CN102499083B - 一种广豆根组培苗叶柄的生根方法 - Google Patents

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Abstract

一种广豆根组培苗叶柄的生根方法，包括如下步骤：(1)将广豆根组培苗接种到MS壮苗培养基中壮苗，使组培苗叶片展开获得完整的木质化程度较高的带柄复叶；(2)将带柄复叶置于MS生根培养基中培养，诱导生根。采用本发明所述的方法可从广豆根的组培苗叶柄中获得大量的根部材料，为广豆根药材来源和有效成分的提取材料来源提供新途径。

Description

一种广豆根组培苗叶柄的生根方法
技术领域
本发明涉及一种组培苗叶柄的生根方法，特别是一种广豆根组培苗叶柄的生根方法。
背景技术
广豆根，也称山豆根、南豆根，为豆科植物越南槐(Sophora tonkinensis Gapnep.)的干燥根及根茎，是著名的广西道地药材和常用中药，为《中华人民共和国药典》所收载。主要分布在广西，云南和贵州亦有产，但产量较小。广豆根药材味苦、寒，有毒，具有清热解毒、消肿止痛等功效，可以治疗喉痈、喉风、喉痹、牙龈肿痛、喘满热咳、肝炎、便秘、黄疸、下痢、痔疾、秃疮、疥癣及蚊、虫、犬咬伤等。
广豆根的药用部位是干燥根及根茎，除了作为传统的中药材使用外，医药工业还以广豆根作为原料，大量研制开发治疗肝炎的针剂、咽喉肿痛的片剂以及抗肿瘤的中成药，因此广豆根药材的需求量越来越大。但广豆根的地域分布范围相当有限，常零星生长于石山岩缝之中；在自然条件下，广豆根开花结荚期的病虫害严重、种子成熟时容易自然脱落，且种子采收后活力容易衰退，这些常造成种子产量低、质量差，生产上难以实现大面积栽培。但为了满足市场需求，获得经济利益，人们大量采挖广豆根资源，致使野生广豆根资源濒临枯竭。通过组织培养方法，从组培苗的叶柄中诱导产生大量不定根，可以为广豆根药材来源和有效成分的提取材料来源提供新途径。
发明内容
本发明的目的是提供一种广豆根组培苗叶柄的生根方法，它能够快速获得大量根类材料，满足医药工业的需要。
本发明通过以下技术方案达到上述目的：一种广豆根组培苗叶柄的生根方法，包括以下步骤：
(1)组培丛生芽壮苗培养：取广豆根组培丛生苗，接种到MS壮苗培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为12-14小时/天的条件下培养30天，丛生芽木质化后叶片展开，获得带三片叶片的带柄复叶，所述MS壮苗培养基为含1.0mg/L的6-BA、0.1mg/L的NAA、0.5mg/L的IBA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(2)组培苗叶柄生根培养：将步骤(1)得到的带三片叶片的带柄复叶，从叶柄处切下，不带腋芽，将叶柄接种到MS生根培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为12-14小时/天的条件下培养30天，从叶柄基部萌发大量的不定根，所述MS生根培养基为含0.1-0.5mg/L的IBA、1.0-2.0mg/L的NAA、0-0.2mg/L的IAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。
本发明的突出优点在于：
(1)本发明通过组织培养技术诱导广豆根组培苗叶柄生根，在短时间内获得大量广豆根不定根，为广豆根药材来源和有效成分的提取材料来源提供新途径，以满足医药工业生产的需要。
(2)在MS壮苗培养基中添加浓度为1.0mg/L的6-BA、0.1mg/L的NAA、0.5mg/L的IBA可促进丛生芽茎段长高、木质化及叶片展开。
(3)采用本发明所述的培养方法，得到的叶柄生根率在95％以上，每个叶柄平均带6-8个根，根长为6-10厘米，直接收获后可作为有效成分提取的原材料，且带叶叶柄可重复作为诱导材料诱导生根。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案进一步说明。
一种广豆根组培苗叶柄的生根方法，包括以下步骤：
(1)组培丛生芽壮苗培养：取广豆根组培丛生苗，接种到MS壮苗培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为12-14小时/天的条件下培养30天，丛生芽木质化后叶片展开，获得带三片叶片的带柄复叶，其中MS壮苗培养基中含1.0mg/L的6-BA、0.1mg/L的NAA、0.5mg/L的IBA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(2)组培苗叶柄生根培养：将步骤(1)得到的带三片叶片的带柄复叶从叶柄处切下，不带腋芽，将叶柄接种到MS生根培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为12-14小时/天的条件下培养30天，从叶柄基部萌发大量的不定根，其中MS生根培养基中含有不同浓度的IBA、NAA和IAA，见表1，30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂外，培养基的pH值为5.8。表2结果表明：IBA和IAA对广豆根组培苗叶柄的生根率具有显著影响，NAA对生根率的影响较小，根据生根率指标确定的最佳培养基为A2B1C2，即培养基中添加激素为0.3mg/L的IBA、1.0mg/L的NAA、0.1mg/L的IAA；IBA对平均单株鲜重有显著影响，其次为IAA和NAA，但影响均不显著，根据平均单株鲜重指标确定的最佳培养基为A2B1C2，即培养基中添加激素为0.3mg/L的IBA、1.0mg/L的NAA、0.1mg/L的IAA。
表1 组培苗叶柄生根培养基的正交试验因素水平表
Figure BSA00000598610800031
表2 不同激素对广豆根组培苗叶柄生根培养30天的生根效果

Claims (1)

1.一种广豆根组织苗叶柄的生根方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：
（1）组培丛生芽壮苗培养：取广豆根组培丛生苗，接种到MS壮苗培养基中，在培养温度为23-27°C，光照强度1500lux，光照时间为12-14小时/天的条件下培养30天，丛生芽木质化后叶片展开，获得带三片叶片的带柄复叶，所述MS壮苗培养基为含1.0mg/L的6-BA、0.1mg/L的NAA、0.5mg/L的IBA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
（2）组培苗叶柄生根培养：将步骤（1）得到的带三片叶片的带柄复叶，从叶柄处切下，不带腋芽，将叶柄接种到MS生根培养基中，在培养温度为23-27°C，光照强度1500lux，光照时间为12-14小时/天的条件下培养30天，从叶柄基部萌发大量的不定根，所述MS生根培养基为含0.1-0.5mg/L的IBA、1.0-2.0mg/L的NAA、0-0.2mg/L的IAA、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。
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