CN102579528B - 一种防治前列腺疾病的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有防治前列腺炎和前列腺增生等疾病的积雪草药物组合物，该组合物是从伞形科植物积雪草Centella asiatica(L.)Urban的干燥全草或带根全草提取纯化而得。该组合物特征在于是由积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草苷B、槲皮素、山奈酚等物质所组成。经药理试验证明具有防治前前列腺炎和列腺增生等作用。该组合物具有在制备防治前列腺疾病的药物中的新用途。并阐述了组合物的药物制剂，可以是片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、混悬剂、滴丸剂、软膏剂、栓剂直肠给药制剂中的任何一种。

Description

一种防治前列腺疾病的药物组合物

技术领域

本发明是关于积雪草药物组合物的医药新用途，具体的说是积雪草药物组合物在制备前列腺疾病药物中的应用，也涉及该药物的药物制剂，本发明属于医药技术领域。

背景技术

前列腺疾病是由于机体抵抗力低下，细菌或其他病原体感染前列腺并迅速大量生长繁殖而引起，多为血液循环感染或经尿道逆行感染，从而诱发前列腺炎。腺体间质有轻度增生组织，结构以增生的结缔组织和平滑肌为主，并有增大的腺囊、增生腺管上皮呈乳头状向囊腔内突出，形成间质腺样组织的混合性结节，从而形成了前列腺增生。前列腺增生，是男性老年病人的常见疾病之一。随着年龄的增加，男人或多或少都有前列腺增生的现象发生。前列腺增生的主要症状有排尿困难，轻者夜里起床小便次数增多，有尿不净或尿完后还有少量排出的现象；严重者出现尿流变细，甚或排不出的现象；同时常伴有腰酸腰痛、四肢无力、遗精等症状。急性前列腺炎以膀胱刺激症状和终末血尿、会阴部疼痛为主要症状，但临床较少见。慢性前列腺炎以排尿延迟、尿后滴尿，或滴出白色前列腺液，或引起遗精、阳痿、早泄等为主要症状。慢性前列腺炎是一种常见和多发的泌尿科疾患。本病原因复杂，症状繁多，病程迁延，顽固难愈，严重影响成年男性的身心健康。目前临床上没有一种抗菌药物能对前列腺疾病产生良好的治疗效果。一是由于前列腺解剖位置特殊，有利于尿道中的细菌进入腺体，不利于腺体引流，致使炎性分泌物易潴留而不易排出；二是前列腺组织结构特殊，前列腺上皮有脂膜存在，抗菌药物不易自血浆弥散入前列腺腺泡，且受前列腺液pH值的影响，要达到腺体内有效的杀菌、抑菌浓度，需具有一定的脂溶性、离解常数高、与血浆蛋白结合率低、毒性低，且能较长时间服用的药物，而目前临床上运用的抗菌药尚不具备这些特点。前列腺本身的病理改变，病灶周围易纤维化，又常影响抗菌药物向病灶扩散。因此，一个安全有效的治疗前列腺药物，正是慢性前列腺患者所需要的。

积雪草组合物是从伞形科Umbelliferae植物积雪草Centella asiatica(L.)Urban的干燥全草或带根全草提取纯化而得。积雪草性寒，味苦、辛，具有清热利湿、解毒消肿之功效。我国民间常用于治疗感冒、扁桃腺炎、传染性肝炎、痢疾、跌打损伤、疔疮肿毒、流行性脑脊髓膜炎等。并且傣族民间积雪草用于食疗治疗很多疾病。积雪草主要成分为积雪草苷、羟基积雪草苷和积雪草苷B。另外含有黄酮类、挥发油类、多炔烯炔类等，还有少量积雪草酸与羟基积雪草酸(赵宇新等报道积雪草研究进展，中国中医药信息杂志，2002年8月第9卷第8期，81-84)。现代药理研究发现积雪草总苷具有抗炎、促进创面愈合、防止瘢痕过度增生等作用，主要用于治疗各种皮肤损伤，包括外伤疤痕、消化道溃疡、硬皮病等；另外还有抗泌尿系统感染、诱导肿瘤细胞调亡等作用。霍德銮发明专利(公开号：CN101073658A)报道了由穿心莲、虎杖、黄藤、积雪草、一枝花等组成的复方制剂具有治疗前列腺炎、前列腺增生的作用。王胜浩等发明专利(公开号：CN100441201C)报道了积雪草总苷具有治疗外伤、手术创伤、烧伤，疤痕疙瘩及硬皮病及抗抑郁和治疗肝肾纤维化作用。黄怀鹏发明专利(公开号：CN1712013A)报道了积雪草总苷具有防治慢性肾功能衰竭的作用。宋吉伦发明专利(公开号：CN100588403C)报道了积雪草总皂苷具有促进伤口愈合，刺激肉芽生长，促进表皮角质化作用。邹节明发明专利(公开号：CN1238039C)报道了金樱根、菝葜、羊开口、金沙藤、积雪草等组成的组合物具有治疗泌尿系统疾病的作用。胡刚等发明专利(公开号：CN1429553A)报道了积雪草总苷具有防治乳腺增生的作用。张胜华研究报道了积雪草苷具有良好的体内、外抗菌活性，尤其对妇科泌尿系感染的作用。到目前为止没有积雪草总苷具有治疗前列腺疾病的报道，也没有单一的积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草苷B具有治疗前列腺的报道。通过实验研究发现，我们提取的积雪草的组合物具有新的用途，为该药材的药理研究开辟新思路。我们实验研究证明，由积雪草苷占10-40％，羟基积雪草苷占10-40％，积雪草苷B占10-40％，槲皮素占1-5％，山奈酚占1-5％组成的组合物，本发明的组合物是从天然的中药材积雪草中提取而得，具有防治前列腺疾病的作用。

已经有报道的可以治疗前列腺疾病的主要为中药复方制剂以及化学药品。其化学药品中抗生素是最常用的，用药时间长，慢性前列腺炎停用后易复发，目前临床上多用抗生素与局部治疗想结合的办法，有一定的疗效，但是不能根治，并且毒副作用大；α-受体阻滞剂也是治疗前列腺疾病的主要药物。中药复方治疗前列腺疾病主要有前列腺丸、肾气丸、野菊花栓、前列回春胶囊和前列康片等。

所以并未见从积雪草提取的以积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草苷B、槲皮素、山奈酚组成的组合物用于治疗前列腺疾病的报道。本组合物具有消炎杀菌、消肿镇痛、促进血液、淋巴液的循环；实验证明本组合物可有效缩小增生、肥大的前列腺组织，提高肾机能、减轻前列腺组织的充血和肿胀、激活细胞活性、提高腺体免疫力、肃清病灶，从而达到治疗前列腺的作用。

本发明的组合物与以往治疗前列腺疾病的药物具有实质性的不同，我们发明的专利与目前报道的具有治疗前列腺疾病的药物的明显区别在于，我们是利用单一植物中得到的熊果烷型皂苷、齐墩果烷型皂苷、黄酮类化合物组成的复合化学成分，相互协同作用，具有明显的药理活性，并且无毒副作用，具有明显的技术进步。

本发明完成前未发现从积雪草中提取的以积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草苷B、槲皮素、山奈酚组成的组合物作为防治前列腺疾病药物的报道，也未发现以积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草苷B、槲皮素、山奈酚组成的组合物用于防治前列腺疾病的临床方面应用。

发明内容

本发明的特点在于以积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草苷B、槲皮素、山奈酚组成的组合物是从中药积雪草(Centella asiatica(L.)Urban)中经提取、精制而获得，本组合物具有化学成分明确，质量可控，各个化学成分相互协同作用，体现了中药化学成分的复合作用。

本发明的目的是提供一种以积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草苷B、槲皮素、山奈酚组成的组合物(以下简称积雪草组合物)，该组合物是从伞形科科植物积雪草中所获得；经进一步动物试验研究证明了积雪草组合物具有防治前列腺疾病的作用。该组合物具有在制备前列腺疾病的药物中的新用途，具有明显的创新性。

本发明的另一目的及特点是：提供了一种植物资源丰富，可产业化生产的积雪草组合物，既具有天然中药化学成分复方的特点、又具有化学成分明确、组成比例搭配得当的优势，该组合物是由齐墩果烷型皂苷、熊果烷型皂苷、黄酮类成分组成，我们将药材提取物中两种三萜皂苷与黄酮类化合物的进行了富集和纯化，得到天然的复方化学成分，具有明显的创新性。该组合物特征在于：按重量百分比计：积雪草苷占10-40％，羟基积雪草苷占10-40％，积雪草苷B占10-40％，槲皮素占1-5％，山奈酚占1-5％，实验证明具有明显的抗菌、抗炎、抗前列腺增生的作用，无明显毒副作用；性能稳定，可以制成各种不同的剂型。本发明完成前没发现有关从积雪草中提取的以积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草苷B、山奈酚、槲皮素组成的组合物对前列腺的生理和药理活性的研究报告，由齐墩果烷型和熊果烷型两种三萜皂苷、黄酮类化合物联合协同作用治疗前列腺疾病也是本发明的一个主要创新点及明显的技术进步。

本发明的所述的积雪草药物组合物制备方法如下：

将积雪草用75％乙醇回流3次，每次2小时；虑过，滤液直接通过AB-8或D101大孔树脂，再用3BV的75％乙醇洗脱，收集流出液及洗脱液，回收乙醇得浸膏；浸膏加去离子水溶解；再次通过AB-8或D101大孔树脂，先用3BV的水或10％乙醇洗脱，再用3BV的75％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，得类白色粉末状积雪草组合物。

本发明提取方法具有生产周期短、可操作性强，没有使用易燃易爆化学试剂、安全，成本低，可以满足大工业化生产的需要。鉴于本发明具有明确的药理活性，本发明工艺所得的积雪草组合物可以产业化制备，具有广阔的应用前景。

申请人在筛选治疗前列腺疾病药物的过程，出乎意料地发现积雪

草苷、羟基积雪草苷、积雪草苷B、槲皮素、山奈酚组成的组合物具有显著的抗前列腺炎、前列腺增生的活性，因此可将含积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草苷B、山奈酚、槲皮素组成的组合物用于制备防治前列腺疾病的药物。其是将本组合物和医学上可接受的赋形剂或载体按照常规的制剂工艺，以5-95∶95-5的重量比例，或者1-9∶9-1的重量比例制成适于胃肠道途径给药或胃肠道外途径给药的各种剂型对患者给药，如加入常规的赋形剂、调味剂、防腐剂、润滑剂、湿润剂、粘合剂、溶剂、增稠剂、增溶剂等药物辅剂，制成任何一种适合于临床使用的剂型，如：片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸、注射剂等。

由于本发明首次公开了积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草苷B、槲皮素、山奈酚组成的组合物在防治前列腺的药用作用，因此，将本组合物单独或与其它活性组份或辅料配合制成药剂，只要是该药剂用于治疗前列腺疾病，均属于本发明的保护范围。本发明的积雪草组合物在制成任何一种剂型时，均具有防治前列腺的作用。

积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草苷B高效液相色谱法测定方法：

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-2mmol/L β-CD溶液(25∶75)为流动相；检测波长为205nm，柱温：25℃。理论板数积雪草苷计算不低于3000。

对照品溶液的制备  分别精密称取积雪草苷、羟基积雪草苷和积雪草苷B对照品各约10mg，各置10ml量瓶中，用乙腈-水(25∶75)溶解并定容，得浓度均为1mg/ml的对照品贮备液。分别精密量取2.5、4和3ml，置同一10ml量瓶中，用乙腈-水(25∶75)定容，得浓度分别为0.25、0.4和0.3mg/ml的混合对照品溶液。

供试品溶液的制备  取本组合物50mg，精密称定，置100ml量瓶中，用乙腈-水(25∶75)溶解，超声20min，定容，取续滤液为供试品溶液。

测定方法  分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

积雪草药物组合物(积雪草苷占25.3％、羟基积雪草苷占35.3％、积雪草苷B占30.4％、槲皮素占1.5％、山奈酚占2.3％)具有防治前列腺疾病的作用，这些药理作用，通过以下药效学试验例得到证实。

1、积雪草组合物的抗炎作用

1.1积雪草组合物对二甲苯所致小鼠耳廓炎症肿胀的影响

取小鼠50只，雄性，体重(20±2)g，随机分成5组，按照表1灌胃给药，每天1次，连续7d，于末次给药1h后，将二甲苯0.3mL滴于小鼠右耳，左耳不涂做对照。2h后将小鼠颈部脱臼处死，用直径9mm的打孔器分别在左、右耳同一部位打下圆耳片，称重，计算左、右耳片重量之差作为肿胀度，比较组间差异。结果见表1。

表1积雪草组合物对二甲苯所致小鼠耳廓炎症肿胀的影响

**P＜0.01，*P＜0.05。与对照组比较

从表1可见，积雪草组合物高、中剂量对二甲苯所致小鼠耳廓炎症肿胀均具有显著的抑制作用，表明它们均具有显著的抗炎作用，积雪草组合物低剂量组对二甲苯所致小鼠耳廓炎症肿胀抑制作用不明显。同样，阳性对照药物吲哚美辛灌胃后，也具有显著的抗炎作用。

1.2积雪草组合物对大鼠棉球肉芽肿形成的影响

取大鼠50只，按性别及体重随机分为5组。按棉球置入法操作步骤于腹股沟皮下各埋植一(30±1)mg的消毒棉球。术后当日给药，剂量同表2，连续7d，于第8d处死动物，剥离并取出棉球肉芽组织，置60℃烤箱干燥12h后称重，计算肿胀度及抑制率。

表2、积雪草组合物对大鼠棉球肉芽肿形成的影响

**P＜0.01，*P＜0.05。与对照组比较

从表2可见，积雪草组合物高、中剂量组对大鼠棉球肉芽肿形成具有显著的抑制作用，具显著的抗炎作用。与生理盐水对照组比较，显示对肉芽增生性炎症具有显著的抗炎作用。吲哚美辛对肉芽增生性炎症亦具有显著的抗炎作用。

2、积雪草组合物对前列腺增生的治疗作用

2.1积雪草组合物对丙酸睾丸素致去势大鼠前列腺增生的作用

取雄性大鼠70只，其中10只在无菌术下切开阴囊后缝合为对照组，另60只在无菌下手术切除双侧睾丸，一周后随机分为6组，按表3给药。每天1次，连续灌胃给药14天后(同时皮下注射丙酸睾丸素5mg/kg)，与阴性模拟组比较，积雪草组合物高、中二个剂量组大鼠的前列腺重量、前列腺指数有所减少(P＜0.01)。保列治逆转前列腺增生的作用最强。高剂量积雪草组合物的作用与前列康作用相近，但弱于保列治的作用。

表3积雪草组合物对去势大鼠前列腺增生的治疗(n＝10，X±SD)

**P＜0.01，*P＜0.05。与阴性对照组比较

2.2积雪草组合物对小鼠前列腺增生的治疗作用

取雄性小鼠70只，留下10只作正常对照，其余小鼠每天依次皮下注射丙酸睾丸素5mg/kg，21天后，处死其中10只小鼠，正常对照小鼠亦同样处死，称取体重和前列腺重并作病理组织学切片镜检，证实前列腺有增生后，将余下小鼠均分为6组，每组10只，按表4所示剂量灌胃给药。每日1次，对照组和模型对照组给予等体积水，连续1个月。末次给药后称量小鼠体重，将动物处死，剖取前列腺称重，并作病理组织学切片镜检。结果见表4。

表4  积雪草组合物对实验性小鼠前列腺增生的治疗作用(X±SD)

**P＜0.01，*P＜0.05。与阴性对照组比较

结果表明：注射丙酸睾丸素21天后，小鼠的前列腺重明显示增大，前列腺腺体明显增生。具有前列腺增生的小鼠服用积雪草组合物1个月后，其前列腺重量给药组与模型对照组比较明显减轻；前列腺指数亦显著偏小，镜检治疗组前列腺增生程度较对照组明显减轻，近乎正常。对小鼠的体重无明显差异。

3、积雪草组合物对动物实验性非细菌性前列腺炎的治疗作用

3.1积雪草组合物对角叉菜胶致小鼠前列腺炎的影响

取雄性小鼠60只，随机分为6组，按表5所示剂量每日灌胃给药一次，共给药14天，第15天用3％戊巴比妥钠腹腔麻醉，无菌术下，下腹部切开，在靠近前列腺头叶的精囊腺注射1％角叉菜胶0.1ml，正常对照组注入注射用0.9％的氯化钠0.1ml，缝合后在给药一次，第16日处死小鼠，用微型进样器去10ul前列腺液，记白细胞数，结果见表5。取出前列腺用10％甲醛溶液固定，进行组织学检查。

表5积雪草组合物对角叉菜胶致小鼠前列腺炎的影响(n＝10，X±SD)

**P＜0.01。与阴性对照组比较

从表5可以看出，阴性模型组的白细胞显著增加，积雪草组合物的各剂量组和前列康组的白细胞显著减少。与阴性模型组比较有显著性差异。

3.2积雪草组合物对角叉菜胶致大鼠前列腺炎的影响

取雄性大鼠60只，随机分为6组，按表6所示剂量每日灌胃给药一次，共给药14天，第15天用3％戊巴比妥钠腹腔麻醉，无菌术下，下腹部切开，在靠近前列腺头叶的精囊腺注射1％角叉菜胶0.1ml，正常对照组注入注射用0.9％的氯化钠0.1ml，缝合后再给药一次，第16日处死小鼠，用微型进样器取10ul前列腺液，记白细胞数，结果见表6。取出前列腺用10％甲醛溶液固定，进行组织学检查。

表6积雪草组合物对角叉菜胶致大鼠前列腺炎的影响(n＝10，X±SD)

**P＜0.01。与阴性对照组比较

从表6可以看出，阴性模型组的白细胞显著增加，积雪草组合物的各剂量组和前列康组的白细胞显著减少。与阴性模型组比较有显著性差异。

从以上的药效学实验可知，积雪草组合物具有治疗前列腺增生和/或前列腺炎的作用，与对照组比较，其治疗效果优于前列康，与保列治相当。并且长期服用没有副作用。

本发明是通过如下的实验施例得以实现(证实)

实例1、(组合物的制备)

将积雪草用75％乙醇回流3次，每次2小时；虑过，滤液直接通过AB-8大孔树脂，再用3BV的75％乙醇洗脱，收集流出液及洗脱液，回收乙醇得浸膏；浸膏加去离子水溶解；再次通过D101大孔树脂，先用3BV的水或10％乙醇洗脱，再用3BV的75％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，得类白色粉末状积雪草组合物，利用高效液相色谱法测定，计算，积雪草苷占25.3％、羟基积雪草苷占35.3％、积雪草苷B占30.4％、槲皮素占1.5％、山奈酚占2.3％。

实施例2、(胶囊剂)

组合物原料200g，药用淀粉适量，混合均匀，制粒，干燥，整粒，装入1号胶囊，制成1000粒，即得。每次2粒、每日2次。

实施例3、(片剂)

组合物原料200g，药用淀粉适量，糊精适量，混合均匀，制粒，干燥，整粒，干燥，加入润滑剂适量，压片，制成1000片，即得。每次2片、每日2次。

实施例4、(滴丸剂)

称取30g聚乙二醇4000，在水浴上熔化，加组合物原料20g，搅拌均匀，倾入保温管中，调节恒温装置，使药液在80-90℃下滴入冷却过的液体石蜡中，滴完后，将药丸倾入滤纸上吸干石蜡油，制成1000粒，即得。每次20粒、每日2次。

实施例5、(颗粒剂)

组合物原料200g，糖粉300g，混合均匀，用适量乙醇制粒，干燥、整粒、分装，制成500袋，即得。每次1袋、每日2次。

Claims (4)

1.一种积雪草组合物在制备前列腺炎和前列腺增生防治的药物中的应用，其特征在于组合物由积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草苷B、槲皮素和山奈酚组成。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于：按重量百分比计：积雪草苷占10-40％，羟基积雪草苷占10-40％，积雪草苷B占10-40％，槲皮素占1-5％，山奈酚占1-5％。

3.一种口服药物制剂，其特征在于含有权利要求1所述的治疗有效剂量的积雪草药物组合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂。

4.根据权利要求3所述的药物制剂，其特征在于所说的制剂选自于片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、混悬剂、膏剂、栓剂直肠给药制剂中的任何一种。