CN102516168A - 一种环丙氟喹诺酮c3/c7双腙西弗碱、制备方法及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药技术领域，具体公开了一种环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱，同时还公开了一种制备方法及其在制药领域中的应用。环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的化学结构式如通式I所示：

Description

一种环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱、制备方法及其应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱，同时还涉及其制备方法及其在制药中的应用。

背景技术

氟喹诺酮(FQ)为上世纪80年代以氟哌酸(即诺氟沙星)为代表发展而来的临床抗菌药。基于其作用靶点拓扑异构酶(TOPO)与哺乳动物TOPO具有相似的功能，据此把抗菌FQ转化为抗肿瘤FQ是目前研究的一个新方向。虽然已设计合成了结构包括二环喹诺酮、三环喹诺酮、四环喹诺酮、手性喹诺酮、类黄酮类等抗肿瘤FQ化合物，但目前这些化合物在不同程度上存在毒性与活性相平行、体内溶解度差导致生物利用度低、在体内易被代谢失活等亟待解决的共性问题。因此，寻找新的结构修饰途径，发现新的先导化合物是目前亟待解决的问题。目前新研究发现，氟喹诺酮C-3羧基虽对抗菌活性是必须的，但对抗肿瘤活性并非必要，可被一些电子等排体取代而发挥抗肿瘤作用。另外，虽然保留7-位哌嗪基是抗菌氟喹诺酮通用的结构修饰方法，但对抗肿瘤而言，哌嗪基是否可用其他基团取代，我们所知甚少。鉴于酰腙及腙类化合物在抑菌、抗病毒、抗肿瘤等方面的广泛应用，以酰腙和腙分别替代抗菌氟喹诺酮骨架C-3和C-7位羧基及哌嗪基，得到新结构的双腙西弗碱抗肿瘤氟喹诺酮先导化合物是本发明研究的主要目的，目前尚未见有环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的相关报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱。

本发明的目的还在于提供一种环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法。

本发明的目的还在于提供一种环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱在制药中的应用。

为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：一种环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱，其化学结构式如通式I所示：

其中，Ar选自苯基、取代苯基、杂环芳香烃基和取代杂环芳香烃基。

优选的，Ar选自苯基、烷基苯基、羟基苯基、烷氧基苯基、卤代苯基、硝基苯基、吡啶基、吡啶稠杂环中的任一种。

进一步优选的，Ar选自

和

中的任一种。

环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法，包括以下步骤：

(1)将6-氟-7-氯-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-3-喹啉羧酸乙酯(如式A所示)溶于过量的质量百分比浓度为80％的水合肼中，然后回流反应24～36小时，制得7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼(如式B所示)；

(2)将7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼与无水乙醇混合，制得混合液，然后加热回流所述混合液至澄清，之后向所述混合液中加入通式II所示化合物，然后再加热回流10～30小时，制得通式I所示化合物；其中通式II所示化合物与7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼的摩尔比为：通式II所示化合物∶7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼＝(1.2～1.3)∶1；

其中，Ar选自苯基、取代苯基、杂环芳香烃基和取代杂环芳香烃基。

经试验表明，本发明提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱对实验L1210、CHO、HL60癌细胞株均具有较强的体外细胞毒活性作用，显示出较强的抗肿瘤活性，可通过与人体可接受的药用载体混合用于制备抗肿瘤药物，也可进一步制成人体可接受的药用盐用于制备抗肿瘤药物。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明。

实施例1-15是环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的具体实施例。

实施例1

本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为苯甲醛缩(1-环丙基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为：

实施例2

本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为对甲基苯甲醛缩(1-环丙基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为：

实施例3

本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为对甲氧基苯甲醛缩(1-环丙基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为：

实施例4

本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为邻羟基苯甲醛缩(1-环丙基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为：

实施例5

本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为邻甲氧基苯甲醛缩(1-环丙基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为：

实施例6

本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为3，4-二氧亚甲基苯甲醛缩(1-环丙基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为：

实施例7

本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为3-甲氧甲基-4-羟基苯甲醛缩(1-环丙基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为：

实施例8

本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为3-羟基-4-甲氧甲基-苯甲醛缩(1-环丙基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为：

实施例9

本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为3，4，5-三甲氧甲基-苯甲醛缩(1-环丙基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为：

实施例10

本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为对氯苯甲醛缩(1-环丙基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为：

实施例11

本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为对氟苯甲醛缩(1-环丙基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为：

实施例12

本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为对硝基苯甲醛缩(1-环丙基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为：

实施例13

本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为4-吡啶甲醛缩(1-环丙基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为：

实施例14

本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为3-吡啶甲醛缩(1-环丙基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为：

实施例15

本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为2-吡啶甲醛缩(1-环丙基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为：

以下实施例16-30是环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱制备方法的具体实施例。

首先制备式B所示化合物，即7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼，将50.0g的式A所示化合物6-氟-7-氯-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-3-喹啉羧酸乙酯与80g质量百分比浓度为80％的水合肼混合，反应液搅拌回流反应32小时，冷却，过滤产生的固体，干燥，制得7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼粗品，7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼粗品用乙醇重结晶，制得7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼。

实施例16

本实施例是实施例1提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌加热回流混合液至澄清，之后再加入0.74g苯甲醛，继续加热回流26小时。冷却，过滤产生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例1提供的化合物1.47g，产率 91％，其熔点为292-294℃。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ(ppm)：1.18～1.32(m，4H，环丙基-H)，3.81～3.82(m，1H，环丙基-H)，7.40～7.77(m，10H，Ph-H)，8.21(s，1H，C8-H)，8.37(s，2H，2×N＝CH)，8.46(s，1H，C5-H)，8.68(s，1H，C2-H)，10.37(s，1H，6-NH)，13.26(s，1H，CONH)；MS(m/z)：468[M+H]⁺，计算467.51[M]⁺。

实施例17

本实施例是实施例2提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌加热回流混合液至澄清，再加入对甲基苯甲醛0.84g，然后继续加热回流反应20小时。冷却，过滤产生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例2提供的化合物，产率90％，熔点 262-264℃。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ(ppm)：1.17～1.30(m，4H，环丙基-H)，2.28，2.32(s，6H，2×CH3)，3.78～3.83(m，1H，环丙基-H)，7.44～7.68(m，8H，Ph-H)，8.18(s，1H，C8-H)，8.35(s，2H，2×N＝CH)，8.44(s，1H，C5-H)，8.64(s，1H，C2-H)，10.36(s，1H，6-NH)，13.23(s，1H，CONH)；MS(m/z)：496[M+H]⁺，计算495.56[M]⁺。

实施例18

本实施例是实施例3提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌加热回流混合液至澄清，再加入对甲氧基苯甲醛0.95g，继续加热回流反应30小时。冷却，过滤产生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例3提供的化合物，产率89％，熔点 265-266℃。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ(ppm)：1.14～1.30(m，4H，环丙基-H)，3.34～3.37(m，1H，环丙基-H)，3.78(s，6H，2×OCH3)，7.04～7.67(m，8H，Ph-H)，8.19(s，1H，C8-H)，8.29～8.36(m，2H，2×N＝CH)，8.59(s，1H，C5-H)，8.67(s，1H，C2-H)，10.20(s，1H，6-NH)，13.19(s，1H，CONH)；MS(m/z)：528[M+H]⁺，计算527.56[M]⁺。

实施例19

本实施例是实施例4提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌加热回流混合液至澄清，再加入邻羟基苯甲醛0.85g，再加热回流26小时。冷却，过滤产生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例4提供的化合物，产率87％，熔点 303-304℃。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ(ppm)：1.15～1.30(m，4H，环丙基-H)，3.80～3.83(m，1H，环丙基-H)，6.94～7.70(m，8H，Ph-H)，8.21(s，1H，C8-H)，8.26(m，2H，2×N＝CH)，8.67(s，1H，C5-H)，8.69(s，1H，C2-H)，10.32，10.40(s，2H，2×OH)，11.34(s，1H，6-NH)，13.29(s，1H，CONH)；MS(m/z)：500[M+H]⁺，计算499.51[M]⁺。

实施例20

本实施例是实施例5提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌加热回流混合液至澄清，再加入邻甲氧基苯甲醛0.95g，再加热回流26小时。冷却，过滤产生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例5提供的化合物，产率86％，熔点 254-256℃。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ(ppm)：1.17～1.32(m，4H，环丙基-H)，3.35～3.37(m，1H，环丙基-H)，3.82(s，6H，2×OCH3)，7.25～7.66(m，8H，Ph-H)，8.18(s，1H，C8-H)，8.30～8.45(m，2H，2×N＝CH)，8.60(s，1H，C5-H)，8.68(s，1H，C2-H)，10.23(s，1H，6-NH)，13.25(s，1H，CONH)；MS(m/z)：528[M+H]⁺，计算527.56[M]⁺。

实施例21

本实施例是实施例6提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌加热回流混合液至澄清，再加入3，4-二甲氧亚甲基苯甲醛1.1g，再加热回流26小时。冷却，过滤产生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例6提供的化合物，产率86％，熔点＞300℃。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ(ppm)：1.16～1.31(m，4H，环丙基-H)，3.78～3.85(m，1H，环丙基-H)，6.11(s，2H，2×OCH2O)，6.99～7.36(m，6H，Ph-H)，8.01(s，1H，C8-H)，8.18～8.23(m，2H，2×N＝CH)，8.36(s，1H，C5-H)，8.74(s，1H，C2-H)，10.22(s，1H，6-NH)，13.18(s，1H，CONH)；MS(m/z)：556[M+H]⁺，计算555.53[M]⁺。

实施例22

本实施例是实施例7提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌加热回流混合液至澄清，再加入3-甲氧基-4-羟基-苯甲醛1.1g，再加热回流26小时。冷却，过滤产生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例7提供的化合物，产率95％，熔点＞300℃。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ(ppm)：1.18～1.34(m，4H，环丙基-H)，3.82～3.89(m，7H，环丙基-H和OCH3)，7.26～7.58(m，6H，Ph-H)，8.13(s，1H，C8-H)，8.22～8.34(m，2H，2×N＝CH)，8.38(s，1H，C5-H)，8.78(s，1H，C2-H)，10.46(s，2H，2×OH)，11.38(s，1H，6-NH)，13.36(s，1H，CONH)；MS(m/z)：560[M+H]⁺，计算559.56[M]⁺。

实施例23

本实施例是实施例8提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌加热回流混合液至澄清，再加入3-羟基-4-甲氧基-苯甲醛1.1g，再加热回流26小时。冷却，过滤产生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例8提供的化合物，产率92％，熔点＞300℃。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ(ppm)：1.15～1.32(m，4H，环丙基-H)，3.80～3.88(m，7H，环丙基-H和OCH3)，7.24～7.55(m，6H，Ph-H)，8.08(s，1H，C8-H)，8.14～8.25(m，2H，2×N＝CH)，8.26(s，1H，C5-H)，8.66(s，1H，C2-H)，10.38(s，2H，2×OH)，11.32(s，1H，6-NH)，13.33(s，1H，CONH)；MS(m/z)：560[M+H]⁺，计算559.56[M]⁺。

实施例24

本实施例是实施例9提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌加热回流混合液至澄清，再加入3，4，5-三甲氧基-苯甲醛1.4g，再加热回流26小时。冷却，过滤产生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例9提供的化合物，产率96％，熔点 258-260℃。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ(ppm)：1.17～1.36(m，4H，环丙基-H)，3.78～3.92(m，13H，环丙基-H和3×OCH3)，7.32～7.66(m，4H，Ph-H)，8.12(s，1H，C8-H)，8.20～8.28(m，2H，2×N＝CH)，8.34(s，1H，C5-H)，8.67(s，1H，C2-H)，11.35(s，1H，6-NH)，13.40(s，1H，CONH)；MS(m/z)：648[M+H]⁺，计算647.67[M]⁺。

实施例25

本实施例是实施例10提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌加热回流混合液至澄清，再加入对氯苯甲醛1.0g，再加热回流26小时。冷却，过滤产生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例10提供的化合物，产率83％，熔点 260-262℃。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ(ppm)：1.22～1.38(m，4H，环丙基-H)，3.83～3.95(m，4H，环丙基-H)，7.64～7.76(m，4H，Ph-H)，8.18(s，1H，C8-H)，8.25～8.32(m，2H，2×N＝CH)，8.45(s，1H，C5-H)，8.76(s，1H，C2-H)，11.40(s，1H，6-NH)，13.44(s，1H，CONH)；MS(m/z)：536 for C135[M+H]⁺，计算536.40[M]⁺。

实施例26

本实施例是实施例11提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌加热回流混合液至澄清，再加入对氟苯甲醛0.87g，再加热回流26小时。冷却，过滤产生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例11提供的化合物，产率93％，熔点 281-282℃。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ(ppm)：1.24～1.42(m，4H，环丙基-H)，3.86～4.07(m，4H，环丙基-H)，7.72～7.81(m，4H，Ph-H)，8.20(s，1H，C8-H)，8.32～8.36(m，2H，2×N＝CH)，8.51(s，1H，C5-H)，8.82(s，1H，C2-H)，11.44(s，1H，6-NH)，13.50(s，1H，CONH)；MS(m/z)：504[M+H]⁺，计算503.49[M]⁺。

实施例27

本实施例是实施例12提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌加热回流混合液至澄清，再加入对硝基苯甲醛1.1g，再加热回流26小时。冷却，过滤产生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例12提供的化合物，产率92％，熔点＞300℃。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ(ppm)：1.27～1.45(m，4H，环丙基-H)，3.88～4.14(m，4H，环丙基-H)，7.79～7.86(m，4H，Ph-H)，8.32(s，1H，C8-H)，8.37～8.41(m，2H，2×N＝CH)，8.56(s，1H，C5-H)，8.85(s，1H，C2-H)，11.46(s，1H，6-NH)，13.53(s，1H，CONH)；MS(m/z)：558[M+H]⁺，计算557.50[M]⁺。

实施例28

本实施例是实施例13提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌加热回流混合液至澄清，再加入4-吡啶醛0.80g，再加热回流10小时。冷却，过滤产生的固体，用无水乙醇重结晶，得实施例13提供的化合物，产率93％，熔点＞300℃。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ(ppm)：1.30～1.47(m，4H，环丙基-H)，3.92～4.22(m，4H，环丙基-H)，8.43(s，1H，C8-H)，8.44～8.62(m，7H，2×N＝CH，C5-H and py-H)，8.91(s，1H，C2-H)，11.52(s，1H，6-NH)，13.62(s，1H，CONH)；MS(m/z)：470[M+H]⁺，计算469.48[M]⁺。

实施例29

本实施例是实施例14提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌加热回流混合液至澄清，再滴加3-吡啶醛0.80g，再加热回流10小时。冷却，过滤产生的固体，用无水乙醇重结晶，得实施例14提供的化合物，产率83％，熔点262-264℃。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ(ppm)：1.28～1.44(m，4H，环丙基-H)，3.90～4.17(m，4H，环丙基-H)，8.38(s，1H，C8-H)，8.41～8.60(m，7H，2×N＝CH，C5-H and py-H)，8.87(s，1H，C2-H)，11.46(s，1H，6-NH)，13.55(s，1H，CONH)；MS(m/z)：470[M+H]⁺，计算 469.48[M]⁺。

实施例30

本实施例是实施例15提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌加热回流混合液至澄清，再滴加2-吡啶醛0.80g，再加热回流10小时。冷却，过滤产生的固体，用无水乙醇重结晶，得实施例15提供的化合物，产率73％，熔点 248-250℃。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)δ(ppm)：1.25～1.42(m，4H，环丙基-H)，3.87～4.15(m，4H，环丙基-H)，8.36(s，1H，C8-H)，8.37～8.59(m，7H，2×N＝CH，C5-H and py-H)，8.85(s，1H，C2-H)，11.34(s，1H，6-NH)，13.48(s，1H，CONH)；MS(m/z)：470[M+H]⁺，计算 469.48[M]⁺。

试验例 实施例1-15提供的各环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的抗肿瘤活性测定

实施例1-15提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱及其结构相近的对照双西弗碱抗肿瘤药比生群(Bisantrene，BT)为供试样品，用二甲基亚砜(DMSO)配成1.0×10-2μmol·L^-1浓度的储备液，用10％小牛血清的RPMI-1640培养液按10倍稀释法稀释到所需的5个浓度梯度，取对数生长期的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞以每孔5000个细胞接种于96孔板，培养隔夜后，加入不同浓度的上述供试样品，48小时后弃去培养基，每孔加入1g·L^-1的溴化四氮唑蓝(MTT)溶液100μL，继续培养4小时后弃去上清液，每孔加入150μL的二甲亚砜(DMSO)，轻轻振荡30分钟，用酶标仪在570nm波长处测其吸光度(OD)值；再取对数生长期的人白血病细胞(HL60)和鼠白血病细胞(L1210)，以每孔7000个细胞接种于96孔板，随后加入不同浓度的上述供试样品，48小时后每孔加入5g·L^-1的MTT溶液10μL，继续培养4小时后加入10％十二烷基磺酸内(SDS)溶液100μL培养过夜，用酶标仪在570nm波长处测其吸光度(OD)值。

按下列公式计算出各浓度对癌细胞的抑制率，公式为：细胞抑制率(％)＝[(1-实验组吸光度值)/对照组吸光度值]×100％，然后以各药物浓度对数值对各浓度下的细胞抑制率作线性回归，得到浓度-效应方程，从所得浓度-效应方程计算出各供试化合物对实验癌细胞的半数抑制浓度(IC₅₀)，具体测定数据见表1所示。

表1各实施例提供环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的抗肿瘤活性测定数据

从表1可以看出，实施例1-15提供的各环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱对3种实验癌细胞株的IC₅₀值均低于50.0μM，这表明实施例1-15提供的各环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱均具有较强的体外细胞毒活性。尤其是苯环含游离羟基和氟的化合物如实施例4化合物、实施例7化合物、实施例8化合物和实施例11化合物以及杂环芳香烃基化合物如实施例14化合物的活性优于或接近对照药物比生群的活性，具有强的体外细胞毒活性。

按照药物开发的一般途径是先进行常规的抗肿瘤体外筛选，然后进行针对性的成药研究，所以本发明提供的化合物具有强的抗肿瘤活性，可通过与人体可接受的酸成盐或与药用载体混合用于制备抗肿瘤药物。

Claims (5)

1.一种环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱，其特征在于，化学结构式如通式I所示：

其中，Ar选自苯基、取代苯基、杂环芳香烃基和取代杂环芳香烃基。

2.根据权利要求1所述的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱，其特征在于，Ar选自苯基、烷基苯基、羟基苯基、烷氧基苯基、卤代苯基、硝基苯基、吡啶基、吡啶稠杂环中的任一种。

3.根据权利要求1或2所述的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱，其特征在于，Ar选自

中的任一种。

4.一种环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将6-氟-7-氯-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-3-喹啉羧酸乙酯溶于过量的质量百分比浓度为80％的水合肼中，然后回流反应24～36小时，制得7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼；

(2)将7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼与无水乙醇混合，制得混合液，然后加热回流所述混合液至澄清，之后向所述混合液中加入通式II所示化合物，然后再加热回流10～30小时，制得通式I所示化合物；其中通式II所示化合物与7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼的摩尔比为：通式II所示化合物∶7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼＝(1.2～1.3)∶1；

其中，Ar选自苯基、取代苯基、杂环芳香烃基和取代杂环芳香烃基。

5.一种环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱及其药用盐在制备抗肿瘤药物中的应用。