CN102643276B

CN102643276B - 一种免疫抑制剂fr901483中间体及其合成方法

Info

Publication number: CN102643276B
Application number: CN201210130574.1A
Authority: CN
Inventors: 涂永强; 马爱军
Original assignee: Lanzhou University
Current assignee: Lanzhou University
Priority date: 2012-04-28
Filing date: 2012-04-28
Publication date: 2015-02-18
Anticipated expiration: 2032-04-28
Also published as: CN102643276A

Abstract

本发明公开一种免疫抑制剂FR901483的中间体，该中间体的合成是由已知的双羟基化合物（1）出发，先在分子结构上得到叠氮基和羰基，再利用分子内施密特反应，在酸作用下，由叠氮基与羰基在分子内构建出FR901483的三环骨架结构，再在二异丙基氨基锂存在下，与叠氮磷酸二苯酯和二碳酸二叔丁酯反应，从而在三环结构骨架的羰基邻位上引入用叔丁氧羰基保护的氨基，得到本发明的免疫抑制剂FR901483中间体。采用本发明的合成方法构建FR901483的三环骨架结构时，产物收率高，操作更简便，效率更高。

Description

一种免疫抑制剂FR901483中间体及其合成方法

技术领域

本发明属于医学药物领域，具体涉及一种免疫抑制剂FR901483中间体及其合成方法。

背景技术

排异反应是异体组织进入有免疫活性宿主的不可避免的难题。一般在人体器官移植手术后，病人的免疫系统会很快识别出外来的新器官，并对新器官有强烈的排斥作用，这种排异现象是导致器官移植手术彻底失败的主要原因之一，严重时会使病人不丧失生命。为解决器官移植的排异问题，出现了免疫抑制剂的概念。目前临床常用的免疫抑制剂有环孢素A（CsA）、他克莫司（tacrolimus, FK506）、雷帕霉素（Rapamycin，简称RAPA）等，但这几种都有较大的副作用，所以寻求在临床上高活性、低毒的新型免疫抑制剂很有必要。

1996年，日本Fujisawa制药公司研究人员从柱状菌代谢物中分离得到一种新型免疫抑制剂，取名FR901483（参考文献J. Antibiot., 1996, 49, 37）。此化合物的结构和相对构型通过X单晶衍射试验证实，绝对构型是通过后期全合成来确定的。经过证实，FR901483具有阻断嘌呤，尤其是腺嘌呤生物合成的作用，其免疫抑制作用是通过抑制AMP（腺嘌呤核苷一磷酸）来抑制DNA的合成。动物实验表明FR901483在小白鼠的皮肤异体移植试验中显示能够延长异体存活时间，是很有前景的免疫抑制剂候选药物。

FR901483具有如下结构式：

虽然FR901483可以从柱状菌代谢物中提取，但是含量太少，成本太高，采用化学合成仍是最佳的途径。FR901483具有氮杂双环壬烷和吡咯烷绸合的三环结构，如何构建该绸合的三环结构成为有机合成FR901483的关键。

文献Brummond, K. M.; Hong, S.-P. J. Org. Chem. 2005, 70, 907–916.公开了一种从1,4-环已二酮单乙二醇缩酮单体出发全合成FR901483的方法，该方法化合物（1）出发，得到绸合的三环结构骨架，其总收率只有6%，且进一步在绸合的三环结构骨架上引入氨基是需要使用毒性较大的试剂如三氧化铬。

发明内容

本发明的目的是提供一种免疫抑制剂FR901483中间体及其合成方法。

一种免疫抑制剂FR901483中间体，其具有如下结构式

，

其中，R为苄基、取代苄基、烯丙基、硅烷基或酰基。

进一步，所述取代苄基为对甲氧基苄基、3,4-二甲氧基苄基、邻硝基苄基、对硝基苄基或对卤代苄基；所述硅烷基为三甲基硅基、三乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基、三苯基硅基、三异丙基硅基或三苄基硅基；所述酰基为乙酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基。

上述免疫抑制剂FR901483中间体的合成方法，该方法包括如下步骤：

（I）将化合物（5）在酸作用下，发生分子内施密特反应得到化合物（6）

；

（II）在二异丙基氨基锂存在下，化合物（6）与叠氮磷酸二苯酯和二碳酸二叔丁酯在-80～0℃反应得到免疫抑制剂FR901483的中间体。

经典的施密特反应（Schmidt反应）是指羧酸、醛或酮与等当量的叠氮酸在质子酸作用下发生重排反应，分别生成胺、腈或酰胺，是Schimdt教授于1924年发现的。Boyer教授于50年代发现了烷基叠氮参与的分子内Schmidt反应，后来的Aubé教授对此反应进行了深入研究，取得了很多实用的结果。Aubé小组主要把羰基和叠氮固定在同一个分子之中，成功的开辟了分子内Schmidt反应。

化合物（5）发生分子内施密特反应所用的酸可以为硫酸、盐酸、磷酸、乙酸、甲酸、路易斯酸或磺酸。

进一步，所述路易斯酸为四氯化钛、三氟化硼乙醚络合物、三氯化铝、甲基二氯化铝或二甲基氯化铝；

所述磺酸为甲烷磺酸、三氟甲磺酸、氟磺酸、氯磺酸或全氟-1-丁磺酸（CAS号 375-73-5）。

化合物（5）发生分子内施密特反应所用的溶剂可以为二氯甲烷、氯仿、乙醚、四氢呋喃、丙酮、苯、甲苯。

化合物（5）发生分子内施密特反应时的反应温为-78℃～25℃。

进一步，化合物（5）发生分子内施密特反应时的反应温为-78℃～0℃。

更进一步，化合物（5）发生分子内施密特反应时的反应温为-30℃～0℃。

进一步，步骤（II）的反应温度为-80～-45℃。

更进一步，步骤（II）的反应温度为-78～-55℃。

更进一步，步骤（II）的反应温度为-78～-72℃。

更进一步，步骤（II）的反应温度为-78℃。

所述的二异丙基氨基锂在使用前制备，具体是将二异丙胺溶于四氢呋喃中，再滴加正丁基锂得到。

进一步，化合物（5）可依如下步骤得到：

a）化合物（1）在碱条件下，引入羟基保护基团R，得到羟基保护的化合物（2）；

b)在四正丁基氟化铵存在下，脱除化合物（2）N位上的叔丁氧羰基，再与1H-咪唑-1-磺酰基叠氮盐酸盐反应得到具有叠氮基团的化合物（3）；

c)化合物（3）经对甲苯磺酸处理得到化合物（4）；

d)化合物（4）在氢氧化钾作用下，与环丙基二苯基锍四氟硼酸盐反应，得到化合物（5）。

化合物（1）可采用文献J. Org. Chem. 2005, 70, 907–916.的方法合成。

步骤a）中化合物（1）与含苄基、取代苄基、烯丙基、硅烷基或酰基的化合物在碱性条件下反应得到引入了羟基保护基团R的化合物（2），其中，

所述含苄基的化合物可以是溴化苄、氯化苄或碘化苄；

所述含取代苄基的化合物为相应的取代苄基溴或取代苄基氯（例如含对甲氧基苄基的化合物可以为对甲氧基苄基溴或对甲氧基苄基氯）；

所述含硅烷基的化合物为相应的氯硅烷（例如叔丁基二苯基硅基由叔丁基二苯基氯硅烷提供）；

所述含酰基的化合物为相应的酰氯或酸酐（例如乙酰基由乙酰氯或乙酸酐提供）。

步骤a）中所述碱可以为：咪唑、醇钠、三乙胺、吡啶、2,6-二甲基吡啶、二异丙胺、N,N-二异丙基乙基胺、氢化钠、氢化钾、叔丁醇钾、氢氧化钠、氢氧化钾，但不限于这些。

步骤a）反应时所用的溶剂可以为：二氯甲烷、N,N-二甲基甲酰胺、氯仿、四氢呋喃、苯、甲苯、乙醚等有机溶剂。

步骤a）引入羟基保护基团R时，当引入的保护基团为苄基、取代苄基或烯丙基时，可加入添加剂四正丁基碘化胺；当引入的保护基团为硅烷基或酰基时，加入的添加剂为4-二甲氨基吡啶。

步骤b）中，脱除化合物（2）N位上叔丁氧羰基的方法：化合物（2）先与叔丁基二甲硅基三氟甲磺酸酯反应，在其N位上引入叔丁基二甲基硅氧基，然后用四正丁基氟化铵脱除化合物（2）N位上的叔丁基二甲基硅氧基和叔丁氧羰基得到一级胺；不经纯化，粗产物再在硫酸铜和碳酸钾作用下，与1H-咪唑-1-磺酰基叠氮盐酸盐在温度为0～5℃发生叠氮化反应，得到化合物（3）。

步骤d）中所使用的环丙基二苯基锍四氟硼酸盐的制备方法可参考文献Org. Synth. 1974, 54, 27.。

步骤d）的产物中还存在化合物（5）的差向异构体化合物（5i），

如果采用盐酸淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，经洗涤、干燥、柱层析分离得到的化合物（5）与化合物（5i）的收率比约为1.4:1；

如果步骤d）反应后加水淬灭，萃取、干燥得到粗产物，粗产物先用硼氢化钠和二苯基二硒处理，再用间氯过氧苯甲酸和吡啶处理，经过处理后的化合物（5）与化合物（5i）的收率比可提高到4:1。

为了从免疫抑制剂FR901483的中间体化合物（7）得最终的免疫抑制剂FR901483，可先脱除化合物（7）上的羟基保护基团R，得到化合物（8），脱除羟基保护基团的方法，本领域技术人员容易根据保护基团的不同，选择采用酸、碱或钯碳催化剂脱除保护基团。

化合物（8）先用LiAlH₄还原，再与氯甲酸苄酯在三乙胺存在下反应得到化合物（9）

。

化合物（9）再依照文献Org. Lett. 2001, 3, 1125–1128.的方法在其骨架上引入磷酸基团，得到FR901483。

本发明中，除有特别说明外，各结构式中的Boc表示叔丁氧羰基，Ph表示苯基，Cbz表示苄氧羰基，Et表示乙基，Bn表示苄基。

本发明有益效果：本发明合成了一种新的免疫抑制剂FR901483中间体，在合成该中间体时，本发明利用分子内施密特反应，完成三环结构骨架的构建，与现有技术相比，由化合物（1）出发得到绸合的三环结构骨架的总收率可达到21%，分子内施密特反应得到化合物（6）这一步的收率可达到67%；进一步在三环结构骨架上引入氨基时，同时也完成了将氨基用叔丁氧羰基保护的过程，与现有技术通常采用的先引叠氮基再还原最后保护方法相比，本发明操作更简便，效率更高，不需要使用毒性大的三氧化铬，得到的化合物（7）与化合物（7i）的收率比约为2:1，且这两个差向异构体采用柱层析即可分离。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步说明。

实施例中柱层析所用硅胶为青岛谱科分离材料有限公司型号zcx-II，洗脱剂采用石油醚（60-90℃）和乙酸乙酯。

实施例1

化合物（2）的制备（羟基保护基团R为Bn）

将化合物（1）（5.029g，11.51mmol）溶于25ml N,N-二甲基甲酰胺中，冰水浴下，依次加入四正丁基碘化铵（0.425g，1.15mmol）、溴化苄（3.44ml，28.77mmol）和质量纯度为60%的氢化钠（1.151g，28.77mmol），加入完毕后立即撤出冰水浴，室温搅拌至反应完全，加水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，依次用水、饱和食盐水洗涤有机相，有机相再用无水硫酸镁干燥，过滤，滤液浓缩，浓缩液再柱层析，得到无色油状液体，即为化合物（2）（5.042g，收率为71%）。化合物（2）表征结果如下

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ7.38－7.26 (m, 8H), 7.13 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 6.92 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.64 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.90 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 11.6 ,Hz, 1H), 4.44－4.35 (m, 2H), 4.00－3.97 (m, 2H), 3.93－3.91 (m, 6H), 3.63 (s, 3H), 3.36－3.31 (m, 1H), 2.78－2.73 (m, 1H), 2.70－2.64 (m, 1H), 2.43－2.37 (m, 1H), 2.21－2.10 (m, 1H), 1.96－1.93 (m, 1H), 1.76－1.74 (m, 1H), 1.56－1.53 (m, 2H), 1.42 (s, 9H);

¹³C NMR (400 MHz, CDCl₃) δ157.9, 155.1, 139.0, 138.5, 130.5, 130.3, 128.4, 128.3, 128.1, 127.8, 127.1, 113.7, 108.5, 79.1,75.7, 71.5, 70.2, 64.3, 55.0, 51.8, 41.2, 39.9, 32.6, 32.3, 28.5, 27.9.

HRMS: (M + H)⁺ calcd for C₃₇H₄₇NO₇ + H, 618.3425; found, 618.3431.。

实施例2

将化合物（2）（11.63g，18.86mmol）溶于150ml二氯甲烷中，冰水浴下，加入2,6-二甲基吡啶（8.76ml,37.71mmol），搅拌2分钟后，滴加叔丁基二甲基硅基三氟甲磺酸酯（6.57ml,56.57mmol），反应1小时，用饱和氯化铵溶液淬灭反应，再用乙酸乙酯萃取，用饱和食盐水洗涤有机相，有机相再用无水硫酸镁干燥，过滤，滤液浓缩1。

将上述浓缩液1溶于100ml四氢呋喃，冰水浴下滴入50ml四正丁基氟化铵（4.922g，18.86mmol）的四氢呋喃溶液，滴完后，反应半小时，用水淬灭反应，用乙醚萃取反应液，饱和食盐水洗涤有机相，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩2。

将上述浓缩液2溶于100ml甲醇，冰水浴下依次加入碳酸钾（7.86g，56.58mmol），五水合硫酸铜（2.36g，9.43mmol）和咪唑磺酰基叠氮（4.71g,22.63mmol），保持冰水浴反应24小时，升至室温。将体系溶剂旋转蒸发，加浓盐酸使析出物溶解，用乙醚萃取，再用饱和食盐水洗涤有机相，有机相用无水硫酸镁干燥，过滤，滤液浓缩后，柱层析得到白色固体（8.4g，收率为82%），即化合物（3）。化合物（3）的表征结果如下

¹H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.43－7.37 (m, 4H), 7.35－7.28 (m, 4H), 7.28－7.27 (m, 2H), 6.88 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.72 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.68 (dd, J = 12.0, 3.2 Hz ,2H), 4.57 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 3.95 (d, J = 8.0 Hz, 4H), 3.76 (s, 3H), 3.72－3.68 (m, 1H), 3.66－3.64 (m, 1H), 2.96 (dd, J = 12.0, 8.4, 5.2 Hz, 1H), 2.76 (q, 1H), 2.47－2.40 (m, 1H), 2.23－2.18 (m, 1H), 1.97－1.92 (m, 1H), 1.86－1.80 (m, 2H), 1.69－1.58 (m, 2H);

¹³C NMR (100 MHz, CDCl3)δ158.1, 138.5, 138.4, 130.0, 129.9, 128.3, 128.3, 127.9, 127.5, 127.4, 113.8, 108.4, 81.5, 76.8, 73.3, 70.5, 64.9, 64.4, 64.3, 55.1, 41.4, 36.8, 35.2, 32.4, 27.7.

HRMS: (M + Na)⁺ calcd for C₃₂H₃₇N₃O₅ + Na, 566.2625; found, 566.2632.。

实施例3

将化合物3（4.23 g，7.79 mmol）溶于50 mL丙酮：水（体积比为10：1）的混合溶剂中，加入对甲苯磺酸（0.74 g，3.90 mmol），回流至反应完全。降温后加少量饱和碳酸氢钠溶液淬灭，旋转蒸发掉溶剂，加水，再用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液浓缩后柱层析得白色固体（4.33 g，收率为97％），即化合物（4）。化合物（4）的表征结果如下

¹H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.39－7.30 (m, 10H), 6.92 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.76 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.70 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.58 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.43 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.91 (td, J = 7.2, 3.2 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.69－3.64 (m, 1H), 3.47 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 2.89 (dd, J = 14.8, 4.8 Hz, 1H), 2.73－2.63 (m, 2H), 2.56－2.44 (m, 3H), 2.32－2.26 (m, 2H), 1.93－1.87 (m, 1H);

¹³C NMR (100 MHz, CDCl3)δ300.0, 158.4, 137.9, 137.8, 130.0, 129.3, 128.5, 128.4, 127.8, 127.8, 127.8, 113.9, 81.8, 74.3, 74.2, 70.7, 65.3, 55.2, 43.6, 41.1, 37.0, 36.7, 28.0.

HRMS: (M + Na)⁺ calcd for C₃₀H₃₃N₃O₄ + Na, 522.2363; found, 522.2363.。

实施例4

将化合物4（3.0 g，6.012 mmol）溶于20 mL二甲基亚砜中，室温加入环丙基二苯基锍四氟硼酸盐（2.19 g，6.97 mmol），加入氢氧化钾（0.56 g，10.04 mmol），原料消失后加水淬灭，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，浓缩得粗产物，备用。将硼氢化钠（0.334 g，8.84 mmol）加入二苯基二硒（0.99 g，3.17 mmol）的无水乙醇溶液中，体系颜色由黄变为无色，将粗产物加入此体系中，室温反应2小时，饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，二氯甲烷萃取。饱和碳酸氢钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。浓缩后加入100 mL正己烷中，在零下三十摄氏度，加入85％间氯过氧苯甲酸（1.48 g，7.30 mmol）的二氯甲烷溶液，接着加入2 mL的吡啶，保持零下三十摄氏度反应过夜后缓慢升至室温，将体系倒入100 mL 3 mol/L的盐酸溶液淬灭，乙酸乙酯萃取，有机相依次用水、饱和碳酸氢钠溶液和饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液浓缩后柱层析得化合物5（1.85 g，收率为57％）和差向异构体（0.45 g，收率为14％）。

化合物（5）的表征结果如下

¹H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.40－7.37 (m, 4H), 7.35－7.31 (m, 4H), 7.23－7.21 (m, 2H), 6.86 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.71 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.66 (dd, J = 22.0, 11.6 Hz, 2H), 4.55 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.23 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.71 (t, J = 4Hz, 1H), 3.61－3.57 (m, 1H), 3.82 (m, 1H), 3.01 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 2.91 (dd, J = 13.6, 5.6 Hz, 1H), 2.75 (dd, J = 13.6, 8.4 Hz, 1H), 2.25－2.21 (m, 1H), 2.09-2.03 (m, 1H), 1.95－1.91 (m, 2H), 1.89－1.77 (m, 3H), 1.62－1.54 (m, 1H), 1.42－1.32 (m, 1H);

¹³C NMR (100 MHz, CDCl3)δ214.5, 158.2, 138.4, 138.2, 130.0, 129.7, 128.4, 128.4, 127.9, 127.7, 127.6, 127.6, 113.9, 81.2, 77.2, 73.4, 70.6, 65.6, 64.5, 55.1, 41.9, 40.6, 36.8, 32.0, 29.4, 27.3, 23.5.

HRMS: (M + Na)⁺ calcd for C₃₃H₃₇N₃O₄ + Na, 562.2676; found, 562.2681.。

实施例5

将化合物5（1.07 g，1.98 mmol）溶于20 mL二氯甲烷中，零摄氏度滴入三氟甲磺酸，反应完全后，加饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应。升至室温后，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液浓缩后柱层析得白色固体（0.404 g，收率为40％），即化合物（6）。

实施例6

将化合物5（1.07 g，1.98 mmol）溶于20 mL二氯甲烷中，零下三十摄氏度滴入氯磺酸，反应完全后，加饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应。升至室温后，乙酸乙酯萃取，有机相饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液浓缩后柱层析得白色固体（0.678 g，收率为67％），即化合物（6）。化合物（6）的表征结果如下

¹H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.39－7.30 (m, 10H), 7.16 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.81 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.49 (dd, J = 24, 12 Hz, 2H), 4.36 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.27－4.21 (m, 2H), 4.03 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.42 (s, 1H), 3.13－3.07 (m, 2H), 2.55 (s, 1H), 2.52－2.43 (m, 1H), 2.39－2.31 (m, 1H), 1.99－1.73 (m, 9H);

¹³C NMR (100 MHz, CDCl3)δ 176.3, 157.7, 138.5, 138.3, 131.8, 130.3, 128.4, 128.3, 127.6, 127.4, 127.3, 127.2, 113.5, 74.2, 73.8, 70.7, 70.3, 60.8, 58.5, 55.2, 55.1, 36.3, 33.9, 33.6, 32.6, 30.7, 28.9, 26.0.

HRMS: (M + H)⁺ calcd for C₃₃H₃₇NO₄ + H, 512.2795; found, 512.2800。

实施例7

冰水浴下将二异丙胺（0.39 mL，2.748 mmol）溶于15 mL四氢呋喃中，滴加1.6 mol/L正丁基锂的正己烷溶液（1.6 mL，2.545 mmol），保持在此温度下搅拌半小时后降至零下78摄氏度，氩气氛下滴入化合物（6）（0.52 g ，1.018 mmol）的四氢呋喃溶液（约10 mL），搅拌两分钟后升至零摄氏度，继续搅拌30分钟。再次降温至零下78摄氏度，加入叠氮磷酸二苯酯（0.548 mL，2.545mmol），15分钟后，滴入二碳酸二叔丁酯（0.555 g，2.545 mmol）的四氢呋喃溶液（约5 mL）。保持零下78摄氏度反应过夜后，升至室温，加水淬灭，并在室温搅拌1小时。乙酸乙酯萃取反应液，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩后柱层析得无色油状液体，即化合物（7）（0.63g，收率为56.7%）和差向异构体(7i)（0.24g，收率为28.3％）

。

化合物（7）的表征结果如下

¹H NMR (400 MHz, CDCl3)δ7.40－7.25 (m, 10H), 7.07 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.81 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.10 (bs, 1H), 4.53 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.42 (dd, J = 16.8, 12.0 Hz, 1H), 4.28 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.23－4.18 (m, 1H), 3.98－3.88 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.48 (dd, J = 13.2, 9.6 Hz, 1H), 3.32 (s, 1H), 3.01 (s, 1H), 2.53 (s, 1H), 2.47－2.45 (m, 1H), 2.05－1.85 (m, 4H), 1.80－1.72 (m, 2H), 1.59 (dd, J = 12.6, 9.8 Hz, 1H), 1.46 (s, 9H);

¹³C NMR (100 MHz, CDCl3)δ 172.6, 157.9, 156.1, 138.3, 138.2, 131.6, 129.9, 128.9, 128.4, 128.2, 127.6, 127.5, 127.4, 127.1, 127.0, 113.8, 79.7, 74.2, 73.6, 70.6, 70.4, 59.2, 58.1, 55.2, 55.1, 52.1, 41.6, 36.0, 33.2, 33.0, 28.3, 27.0, 26.4.

HRMS: (M + H)⁺ calcd for C₃₈H₄₆N₂O₆+ H, 627.3429; found, 627.3439。

实施例8

化合物（7）（0.3441 g，0.55 mmol）溶于5 mL甲醇中，加入氢氧化钯/碳（1.1 g），通氢气搅拌至反应完全，滤掉固体（回收），并用甲醇洗涤。滤液浓缩后柱层析得白色固体8（0.189 g，收率为77％）。

¹H NMR (400 MHz, CDCl3)δ 7.20 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.80 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.19 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 4.31 (s, 1H), 3.92－3.85 (m, 2H), 3.76 (m, 4H), 3.43 (s, 1H), 3.36 (dd, J = 13.0, 10.2 Hz, 1H), 2.99 (s, 2H), 2.40－2.34 (m, 1H), 2.19 (s, 1H), 2.06－1.97 (m, 2H), 1.92－1.80 (m, 2H), 1.74－1.66 (m，2H), 1.57 (m, 1H), 1.41 (s, 9H);

¹³C NMR (100 MHz, CDCl3)δ173.4, 158.0, 156.1, 131.3, 130.0, 113.9, 79.9, 66.9, 66.2, 59.5, 58.3, 55.2, 55.2, 52.0, 44.2, 41.1, 33.1, 32.6, 29.0, 28.3, 26.4.

HRMS: (M + H)⁺ calcd for C₂₄H₃₄N₂O₆ + H, 447.2490; found, 447.2498。

实施例9

化合物8（0.189 g，0.423 mmol）溶于5 mL四氢呋喃中，冰水浴下，小心加入氢化铝锂（0.161 g，4.23 mmol），升温至80摄氏度回流反应，反应完全后依次加水，10％氢氧化钠溶液和水淬灭反应，搅拌澄清后，滤掉絮状沉淀，滤液用乙酸乙酯萃取，少许饱和食盐水洗涤后，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩后直接溶于10 mL二氯甲烷，室温下加入氯甲酸苄酯（0.09 mL，0.635 mmol），然后加入三乙胺（0.076 mL，1.057 mmol），室温反应完全后，旋转蒸发干溶剂，柱层析得化合物9（0.142 g，收率为70％）。

¹H NMR (400 MHz, CDCl3)δ7.33－7.30 (m, 5H), 7.29 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.78 (d, J = 8.8 Hz,2H), 5.07 (brs, 2H), 4.20 (brs, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.22－3.67 (m, 3H), 3.42－3.08 (m, 4H), 3.05 (s, 3H)，2.48－1.78 (m, 11H);

¹³C NMR (100 MHz, CDCl3)δ158.7, 156.9, 136.2, 130.7, 128.7, 128.3, 127.9, 114.2, 67.7, 66.9, 65.0, 63.7, 60.4, 55.3, 51.2, 50.5, 42.5, 40.2,32.6, 30.4, 28.1, 27.2,21.6.

HRMS: (M + H)⁺ calcd for C₂₈H₃₆N₂O₅ + H, 481.2697; found, 481.2700.。

Claims

1.一种免疫抑制剂FR901483中间体的合成方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

；

（II）在二异丙基氨基锂存在下，化合物（6）与叠氮磷酸二苯酯和二碳酸二叔丁酯在-80～0℃反应得到免疫抑制剂FR901483的中间体；

所述化合物（5）发生分子内施密特反应的温度为-78℃～25℃；

所述免疫抑制剂FR901483中间体具有如下结构式

，

其中，R为苄基、取代苄基、烯丙基、硅烷基或酰基。

2.根据权利要求1所述免疫抑制剂FR901483中间体的合成方法，其特征在于：所述取代苄基为对甲氧基苄基、3,4-二甲氧基苄基、邻硝基苄基、对硝基苄基或对卤代苄基；所述硅烷基为三甲基硅基、三乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基、三苯基硅基、三异丙基硅基或三苄基硅基；所述酰基为乙酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基。

3.根据权利要求1所述免疫抑制剂FR901483中间体的合成方法，其特征在于，步骤（I）中，所述酸为硫酸、盐酸、磷酸、乙酸、甲酸、路易斯酸或磺酸。

4.根据权利要求1所述免疫抑制剂FR901483中间体的合成方法，其特征在于：所述化合物（5）按如下步骤得到：

a）化合物（1）在碱条件下，引入羟基保护基团R，得到羟基保护的化合物（2）

；

b)在四正丁基氟化铵存在下，脱除化合物（2）N位上的叔丁氧羰基，再与1H-咪唑-1-磺酰基叠氮盐酸盐反应得到具有叠氮基团的化合物（3）

；

c)化合物（3）经对甲苯磺酸处理得到化合物（4）

；

d)化合物（4）在氢氧化钾作用下，与环丙基二苯基锍四氟硼酸盐反应，得到化合物（5）

。

5.根据权利要求4所述免疫抑制剂FR901483中间体的合成方法，其特征在于：步骤a）中所述碱为咪唑、醇钠、三乙胺、吡啶、2,6-二甲基吡啶、二异丙胺、N,N-二异丙基乙基胺、氢化钠、氢化钾、叔丁醇钾、氢氧化钠或氢氧化钾。

6.根据权利要求4所述免疫抑制剂FR901483中间体的合成方法，其特征在于，步骤b）中脱除化合物（2）N位上叔丁氧羰基的方法为：化合物（2）先与叔丁基二甲硅基三氟甲磺酸酯反应，在其N位上引入叔丁基二甲基硅氧基，然后用四正丁基氟化铵脱除化合物（2）N位上的叔丁基二甲基硅氧基和叔丁氧羰基。