CN102657718A

CN102657718A - 一种高含量山楂黄酮的制备方法

Info

Publication number: CN102657718A
Application number: CN2012100831557A
Authority: CN
Inventors: 蒋国强
Original assignee: ANHUI SUNSHINE BIO-TECH Co Ltd
Current assignee: ANHUI SUNSHINE BIO-TECH Co Ltd
Priority date: 2012-03-26
Filing date: 2012-03-26
Publication date: 2012-09-12

Abstract

一种高含量山楂黄酮的制备方法，它涉及一种高含量山楂黄酮的提取方法。它的制备步骤为：1、以山楂片为原料，食用乙醇溶液为溶剂，提取山楂黄酮；2、将提取液进行减压过滤，收集滤液；3、回收滤液中的乙醇至无醇状态，并冷却静置；4、将收集液体过大孔吸附树脂进行吸附；5、吸附结束后用分别用酸水、纯化水进行洗柱，直至流出液体呈近中性；6、用不同浓度的食用乙醇进行梯度洗脱，收集乙醇洗脱液；7、利用高速管式离心机对洗脱液进行离心，并收集液体；8、离心后洗脱液进行浓缩，浓缩达到一定要求，进行喷雾干燥；本发明能够使所得产品杂质少、含量高、有效成分损失少、安全性较高，且溶剂、树脂都可以重复使用。

Description

一种高含量山楂黄酮的制备方法

技术领域：

本发明涉及了一种高含量提取物制备方法，具体涉及了一种以食用乙醇为溶剂，通过大孔树脂富集纯化后得到黄酮含量高的山楂提取物的方法。

背景技术：

山楂(Fructus crataegi)为蔷薇科山楂(Crataegus pannatifida Bge)属的干燥成熟果实，是我国为数不多的药食两用天然的植物资源。在《齐民要术》、《滇南本草》、《本草纲目》等多本古医书中，对其医药应用都有记载。近年来临床和实验研究表明，山楂具有降压、降血脂、预防心血管疾病、抗氧化等多种功效，已成为了食品及医药保健品行业研究的热点。黄酮类化合物是山楂中最主要的有效活性成分。目前，从山楂中分离的黄酮成分约30余种，主要是含碳键的黄酮苷类、黄酮醇及其苷类、双氧黄酮苷类、聚合黄酮类。其中黄酮类化合物中的牡荆素，是一种抗癌作用较强的药物。同时山楂提取物对心血管疾病、癌细胞体内生长、增殖和浸润转移均有一定的抑制作用。因此，研究开发高含量的山楂黄酮制备方法并将其工业化具有重要的经济价值和现实意义。

山楂果实中果胶含量很高，给提取分离工作带来了很大的很大困难，目前关于山楂黄酮的研究报道，多集中于山楂叶和山楂核，果实中提取山楂黄酮的研究相对较少。然而，在已有的从果实中提取山楂黄酮的研究中所得到的提取率较低，有效成分含量较低(10～60％)、除杂不彻底、产品纯度也不高，很难达到医药和保健行业的要求。本发明采用动态回流提取、梯度洗脱等工艺，得到了有效成分含量高、杂质少、安全性高的山楂提取物。

发明内容：

本发明的目的是提供一种高含量山楂黄酮的制备方法，它能够使所得产品杂质少、含量高、有效成分损失少、安全性较高，且溶剂、树脂都可以重复使用。

为了解决背景技术所存在的问题，本发明是采用以下技术方案：它的制备步骤为：1、以山楂片为原料，食用乙醇溶液为溶剂，提取山楂黄酮；2、将提取液进行减压过滤，收集滤液；3、回收滤液中的乙醇至无醇状态，并冷却静置；4、将收集液体过大孔吸附树脂进行吸附；5、吸附结束后用分别用酸水、纯化水进行洗柱，直至流出液体呈近中性；6、用不同浓度的食用乙醇进行梯度洗脱，收集乙醇洗脱液；7、利用高速管式离心机对洗脱液进行离心，并收集液体；8、离心后洗脱液进行浓缩，浓缩达到一定要求，进行喷雾干燥。

所述的山楂为蔷薇科山楂，属于的干燥成熟果实，是一种重要的药食两用植物资源。

所述步骤1中的食用乙醇溶液的体积分数为75％～80％，通过食用乙醇溶液进行回流、带搅拌的动态提取，料液比为1∶3，提取温度为50～60℃，提取2次，每次3h。

所述步骤2中减压过滤是利用硅藻土压滤机过滤，助滤剂为的红、白两种颜色，比例为红∶白＝3∶1，过滤压力为0.2～0.3MPa。

所述步骤3中回收乙醇的温度为55～60℃，压力为0.1MPa。

所述步骤4中大孔吸附树脂的型号为HPD600。

所述步骤5中先用体积分数1％HCl水溶液进行清洗，然后用纯化水进行正反洗。

所述步骤6中用不同浓度的食用乙醇进行梯度洗脱是依次用不同体积分数为15％、30％、75％食用乙醇溶液洗脱大孔树脂。

所述步骤7中高速管式离心机的转速为12000～14000r/min，进料的流速为8～10L/min。

所述步骤8中离心后洗脱液的温度为55～60℃，浓缩压力为0.1MPa，浓缩液中总黄酮含量在24％以上，浓缩液的固含量在30％以上。

本发明具有以下有益效果：

1、以食用乙醇水溶液为溶剂，经济、安全、无毒，而且可以重复使用。

2、提取后进行了一次过滤，除去一些大颗粒的杂质；洗脱后对洗脱液进行了高速离心，分离出洗脱液中的一些杂质；因此，除杂更彻底。

3、采用梯度洗脱，使富集在吸附柱上山楂提取物中的不同有效成分分别解吸出来，最终得到总黄酮含量较高的产品。

4、产品在提取、浓缩时的温度均在60℃以下，对产品的有效成分破坏较少；喷雾干燥时温度虽高但只是瞬间的，对产品的有效成分破坏也较低。

具体实施方式：

下面结合实施例对本发明方法作进一步说明。

实施例1：实验室小试

称取挑拣后的山楂片2kg，用纯化水进行冲洗，放入10L圆底烧瓶中，加入6L体积分数为75％的食用乙醇水溶液，安装回流装置，进行回流提取，提取水浴温度为60～65℃，回流提取3h，提取两次，合并提取液；将提取液减压抽滤，得到的滤液用旋转蒸发仪回收提取液中乙醇，回收温度为60℃，回收乙醇至无醇(用酒精计进行测定)，冷却静置2h；将预先用75％食用乙醇处理好的HPD600大孔吸附树脂装入以湿法树脂柱，装入量约为柱体积的四分之三，在树脂上端放入脱脂棉(用于阻隔杂质)，用纯化水冲洗至无醇，然后将冷却后的滤液进行上柱吸附；吸附结束后，用8倍柱体积的1％盐酸溶液进行洗柱，然后再用约15倍柱体积的纯化水进行洗柱，直到流出液的pH值在7左右；依次用2～3倍柱体积、体积分数为15％、30％、75％乙醇溶液洗脱大孔树脂，并收集乙醇洗脱液；用12000r/min的高速离心机对洗脱液进行离心，离心20min，收集离心后的液体；浓缩离心后的洗脱液，浓缩温度为58℃，压力0.1MPa，浓缩时对总黄酮含量和固含量进行监测，达到一定要求时，浓缩结束；用UV法测定浓缩液中总黄酮含量(以芦丁计)为27.23％，浓缩液中的固含量为31.54％，然后进行喷雾干燥，收集粉末过80目筛，打包称重，检测合格后，放入干燥器内保存。本次实验得到的山楂提取物0.04Kg，用UV法测定总黄酮含量(以芦丁计)为86.33％。

实例2：车间生产中试

称取挑拣后的山楂片230kg，用纯化水进行冲洗，放入带温控、搅拌装置的容积为4方的提取罐中，加入料液比为1∶3、体积分数为80％的食用乙醇水溶液，进行回流、动态提取，提取温度为50～60℃，回流提取3h，提取两次，合并两次提取液进行过滤；过滤时使用助滤剂压滤机，添加硅藻土的总量为12kg，红白的比例为3∶1，过滤压力为0.2MPa；滤液利用降膜蒸发器回收乙醇，回收温度为60℃，回收液体中不含乙醇(用酒精计进行监测)，然后将液体冷却静置至常温；将预先用体积分数75％食用乙醇处理好的HPD600大孔吸附树脂装入以湿法树脂柱，装入树脂量约200kg，用纯化水冲洗至无醇，然后将冷却后的滤液进行上柱吸附；吸附结束后，用8倍柱体积的1％盐酸溶液进行洗柱，然后再用约15倍柱体积的纯化水进行正反洗柱，直到流出液的pH值在7左右；依次用3倍柱体积、体积分数为15％、30％、75％食用乙醇溶液洗脱大孔树脂，并收集乙醇洗脱液；利用降膜蒸发器浓缩，浓缩温度为60℃，压力0.1MPa，浓缩时对总黄酮含量和固含量进行监测，达到一定要求时浓缩结束；用14000r/min的管式离心机对洗脱液进行离心，进料流速设定为8L/min，收集离心后的液体，用UV法测定浓缩后浓缩液中总黄酮含量(以芦丁计)为32.38％，浓缩液中的固含量为36.51％，然后进行喷雾干燥，收集粉末过80目筛，打包称重，检测合格后放入成品库。本次实验得到的山楂提取物4.82Kg，用UV法测定总黄酮含量(以芦丁计)为88.71％。

Claims

1.一种高含量山楂黄酮的制备方法，其特征在于它的制备步骤为：1)、以山楂片为原料，食用乙醇溶液为溶剂，提取山楂黄酮；2)、将提取液进行减压过滤，收集滤液；3)、回收滤液中的乙醇至无醇状态，并冷却静置；4)、将收集液体过大孔吸附树脂进行吸附；5)、吸附结束后用分别用酸水、纯化水进行洗柱，直至流出液体呈近中性；6)、用不同浓度的食用乙醇进行梯度洗脱，收集乙醇洗脱液；7)、利用高速管式离心机对洗脱液进行离心，并收集液体；8)、离心后洗脱液进行浓缩，浓缩达到一定要求，进行喷雾干燥。

2.根据权利要求1所述的一种高含量山楂黄酮的制备方法，其特征在于所述的步骤1)中的食用乙醇溶液的体积分数为75％～80％，通过食用乙醇溶液进行回流、带搅拌的动态提取，料液比为1∶3，提取温度为50～60℃，提取2次，每次3h。

3.根据权利要求1所述的一种高含量山楂黄酮的制备方法，其特征在于所述步骤2)中减压过滤是利用硅藻土压滤机过滤，助滤剂为的红、白两种颜色，比例为红∶白＝3∶1，过滤压力为0.2～0.3MPa。

4.根据权利要求1所述的一种高含量山楂黄酮的制备方法，其特征在于所述步骤3)中回收乙醇的温度为55～60℃，压力为0.1MPa。

5.根据权利要求1所述的一种高含量山楂黄酮的制备方法，其特征在于所述步骤4)中大孔吸附树脂的型号为HPD600。

6.根据权利要求1所述的一种高含量山楂黄酮的制备方法，其特征在于所述步骤5)中先用体积分数1％HCl水溶液进行清洗，然后用纯化水进行正反洗。

7.根据权利要求1所述的一种高含量山楂黄酮的制备方法，其特征在于所述步骤6)中用不同浓度的食用乙醇进行梯度洗脱是依次用不同体积分数为15％、30％、75％食用乙醇溶液洗脱大孔树脂。

8.根据权利要求1所述的一种高含量山楂黄酮的制备方法，其特征在于所述步骤7)中高速管式离心机的转速为12000～14000r/min，进料的流速为8～10L/min。

9.根据权利要求1所述的一种高含量山楂黄酮的制备方法，其特征在于所述步骤8)中离心后洗脱液的温度为55～60℃，浓缩压力为0.1MPa，浓缩液中总黄酮含量在24％以上，浓缩液的固含量在30％以上。