CN102526427A - 治疗胃肠疾病的中药组合物及质量检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗胃肠道疾病的口服中药组合物，以及质量检测方法。本发明所述的治疗胃肠疾病的中药组合物是由以下重量百分比的原料药制成的口服制剂：山药5-13%、黄柏15-22%、陈皮7-13%、肉桂14-20%、甘草2-8%、广藿香19-25%、佩兰5-10%、大腹皮2-8%、丁香5-10%。本发明经过多年的实验摸索，对特定的壮药传统药方进行了大胆的创新，开发了一种具有温中和胃，理气止痛功能的，用于邪滞中焦所致的恶心、呕吐、纳差、胃痛、腹痛、胃胀、腹胀、泄泻证，西医诊断属于消化不良的中药组合物，该组合物疗效确切，剂型稳定，质量可控且无毒副作用，是易于被广泛施用的现代制剂。

Description

治疗胃肠疾病的中药组合物及质量检测方法

技术领域

本发明涉及一种治疗胃肠道疾病的口服中药组合物，以及质量检测方法。

背景技术

腹泻是全球性问题，中国疾病预防控制中心肠道传染防治所研究员、消化疾病专家冉陆指出，每年全球有五百万人死于急性腹泻，致死率高居各种疾病之四，其中大部分在发展中国家。中国每年约有八点三六亿人次患病，儿童比例约达三分之一左右，是不可掉以轻心的一种疾病。

腹泻是消化系统疾病中的一种常见症状，其病因多种多样，如细菌病毒感染、消化不良、肠功能紊乱等均可引起腹泻。而目前市场上止泻药品种繁多，按药性主要分为三类：抗生素、微生态制剂、蒙脱石散剂。常用药物有黄连素、庆大霉素、环丙沙星、氟哌酸等。而西药治疗腹泻其副作用较多，滥服抗生素容易引起不同程度的副作用，可出现恶心、呕吐、食欲下降，甚至影响肝脏、肾脏和造血功能。如三岁以下小儿不宜长期应用药用炭；儿童忌用四环素；遗传性葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏的儿童禁止使用黄连素，以免引起溶血性贫血，导致黄疸。孕妇则忌用黄连素、四环素及某些抗生素。肝病患者忌用黄连素、四环素；肾功能不良者慎用碱式碳酸铋片。脑出血急性期及青光眼、前列腺肥大、尿潴留、反流性食管炎患者禁用山莨菪碱；青光眼、尿潴留、前列腺肥大、心动过速者禁用颠茄。相比之下，中药如参苓白术丸、加味香连丸、附子理中丸、加味保和丸等治疗腹泻的优势为世人所承认，除疗效可靠外，其根本原因是针对不同的病因，辩证施治，注重病人内在抵抗力的调整、有着西药不可比拟的优势。

中医理论认为腹泻疾病可分为七种：痢疾（即西医所说的肠道传染病），表现为里急后重，大便中有黏液或脓血，常用中成药有双黄连消炎片及加味香连丸；热泻，表现为腹痛肠鸣，痛一阵泻一阵，伴有发烧口渴，小便赤短等症状，常用中成药有双黄连消炎片及加味香连丸；五更泻，表现为每天早晨起床前，于肚脐周围作痛，腹胀肠鸣，泻后轻快等症，可服用四神丸；其他还可分寒泻、久泻、脾虚泻、伤食泻。近年来，随着临床研究的深入，市场上出现了很多治疗腹痛腹泻的中药制剂，但现有药物有些属于只能治疗上述七种腹泻分类中的某一种，针对性不强，而有些只治标不治本，有些使用价格昂贵的成分，有些在应用过程中由于疗效不确切而中断使用。

发明内容

本发明的目的是提供一种服用方便、作用平稳、疗效广泛、确切的治疗胃肠疾病的中药组合物。

本发明的另一目的是这种中药组合物的质量检测方法。

本发明所述的治疗胃肠疾病的中药组合物是由以下重量百分比的原料药制成的口服制剂：山药5-13%、黄柏15-22%、陈皮7-13%、肉桂14-20%、甘草2-8%、广藿香19-25%、佩兰5-10%、大腹皮2-8%、丁香5-10%。

为了获得更好的疗效，优选中药原料的用量为下列重量百分比：

山药7-11%、黄柏16-20%、陈皮9-11%、肉桂16-18%、甘草3-6%、广藿香20-23%、佩兰6-8%、大腹皮3-6%、丁香6-8%。

本发明处方取自于壮族民间验方并在此基础上，根据传统中医理论，经科学配伍研制而成。中医理论中的中焦指脾胃，中焦的脾脏职责是化水谷精微，使它通达到经络，遍滋全身，中焦受阻则出现先吐后痛或先痛后吐的症状。本方所治之病症，是由于风寒之邪夹湿外袭，从口鼻入侵谷道，或外感山岚瘴疟，同时素体虚弱，谷道（条根埃）的消化、吸收功能低弱，造成谷道阻滞，气机不畅，两路不通，天、地、人三气不能同步所致。风寒之邪侵袭机体，毒正相争，故发热怕冷；谷道阻滞，气机不畅，故肚子胀满或疼痛，食欲不振，面色萎黄；气机升降功能失调，胃气上逆，则恶心呕吐；谷道（咪胴、咪虽）运化吸收功能失调，水谷精微营养物质不能很好地消化吸收，混杂而下，故肠鸣泄泻等。舌苔白腻，脉濡数为外感风寒夹湿的舌脉像。治当解表化湿，健脾和中，通畅谷道。方中主要药物广藿香（壮药名：棵瓤枝）、肉桂（壮药名：能桂）、陈皮（壮药名：广陈皮）是壮族民间用于治疗呕吐、泄泻、腹胀的特效药。本发明人将较好或最佳的原料用量特征加以选择，从而完成本发明，本方对邪滞中焦所致的恶心、呕吐、纳差、胃痛、腹痛、胃胀、腹胀、泄泻有特效。

本发明是为肠胃用药，为肠胃患者而设，以解表化湿，健脾和中，通畅谷道为法。方中以芳香化浊，和中止呕，发表解暑的藿香，以及芳香化湿、醒脾开胃的佩兰为主药；辅以陈皮调理谷道气机，理气燥湿，和胃降逆止呕；丁香行气通窍，降逆止呕；大腹皮行气化湿，畅中行滞；山药补脾祛湿，使脾气健运，湿浊得消；肉桂辛甘大热，祛寒止痛，温中散寒，共济温中健脾之效。以上药味均以辛温为主，为防其辛散太过，配以少量苦寒的黄柏苦以燥湿，寒以清热，清热解毒，以清湿毒内郁以及诸药过于辛温所生之热毒；甘草调和诸药，兼能清热、缓急止痛。诸药合用，可以起到解表化湿，健脾和中的功效，可以使谷道通畅，升降复常，则诸症自解，可以治疗外感风寒，湿滞内伤脾胃以及山岚瘴疟之症。临床表现为发热怕冷，肚子胀满或疼痛，食欲不振，面色萎黄，恶心呕吐，肠鸣泄泻，舌苔白腻，脉濡数等。

所用药材山药、黄柏、陈皮、肉桂、甘草、广藿香、佩兰、大腹皮、丁香在《中国药典》2010年版一部中收载。

制备本发明药物有效成分的方法可以是将上述用量的原料干燥，粉碎，混匀；也可将上述原料部分提取或全部提取。例如称取上述用量的山药、黄柏、陈皮、肉桂、甘草、广藿香、佩兰、大腹皮、丁香，直接将中药原料分别干燥，粉碎，混匀制成散剂或胶囊剂，也可与药学上可接受的赋形剂制成丸剂。也可将上述部分中药或全部原料进行水提取精制或用0.1%-99.0%乙醇提取，回收或浓缩，与药学上可接受的赋形剂制成各种剂型如胶囊剂、丸剂、片剂、颗粒剂、口服液。

本发明经过多年的实验摸索，对特定的壮药传统药方进行了大胆的创新，开发了一种具有温中和胃，理气止痛功能的，用于邪滞中焦所致的恶心、呕吐、纳差、胃痛、腹痛、胃胀、腹胀、泄泻证，西医诊断属于消化不良的中药组合物，该组合物疗效确切，剂型稳定，质量可控且无毒副作用，是易于被广泛施用的现代制剂。   

本发明抗腹泻作用的实验研究：

摘要： [ 目的] 观察本发明对小鼠小肠推进运动、药物性腹泻的影响。[ 方法] 将小鼠分为本发明高、中、低三个治疗组、生理盐水组和止痢胶囊对照组。高、中、低剂量组分别给予本发明12g/ kg、6g/ kg、3g/ kg，对照组给生理盐水，阳性对照组给予止痢胶囊混悬液。测量小肠全长及酚红在小肠内推进距离，计算肠推进百分率以及各用药组的抑制率；观察小鼠腹泻潜伏期以及6h 内的腹泻摊数。[ 结果] 本发明外用对正常小鼠肠推进有明显的抑制作用，并对口服番泻叶浸剂所致的腹泻小鼠模型具有明显的保护作用，使腹泻潜伏期延长，腹泻次数减少。[ 结论] 本发明外用具有明确的止泻作用。

1、 实验材料

1.1   实验药物与试剂   本发明实施例2，每粒含生药0.3g，由广西梧州三鹤药业有限公司提供；止痢胶囊：安徽精方药业股份有限公司产品；番泻叶煎液：狭叶番泻叶( Cassia angustifo liaVahl) 的小叶，符合2000 版《中国药典》规定并加工炮制合格的饮片，取番泻叶100g 加水1200mL，浸泡15min 后，煎煮15min，四层纱布过滤, 滤液50°C 减压浓缩至0. 3g·ml^- 1。置于4°C 冰箱中保存, 临用时在水浴中加热至25°C。0.9% 氯化钠注射液, 安徽双鹤药业有限责任公司产品。

1.2   实验动物  ICR 小鼠，雄性，由昆明医学院实验动物中心提供。饲养室温度22±1℃ ，湿度50~70%，颗粒饲料来源于实验动物中心。

2、 方法

2.1   观察小肠推进功能的给药方案   雄性ICR 小鼠52 只，体重18~ 22g，随机分成5 组，每组10只，腹部去毛外涂给药，高、中、低剂量组分别给予本发明12g ( 按生药量折算，下同) / kg、6g/ kg、3g /kg，给药体积均为0.05ml/10g 体重( 中、低剂量组用生理盐水分别稀释2、4 倍后给药)，对照组给予等容积生理盐水，阳性对照组灌胃给予止痢胶囊混悬液1. 48g / kg, 1 次/ d，连续3d，末次给药前12h 禁食，末次给药后45min，灌胃给予0.04%酚红溶液( 以10%阿拉伯胶溶液配制) 0.2ml/ 10g 体重, 20min 后脱颈臼处死, 测量小肠全长及酚红在小肠内推进距离，计算肠推进百分率( 幽门至酚红推进前沿距离/小肠全长×100% ) 以及各用药组的抑制率。

2.2  观察抗番泻叶所致腹泻的给药方案  雄性ICR 小鼠50 只，体重18~22g，随机分为5 组，每组10 只；腹部去毛后外涂给药，给药方法同上，末次给药后30min，每只小鼠灌胃给予30% 番泻叶煎剂0. 2ml/10g 体重，单个放置在垫有滤纸的15×25cm的塑料笼内。每隔1h 换垫纸，观察小鼠腹泻潜伏期以及6h 内的腹泻摊数。

2.3  统计学方法  所有计量数据均表示为x±sd，检验方法为t 检验， P < 0. 05 为有统计学意义。

3、结果

3.1  对正常小鼠小肠推进功能的影响   从表1 结果可见，本发明12、6 和3g / kg 剂量均明显抑制正常小鼠的小肠推进功能，小肠推进率与对照组相比均有显著性差异( P < 0.05) ，抑制率在17. 8 ~28. 2%之间，量效关系明确。

 

表1 本发明对正常小肠推进功能的影响(x±sd)

组别

剂量(g/kg)

n

酚红推进距离(cm)

小肠全长

推进率(%)

抑制率(%)

对照

-

10

32.4±3.2

46.5±4.5

69.6±7.1

-

止痢胶囊

1.48

10

23.7±3.7

47.2±5.1

50.6±7.3*

26.4

本发明

12

10

19.5±4.8

47.7±3.8

43.8±10.6*

28.2

本发明

6

10

21.3±7.4

47.3±3.4

48.5±13.7*

22.5

本发明

3

10

22.9±6.2

47.1±3.9

53.6±11.5*

17.8

与对照组比较，*P＜0.05。

3.2  对番泻叶所致腹泻的影响  表2 结果显示，本发明各剂量组对番泻叶所致的小鼠腹泻有一定的对抗作用，表现在使腹泻潜伏期延长。使不同时间的累积腹泻次数减少，而且有一定的剂量关系。

表2 本发明对番泻叶所致腹泻小鼠的影响(x±sd)

与对照组比较，*P＜0.05。

4、讨论

综合上述实验结果，本发明外用能明显降低正常小鼠肠推进百分率，并对口服番泻叶浸剂所致的腹泻小鼠模型具有明显的保护作用，使腹泻潜伏期延长，腹泻次数减少，提示本发明外用具有明确的止泻作用，这一点与临床应用是相符的，至于其作用机制尚待进一步研究。

 

具体实施方法

实施例1：散剂的制备

称取原料：山药88克、黄柏177克、陈皮107克、肉桂170克、甘草49克、广藿香215克、佩兰78克、大腹皮46克、丁香71克，干燥，粉碎，混合均匀，制成散剂。

实施例2：胶囊剂的制备

称取原料：山药88克、黄柏177克、陈皮107克、肉桂170克、甘草49克、广藿香215克、佩兰78克、大腹皮46克、丁香71克，干燥，粉碎，混合均匀，装入胶囊，制成胶囊剂。

实施例3：丸剂的制备

称取原料：山药88克、黄柏177克、陈皮107克、肉桂170克、甘草49克、广藿香215克、佩兰78克、大腹皮46克、丁香71克，干燥，粉碎，混合均匀，加入药学上可接受的辅料，制丸、干燥、包衣，制成丸剂。

实施例4：颗粒剂的制备

称取原料：山药88克、黄柏177克、陈皮107克、肉桂170克、甘草49克、广藿香215克、佩兰78克、大腹皮46克、丁香71克，加水煎煮2-3次干燥，粉碎，混合均匀，加入药学上可接受的辅料，制粒、干燥，制成颗粒剂。

实施例5：片剂的制备

称取原料：山药88克、黄柏177克、陈皮107克、肉桂170克、甘草49克、广藿香215克、佩兰78克、大腹皮46克、丁香71克，加水煎煮2-3次干燥，粉碎，混合均匀，加入药学上可接受的辅料，制粒、干燥，压片，制成片剂。

实施例六： 

称取原料：山药50克、黄柏150克、陈皮70克、肉桂140克、甘草20克、广藿香190克、佩兰50克、大腹皮20克、丁香50克，加水煎煮2-3次干燥，粉碎，混合均匀，加入药学上可接受的辅料，制粒、干燥，制成颗粒剂或压片，制成片剂。

实施例7：

称取原料：山药130克、黄柏220克、陈皮130克、肉桂200克、甘草80克、广藿香250克、佩兰100克、大腹皮80克、丁香100克，加水煎煮2-3次干燥，粉碎，混合均匀，加入药学上可接受的辅料，制粒、干燥，制成颗粒剂或压片，制成片剂。

实施例8：

称取原料：山药60克、黄柏200克、陈皮100克、肉桂160克、甘草50克、广藿香220克、佩兰80克、大腹皮60克、丁香80克，加水煎煮2-3次干燥，粉碎，混合均匀，加入药学上可接受的辅料，制粒、干燥，制成颗粒剂或压片，制成片剂。

实施例9：

称取原料：山药50克、黄柏150克、陈皮70克、肉桂140克、甘草20克、广藿香190克、佩兰50克、大腹皮20克、丁香50克，干燥，粉碎，混合均匀，装入胶囊，制成胶囊剂。或制成散剂。或加入药学上可接受的辅料，制丸、干燥、包衣，制成丸剂。

实施例10：

称取原料：山药130克、黄柏220克、陈皮130克、肉桂200克、甘草80克、广藿香250克、佩兰100克、大腹皮80克、丁香100克，干燥，粉碎，混合均匀，装入胶囊，制成胶囊剂。或制成散剂。或加入药学上可接受的辅料，制丸、干燥、包衣，制成丸剂。

实施例11：

称取原料：山药60克、黄柏200克、陈皮100克、肉桂160克、甘草50克、广藿香220克、佩兰80克、大腹皮60克、丁香80克，干燥，粉碎，混合均匀，装入胶囊，制成胶囊剂。或制成散剂。或加入药学上可接受的辅料，制丸、干燥、包衣，制成丸剂。

本发明所述的治疗胃肠疾病的中药组合物的质量检测方法包括：

a.对制剂中的成分进行【鉴别】；

b.对制剂进行【检查】；

c.对制剂中有效成分进行【含量测定】。

其中所述对制剂中的成分进行【鉴别】，步骤如下：

鉴别  (1)取散剂或胶囊剂内容物，置显微镜下观察：非腺毛1~6细胞，平直或先端弯曲，壁具疣状突起，鉴别为广藿香；纤维鲜黄色，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维，鉴别为黄柏；石细胞类圆形或类方形，壁厚，有的一面菲薄，鉴别为肉桂；草酸钙方晶成片存在于中果皮薄壁细胞中，呈多面体形、菱形或双锥形，鉴别为陈皮；淀粉粒扁卵形、三角状卵形、类圆形或矩圆形，脐点点状、人字状、十字状或短缝状，鉴别为山药。

(2)取散剂或胶囊剂内容物4.5g，加乙醚50ml超声处理5分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml，作为供试品溶液。另取百秋李醇对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI B）试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(30~60℃)-乙酸乙酯-冰乙酸(95：5：0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰。供试品色谙中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

(3)取散剂或胶囊剂内容物1.5g，加甲醇20ml，加热回流20分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品溶液。取黄柏对照药材0.2g，加甲醇10ml，同法制成对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录VI B）试验，吸取上述三种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水 (10：7：1：1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点。

(4)取陈皮对照药材0.3g，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。再取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录VI B）试验，吸取鉴别(3)项下供试品溶液及上述两种溶液各2μl，分别点于同一以0.5%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水 (100：17：13)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝溶液，置紫外光灯（365nm)下检视。供试品色谙中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(5)取散剂或胶囊剂容物1.8g，加乙酸乙酯20ml，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液低温浓缩至5ml，作为供试品溶液。取桂皮醛对照品，加乙醇制成每1ml含2μl的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI B）试验，吸取本品溶液及阴性对照溶液各10μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯 (17：3)为展开剂，取出，晾干，喷以二硝基苯肼乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

【检查】应符合应符合《中国药典》2010年版一部胶囊剂项下有关的各项规定(附录 IL)。

【含量测定】照高效液相色谱法(《中国药典》2010年版一部附录V ID)测定。

色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05mol/ L磷酸二氢钠溶液(用磷酸调节pH值至3.0)(28：72)为流动相；检测波长为265nm。理论塔板数按盐酸小檗碱计算应不低于5000。

对照品溶液的制备  取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备 取装量差异项下的本品内容物0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入盐酸-甲醇(1：100) 20ml，称定重量，超声处理(功率80W，频率50kHz)40钟，再称定重量，用盐酸-甲醇(1：100)补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，加在中性氧化铝柱(100~200目，5g，内径0.8cm，干法上柱)上，，用甲醇50ml洗脱，洗脱液浓缩至干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液作为供试品溶液。

测定法  精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每粒含黄柏以盐酸小檗碱（C₂₀H₁₇NO₄·HCL）计，不得少于1.2mg。

Claims (4)

1.一种治疗胃肠疾病的中药组合物，其特征在于是由以下重量百分比的原料药制成的口服制剂：山药5-13%、黄柏15-22%、陈皮7-13%、肉桂14-20%、甘草2-8%、广藿香19-25%、佩兰5-10%、大腹皮2-8%、丁香5-10%。

2.如权利要求1所述的治疗胃肠疾病的中药组合物，其特征在于是由以下重量百分比的原料药制成的口服制剂：山药7-11%、黄柏16-20%、陈皮9-11%、肉桂16-18%、甘草3-6%、广藿香20-23%、佩兰6-8%、大腹皮3-6%、丁香6-8%。

3.如权利要求1或2所述的治疗胃肠疾病的中药组合物，其特征在于是由以下重量配比的原料药制成的口服制剂：山药88、黄柏177、陈皮107、肉桂170、甘草49、广藿香215、佩兰78、大腹皮46、丁香71。

4.一种如权利要求1所述的治疗胃肠疾病的中药组合物的质量检测方法，其特征在于包括：

a.对制剂中的成分进行鉴别；

b.对制剂进行检查；

c.对制剂中有效成分进行含量测定；

其中所述的对制剂中的成分进行鉴别，步骤如下：

鉴别  (1)取散剂或胶囊剂内容物，置显微镜下观察：非腺毛1~6细胞，平直或先端弯曲，壁具疣状突起，鉴别为广藿香；纤维鲜黄色，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维，鉴别为黄柏；石细胞类圆形或类方形，壁厚，有的一面菲薄，鉴别为肉桂；草酸钙方晶成片存在于中果皮薄壁细胞中，呈多面体形、菱形或双锥形，鉴别为陈皮；淀粉粒扁卵形、三角状卵形、类圆形或矩圆形，脐点点状、人字状、十字状或短缝状，鉴别为山药；

(2)取散剂或胶囊剂内容物4.5g，加乙醚50ml超声处理5分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml，作为供试品溶液；另取百秋李醇对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚30~60℃-乙酸乙酯-冰乙酸95：5：0.2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谙中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(3)取散剂或胶囊剂内容物1.5g，加甲醇20ml，加热回流20分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品溶液；取黄柏对照药材0.2g，加甲醇10ml，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10：7：1：1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；

(4)取陈皮对照药材0.3g，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；再取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取鉴别(3)项下供试品溶液及上述两种溶液各2μl，分别点于同一以0.5%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水 100：17：13为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝溶液，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(5)取散剂或胶囊剂容物1.8g，加乙酸乙酯20ml，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液低温浓缩至5ml，作为供试品溶液；取桂皮醛对照品，加乙醇制成每1ml含2μl的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取本品溶液及阴性对照溶液各10μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚60~90℃-乙酸乙酯 17：3为展开剂，取出，晾干，喷以二硝基苯肼乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

检查：应符合《中国药典》2010年版一部胶囊剂项下有关的各项规定；

含量测定：照高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05mol/ L磷酸二氢钠溶液28：72为流动相，磷酸二氢钠溶液用磷酸调节pH值至3.0；检测波长为265nm；理论塔板数按盐酸小檗碱计算应不低于5000；

对照品溶液的制备  取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备 取装量差异项下的本品内容物0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入盐酸-甲醇1：100  20ml，称定重量，超声处理40钟，再称定重量，用盐酸-甲醇1：100补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，加在中性氧化铝柱上，用甲醇50ml洗脱，洗脱液浓缩至干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；

测定法  精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本品每粒含黄柏以盐酸小檗碱C₂₀H₁₇NO₄·HCL计，不得少于1.2 mg。