CN102492020B - 一种匹多莫德化合物及其新制法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种匹多莫德化合物及其制法，该方法是将现有技术制备的匹多莫德粗品，经过以下步骤制备得到高纯度的匹多莫德化合物：向匹多莫德粗品原料中加入弱碱溶液，充分反应至澄清，得匹多莫德盐溶液，然后加入活性炭吸附，过滤收集滤液，然后向上述过滤溶液中加入酸，过滤收集沉淀，最后经制备型酸性氧化铝色谱柱分离纯化，收集洗脱液，减压浓缩，真空干燥，得到匹多莫德精制品。该方法工艺简单，操作方便，成本低，适合于规模化生产，提高了纯度从而提高制剂产品质量，保障其在抗敏感菌感染用药中的安全性，减少了毒副作用。

Description

一种匹多莫德化合物及其新制法

技术领域

本发明涉及一种匹多莫德化合物及其新制法，属于医药技术领域。

背景技术

匹多莫德(Pidotimod)，由意大利POLI化学工业公司在20世纪80年代后期成功合成，并与1993年获准上市用于临床。其化学名为(R)-3-[(S)-(5-氧代-2-吡咯烷基)羰基]-四氢噻唑-4-羧酸。分子式：

匹多莫德是人工合成的二肽类药物，是一种安全有效的免疫功能促进剂，能促进非特异性免疫反应，又能促进特异性免疫反应。它可促进巨噬细胞及中性粒细胞的吞噬活性，提高其趋化性；激活自然杀伤细胞；促进有丝分裂原引起的淋巴细胞增殖，使免疫功能低下时降低的辅助性T细胞(CD4⁺)与抑制性T细胞(CD8⁺)的比值升高恢复正常；通过刺激白介素-2和β-干扰素促进细胞免疫反应。临床实验均表明匹多莫德虽无直接的抗菌及抗病毒活性，但通过促进肌体的免疫功能对细菌(肺炎链球菌，大肠杆菌，绿脓杆菌，变形杆菌)和病毒(流行病毒，单纯疱疹病毒，鼠脑心肌炎病毒及门果病毒等)感染发挥显著的疗效。临床上主要用于治疗上下呼吸道反复感染、耳鼻喉科反复感染、泌尿系统感染及辅助治疗恶性肿瘤等免疫功能缺陷方面的疾病，是一种治疗显著的免疫促进剂。静脉注射匹多莫德适用于不便口服给药的患者，而且起效快，生物利用度高。

匹多莫德的合成方法主要有：用L-半胱氨酸或其盐酸盐与甲醛反应生成L-噻唑烷-4-羧酸，然后与L-焦谷氨酸的反应活性的酯或L-焦谷氨酸的酰氯反应制得。制备反应活性的酯时可用五氯苯酚、五氟苯酚、2，4，5-三氯苯酚、N-羟基琥珀酰亚胺或N-羟基邻苯二甲酰亚胺，但制得的反应活性的酯毒性较大，且氮取代的反应活性的酯的稳定性很差；而制备酰氯时通常采用氯化亚砜、五氯化磷或草酰氯等，但氯化亚砜、五氯化磷和草酰氯等均具有毒性和腐蚀性，能严重刺激眼睛、皮肤和呼吸道，应用于生产中设备腐蚀严重，污染问题严重，环境问题突出，且它们作为氯化试剂的工艺还存在产品收率和纯度较低等问题。另外，用L-半胱氨酸盐酸盐与甲醛进行反应，需用吡啶和乙醇处理，成本高、污染严重。

US4839387公开了一种匹多莫德的制备方法，以及用水重结晶纯化。CN101423516A公开了一种匹多莫德钠盐的制备及药用用途，它是由匹多莫德与氢氧化钠在水或乙醇中反应后，经浓缩干燥或冷冻干燥得到。CN102101881A公开了一种匹多莫德钾盐的制备及应用，它是由等摩尔的匹多莫德与氢氧化钾在水中或其他溶剂或多种溶剂混合液中反应后，制得匹多莫德钾盐。

CN1680427A公开了一种易于水溶解的匹多莫德复盐及制备方法。它是将匹多莫德与精氨酸、赖氨酸或葡甲胺在合适的溶剂中充分混合，使匹多莫德与精氨酸、赖氨酸或葡甲胺在液体环境中接触而形成复盐，再将溶剂除去。但这种方法过程过于繁琐，形成的复盐还不容易保存。

CN102167727A公开了一种匹多莫德的合成方法，所述合成方法通过L-半胱氨酸与多聚甲醛或甲醛反应生成L-噻唑烷-4-羧酸、其再进行酯化生成L-噻唑烷-4-羧酸酯或者用L-半胱氨酸酯类盐酸盐与多聚甲醛或甲醛反应直接生成L-噻唑烷-4-羧酸酯，然后L-噻唑烷-4-羧酸酯与L-焦谷氨酸进行缩合反应生成(4R)-3-[[(2S)-5-氧代-2-吡咯烷基]羰基]-4-噻唑烷羧酸酯，再经水解反应合成匹多莫德，用浓盐酸调节反应液pH值至1～2后，搅拌析晶2～10h，过滤，滤饼用冷水洗涤，过滤，滤饼加水，加热至回流温度，保温搅拌0.5～2h，冷却至0～10℃搅拌2～10h，析出晶体，过滤，滤饼干燥，制得式(I)所示的匹多莫德，其依然是水重结晶纯化。

胡昆在《中国医药工业杂志》(2009年12期，匹多莫德的合成)中公开了L-半胱氨酸盐酸盐与甲醛反应生成L-4-噻唑烷羧酸(4)；另用L-焦谷氨酸与氯化亚砜反应制得L-焦谷氨酰氯(5)；4和5在三乙胺作缚酸剂的条件下反应制得匹多莫德，水重结晶纯化，总收率约55％。

李秀珍在《化学世界》(2005年09期，免疫促进剂匹多莫德的合成改进)中公开了以L半胱氨酸、L-焦谷氨酸为起始原料，经三步合成了匹多莫德。在传统的合成方法基础上进行了一定的改进，即在第二步的酯化反应中采用了冰浴条件下向无水甲醇中滴加CH3COCl，得到甲醇的HCl溶液，在其未达到饱和状态时仍取得了比较好的酯化结果，其应用异丙醇∶甲醇＝6∶4进行重结晶纯化，收率51％。

单世明在《中国新药杂志》(2000年11期，免疫促进剂匹多莫德的合成)中公开了以L半胱氨酸及L焦谷氨酸为起始原料，经成环、酯化及缩合3步反应，合成该化合物，用蒸馏水重结晶纯化。

事实上，一般的重结晶纯化技术难于获得高纯度的匹多莫德，因而不容易得到高产率高纯度的匹多莫德。可以看出，现有技术的方法或者步骤繁多，或者收率较低，耗费了大量昂贵的原料，造成成本高昂，或使用了毒性溶剂，造成药物的毒性残留，影响了制剂产品质量。

另外，匹多莫德在酸碱环境和高温环境下容易发生破换，更容易发生水解。在化合物存放不当或存放时间过长时，会导致药物活性成分含量降低，色泽加强，有关物质的含量升高。在某些情况下，由于生产工艺控制不当，导致药物纯度也不符合要求。现有技术对此没有公开专门的纯化方法，因此有必要对不合格的产品或粗品进一步进行纯化，以高产率提供高纯度的化合物。本领域迫切需要研究出一种低成本、收率高、适用于大生产的尼索地平的合成方法，以克服上述缺点。

因此，特别需要一种理想的方法，其可以简单有效地进行匹多莫德的精制，提高了制剂产品的质量。本发明需要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种匹多莫德化合物的纯化方法，该方法简单，产品纯度高，收率高，易于工业化生产。

发明内容

本发明的目的是提供一种匹多莫德化合物的制备方法，通过酸碱反应，活性炭吸附及制备型酸性氧化铝色谱柱分离纯化，可以简单有效地进行匹多莫德的精制，提高了制剂产品的质量，减少了毒副作用，适合于工业化大生产。本发明提供了不使用昂贵和有害的试剂以及苛刻的反应参数的方法，获得了最大产量和优良纯度的匹多莫德。

申请人在大量现有文献的基础上，通过大量筛选的实验，发现上述文献以及一般的纯化分离方法例如结晶等方法难于获得高纯度高产率的化合物，而各种分离纯化方法均存在缺陷。本发明人经过长期认真的研究，意外发现了一种匹多莫德化合物的纯化方法，令人惊奇地获得了高产率高纯度的产品。

本发明提供了一种匹多莫德化合物的制备方法，解决了目前技术合成的匹多莫德纯度低的缺点，提高了纯度，保障了用药的安全性，减少了毒副作用，该方法工艺简单，操作方便，成本低，适合于规模化生产。

本发明提供了一种利用酸性氧化铝柱层析分离的方法将低纯度匹多莫德化合物进行纯化的方法，本方法可以用于匹多莫德制备的后处理过程，也可以用于纯度不合格的产品或粗品的纯化。

本申请人经过长期认真的大量研究，分离纯化过程中，筛选了硅胶、氧化铝、大孔吸附树脂或大孔离子交换树脂等各种填料色谱柱，例如硅胶的粒径为45-250μm、孔径为

的硅胶；中性氧化铝或酸性氧化铝粒径为18-200μm的氧化铝或酸性氧化铝，A850型强碱丙烯酸系树、A500P型大孔强碱苯乙烯系树脂，大孔树脂型号为AmberliteXAD-6、AmberliteXAD-7、AmberliteXAD-8、Diaion HP2MG、GDX-501、HPD400、HPD450、HPD750、AmberliteXAD-9、AmberliteXAD-10、GDX-401、GDX-601等大孔树脂，本发明人意外发现应用大孔树脂对产品的纯度并没有明显改善，硅胶也不理想，而专用的酸性氧化铝不仅可以充分吸附上柱物中的杂质成分及其它色素，还对本品纯化有着独到稳定的意外效果，而且操作较简易。

本发明的技术方案如下：

(1)将匹多莫德粗品分散于适量水中，充分搅拌下滴加弱碱溶液至溶液pH值约为7-7.5，得匹多莫德盐溶液；然后加入活性炭吸附，过滤收集滤液；

(2)向上述滤液中加入酸，室温搅拌至溶液的pH值为1～2，冷却至0～4℃，静置1-3小时析出沉淀，过滤收集沉淀；

(3)将步骤(2)中的产品用4∶1甲醇-水溶解，再加入适量酸性氧化铝搅拌均匀，挥去溶剂后加到制备的色谱柱上端，利用制备型酸性氧化铝色谱柱进行分离纯化，收集洗脱液，减压浓缩，在25～30℃下真空干燥，得到匹多莫德。

本发明人发现酸碱的选用以及其pH值的控制对产品的质量非常重要。上述所述的制备方法，其中所述的碱选自磷酸钠、磷酸钾、磷酸氢二钠、磷酸氢二钾、磷酸氢二铵、磷酸铵中的一种，优选磷酸氢二钠或磷酸氢二钾。上述所述的制备方法，其中步骤(1)中加入弱碱溶液至溶液的pH值为7-7.5。

上述所述的制备方法，其中步骤(1)中加入占溶液总体积0.1-0.5％(g/ml)的活性炭，35-45℃保温，搅拌15-30min。

上述所述的制备方法，其中步骤(2)中所述的酸选自盐酸、乙酸和磷酸中的一种，优选盐酸。上述所述的制备方法，其中步骤(3)中加入酸至溶液的pH值为1～2。

上述所述的制备方法，其中步骤(3)中所述固定相的粒径为18-200μm，孔径为约6-9nm的pH3.5-4.5细孔柱层析专用酸性氧化铝。上述所述的制备方法，其中步骤(3)中所述酸性氧化铝可以例如为粒径为50-200μm，孔径为6nm，pH 4.5的Baker柱层析专用酸性氧化铝；或粒径为63-200μm，孔径为9nm的pH 4.0的Merck细孔酸性氧化铝；或粒径为18-32μm，孔径为6nm的pH 4.5的ICN细孔酸性氧化铝。

在本发明的一个方面，作为优选，每次纯化药物的质量与色谱柱填料的质量之比为1∶10-200，优选质量比为1∶15-100。一般而言，本发明所用色谱柱的色谱柱包括直径为约0.1至约20cm，优选为至少5cm。此方法中色谱柱长度范围优选为约10厘米至约200厘米，更优选长度范围为约40厘米至约120厘米，最优选的长度为80厘米，这可以根据需要纯化药物的质量而选择。

流动相的用量只要满足将药物基本上完全洗脱即可，洗脱后的流分分段收集，不同段的流分中药物的含量不同，为了获得高纯度的药物(例如纯度大于99.5％)，需将药物含量大于90％的流分合并，优选将药物含量大于95％的流分合并。

在本发明的一个方面，在本发明方法中得到的所需纯度在某种程度上依赖于杂质的量和色谱柱的操作环境。在流动相中有机溶剂的选择和用量必须是可控的，使得不会过早地把物质洗脱出来。

上述所述的制备方法，其中所述的柱层析的压力为0.5-5.0MPa，优选为1.0-2.5MPa。

上述所述的制备方法，其中所述的流动相是体积比为3∶1的乙醇和乙酸乙酯的混合溶剂。上述所述的制备方法，其中所述的柱层析的流速为1.0-2.0ml/min。

本发明的一个优选的实施方案中，所述的匹多莫德化合物的制备方法，包括如下步骤：

(1)将匹多莫德粗品分散于适量水中，充分搅拌下滴加磷酸氢二钠或磷酸氢二钾溶液至溶液pH值约为7-7.5，得匹多莫德盐溶液；然后加入占溶液总体积0.1-0.5％(g/ml)的活性炭吸附，35-45℃保温，搅拌15-30min，过滤，收集滤液；

(2)向上述滤液中加入盐酸，室温搅拌至溶液的pH值为1～2，冷却至0～4℃，静置1-3小时析出沉淀，过滤收集沉淀；

(3)将步骤(2)中的产品用4∶1甲醇-水溶解，再加入适量酸性氧化铝搅拌均匀，挥去溶剂后加到制备的色谱柱上端，利用制备型酸性氧化铝色谱柱进行分离纯化，其中所用的流动相为体积比为3∶1的乙醇和乙酸乙酯的混合溶剂，所用的固定相为粒径为18-200μm，孔径为约6-9nm的pH3.5-4.5细孔柱层析专用酸性氧化铝，例如粒径为50-200μm，孔径为6nm，pH 4.5的Baker柱层析专用酸性氧化铝；或粒径为63-200μm，孔径为9nm的pH 4.0的Merck细孔酸性氧化铝；或粒径为18-32μm，孔径为6nm的pH 4.5的ICN细孔酸性氧化铝，流速为1.0-2.0ml/min，柱温20℃，柱压1.0-2.5MPa，收集洗脱液，减压浓缩，在25～30℃下真空干燥，得到匹多莫德。

此外，本发明方法纯度高，得到纯度不低于99.7％，收率不低于95.0％。其纯度检测方法是本领域已知的，可应用高效液相色谱法，例如参见朱永琴在《河南科技大学学报(医学版)》2011年01期中公开了HPLC法测定匹多莫德含量及其有关物质，应用色谱柱：Eclipse Plus C18(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：0.01mol/L磷酸二氢钠溶液-甲醇-异丙醇(97∶2∶1)；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；检测波长：210nm，此方法在0.05～20.0mg/mL范围内线性良好，最小检出量为0.5ng。

本发明所述的匹多莫德化合物的精制方法，可以得到纯度(匹多莫德纯度检测方法可参见新药转正标准第35册，匹多莫德第153页)不低于99.7％的匹多莫德精制品，解决了原料药纯度不高的难题，保证了匹多莫德的产品质量，减少了毒副作用，该方法简单易操作，适合于工业化生产。

具体实施方式

以下通过具体实施方式进一步解释或说明本发明内容，但实施例不应被理解为对本发明保护范围的限制。

实施例1

(1)将100g纯度95.68％的匹多莫德粗品分散于1000ml水中，充分搅拌下滴加磷酸氢二钠溶液，至溶液的pH值为7.0，得匹多莫德钠盐溶液；然后加入4g活性炭，45℃保温，搅拌30min，过滤，收集滤液；

(2)向上述滤液中加入盐酸，室温搅拌至溶液的pH值为1.0，冷却至约4℃，静置1小时析出沉淀，过滤收集沉淀；

(3)将步骤(2)中的产品用适量4∶1甲醇-水溶解，再加入100g酸性氧化铝搅拌均匀，挥去溶剂后加到制备的色谱柱上端，利用制备型色谱柱进行分离纯化，其中所用的流动相为体积比为3∶1的乙醇和乙酸乙酯的混合溶剂，固定相为粒径50-200μm孔径6nm的pH4.5的Baker柱层析专用酸性氧化铝，流速为2.0ml/min，柱温20℃，柱压2.5MPa，收集洗脱液，减压浓缩，在30℃下真空干燥，得到匹多莫德91.7g，收率95.55％，HPLC纯度为99.70％，熔点193～194℃，[α]²⁵ _D＝-150°(C＝2，5N HCl)。

¹H NMR(DMSO-d₆)δ：13.0(1H，s)，8.5(1H，s)，5.0～5.8(4H，m)，3.8～4.2(2H，m)，2.0～2.4(4H，m)。M+1245。

实施例2

(1)将100g纯度95.68％的匹多莫德粗品分散于1000ml水中，充分搅拌下滴加磷酸氢二钾溶液中，至溶液的pH值为7.2，得匹多莫德盐溶液；然后加入2.5g的活性炭，35℃保温，搅拌15min，过滤，收集滤液；

(2)向上述滤液中加入盐酸，室温搅拌至溶液的pH值为1.4，冷却至约0℃，静置3小时析出沉淀，过滤收集沉淀；

(3)将步骤(2)中的产品用4∶1甲醇-水溶解，再加入100g酸性氧化铝搅拌均匀，挥去溶剂后加到制备的色谱柱上端，利用制备型色谱柱进行分离纯化，其中所用的流动相为体积比为3∶1的乙醇和乙酸乙酯的混合溶剂，固定相为粒径粒径为18-32μm，孔径为6nm的pH 4.5的ICN细孔酸性氧化铝，流速为1.2ml/min，柱温20℃，柱压1.5MPa，收集洗脱液，减压浓缩，在25℃下真空干燥，得到匹多莫德91.1g，收率95.0％，HPLC纯度为99.78％，熔点193～194℃，[α]²⁵ _D＝-150°(C＝2，5N HCl)。

¹H NMR(DMSO-d₆)δ：13.0(1H，s)，8.5(1H，s)，5.0～5.8(4H，m)，3.8～4.2(2H，m)，2.0～2.4(4H，m)。M+1 245。

实施例3

(1)将100g纯度95.68％的匹多莫德粗品分散于1000ml水中，充分搅拌下滴加磷酸氢二钠溶液中，至溶液的pH值为7.5，得匹多莫德盐溶液；然后加入5g活性炭，40℃保温，搅拌20min，过滤，收集滤液；

(2)向上述滤液中加入盐酸，室温搅拌至溶液的pH值为2.0，冷却至约4℃，静置1小时析出沉淀，过滤收集沉淀；

(3)将步骤(2)中的产品用4∶1甲醇-水溶解，再加入100g酸性氧化铝搅拌均匀，挥去溶剂后加到制备的色谱柱上端，利用制备型色谱柱进行分离纯化，其中所用的流动相为体积比为3∶1的乙醇和乙酸乙酯的混合溶剂，固定相为18-32μm孔径为6nm的的pH 4.5的ICN酸性氧化铝，流速为1ml/min，柱温20℃，柱压1.0MPa，收集洗脱液，减压浓缩，在30℃下真空干燥，得到匹多莫德91.8g，收率95.8％，HPLC纯度为99.85％，熔点193～194℃，[α]²⁵ _D＝-150°(C＝2，5N HCl)。

¹H NMR(DMSO-d₆)δ：13.0(1H，s)，8.5(1H，s)，5.0～5.8(4H，m)，3.8～4.2(2H，m)，2.0～2.4(4H，m)。M+1 245。

实施例4

(1)将100g纯度95.68％的匹多莫德粗品分散于1000ml水中，充分搅拌下滴加磷酸氢二钠溶液中，至溶液的pH值为7.3，得匹多莫德盐溶液；然后加入1g活性炭，40℃保温，搅拌25min，过滤，收集滤液；

(2)向上述滤液中加入盐酸，室温搅拌至溶液的pH值为1.3，冷却至约4℃，静置2小时析出沉淀，过滤收集沉淀；

(3)将步骤(2)中的产品用4∶1甲醇-水溶解，再加入100g酸性氧化铝搅拌均匀，挥去溶剂后加到制备的色谱柱上端，利用制备型色谱柱进行分离纯化，其中所用的流动相为体积比为3∶1的乙醇和乙酸乙酯的混合溶剂，固定相为粒径为63-200μm，孔径为9nm的pH 4.0的Merck细孔酸性氧化铝，流速为1.5ml/min，柱温20℃，柱压2.0MPa，收集洗脱液，减压浓缩，在25℃下真空干燥，得到匹多莫德91.2g，收率95.1％，HPLC纯度为99.81％，熔点193～194℃，[α]²⁵ _D＝-150°(C＝2，5N HCl)。

¹H NMR(DMSO-d₆)δ：13.0(1H，s)，8.5(1H，s)，5.0～5.8(4H，m)，3.8～4.2(2H，m)，2.0～2.4(4H，m)。M+1 245。

上述实施例1-4所用的酸性氧化铝为供应商Baker、Merck或ICN的柱层析专用酸性氧化铝，粒径为18-200μm，孔径为约6nm，pH为3.5-4.5。

对比实施例1

(1)将100g纯度95.68％的匹多莫德粗品分散于1000ml水中，滴加氨水溶液中，充分搅拌至溶液的澄清，得匹多莫德盐溶液；然后加入4g活性炭，45℃保温，搅拌30min，过滤，收集滤液；

(2)向上述滤液中加入甲酸，室温搅拌至溶液的pH值为2.0，冷却至约4℃，静置1小时析出沉淀，过滤收集沉淀；

(3)将步骤(2)中的产品用4∶1甲醇-水溶解，再加入100g中性氧化铝搅拌均匀，挥去溶剂后加到制备的色谱柱上端，利用制备型色谱柱进行分离纯化，其中所用的流动相为体积比为3∶1的乙醇和乙酸乙酯的混合溶剂，固定相为粒径50-200μm孔径6nm的pH 7.0的Baker柱层析专用中性氧化铝，流速为2.0ml/min，柱温20℃，柱压2.5MPa，收集洗脱液，减压浓缩，在30℃下真空干燥，得到匹多莫德82.7g，收率85.22％，HPLC纯度为98.6％，熔点191～195℃。

对比实施例2

(1)将100g纯度95.68％的匹多莫德粗品分散于1000ml水中，充分搅拌下滴加磷酸氢二钾溶液中，至溶液的pH值为7.2，得匹多莫德盐溶液；然后加入2.5g的活性炭，35℃保温，搅拌15min，过滤，收集滤液；

(2)向上述滤液中加入盐酸，室温搅拌至溶液的pH值为1.4，冷却至约0℃，静置3小时析出沉淀，过滤收集沉淀

(3)将步骤(2)中的产品用4∶1甲醇-水溶解，再加入100gHP-20大孔吸附树脂柱上端，利用制备型HP-20大孔吸附树脂柱进行分离纯化，用纯化水洗至澄清，然后用30％的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，在25℃下真空干燥，得到匹多莫德77.8g，收率79.77％，HPLC纯度为98.10％，熔点191～195℃。

对比实施例3

(1)将100g纯度95.68％的匹多莫德粗品分散于1000ml水中，充分搅拌下滴加磷酸氢二钠溶液中，至溶液的pH值为7.5，得匹多莫德盐溶液；然后加入0.8g活性炭，40℃保温，搅拌20min，过滤，收集滤液；

(2)向上述滤液中加入盐酸，室温搅拌至溶液的pH值为2.0，冷却至约4℃，静置1小时析出沉淀，析出沉淀，过滤收集沉淀；

(3)将步骤(2)中的产品用4∶1甲醇-水溶解，再加入100g硅胶搅拌均匀，挥去溶剂后加到制备的色谱柱上端，利用制备型色谱柱进行分离纯化，其中所用的流动相为体积比为3∶1的乙醇和乙酸乙酯的混合溶剂，所用固定相为18-32μm孔径为6nm的色谱专用硅胶，流速为1ml/min，柱温20℃，柱压1.0MPa，收集洗脱液，减压浓缩，在30℃下真空干燥，得到匹多莫德87.9g，收率91.0％，HPLC纯度为99.05％，熔点193～196℃。

对比实施例4

(1)将100g纯度95.68％的匹多莫德粗品分散于1000ml水中，充分搅拌下滴加磷酸氢二钠溶液中，至溶液的pH值为7.3，得匹多莫德盐溶液；然后加入1g活性炭，40℃保温，搅拌25min，过滤，收集滤液；

(2)向上述滤液中加入盐酸，室温搅拌至溶液的pH值为1.3，冷却至约4℃，静置2小时析出沉淀，析出沉淀，过滤收集沉淀；

(3)将步骤(2)中的产品用4∶1甲醇-水溶解，再加入100g AB-8大孔吸附树脂柱上端，利用制备型AB-8大孔吸附树脂柱进行分离纯化，用纯化水洗至澄清，然后用30％的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，在25℃下真空干燥，得到匹多莫德80.4g，收率82.52％，HPLC纯度为98.21％，熔点191～195℃。

上述实施例和对比例从不同方面充分说明了本发明特定组合方法的优越性，尤其是包括制备型酸性氧化铝色谱柱的色谱条件以及优化的参数，带来了意想不到的效果，是理论上无法合理预期的。不受理论限制，可能是各种纯化方法对药物中不同杂质的除去效果不同，本发明组合的纯化方法对药物中的杂质具有协同的分离作用，本发明提供的精制方法具有实质的特点和显著的进步，取得的意想不到的技术效果，获得了高产率高纯度的产品。

根据上述的实施例对本发明作了详细描述，并且本发明通过与之相关的对比实施例证实本发明取得了令人意外的优异效果。需说明的是，以上的实施例仅仅为了举例说明本发明而已。在不偏离本发明的精神和实质的前提下，本领域技术人员可以设计出本发明的多种替换方案和改进方案，其均应被理解为在本发明的保护范围之内。本申请所引用的各个参考文献，在此全文引入作为参考。

Claims (2)

1.一种式(I)所示结构的匹多莫德化合物的制法，

其制法包括如下步骤：

(1)将匹多莫德粗品分散于适量水中，充分搅拌下滴加磷酸氢二钠或磷酸氢二钾溶液至溶液pH值为7-7.5，得匹多莫德盐溶液；然后加入占溶液总体积0.1-0.5％g/ml的活性炭吸附，35-45℃保温，搅拌15-30min，过滤，收集滤液；

(2)向上述滤液中加入盐酸，室温搅拌至溶液的pH值为1～2，冷却至0～4℃，静置1-3小时析出沉淀，过滤收集沉淀；

(3)将步骤(2)中的产品用4∶1甲醇-水溶解，再加入适量酸性氧化铝搅拌均匀，挥去溶剂后加到制备的色谱柱上端，利用制备型酸性氧化铝色谱柱进行分离纯化，其中所用的流动相为体积比为3∶1的乙醇和乙酸乙酯的混合溶剂，所用的固定相为粒径为18-200μm，孔径为6-9nm的pH3.5-4.5细孔柱层析专用酸性氧化铝，流速为1.0-2.0ml/min，柱温20℃，柱压1.0-2.5MPa，收集洗脱液，减压浓缩，在25～30℃下真空干燥，得到匹多莫德。

2.根据权利要求1所述的制法，其特征在于所述的固定相是粒径为50-200μm，孔径为6nm，pH 4.5的Baker柱层析专用酸性氧化铝；或粒径为63-200μm，孔径为9nm的pH 4.0的Merck细孔酸性氧化铝；或粒径为18-32μm，孔径为6nm的pH 4.5的ICN细孔酸性氧化铝。