基酮处理12.4提供20.1。加热,随后进行烷基化以提供20.2。
用硫代酰胺处理18.2提供21.1。
用LiAlH4处理12.3,随后用氧化条件处理提供醛22.1。在维蒂希(Wittig)条件下用2-(二乙氧基磷酰基)醋酸乙酯处理随后氢化提供22.2。将酯还原成醇,随后甲苯磺酰化并且用胺取代提供22.3。
III.可治疗的感染:黄病毒科病毒
在某些方面,本发明提供用于治疗与黄病毒科病毒感染有关的疾病的方法。本发明提供治疗感染来自病毒的黄病毒科的病毒的宿主的示例性方法,其中包括:对所述宿主施用治疗有效量的本发明化合物以抑制HCV或减少在所述宿主中的病毒载量。在一个实施方案中,施用的本发明化合物选自式I、IA-D、II、IIA-J、III、IV、IVA-B、V、VA、VI、VIA-B、VII、VIIA、VIII、VIIIA、IX和IXA-J的化合物及其药学上可接受的盐或前药。在一个实施方案中,本发明化合物是分离的EBP841、EBP1310、EBP1047、EBP1489、EBP1452、EBP1172或EBP1456和其药学上可接受的盐或前药。在多种实施方案中,本发明化合物作为它们的药物组合物施用。
本发明化合物可用于病毒感染的治疗,其中所述病毒是黄病毒科病毒,该病毒科包括但不限于黄病毒、瘟病毒和丙型肝炎病毒。其它黄病毒科病毒包括黄热病毒(YFV);登革热病毒,包括登革热1-4型(Denguetypes 1-4);日本脑炎病毒(Japanese Encephalitis virus);墨累河谷脑炎病毒(Murray Valley Encephalitis virus);圣路易斯脑炎病毒(St.LouisEncephalitis virus);西尼罗病毒(West Nile virus);蜱传脑炎病毒;丙型肝炎病毒(HCV);Kunjin病毒;中欧脑炎病毒(Central Europeanencephalitis virus);苏联春夏型脑炎病毒(Russian spring-summerencephalitis virus);Powassan病毒;卡萨努森林病病毒(Kyasanur Forestdisease)和鄂木斯克出血热病毒(Omsk hemorrhagic fever virus)。因此,当以下说明书引用热控制阀时,该引用仅是为了清楚起见并且不希望将本公开限制于HCV,因为本发明的方法和组合物可适用于任何黄病毒科病毒。
本发明的实施方案包括治疗病毒的黄病毒科的病毒感染的方法。具体来讲,本文中描述的本发明化合物可用于治疗病毒的黄病毒科的病毒感染。在一个实施方案中,本公开提供通过以一个或多个剂量对宿主施用治疗有效量的本发明化合物以减少所述宿主中的病毒载量来治疗感染来自病毒的黄病毒科病毒感染的方法。本发明的实施方案还包括预防性治疗病毒的黄病毒科的病毒感染的方法。具体来讲,本发明化合物可如本文中描述的用于预防性治疗病毒的黄病毒科的病毒感染。
在一个实施方案中,如本文所述的本发明化合物与另一种药剂(例如抗病毒剂)组合使用以治疗来自病毒的黄病毒科的病毒感染。在一个实施方案中,本文中描述的本发明化合物与另一种药剂(例如抗病毒剂)组合使用以预防性治疗来自病毒的黄病毒科的病毒感染。
在一个实施方案中,本发明化合物的有效量是当以一个或多个剂量对有需要的宿主(例如人)施用时,与未用本发明化合物治疗的个体中的病毒载量相比,使所述个体中的HCV或其它黄病毒科病毒载量减少至少约10%、至少约50%、至少约75%、至少约80%或至少约90%或以上的量。病毒载量可通过测量血清中的病毒的效价或水平来测量。这些方法包括但不限于定量聚合酶链反应(PCR)和分支链DNA(bDNA)试验。用于测量HCV RNA的病毒载量(效价)的定量分析已经被开发出来。许多此类分析法在商业上是可用的,包括定量逆转录PCR(RT-PCR)(Amplicor HCV MonitorTM,Roche Molecular Systems,New Jersey);和分支链DNA(脱氧核糖核酸)信号放大分析(QuantiplexTMHCV RNA Assay(bDNA),Chiron Corp.,Emeryville,California)。参见,例如Gretch等,(1995)Ann.Intern.Med.123:321-329。还在研究中的是由Chiron Corporation以商品名出售的核酸试验(NAT),该NAT同时检测HIV-1和HCV的存在。参见,例如Vargo等,(2002)Transfusion 42:876-885。
各种黄病毒科病毒(包括但不限于HCV)可严重地损害感染的患者的肝脏。因此,本发明提供用于防止肝脏损害和(在一些患者中)修复肝功能的方法。因此,在一些实施方案中,本发明化合物的有效量是当以一个或多个剂量对有需要的宿主(例如人)施用时,与未用本发明化合物治疗的个体的肝功能相比,使所述个体的肝功能增加至少约10%、至少约25%、至少约50%、至少约75%、至少约90%或以上的量。在一些实施方案中,本发明化合物的有效量是当以一个或多个剂量对有需要的宿主(例如人)施用时,与未用本发明化合物治疗的个体的肝纤维化程度相比,使所述宿主的肝纤维化减少至少约10%、至少约25%、至少约50%、至少约75%、至少约90%或以上的量。
肝纤维化减少通过分析肝脏活检样本来测定。肝活检的分析包括两个主要部分的评价:通过作为严重性和正在进行的疾病活性的测量的“等级”评价的坏死性炎症,和通过作为长期疾病发展的反映的“阶段”评价的纤维化和实质的损伤或血管重塑。参见,例如Brunt(2000)Hepatol.31:241-246;和METAVIR(1994)Hepatology 20:15-20。根据肝活检的分析进行指定得分。存在许多标准化的评分系统,它们提供纤维化的程度和严重性的定量评价。这些系统包括瞬时弹性成像、METAVIR、Knodell、Scheuer、Ludwig和Ishak评分系统。
瞬时弹性成像纤维化评分系统适于在测定患者是否需要治疗或对根据本发明的方法的治疗响应中使用,它由Thierry Poynard开发并且主要在欧洲销售但是在美国也有销售。它常常在侵入性肝脏活检危险时使用。该评分系统的上市产品称为FibroScan,所述系统提供肝脏硬化的测量。
METAVIR评分系统基于肝脏活检的各种特征的分析,包括纤维化(门纤维化、中央小叶纤维化和肝硬化);坏死(碎片状坏死和小叶片坏死、嗜酸性退缩(acidophilic retraction)和气球样变性);炎症(门管区炎症、门淋巴聚集(portal lymphoid aggregates)和门炎症分布);胆管变化;和Knodell指标(门脉周围坏死、小叶片坏死、门炎症、纤维化和总体疾病活跃度的分数)。在METAVIR中的各阶段的定义如下:得分:0,无纤维化;得分:1,门管区的星状肿大但是没有间隔(septa);和得分:4,肝硬化。
Knodell的评分系统(也称为Hepatitis Activity Index)根据得分将标本分成四个组织特征的类型:I.门脉周围和/或桥接坏死;II.小叶内退化和灶样坏死;III.门炎症;和IV.纤维化。在Knodell评分系统中,得分如下:得分:0,无纤维化;得分:1,轻度的纤维化(纤维状门膨大);得分:2,中度的纤维化;得分:3,严重的纤维化(桥接纤维化);和得分:4,肝硬化。因此,所述评分是得分越高,肝脏组织损伤越严重。参见Knodell(1981)Hepatol.1:431。
在Scheuer评分系统中,得分如下:得分:0,无纤维化;得分:1,增大的、纤维化的门管区;得分:2,门脉周围或门-门间隔,但是完整的结构;得分:3,结构变形的纤维化,但是无明显的肝硬化;得分:4,很可能的或明确的肝硬化。参见Scheuer(1991)J.Hepatol.13:372。
Ishak评分系统描述于Ishak(1995)J.Hepatol.22:696-699。阶段0,无纤维化;阶段1,一些门区的纤维状膨大,有或者没有短的纤维间隔;阶段2,大部分门区的纤维状膨大,有或者没有短的纤维间隔;阶段3,大部分门区的纤维状膨大,偶见门门(P-P)桥接;阶段4,门区的纤维状膨大,明显的桥接(P-P)以及门中央(P-C);阶段5,明显的桥接(P-P和/或P-C),偶见结节(不完全的肝硬化);阶段6,肝硬化,很可能的或明确的。
本发明提供的治疗的益处也可以使用Child-Pugh评分系统来测量和评价,所述系统包含基于血清胆红素水平、血清白蛋白水平、凝血酶原时间、腹水的存在和严重程度和脑病的存在和严重程度的异常的多元评分系统。根据这些参数的异常的存在和严重程度,可以将患者归入临床疾病的增加的严重程度的三种类型之一:A、B或C。
a.HCV
在一个实施方案中,用于抑制HCV复制和治疗HCV感染的本发明化合物特别值得关注。根据本发明的方法能治疗的HCV可以是任何基因型(基因型1、2、3、4、5、6等)以及HCV基因型的亚型(例如1a、1b、2a、2b、3a等)。因为HCV基因型1通常最难治疗,用于治疗HCV基因型1和基因型1亚型感染的本发明的方法和组合物是特别值得关注。然而,仍然需要治疗其它HCV基因型的方法,本发明提供这些方法。因此,在一个实施方案中,本发明提供治疗黄病毒感染(例如HCV感染)的方法和减少可以作为HCV感染的后遗症存在的肝脏纤维化的方法。
本公开的实施方案提供对治疗患有病毒感染的患者有用的方法、化合物和药物制剂。在一个实施方案中,患者感染HCV但是不知是否感染另一种病毒(包括但不限于HIV)。在另一个实施方案中,患者感染HCV和一种或多种其它病毒(包括但不限于HIV)。在一个实施方案中,通过仅施用对治疗HCV感染有用的如本文所述的本发明的单一化合物来治疗患者的病毒感染。在另一个实施方案中,通过施用对治疗HCV感染有用的本文中描述的本发明化合物以及已知对治疗病毒感染有用一种或多种其它药剂来治疗患者的病毒感染。
(i)基因型1b
在美国,HCV基因型1b存在于15-20%的患者中。亚型1b使用当前的药物难以根除。该类型在欧洲、土耳其和日本是最普遍的。本发明提供用于治疗HCV基因型1b感染的方法。
(ii)其它基因型
丙型肝炎病毒的最常用的分类具有被分成以下基因型(主要类型)的HCV:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10和11。HCV基因型可以分解为亚型,其中一些包括:1a、1b、1c、2a、2b、2c、3a、3b、4a、4b、4c、4d、4e、5a、6a、7a、7b、8a、8b、9a、10a和11a。在这些当中,1a大多见于北美洲和南美洲,但是在澳大利亚也是常见的。1b(如上所述)大多见于欧洲和亚洲。在日本和中国2a是最常见的基因型2。在美国和北欧2b是最常见的基因型2。在西欧和南欧2c是最常见的基因型2。在澳大利亚(40%的案例)和南亚3a是高度普遍的。在埃及4a是高度普遍的。在中非4c是高度普遍的。在南非5a是高度普遍的。6a限于香港、澳门和越南。在泰国7a和7b是常见的。在越南8a、8b和9a是普遍的。10a和11a见于印度尼西亚。
更具体地,在美国基因型1a存在于50-60%的患者中。该类型使用当前的药物难以根除。在美国基因型1c存在少于1%的患者中。在美国基因型2a、2b和2c存在于10-15%的患者中。这些亚型分布广泛并且对药物最敏感。在美国基因型3a和3b存在于4-6%的患者中。在印度、巴基斯坦、澳大利亚和苏格兰这些亚型是最普遍的。在美国基因型4存在于少于5%的患者中。它在中东和非洲是最普遍的。在美国基因型5存在于少于5%的患者中。它在南非是最普遍的。在美国基因型6存在于少于5%的患者中。它在香港和澳门是最普遍的。
本发明的方法针对这些和其它HCV基因型和亚型也是有效的。
IV.药物组合物、单位剂型及其施用
在某些方面,本发明提供药物组合物,所述药物组合物包含一种或多种本发明化合物和任选的一种或多种本文中确定的其它抗病毒药剂或在替代方案中大体上由一种或多种本发明化合物和任选的一种或多种本文中确定的其它抗病毒药剂组成,并且与一种或多种药学上可接受的赋形剂、稀释剂、载体和/或佐剂配制。在一个实施方案中,所述一种或多种本发明化合物选自式I、IA-D、II、IIA-J、III、IV、IVA-B、V、VA、VI、VIA-B、VII、VIIA、VIII和VIIIA、IX和IXA-J的化合物及其药学上可接受的盐或前药。在一个实施方案中,所述一种或多种本发明化合物选自分离的EBP841、EBP1310、EBP1047、EBP1489、EBP1452、EBP1172或EBP1456和其药学上可接受的盐或前药。此外,本发明的药物组合物的实施方案包括与一种或多种药学上可接受的辅助物质配制这些本发明化合物。具体来讲,一种或多种本发明化合物可以与一种或多种药学上可接受的赋形剂、稀释剂、载体和/或佐剂配制以提供本发明的药物组合物的实施方案。
在一个实施方案中,本发明化合物与另一种抗病毒药剂组合以制备本发明的药物组合物,所述药物组合物可以包括一种或多种药学上可接受的赋形剂、稀释剂、载体和/或佐剂。
在一个实施方案中,本发明化合物(在下面也可以称为“药物”)可以与一种或多种药学上可接受的赋形剂、稀释剂、载体和/或佐剂配制以提供对本发明的方法有用的制剂。
多种药学上可接受的赋形剂在本领域是已知的。药学上可接受的赋形剂已经充分地描述于各种出版物中,包括例如A.Gennaro(2000)“Remington:The Science and Practice of Pharmacy”,第二十版,Lippincott,Williams,& Wilkins;Pharmaceutical Dosage Forms andDrug Delivery Systems(1999)H.C.Ansel等编,第七版,Lippincott,Williams,& Wilkins;和Handbook of Pharmaceutical Excipients(2000)A.H.Kibbe等编,第三版,Amer.Pharmaceutical Assoc。
药学上可接受的赋形剂如媒介物、佐剂、载体或稀释剂对公众而言易于得到。此外,药学上可接受的辅助物质如pH调节剂和缓冲剂、张力调节剂、稳定剂、润湿剂等对公众而言易于得到。
在本发明的一个实施方案中,本发明化合物通过与适当的、药学上可接受的载体或稀释剂组合配制到药物组合物中,并且配制到固体、半固体、液体或气体形式的制剂中,如片剂、胶囊、粉剂、颗粒、软膏剂、溶液、栓剂、注射剂、吸入剂和气雾剂。
在药用剂型中,本发明化合物可以以药学上可接受的盐的形式来施用,或本发明化合物可以单独使用或以与其它药物活性化合物的适当的缔合以及组合来使用。以下药物制剂、单位剂型、其制备方法和赋形剂仅是示例性的并且决不进行限制。
对于口服制剂,本发明化合物可以单独使用或在本发明的药物制剂中使用,所述药物制剂包含或大体上包含与适当的添加剂组合以制成片剂、粉剂、颗粒或胶囊的化合物,例如与惯用的添加剂如乳糖、甘露醇、玉米淀粉或马铃薯淀粉;与粘合剂如结晶纤维素、纤维素衍生物、阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶;与崩解剂如玉米淀粉、马铃薯淀粉或羧甲基纤维素钠;与润滑剂如滑石粉或硬脂酸镁;和(如果需要)与稀释剂、缓冲剂、润湿剂、防腐剂和调味剂。
适于口服施用的药物制剂和单位剂型对治疗慢性病状、病毒感染和患者自行施用药物的治疗是特别有用的。对于急性感染和危急生命的病状,特别是需要住院治疗的那些,静脉内制剂是所需的,本发明同样提供这样的制剂。
本发明提供药物制剂,其中所述化合物可以配制到用于根据本发明通过将它们溶解、悬浮或乳化在水或非水溶剂(如植物油或其它类似的油、合成脂肪酸甘油酯、高级脂肪酸或丙二醇的酯)中进行注射的制剂中;并且(如果需要)具有惯用的添加剂如增溶剂、等渗剂、助悬剂、乳化剂、稳定剂和防腐剂。
本发明提供的气雾剂制剂可以经由吸入施用。例如,本发明的药物制剂的实施方案配制到加压的可接受的挥发剂(如二氯二氟甲烷、丙烷、氮气等)中的本发明化合物。
本发明的栓剂可以通过将本发明化合物与各种碱(如乳化碱或水溶性碱)的任一种混合来制备。本发明化合物的该药物制剂的实施方案可以经由栓剂直肠施用。所述栓剂可以包括媒介物如可可脂、碳蜡和聚乙二醇,其在体温时熔化而在室温下固化。
用于口服或直肠施用的单位剂型(如糖浆、酏剂和混悬剂)可以提供,其中各种剂量单位(例如一茶匙、一汤匙、片剂或栓剂)含有预定量的含一种或多种本发明化合物的组合物。类似地,用于注射或静脉内施用的单位剂型可以包含在组合物(如在无菌水、生理盐水或另一种药学上可接受的载体中的组合物)中的本发明化合物。
本发明的药物制剂的实施方案包括其中本发明化合物配制在可注射组合物中的那些。本发明的可注射的药物制剂制备为液体溶液或混悬剂;或制备为适于在注射之前溶解或悬浮在液体媒介物中的固体形式。根据本发明的药物制剂的其它实施方案,所述制剂也可以是乳化的或所述活性成分封装在脂质体媒介物中。
在一个实施方案中,本发明化合物被配制用于通过持续的递送系统来递送。术语“持续递送系统”与“受控递送系统”在本文中可互换使用,并且涵盖与导管、注射装置等(它们中大量的是在本领域已知的)组合的持续(例如受控)递送装置(例如泵)。
机械或电动机械输注泵也可以适于与本公开一起使用。此类装置的实例包括描述于例如美国专利第4,692,147号;第4,360,019号;第4,487,603号;第4,360,019号;第4,725,852号;第5,820,589号;第5,643,207号;第6,198,966号等的那些。一般来讲,本发明化合物的递送可以使用各种再填充、泵系统的任一种来实现。泵随时间提供一致的、受控释放。在一些实施方案中,本发明化合物在药物不能渗透的储存器的液体制剂中,并且以持续的方式对个体递送。
在一个实施方案中,所述药物递送系统是至少部分植入式的装置。所述植入式装置可以使用本领域熟知的方法和装置植入任何合适的植入位置。植入位置是在受试者身体内的药物递送装置所引入和安置的位置。植入位置包括但不一定限于真皮下、皮下、肌内或受试者身体内的其它合适的位置。在一些实施方案中使用皮下植入位置,因为便于植入和除去药物递送装置。
适于在本公开中使用的药物释放装置可以基于各种操作模式的任一种。例如,所述药物释放装置可以基于扩散系统、对流系统或侵蚀系统(例如基于侵蚀的系统)。例如,所述药物释放装置可以是电化学泵、渗透泵、电渗透泵、蒸气压泵或渗透突释基质(osmotic bursting matrix),例如其中所述药物被并入聚合物中并且所述聚合物伴随浸渍药物的聚合材料(例如生物可降解、浸渍药物的聚合材料)的降解提供药物制剂的释放。在其它实施方案中,所述药物释放装置基于电扩散系统、电解泵、泡腾泵、压电泵、水解系统等。
基于机械或电动机械的输注泵的药物释放装置也可以适于与本公开一起使用。此类装置的实例包括描述于例如美国专利第4,692,147号;第4,360,019号;第4,487,603号;第4,360,019号;第4,725,852号等的那些。一般来讲,受试者治疗方法可以使用各种再填充、非可交换泵系统的任一种来实现。由于其通常随时间的更一致的、受控释放,通常泵和其它对流系统是优选的。在一些实施方案中使用渗透泵是由于它们的更一致的受控释放和相对小的尺寸的组合优势(参见,例如PCT公布的申请第WO 97/27840号和美国专利第5,985,305号和第5,728,396号)。适于在本公开中使用的示例性渗透驱动的装置包括但不一定限于描述于以下美国专利中的那些:3,760,984;3,845,770;3,916,899;3,923,426;3,987,790;3,995,631;3,916,899;4,016,880;4,036,228;4,111,202;4,111,203;4,203,440;4,203,442;4,210,139;4,327,725;4,627,850;4,865,845;5,057,318;5,059,423;5,112,614;5,137,727;5,234,692;5,234,693;5,728,396等。
在一些实施方案中,所述药物递送装置是植入式装置。所述药物递送装置可以使用本领域熟知的方法和装置植入任何合适的植入位置。如本文中指出,植入位置是在受试者身体内的药物递送装置所引入和安置的位置。植入位置包括但不一定限于真皮下、皮下、肌内或受试者身体内的其它合适的位置。
在一些实施方案中,本发明化合物使用植入式药物递送系统来递送,例如可编程以提供用于施用药剂的系统。示例性可编程、植入式系统包括植入式输注泵。示例性植入式输注泵或与此类泵一起使用的装置描述于例如美国专利第4,350,155号;第5,443,450号;第5,814,019号;第5,976,109号;第6,017,328号;第6,171,276号;第6,241,704号;第6,464,687号;第6,475,180号和第6,512,954号。可以适合于本公开的再一个示例性装置是Synchromed输注泵(Medtronic)。
适用于本发明化合物的赋形剂是例如水、盐水、葡萄糖、甘油、乙醇等和其组合。此外(如果需要),所述媒介物可以含有少量的辅助物质如润湿剂或乳化剂或pH缓冲剂。对本领域技术人员来说,制备此类剂量形式的方法是已知的,或通过考虑本公开将会变得显而易见。参见,例如Remington's Pharmaceutical Sciences,Mack PublishingCompany,Easton,Pennsylvania,第17版,1985。所施用的组合物或制剂将会(无论如何)含有一定量的足以在治疗的受试者中获得所需的状况的化合物。
本发明组合物包括包含缓释或控释基质的那些。此外,本发明的实施方案可以与使用缓释制剂的其它治疗一起使用。本文中使用的缓释基质是由材料(通常是聚合物)制成的基质,所述材料可通过酶催化或基于酸的水解或溶出而降解。一旦被插入身体,所述基质就被酶和体液所作用。所需的缓释基质选自生物相容的材料,如脂质体、聚丙交酯(聚乳酸)、聚乙交酯(乙醇酸的聚合物)、聚丙交酯共聚-乙交酯(乳酸和乙醇酸的共聚物)、聚酐、聚(邻)酯、多肽、透明质酸、胶原、硫酸软骨素、羧酸、脂肪酸、磷脂、多糖、核酸、聚氨基酸、氨基酸如苯丙氨酸、酪氨酸、异亮氨酸、多核苷酸、聚乙烯基丙烯(polyvinyl propylene)、聚乙烯吡咯烷酮和硅树脂。说明性的生物可降解基质包括聚丙交酯基质、聚乙交酯基质和聚丙交酯共聚-乙交酯(乳酸和乙醇酸的共聚物)基质。
在另一个实施方案中,本公开的药物组合物(以及组合组合物)在控释系统中递送。例如,本发明化合物可以使用静脉内输注、植入式渗透泵、透皮贴片、脂质体或其它施用方式来施用。在一个实施方案中,可以使用泵(Sefton(1987).CRC Crit.Ref.Biomed.Eng.14:201;Buchwald等(1980).Surgery 88:507;Saudek等(1989).N.Engl.J.Med.321:574)。在另一个实施方案中,使用聚合材料。在又一个实施方案中,控释系统被近似放入治疗靶标(即肝脏)中,因此只需要全身性剂量的一小部分。在又一个实施方案中,控释系统被近似放入治疗靶标中,因此只需要全身性的一小部分。其它控释系统在Langer(1990).Science249:1527-1533的综述中论述。
在另一个实施方案中,本发明的组合物(以及各别的或一起的组合组合物)包括通过将本文中描述的抑制剂浸渍到吸收性材料(如缝线、绷带和纱布)中或涂布在固相材料(如手术缝合钉、拉链和导管)表面上来递送组合物而形成的那些。鉴于本公开,该类型的其它递送系统对本领域技术人员将是显而易见的。
因此,本发明提供用于施用根据本发明的方法的本发明化合物的各种药物制剂、单位剂型和药物递送装置。这些包括但不限于适于口服施用的片剂、胶囊和混悬剂;适于肌内和/或静脉内施用的制剂;适于局部施用的洗剂、乳膏剂、混悬剂、凝胶和处理的贴片和/或绷带;和用于持续施用本发明化合物的泵和植入式储库制剂和装置。
从上述部分可以明白的是,本发明提供用于对宿主(例如人)施用本发明化合物来治疗病毒感染的方法和组合物。在多种实施方案中,本发明的这些方法几乎覆盖适于药物递送的任何可用的方法和途径,包括体内和体外方法以及全身性和局部施用途径。
因此,适用于本发明的方法的施用途径包括鼻内、肌内、气管内、皮下、皮内、局部涂覆、静脉内、直肠、鼻、口服和其它肠内和肠胃外施用途径。施用途径可以根据药剂和/或所需的效果而组合(如果需要)或调整。活性剂可以以单一剂量或多剂量施用。适于递送的这些方法和途径的实施方案包括全身性或局部途径。一般来讲,适于本发明的方法的施用途径包括但不限于肠内、肠胃外或吸入途径。
除了吸入施用肠胃外施用途径包括但不限于局部、透皮、皮下、肌内、眶内、囊内、脊柱内、胸骨内和静脉内途径,即除了通过消化道的任何施用途径。进行肠胃外施用可以实现抑制剂的全身性或局部递送。当希望全身性递送时,施用通常涉及药物制剂的侵入性或全身性吸收的局部或粘膜施用。
本发明化合物也可以通过肠内施用递送给受试者。肠内施用途径包括但不限于口服和直肠(例如使用栓剂)递送。
通过皮肤或黏膜施用抑制剂的方法包括但不限于局部涂覆合适的药物制剂、透皮传输、注射和表皮施用。对于透皮传输,吸收促进剂或电离子透入是合适的方法。电离子透入传输可以使用市售“贴片”来实现,所述贴片经由通过未破损的皮肤进行几天或更长时间的电脉冲来连续地递送其产品。
在本发明的方法的各种实施方案中,虽然TID或更频繁地施用化合物可以使使用缓释药物制剂或本发明的其它持续递送方法更便利地施用,但是本发明化合物将以持续的、基于每天的口服施用,至少每天一次(QD),在多种实施方案中是一天两次(BID)、一天三次(TID)甚至一天四次。这样的每天施用通常会持续至少一周,经常是至少四周,有时至少3个月,并且在一些情况下是一年或更长。通常,治疗有效的日剂量将是至少1mg至不多于5g;例如,可以施用10mg、100mg、250mg、500mg、1g或2.5g的日剂量,这取决于特定的化合物和选择的施用方法。适于口服施用的单位剂量通常是以含有100mg、250mg或500mg本发明化合物的片剂或胶囊形式。适用于此类单位剂型中的本发明的说明性化合物包括不限于具有以下EBP编号的化合物:699、700、701、749、824、827、832、833、835、836、838、839、841、910、963、1040、1046、1047、1075、1203、1222、1225、1234、1235、1236、1296、1300、1305、1306、1307、1310、1424、1425、1426、1468、1469、1471、1473、1474、1475、1478、1479、1486、1487、1488、1489、1556、1557、1558、1559、1560、1561、1562、1581、1594、1595、1596、1597、1598、1604、1609、1619、1620、1621、1622和1632-1659。在这些当中,化合物910、963、1040、1047、1075、1203、1222、1225、1234、1235、1236、1296、1300、1305、1306、1307、1310、1424、1425、1426、1468、1469、1471、1473、1474、1475、1478、1479、1486、1487、1488、1489、1556、1557、1558、1559、1561、1562、1581、1594、1595、1596、1597、1598、1604、1609、1619、1620、1621、1622和1632-1659是尤其值得注意的,因为本文中的数据证明当口服QD、BID或TID施用时,所述化合物应该对于治疗HCV而言是安全和有效的。
给药可以根据本发明的方法使用胶囊,片剂,口服混悬剂、皮下或肌注射内混悬剂、静脉内输注混悬剂、用于局部涂覆的凝胶或乳膏剂或关节内注射混悬剂来实现。
在本发明的一个实施方案中,对需要治疗的患者施用本发明化合物来治疗HCV感染。用于治疗HCV感染的本发明各种组合疗法在以下部分V中描述。在这些组合疗法中,本发明化合物将会如本文所述施用,其它化合物根据经管理机构批准的施用计划来施用。
在另一方面,本发明提供本发明的化合物或本发明的组合物中的任意一种或多种用于制备抑制或治疗HCV感染的药物的用途。
V.组合疗法
本文中描述的药物制剂和单位剂型可以与其它药物(包括其它抗病毒药物)组合使用。因此本发明的方法包括通过施用两种或两种以上药物来治疗病毒诱发(或其它病原体诱发)的疾病的方法,其中至少一种是本发明化合物并且至少一种选自由以下组成的组:(1)核苷类似物,包括但不限于利巴韦林(ribavirin);(2)干扰素;(3)thiazolides,包括但不限于硝唑尼特(nitazoxanide);(4)蛋白酶抑制剂;(5)聚合酶抑制剂(核苷和非核苷抑制剂);(6)解螺旋酶抑制剂;(7)C类CpG toll样受体7和/或9拮抗剂;(8)两亲螺旋干扰物;(9)他汀类;(10)免疫调节剂(包括甾体和非甾体免疫调节剂);(11)抗炎药;(12)异戊烯化抑制剂,包括异戊烯转移酶抑制剂,包括但不限于另一种FTI、GGTI或双效FTI/GGTI;和/或(13)其它药剂,包括用于治疗副作用和/或减轻疼痛的药剂。可以在本发明的组合疗法中使用的各种这些种类的其它药物在下面论述。
1.核苷类似物
适于在本发明的组合疗法中使用的核苷类似物包括但不限于利巴韦林、左旋韦林(levovirin)、塔利韦林(taribavirin)、艾托立宾(isatoribine),在美国专利第5,559,101号中公开并且由该专利的式I涵盖的L-呋喃核糖基核苷(例如1-β-L-呋喃核糖基尿嘧啶、1-β-L-呋喃核糖基-5-氟尿嘧啶、1-β-L-呋喃核糖基胞嘧啶、9-β-L-呋喃核糖腺嘌吟、9-β-L-呋喃核糖基次黄嘌呤、9-β-L-呋喃核糖基鸟嘌呤、9-β-L-呋喃核糖基-6-硫代鸟嘌呤、2-氨基-α-L-呋喃核糖[1’,2’:4,5]噁唑啉、O2,O2-脱水-1-α-L-呋喃核糖基尿嘧啶、1-α-L-呋喃核糖基尿嘧啶、1-(2,3,5-三-O-苯甲酰基-α-呋喃核糖基)-4-硫代尿嘧啶、1-α-L-呋喃核糖基胞嘧啶、1-α-L-呋喃核糖基-4-硫代尿嘧啶、1-α-L-呋喃核糖基-5-氟尿嘧啶、2-氨基-β-L-阿拉伯呋喃糖[1’,2’:4,5]噁唑啉、O2,O2-脱水-β-L-阿拉伯呋喃糖尿嘧啶、2’-脱氧-β-L-尿苷、3’5’-二-O-苯甲酰基-2’-脱氧-4-硫代-β-L-尿苷、2’-脱氧-β-L-胞苷、2’-脱氧-β-L-4-硫代尿苷、2’-脱氧-β-L-胸苷、2’-脱氧-β-L-5-氟尿嘧啶、2’,3’-双脱氧-β-L-尿苷、2’-脱氧-β-L-5-氟尿嘧啶和2’-脱氧-β-L-肌苷);在美国专利第6,423,695号中公开并且由该专利的式I涵盖的化合物;在美国专利公开第2002/0058635号中公开并且由该公开的式1涵盖的化合物;在WO 01/90121A2中公开的核苷类似物(Idenix);在WO 02/069903A2中公开的核苷类似物(Biocryst Pharmaceuticals Inc.);和在WO 02/057287A2或WO 02/057425A2中公开的核苷类似物(均是Merck/Isis)。某些核苷类似物是DNA聚合酶抑制剂,它们也在下面作为一类论述。
在一个实施方案中,在本发明的组合疗法中使用的核苷类似物是利巴韦林。利巴韦林,1-β-D-呋喃核糖基-1H-1,2,4-三唑-3-甲酰胺(可以从ICN Pharmaceuticals,Inc.,Costa Mesa,Calif.获得)描述于MerckIndex,化合物编号8199,第十一版。其制备和配制描述于美国专利第4,211,771号。对本发明的组合疗法有用的其它核苷类似物包括利巴韦林的衍生物(参见,例如美国专利第6,277,830号)。在一个实施方案中,在本发明的组合疗法中使用的核苷类似物是左旋韦林。左旋韦林是利巴韦林的L-对映异构体,并且显示增强Th1免疫反应超过Th2免疫反应的性质。左旋韦林由ICN Pharmaceuticals制备。在一个实施方案中,在本发明的组合疗法中使用的核苷类似物是塔利韦林。塔利韦林是利巴韦林的3-甲脒衍生物,并且作为利巴韦林的前药。它被腺苷脱氨基酶有效地转化成利巴韦林。
2.干扰素
当前的治疗HCV感染的医疗实践通常使用干扰素-α单药治疗或用利巴韦林(如Rebetol或Copegus)和干扰素-α(如干扰素α2b)或聚乙二醇化干扰素(如Pegasys(由Roche销售)或PEG-Intron(由Schering Plough销售))的组合疗法。根据本发明的方法,使用本发明化合物与这些标准疗法之一组合来治疗HCV感染。
因此,本发明提供其中使用干扰素(例如干扰素-α(IFN-α))与本发明化合物组合的组合疗法。在本发明的治疗方法中可以使用任何已知的IFN-α。本文中使用的术语“干扰素-α”是指一类抑制病毒复制和细胞增殖以及调节免疫反应的相关多肽。术语“IFN-α”包括天然存在的IFN-α;合成IFN-α;衍生化IFN-α(例如聚乙二醇化IFN-α、糖基化IFN-α等);和天然存在的或合成IFN-α的类似物。因此,实质上具有抗病毒性质(如针对天然存在的IFN-α所述)的任何IFN-α可以在本发明的组合疗法中使用。
为了本发明目的,适合的α干扰素包括但不限于天然存在的IFN-α(包括但不限于天然存在的IFN-α2a、IFN-α2b);重组干扰素α-2b,如可以从Schering Corporation,Kenilworth,NJ获得的Intron-A干扰素;重组干扰素α-2a,如可以从Hoffmann-La Roche,Nutley,NJ获得的Roferon干扰素;重组干扰素α-2C,如可以从Boehringer IngelheimPharmaceuticals,Inc.,Ridgefield,CT获得的Beroforα2干扰素;干扰素α-n1,天然α干扰素的纯化混合物,如可以从Sumitomo,Japan获得的Sumiferon,或可以从Glaxo-Wellcome Ltd.,London,Great Britain获得的Wellferon干扰素α-n1(INS);和干扰素α-n3,由Interferon Sciences制备的天然α干扰素的混合物并且可以从Purdue Frederick Co.,Norwalk,CT获得(商品名为Alferon)。
术语“IFN-α”也涵盖复合IFN-α。复合IFN-α(也称为“CIFN”和“IFN-con”和“复合干扰素”)涵盖但不限于氨基酸序列指定的IFN-con1、IFN-con2和IFN-con3,它们公开于美国专利第4,695,623号和第4,897,471号;和如天然存在的干扰素α的共有序列的规定所定义的复合干扰素(例如Three Rivers Pharmaceuticals,Warrendale,PA)。IFN-con1是在alfacon-1产品中的复合干扰素药剂。本文中通过其商品名或其通用名(干扰素alfacon-1)引用复合干扰素产品。编码IFN-con的DNA序列可以如上述专利中描述或其它标准方法来合成。在一个实施方案中,所述至少一种其它治疗剂是CIFN。
在本发明的组合疗法的各种实施方案中,使用包含IFN-α和异源多肽的融合多肽。合适的IFN-α融合多肽包括但不限于Albuferon-αTM(人白蛋白和IFN-α的融合产物;Human Genome Sciences;参见,例如Osborn等(2002)J.Pharmacol.Exp.Therap.303:540-548)。还适于在本公开中使用的是IFN-α的基因改组形式。参见,例如Masci等(2003)Curr.Oncol.Rep.5:108-113。其它合适的干扰素包括Multiferon(Viragen)、Medusa Interferon(Flamel Technology)、Locteron(Octopus)和ω干扰素(Intarcia/Boehringer Ingelheim)。
术语“IFN-α”还涵盖被衍生化(例如相对于天然存在的肽被化学修饰)以改变某些性质如血清半衰期的IFN-α的衍生物。因而,术语“IFN-α”包括糖基化IFN-α;用聚乙二醇衍生化的IFN-α(“PEG化的IFN-α”)等。聚乙二醇化IFN-α和用于制备聚乙二醇化IFN-α的方法在例如美国专利第5,382,657号;第5,981,709号和第5,951,974号中论述。聚乙二醇化IFN-α涵盖PEG和任何以述IFN-α分子的缀合物,包括但不限于与干扰素α-2a(Roferon,Hoffman La-Roche,Nutley,N.J.)、干扰素α2b(Intron,Schering-Plough,Madison,N.J.)、干扰素α-2c(BeroforAlpha,Boehringer Ingelheim,Ingelheim,Germany)和如天然存在的干扰素α(InterMune,Inc.,Brisbane,Calif.)的共有序列的规定所定义的复合干扰素缀合物的PEG。
因此,在本发明的组合疗法的一些实施方案中,所述IFN-α已经过一个或多个聚乙二醇部分修饰,即聚乙二醇化。聚乙二醇化IFN-α多肽的PEG分子与IFN-α多肽的一个或多个氨基酸侧链缀合。在一个实施方案中,所述聚乙二醇化IFN-α只在一个氨基酸上含有PEG部分。在另一个实施方案中,所述聚乙二醇化IFN-α在两个或两个以上氨基酸上含有PEG部分,例如所述IFN-α含有与两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个或十个不同氨基酸残基连接的PEG部分。IFN-α可以通过氨基、巯基、羟基或羧基直接与PEG偶合(即没有连接基团)。在本发明的各种实施方案中,组合施用干扰素、利巴韦林和本发明化合物来治疗HCV感染。
3.Thiazolides
许多thiazolide衍生物正在开发用于治疗黄病毒科病毒,包括但不限于HCV感染,根据本发明的方法,共同施用本发明化合物和thiazolide(包括但不限于硝唑尼特(Alinia,Romark Laboratories或硝唑尼特的其它缓释制剂或其它thiazolides))在HCV的治疗中是有效的。根据本发明的组合疗法,施用硝唑尼特可以是(为了说明并且不限于)500mg po BID。在一个实施方案中,在该组合疗法中还使用了干扰素α和/或核苷类似物如利巴韦林。在本发明的组合疗法中还可以使用其它剂量、其它thiazolides或硝唑尼特或另一种thiazolide的其它制剂(如缓释制剂)。
4.蛋白酶抑制剂
许多HCV蛋白酶抑制剂正在开发用于治疗HCV感染,根据本发明的方法,共同施用本发明化合物和HCV蛋白酶抑制剂对HCV和其它黄病毒科病毒感染的治疗是有效的。在一个实施方案中,在该组合疗法中还使用干扰素α和/或核苷类似物如利巴韦林。合适的HCV蛋白酶抑制剂包括但不限于特拉匹韦(telaprevir,VX-950,Vertex)、BILN 2061和BI 12202(Boehringer Ingelheim)、博赛泼维(boceprevir,SCH503034,Schering Plough)、ITMN191(Roche/InterMune/ArrayBioPharma)、MK-7009(Merck)、TMC435350(Tibotec/Medivir)、ACH-1095和ACH-806(Achillion/Gilead)和其它NS3/NS4A蛋白酶的抑制剂,包括但不限于Presidio正在开发的化合物。
因此,在一个实施方案中,HCV NS3抑制剂与本发明化合物组合施用来治疗HCV。合适的HCV非结构蛋白质-3(NS3)抑制剂包括但不限于如在美国专利第6,642,204号、第6,534,523号、第6,420,380号、第6,410,531号、第6,329,417号、第6,329,379号和第6,323,180号中公开的三肽(Boehringer-Ingelheim);如在美国专利第6,143,715号中公开的化合物(Boehringer-Ingelheim);如在美国专利第6,608,027号中公开的大环化合物(Boehringer-Ingelheim);如在美国专利第6,617,309号、第6,608,067号和第6,265,380号中公开的NS3抑制剂(VertexPharmaceuticals);如在美国专利第6,624,290号中公开的氮杂肽化合物(Schering);如在美国专利第5,990,276号中公开的化合物(Schering);如在Pause等(2003)J.Biol.Chem.278:20374-20380中公开的化合物;NS3抑制剂BILN 2061(Boehringer-Ingelheim;Lamarre等(2002)Hepatology 36:301A;和Lamarre等(Oct.26,2003)Naturedoi:10.1038/nature02099);NS3抑制剂VX-950(Vertex Pharmaceuticals;Kwong等(Oct.24-28,2003)54th Ann.Meeting AASLD);NS3抑制剂SCH6(Abib等(October 24-28,2003)Abstract 137。Program andAbstracts of the 54th Annual Meeting of the American Association forthe Study of Liver Diseases(AASLD)。October 24-28,2003.Boston,MA);在WO 99/07733、WO 99/07734、WO 00/09558、WO 00/09543、WO 00/59929或WO 02/060926中公开的任何NS3蛋白酶抑制剂(例如在WO 02/060926的第224-226页的表中公开的化合物2、3、5、6、8、10、11、18、19、29、30、31、32、33、37、38、55、59、71、91、103、104、105、112、113、114、115、116、120、122、123、124、125、126和127;和如在美国专利公开第2003019067号、第20030187018号和第20030186895号的任一个中公开的NS3蛋白酶抑制剂。
在一个实施方案中,在本发明的组合疗法中使用的NS3抑制剂是特异性NS3抑制剂种类的一种,例如抑制NS3丝氨酸蛋白酶活性并且不显示针对其它丝氨酸蛋白酶(如人白细胞弹性蛋白酶、猪胰腺弹性蛋白酶或牛胰腺糜蛋白酶或半胱氨酸蛋白酶,如人肝组织蛋白酶B)的显著抑制活性的NS3抑制剂。
5.聚合酶抑制剂
许多HCV核糖核酸聚合酶(NS5B)抑制剂正在开发用于治疗HCV感染,根据本公开的方法,共同施用本发明化合物和HCV核糖核酸聚合酶抑制剂对HCV的治疗是有效的。在一个实施方案中,在该组合疗法中还使用干扰素α和/或核苷类似物如利巴韦林和/或HCV蛋白酶抑制剂。合适的HCV核糖核酸聚合酶抑制剂包括但不限于伐洛比西他滨(valopicitabine,NM283,Idenix/Novartis)、HCV-796(Wyeth/ViroPharma)、R1626(Roche)、R7128(Roche/Pharmasset)、GS-9190(Gilead)、MK-0608(Merck)、PSI-6130(Pharmasset)和PFE-868,554(PFE)。
因此,在一个实施方案中,NS5B抑制剂与本发明化合物组合施用来治疗HCV感染。合适的HCV非结构蛋白质-5(NS5;RNA依赖性核糖核酸聚合酶)抑制剂包括但不限于如在美国专利第6,479,508号中公开的化合物;如在PCT专利申请第PCT/CA02/01127号、第PCT/CA02/01128号和第PCT/CA02/01129号的任一个中公开的化合物;如在美国专利第6,440,985号中公开的化合物;如在WO 01/47883中公开的化合物,例如JTK-003;如在Zhong等(2003)Antimicrob.AgentsChemother.47:2674-2681中公开的双核甙酸类似物;如在Dhanak等(2002)J.Biol Chem.277(41):38322-7中公开的苯丙噻二嗪化合物;如在WO 02/100846A1或WO 02/100851A2中公开的NS5B抑制剂;如在WO 01/85172A1或WO 02/098424A1中公开的NS5B抑制剂;如在WO 00/06529或WO 02/06246A1中公开的NS5B抑制剂;如在WO03/000254中公开的NS5B抑制剂;如在EP 1256,628A2中公开的NS5B抑制剂;JTK-002;和JTK-109。
在一个实施方案中,在本发明的组合疗法中使用的NS5抑制剂是特异性NS5抑制剂种类的一种,例如抑制NS5RNA依赖性核糖核酸聚合酶并且没有对于其它RNA依赖性RNA聚合酶和对于DNA依赖性RNA聚合酶的显著抑制作用的NS5抑制剂。
6.解螺旋酶抑制剂
许多靶向HCV NS3解螺旋酶的药剂正在开发中,抑制HSV解螺旋酶引物酶酶复合物的化合物(如ASP2151)是已知的并且可以与本发明化合物组合使用来治疗病毒感染。因此,对于黄病毒科(包括但不限于HCV、病毒感染)的治疗,在本发明的各种实施方案中,施用本发明化合物与解螺旋酶抑制剂的组合。
7.C类CpG Toll样受体7和/或9拮抗剂
许多toll样受体(TLR)激动剂正在开发用于治疗HCV感染,并且根据本公开的方法,共同施用本发明化合物和TLR激动剂可以有效地治疗HCV。在一个实施方案中,在该组合疗法中还使用干扰素α和/或核苷类似物(如利巴韦林)和/或HCV蛋白酶抑制剂和/或HCV核糖核酸聚合酶抑制剂。合适的TLR激动剂包括但不限于TLR7激动剂(即ANA245和ANA975(Anadys/Novartis))和TLR9激动剂(即Actilon(Coley)和IMO-2125(Idera))。
8.两亲螺旋干扰物和NS4B抑制剂
在本发明的各种实施方案中,本发明化合物与另一种两亲螺旋干扰物和/或在本文和PCT公布WO 2002/089731、PCT公布WO2005/032329、PCT公布WO 2009/039248(包括但不限于克立咪唑)、PCT公布第WO 2010/039195号、PCT公布第WO 2010/107739号和PCT公布第WO 2010/107742号中公开的NS4B抑制剂组合使用,各个公布以引用方式并入本文。
9.他汀类和其它HMG CoA还原酶抑制剂
HMG CoA还原酶抑制剂(包括但不限于他汀类)产生抗病毒作用(参见Delang等,2009,Hepatology 50(1):6-16;和Amet等,Microbesand Infection 10(5):471-480,这两者均以引用方式并入本文)。在本发明的组合疗法的一个实施方案中,HMG CoA还原酶抑制剂与本发明化合物组合使用来治疗HCV感染。在各种实施方案中,HMG CoA还原酶抑制剂是他汀,包括但不限于洛伐他汀(lovastatin)、辛伐他汀(simvastatin)、阿伐他汀(atorvastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)和普伐他汀(pravastatin)。参见,例如美国专利第7,223,787号,所述专利以引用方式并入本文。
10.免疫调节剂
基于类固醇的免疫调节疗法(包括但不限于用甲基强的松龙)可用于本发明的组合疗法,非类固醇免疫调节疗法也如此。
对本发明的组合疗法有用的非类固醇免疫调节疗法包括施用以下种类的药物:肌苷酸脱氢酶(IMPDH)的抑制剂和IMPDH抑制剂的前药(霉酚酸酯,mycophenolate mofetil);二氢乳清酸脱氢酶抑制剂(特立氟胺(teriflunomide);芬戈莫德(fingolimod);来氟米特(leflunomide))或二氢乳清酸脱氢酶抑制剂的前药;使受体靶向B淋巴细胞和/或T淋巴细胞的单克隆抗体(利妥昔单抗(rituximab));引起分裂和非分裂淋巴细胞的选择性细胞凋亡的化合物,包括嘌呤核苷类似物前药(乐司他丁(leustatin));可以调节引起从Th1向Th2反应转化的免疫反应的化合物(醋酸格拉默(glatiramer acetate));和叶酸代谢抑制剂(甲氨蝶呤(methotrexate))。
11.抗炎药
对本发明的组合疗法有用的抗炎疗法包括基于类固醇的疗法(甲基强的松龙);用肿瘤坏死因子(TNF)拮抗剂(依那西普(etanercept))的治疗;和用嘧啶合成抑制剂(来氟米特(leflunomide))的治疗。
12.异戊烯化抑制剂
异戊烯化抑制剂(异戊烯化的抑制剂)指抑制(例如减少或消除)蛋白质的异戊烯化,更具体地是病毒复制需要的蛋白质的异戊烯化的任何化合物、药剂或治疗。更具体地,此类抑制剂包括抑制异戊烯化酶,特别是异戊烯转移酶酶,更具体地是CAAX-异戊烯转移酶的任何化合物(例如拮抗剂)。此类酶的特定的和优选的实例包括香叶酰香叶酰转移酶(“GGTase”)和法呢酰转移酶(“FTase”)。在一个优选实施方案中,FTase抑制剂(“FTI”)或GGTase抑制剂(“GGTI”)分别对于FTase或GGTase具有低于1mM并且更优选的低于100nM的IC50。所述抑制剂可以抑制GGTase或FTase,或同时抑制两者(即双重抑制剂)。或者,可以使用包含GGTase抑制剂和FTase抑制剂的组合。最优选的GGTase或FTase抑制剂是选择性抑制剂,即它们实质上对GGT或FT有活性而对其它酶没有实质的特定活性(IC50>20μM)。用于本发明的最优选的异戊烯转移酶抑制剂是AZD3409和洛那法尼(lonafarnib)。
示例性GGTI包括FTI-277和GGTI-298。说明性的FTIs包括3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂和HMG-CoA抑制剂(包括上述他汀类)。对本发明的组合疗法有用的其它FTI包括描述于以下公布的:WO 98/54966;美国专利第6,096,757号;Shih等,Cancer ChemotherPharmacol(2000)46:387-393;WO 01/45740;WO 01/56552;WO01/62234;WO 01/64199;EP 534546;Reiss,1990,Cell 62:81-8;James,1993,Science 260:1937-1942;Lerner,1995,J.Biol.Chem.270:26802;WO 95/25086;EP 696593;PCT/GB96/01810;PCT/GB99/00369;WO95/10516;WO 97/23478和美国专利第5,874,442号;第6,232,338号;第7,101,897号和第7,342,016号。
更具体地,对本发明的组合疗法有用的FTI包括但不限于:A-87049、A-176120、A-197574、A-228839、A-228839.25、A-345665、A-345877、A-373857、A-409100;ABT-100、ABT-839;Arglabin;Arglabin-DMA HCl;Arteminolide C;Artemisolide;2-苯甲酰氧基肉桂醛(BCA);AZD-3409;BIM-46068;BMS-191563、BMS-193269、BMS-214662、BMS-225975、BMS-316810;BNG-1;CH-222422;CP-609754、CP-663427;二甲基氨基阿格拉滨HCl;DMNQ-533;ER-51784、ER-51785;FTI-276、FTI-277、FTI-2148、FTI-2153、FTI-2600;异鼠李素(Isorhamnetin);异鼠李素(Isorhamnetol);J-104126、J-104134、J-104871;L-778123、L-779575;LB-42908;3’-甲氧基槲皮素;Methylflucidone;NSC-702818(替吡法尼)、NSC-712392;OSI-754;PD-161956、PD-169451;R-115777;RPR-115135、RPR-130401、RPR-201764;SCH-400、SCH-207758、SCH-211618、SCH-226374、SCH-44342、SCH-54429、SCH-59228、SCH-66336(洛那法尼(lonafarnib);Sarasar)、SCH-69955、SCH-69956、SCH-704742;TAN-1813和XR-3054。
对本发明的方法有用的其它异戊烯转移酶抑制剂包括6-[氨基(4-氯苯基)-1-甲基-1H-咪唑-5-基甲基]-4-(3-氯苯基)-1-甲基-2(1H)-喹啉酮(也标识为R115777、替吡法尼或Zamestra.TM.,其FTase IC50是0.86nM);4-(3-氯苯基)-6-[(4-氯苯基)羟基(1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基]-1-甲基-2(1H)-喹啉酮;6-[(4-氯苯基)羟基(1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基]-4-(3-乙氧苯基-1-甲基-2(1H)-喹啉酮;6-[(4-氯苯基)(1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基]-4-(3-乙氧苯基)-1-甲基-2(1H)-喹啉酮单盐酸盐一水合物;6-[氨基(4-氯苯基)(1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基]-4-(3-乙氧苯基)-1-甲基-2(1H)-喹啉酮;6-[氨基(4-氯苯基)(1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基]-1-甲基-4-(3-丙基苯基)-2(1H)-喹啉酮;(B)-6-[氨基(4-氯苯基)(1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基]-4-(3-氯苯基)-1-甲基-2(1H)-喹啉酮(参见专利申请WO9716443和EP1162201)。
13.其它药剂
在本发明的方法的其它实施方案中,共同施用本发明化合物和来自以下种类化合物之一的化合物来治疗HCV感染:
(a)亲环素抑制剂(即NIM-811(Novartis)和DEBIO-025(Debiopharm));
(b)α-葡萄糖苷酶抑制剂(即西戈斯韦(Celgosivir,Migenix));
(c)靶向NS5A的药剂包括但不限于A-831(ArrowTherapeutics)、AZD2836(Astra Zeneca)和在XTL/Presidio或BMS的开发中的药剂(参见PCT公布WO 2006/133326和WO 2008/021928,以引用方式并入本文);
(d)靶向TBC1D20和/或与TBC1D20的NS5A的相互作用的药剂(参见PCT公布WO 2007/018692和美国专利申请第11/844,993号,以引用方式并入本文);
(e)靶向NS4B的GTPase活性的药剂(参见PCT公布WO2005/032329和美国专利申请公布2006/0199174,以引用方式并入本文);
(f)靶向在HCV蛋白质中的PIP2或BAAPP结构域的药剂,如在NS4B和NS5A中发现的那些(参见PCT公布第WO 2010/148541号);
(g)靶向HCV进入、组装或释放的药剂,包括对共受体的抗体;
(h)靶向HCV中的序列的siRNAs、shRNAs、反义RNAs或其它基于RNA的分子;
(i)靶向调节HCV复制的microRNA122或其它microRNAs的药剂;
(j)靶向PD-1、PD-L1或PD-L2相互作用或途径的药剂(参见美国专利申请公布20080118511、20070065427、20070122378,以引用方式并入本文);
(k)批准用于治疗HIV的任何药剂;
(l)对治疗HBV有用的任何药剂(参见Lok等,2007年4月,Gastroenterology 132:1586-1594);
(m)副作用控制剂,包括但不限于对疼痛控制有效的药剂;改善胃肠不适的药剂;镇痛药、抗炎药、抗精神病药、抗神经症药、抗焦虑药、造血功能治疗药和用于患有疼痛或在用受试者治疗的过程中的任何其它副作用的患者的姑息护理的任何药剂,包括但不限于姑息剂,如醋氨酚(acetaminophen)、布洛芬(ibuprofen)、其它NSAIDs、H2阻滞剂、质子泵抑制剂和抗酸剂。
本发明的方法和组合物现已详细地描述,提供以下实施例是为了说明可以用来制备本发明化合物和证明其抗病毒活性的方法。抗肝炎和其它病毒的活性可以通过基于细胞的试验在体外证明,该试验评价单独的本发明化合物和随后与其它抗病毒化合物组合的本发明化合物的细胞毒性和IC50。用于这些试验的细胞系由有助于相应病毒生长的细胞系并且可以是源自实验室和/或源自患者的细胞系组成。
提出本文的实施例是为了向本领域的普通技术人员提供如何进行方法和使用本文中公开和要求保护的化合物的说明性的公开和描述。已经努力确保数值(例如量、温度等)的准确性,但对一些误差和偏差应予以说明。除非另外指出,否则份数是重量份,温度是以℃计,压力是处于或接近大气压。标准温度和压力定义为20℃和1大气压。与本文中描述的那些类似或等同的任何方法和材料也可以用于实施或测试本发明。
本说明书中引用的所有出版物和专利均以引用方式并入本文,如同指出每个单独的出版物或专利明确且单独地以引用方式并入,并且通过引用并入本文来公开和描述与引用这些出版物相关的方法和/或材料。任何出版物的引用均是其在提交日期之前是公开内容,并且不应解释为承认本公开由于现有公开内容而无权早于此类出版物。此外,提供的公布日可以不同于可能需要独立地确认的实际公布日期。
本领域技术人员阅读本公开后将会显而易见的是,本文中描述和说明的每个单独的实施方案均具有分立的组分和特征,它们可以容易地与任何其它若干实施方案的特征分离或组合,而不脱离本公开的范围或精神。
任何列举的方法均可以按事件列举的顺序或任何其它逻辑上可能的顺序进行。除非另外指出,否则本公开的实施方案将使用合成有机化学技术、生物化学、生物学、分子生物学、重组DNA技术、药理学等,它们在本领域的技术范围之内。此类技术在文献中有充分地阐释。
本公开不限于描述的特定实施方案,并且本发明的实施方案因而可以(理所当然)变化。在详细地描述本公开的实施方案之前,应理解的是,除非另外指出,否则本公开不限于特定的材料、试剂、反应材料、制备过程等,因此可以变化。在本公开中还可能的是,可以以逻辑上可能的不同顺序进行步骤。
实施例
1.合成本发明的化合物
本发明的化合物(包括但不限于以上表中展示的化合物和本文中的式所定义的化合物)可以使用通过以下方法说明的方法来制备。
A.本发明化合物,化合物1.6和1.8(特别是由式IA、IB、IC、II和IIA-C描述的化合物)如以下示意性地展示和描述来合成。
a.在0℃下,向1.1(0.5g,2.1mmol)于THF(50mL)中的溶液添加60%NaH(0.092g,2.3mmol)。在0℃下搅拌30min之后,逐滴添加MeI(0.143mL,2.3mmol)。搅拌1h之后,将溶液用EtOAc(50mL)稀释并且用饱和NaHCO3水溶液(3×20mL)洗涤。真空除去有机溶剂以提供粗制的1.2,其不经进一步纯化即使用。
b.向1.2(2.1mmol)于iPrOH(50mL)中的溶液添加氮杂环庚烷(4.1mmol)。将溶液加热至80℃并保持12h之后,真空除去溶剂以提供粗制的1.3。经由硅胶色谱法(在己烷中的10-20%EtOAc)纯化,得到具有对应于产物的分子量的两种化合物,较高Rf斑点是所需产物1.3。
c.用TFA/CH2Cl2(1:1)处理1.3(2.1mmol)2h之后,真空除去溶剂,提供1.4,其不经进一步纯化即使用。
d.向1.4(0.1g,0.5mmol)于DMF(5mL)中的溶液添加4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.112g,0.6mmol)、HATU(0.228g,0.6mmol)和DIEA(0.244mL,1.5mmol)。搅拌30min之后,真空除去溶剂以提供粗制的1.5。
e.将1.5(0.5mmol)于TFA/CH2Cl2(1:1)中的溶液搅拌30min。真空除去溶剂,随后通过反相制备型HPLC纯化提供标题化合物1.6。
f.向1.6(0.5mmol)于DMF(5mL)中的溶液添加2-溴乙醇(1.0mmol)、Cs2CO3和NaI。在70℃下搅拌4h之后,将反应溶液用EtOAc稀释并且用水及盐水洗涤。有机层经Mg2SO4干燥并且真空除去溶剂以提供粗制的1.7。
g.向1.7(0.2mmol)于CH2Cl2(5mL)中的溶液添加MsCl(4mmol)和TEA(1.5mmol)。在室温下搅拌30min之后,真空除去溶剂。随后将粗制的甲磺酸酯溶于DMF(2mL),添加吡咯烷(4mmol)、Cs2CO3(1.0mmol)和NaI(0.5mmol),并且在80℃下搅拌16h以提供1.8,将其通过反相制备型HPLC纯化。
1H NMR(CDCl3和CD3OD,δppm):8.18(d,1Hc),6.58(d,1Hd),4.02(s,3Hj),3.91-3.48(m,4Hb,4Hg,4Hl),3.11-2.95(m,2Hh,2Hi),2.80-1.95(m,8Ha,1Hk),1.82-1.72(m,4Hf),1.49-1.47(m,4Hm)。上标(这里是指a-m,并且对于以下其它化合物)将共振与化合物中的氢原子相关联。基于此处提供的NMR波谱和/或已知的NMR共振,有经验的人员通过它们的NMR波谱将容易地能够鉴定式I、IA、IB的化合物和此处提供的其它化合物。
B.本发明化合物,化合物1.9(例如通过式IA、IB、IC、II、IIA和IIB描述的化合物)如以下示意性地展示和描述来合成。
a.向1.6(0.1mmol)于DMF(2mL)中的溶液添加1-(2-氯乙基)哌啶(0.2mmol)、Cs2CO3和NaI。在70℃下搅拌4h之后,将反应溶液通过反相制备型HPLC纯化以提供1.9。
1H NMR(CDCl3和CD3OD,δppm):8.25(d,1Hc),6.62(d,1Hd),4.20(s,3Hj),3.85(m,4Hg),3.70-3.47(m,4Hb,1He,2Hl),3.42(m,1Hk),3.18(m,2Hi),2.92(m,2Hh),2.19(m,4Hf),2.00-1.82(m,8Ha,1H),1.58(m,6Hm)。
C.本发明化合物,化合物1.10(例如通过式IA、IB、IC、II、IIA和IIB描述的化合物)如以下示意性地展示和描述来合成。
a.向1.6(0.1mmol)于DMF(2mL)中的溶液添加2-溴乙烷(0.2mmol)、Cs2CO3和NaI。在70℃下搅拌4h之后,将反应溶液通过反相制备型HPLC纯化以提供1.10。
1H NMR(CDCl3,δppm):8.18(d,1Hc),7.08(d,1Hk),6.58(d,1Hd),4.22(m,1He),3.92(s,3Hj),3.65(m,4Hg),3.30-3.15(m,2Hb),3.15(q,2Hh),3.75(m,2Hb’),2.25-2.15(m,4Hf),1.80(m,4Ha),1.55(m,4Ha),1.38(t,3Hi)。
D.本发明化合物,化合物1.11(例如通过式IA、IB、IC、II、IIA和IIB描述的化合物)如以下示意性地展示和描述来合成。
a.向1.6(0.1mmol)于DMF(2mL)的溶液中添加2-溴丙烷(0.2mmol)、Cs2CO3和NaI。在70℃下搅拌4h之后,将反应溶液通过反相制备型HPLC纯化以提供1.11。
1H NMR(CDCl3,δppm):1H NMR(CDCl3,δppm):8.15(d,1Hc),6.54(d,1Hd),4.25(m,1He),3.93(s,3Hj),3.70(t,4Hg),3.62-3.45(m,2Hb,1Hh),2.88(dd,2Hb’),2.22-2.12(m,4Hf),1.82(m,4Ha),1.51(m,4Ha),1.32(d,6Hi)。
E.本发明的化合物,化合物1.12(例如通过式IA、IB、IC、II、IIA和IIB描述的化合物)如以下示意性地展示和描述来合成。
a.向1.6(0.1mmol)于DMF(2mL)中的溶液添加碘甲烷(0.2mmol)、Cs2CO3和NaI。在70℃下搅拌4h之后,将反应溶液通过反相制备型HPLC纯化以提供1.12。
F.其它的本发明化合物,化合物2.2和2.3(例如通过式IID描述)如以下示意性地展示和描述来合成。
a.向1.2(0.5mmol)的iPrOH溶液添加环己醇(5mmol)和60%NaH(5.5mmol)。将溶液在50-60℃下加热12h之后,真空除去溶剂以提供粗制的2.1。
b.按照如1c-g的类似转化提供2.3。
G.另一种本发明化合物,化合物3.3(通过式III描述的化合物)如以下示意性地展示和描述来合成。
a.向1.4(0.080g,0.3mmol)于DMF(1mL)溶液添加DPPA(0.136g,0.51mmol)和TEA(0.050mL,0.51mmol)。搅拌1h之后,添加水(0.1mL)并且将溶液加热至90℃并保持1h。将溶液用EtOAc(10mL)稀释并且用水(3×5mL)洗涤。真空除去有机溶剂以提供粗制的3.1,其不经进一步纯化即使用。
b.按照如1d-g的类似的转化提供3.3。
H.另一种本发明化合物,化合物4.4(通过式IV描述的化合物)如以下示意性地展示和描述来合成。
a.在0℃下向1.1(1.0g,4.2mmol)于DMF(10mL)中的溶液添加60%NaH(0.169g,4.6mmol)。在0℃下搅拌30min之后,分批添加1-(溴乙基)-4-氯苯(0.949mL,4.6mmol)。搅拌3h之后,将溶液用EtOAc(50mL)稀释并且用饱和NaHCO3水溶液(3×20mL)洗涤。真空除去有机溶剂以提供粗制的4.1,其不经进一步纯化即使用。
b.向4.1(4.2mmol)于iPrOH(50mL)中的溶液添加氮杂环庚烷(4.5mmol)。将溶液加热至80℃并保持12h之后,真空除去溶剂以提供粗制的4.2。经由硅胶色谱法(在己烷中的10-20%EtOAc)纯化得到具有对应于产物的分子量的两种化合物,较高Rf点是所需产物4.2。
c.向4.2(1.5g,3.4mmol)于THF(12mL)中的溶液添加2M LiAlH4(5mmol)。在50℃下加热2h之后,向溶液逐滴添加10%NaHSO4直到没有气泡出现。将混合物经硅藻土过滤,随后用THF冲洗。真空除去溶剂提供粗制的4.3,其不经进一步纯化即使用。
d.向4.3(0.1mmol)于DMF(5mL)中的溶液添加60%NaH(0.11mmol)。搅拌30min之后,向溶液添加1-(3-氯丙基)哌啶盐酸盐(0.2mmol)并且加热至80℃并保持12h。通过反相HPLC纯化提供标题化合物4.4。
I.另一种本发明化合物,化合物5.2(通过式IV描述的化合物)如以下示意性地展示和描述来合成。
a.向4.3(0.4mmol)于CH2Cl2(3mL)中的溶液添加MsCl(0.039mL,0.5mmol)和DIEA(0.097mL,0.6mmol)。搅拌15min之后,真空除去溶剂以提供粗制的5.1,其不经进一步纯化即使用。
b.向5.1(0.13mmol)于DMF(1mL)中的溶液添加4-(氨基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.15mmol)和DIEA(0.2mmol)。在60℃下加热12h之后,真空除去溶剂。添加TFA/CH2Cl2(1:1)并且搅拌30min。真空除去溶剂并且通过反相HPLC纯化粗制残留物以提供标题化合物5.2。
J.另一种本发明化合物,化合物23.5(通过式IX描述的化合物)如以下示意性地展示和描述来合成。
a.向12.4于DCM中的溶液逐滴滴加草酰氯加1滴DMF。搅拌1h之后,真空除去溶剂。在0℃下向残留物的DCM溶液添加新鲜制备的在乙醚中的CH2N2。搅拌1h之后,真空除去溶剂。将残留物再溶解于HOAc。添加HBr(48%水溶液)并且搅拌30min。真空除去溶剂并且将粗制残留物溶于乙酸乙酯并且用NaHCO3水溶液洗涤。将粗制残留物经由柱色谱法(在己烷中的20%乙酸乙酯)纯化以提供23.2。
b.在室温下向23.2于ACN中的溶液添加DIPEA和Boc-哌啶羧酸。搅拌15h之后,真空除去溶剂,将粗制残留物溶于乙酸乙酯并且用NaHCO3水溶液洗涤。浓缩有机层以得到23.3(80-90%)。
c.在密封管中向23.3于邻-二甲苯中的溶液添加NH4OAc和Et3N。将密封管加热至140℃并保持1.5h。真空除去溶剂并且将粗制残留物溶于乙酸乙酯并且用NaHCO3水溶液洗涤。将有机层浓缩,并且将粗制残留物经由柱色谱法(在DCM中的10%MeOH)纯化以得到产物23.4(60%)。
d.向23.4于DCM中的溶液添加TFA随后添加NaH和MeI以得到23.5。
K.另一种本发明化合物,化合物24.1(通过式IX描述的化合物)如以下示意性地展示和描述来合成。
a.在密封管中向23.3于HOAc中的溶液添加NH4OAc(15当量)并且加热至100℃。真空除去溶剂并且将粗制残留物溶于乙酸乙酯并且用NaHCO3水溶液洗涤。用TFA处理提供24.1。
L.另一种本发明化合物,化合物25.4(通过式IX描述的化合物)如以下示意性地展示和描述来合成。
a.向23.2于EtOH中的溶液添加硫代草酰胺乙酯(1.5eq)。加热至60℃并保持4h之后,真空除去溶剂,并且将粗制残留物溶于DCM并且用NaHCO3水溶液洗涤。将有机层浓缩,并且将粗制残留物经由柱色谱法(在己烷中的30%乙酸乙酯)纯化以得到25.1。用在THF/MeOH/H2O中的1M LiOH处理提供25.1。
b.在0℃下,向25.1于DCM中的溶液添加NMM和氯甲酸异丁酯(2eq)。在室温下搅拌1h之后,添加胺并且将溶液在室温(rt)下搅拌1h。将粗制残留物溶于DCM并且用NaHCO3水溶液洗涤。将有机层浓缩,将粗制残留物经由柱色谱法(在DCM中的10%MeOH)纯化以得到25.2。
c.用TFA处理25.2提供25.3。
M.另一种本发明化合物,化合物26.3(式IX化合物)如以下示意性地展示和描述来合成。
a.向12.4(1当量)于DMF中的溶液添加氨基脲、HATU(1.2当量)和DIPEA(1.5当量)以得到26.1。
b.将26.1于POCl3中的溶液加热至100℃并保持6h。冷却至室温之后,添加DCM并且将溶液用NaHCO3洗涤。除去溶剂提供粗产物,将其经由柱色谱法(在DCM中的10%MeOH)纯化以提供26.2。
c.用H2和碳载钯处理提供26.3。
d.为了制备氨基脲26.4:向羧酸于DMF中的溶液添加HATU(1.2当量)和DIPEA(1.5当量)。在室温下搅拌15h之后,将溶液用DCM稀释并且用NaHCO3洗涤。除去溶剂随后经由柱色谱法(在DCM中的10%MeOH)纯化提供26.6。用TFA处理提供26.4。
N.另一种本发明化合物,化合物27.2(通过式IX描述的化合物)如以下示意性地展示和描述来合成。
a.在密封管中将27.1与在MeOH中的7N NH3加热至150℃并保持48h,随后是MeI和NaH以提供27.2。
O.另一种本发明化合物,化合物28.2(通过式IX描述的化合物)如以下示意性地展示和描述来合成。
a.在室温下,向12.4于ACN中的溶液添加DIPEA和28.3。搅拌15h之后,真空除去溶剂,将粗制残留物溶于乙酸乙酯并且用NaHCO3水溶液洗涤。将有机层浓缩以得到28.1。
b.在密封管中向28.1于邻-二甲苯中的溶液添加NH4OAc和Et3N。将密封管加热至140℃并保持1.5h。真空除去溶剂并且将粗制残留物溶于乙酸乙酯并且用NaHCO3水溶液洗涤。将有机层浓缩,并且将粗制残留物经由柱色谱法(在DCM中的10%MeOH)纯化,用MeI/NaH处理随后用TFA处理以得到28.2。
c.28.3可从相应的羧酸和重氮甲烷随后的HBr来制备。
P.另一种本发明化合物,化合物29.5(例如通过式IC或IV描述的化合物)如以下示意性地展示和描述来合成。
a.向1.2(10mmol)于iPrOH中的溶液添加氮杂环辛烷(30mmol)并且加热至80℃并保持48h。搅拌之后,真空除去溶剂以提供粗制的29.1,将其经由硅胶色谱法(在己烷中的20%乙酸乙酯)纯化以提供纯的29.1。
b.向29.1(10mmol)于THF中的溶液逐滴滴加在THF(30mmol)中的1M LiAlH4。搅拌16h之后,逐滴添加在水中的饱和Na2SO3直到不再观察到气体逸出。
c.向29.2(10mmol)于CH2Cl2中的溶液添加戴斯-马丁试剂(Dess-Martin reagent)并且搅拌1h。
d.在0℃下向2-(二乙氧基磷酰基)醋酸乙酯于THF中的溶液添加NaH(11mmol)。搅拌1h之后,添加29.3(10mmol)的THF溶液,并且将反应混合物在室温下搅拌2h。
e.向29.4(5mmol)于EtOH中的溶液添加C载Pd并且经由气球置于H2气氛下并保持16h。
f.向29.4(5mmol)于THF中的溶液添加在THF中的1MLiAlH4(10mmol)。随后将醇(4mmol)用TsCl(4.4mmol)和DIEA(8mmol)处理以提供甲苯磺酸酯。将反应溶液用CH2Cl2稀释并且用水洗涤。将有机层干燥并且真空除去溶剂以提供粗制的甲苯磺酸酯。将粗制的甲苯磺酸酯溶于DMF并且与吡咯烷、Cs2CO3和NaI加热至80℃过夜以提供29.5,将其经由反相制备色谱法纯化。
2.测试本发明化合物的抗HCV基因型1b活性
适合的1b HCV RNA复制子试验使用Huh7细胞系,其包含具有稳定荧光素酶(LUC)报告基因。该结构含有使细胞系更强健的修饰并且提供用于抗病毒筛选的稳定的LUC表达。LUC报告基因用作HCV复制的间接测量。LUC报告基因的活性与HCV RNA水平成正比并且阳性对照抗病毒化合物使用LUC端点表现相当。
适用于证明对本发明的方法有用的化合物的抗病毒活性的HCV试验包括在该实施例中描述的用于HCV复制子报告基因细胞系的荧光素酶试验和用于HCV复制子报告基因细胞系的MTT试验。描述于该实施例的这些试验的实施方案由Shanghai ChemPartner Co.,Ltd.开发,该公司为一家中国公司,总部位于中国上海蔡伦路720号,3号楼,邮编201203。
A.用于HCV复制子报告基因细胞系的荧光素酶试验
临用前制备新鲜的生长培养基。在所述工序中使用的容器是10cm直径培养皿。使用HCV复制子报告基因细胞系。制备完全培养基:如在以下“培养基”中所述添加FBS和适当的添加剂。在37℃恒温水浴中预热所述培养基。从37℃CO2恒温箱移去所述培养皿。核对标在所述培养皿上的细胞名称和完全培养基和传代数。小心地吸出培养基并且添加1mL PBS以冲洗细胞。除去并丢弃溶液并且添加1mL 0.25%胰蛋白酶/0.02% EDTA。用添加的胰蛋白酶/EDTA冲洗细胞,确保所有细胞已经被冲洗。用真空泵除去胰蛋白酶/EDTA并且在37℃下孵育3-5分钟。在倒置显微镜下检查细胞形态以确认单细胞悬浮液清楚可见。向培养皿中添加3mL完全培养基并且通过轻微的吸取使细胞悬浮。用血球计计算细胞数目。通过添加适当体积的完全培养基将细胞密度调节至100k/mL。向96孔白板的各孔中添加100μl细胞悬浮液;因此细胞密度是每孔10k。将板标记上细胞名称、传代数、接种密度、日期和操作者姓名。将96孔试验板置于37℃5% CO2恒温箱中并保持24小时。
以在100% DMSO中的25mM制备或提供化合物。这是化合物储备溶液。稀释过程应该在细胞培养罩中进行。将储备溶液分配到96孔板的第二列中。通过将10μl化合物转移到下一个含有40μl DMSO的孔中制备9步(总共10个浓度)、5-倍连续稀释液。重复所有的化合物。从各孔中吸出2μl上述化合物溶液并且使用12通道吸移器添加到198μl完全培养基中,以得到具有1% DMSO的10倍浓度化合物溶液,充分混合。
从37℃/5% CO2恒温箱移去96孔试验板,在倒置显微镜下检查细胞形态。在细胞培养罩中,向在所述96孔试验板上的各孔中添加10μl10x浓度化合物溶液。所有化合物的剂量反应均一式两份地进行。化合物的起始最终浓度是25μM,DMSO最终浓度是0.1%。在板上标记化合物编码和浓度。将96孔试验板置于CO2恒温箱中48小时。向各孔中添加30μl Stead-Glo荧光素酶系统(Promega)试剂并且通过在板振荡器上轻微的摇动5分钟进行混合,以允许充分的细胞溶解。用2秒的积分时间使用Envision(Perkin Elmer)测量荧光。记录并分析数据。
细胞培养基是DMEM完全培养基:补充有10% FCS、2mMGlutamin(Life Technologies#25030-024)、青霉素(100IU mL)/链霉素(100μg/ml)(Life Technologies#15140-114)和1x非必需氨基酸(Life Technologies#11140-035)的DMEM(Life Technologies#41965-039)。G418(“Geneticin”,Life Technologies):浓度以单位体积的原始物质的重量给出。根据制备商的说明,典型批次的比活性是大约700μg/mg。该值不一定反映使用者系统中的生物活性。因此,每个新批次的G418均应该单独地检测,例如使用不同的选择条件(0.2-1mg/mL)在电穿孔试验中检测。
B.用于HCV复制子报告基因细胞系的MTT试验
MTT试验(和MTS试验)是实验室检测和标准的比色试验(测定颜色改变的试验),其用于测定酶将MTT或MTS+PMS还原成甲臜(formazan)从而产生紫色的活性。它还可以用于测定潜在的药剂和其它毒性材料的细胞毒性,因为那些药剂会产生细胞毒性并且因此产生代谢功能紊乱并且因此产生在试验中的降低的性能。黄色MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物,一种四唑)在活细胞中被还原成紫色甲臜。添加增溶溶液(通常是二甲亚砜、酸化的乙醇溶液或去污剂十二烷基硫酸钠的稀盐酸溶液)以将不可溶的紫色甲臜产物溶解到有色溶液中。该有色溶液的吸光度可以通过用分光光度计在某一波长(通常介于500和600nm之间)测定来定量。最大吸收取决于使用的溶剂。
培养基、培养板和添加剂如该实施例的部分A所述来制备。在37℃的恒温水浴中预热培养基。从37℃CO2恒温箱中移去培养皿。核对标在所述培养皿上的细胞名称和完全培养基和传代数。小心地吸出培养基并且添加1mL PBS以冲洗细胞。除去并丢弃溶液并且添加1mL 0.25%胰蛋白酶/0.02% EDTA。用添加的胰蛋白酶/EDTA冲洗细胞,确保所有细胞已经被冲洗。用真空泵除去胰蛋白酶/EDTA并且在37℃下孵育3-5分钟。在倒置显微镜下检查细胞形态直到单细胞悬浮液清楚可见。向培养皿中添加3mL完全培养基并且通过轻微的吸取使细胞悬浮。用血球计计算细胞数目。通过添加适当体积的完全培养基将细胞密度调节至100k/mL。向96孔白板的每个孔中添加100μl细胞悬浮液;因此使细胞密度是10k每孔。将板标记上细胞名称、传代数、接种密度、日期和操作者姓名。将所述96孔试验板放在37℃5% CO2恒温箱中并保持24小时。
以在100% DMSO中的25mM制备或提供化合物。这是化合物储备溶液。稀释过程应该在细胞培养罩中进行。将储备溶液分配到96孔板的第二列中。通过将10μl化合物转移到含有90μl DMSO的下一个孔中制备9步(总共10个浓度)、5-倍连续稀释液。重复所有的化合物。从各孔中吸出2μl上述化合物溶液并且使用12通道吸移器添加到198μl完全培养基中以得到具有1% DMSO的10倍浓度化合物溶液,充分混合。从37℃/5% CO2恒温箱移去96孔试验板,在倒置显微镜下检查细胞形态。在细胞培养罩中,将10μl的10x浓度化合物溶液添加到在96孔试验板上的每个孔中。所有化合物的剂量反应均一式两份地进行。化合物的起始最终浓度是25μM,DMSO最终浓度是0.1%。
在板上标记化合物编码和浓度。将96孔试验板置于CO2恒温箱中48小时。向每个孔中添加10μl的5mg/mL MTT并且在37℃CO2恒温箱中孵育4小时。直接向每个孔中添加100μl测试溶液(10% SDS+5%异丁醇+10mmol/L HCl)并且在37℃/5% CO2恒温箱中过夜。在SpectraMax Plus 384(MDC)上测定在580/680nm的吸光度。记录并分析结果。
3.HCV基因型2a感染克隆试验
在一个实施方案中,所述复制试验方案可以包括以下阶段。应注意,以下复制试验方案是非限制性的,并且作为复制试验方案的说明性实施方案呈现。在上述部分A和B中的试验用于产生基因型1b抑制活性和相关的细胞毒性(生活力)数据。以下试验可以用于产生基因型2a抑制活性数据。
阶段1:RNA转录
1)在37℃下用XbaI使FL-J6/JFH-5’C19Rluc2AUbi质粒线性化2小时,并且在1%琼脂糖凝胶上操作以检验分解的完全性。2)通过用绿豆核酸酶在30℃下处理30min来分解5’突出端。3)对于Bart79I-luc质粒(类似描述于Elazar等,J.Virol.2003,77(10):6055-61的Bart79I质粒,不同的是新霉素磷酸转移酶基因已经替换为基因编码荧光虫荧光素酶)的线性化,使用ScaI限制性内切酶,随后在凝胶上检查线性化的模板DNA以确认裂解是完全的,此后用蛋白酶k分解。4)通过用蛋白酶K分解30min纯化模板,苯酚-氯仿萃取,乙醇淀析,并随后以1μg/μl重悬。5)对于转录反应,通过采用用于FL-J6/JFH-5’C19Rluc2AUbi(Ambion,Austin,TX)的T7 Megascript试剂盒或用于Bart79I-luc(Promega,Madison,WI)的RiboMaxTM试剂盒来使用1μg纯化的模板。在37℃下孵育反应4h。6)添加DNAse 15min。7)用等体积苯酚/氯仿萃取并随后用等体积氯仿萃取。回收水相并且转移到新的管中。8)通过添加1体积异丙醇并且充分混合使RNA析出。9)在-20℃冷冻混合物至少15min。在4℃下以最高速度离心15min使RNA颗粒化。10)小心地除去上清溶液并且以1μg/μl使RNA重悬在无RNase/DNase的水中。11)在凝胶上操作并且检验RNA浓度。12)制成等分试样并且储存于-80℃下。
阶段2:电穿孔Huh7.5细胞
1)用PBS洗涤细胞一次,胰蛋白酶化。2)在50ml管中将细胞重悬在每10cm板的完全培养基(牵拉在一起)5mL的总体积中。3)在4℃下使细胞以1000xRPM颗粒化5min。吸出上清液并且重悬在10mL冰冷的不含RNAse的过滤的1X PBS(BioWhitaker)中–用吸移管轻轻地上下吸移大约5次以除去细胞团。4)如前所述以1000xRPM再次使所细胞颗粒化并且再次重悬在10ml冰冷的PBS(BioWhitaker)中。5)除去10μl等分试样以测定细胞浓度。6)再次使细胞颗粒化并且以1.5×107细胞/mL的最终浓度重悬在冰冷的不含RNAse的PBS中。需要:每各个电穿孔(ep)在0.4mL 中的6×106细胞和5μgFL-J6/JFH-5’C19Rluc2AUbi RNA或Bart79I-luc RNA。7)将5μg RNA等分试样置于微量离心管中(每个ep1个管)。8)除去0.4ml细胞悬浮液并且加到RNA中。通过吸移混合两次。9)立即将0.4ml转移到2mm间隙的电穿孔比色皿中。10)对细胞进行脉冲:820v,5脉冲,99μsec,220ms间隔,单极。11)使细胞静置15min。12)使用在比色皿包中的Pasteur吸移管将细胞转移到培养基中。由所有管制备常用的储液。13)在96孔板中接种10,000个细胞/孔。14)稍微转动板以均匀接种细胞。15)在处理之前孵育24hr。
阶段3:处理板
1)电穿孔约24hr之后制备具有所需浓度的药物的培养基。2)吸出培养基并且添加100μl新鲜的培养基和药物。留下开始时的未处理的孔并且也留下结束时的未处理的孔。3)每天重复并且再持续2天。
阶段4:收获(自电穿孔第5天)
1)阿尔玛蓝(Alamar blue)试验–a)包括用于扣除本底的培养基(也用于容易地查看颜色变化)。b)吸出培养基。c)制备培养基加10%阿尔玛蓝的储液。每孔的总体积是100μl。d)在37℃下孵育2-2.5小时(或直到有颜色变化)。c)在flex station上读板。
2)海肾荧光素酶试验–a)吸出具有阿尔玛蓝的培养基。b)用1x PBS洗涤。c)彻底地吸出(吸出,随后倾斜并且再吸出缓冲液残余物)。d)确定需要何种裂解缓冲液:萤火虫或海肾。e)添加30μl的1x裂解缓冲液(向4体积无菌水中添加1体积的5x裂解缓冲液)。f)将板摇动15min。g)在-80℃下冷冻。此时,可以停止或继续到下一个阶段。
阶段5:用光度计读取。a)使板解冻。b)将板放在冰上直到读取。c)制备所需要的底物试剂;对于海肾:使海肾缓冲液解冻,制备1体积100X海肾luc底物加100体积luc试验缓冲液+2mL用于涂光度计(例如,对于4mL海肾luc底物,添加40ul试验缓冲液)。对于萤火虫;使10mL萤火虫缓冲液解冻并且加到荧光素酶试剂中。d)根据制造商的说明使用标准光度计读板。
4.HERG通道试验
已经证明药物与QT延长相关并且在一些情况下与严重的室性心律失常相关。这些不良事件的最常见的机理是抑制一个或多个心脏钾通道,具体来讲是hERG。该通道流(current)对于心脏肌细胞复极化是重要的并且是药物延长QT间隔的常见的靶标。因此在该研究中的检测物品被表征为测定它们抑制hERG通道的能力。离子通道活性使用表达hERG mRNA的稳定地转染中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系来测定。在CHO细胞系中表达的该克隆的通道的药理学非常类似于在天然组织中观察到的。
细胞:使用AVIVA’s CHO细胞系(其稳定地表达hERG通道)用于研究。细胞在含有10%FBS、1%青霉素/链霉素和500μg/ml G418的DMEM/F12中培养。检测之前,使用Accumax(Innovative CellTechnologies)收获细胞)。
溶液:对于电生理学的记录,使用以下溶液。外部溶液:2mMCaCl2;2mM MgCl2;4mM KCl;150mM NaCl;10mM Glucose;10mM HEPES;310-320mOsm;pH 7.4(用1M NaOH调节)。内部溶液:140mM KCl;10mM MgCl2;6mM EGTA;5mM HEPESNa;mMATP-Mg;300-320mOsm;pH 7.25(用1M KOH调节)。
电生理学:完整的细胞记录是使用PX 7000A(Axon Instruments)用VIVA's SealChipTM技术进行的。以-80mV的持续电势将细胞电压固定。随后通过去极化步骤使hERG电流激活至-50mV进行300ms。在-50mV的该第一步骤用作用于测量尾电流峰值振幅的基线。紧接着,施加5s的达+20mV的电压步骤以激活通道。最后,回到-50mV的步骤进行5秒除去激活作用并且记录去激活尾电流。
化合物处理和稀释:所有化合物均自10或30mM DMSO储备溶液制备。通过超声处理20min,随后剧烈地涡旋将溶液混合。在测试之前,使用外部溶液将化合物在玻璃小瓶中稀释至检测浓度。在使用之前20min之内制备稀释液。在所有最终稀释液中均存在等量的DMSO(0.1%)。
电生理学工序:获得完整的细胞形态之后,监测细胞90s以评价稳定性并随后用外部溶液洗涤66s。随后全过程每12s对细胞施加上述电压方案。只有具有高于阈值(参见质量控制部分)的记录参数的稳定细胞被允许进入药物添加工序。对细胞施加含有0.1% DMSO(媒介物)的外部溶液以建立基线。使电流稳定3至5min之后,施加检测物品。以4次单独的添加将测试物品溶液加入细胞中。将细胞保存在测试溶液中直到测试物品的作用达到稳定状态,最多12min。然后,添加1μM西沙必利(cisapride,阳性对照)。最后,用外部溶液冲洗直到恢复电流达到稳定状态。
数据分析:数据分析使用DataXpress(Axon Instruments)、Clampfit(Axon Instruments)和Origin(Originlab Corporation)软件进行。
质量控制:在来源于试验的报告中包括的数据满足所有以下标准:a)记录参数:膜电阻(Rm):>200MΩ;接触电阻(Ra):<15MΩ;尾电流振幅:>150pA;b)药理学参数:1μM西沙必利:>95%抑制。
5.协同作用研究
组合研究在1b复制子试验中进行,在若干浓度下组合至少两种化合物(低于、等于和高于其在1b复制子试验中的EC50值)。随后使用MacSynergyTM分析荧光素酶值来确定药物组合的作用是否是强烈地协同(协同量>100)、中等地协同(50<协同量<100)、适度地协同(25<协同量<50)、相加(-25<协同量<25)、适度地拮抗(-50<协同量<-25)、中等地拮抗(-100<协同量<-50)或强烈地拮抗(协同量<-100)。为了说明,参见在以下表中的EBP1047和克立咪唑(EBP1)(条目15)的组合,其显示出495μM2的协同量,这表明基因型1b中的强协同作用。
在克立咪唑(EBP1)和其它氮杂-吲唑类似物之间的其它协同组合如在以下条目中举例说明:5(EBP1和EBP697)、8(EPB1和EBP726)、10(EBP1和EBP756)和12(EBP1和EBP841)、13P909)、14(EBP1和EBP987)、18(EBP1和EBP 1147)、19(EBP1和EBP1171)、20(EBP1和EBP1452)、21(EBP1和EBP1456)、22(EBP1和EBP1479)和23(EBP1和EBP1489)。EBP697、EBP726、EBP756、EBP841、EBP909、EBP987、EBP1147、EBP1171、EBP1452、EBP1456、EBP1479和EBP1489在48小时1b复制子试验中具有小于3μM的EC50值。
在以下表或结果中,EBP520是博赛泼维(boceprevir),EBP521是ITMN-191(也称为RG7227)。
表2
6.Caco-2渗透率试验
肠上皮渗透率是决定人吸收的速率和程度以及影响候选药物的生物利用率的重要特性。不良肠渗透率导致有限的吸收。一般来讲,优选较高的吸收作用。Caco-2细胞系是类似人小肠的上皮内层的人结肠腺癌细胞系。在人肠上皮中表达的若干转运蛋白也在Caco-2细胞模型中表达。某些转运蛋白是调节化合物从细胞内分泌回到顶端腔(肠腔的代表)的流出系统,限制总的吸收作用。在渗透率试验中,表观渗透率系数在细胞单层的顶端至基底侧(Papp(A-B))和基底至顶端侧(Papp(B-A))之间测量。Papp(A-B)<2×10-6cm/s预示向基底侧的低渗透率,2×10-6cm/s<Papp(A-B)<20×10-6cm/s预示中等渗透率,Papp(A-B)>20×10-6cm/s预示高渗透率。在B-A渗透率试验中,测量Papp(B-A)并且评估化合物的流出电势。同时,这些试验结果作为Papp(B-A)与Papp(A-B)的比例报告。Papp(B-A)/Papp(A-B)>3可能是被流出系统之一转运,并且具有不良的吸收。Papp(B-A)/Papp(A-B)<3可能显示合理的肠吸收。在该实施例中描述了适用于预测对本发明的方法有用的化合物的肠吸收的体外药物吸收试验。描述于该实施例的该试验的实施方案由上海ChemPartner Co.,Ltd.开发,该公司为一家中国公司,总部位于中国上海蔡伦路720号,3号楼,邮编201203。
试剂
Caco-2(ATCC,目录号HTB-37TM)细胞在生长培养基(MEM+10% FBS+1% NEAA)中培养。生长培养基通过向445mLMEM中添加50mL FBS和5mL NEAA或通过根据实际需要调整最终体积来制备。还使用了胰蛋白酶-EDTA(Invitrogen,目录号25200-072)。
试验和配制溶液缓冲液
使用具有25mM HEPES,pH 7.4的Hanks平衡盐溶液(HBSS,Invitrogen,目录号14025-092),具有0.2% DMSO的HBSS缓冲液(加入25mL HBSS缓冲液的50μL DMSO)和具有0.4% DMSO的HBSS缓冲液(加入25mL HBSS缓冲液的100μL DMSO)。
对照
使用式(实际重量/分子量)/mL溶剂=10mM,在DMSO中制备化合物的10mM储备溶液并且在试验缓冲液中制备荧光黄的10mM储备溶液。使用红霉素、美托洛尔(Metoprolol)和阿替洛尔(Atenolol)作为参照化合物。制备提供溶液(donor solution)(对于化合物是10μM,对于荧光黄是5μM)。对于A-B,将4μL的10mM化合物储备溶液和2μL的10mM荧光黄储备溶液装入4mL的HBSS缓冲液,并且离心(5min,4000rpm)以析出不溶解的颗粒。收集上清液用于化合物配制。对于B-A,将4μL(化合物)的10mM化合物储备溶液加入4mL具有0.2% DMSO的HBSS缓冲液,并且离心(5min,4000rpm)以析出不溶解的颗粒。收集上清液用于化合物配量(dosing)。
制备接收溶液(receiver solution)。对于A-B,所述溶液是具有0.4% DMSO的HBSS缓冲液。对于B-A,将2μL的10mM荧光黄储备溶液加入4mL具有0.2% DMSO的HBSS缓冲液。制备化合物溶液用于标准曲线(3μM/1μM/0.2μM/0.04μM/0.01μM/0.005μM):
20X溶液:
15μL(10mM)+485μL(MeOH:H2O=1:1)---500μL(300μM)
200μL(300μM)+800μL(MeOH:H2O=1:1)---1000μL(60μM)
200μL(60μM)+400μL(MeOH:H2O=1:1)---600μL(20μM)
200μL(20μM)+800μL(MeOH:H2O=1:1)---1000μL(4μM)
200μL(4μM)+800μL(MeOH:H2O=1:1)---1000μL(0.8μM)
200μL(0.8μM)+600μL(MeOH:H2O=1:1)---800μL(0.2μM)
200μL(0.2μM)+200μL(MeOH:H2O=1:1)---400μL(0.1μM)
1X溶液:3μL的20×溶液(0.1-60μM)+57μL 0.4% DMSOHBSS+60μL乙腈(ACN)内标(IS,200ng/mL Osalmid)。试验如以下所述进行
常规培养和维护
储备培养物在MEM+10% FBS+1% NEAA中保存,在75cm2组织培养处理的烧瓶中生长并且每周分离(传代)2次以保持所需的融合。为了维持传代,通常将胰蛋白酶化的细胞以1:4的标准传代比例分布到新的烧瓶中。
接种试验板
在进行试验之前Caco-2试验板接种21-27天。向24孔基底室中以在具有1mL体积生长培养基的250μL顶室体积中的0.17×105/孔的细胞密度(6.6×104/mL)接种24孔版。通常每隔一天更换试验板的生长培养基。
试验板的制备
经过所需的细胞生长期之后,从恒温箱中移去细胞培养板以使培养物平衡至室温(大约0.5小时)。使用无菌HBSS缓冲液,pH 7.4洗涤单层,交换体积一次。使用Millicell ERS系统欧姆计测量横穿单层的电阻(如果(跨膜电阻)TEER高于250欧姆*cm2就使用细胞)。
细胞板的制备
从顶侧和基底侧除去缓冲液。根据板布局图向顶端孔加入600μL提供溶液(用于A到B)或500μL接收溶液(用于B到A)。通过向新的24孔板的孔中添加800μL接收溶液(用于A到B)或900μL提供溶液(B到A)来制备新鲜的基底板。在37℃下孵育顶端和基底板。
分析板的制备
5min之后,将来自所有提供溶液(A到B和B到A两者)的100μL样本转移到D0的样本板的适当的孔中。将来自所有顶室(A到B的提供溶液和B到A的接收溶液)的100μL样本转移到荧光黄D0(D0LY)的微板的适当的孔中。将顶板放置在基底板上以开始转运过程。在90min时,将顶端和基底板分开并且将来自所有提供溶液(A到B和B到A两者)的100μL样本转移到D90的新的样本板的适当的孔中,并且将来自所有接收溶液的200μL样本转移到R90的样本板的适当的孔中。将来自所有基底室(A到B的接收溶液和B到A的提供溶液)的100μL样本转移到荧光黄R90(R90LY)的新的微板的适当的孔中。使用荧光分析仪通过在485nm的激发波长和535nm的发射波长读取D0LY和R90LY确定LY渗透率。
样本制备
对于接收溶液,使用60μL样本+60μL ACN和IS(200ng/mL柳胺酚)制备样本。对于提供溶液,使用6μL样本+54μL 0.4%DMSO/HBSS+60μL ACN和IS(200ng/mL柳胺酚)制备样本。
7.肝微粒体稳定性测试
设计代谢稳定性试验是为了测量检测化合物在来自人和动物物物种的各种试验基质中的稳定性。从代谢观点来看,药物将是相对稳定的,具有小的首过效应并且在血液中的相当长的一段时间保持有效浓度。来自肝脏的微粒体制剂含有全部CYP同工酶和负责人体中的大部分药物代谢的其它膜结合药物代谢酶。肝微粒体中的代谢稳定性可以确定半衰期(T1/2)和内在清除率(Clint)。Clint的确定对确定代谢其与体内全身清除相比是否是主要的清除途径是有用的。对于在肝微粒体中的高代谢稳定性:T1/2>120min,对于在肝微粒体中的中等代谢稳定性:30min<T1/2<120min,对于在肝微粒体中的低代谢稳定性:T1/2<30min。在该试验中,检测化合物针对人、Sprague Dawley大鼠和CD-1小鼠肝微粒体进行检测。结果作为15、30和60分钟之后的母体化合物剩余%来报告。人、Sprague Dawley大鼠和CD-1小鼠肝微粒体样本购自BDGentest。适于在预测对本发明的方法有用的化合物的首过代谢中使用的体外代谢稳定性试验在该实施例中描述。描述于该实施例的该试验的实施方案由上海ChemPartner Co.,Ltd.开发,该公司是一家中国公司,总部位于中国上海蔡伦路720号,3号楼,邮编201203。
试剂
使用化合物储备溶液(在DMSO中的10mM检测化合物,储存在-80℃),试验缓冲液(0.1M磷酸钾缓冲液,pH 7.4),缓冲液A(1.0L含有1.0mM EDTA的0.1M磷酸氢一钾缓冲液),缓冲液B(1.0L含有1.0mM EDTA的0.1M磷酸氢二钾缓冲液),缓冲液C(K-磷酸盐缓冲液,0.1M磷酸钾缓冲液,1.0mM EDTA,pH 7.4,通过用缓冲液A滴定700mL缓冲液B同时监测pH计)。
标准添加液(Spiking Solution)
制备检测化合物或阳性对照溶液(3×)。通过将10μL的10mMDMSO储备溶液添加到190μL ACN中制备500μM标准添加液。对于在微粒体(0.75mg/mL)中的1.5μM标准添加液,将1.5μL的500μM标准添加液和18.75μL的20mg/mL肝微粒体添加到479.75μL的K-磷酸盐缓冲液中。
其它溶液
通过在5mL K-磷酸盐缓冲液中溶解25.1mg的NADPH四钠盐来制备在0.1M K-磷酸盐缓冲液中的6mM NADPH。
工序
将含有0.75mg/mL微粒体溶液的30μL的1.5μM标准添加液加入指定为60min、30min、15min、5min和0min的孔中。将板在37℃下预孵育10分钟。向指定为时间60的孔中加入15μL的NADPH储备溶液(6mM)并且计时。在30min、15min和5min,向孔中加入15μL的NADPH储备溶液(6mM)。在孵育结束时,向所有孔(60min、30min、15min、5min和0min)中加入含有IS的135μL的ACN。随后向指定为时间0的孔中加入15μL的NADPH储备溶液(6mM)。淬灭之后,将反应混合物在3220×g离心10min。将50μL来自各孔的上清液转移到含有50μL超纯水(Millipore)的96孔样本板中用于LC/MS分析。
8.CYP抑制测试
当药物抑制或诱导药物代谢酶(如CYP)的活跃时可能发生代谢药物药物相互作用,其可能影响并存的药物的代谢。结果,这些药物的血浆浓度可能增加,导致潜在的毒性。
检测了选择化合物针对五种不同CYP酶的CYP抑制:CYP 1A2、CYP 2C9、CYP 2C19、CYP 2D6、CYP 3A4。个体CYP酶与没有抑制剂的相应底物(阴性对照)一起孵育。随后将个体CYP酶在检测化合物存在下与相应底物一起孵育。结果作为“CYP(阴性对照%)1A2=v%;2C9=w%;2C19=x%;2D6=y%;3A4=z%”报告,其中v%、w%、x%、y%和z%是相对于阴性对照的抑制%。v、w、x、y、z>75的值表示低水平的相应酶的抑制。70>v、w、x、y、z>30的值表示中等水平的相应酶的抑制。
使用以下试剂:磷酸二氢钠;磷酸氢二钠;β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸-还原的(NADPH),Roche;Milli-Q Water;0.1M磷酸钾缓冲液(K-缓冲液),pH 7.4。使用以下储备溶液。储备A(在1L Milli-Q水中的136.5g磷酸二氢钾(1.0M))。储液B(在1L Milli-Q水中的174.2g磷酸氢二钾(1.0M))。将40.5mL的储备B与9.5mL的储备A混合,用Milli-Q水将总体积调节至接近500mL以得到0.1M磷酸钾缓冲液。将缓冲液用KOH或H3PO4滴定至pH 7.4。为了制备辅因子缓冲液(4×,8mM NADPH),将66.7mg NADPH四钠盐溶于10mL的K-缓冲液。对于人肝微粒体溶液,使用储备溶液(20mg/mL(4×最终))。
制备以下阳性对照储备溶液:0.3mMα-萘黄酮(MW:272.3,在1mL DMSO中的0.0817mgα-萘黄酮),10mM磺胺苯吡唑(MW:314.4,在1mL DMSO中的3.14mg磺胺苯吡唑),100mM奥美拉唑(MW:345.4,在1mL DMSO中的34.54mg奥美拉唑),2.5mM奎尼丁(MW:324,在1mL DMSO中的0.81mg奎尼丁),和2.5mM酮康唑(MW:531.4,在1mL DMSO中的1.33mg酮康唑)。
制备以下底物储备溶液:6mM非那西汀(MW:179.22,在1mLcan中的1.075mg非那西汀),10mM双氯芬酸(MW:318.83,在1mlH2O中的3.18mg双氯芬酸),35mM S-美芬妥英(MW:218.25,在1mL ACN中的7.64mg s-美芬妥英),10mM丁呋洛尔(MW:297.82,在1ml H2O中的2.98mg丁呋洛尔),1mM咪达唑仑(MW:325.77,在1mL can中的0.326mg咪达唑仑),和10mM睾酮(MW:288.42,在1ml ACN中的2.88mg睾酮)。
试验工序
在0.2mg/mL肝微粒体溶液中制备检测化合物和参照化合物(阳性对照)。通过添加在990μL K-缓冲液中的10μL微粒体储备溶液(20mg/mL)从储备溶液制备0.2mg/mL肝微粒体溶液(2×最终)。用12μL的ACN稀释8μL 10mM检测化合物储备溶液(在DMSO或其它溶剂中的各种浓度)以制备4mM溶液。使用DMSO/ACN(40:60)从4mM溶液往下七个浓度点(400×最终)进行1:3连续稀释:4mM、1.33mM、0.44mM、0.148mM、0.1494mM、0.0165mM、0.00549mM、0mM。用12μLACN稀释在DMSO中的8μL参照化合物储备溶液。使用DMSO/ACN(40:60)从稀释的浓度往下七个浓度点(400×最终)进行1:3连续稀释。将2μL连续稀释的检测化合物加入400μL的0.2mg/mL微粒体溶液。将1μL连续稀释的参照化合物加入200μL的0.2mg/mL微粒体溶液。
在微粒体溶液中制备用于CYP2C19的底物溶液(4×最终)。在K-缓冲液中制备用于其它CYP的底物溶液(4×最终)。在96孔试验板中添加以下预热的溶液(一式两份):在0.2mg/mL微粒体溶液中的30μL的2×检测化合物和参照化合物。添加15μL的4×底物溶液(CYP2C19含有肝微粒体)。在37℃下将样本预孵育10分钟。向试验板中添加15μL预热的4×NADPH辅因子溶液(参见步骤6.7)以引发反应并且孵育(37℃)5分钟(CYP3A4)、10分钟(CYP1A2、CYP2C9和CYP2D6)和45分钟(CYP2C19)。通过添加120μL含有IS的ACN停止反应。将试验板离心(4000rpm)15分钟并且将上清液转移到新的96孔板中用于LC/MS分析。曲线拟合以使用基于使用式Y=底部+(顶部-底部)/(1+10^((LogEC50-X)*斜率))的数据计算的S形(非线性的)剂量-响应模型(GraphPad Prism 5.0)计算IC50,其中X是浓度的对数,Y是在对从高到低的抵制剂浓度响应的S形状中从底部开始到顶部的响应值。
虽然已经说明和描述某些实施方案,但是应理解的是,可以根据本领域的一般技术对其进行改变和修改而不脱离在以下权利要求书中定义的本发明的广泛的方面。
9.活体内大鼠药动学研究
设计活体内大鼠药动学研究是为了测量大鼠静脉内(IV)和口服(PO)给药之后的生物利用率、组织分布和代谢物鉴别。完整的PK研究通常包括两个研究组(IV和PO)并且每种化合物从多个动物中获取一系列的血液样本。在该实施例中描述的试验由BioDuro开发,该公司为一家中国公司,总部位于中国北京昌平区生命科学园路29号E座,邮编102206。
表3
为了证明它们的生物利用率和肝脏浓度,在大鼠活体内检测了EBP1047、EBP1595、EBP1597和EBP1604。EBP1047、EBP1595、EBP1597和EBP1604在0.5-2μM之间显示HCV 1b复制子活性(活体外PK曲线),这预示在人肝脏比大鼠肝脏中更高的稳定性和中等的肠吸收。
表4
各化合物均单独地IV(对大鼠1-3为1mpk(mg/kg))和PO(对大鼠4-18为20或40mpk)给药,随后在各时间点从每个动物抽取血液并进行肝脏浓度研究(对于PO给药的大鼠)。所有四种化合物比在血浆中显示更高的肝脏浓度,在Cmax的肝脏/血浆比例(L/P比例)>170。
EBP1047在肝脏中的浓度(ng/g)显示在给药后1h和8h之间,肝脏浓度在1-30μM范围内。具有0.5μM的EC50的EBP1047,对于每天一次(qd)给药,在肝脏中的EBP1047的浓度可以高于EC50的2-60倍之间持续至少8小时。因此,该化合物和具有类似活性曲线的化合物可以每天给药一次、两次或三次(或更频繁)来治疗HCV感染。
在肝脏中的EBP1595浓度(ng/g)显示在给药后0.25h和4h之间肝脏浓度在1-32μM范围内。具有1μM的EC50的EBP1595,对于qd给药,在肝脏中的EBP1595的浓度可以高于EC50的2-32倍之间持续至少4小时。因此,该化合物和具有类似活性曲线的化合物可以每天给药两次或三次(或更频繁)来治疗HCV感染。
在肝脏中的EBP1597的浓度(ng/g)显示在给药后0.25h和12h之间,肝脏浓度在2-18μM范围内。具有0.9μM的EC50的EBP1597,对于qd给药,在肝脏中的EBP1597的浓度可能高于EC50的2-18倍之间持续12小时。在这12小时期间,在肝脏中的EBP1597的浓度比其EC50更高。因此,该化合物和具有类似活性曲线的化合物可以每天给药一次、两次或三次(或更频繁)来治疗HCV感染。
在肝脏中的EBP1604的浓度(ng/g)显示在给药后0.25h和1h之间,肝脏浓度在2-18μM范围内。具有2.2μM的EC50,对于qd给药,EBP1604的浓度可能达到高于其EC50的6倍持续至少1小时。因此,该化合物和具有类似活性曲线的化合物可以每天给药两次或三次(或更频繁)来治疗HCV感染。
这些结果列于下面的表中。BID、TID或更频繁的给药可以进一步延长在肝脏中的这些化合物在高于这些化合物的EC50浓度的暴露。对于希望对药物的较长肝脏暴露的治疗,EBP1047、EBP1595或EBP1597可以提供需要暴露。对于对药物的较短的肝脏暴露是足够的治疗,EBP1047、EBP1595、EBP1597和EBP1604可以提供需要的暴露。
表5
总之,这些结果证明,具有R1=小脂族基团(包含少于3个碳,例如烷基);R5=空间位阻胺(7-8元环,N,N-甲基-异丁基或2-烷基取代的哌啶);R22=小脂族基团(包含不超过5个碳,例如烷基和环烷基)或R22=-CH2CH2-仲胺或叔胺(包含不超过7个碳)的化合物可具有良好的口服吸收性,因此可在抗病毒治疗中用作例如口服施用的化合物。
虽然已经参考其具体实施方案对本发明进行了描述,但是本领域技术人员应理解,可以进行各种改变以及等同物可以进行替换而不脱离本发明的范围。此外,可以进行许多修改以适应特定的情况、材料、物质组成、过程、过程步骤或步骤,以实现本发明提供的益处而不脱离本发明的范围。所有此类修改均意图在此所附权利要求的范围内。
本文中引用的所有出版物和专利文件均以引用方式并入本文,恰如明确地和单独地指出每个此类出版物或文件均以引用方式并入本文。出版物和专利文件的引用不希望作为任何此类文件是相关的现有技术的指示,也不希望它构成所述内容或其日期的任何承认。
Claims (30)
1.下式的的化合物或其药学上可接受的盐:
其中
R1是氢;C1-C6烷基;被取代的或未取代的C3-C8环烷基、5-8元杂环基或6元芳基取代的C1-C6烷基;C2-C6烯基;取代的或未取代的C3-C8环烷基、-CO-(C3-C8环烷基)、-CO-(C1-C6烷基)、-CO-芳基、-CO-杂芳基-、-CO-杂环-、-SO2-(C1-C6烷基)或-SO2-(C3-C8环烷基)基团;或R1和R2一起形成12-25元杂环,或R1和R5一起形成12-25元杂环;
L是键、-CONH-、-NH-CO-、取代的或未取代的C1-C5亚烷基、取代的或未取代的C2-C5杂亚烷基、取代的或未取代的5元杂芳基或其组合;
R2是-NH2、-NHR’、-NR’R’、-NHCOR’、-NR’COR’、-NHSO2R’、-NR’SO2R’、-NHSO2NH2、-NHSO2NHR’、-NHC(O)NH2、-NHC(O)NHR’、-N(R’)SO2NH2、-N(R’)SO2NHR’、-N(R’)C(O)NH2和-N(R’)C(O)NH R’,或取代的或未取代的5-7元杂环基、C5-C7环烷基、5-6元杂芳基或6元芳基;
R3、R4和R5独立地是氢、卤代、-OH、-OR’、-NH2、-NHR’、-NR’R’、-NHCOR’、-NR’COR’、-NHSO2R’、-NR’SO2R’、-NHSO2NH2、-NHSO2NHR’、-NHC(O)NH2、-NHC(O)NHR’、-N(R’)SO2NH2、-N(R’)SO2NHR’、-N(R’)C(O)NH2和-N(R’)C(O)NHR’、-SO2R’、-SO2NH2、SO2NHR’、SO2NR’R’、-CONH2、-CONHR’、-CONR’R’、-CO2H、-CO2R’,或取代的或未取代的C1-C6烷基、C3-C8环烷基、芳基、杂芳基或杂环基;以及
R’是取代的或未取代的C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C8环烷基、芳基、杂芳基或杂环基,或两个R’基团与其所键合的氮原子一起形成杂环。
2.根据权利要求1所述的化合物,其中R3是氢,并且R4和R5均独立地是非氢取代基。
3.根据权利要求1所述的化合物,其中R3和R5是氢,并且R4是非氢取代基。
4.根据权利要求1所述的的化合物,具有下式:
其中
R1是氢;C1-C6烷基;被取代的或未取代的C3-C8环烷基、5-8元杂环基或6元芳基取代的C1-C6烷基;C2-C6烯基;取代的或未取代的C3-C8环烷基、-CO-(C3-C8环烷基)、-CO-(C1-C6烷基)、-CO-(C3-C8环杂烷基)、-CO-(C1-C6杂烷基)、-SO2-(C1-C6环烷基)或-SO2-(C3-C8环烷基)基团;
L是键、-CONH-、-NH-CO-、取代的或未取代的C1-C5亚烷基、取代的或未取代的C2-C5杂亚烷基或其组合;
R2是取代的或未取代的5-7元杂环基、C5-C7环烷基、5-6元杂芳基或6元芳基;
R5是R51R52N-、R53(MeSO2)N-、R54O-或取代的或未取代的C1-C6烷基;
R51是氢或C1-C3烷基;
R52是C1-C3烷基、取代的或未取代的环烷基、芳基、杂环基或杂芳基,其中每个环烷基、芳基、杂环基或杂芳基含有6-8个环原子,或R51和R52与其所键合的氮原子一起形成被取代或未取代的苄基、酰基或磺酰基取代的含有最多3个杂原子的6、7、8或9元杂环基环;
R53是取代的和未取代的C1-C6烷基;以及
R54是氢、取代的或未取代的苄基、支链C3-C8烷基、未取代的C5-C8环烷基或被一个或多个直链或支链C1-C4烷基取代的C5-C8环烷基。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的化合物,其中
R1是氢、C1-C5烷基或-(CH2)k-R11;
k是1或2;以及
R11是C3-C8环烷基或取代的或未取代的芳基或杂芳基。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物,其中R1是氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基、环丙基甲基或4-氯苄基。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的化合物,其中R1是甲基。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的化合物,其中L是-CONH-并且-CO-NH-的碳原子与所述氮杂吲唑环键合。
9.根据权利要求1-7中任一项所述的化合物,其中L是取代的或未取代的C1-C5亚烷基或C1-C5杂亚烷基。
10.根据权利要求1-7和9中任一项所述的化合物,其中
L是-(CH2)n-、-O-(CH2)n-或-CH2-O-(CH2)n-;
L的左侧与所述氮杂吲唑部分键合;以及
n是1、2、3或4。
11.根据权利要求10所述的化合物,其中L是-(CH2)n-。
12.根据权利要求10所述的化合物,其中L是-O-(CH2)n-。
13.根据权利要求10所述的化合物,其中L是-CH2-O-(CH2)n-。
14.根据权利要求11-13中任一项所述的化合物,其中n是3或4。
15.根据权利要求1-14中任一项所述的化合物,其中R2是取代的或未取代的哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基或氮杂环庚烷基。
16.根据权利要求1-15中任一项所述的化合物,其中R2是取代的或未取代的哌啶-3-基或哌啶-4-基。
18.根据权利要求1-14中任一项所述的化合物,其中R2是-NR23R24并且R23和R24独立地是氢、C1-C3烷基、被C3-C4环烷基环取代的C1-C3烷基、6-7元杂环,或R23和R24与其所键合的氮原子一起形成取代的或未取代的5-8元杂环。
25.一种化合物,其为EBP841、EBP1047、EBP1172、EBP1310、EBP1452、EBP1456、EBP1489、EBP1595、EBP1597或EBP1604或其每个的药学上可接受的盐或前药。
26.一种组合物,其包含根据权利要求1-25中任一项所述的化合物和药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
27.一种抑制感染HCV的细胞中的HCV复制的方法,其包括使所述细胞与根据权利要求1-25中任一项所述的化合物或根据权利要求26所述的组合物接触,从而抑制所述细胞中的HCV复制。
28.一种治疗感染HCV的患者的方法,其包括对需要此治疗的患者施用治疗有效量的根据权利要求1-25中任一项所述的化合物或根据权利要求26所述的组合物,从而治疗所述患者。
29.根据权利要求1-25中任一项所述的化合物在制备用于治疗HCV感染的药物中的用途。
30.根据权利要求1-25中任一项所述的化合物或根据权利要求26所述的组合物,其用于治疗HCV感染。
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PB01 | Publication | ||
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Application publication date: 20120912 |