CN102665741A - 用于治疗感冒和流感的包含姜和一枝黄花的草本组合物 - Google Patents

Abstract

本文描述了一种用于预防和/或治疗感冒和/或流感感染的包含姜和一枝黄花的组合的组合物。本文还描述了一种治疗或预防有需要的受试者的感冒和/或流感感染的方法，所述方法包括对所述受试者施用有效量的包含姜和一枝黄花的组合的组合物。

Description

用于治疗感冒和流感的包含姜和一枝黄花的草本组合物

相关申请的交叉引用

本申请为2010年10月22日提交的并根据PCT条约第21条(2)款以英文进行公布的PCT申请第/CA2010/00*号，本申请要求2009年10月22日提交的美国临时申请第61/254,031号和2010年2月25日提交的美国临时申请第61/308,052号的权益。所有文献的全部内容都以引用方式并入本文。

发明领域

本发明涉及感冒和/或流感感染的预防和/或治疗。更具体来说，本发明涉及用于药物组合物和/或营养组合物的姜和一枝黄花的组合以及用于预防和/或治疗感冒和/或流感感染或其症状的方法。

发明背景

流感

流感是由流感病毒引起的一种传染性疾病。普通流感的特征是与呼吸困难、强烈肌肉疼痛(肌痛)、头痛、发冷、鼻塞、发烧、咳嗽、喷嚏和喉咙痛相关的急性感染。大多数人通常都可从流感中恢复而无任何的并发症。老年人、年幼儿童和具有免疫系统缺陷的人可能会产生严重的并发症或甚至可能死于流感。

目前的文献将人普通流感描述为一种严重的疾病，它每年仅在美国就引起估计36,000人死亡(Roxas，2007)。每年普通的流行性感冒(流感)的流行导致了工作时间和在校时间的损失以及大量的住院时间，甚至在尤其易患呼吸感染的年长人士中导致死亡。

流感是由甲型或乙型流感病毒株引起，但是甲型菌株通常是大流行性流感的原因(Klenk，2008)。存在多种甲型菌株亚型，所述亚型是根据一个H编号(对应血凝素的类型)和一个N编号(对应神经氨酸酶的类型)来进行标记。存在16种不同的H抗原(H1到H16)和9种不同的N抗原(N1到N9)。甲型流感(H1N1)病毒是甲型流感病毒的一种亚型并且是人流行性感冒(流感)的最常见病因。H1N1的一些菌株是人体内特有的并且引起所有流感样疾病中的一小部分以及所有季节性流感的一小部分。大流行性H1N1/09病毒是一种猪源性甲型流感病毒H1N1亚型病毒株，它是2009年流感大流行的原因。流感治疗有可能用诸如奥司他韦(Oseltamivir)(

Roch)或扎那米韦(Zanamivir)的药物来进行，这两种药物均为神经氨酸酶的抑制剂，所述酶是流感病毒表面的一种重要的酶(Gubareva LV，2004)。已知来自流感家族的病毒呈现出高突变率并且每一年都可能发生对其基因组的修饰从而引起抗药性。例如，已经观察到流感病毒株对达菲^TM(Tamiflu^TM)治疗呈现高抗性的情况(美国疾病控制中心(CDC))。

因此，感染人类的新型流感病毒会经常出现。这些菌株常常来自于其它品种并且已通过突变而适应于人类。猪流感甲型H1N1流感病毒，又称猪流感，已在全世界范围有所报道并且被公告为一种大流行性流感病毒。猪流感H1N1原本只感染猪，但是2009年开始在北美感染人类。人类对这种病毒的天然免疫性极低甚至没有免疫性，这可导致严重和广泛的疾病。

在对健康成人所观察到的70到90％的情况下，疫苗可以预防流感(Bridges CB，2000；Herrera GA，2007)。然而，流感疫苗必须每年进行重新设计，因为上一年的疫苗可能对新突变的菌株无效。因此，每年的疫苗是在流行季节开始之前根据上一年的疫苗进行设计。由于科学家通常无法精确地预测何种菌株会主导，所以疫苗可能并不完全相应于新的菌株。另外，流感疫苗是针对甲型和乙型流感病毒株而特别设计，因此不能够提供对诸如鼻病毒和冠状病毒类型的感冒病毒的保护。

流感症状可用之前提及过的治疗或(例如)用以下来减轻，1)用于缓解疼痛和退烧的非处方(over-the-counter)镇痛剂；2)用于无痰性干咳的止咳药；3)帮助清痰以使痰可被咳出的祛痰药；和/或4)减轻鼻塞的解充血药。

感冒

普通感冒是工业化社会的一种极为频发的急性疾病并且在美国是就医的主要原因(Roxas，2007)。尽管感冒通常是良性的，但却是缺勤的一个主要原因，同样也引起包括生产力损失和治疗成本的显著经济负担。普通感冒是由多种病毒引起，大多数时候是鼻病毒和冠状病毒类型的感冒。目前普通感冒无药治愈，因此当前疗法的目标为症状的减轻。用于普通感冒的预防策略包括避开受感染人群和在感冒季节勤于洗手。

传统疗法的效力有限。某些药物的成本不菲并且有副作用。通常认为膳食补充剂(例如，紫锥菊(Echinacea)、人参(ginseng)等)是有效的，但是它们缺乏使用现代培养方法进行的正规研究。

对用于预防和/或治疗感冒和/或流感感染的替代组合物的存在需要。

本说明书引用了大量的文件，将其全部内容以引用方式并入本文。

发明概要

申请人已经对两种植物或其部分(例如，它们的提取物)的组合的新性质进行了鉴定和表征。本发明的组合拥有包括体外和体内抗病毒能力的活性。

本发明的组合的两种主要活性组分是1)姜；和2)一枝黄花。如本文所使用并且除非出现时的上下文隐含地或明确地暗示这些术语的另一含义，否则术语“姜”和“一枝黄花”指的是完整植物、其部分或其提取物。这些植物及其提取物被认为是用于人的安全物质(German Commission E，Blumenthal M，1998)。申请人已经证明单独或进行组合的这些植物有效预防和/或治疗感冒和流感感染。另外，申请人发现，一枝黄花和姜共同作用并且表现出强的(大于相加的)抗病毒活性，包括对流感病毒(菌株A/WS/33，H1N1)感染活性的抑制。此外，申请人在本文证明，在抑制病毒感染方面，一枝黄花的醇提物比诸如水提物的其它类型的提取物更有效。这两种植物(或其特定部分或其提取物)的组合提供了减弱/缓解感冒和流感症状和/或缩短感染持续时间的替代途径。

除其抑制流感病毒(例如，普通H1N1菌株以及H1N1猪流感菌株)的体外感染活性的能力之外，已证实本发明的组合在重现流感病毒感染(菌株A/WS/33，H1N1)的体内动物模型中有活性。

组合物

因此，在第一方面中，本发明提供一种用于预防和/或治疗感冒和/或流感感染(或相关症状)的包含姜和一枝黄花的组合的组合物。

在本发明的组合物的一个特定实施方案中，所述组合物进一步包含载体。在本发明组合物的另一个实施方案中，所述组合物包含姜提取物和/或一枝黄花提取物。在另一个实施方案中，所述组合包含姜粉。在另一个实施方案中，所述姜提取物为姜的粗提物。在另一个实施方案中，所述姜提取物为姜的粗100％水提物(100％ water gingerextract)。在另一个实施方案中，所述姜提取物为姜的CO₂提取物。在另一个实施方案中，所述一枝黄花提取物为一枝黄花的粗提物。在另一个实施方案中，所述一枝黄花提取物为一枝黄花的粗100％水提物。在另一个实施方案中，所述一枝黄花提取物为一枝黄花的醇提物。在另一个实施方案中，所述一枝黄花醇提物为一枝黄花的水醇提物。在另一个实施方案中，用于制备所述水醇提物的醇包含伯醇。在另一个实施方案中，所述伯醇为甲醇、乙醇、1-丙醇、1-丁醇或其任意组合。在另一个实施方案中，所述伯醇为乙醇。在另一个实施方案中，用于制备所述水醇提物的醇包含仲醇。在另一个实施方案中，使用至少两种不同的醇的混合物。在另一个实施方案中，所述醇提物是使用包含介于约20％与约85％之间的醇的溶液来制备。在另一个实施方案中，所述提取物是使用包含60％的醇的溶液来制备。在另一个实施方案中，所述提取物是使用包含约30％的醇的溶液来制备。在另一个实施方案中，所述组合包含介于约1∶15与约10∶1之间的姜∶一枝黄花比例。在另一个实施方案中，所述姜∶一枝黄花比例为约1∶5。在另一个实施方案中，所述姜∶一枝黄花比例为约5∶1。在另一个实施方案中，所述有效量包含介于约40mg与约4500mg之间的姜。在另一个实施方案中，所述组合物包含介于约40mg与约200mg之间的姜。在另一个实施方案中，所述组合物包含介于约43.5mg与约174mg之间的姜。在另一个实施方案中，所述组合物包含介于约1000mg与约4500mg之间的姜。在另一个实施方案中，所述组合物包含介于约2000mg与约4000mg之间的姜。在另一个实施方案中，所述组合物包含介于约200mg与约800mg之间的一枝黄花。在另一个实施方案中，所述组合物包含介于约400mg与约800mg之间的一枝黄花提取物。

在本发明的组合物的另一个实施方案中，所述组合物包含蓝莓粉。在另一个实施方案中，所述姜为生姜(Zingiber officinale Roscoe)。在另一个实施方案中，所述一枝黄花为毛果一枝黄花(Solidagovirgaurea)。在另一个实施方案中，姜和一枝黄花为所述组合物中用于预防或治疗感冒或流感感染的唯一的医药成分。在另一个实施方案中，所述组合物进一步包含作为非医药成分的微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、硬脂酸、硅溶胶、硬脂酸镁和磷酸一氢钙。

在一个相关方面中，本发明提出了一种包含姜和一枝黄花的组合的营养和/或膳食组合物(食品补充剂、饮料(例如2-4盎司的免疫弹(immune shot))或食品)。在一个实施方案中，所述组合物为营养或膳食或兽医组合物。在另一个实施方案中，所述组合物包含于饮料或食品中。在另一个实施方案中，所述组合物包含于2到6盎司短饮(shooter)饮料中。在另一个实施方案中，所述组合物适于在感冒或流感症状发作的48小时内施用。在另一个实施方案中，所述组合物适于在感冒或流感症状发作的24小时内施用。在另一个实施方案中，所述组合物适于每日施用两次。

在本发明的组合物的另一个实施方案中，所述组合预防或治疗以下症状中的至少一种：受试者血液或细胞中出现病毒滴度、流鼻涕、鼻塞、喷嚏、喉咙痛、喉咙发痒、咳嗽、嗓子嘶哑、头部充血、胸闷、疲惫、发烧、肌肉痛、缺乏食欲、头疼和发冷。在另一个实施方案中，所述组合预防或治疗至少两种症状。在另一个实施方案中，本发明的组合预防、治疗或减轻至少两种上述症状。

在本发明的组合物的另一个实施方案中，所述组合物是用于治疗和/或预防感冒和/或流感感染。在另一个实施方案中，所述组合协同地预防和/或治疗感冒和/或流感感染。在另一个实施方案中，所述组合物是用于预防和/或治疗流感感染。在另一个实施方案中，所述组合物是用于预防和/或治疗鼻病毒感染。在另一个实施方案中，所述组合物是用于预防感冒和/或流感感染。在另一个实施方案中，所述组合物是用于治疗感冒和/或流感感染。在另一个实施方案中，所述组合物适于兽医应用。在另一个实施方案中，所述组合物适于人。

方法

在另一个方面中，本发明提供了一种治疗和/或预防有需要的受试者的感冒和/或流感感染的方法，所述方法包括对所述受试者施用有效量的包含姜和一枝黄花的组合的组合物，借以预防或治疗感冒或流感。

在所述方法的一个特定实施方案中，所述组合物进一步包含载体。在一个实施方案中，所述组合物包含姜提取物和/或一枝黄花提取物。在一个实施方案中，所述组合物包含姜粉。在一个实施方案中，所述姜提取物为姜的粗提物。在一个实施方案中，所述姜提取物为姜的粗100％水提物。在一个实施方案中，所述姜提取物为姜的CO₂提取物。在一个实施方案中，所述一枝黄花提取物为一枝黄花的粗提物。在一个实施方案中，所述一枝黄花提取物为一枝黄花的粗100％水提物。在一个实施方案中，所述一枝黄花提取物为一枝黄花的醇提物。在一个实施方案中，所述一枝黄花醇提物为一枝黄花的水醇提物。在一个实施方案中，用于制备所述水醇提物的醇包含伯醇。在一个实施方案中，所述伯醇为甲醇、乙醇、1-丙醇、1-丁醇或其任意组合。在一个实施方案中，所述伯醇为乙醇。在一个实施方案中，用于制备所述水醇提物的醇包含仲醇。在一个实施方案中，使用至少两种不同的醇的混合物来制备所述醇提物。在一个实施方案中，所述醇提物是使用包含介于约20％与约85％之间的醇的溶液来制备。在一个实施方案中，所述醇提物是使用包含约60％的醇的溶液来制备。在一个实施方案中，所述醇提物是使用包含约30％的醇的溶液来制备。在一个实施方案中，所述组合物包含介于约1∶15与约10∶1之间的姜∶一枝黄花比例。在一个实施方案中，所述姜∶一枝黄花比例为约1∶5。在一个实施方案中，所述姜∶一枝黄花比例为约5∶1。在一个实施方案中，所述有效量包含介于约40mg与约4500mg之间的姜。在一个实施方案中，所述有效量包含介于约40mg与约200mg之间的姜。在一个实施方案中，所述有效量包含介于约43.5mg与约174mg之间的姜。在一个实施方案中，所述有效量包含介于约1000mg与约4500mg之间的姜。在一个实施方案中，所述有效量包含介于约2000mg与约4000mg之间的姜。在一个实施方案中，所述有效量包含介于约200mg与约800mg之间的一枝黄花。在一个实施方案中，所述有效量包含介于约400mg与约800mg之间的一枝黄花提取物。在一个实施方案中，所述组合物进一步包含蓝莓提取物。在一个实施方案中，所述姜为生姜。在一个实施方案中，所述一枝黄花为毛果一枝黄花。在一个实施方案中，姜和一枝黄花为所述组合物中用于治疗感冒或流感感染的唯一的医药成分。在一个实施方案中，所述组合物进一步包含作为非医药成分的微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、硬脂酸、硅溶胶、硬脂酸镁和磷酸一氢钙。在一个实施方案中，所述组合物为营养用或膳食或兽医组合物。在一个实施方案中，所述组合物为食品补充剂。在一个实施方案中，所述组合物包含于饮料或食品中。在一个实施方案中，所述饮料为2到6盎司的短饮饮料。

在本发明的方法的另一个实施方案中，所述组合物是在感冒或流感症状发作的48小时内施用。在另一个实施方案中，所述组合物是在感冒或流感症状发作的24小时内施用。在另一个实施方案中，所述组合物每日施用两次。在另一个实施方案中，所述组合预防和/或治疗以下症状中的至少一种：受试者血液或细胞中出现病毒滴度、流鼻涕、鼻塞、喷嚏、喉咙痛、喉咙发痒、咳嗽、嗓子嘶哑、头部充血、胸闷、疲惫、发烧、肌肉痛、缺乏食欲、头疼和发冷。在另一个实施方案中，所述组合预防和/或治疗至少两种症状。在另一个实施方案中，所述组合协同地预防和/或治疗感冒和/或流感感染。

在所述方法的另一个实施方案中，所述组合物是用于预防和/或治疗流感感染。在所述方法的另一个实施方案中，所述组合物是用于预防和/或治疗鼻病毒感染。在所述方法的另一个实施方案中，所述组合物是用于预防感冒和/或流感感染。在所述方法的另一个实施方案中，所述组合物是用于治疗感冒和/或流感感染。在所述方法的另一个实施方案中，所述受试者为非人类的动物。在所述方法的另一个实施方案中，所述受试者是人。

根据本发明的另一个方面，提供一种在细胞内预防和/或治疗感冒和/或流感感染的方法，所述方法包括使所述细胞接触有效量的姜和一枝黄花的组合，借以所述组合物预防和/或减弱感冒和/或流感病毒的感染活性。根据本发明的另一个方面，提供了一种预防和/或治疗感冒和/或流感感染的方法，所述方法包括对有需要的受试者施用包含一枝黄花醇提物的组合物，借以预防和/或治疗感冒和/或流感感染。在一个特定的实施方案中，将上述方法用于预防感冒和/或流感感染。

在一个进一步的方面中，本发明提供一种在细胞内预防和/或治疗感冒和/或流感感染的方法，所述方法包括使所述细胞接触有效量的姜和一枝黄花的组合。在一个实施方案中，所述组合协同地预防或减弱感冒和/或流感病毒的感染活性。

用途

在一个进一步的方面中，本发明涉及包含姜和一枝黄花的组合的组合物用于制造用以预防或治疗感冒或流感感染的本发明的组合物的用途。在一个实施方案中，所述用途是用于制造药物。在另一个实施方案中，所述用途是用于制造营养或膳食组合物(例如，食品补充剂或膳食补充剂)。

在一个进一步的方面中，本发明涉及如上文定义的组合物用于预防和/或治疗感冒和/或流感感染的用途，或在制造用于预防和/或治疗感冒和/或流感感染的药物、营养组合物或膳食组合物中的用途。

在本发明的用途的一个特定实施方案中，所述组合物进一步包含载体。在另一个实施方案中，所述组合物包含姜提取物和/或一枝黄花提取物。在另一个实施方案中，所述组合物包含姜粉。在另一个实施方案中，所述姜提取物为姜的粗提物。在另一个实施方案中，所述姜提取物为姜的粗100％水提物。在另一个实施方案中，所述姜提取物为姜的CO₂提取物。在另一个实施方案中，所述一枝黄花提取物为一枝黄花的粗提物。在另一个实施方案中，所述一枝黄花提取物为一枝黄花的粗100％水提物。在另一个实施方案中，所述一枝黄花提取物为一枝黄花的醇提物。在另一个实施方案中，所述一枝黄花醇提物为一枝黄花的水醇提物。在另一个实施方案中，用于制备所述水醇提物的醇包含伯醇。在另一个实施方案中，所述伯醇为甲醇、乙醇、1-丙醇、1-丁醇或其任意组合。在另一个实施方案中，所述伯醇为乙醇。在另一个实施方案中，用于制备所述水醇提物的醇包含仲醇。在另一个实施方案中，使用至少两种不同的醇的混合物来制备所述醇提物。在另一个实施方案中，所述醇提物是使用包含介于约20％与约85％之间的醇的溶液来制备。在另一个实施方案中，所述醇提物是使用包含约60％的醇的溶液来制备。在另一个实施方案中，所述醇提物是使用包含约30％的醇的溶液来制备。在另一个实施方案中，所述组合物包含介于约1∶15与约10∶1之间的姜∶一枝黄花比例。在另一个实施方案中，所述姜∶一枝黄花比例为约1∶5。在另一个实施方案中，所述姜∶一枝黄花比例为约5∶1。在另一个实施方案中，所述有效量包含介于约40mg与约4500mg之间的姜。在另一个实施方案中，所述有效量包含介于约40mg与约200mg之间的姜。在另一个实施方案中，所述有效量包含介于约43.5mg与约174mg之间的姜。在另一个实施方案中，所述有效量包含介于约1000mg与约4500mg之间的姜。在另一个实施方案中，所述有效量包含介于约2000mg与约4000mg之间的姜。在另一个实施方案中，所述有效量包含介于约200mg与约800mg之间的一枝黄花。在另一个实施方案中，所述有效量包含介于约400mg与约800mg之间的一枝黄花提取物。在另一个实施方案中，所述组合物进一步包含蓝莓提取物。在另一个实施方案中，所述姜为生姜。在另一个实施方案中，所述一枝黄花为毛果一枝黄花。在另一个实施方案中，姜和一枝黄花为所述组合物中用于治疗感冒或流感感染的唯一的医药成分。在另一个实施方案中，所述组合物进一步包含作为非医药成分的微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、硬脂酸、硅溶胶、硬脂酸镁和磷酸一氢钙。在另一个实施方案中，所述组合物为营养或膳食或兽医组合物。在另一个实施方案中，所述组合物为食品补充剂。在另一个实施方案中，所述组合物包含于饮料或食品中。在另一个实施方案中，所述饮料为2到6盎司的短饮饮料。在另一个实施方案中，所述组合物适于在感冒或流感症状发作的48小时内施用。在另一个实施方案中，所述组合物适于在感冒或流感症状发作的24小时内施用。在另一个实施方案中，所述组合物适于每日施用两次。在另一个实施方案中，所述组合预防或治疗以下症状中的至少一种：受试者血液或细胞中出现病毒滴度、流鼻涕、鼻塞、喷嚏、喉咙痛、喉咙发痒、咳嗽、嗓子嘶哑、头部充血、胸闷、疲惫、发烧、肌肉痛、缺乏食欲、头疼和发冷。在另一个实施方案中，所述组合预防或治疗至少两种症状。在另一个实施方案中，所述组合协同地预防和/或治疗感冒和/或流感感染。在所述用途的另一个实施方案中，所述组合物是用于预防和/或治疗流感感染。在所述用途的另一个实施方案中，所述组合物是用于预防和/或治疗鼻病毒感染。在所述用途的另一个实施方案中，所述组合物是用于预防感冒和/或流感感染。在所述用途的另一个实施方案中，所述组合物是用于治疗感冒和/或流感感染。在所述用途的另一个实施方案中，所述组合物适用于非人类的动物。在所述用途的另一个实施方案中，所述组合物适用于人。

在另一个方面中，本发明涉及有效量的姜和一枝黄花的组合用于在细胞内预防和/或治疗感冒和/或流感感染的用途。在另一个方面中，本发明涉及一枝黄花醇提物用于预防和/或治疗感冒和/或流感感染的用途。在一个实施方案中，这些用途是用于预防感冒和/或流感感染。

试剂盒

本发明还提供了用于预防或治疗感冒或流感感染的试剂盒或商业包装，其包含姜和一枝黄花的组合以及如何预防或治疗感冒或流感感染的说明书。

在另一个方面中，本发明涉及用于预防和/或治疗感冒和/或流感感染的试剂盒，其包含如本文所定义的组合物以及使用所述组合物来预防和/或治疗感冒和/或流感感染的说明书或如本文所述的本发明的方法或用途。

组合物、方法、用途和试剂盒

在上文所述的组合物、方法、用途和试剂盒的一个实施方案中，上文提及的组合物包含姜粉(即，经研磨和干燥或冻干的姜的根茎)。在一个实施方案中，上文提及的组合物包含姜提取物。在一个实施方案中，所述提取物为干燥根茎的粗提物。在一个实施方案中，上文提及的姜提取物为姜的CO₂提取物。在另一个实施方案中，所述姜提取物为醇提物。在优选的情况下，所述姜提取物为姜的CO₂提取物。

在上文所述的组合物、方法、用途和试剂盒的一个实施方案中，上文提及的组合物包含一枝黄花提取物(即，经研磨和干燥或冻干的完整一枝黄花或其部分(例如花和/或叶))。在一个实施方案中，上文提及的组合物包含一枝黄花的地上部位(完整或其提取物)。在一个实施方案中，所述一枝黄花提取物为CO₂提取物。在一个优选的实施方案中，上文提及的一枝黄花提取物为醇提物。

在上文所述的组合物、方法、用途和试剂盒的一个实施方案中，上文提及的醇提物为水醇提物。在一个实施方案中，用于制备所述水醇提物的醇包含伯醇。可根据本发明使用的伯醇的非限定性实例包括甲醇、乙醇、1-丙醇、1-丁醇或其组合。在一个实施方案中，用于制备所述水醇提物的醇包含仲醇。所述仲醇的非限定性实例包括2-丙醇、2-丁醇或其组合。在一个实施方案中，用于制备所述水醇提物的醇包含叔醇，诸如2-甲基-2-丙醇。在一个实施方案中，用于制备所述水醇提物的醇包含多元醇。多元醇的非限定性实例包括乙二醇、丙二醇、二乙二醇、二丙二醇、1，3-丁二醇或其组合。在特定的实施方案中，用于制备所述水醇提物的醇为乙醇。

在上文所述的组合物、方法、用途和试剂盒的一个实施方案中，使用至少两种不同的醇的混合物来制备上文提及的醇提物。

在上文所述的组合物、方法、用途和试剂盒的一个特定实施方案中，上文提及的本发明的醇提物可使用包含介于约20％与约85％之间的醇的溶液来制备。在一个实施方案中，上文提及的水醇物是使用包含约30％的醇的溶液来制备。在一个特定实施方案中，所述水醇物是使用包含约30％的乙醇的溶液来制备。

在上文所述的组合物、方法、用途和试剂盒的一个特定实施方案中，本发明的组合物包含姜和一枝黄花的组合，其量和比例使得其可协同地预防或治疗感冒或流感感染(例如，使得其降低流感或感冒病毒的感染活性，(例如)在对空斑形成单位的抑制的体外分析中，其降低水平超过各种化合物单独的抗病毒活性的总和)。

在上文所述的组合物、方法、用途和试剂盒的一个实施方案中，所述组合包含介于约1∶10与10∶1之间的姜∶一枝黄花比例。在另一个实施方案中，所述姜∶一枝黄花比例为约1∶5。在一个进一步的实施方案中，所述姜∶一枝黄花比例为约5∶1。在一个特定实施方案中，本发明的组合中使用的姜粉与一枝黄花水醇提物之间的比例为约5∶1(姜粉∶一枝黄花提取物)。在另一个特定实施方案中，本发明的组合中使用姜的CO₂提取物和一枝黄花水醇提物之间的比例为1∶5(姜粉∶一枝黄花提取物)。

在上文所述的组合物、方法、用途和试剂盒的一个特定实施方案中，上文提及的组合物包含介于约40mg与约4500mg之间的(例如，40、50、60、70、80、90、100、150、200、250、300、350、400、500、600、700、800、900、1000、1500、2000、3000、3500、4000、4500mg等)姜粉和介于约200mg与约800mg之间的(例如200、300、400、500、600、700mg)一枝黄花水醇提物。在另一个实施方案中，上文提及的组合物包含介于约2000mg与约4000mg之间的姜粉和介于约400mg与约800mg之间的一枝黄花醇提物。在另一个特定的实施方案中，上文提及的组合物包含介于约40mg与约200mg之间的(例如45、60、75、90、100、120、140、150、175mg等)姜的CO₂提取物和介于约200mg与约800mg之间的一枝黄花水醇提物。在一个优选的实施方案中，上文提及的组合物包含介于约43.5mg与约174mg之间的姜的CO₂提取物和介于约200mg与约800mg之间的一枝黄花水醇提物。

尽管在上述组合物、方法、用途和试剂盒的特定实施方案中，本发明的组合物包含如上文所定义的特定量的姜和一枝黄花，但应被施用于预防或治疗感冒流感感染的治疗有效量可能有所不同(例如，施用多于一个胶囊的情况或所述组合物每日的施用多于一次的情况)。由此，在一个实施方案中，用于预防或治疗感冒或流感感染的有效量或剂量每日包含介于约40mg与约200mg之间的(例如45、60、75、90、100、120、140、150、175mg等)姜的CO₂提取物和介于约200mg与约800mg之间的(例如200、300、400、500、600、700mg)一枝黄花水醇提物。在另一个实施方案中，用于预防或治疗感冒或流感感染的有效量或剂量每日包含介于约43.5mg与约174mg之间的姜的CO₂提取物和介于约200mg与约800mg之间的一枝黄花水醇提物。在另一个实施方案中，用于预防或治疗感冒或流感感染的有效量或剂量每日包含介于约1000mg与约4000mg之间的(例如1500、2000、3000、3500、4000mg等)姜粉和介于约200mg与约800mg之间的一枝黄花水醇提物。在一个进一步的实施方案中，用于预防或治疗感冒或流感感染的有效量或剂量每日包含介于约2000mg与约4000mg之间的(例如1500、2000、3000、3500、4000mg等)姜粉和介于约200mg与约800mg之间的一枝黄花水醇提物。在另一个实施方案中，用于预防或治疗感冒或流感感染的有效量或剂量包含介于约2000mg与约4000mg之间的姜粉和介于约400mg与约800mg之间的一枝黄花水醇提物。

上文提及的有效量的姜和一枝黄花可以用一种或多种剂量进行施用。例如，包含约43.5mg姜的CO₂提取物和约200mg一枝黄花水醇提物的组合物每日可施用2到4次。技术人员应了解如何根据受试者的年龄、性别和体重而调整所述剂量。

在上文所述的组合物、方法、用途和试剂盒的一个特定实施方案中，本发明的组合物可包含用于预防或治疗感冒或流感感染的另外的产品或提取物，或同任何另外的感冒或流感药物联合使用。另外的感冒或流感药物的非限定性实例包括Cold Fx^TM、达菲^TM、紫锥菊、人参、金刚烷胺(amantadine)、盐酸金刚乙胺(rimantadine)、维生素C等。在一个特定实施方案中，本发明的组合物进一步包含蓝莓粉。在另一个特定实施方案中，本发明的组合物包含作为预防或治疗感冒或流感感染的仅有的医药成分的姜和一枝黄花的组合。在本发明的另一个实施方案中，本发明的组合物包含来自五种不同植物的提取物，所述提取物包括作为唯一的草本提取物或作为唯一的医药成分的来自姜和一枝黄花的提取物。在一个更特定实施方案中，本发明的组合物包含来自四种不同植物的提取物，所述提取物包括作为唯一的草本提取物或作为唯一的医药成分的来自姜和一枝黄花的提取物。在一个更特定实施方案中，本发明的组合物包含来自三种不同植物的提取物，所述提取物包括作为唯一的草本提取物或作为唯一的医药成分的来自姜和一枝黄花的提取物。在一个更特定的实施方案中，本发明的组合物包含作为唯一的草本提取物的来自姜和一枝黄花的提取物。

除用于预防或治疗感冒和/或流感感染的医药成分之外，本发明的组合物可包含另外的非医药成分。例如，用于口服的制剂可包含一种或多种添加剂，如甜味剂、芳香剂、着色剂、稳定剂和防腐剂(例如抗微生物剂)。本发明的组合物可与例如惰性稀释剂的惯用的药学上可接受的载体或媒介物混合。在一个特定实施方案中，本发明的组合物另外包含以下非医药成分中的至少一种(或两种，或三种，或四种等)：微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、硬脂酸、硅溶胶、硬脂酸镁、磷酸一氢钙和卵磷脂。

可根据本发明使用任何品种的一枝黄花和姜。在一个实施方案中，所述一枝黄花的品种为一枝黄花(Solidago decurrense)、加拿大一枝黄花(Solidago canadensis)、毛果一枝黄花(Solidago virgaurea)或其任意组合。在一个特定实施方案中，所述一枝黄花的品种为毛果一枝黄花并且姜的品种为生姜。

本发明的其它目标、优点和特征将在阅读下文中对参考附图以举例说明方式给出的特定实施方案的非限定性描述之后更为明确。

附图简述

在附图中：

图1示出姜的CO₂提取物、一枝黄花提取物(ETOH)及其组合对流感病毒感染MDCK细胞单层的能力(空斑形成单位)的抑制(抗病毒)效果；

图2示出姜粉、一枝黄花提取物(ETOH)及其组合对流感病毒感染MDCK细胞单层的能力(空斑形成单位)的抑制(抗病毒)效果；

图3示出小鼠在感染流感病毒株A/WS/33后的平均死亡天数(MDD)。在感染前5天开始每天进行预防性治疗(黑色)，而从感染当日开始进行治愈性治疗(灰色)；

图4示出感染流感病毒株A/WS/33后各实验组的小鼠的体重损失百分比；

图5示出姜的CO₂提取物、一枝黄花(毛果一枝黄花)提取物(ETOH)及其组合对鼻病毒感染单层HELA细胞的能力的抑制(抗病毒)(空斑形成单位的抑制)效果；

图6示出来自各种品种(一枝黄花、毛果一枝黄花和加拿大一枝黄花)的一枝黄花提取物(ETOH和水)对流感病毒A/WS/33N H1N1感染MDCK细胞单层的能力的抑制(PFU的抑制)(抗病毒)效果；以及

图7示出姜的CO₂提取物(A)、一枝黄花提取物(ETOH)(B)和姜的CO₂提取物/一枝黄花提取物的组合(C)对流感A/CA/04/09(H1N1)病毒感染MDCK细胞单层的能力(PFU：空斑形成单位)的抑制(抗病毒)效果。

说明性实施方案的描述

本发明的申请人已意外地发现姜和一枝黄花的组合协同地降低了感冒和/或流感病毒的感染活性，由此降低了所述感染的发展、病毒滴度和相关症状。因此，本发明涉及使用共同作用以预防或治疗感冒或流感感染的姜和一枝黄花的组合以及由其得到的用于治疗的组合物和方法。

本文所用的术语“治疗(treat/treating/treatment)”和“预防(prevent/preventing/prevention)”指的是引发所需的生物学反应，即分别为治疗效果和预防效果。根据本发明，所述治疗效果包括所述感染的发展或相关症状的严重性或数量的减少/降低或所述感染和/或相关症状的完全治愈。根据本发明，预防效果可包括施用本发明的组合/组合物后，感染的发作、发展的延迟或相关症状(例如，受试者血液或细胞中出现病毒滴度、流鼻涕、鼻塞、喷嚏、喉咙痛、喉咙发痒、咳嗽、嗓子嘶哑、头部充血、胸闷、疲惫、发烧、肌肉痛、缺乏食欲、头疼和发冷)的严重性或数量的减少/降低。在一个实施方案中，包含一枝黄花和姜的组合的本发明的组合物完全使所述受试者预防感冒或流感感染。本文所述的方法、组合物、制剂和用途适用于人和动物(包括鸟类)，优选哺乳动物。

动物可受益于本发明的组合物、方法、和试剂盒。例如，猪流感和禽流感为猪、家禽和牛产业中的主要问题。近来，感染此产业的流感的两种大流行菌株H1N1(猪流感)和H5N1禽流感造成生产者的严重损失。诸如疫苗的可用预防性治疗成本过高而无法广泛使用。诸如防治性药疗(phytoremedy)的天然无抗生素治疗将有可能使鼻病毒和流感感染得到更佳控制并且提高家畜业的收益。其它动物(例如，牧业动物，包括马、绵羊、山羊等；以及宠物，如犬、猫等)也易感染流感并可从预防性治疗或早期治疗中获益。

因此，本文所使用的术语“受试者”在本发明的兽医应用上下文中涉及任何哺乳动物，包括猪、羔羊、山羊、牛(例如菜牛、小牛)、禽(例如鸡、鸭、鹅)、小鼠、大鼠、猴、猫、犬和马。在另一个特定实施方案中，受试者指的是人。“有需要的受试者”或“患者”在本发明的上下文中意在包括从本发明的姜和一枝黄花组合中受益或可能受益的任何受试者。在一个实施方案中，有需要的受试者为被诊断患有感冒或流感的受试者。在另一个实施方案中，有需要的受试者为可能感染感冒或流感的受试者或感冒或流感可能带来严重的健康后果的受试者(例如年幼儿童、年长或免疫缺陷的受试者、处于至少一只动物表现出感染症状的牧群的成员等)。感染感冒或流感的可能性可用(例如)所述疾病在受试者所处环境中的流行程度来确定，所述环境包括家庭的亲密成员(姐妹、兄弟、父母、祖父母、叔父和姨母、配偶、同事、朋友等)、牧群的成员。在一个实施方案中，有需要的受试者为罹患感冒或流感或任何相关症状的受试者。

本文所用术语“协同地”意指是两种或多种物质以协作方式一起发挥作用从而使所述组合的总效果超过每种物质分别单独作用的总和。因此，“协同地预防或治疗”感冒或流感感染或相关症状的表述的意思是，与一枝黄花和姜单独作用的效果的总和相比，本发明的组合更有效地降低感冒或流感的感染活性或减轻相关症状。这包括了减少恢复时间或提高症状缓解或减弱的速度。例如，如果在用一枝黄花和姜的组合进行治疗后，病毒感染活性/能力被抑制(例如受感染细胞培养物中空斑形成单位(PFU)的数量减少)80％，而所述病毒感染活性/能力在用一枝黄花单独进行治疗后被抑制25％并且在用姜单独进行治疗后被抑制30％(80％大于25％+30％)，那么就存在协同效果。

本文所使用的术语“感冒”指的是上呼吸道系统的一种传染性病毒感染疾病，多数由小核糖核酸病毒(包括鼻病毒)或冠状病毒引起。它还包括由副流感病毒、人呼吸道合胞病毒、腺病毒和肠病毒引起的感染。感冒的常见症状包括喉咙痛、流鼻涕、鼻部充血、咳嗽和喷嚏。

本文所使用的术语“流感”指的是来自正粘病毒(流感病毒)科的RNA病毒引起的一种传染性疾病。它感染禽类和哺乳动物。流感的常见症状包括发冷、发烧、喉咙痛、喉咙发痒、肌肉痛、头痛、胸闷、头部充血、咳嗽、虚弱、疲惫、无食欲和全身不适。

本文所使用的冠词“一(个/种)”和“所述”指的是一个(种)或多于一个(种)(即，至少一个(种))所述冠词的修饰对象。

本文所使用的术语“包括”和“包含”意思为词组“包括但不限于”和“包含但不限于”，并且所述术语与所述词组可互换使用。

本文所使用的术语“诸如”意思为“诸如但不限于”，并且所述术语与所述词组可互换使用。

提取物

本发明的组合的两种主要活性/医药成分为姜和一枝黄花、其部分或其提取物。根据本发明，制成粉末(例如，研磨和干燥或冻干)的完整的姜的根茎(rhizome)或完整一枝黄花可用于本发明的组合。或者，可使用姜的根茎提取物或一枝黄花提取物。所述提取物可以来自完整植物或其部分(例如一枝黄花的地上部分)。在一个实施方案中，所述姜提取物和/或一枝黄花提取物为粗提物(例如，粗100％的水提物)。

本文所使用的术语“粗”在“粗提物”表述中指的是未被分馏的水提物(例如，来自姜和一枝黄花的水提物)。粗提物可为任何类型的水调物(water concoction)或水煎物(water brew)，其中姜的根茎或一枝黄花被切成片段和/或研磨，任选冻干并且与水混合以获得在使用前可任选被过滤的水提物。

或者，可根据本发明使用醇提物或CO₂超临界提取物。根据本发明使用的一枝黄花和姜提取物可在家中制作或在实验室中制作或可为市售的提取物，诸可从Martin Bauer(意大利)、Flavex(德国)或Finzelberg(德国)购买的姜和一枝黄花提取物。在一个优选的实施方案中，所述姜提取物为从生姜的根茎获得的CO₂提取物，并且所述一枝黄花提取物为从毛果一枝黄花地上部分获得的水醇提取物。

本领域已知的大量标准提取技术可用于制备本发明的植物提取物。一般来说，提取工艺需要将固态植物材料与溶剂接触并充分混合并且其进行的接触时间足以保证所述固态植物材料对溶剂充分暴露从而使所述植物材料中存在的所需治疗活性(生物活性组分)可被溶剂吸收。

如上文所指出，所述植物材料来自姜和一枝黄花品种中的一种或组合，可根据本发明来使用的一枝黄花品种的非限定性实例包括：白毛一枝黄花(solidago albopilosa)、高原一枝黄花(solidagoaltiplanities)、大西洋一枝黄花(solidago arguta)、具穗一枝黄花(solidago auriculata)、双色一枝黄花(solidago bicolor)、南部一枝黄花(solidago brachyphylla)、巴克利一枝黄花(solidago buckleyi)、蓝茎一枝黄花(solidago caesia)、岩生一枝黄花(solidago calcicola)、加州一枝黄花(solidago californica)、加拿大一枝黄花、卡特勒阿尔卑斯一枝黄花(solidago cutleri)、迪姆一枝黄花(solidago deamii)、一枝黄花、暗色一枝黄花(solidago discoidea)、松泥一枝黄花(solidagofistulosa)、山地一枝黄花(solidago flaccidifolia)、锯齿一枝黄花(solidago flexicaulis)、solidago gattingeri、巨一枝黄花(solidagogigantea)、簇生一枝黄花(solidago glomerata)、维吉尼亚一枝黄花(solidago gracillima)、solidago guiradonis、绒毛一枝黄花(solidagohispida)、朱丽叶一枝黄花(solidago juliae)、solidago juncea、埃利奥特一枝黄花(solidago latissimifolia)、莱文沃思一枝黄花(solidagoleavenworthii)、路易斯安那一枝黄花(solidago ludoviciana)、大叶一枝黄花(solidago macrophylla)、密苏里一枝黄花(solidagomissouriensis)、柔绒一枝黄花(solidago mollis)、落基山一枝黄花(solidago multiradiata)、幼小一枝黄花(solidago nana)、灰一枝黄花(solidago nemoralis)、甘香一枝黄花(solidago odora)、沃希托山一枝黄花(solidago ouachitensis)、园叶一枝黄花(solidago patula)、糙绒一枝黄花(solidago petiolaris)、松荫一枝黄花(solidagopinetorum)、羽一枝黄花(solidago plumosa)、波特一枝黄花(solidagoporteri)、多绒一枝黄花(solidago puberula)、卡罗来纳一枝黄花(solidago pulchra)、软齿一枝黄花(solidago radula)、罗恩山一枝黄花(solidago roanensis)、糙茎一枝黄花(solidago rugosa)、岩一枝黄花和(solidago rupestris)、影一枝黄花(solidago sciaphila)、滨海一枝黄花(solidago sempervirens)、短一枝黄花(solidago shortii)、单一枝黄花(solidago simplex)、solidago simulans、华彩一枝黄花(solidago speciosa)、内华达一枝黄花(solidago spectabilis)、匙叶一枝黄花(solidago spathulata)、秋一枝黄花(solidago sphacelata)、蓝岭一枝黄花(solidago spithamaea)、大一枝黄花(solidago squarrosa)、嫩枝一枝黄花(solidago stricta)、缠叶一枝黄花(solidago tortifolia)、细叶一枝黄花(solidago tenuifolia)、沼泽一枝黄花(solidagouliginosa)、榆叶一枝黄花(solidago ulmifolia)、三脉一枝黄花(solidagovelutina)、春一枝黄花(solidago verna)、毛果一枝黄花和赖特一枝黄花(solidago wrightii)。在优选的情况下，一枝黄花的品种是一枝黄花、加拿大一枝黄花、毛果一枝黄花或其混合物。在一个特定实施方案中，所述一枝黄花品种为毛果一枝黄花。

在提取工艺中使用的植物材料可为完整的植物或其可以来自所述一种或多种植物一个或多个明显不同组织，例如，叶、根、地上部分(诸如花和茎等)。如果需要，则所述植物材料可进行处理以便于提取工艺。通常这样的处理使所述植物材料由某些手段粉碎以便向溶剂提供较大的表面积。例如，可使用研磨器或其它设备将植物材料进行机械压碎或切片，以将所述植物部分粉碎成小片或颗粒，或可将所述植物材料在液氮中冷冻并随后压碎或粉碎成小片。

在本发明涉及的制备中使用的溶剂提取工艺通常使用水性溶剂(例如水或缓冲液)、液体有机化合物或其组合来作为溶剂。当然，用于提取工艺的所有试剂对用于人和其它动物体来说必须是可接受的，或在不可接受的情况下，纯化工艺必须确保在人使用前所纯化的提取物中不含任何毒性杂质。可在制备提取物的提取工艺中用作为溶剂的示例性液体有机化合物包括但不限于以下：醇溶剂，其包括伯醇，诸如甲基醇(甲醇)、乙基醇(乙醇)、1-丙醇和1-丁醇；仲醇，诸如2-丙醇和2-丁醇；叔醇，诸如2-甲基-2-丙醇；以及液体多元醇，诸如甘油和二醇。合适的二醇包括(例如)乙二醇、丙二醇、二乙二醇、二丙二醇和1，3-丁二醇。用于植物提取的其它已知有机溶剂包括丙酮、四氢呋喃、乙腈、1，4-二噁烷、吡啶、二甲亚砜、N，N-二甲基甲酰胺、乙酸、乙醚和乙酸乙酯。

超临界提取也可被用于本发明的提取物的制备。超临界提取使用CO₂作为溶剂。在低于40℃的温度下，在压力下，CO₂处于其超临界态，即液态。其获得具有气体流动性的溶剂特质。总体上，CO₂提取装置包括在环境温度下充满液体CO₂的CO₂工作槽、用于增压和驱动循环的泵、盛有粉末状原材料的提取器、膨胀阀和用于收集提取物的分离器。另外，还有不同的热交换器以用于调节循环气体的温度条件。在提取器中建立的超临界条件下，CO₂对亲脂成分(例如，姜中的姜辣醇和姜烯酚)具有溶解特性，而CO₂在分离器中的条件下(例如，60巴，30℃)为不具溶剂能力的气相。因此，沉淀出了所述提取物并且再生了所述气体。所述CO₂随后通过冷却而液化并返回所述的工作槽从而完成了所述CO₂循环。

可将多种不同的条件用于提取工艺。通常，所述提取程序是在介于约10分钟与约72小时之间的时间段内在介于约4℃与约50℃之间的温度下进行。但是，可以使用介于约4℃与约90-100℃之间的温度，例如，介于约4℃与约70℃之间的温度。类似地，所述提取时间可取决于其它提取条件而变化，诸如使用的溶剂和温度；例如，所述提取时间可从数分钟变化到数天。对适当提取温度和时间的确定属于本领域普通人员的技能。

所述溶剂与所述植物材料之间的充分接触可通过震荡悬浮液加以促进。或者，可以使用配备了如可提高提取效率的搅拌器的提取设备。所述提取可在大气压下、正压(即，超过大气压)下或可通过(例如)抽气(真空)来建立的减压(即，低于大气压)下进行。本领域的技术人员可通过对诸如制备设施和产量的制备条件加以考虑而容易地确定或选择适当的提取条件。

本发明涵盖了，所述提取工艺可在多种规模下进行，包括已知的制备提取物的大、中和小规模方法。

在所述提取工艺之后，可将液体馏分(提取物)与固体(不溶)物质分离。所述液体和固体馏分的分离可通过本领域技术人员已知的一种或多种标准分离工艺实现，诸如多种离心或过滤工艺。在本发明的一个实施方案中，所述提取物是在提取后通过一个或多个过滤步骤而与固体物质分离。在另一个实施方案中，所述提取物是在提取后通过一系列过滤步骤而与固体物质分离。

在一个实施方案中，姜的CO₂提取物为使用有机姜(生姜的根茎或地下部分)通过CO₂提取(又称超临界提取或超临界液体CO₂提取)而获得的精油。在一个特定实施方案中，本发明的组合所包含的姜的CO₂提取物是从具有完备记录的植物材料获得并且对其总体化学指纹特征(fingerprint)进行了标准化，包括对特定标记化合物(姜辣醇和姜烯酚)进行了鉴定。在一个实施方案中，与原始植物材料相比，本发明的组合所包含的姜的提取物类型的辛辣化合物(姜烯酚和姜辣醇)被浓缩了20-25倍。这样的提取物的一个实例来自Flavex(德国)。

在一个实施方案中，所述一枝黄花提取物为通过使用醇∶水介于约20％与约85％之间的(例如25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85％)水醇混合物进行提取所获得的干燥浓缩提取物。在一个实施方案中，所述一枝黄花提取物为通过使用70％水和30％醇的混合物进行提取所获得的干燥的5-7∶1浓缩提取物。在一个特定实施方案中，醇为乙醇。在一个实施方案中，含有90％的天然提取物和10％的沉淀硅石DAB(德国药典(Deutsche Arzneibuch))。在一个特定实施方案中，本发明的组合包含的一枝黄花提取物是从具有完备记录的植物材料获得的商业提取物，对所述提取物的总体化学指纹特征进行了标准化，包括对特定标记化合物(黄酮类，可从例如Finzelberg(德国)购买)进行了鉴定。

表I概述了本发明的特定实施方案中使用的CO₂和水醇提取物的主要特征。

表I：本发明的两种示例性的基于姜或一枝黄花的活性提取物的特征

制剂

本发明的包含姜、一枝黄花、其部分或其提取物的组合的组合物可根据施用途径以多种方式来配制。本发明的组合物可以任何合适的方式进行施用，包括(例如)局部施用(局部效果，将物质直接用于需要其作用的部位，例如鼻部施用)或口服(例如舌下施用)。施用是以惯用的方式进行，优选口服。

施用途径可取决于多种因素，诸如环境和治疗目的，以及受试者的特点。因此，本发明的组合物可以任何所需方式进行配制，例如，配制在或配制为饲料、食物(例如调味料、动物饲料等)、液体(例如糖浆或免疫弹，如2-4盎司的单弹剂)、乳霜、气溶胶、喷雾、片剂、干粉、干植物、胶囊、凝胶、纳米混悬液、微凝胶剂或栓剂。优选的施用途径是以胶囊、片剂等等形式或以诸如饮料(例如，包含来自姜和一枝黄花的提取物的2-4盎司免疫弹)的液体制剂形式进行口服。本发明的组合物还可作为一枝黄花和姜的提取物的混合物以粉末形式进行提供，所述粉末可随后与水或任何其它合适的液体饮料或食物混合。

根据本发明，姜和一枝黄花或它们的提取物可与惯用的药学上可接受的的载体、稀释剂或媒介物以及适当情况下与其它辅助分子进行混合。

如上文所指出，所述组合物可进一步包含药学上/营养学上可接受的载体或赋形剂。本文所使用的“药学上可接受的的载体”或“媒介物”包括生理学上相容的任何或全部溶剂、缓冲液、分散介质、包衣(coating)、抗细菌和抗真菌剂、等渗和吸收延迟剂等。所述载体经过选择用于通过选定施用途径而进行施用。用于药学活性物质的这些介质和药剂/赋形剂/载体/非医药成分的使用在本领域中众所周知(Rowe等，Handbook of pharmaceutical excipients，2003年第四版，Pharmaceutical Press，英国伦敦)。除非传统的介质或药剂与活性化合物不相容，否则涵盖其在本发明的药物/营养/食用组合物中的使用。

可并入本发明的药物/营养/食用制剂中的非限定性药学上合适的材料包括防腐剂、增溶/稀释剂/溶剂、抗氧化剂、肠溶衣、吸收增强剂、pH调节剂和缓冲液、分散剂、包衣、抗细菌和抗真菌剂、吸收延迟剂(定时释放)、渗透压调节剂、等渗剂、防腐剂、稳定剂、表面活性剂、增稠剂、溶剂、润滑剂、着色剂、润湿剂以及色素和调味剂。用于制备适当制剂的方法在本领域中众所周知(参见例如Hendrickson，2005)。

本文所使用的表述“防腐剂”意指能够延迟或防止微生物或化学性腐败并且起保护防止变色的任何成分。在不受限定的情况下，防腐剂包括苯扎氯铵、苄索氯铵、苯甲醇、羟苯丁酯、氯丁醇、氯甲酚、甲酚、羟苯乙酯、羟苯甲酯、米吡氯铵、苯酚、苯氧乙醇、乙酸苯汞、硝酸苯汞、羟苯丙酯和硫柳汞(参见Nema，1997)。

本文所使用的术语“溶剂”意指能够促进活性成分溶解于制剂中的成分。在不受限定的情况下，其包括水、水醇溶液、乳液或混悬液，包括盐水和缓冲医药肠胃外媒介物，其包括氯化钠溶液、林格氏(Ringer′s)葡萄糖溶液、葡萄糖加氯化钠溶液、含乳糖的林格氏溶液，或不挥发性油类。静脉内媒介物可包括体液和营养补充物、电解质补充物，诸如基于林格氏葡萄糖的补充物等。

口服制剂可以颗粒、粉末、胶囊、丸剂、片剂、薄膜包衣片剂、糖衣片剂、糖浆、乳液、混悬液、分散液、气溶胶、溶液、锭剂和/或液体的形式进行施用。在一个实施方案中，本发明的组合物是以胶囊形式进行配制。其还可以作为栓剂、阴道栓剂进行施用和/或以肠胃外方式施用，例如以溶液、乳液、乳霜或混悬液的形式进行施用。其可被施用以备于延时释放，或由包衣进行防胃酸保护以便在消化道的小肠部位释放。

胶囊可含有作为单一成分的组合物或与诸如碳酸钙、磷酸钙或高岭土的固体稀释剂混合的组合物。

根据本发明的组合物可配制为液体、膏状或固体制剂，例如配制为水溶液或醇溶液、水性混悬液或乳液。

通过将活性化合物/组合物溶于水中并根据需要添加合适的着色剂、调味剂、稳定剂和增稠剂来制备适于口服的水溶液。可通过将细碎的活性组分同粘性材料一起分散于水中来制备适于口服的水悬浮物，所述粘性材料诸如天然或合成的树胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和其它众所周知的混悬剂。非水性溶剂的实例为醇、苯甲酸苄酯、丁醇、聚乙二醇、丙二醇、N，N-二甲基乙酰胺、油酸乙酯、油酸油醇酯、三油酸甘油酯、二油酸甘油酯、单油酸甘油酯、鲸蜡醇、硬脂醇、癸酸、十一烯酸、十一烷酸、月桂酸、油酸、具有8到12个碳原子的饱和脂肪酸的合成甘油酯、甘油的聚环氧乙烷衍生物、蜂蜡、甘油、矿物油、植物油，诸如但不限于玉米油、棉籽油、花生油(peanut oil)、芥花籽油、芝麻油、红花籽油、大豆油、花生油(arachisoil)、蓖麻油、亚麻籽油、大豆油、葵花籽油、橄榄油、鱼肝油及其任意组合(参见Nema，1997)。

片剂形式可包括以下一种或多种：乳糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、磷酸钙、玉米淀粉、马铃薯淀粉、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、硅溶胶、明胶、胶态二氧化硅、滑石、磷酸一氢钙、硬脂酸镁、硬脂酸及其它赋形剂、着色剂、填充剂、粘合剂、稀释剂、缓冲剂、保湿剂、防腐剂、调味剂、染料、崩解剂和药学上可相容的载体。锭剂形式可在例如蔗糖的调味剂中包含活性成分并且软锭剂可在惰性基质中包含活性成分，惰性基质的实例诸如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯胶乳液、凝胶等，其中除所述活性成分外还包含本领域已知的载体。

肠溶衣可进一步用于本发明的胶囊以抵抗与强酸性胃液的长时间接触但溶于酸性轻微或中性的小肠环境。在不受限定的情况下，乙酸邻苯二甲酸纤维素、Eudragit^TM和邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素(HPMCP)可用于本发明的组合物的肠溶衣。常用的乙酸邻苯二甲酸纤维素的浓度为核心重量的0.5-9.0％。塑化剂的添加提高了此包衣材料耐水性，并且使用这些塑化剂的制剂比单独使用乙酸邻苯二甲酸纤维素更为有效。乙酸邻苯二甲酸纤维素可与许多塑化剂相容，包括乙酰单酸甘油酯、丁基邻苯二甲酰基羟乙酸丁酯、酒石酸二丁酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸单乙二醇酯、甘油、丙二醇、三乙酸甘油酯、柠檬酸三乙酯和三丙酸甘油酯。其还可与诸如乙基纤维素的其它包衣剂组合使用于药物控制释放/定时释放制剂。

在一个实施方案中，包含本发明的姜和一枝黄花的组合的组合物可使用一种或多种可消耗载体来配制以作为食品或膳食补充剂进行施用。“可消耗载体”在本文定义为任何食品、食品成分或食品添加剂或用于将活性剂压片、囊封或进行用于口服的其它配制的任何媒介物，无论其用于人还是动物/兽医用途。对于膳食补充剂来说，本发明的组合可根据本领域中的常规方法进行混合。膳食补充剂可以多种形式进行制备，包括但不限于，液体、粉末或固体丸剂形式。本发明的提取物或组合物可单独施用或与其它化合物或提取物组合施用，包括将化合物或提取物组合将产生相加或协同效果的情况。本发明的提取物和/或组合物还可直接加入食品中并作为正常餐食的部分被摄入。本领域技术人员了解用于将这类药剂加入或并入食品中的多种方法。

剂量

本发明的组合物和制剂是以足以预防和/或治疗感冒和/或流感感染和/或缓解与感冒和/或流感相关的任何症状的量和频率进行施用。

可对受试者施用任何量的本发明的组合物，条件是所述化合物不与严重的副作用相关并且为无毒剂量。所述剂量可取决于多种因素，包括施用模式、受试者的年龄和性别。其它因素，诸如受试者的一般健康和病状以及受试者正在服用的药物，可调整本发明的组合物的剂量。通常，单剂量中含有的一枝黄花和姜(或它们的提取物)的量应为在不诱发显著毒性的情况下有效预防或治疗感冒或流感感染和一个或多个相关症状的量，即，所述组合物改善或减弱以下的一种或多种：受试者血液或细胞中出现病毒滴度、流鼻涕、鼻塞/鼻部充血、喷嚏、喉咙痛、喉咙发痒、咳嗽、嗓子嘶哑、头部充血、胸闷、全身虚弱、发烧、肌肉痛、缺乏食欲、头疼和发冷。一般来说，有效剂量不应超过加拿大、美国和欧洲药典(CA，US and EP pharmacopeia)对每种产品的单独规定。

因此，在本发明的一方面中，在感冒和/或流感和/或流感症状发作之前，包含姜和一枝黄花或其提取物的组合物(食品补充剂或食物)是作为预防性措施进行施用。在本发明的另一方面中，本发明的药物或营养用或膳食组合物与用于治疗感冒和/或流感症状的一种或多种药物组合施用。在一个进一步的方面中，一旦当受试者被诊断为感冒或流感感染或在感冒或流感症状发作之后，就施用本发明的组合物。在另一个实施方案中，本发明的组合物与用于预防和/或治疗感冒和/或流感感染的一种或多种药物组合施用，所述药物例如Cold Fx^TM、达菲^TM、紫锥菊、人参、金刚烷胺、盐酸金刚乙胺、维生素C等。

本文所用的表述“有效量”或“治疗有效量”意指有效于实现所需治疗效果的量，所述治疗效果例如改善患者的病状同时避免了不良副作用。有效量可以用一次剂量或多次剂量进行施用。出于本发明的目的，本发明的组合物的有效量是诱导对感冒和/或流感感染的治疗性或预防性反应的量。这个量可根据感染的性质(特定类型的病毒感染)、感染的严重性、施用的模式、被感染受试者的年龄、体重和性别等而变化。本领域的技术人员可容易地并且毫无困难地确定这个有效量。一般来说，所述有效量为介于约40mg与约4500mg之间的姜(例如CO₂提取物)和介于约200mg与约800mg之间的一枝黄花(例如水醇提物)。在一个实施方案中，所述有效量为介于约43.5mg与约174mg之间的姜的CO₂提取物和介于约200mg与约400mg之间的一枝黄花水醇提物。在另一个实施方案中，上文提及的组合物包含介于约1000mg与约4500mg之间的姜粉和介于约200mg与约800mg之间的一枝黄花醇提物。在一个实施方案中，上文提及的组合物包含介于约2000mg与约4000mg之间的姜粉和介于约400mg与约800mg之间的一枝黄花醇提物。

在本发明的一个相关方面中，调整姜和一枝黄花的量之间的比例以获得抗病毒协同效果(即，对病毒感染的抑制效果超过姜和一枝黄花在单独施用时所观察到的效果的总和)。所述比例将取决于所使用的提取物的类型进行适应性调整。在一个实施方案中，姜粉与一枝黄花醇提物之间的比例介于约10∶1与约5∶3(例如8∶1、7∶1、6∶1、5∶1、5∶2等)的姜粉∶一枝黄花醇提物之间。在优选的情况下，所述比例为约5∶1的姜粉∶一枝黄花醇提物。在另一个实施方案中，姜的CO₂提取物与一枝黄花醇提物之间的比例介于约1∶15与约3∶5(例如1∶10、1∶8、1∶7、1∶6、1∶5、2∶5等)的姜的CO₂提取物∶一枝黄花醇提物之间。在优选的情况下，所述比例为约1∶5的姜的CO₂提取物∶一枝黄花醇提物。

所述有效量可每日以单次剂量或多次剂量(例如，每日单次剂量、每日两次、每日三次或每日四次)进行给予。其还可根据处方每2天、每3天或每周一次进行给予。在优选的情况下，将所述有效量每日给予两次。

对人受试者施用的有效量可通过对动物的研究来计算。使用提供小鼠到人之间的换算因子的已公布的换算表，可将剂量按比例扩大为人的等价剂量(HED)以便开始临床试验。

由于实际剂量必须由主治医生根据各个患者的独特临床因素进行谨慎选择和滴定，因此以上这些仅为简单的指导。最佳的日剂量应通过本领域已知的方法进行测定并且会受到一些因素的影响，诸如上文指出的患者年龄和其它临床相关因素。

本发明通过以下非限定性实施例进行进一步详细地说明。

实施例1

包含姜和一枝黄花的提取物的组合对流感病毒感染的体外协同抗病毒活性

申请人已经证明，单独和进行组合的姜和一枝黄花提取物在细胞模型中显示出抗病毒活性，所述细胞模型是公认的分析治疗产品的抗病毒活性的标准方法(Hayden F，1980)。这种模型使用感染了流感病毒(流感A/WS/33，H1N1)的单层MDCK(马-达二氏犬肾)细胞系，产生了可随后进行计数的裂解空斑。在这个分析模型中，当存在抗病毒药剂时，裂解空斑的数量与测试药剂的抗病毒能力成比例地降低。

使MDCK细胞(ATCC# CCL-34)的单层在6孔培养板中生长直至汇合。在感染或接种之前，将培养基去除并且使用预暖的无任何添加剂的DMEM小心地清洗细胞两次。将200μl的产品(来自Finzelberg的一枝黄花(毛果一枝黄花)的ETOH水醇提物，产品编号No.0193305和/或来自Flavex的姜(生姜)的CO₂提取物，产品编号0.14.013)以适当的稀释度加入含有2pg/ml的TPCK(用在不影响胰蛋白酶的情况下降低胰凝乳蛋白酶的活性的L-1，4′-甲苯磺酰胺基-2-苯基乙基氯甲基酮处理的胰蛋白酶)的DMEM中。使用稀释于200μl无血清的含TPCK的DMEM中的人流感病毒A/WS/33(ATCC#VR-1520)H1N1对细胞进行感染。所述平板在室温下孵育一小时。吸收之后，将所述细胞置于含有所述产品和2pg/ml TPCK的预定培养基中平铺在3ml的0.6％琼脂糖上。使用媒介物作为对照。重复进行所有分析。一旦平铺之后，就将所述平板在加湿气氛中在37℃和5％CO₂下孵育48-72小时。

孵育之后，使用中性红对所述平板进行染色。对所有的孔进行数码照相并对空斑进行计数，并计算产品的每个稀释度下的空斑抑制。

将抑制报道为与缺少产品情况下的感染相比的感染的抑制百分比。根据以下公式计算抑制百分比：

抑制百分比(％)＝[C_A-C_B/C_A]×100

其中C_A为缺少产品或植物提取物的情况下的空斑数，C_B为存在提取物的情况下的空斑数。

根据使用数据获得的曲线(未示出)，显示出一枝黄花提取物在0.04mg/ml的浓度下对流感病毒感染的抑制为50％。根据使用数据获得的曲线(未示出)，显示出姜的CO₂提取物在高于0.05mg/ml的浓度下抑制流感病毒感染，并且显示出5/1的混合物(一枝黄花/姜CO₂)在0.013/0.003mg/ml的浓度下对流感病毒感染的抑制为68％。这些结果清晰地反映了一枝黄花和姜的CO₂提取物在以5/1的比例(一枝黄花∶姜，也参见图1)混合时的协同效果。

使用姜粉(经干燥和研磨的完整的姜的根茎)替代姜的CO₂提取物获得了类似的结果(图2)。图2所示的实验的一枝黄花∶姜粉的比例为1∶5。将这些结果与达菲^TM和Cold-Fx^TM进行了比较(数据未示出)。在浓度为1mg/ml的Cold-Fx^TM情况下，未观察到抑制，而0.05mg/ml的达菲^TM对裂解空斑形成的抑制为52％。因此，两种产品在降低病毒感染方面均比本发明的一枝黄花和姜的组合的效率更低。

实施例2

一枝黄花提取物和姜粉对流感病毒感染的体内抗病毒活性

动物模型使申请人得以证明，当进行组合时，姜粉和一枝黄花提取物还具有干扰流感感染能力的体内潜力。在使用的动物模型中，将姜的植物提取物(完整的姜的根茎粉末)和一枝黄花的干燥水醇提物(来自Finzelberg，德国)进行组合以显示更加显著的活性。

姜粉、一枝黄花提取物或其组合的动物无毒剂量已在之前由申请人通过体内毒性分析确认(数据未示出)。

在公认的涉及流感病毒的预防和治疗的动物模型(Cottey R，2001)中，对姜、一枝黄花和其组合进行了分析。在本研究中，姜是以干燥植物(根茎)的CO₂提取物的形式进行分析。然而，所用的姜的干燥植物的相对量等价于实施例1中所使用的姜的CO₂提取物(等价于干燥的起始材料)。所使用的姜/一枝黄花组合还包含蓝莓干粉。这种制剂被命名为Nutracan^TM制剂并在下表II中描述。

表II：Nutracan^TM的配制

在此模型中，根据初步研究的测定(数据未示出)，使用流感菌株A/WS/33(H1N1)以1×10³的PFU对CD-1小鼠(每组10只雌性小鼠)进行鼻内接种。在感染前5天(预防组)或感染当天(治疗/治愈组)使用姜粉(125mg/kg)、一枝黄花提取物(25mg/kg)或其组合(350mg/kg的Nutracan^TM)对各组进行治疗。将姜粉、一枝黄花提取物及其组合与达菲^TM(磷酸奥司他韦，来自Roch，浓度10mg/kg，用于治疗/治愈组)和

(CVT-E002，一种源自人参的富集馏分，在加拿大作为预防/减缓感冒和流感症状的天然健康产品(NHP)出售，来自CV Technologie，浓度20mg/kg，用于预防组)进行比较。所有这些产品均进行口服。

1)根据小鼠体重对七组CD1小鼠进行随机治疗(n＝10)。对每个组的描述、对每个组的给药方案和治疗持续时间参见下文表III，2)在感染前的5天使用100μl产品的单次日剂量对预防组中的小鼠进行强制口服，3)在感染当天(第0天)，所有小鼠均在感染前4小时进行强制口服。然后，使用以含于30μl PBS中的10³PFU的流感菌株A/WS/33对所有小鼠进行接种。此过程是在异氟烷的轻度麻醉下进行。4)对全部七个组(4个预防组、2个治疗组和一个对照组)给予单次日剂量直到研究结束，例如进行8天，并且5)每天对表观症状和体重进行记录。当小鼠的一般状况(包括异常行为，由兽医确定)已恶化或体重损失超过它们体重的20％时，将小鼠处死。

表III：在动物流感感染模型中分析的小鼠组的描述

图3中的数据显示，用包含姜和一枝黄花提取物的组合进行预防性治疗的受感染的小鼠组(#4)的平均死亡天数(MDD)为7.8天，这与达菲

的治愈性治疗的效果(MDD＝7.6)相当。与对照组(MDD＝5.7)相比时，所有组的MDD均的增加。在所述研究的预防组中，一枝黄花和姜的组合(Nutracan^TM制剂)是MDD增加最大的组。一种用于预防和缓解感冒和流感症状的NHP是最低的，尽管仍具有显著性差异。在治愈组中，达菲

最为有效，但是媒介物组和所述组合(Nutracan^TM制剂)之间的差异仍然具有统计学显著性。必须注意到，每个组(预防或医疗组)与对照组之间存在着统计学差异(p＜0.002或更低)。在实验后6天，对照组中没有小鼠能继续存活，而使用治疗的实验组具有不同的存活率。

下文表IV概述了MDD值并且提供了研究中的每个组的统计学数值。与没有治疗的对照组相比，所有实验组均具有显著性数值。

表IV：所有实验组的MDD与对照组相比的p-值

还分析了提取物对感染后的体重损失量的作用。体重损失的百分比在图4中给出。感染前的5天不在图中，这是因为各组间没有显著性体重差异。应着重注意，在结束时差异较低，因为剩下的小鼠是在实验中存活下来的小鼠。

实施例3

姜和一枝黄花的提取物对感冒感染的抗病毒活性

评测了姜(CO₂提取物，来自Flavex，产品编号0.14.013)和一枝黄花(毛果一枝黄花的水醇提物，Finzelberg产品编号0193305)对人感冒感染的抗病毒活性。如下文表V和图5所示，一枝黄花和姜提取物(单独或进行组合)均抑制鼻病毒感染，尽管在测试浓度下一枝黄花显得比姜更加有效。

使用公认的分析鼻病毒空斑形成的标准方法的细胞模型来测定抗病毒活性(Fiala M，1968)。此模型使用了感染人鼻病毒的单层HeLa细胞系，其产生随后被计数的裂解空斑(受感染的细胞区域)。在所述分析模型中，当存在抗病毒药剂时，裂解空斑的数量与测试药剂的抗病毒能力成比例地降低。

使HeLa细胞(ATCC# CCL-2)的单层在6孔培养板中生长直至汇合。在感染或接种之前，将培养基去除并且使用补充了3mM MgCl₂和2％胎牛血清的预暖的DMEM小心地清洗细胞一次。将200μl的测试产品(一枝黄花和/或姜提取物)以适当的稀释度加入含有3mMMgCl₂和2％胎牛血清的DMEM中。然后，使用在200μl与测试提取物相同的培养基中进行稀释人鼻病毒1A(ATCC#VR-1559)对细胞进行感染。所述平板在33℃和5％CO₂下孵育一小时。吸收之后，将所述产品和病毒溶液除去，并将所述细胞置于含有所述产品的预定培养基中平铺在3ml含有1％琼脂糖的溶液之上。使用媒介物作为对照。重复进行所有分析。一旦平铺之后，就将所述平板在加湿气氛中在33℃和5％CO₂下孵育2天。

孵育之后，使用0.1％的结晶紫对平板进行染色。对所有的孔进行数码照相并对空斑进行计数，并计算产品的每个稀释度下的空斑形成抑制。

将抑制报道为与缺少产品情况下的感染相比的感染的抑制百分比。根据以下公式计算抑制百分比：

抑制百分比(％)＝[C_A-C_B/C_A]×100

其中C_A为缺少产品或植物提取物的情况下的空斑数，C_B为存在提取物或其组合的情况下的空斑计数。

表V：单独或进行组合的姜和一枝黄花提取物对人鼻病毒1A(HRV-1A)感染的抗病毒活性

实施例4

一枝黄花醇提物和水提物的抗病毒活性

根据实施例1所述在MDCK细胞单层上评测了不同品种的一枝黄花的水提物和醇提物对流感病毒A/WS/33H1N1的抗病毒活性。用水进行的提取如下进行：在室温下，通过在50ml水中进行24小时的搅拌，停止搅拌放置24小时并随后在1500rpm下离心7分钟，对7.5g经研磨的一枝黄花进行提取。对上清进行40μm、1.2μm、0.45μm和最终0.2μm的多重过滤。

醇提取如下进行：在10分钟回流下，将15g经研磨的一枝黄花浸渍于100ml甲醇中。对所产生的提取物进行40μm、1.2μm和最终0.2μm的多重过滤。

下文表VI和图6中提供的结果显示，对于一枝黄花和加拿大一枝黄花来说，所述醇提物在抑制病毒感染方面比水提物更加有效。对于毛果一枝黄花可观察到类似结果，尽管抑制程度较低。这一差异或许是归结于测试浓度(其浓度可能过高而无法清楚地显示此特定品种的差异)。另外，根据对水提物的观察，在所测试的品种之中，毛果一枝黄花在抑制病毒感染方面显得最为有效，紧随其后的是加拿大一枝黄花，最后为一枝黄花。

表VI：来自不同品种的一枝黄花的水提物和醇提物的抗病毒活性

实施例5

一枝黄花和姜的提取物对人大流行性H1N1/09流感病毒(猪流感病毒)的抗病毒活性

测试了一枝黄花(毛果一枝黄花)和姜的提取物(单独和/或组合)对猪流感的抗病毒活性并且与利巴韦林(Ribavarin)和奥司他韦的抗病毒活性进行了比较。

所述抗病毒和毒性分析已得到验证(Noah等，Antiviral Res.2007年1月；73(1)：50-9)。

材料和方法

细胞活力的

检测分析

对流感所诱导的CPE的测量是基于对ATP的定量，ATP为代谢活性细胞的指示物。CPE分析使用了市售的

发光法细胞活力检测试剂盒(Promega，麦迪逊，威斯康星州)并且是一种在培养物中测定细胞毒性和细胞增殖的可靠方法。方法的程序涉及将单一试剂(

试剂)直接加入培养基中的先前培养的分汇合细胞中。这将导致细胞裂解并产生与存在的ATP(为活力的生物标记)的量成比例的生物发光信号(半衰期超过5小时，取决于细胞类型)。

材料

马-达二氏犬肾细胞(MDCK)，ATCC目录号#CCL-34；人流感病毒A/CA/04/09 H1N1；CellTiter-GLO-Promega；底物-目录号#G755B；缓冲液-目录号#G765B；对照药物-利巴韦林-MPBiochemicals Inc.，目录号#196066-奥司他韦羧酸盐(Southernresearch)；以及测试化合物：(姜的CO₂提取物和一枝黄花水醇提物)。进行所述分析需要最低为一(1)毫克的每种化合物(总共2mg)。

方法

表VII：对剂量反应的测试平板方案和示例性化合物浓度H1N1/09的测试

在第1天，使MDCK细胞生长至90％汇合度，随后胰蛋白酶消化、回收、离心并以PBS清洗2次以除去残存血清。随后，将所述细胞在含有BSA的DMEM中稀释，分样到96孔平板中并且在37℃下使其附着平板18小时。

在第2天，目测确认细胞活力。将测试化合物(姜的CO₂提取物，一枝黄花水醇提物，和5∶1的一枝黄花/姜CO₂)在含BSA的培养基中稀释至适当的测试浓度，并在接种前2小时加入病毒中，重复三次。2小时后，将含病毒的化合物溶液加入各CPE中，并且将无病毒的化合物加入毒性测试孔中。平板是如下制备：1)未处理(培养基，阴性对照)；2)以最终浓度为0.01、0.04、0.12、0.37、1.1、3.3、10、30μg的姜CO₂(1∶3系列稀释，3.3的常用对数范围，8种剂量)进行处理；或者3)以最终浓度为0.07、0.214、0.62、1.85、5.56、16.67、50、150μg的一枝黄花提取物进行处理；或4)以最终浓度为0.014/0.07、0.04/0.214、0.12/0.62、0.37/1.85、1.1/5.56、3.3/16.67、10/50、30/150μg的1/5姜CO₂/一枝黄花提取物进行处理；或5)以最终浓度为0.016、0.033、0.10、0.33、1.04、3.3、10.4、33μM的奥司他韦进行处理；或6)以溶于＜1％的DMSO中的最终浓度为0.046、0.14、0.4、1.2、3.7、11.1、33.3、100μM的利巴韦林进行处理。最终孔内体积为100μl(50μl细胞+25μl药物4×(或培养基)+25μl病毒4×(或培养基))。所述对照病毒也在进行接种前在培养基中孵育2小时。

将各中条件应用于孔中：1)病毒(三次重复)-用于抗病毒效力(CPE)分析；以及2)无病毒(两次重复)-用于毒性分析。加入100TCID₅₀(在72小时内导致50％致死率的组织培养物感染剂量的100倍，在孔中的最终浓度为1×)的病毒。

在第5天(病毒添加后72小时)，使用Promega的试剂盒通过发光法分析测量细胞活力。

数据报道

随后对原始数据进行分析和汇总以提供：1)每次的处理和菌株的原始数据和剂量反应曲线；2)抑制浓度；IC50，IC90；3)每次的处理和菌株的原始数据和毒性分布；4)毒性浓度；TC50和TC90；以及5)每次的处理和菌株的治疗指数(参见下文表VIII)。

表VIII：对流感H1N1菌株A/CA/04/09的抗毒性效力

在上述方案之后，显示出一枝黄花提取物(PL208 50002)在低于0.07μg/ml的浓度下对猪流感病毒感染的抑制为50％。显示出姜的CO₂提取物在0.02μg/ml的浓度下对相同病毒感染的抑制，并且显示出混合物(一枝黄花/姜CO₂)在0.04∶0.07μg/ml的浓度下对病毒感染的抑制为50％。这些结果证明了一枝黄花提取物和姜的CO₂提取物单独或以5/1(一枝黄花∶姜，图7A-C)的比例混合后的强烈效果。将这些结果与达菲^TM和利巴韦林进行比较。与本发明的一枝黄花和姜的提取物的组合和单独的提取物相比，两种产品在降低猪流感感染方面均效率较低。

当对化合物进行单独测试时，所观察到的最高细胞活力对PL208来说是在0.21μg/ml下的99％并且对PL202来说是在0.37μg/ml下的101％。两种化合物在这些浓度下的组合产生120％的细胞活力，暗示出所述化合物在这些浓度下没有细胞毒性并且能够促进细胞生长并预防病毒所诱导的细胞死亡。根据这些数据，很清楚这种组合是药物的最佳浓度组合。虽然由于单独在这些浓度下使用的药物的细胞活力值已达或超过100％而没有精确地测定所以协同效应，但是仍然暗示出了某种程度的协同效应。

实施例6

在症状发作的48小时之内施用姜和一枝黄花的提取物改善了感冒和流感感染的治疗

申请人在接受姜和一枝黄花的提取物的人受试者的个案(anecdotic case)中已经观察到，在感冒和流感症状发作的48小时之内施用Nutracan^TM制剂(包含姜(粉末)和毛果一枝黄花(水醇)提取物-参见上文表2)大大提高了治疗的成功率。本发明的组合物因此可有益地在所述症状发作的48内施用或作为预防性治疗(即，在所述症状发作前)施用。

实施例7

包含一枝黄花水醇提物和姜的CO₂提取物的示例性口服制剂

制备了以下口服囊片制剂以用于为对本发明的组合的效力进行临床评测。所述制剂为用于口服的450mg胶囊。产品制剂描述在下文表IX中并命名为BDI-630：

表IX：为临床研究而制备的示例性口服制剂

实施例8

包含姜粉和一枝黄花提取物的组合的一次大剂量(one-shot)液体制剂对流感和鼻病毒感染的体外抗病毒活性

申请人已证明，《一次大剂量》液体制剂中的姜和一枝黄花在上文实施例1-3的细胞模型中显示出抗病毒活性。

这些实验评估了姜粉(根茎/完整的根)和一枝黄花提取物的不同组合的器官影响性质、pH值和口味(在果汁中的口味)。

表X：液体制剂组分的不同组合和量的鉴定

混合物	姜粉(g)	一枝黄花提取物(g)	60ml液体
				B	1	0.4	H2O
C	0.5	0.4	H2O
				G	1	0.2	H2O
H	0.5	0.2	H2O

浓度高于1g的姜口味不合宜因而并未进行。

测试了制剂B到H中的每一种对流感和1A与2型鼻病毒的抗病毒活性，并且分别在表XI到XIII中报道结果。

表XI：在MDCK细胞上对流感菌株A/WS/33的抗病毒效力

*这些结果提供为μg姜粉/μg一枝黄花提取物/ml

表XII：在HeLa细胞上对1A型鼻病毒的抗病毒效力

表XIII：在HeLa细胞上对2型鼻病毒的抗病毒效力

液体制剂(一次大剂量)在体外对感冒和鼻病毒感染具有效。在对1A型鼻病毒的分析中观察到姜粉和一枝黄花提取物之间的协同效应。在一个特定实施方案中，所述制剂可以是体积约为60ml的调味果汁。在一个更特定实施方案中，所述60ml调味果汁包含0.5g姜粉和0.3g一枝黄花提取物的比例。

实施例9

临床研究

临床研究(No.BDI-URS-09-002)目的：将使用紫锥菊胶囊作为参比产品进行的双盲研究用于评估本发明的组合(临床研究方案中名为BDI-630)在降低感冒相关症状的严重性和持续时间中的安全性和初步临床效力。在所述双盲研究中所遵循的基本方法为，在社区成年居民中(年龄介于21与60岁之间)，将一种公认的减弱感冒症状的NHP紫锥菊(Echinamide^TM-紫锥菊提取物，植物体∶提取物的比例为2.4∶1)的效果与本发明的组合进行比较。

以下为所使用的临床方案的概述

试验目的

试探性/探索性临床试验的目的在于评估根据实施例7(表IX)所述的包含从姜(生姜)获得的CO₂超临界提取物和从一枝黄花(毛果一枝黄花)获得的水醇提物的特定制剂相对

(紫锥菊)对社区成年居民(年龄介于18与60岁之间)的感冒症状的调理(缓解)的效果。

研究设计和持续时间

研究BDI-URS-09-002将为一种探索性双盲随机化对照研究，是冬季在加拿大魁北克的中心进行。将对已经患上感冒症状(在最近36小时内)并且已经签署知情同意书(ICF)的患者进行筛选以根据纳入和排除标准对他们的适任资格进行评测。

将根据医生评估临床上确诊具有感冒症状(如下文定义)的约80名患者进行随机治疗以在10天的治疗期间之后获得最少72名的可评估患者(即，预计淘汰率约为10％)。对患者随机分配BDI-630或

随机治疗的患者将在第1天(筛选和随机拜访)开始服用研究产品并且将持续总计10天。评估拜访将在第7天和第14天进行。将对患者进行长达14天的监测以做安全性评测和感冒症状评估。在14天的研究期间，将要求患者完成Wisconsin上呼吸道症状调查-21(WURSS-21)和日志(用于记录每日不良事件、伴服药物、研究产品的日剂量)。如果患者经历严重不良事件，则患者将与研究者联系并且将安排排期计划外的(紧急)拜访以由医生进行适当的诊断和治疗。

在本研究中，临床上确诊的感冒定义如下：所述患者报告下列症状中的至少两种(在最近36小时之内)：流鼻涕、鼻不通气/鼻塞、喷嚏、喉咙痛、喉咙发痒、咳嗽、嗓子嘶哑、头部充血、胸闷和感觉疲劳/疲惫。

对每位患者使用BDI-630或

进行的治疗持续时间为10天。

对每位患者的研究的总持续时间为14天。患者拜访如下进行：第1天(筛选和随机治疗)、第7天(治疗评估)和第14天(治疗后续跟踪)。

样本大小

预计将对至少120名患者进行筛选以对80名适任患者进行随机治疗(40名患者使用BDI-630，40名患者使用

)，并且约72名将完成此14天的研究，因为此研究期间约10％可能会被淘汰。

纳入标准

患者必须在研究第1天符合以下全部标准才能适任进行随机化治疗而进入本研究：1.已经签署知情同意书(ICF)；2.能够理解并且遵循设定研究程序；3.年龄介于18与60岁之间；4已由研究者使用WURSS-21问卷评估为在临床上确诊感冒的早期症状；即，患者报告下列症状中的至少两种(不超过最近36小时)：流鼻涕、鼻塞、喷嚏、喉咙痛、喉咙发痒、咳嗽、嗓子嘶哑、头部充血、胸闷、感觉疲惫；5.对于育龄妇女，从随机治疗当日起至治疗结束后两周怀孕测试为阴性并且同意避孕(使用有效的避孕方法或禁欲)；6.能够参与所有的排期拜访并且遵循所有试验程序；并且7.总体健康状态良好，根据病史、生命体征(心率、血压、口腔温度)和对以下身体系统进行的体检和研究者认为必须的其他检查来确定，耳、鼻和喉；胸、肺；腹腔；心血管；神经系统；骨骼肌；手足；皮肤/表皮；外周血管。

排除标准

在研究第1天符合以下标准中的任何一个的患者不适任进行随机治疗而进入本研究：1.根据所述研究者或临床人员确定，患者疑似患有流感(流感)、链球菌感染；哮喘、肺炎、禽流感或猪流感(H1N1)；2在随机治疗前四周内参与了疫苗、药物、医疗器械或医疗程序的研究(不涉及临床试验的在先接种是允许的)；3.已计划在当前研究期间参与任何其它临床试验或研究(并非在上一段落中所规定的研究)；4.已知或疑似具有免疫功能损伤/变更(alteration)，例如，由以下引起：(a)最近3个月内，长期使用全身性皮质类固醇(即，全身性可的松(Cortisone)、地塞米松(Dexamethasone)和/或其它免疫抑制药物，例如依木兰(Imuran))或最近15天内使用鼻用皮质类固醇或在研究期间有意向接受此类药物；(b)有以下病史：人免疫缺陷病毒(HIV)感染、乙型肝炎或丙型肝炎、肺结核、类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、胶原血管病、多发性硬化；(c)先天或后天免疫缺陷病史，免疫抑制治疗史，例如此前六个月进行的抗癌化疗或放射疗法；(d)最近3个月内接受肠胃外免疫球蛋白制剂、血液制品和/或血浆衍生品或在研究期间有意接受此类药物；或(e)使用其它的免疫调节药物(即，白介素、干扰素)；5.当前或计划使用抗凝血药(例如，华法林(warfarin)、肝素、

))、消炎药物、抗病毒药物、含皮质类固醇或抗组胺的鼻用解充血药、祛痰药、锭剂、锌、口服抗组胺、抗生素、咳嗽糖浆、睡眠药物(例如安眠药、咖啡因药)、意在治疗感冒的草本补充剂(例如，草本茶类)、

人参和维生素C(含有＜100mg维生素C的复合维生素是允许的)；6.已知对姜或一枝黄花草本植物或紫锥菊全身性过敏；7.已知对菊科(Asteraceae/Compositeae/family)(例如豚草、菊花、金盏花和雏菊)有过敏反应；8.已知的出血病症；9.已知的肾脏疾病；10.已知的血管紧张度；11.患有不稳型心绞痛或在最近3个月内患上心肌梗塞，或患有二级高血压(收缩压＞160mmHg和/或舒张压＞100mmHg)的患者；12.当前酒精成瘾或主动吸食大麻或药物成瘾(因为这将干扰患者遵循试验程序的能力)；13.计划在本研究期间或在本研究结束后30天内接受手术；或14.根据本研究者意见任何可能干扰对所述研究目的的评估或将导致违背所述方案的情况。

药物制剂

BDI-630为两种医药成分的组合：姜(生姜)的根茎的CO₂提取物和一枝黄花(毛果一枝黄花)的地上部分的水醇提物。每个BDI-630胶囊含有450mg的所述混合物和赋形剂(详细制剂参见实施例7)。

每个胶囊为含有250mg紫锥菊的商业产品。

胶囊将被置入相同的白色不透明胶囊中并且包装入用于BDI-630的相同的塑料瓶内以确保盲性(blindness)。

给药方案

从第1天到第7天：A)BDI-630：4粒胶囊/日(2粒胶囊，每日两次)；日总剂量1,800mg；或B)

4粒胶囊/日(2粒胶囊，每日两次)；每日总剂量1,000mg。

供应物将以相同的比例送至研究场所，并且标签将为一个数字(与盲化随机编码相关)，但场所的人员不了解此编码。治疗产品(BDI-630或)盛于瓶内提供，每个瓶含有10天的供应量。这些药瓶将在第1天分发给患者并且空瓶将在第14天被返还以确定守规情况并进行供应物的盘点。

在症状确诊和随机治疗后，BDI-630或

必须每日服用进行10天。评估拜访将根据下文表XIV的描述进行：

表XIV：治疗/评测拜访

¹筛选和第1天将合并到一次拜访中。所述筛选的失败者将在第1天的治疗和程序之前被排除；²排期计划外的拜访将仅对紧急SAE评估进行实施，如果其无法在第7或14天完成；³第1天的临床实验室测试(以确定基线)必须在随机治疗后但在第一次治疗剂量之前完成；⁴将收集血清以用于后续的细胞因子(肿瘤坏死因子和白介素-6)剂量定量。将这些血清保持冷冻(在-70摄氏度下)直至进行测试；⁵患者将从第1天开始持有一本日志并将每天记录数据进行14天。他们将在第7天和第14天的拜访中携带该日志；⁶第一次WUSRR-21问卷将在第1天在体检和研究者面谈之前由患者完成。所述WURSS-21问卷必须随后由患者每天完成并在第7天和第14天拜访之前或期间来完成；⁷第一剂量应在研究场所施用并且患者应在30分钟内处于观察之下(以防过敏反应，从而确保进行适当的治疗)。

伴服药物

禁止的药物/治疗：

(1)以任何其它研究药物进行的治疗；或(2)在整个研究期间使用以下药物：免疫调节药(即，白介素、干扰素)；全身性皮质类固醇(即，全身性可的松、地塞米松和/或其它免疫抑制药物，例如依木兰)；抗凝血药(例如，华法林、肝素、阿司匹林、氯吡格雷)、消炎药物、抗病毒药物、含皮质类固醇或抗组胺的鼻用解充血药；祛痰药、锭剂、锌类、口服抗组胺、抗生素、咳嗽糖浆；睡眠药物(例如安眠药、咖啡因药)；意在治疗感冒的草本补充剂(例如，草本茶类)、

人参和维生素C(含有＜100mg维生素C的复合维生素是允许的)。

允许的伴服药物：

退烧药(用于发烧患者)，即对乙酰氨基酚

和布洛芬(ibuprofen)(

或

)；以及鼻部盐水喷剂。

提前退出(Premature Withdrawal)/中断标准

在任何时刻，可根据患者自身请求或研究者的临床判断让患者退出研究。然而，会对请求退出的患者进行有力地鼓励以完成对其病例的有效性评估的适当检测以便并入本分析中。还未随机治疗的患者被视为“筛选失败者”。

经历直接过敏反应(归因于治疗产品)的患者将退出所述研究。这样的反应被定义为立即发作(给药后1小时内)的全身性过敏反应，所述反应i)与血压过低和晕厥相关；或ii)涉及两个或多个器官系统。

所述研究者还应在病例报告表(Case Report Form，CRF)和源文记载中提供关于退出原因和状况的简要评论，特别是如果治疗的终止与“缺乏效力”或“缺乏耐受性”无关的情况。

应根据临床表现跟踪对由于不良效果而被退出并且退出时所述不良效果未被解决的患者。

效力变量和分析

将对以下的效力终点)进行评估：(a)第1天与第14天之间，WURSS-21问卷中所汇总常见感冒症状的严重性的总严重性计分((total severity score)(即，流鼻涕、鼻塞、喷嚏、喉咙痛、喉咙发痒、咳嗽、嗓子嘶哑、头部充血、胸闷和感觉疲惫)的变化；(b)第1天与第14天之间，根据WURSS-21问卷中所汇总的数据的总严重性计分(即，流鼻涕、鼻塞、喷嚏、喉咙痛、喉咙发痒、咳嗽、嗓子嘶哑、头部充血、胸闷和感觉疲惫)的曲线下方面积(AUC)；(c)第1天与第14天之间，具有至少一种得分为5(适中)或更高的WURSS-21症状(即，流鼻涕、鼻塞、喷嚏、喉咙痛、喉咙发痒、咳嗽、嗓子嘶哑、头部充血、胸闷和感觉疲惫)的天数；(d)通过第1天与第14天之间汇总的WURSS-21问卷中的生活质量(QOL)问题而测量的健康相关生活质量(即，思路清晰；睡眠良好；呼吸顺畅；步行、爬楼梯、锻炼、完成每日活动；家外工作；家内工作；与他人的互动；私人生活)；(e)第1天与第14天之间针对普通感冒使用的治疗和药物的频率、类型和强度；以及(f)血清中细胞因子的水平。

安全性变量和分析

根据治疗-发生的不良事件、实验室测量(临床化学、细胞因子水平、血液病学和尿样分析)和伴服药物来评估安全性。根据类型、频率和强度对经历AE和SAE的患者数量和百分比进行评估。

统计学分析

在本研究中将对以下群体进行分析：(A)安全性群体：适任分析的患者将已接受最少一个剂量的研究产品；以及(B)治疗意向群体：适任分析的患者为已接受至少一个剂量的研究产品并且根据患者随机的分组来随机治疗的患者。

为在列联表中对变量假设进行评估，使用了对比例的Fisher精确检验(Fisher exact test)。时间重复的数据的多重比较将通过重复测量方差分析(ANOVA)来进行。另外，将使用描述性统计和图形方法对数据进行特征分析。

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Claims (155)

1.一种组合物，其包含用于预防和/或治疗感冒和/或流感感染的姜和一枝黄花的组合。

2.根据权利要求1所述的组合物，其进一步包含载体。

3.根据权利要求1或2所述的组合物，其中所述组合物包含姜提取物和/或一枝黄花提取物。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中所述组合包含姜粉。

5.根据权利要求3所述的组合物，其中所述姜提取物是姜的粗提物。

6.根据权利要求5所述的组合物，其中所述姜提取物是姜的粗100％水提物。

7.根据权利要求3所述的组合物，其中所述姜提取物是姜的CO₂提取物。

8.根据权利要求3至7中任一项所述的组合物，其中所述一枝黄花提取物是一枝黄花的粗提物。

9.根据权利要求8所述的组合物，其中所述一枝黄花提取物是一枝黄花的粗100％水提物。

10.根据权利要求3至7中任一项所述的组合物，其中所述一枝黄花提取物是一枝黄花醇提物。

11.根据权利要求10所述的组合物，其中所述一枝黄花醇提物是一枝黄花水醇提物。

12.根据权利要求11所述的组合物，其中用于制备所述水醇提物的醇包括伯醇。

13.根据权利要求12所述的组合物，其中所述伯醇为甲醇、乙醇、1-丙醇、1-丁醇或其任意组合。

14.根据权利要求13所述的组合物，其中所使用的伯醇是乙醇。

15.根据权利要求10所述的组合物，其中用于制备所述水醇提物的醇包括仲醇。

16.根据权利要求10至15中任一项所述的组合物，其中使用至少两种不同的醇的混合物。

17.根据权利要求10至16中任一项所述的组合物，其中所述醇提物是使用包含介于约20％与约85％之间的醇的溶液来制备。

18.根据权利要求17所述的组合物，其中所述提取物是使用包含60％的醇的溶液来制备。

19.根据权利要求17所述的组合物，其中所述提取物是使用包含约30％的醇的溶液来制备。

20.根据权利要求1至19中任一项所述的组合物，其中所述组合包含介于约1∶15与约10∶1之间的姜∶一枝黄花比例。

21.根据权利要求20所述的组合物，其中所述姜∶一枝黄花比例为约1∶5。

22.根据权利要求20所述的组合物，其中所述姜∶一枝黄花比例为约5∶1。

23.根据权利要求1至22中任一项所述的组合物，其中所述有效量包含介于约40mg与约4500mg之间的姜。

24.根据权利要求23所述的组合物，其包含介于约40mg与约200mg之间的姜。

25.根据权利要求24所述的组合物，其包含介于约43.5mg与约174mg之间的姜。

26.根据权利要求23所述的组合物，其包含介于约1000mg与约4500mg之间的姜。

27.根据权利要求23所述的组合物，其中所述有效量包含介于约2000mg与约4000mg之间的姜。

28.根据权利要求1至27中任一项所述的组合物，其包含介于约200mg与约800mg之间的一枝黄花。

29.根据权利要求28中任一项所述的组合物，其包含介于约400mg与约800mg之间的一枝黄花提取物。

30.根据权利要求1至29中任一项所述的组合物，其进一步包含蓝莓粉。

31.根据权利要求1至30中任一项所述的组合物，其中所述姜是生姜。

32.根据权利要求1至31中任一项所述的组合物，其中所述一枝黄花是毛果一枝黄花。

33.根据权利要求1至32中任一项所述的组合物，其中姜和一枝黄花是所述组合物中用于预防或治疗感冒或流感感染的仅有的医药成分。

34.根据权利要求1至33中任一项所述的组合物，其进一步包含作为非医药成分的微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、硬脂酸、硅溶胶、硬脂酸镁和磷酸一氢钙。

35.根据权利要求1至34中任一项所述的组合物，其中所述组合物是营养或膳食或兽医组合物。

36.根据权利要求1至35中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含在饮料或食品中。

37.根据权利要求36所述的组合物，其中所述组合物包含在2到6盎司短饮饮料中。

38.根据权利要求1至37中任一项所述的组合物，其适于在感冒或流感症状发作的48小时内施用。

39.根据权利要求1至37中任一项所述的组合物，其适于在感冒或流感症状发作的24小时内施用。

40.根据权利要求1至39中任一项所述的组合物，其适于每日施用两次。

41.根据权利要求1至40中任一项所述的组合物，其中所述组合预防或治疗以下症状中的至少一种：受试者血液或细胞中出现病毒滴度、流鼻涕、鼻塞、喷嚏、喉咙痛、喉咙发痒、咳嗽、嗓子嘶哑、头部充血、胸闷、疲惫、发烧、肌肉痛、缺乏食欲、头疼和发冷。

42.根据权利要求41所述的组合物，其中所述组合预防或治疗所述症状中的至少两种。

43.根据权利要求1至42中任一项所述的组合物，其用于预防和/或治疗感冒和/或流感感染。

44.根据权利要求1至43中任一项所述的组合物，其中所述组合协同地预防和/或治疗感冒和/或流感感染。

45.根据权利要求1至44中任一项所述的组合物，其用于预防和/或治疗流感感染。

46.根据权利要求1至44中任一项所述的组合物，其用于预防和/或治疗鼻病毒感染。

47.根据权利要求1至46中任一项所述的组合物，其用于预防感冒和/或流感感染。

48.根据权利要求1至46中任一项所述的组合物，其用于治疗感冒和/或流感感染。

49.根据权利要求1至48中任一项所述的组合物，其适于兽医学应用。

50.一种预防和/或治疗有需要的受试者的感冒和/或流感感染的方法，其包括对所述受试者施用有效量的包含姜和一枝黄花的组合的组合物，借以预防或治疗所述感冒或流感感染。

51.根据权利要求50所述的方法，其中所述组合物进一步包含载体。

52.根据权利要求50至51中任一项所述的方法，其中所述组合物包含姜提取物和/或一枝黄花提取物。

53.根据权利要求50至52中任一项所述的方法，其中所述组合物包含姜粉。

54.根据权利要求52或53所述的方法，其中所述姜提取物是姜的粗提物。

55.根据权利要求54所述的方法，其中所述姜提取物是姜的粗100％水提物。

56.根据权利要求52所述的方法，其中所述姜提取物是姜的CO₂提取物。

57.根据权利要求52至56中任一项所述的方法，其中所述一枝黄花提取物是一枝黄花的粗提物。

58.根据权利要求57所述的方法，其中所述一枝黄花提取物是一枝黄花的粗100％水提物。

59.根据权利要求52至56中任一项所述的方法，其中所述一枝黄花提取物是一枝黄花醇提物。

60.根据权利要求59所述的方法，其中所述一枝黄花醇提物是一枝黄花水醇提物。

61.根据权利要求60所述的方法，其中用于制备所述水醇提物的醇包括伯醇。

62.根据权利要求61所述的方法，其中所述伯醇包括甲醇、乙醇、1-丙醇、1-丁醇或其任意组合。

63.根据权利要求62所述的方法，其中所述伯醇是乙醇。

64.根据权利要求63所述的方法，其中用于制备所述水醇提物的醇包括仲醇。

65.根据权利要求59至64中任一项所述的方法，其中使用至少两种不同的醇的混合物来制备所述醇提物。

66.根据权利要求59至65中任一项所述的方法，其中所述醇提物是使用包含介于约20％与约85％之间的醇的溶液来制备。

67.根据权利要求66所述的方法，其中所述醇提物是使用包含约60％的醇的溶液来制备。

68.根据权利要求66所述的方法，其中所述醇提物是使用包含约30％的醇的溶液来制备。

69.根据权利要求50至68中任一项所述的方法，其中所述组合物包含介于约1∶15与约10∶1之间的姜∶一枝黄花比例。

70.根据权利要求69所述的方法，其中所述姜∶一枝黄花比例为约1∶5。

71.根据权利要求69所述的方法，其中所述姜∶一枝黄花比例为约5∶1。

72.根据权利要求50至71中任一项所述的方法，其中所述有效量包含介于约40mg与约4500mg之间的姜。

73.根据权利要求72所述的方法，其中所述有效量包含介于约40mg与约200mg之间的姜。

74.根据权利要求73所述的方法，其中所述有效量包含介于约43.5mg与约174mg之间的姜。

75.根据权利要求72所述的方法，其中所述有效量包含介于约1000mg与约4500mg之间的姜。

76.根据权利要求72所述的方法，其中所述有效量包含介于约2000mg与约4000mg之间的姜。

77.根据权利要求50至76中任一项所述的方法，其中所述有效量包含介于约200mg与约800mg之间的一枝黄花。

78.根据权利要求77所述的方法，其中所述有效量包含介于约400mg与约800mg之间的一枝黄花提取物。

79.根据权利要求50至78中任一项所述的方法，其中所述组合物进一步包含蓝莓提取物。

80.根据权利要求50至79中任一项所述的方法，其中所述姜是生姜。

81.根据权利要求50至80中任一项所述的方法，其中所述一枝黄花是毛果一枝黄花。

82.根据权利要求50至81中任一项所述的方法，其中姜和一枝黄花是所述组合物中用于治疗感冒和/或流感感染的仅有的医药成分。

83.根据权利要求50至82中任一项所述的方法，其中所述组合物进一步包含作为非医药成分的微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、硬脂酸、硅溶胶、硬脂酸镁和磷酸一氢钙。

84.根据权利要求50至83中任一项所述的方法，其中所述组合物是营养或膳食或兽医组合物。

85.根据权利要求50至83中任一项所述的方法，其中所述组合物是食品补充剂。

86.根据权利要求50至85中任一项所述的方法，其中所述组合物包含在饮料或食品中。

87.根据权利要求86所述的方法，其中所述饮料是2到6盎司短饮饮料。

88.根据权利要求50至87中任一项所述的方法，其中所述组合物是在感冒或流感症状发作的48小时内施用。

89.根据权利要求50至87中任一项所述的方法，其中所述组合物是在感冒或流感症状发作的24小时内施用。

90.根据权利要求50至89中任一项所述的方法，其中所述组合物每日施用两次。

91.根据权利要求50至90中任一项所述的方法，其中所述组合预防和/或治疗以下症状中的至少一种：受试者血液或细胞中出现病毒滴度，流鼻涕，鼻塞，喷嚏，喉咙痛，喉咙发痒，咳嗽、嗓子嘶哑，头部充血、胸闷、疲惫、发烧、肌肉痛、缺乏食欲、头疼和发冷。

92.根据权利要求91所述的方法，其中所述组合预防和/或治疗所述症状中的至少两种。

93.根据权利要求50至92中任一项所述的方法，其中所述组合协同地预防和/或治疗感冒和/或流感感染。

94.根据权利要求450至93中任一项所述的方法，其用于预防和/或治疗流感感染。

95.根据权利要求50至93中任一项所述的方法，其用于预防和/或治疗鼻病毒感染。

96.根据权利要求50至95中任一项所述的方法，其用于预防感冒和/或流感感染。

97.根据权利要求50至95中任一项所述的方法，其用于治疗感冒和/或流感感染。

98.根据权利要求50至97中任一项所述的方法，其中所述受试者是非人类的动物。

99.一种在细胞中预防和/或治疗感冒和/或流感感染的方法，其包括使所述细胞接触有效量的姜和一枝黄花的组合，借以所述组合物预防和/或降低感冒和/或流感病毒的感染活性。

100.一种预防和/或治疗感冒和/或流感感染的方法，其包括对有需要的受试者施用包含一枝黄花醇提物的组合物，借以预防和/或治疗所述感冒和/或流感感染。

101.根据权利要求99或100所述的方法或组合物，其用于预防感冒和/或流感感染。

102.如权利要求1至42任一项中所定义的组合物用于预防和/或治疗感冒和/或流感感染的用途。

103.如权利要求1至42任一项中所定义的组合物在制造用于预防和/或治疗感冒和/或流感感染的医药、营养组合物或膳食组合物中的用途。

104.根据权利要求102或103所述的用途，其中所述组合物进一步包含载体。

105.根据权利要求102至104中任一项所述的用途，其中所述组合物包含姜提取物和/或一枝黄花提取物。

106.根据权利要求102至105中任一项所述的用途，其中所述组合物包含姜粉。

107.根据权利要求105所述的用途，其中所述姜提取物是姜的粗提物。

108.根据权利要求107所述的用途，其中所述姜提取物是姜的粗100％水提物。

109.根据权利要求105所述的用途，其中所述姜提取物是姜的CO₂提取物。

110.根据权利要求105至109中任一项所述的用途，其中所述一枝黄花提取物是一枝黄花的粗提物。

111.根据权利要求110中所述的用途，其中所述一枝黄花提取物是一枝黄花的粗100％水提物。

112.根据权利要求105至109中任一项所述的用途，其中所述一枝黄花提取物是一枝黄花醇提物。

113.根据权利要求112所述的用途，其中所述一枝黄花醇提物是一枝黄花水醇提物。

114.根据权利要求113所述的用途，其中用于制备所述水醇提物的醇包括伯醇。

115.根据权利要求114所述的用途，其中所述伯醇包括甲醇、乙醇、1-丙醇、1-丁醇或其任意组合。

116.根据权利要求115所述的用途，其中所述伯醇是乙醇。

117.根据权利要求113所述的用途，其中用于制备所述水醇提物的醇包括仲醇。

118.根据权利要求112至117中任一项所述的用途，其中使用至少两种不同的醇的混合物来制备所述醇提物。

119.根据权利要求112至117中任一项所述的用途，其中所述醇提物是使用包含介于约20％与约85％之间的醇的溶液来制备。

120.根据权利要求119所述的用途，其中所述醇提物是使用包含约60％的醇的溶液来制备。

121.根据权利要求119所述的用途，其中所述醇提物是使用包含约30％的醇的溶液来制备。

122.根据权利要求102至121中任一项所述的用途，其中所述组合物包含介于约1∶15与约10∶1之间的姜∶一枝黄花比例。

123.根据权利要求122所述的用途，其中所述姜∶一枝黄花比例为约1∶5。

124.根据权利要求122所述的用途，其中所述姜∶一枝黄花比例为约5∶1。

125.根据权利要求102至124中任一项所述的用途，其中所述有效量包含介于约40mg与约4500mg之间的姜。

126.根据权利要求125所述的用途，其中所述有效量包含介于约40mg与约200mg之间的姜。

127.根据权利要求126所述的用途，其中所述有效量包含介于约43.5mg与约174mg之间的姜。

128.根据权利要求125所述的用途，其中所述有效量包含介于约1000mg与约4500mg之间的姜。

129.根据权利要求125所述的用途，其中所述有效量包含介于约2000mg与约4000mg之间的姜。

130.根据权利要求102至129中任一项所述的用途，其中所述有效量包含介于约200mg与约800mg之间的一枝黄花。

131.根据权利要求130所述的用途，其中所述有效量包含介于约400mg与约800mg之间的一枝黄花提取物。

132.根据权利要求102至131中任一项所述的用途，其中所述组合物进一步包含蓝莓提取物。

133.根据权利要求102至132中任一项所述的用途，其中所述姜是生姜。

134.根据权利要求102至133中任一项所述的用途，其中所述一枝黄花是毛果一枝黄花。

135.根据权利要求102至134中任一项所述的用途，其中姜和一枝黄花是所述组合物中用于治疗感冒和/或流感感染的仅有的医药成分。

136.根据权利要求102至135中任一项所述的用途，其中所述组合物进一步包含作为非医药成分的微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、硬脂酸、硅溶胶、硬脂酸镁和磷酸一氢钙。

137.根据权利要求102至136中任一项所述的用途，其中所述组合物是营养或膳食或兽医组合物。

138.根据权利要求102至137中任一项所述的用途，其中所述组合物是食品补充剂。

139.根据权利要求102至138中任一项所述的用途，其中所述组合物包含在饮料或食品中。

140.根据权利要求139所述的用途，其中所述饮料是2到6盎司短饮饮料。

141.根据权利要求102至140中任一项所述的用途，其中所述组合物适于在感冒或流感症状发作的48小时内施用。

142.根据权利要求102至140中任一项所述的用途，其中所述组合物适于在感冒或流感症状发作的24小时内施用。

143.根据权利要求102至142中任一项所述的用途，其中所述组合物适于每日施用两次。

144.根据权利要求102至143中任一项所述的用途，其中所述组合预防和/或治疗以下症状中的至少一种：受试者血液或细胞中出现病毒滴度，流鼻涕，鼻塞，喷嚏，喉咙痛，喉咙发痒，咳嗽、嗓子嘶哑，头部充血、胸闷、疲惫、发烧、肌肉痛、缺乏食欲、头疼和发冷。

145.根据权利要求145所述的用途，其中所述组合预防和/或治疗所述症状中的至少两种。

146.根据权利要求102至145中任一项所述的用途，其中所述组合协同地预防和/或治疗感冒和/或流感感染。

147.根据权利要求102至146中任一项所述的用途，其用于预防和/或治疗流感感染。

148.根据权利要求102至146中任一项所述的用途，其用于预防和/或治疗鼻病毒感染。

149.根据权利要求102至148中任一项所述的用途，其用于预防感冒和/或流感感染。

150.根据权利要求102至148中任一项所述的用途，其用于治疗感冒和/或流感感染。

151.根据权利要求102至150中任一项所述的用途，其用于非人类的动物。

152.有效量的姜和一枝黄花的组合用于在细胞中预防和/或治疗感冒和/或流感感染的用途。

153.一枝黄花醇提物用于预防和/或治疗感冒和/或流感感染的用途。

154.根据权利要求152或153所述的用途，其用于预防感冒和/或流感感染。

155.一种用于预防和/或治疗感冒和/或流感感染的试剂盒，其包括如权利要求1至42任一项中所定义的组合物，以及使用所述组合物以用于预防和/或治疗感冒和/或流感感染的说明书。

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