CN102617727B - 一种胸腺法新化合物及其新制法 - Google Patents

一种胸腺法新化合物及其新制法 Download PDF

Info

Publication number
CN102617727B
CN102617727B CN201210052504.9A CN201210052504A CN102617727B CN 102617727 B CN102617727 B CN 102617727B CN 201210052504 A CN201210052504 A CN 201210052504A CN 102617727 B CN102617727 B CN 102617727B
Authority
CN
China
Prior art keywords
thymosin
alpha1
thymalfasin
making
neutral alumina
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201210052504.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102617727A (zh
Inventor
陶灵刚
赵雁鸿
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Ling Kang Pharmaceutical Group Limited by Share Ltd
Original Assignee
Hainan Lingkang Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hainan Lingkang Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Hainan Lingkang Pharmaceutical Co Ltd
Priority to CN201210052504.9A priority Critical patent/CN102617727B/zh
Publication of CN102617727A publication Critical patent/CN102617727A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102617727B publication Critical patent/CN102617727B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Abstract

本发明公开了一种包括如下处理步骤制得的胸腺法新化合物:将胸腺法新粗品溶解于醇类溶剂或三氟乙酸中,加入pH 2.0-4.0的缓冲溶液,加入活性炭吸附,过滤,收集滤液,减压浓缩;将浓缩液用制备型中性氧化铝色谱柱进行分离纯化,收集洗脱液,依次用板框和滤膜过滤,然后再将滤液用超滤膜超滤浓缩,获得二次浓缩液;向所获得的浓缩液中缓慢加入乙醚,搅拌,梯度降温,析出胸腺法新,将析出的胸腺法新进行离心洗涤,经固体干燥剂干燥,获得纯化的胸腺法新。本发明方法所得到的胸腺法新纯度高,减少了制备用于治疗慢性乙型肝炎、各种免疫功能受损的疾病的药物使用过程中的毒副作用,提高了制剂的产品质量,适合于工业化大生产。

Description

一种胸腺法新化合物及其新制法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种胸腺法新化合物及其新制法,通过该新制法可以得到高纯度的胸腺法新,属于医药技术领域。
背景技术
[0002] 胸腺法新(Thymosin α 1,也称胸腺肽α I)是胸腺素主要的生物活性成分,为体内重要的免疫调节物质,是氮端乙酰化的28个氨基酸组成的多肽,按干燥品计算,含胸腺肽Cil(C129H215N33O55)不少于95.0%。研究表明,胸腺法新促进骨髓干细胞发育分化为原淋巴细胞及前淋巴细胞;诱导T淋巴细胞分化与成熟,使已成熟的T细胞进一步分化为几个不同的亚群,如杀伤细胞、记忆细胞、效应细胞、辅导T淋巴细胞等,并产生各种可溶性介质;增强淋巴细胞对有丝分裂素的反应,并可增加淋巴组织的蛋白质和核酸的合成;增加r-1FN、a-1FN、IL_2、IL-3和淋巴毒素的生成,增强抗病毒和抗肿瘤的免疫反应;抑制自身免疫反应;恢复抑制性T细胞的功能。目前胸腺法新已被广泛应用于临床,治疗多种疾病,如用于慢性乙型肝炎的治疗;用于丙型肝炎、肝细胞癌、恶性黑色素瘤的治疗;用于治疗感染性疾病、自身免疫性疾病、恶性肿瘤等的治疗。
[0003] CN 1390853A公开了一种制备胸腺肽的工艺方法,其步骤如下:对新鲜的胸腺匀浆液加入PH 2.0-4.0的缓冲溶液,以抑制酶活性;在10°C以下用超声波,匀质机或超细技术对新鲜的胸腺组织进行处理,以破碎细胞;冷冻离心,得离心液经截流分子量为6000-10000的超滤柱进行超滤,得粗制品;应用纳滤技术,将超滤液浓缩10倍以上。但是这种工艺要经过一段时间的微波加热,势必会破坏其中胸腺肽的活性。
[0004] CN 101921331A公开了一种胸腺肽的制备方法,其步骤为:用pH 3.5-4.0的缓冲液将胸腺洗涤干净,再加入PH 3.5-4.0的缓冲液低温匀浆,制备胸腺匀浆液;得到的匀浆液经过热变性离心除去杂蛋白,然后用盐酸调节上清液PH至4.5-5.0,再次离心,调节上清液PH值至中性;得到的中性上清液经过不同的滤膜过滤,除去杂质和细菌,冻干,得到胸腺肽成品。这种方法制备的胸腺肽步骤多,工艺复杂,制作成本高,不适合工业化生产。
[0005] CN 101602802A公开了一种胸腺法新脱盐的工艺,其是使用离子交换的方法脱去胸腺法新样品的盐分,其工艺步骤为:将胸腺法新溶液调节PH至酸性,再将酸化后的胸腺法新溶液与阳离子交换树脂混合,用水洗脱离子交换树脂;再用碱性溶液洗脱交换树脂,收集在230nm波长处有吸收的洗脱液,浓缩干燥,得脱盐胸腺法新。该方法只是将盐洗脱,为简单的洗脱方法,并不改变其纯度,实用性不大。
[0006] 可以看出,现有技术的方法或者步骤繁多,不适合工业生产;或者收率较低,耗费了大量的原料,造成成本高昂,或使用了毒性溶剂,造成药物的毒性残留,影响了制剂产品质量。
[0007] 另外,虽然目前获得的胸腺法新最高纯度可以达到99.6%甚至更高一点,但这只能通过特殊的纯化方式获`得,一般制备或提取方法获得的胸腺法新例如由于生产工艺控制不当等原因纯度并不高,因而也不适合直接使用,而且即使纯化后的胸腺法新若存放不当或存放时间过长时,也会导致药物活性成分含量降低,色泽加强,有关物质的含量升高,特别是若有高分子杂质,会出现致敏性和不明生理反应。因此有必要对不合格的产品或粗品进一步进行纯化,以提供高纯度的化合物。本领域迫切需要研究出一种低成本、纯化度高、适用于大规模制备胸腺法新的方法。
发明内容
[0008] 本发明需要解决的技术问题是克服现有技术的不足,提供一种胸腺法新化合物的纯化方法,不使用昂贵和有害的试剂以及苛刻的反应参数和条件,工艺简单,产品纯度高,毒性溶剂残留低,易于工业化生产,进而也能够提高制剂产品质量,减少毒副作用。
[0009] 本发明人经过长期认真的研究,经过组合应用特定的方法并优化参数后,意外发现了一种纯化胸腺法新的方法,获得理想的纯度。本发明提供的精制方法所针对的胸腺法新是目前已知的合成方法所制得的胸腺法新粗品或者市售的胸腺法新原料药或其过期产品,以下也可称为原料胸腺法新。
[0010] 具体而言,为了提高原料胸腺法新(或其粗品)的纯度,本发明提供一种纯化胸腺法新的方法,包括以下步骤:
[0011] 步骤1,将胸腺法新粗品溶解于醇类溶剂或三氟乙酸中,加入pH 2.0-4.0的缓冲溶液,加入活性炭吸附,过滤,收集滤液,减压浓缩,获得一次浓缩液;
[0012] 步骤2,将上述浓缩液用制备型中性氧化铝色谱柱进行分离纯化,收集洗脱液,依次用板框和滤膜过滤,然后再将滤液用超滤膜超滤浓缩,获得二次浓缩液;
[0013] 步骤3,向所获得的浓缩液中缓慢加入乙醚,搅拌,梯度降温,析出胸腺法新,将析出的胸腺法新进行离心洗涤,经固体干燥剂干燥,获得纯化的胸腺法新。
[0014] 以下具体描述本发明。
[0015] 在本发明的步骤I中,将一定量的胸腺法新粗品溶解于醇类溶剂或三氟乙酸中,加入pH 2.0-4.0的缓冲溶液,加入活性炭吸附,过滤,收集滤液,减压浓缩,获得一次浓缩液。
[0016] 该步骤中采用的醇类溶剂或三氟乙酸都能溶解或有效分散胸腺法新,而且也能够与水互溶。因此可以使用纯的醇类溶剂或三氟乙酸,也可以使用它们的水溶液。
[0017] 所述醇类溶剂可以是低级醇,例如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇或异丁醇,也可以是二元醇,如乙二醇,优选乙醇、异丙醇、正丁醇或乙二醇。
[0018] 醇类溶剂或三氟乙酸的用量一般是胸腺法新粗品重量的4-10倍,优选5-8倍,具体视胸腺法新溶解或分散情况而定。
[0019] 在该步骤中,为使胸腺法新溶液处于酸性范围内,加入pH 2.0-4.0的缓冲溶液,原则上可以使用任何缓冲溶液,但优选该缓冲溶液是水溶性的,优选包含磷酸二氢钠和乙酸铵,例如取一定量如0.1mol磷酸二氢钠,加水2000毫升溶解,用lmol/L乙酸铵溶液调pH至 2.0-4.0,优选 2.5-3.5,更优选 2.8-3.2。
[0020] 本发明人发现,在步骤I获得的胸腺法新这种酸性体系中,生产胸腺法新粗品时伴随的如大分子有机物等有色物质和某些杂质性物质能够通过活性炭吸附的方式予以去除,从而实现胸腺法新粗品的初步纯化。
[0021] 根据本发明, 活性炭的加入量为溶液总体积的0.1-1.0% (g/ml),优选0.2-0.8%(g/ml),更优选0.3-0.5% (g/ml)。优选在活性炭吸附过程中进行搅拌,并且控制温度为2-20°C,优选5-15°C,更优选8-12°C,避免胸腺法新在较高温度下发生变质或变性,影响其活性。搅拌吸附的时间为10-15分钟。活性炭吸附后进行过滤,收集滤液,减压浓缩,获得一次浓缩液。
[0022] 在本发明的步骤2中,用制备型中性氧化铝色谱柱进行分离纯化,收集洗脱液,依次用板框和滤膜过滤,然后再将滤液用超滤膜超滤浓缩,获得二次浓缩液。
[0023] 一般情况下,胸腺法新中含有制备或提取过程中引入的溶剂、各种原料和/或中间产物,存放过程中带入或产生的细菌内毒素,以及各种无机物和金属等,这些物质以杂质的形式存在,影响了胸腺法新的纯度。本发明使用制备型色谱柱的分离纯化功能,将胸腺法新与这些杂质性物质加以分离,达到进一步提纯胸腺法新的目的。
[0024] 本申请人经过长期认真研究,进行了大量分离纯化实验,筛选了硅胶、氧化铝或大孔树脂等各种填料色谱柱,例如硅胶的粒径为45-250 μ m、孔径为80-100A的硅胶;氧化铝或中性氧化铝粒径为18-200μπι的氧化铝或中性氧化铝,大孔树脂型号为AmberliteXAD-6、AmberliteXAD-7、AmberliteXAD-8、Diaion HP2MG、⑶X-501、HPD400、HPD450、HPD750、Amber I i teXAD-9、Amber I i teXAD-10、GDX-401、GDX-601、AB-8 等大孔树脂。
[0025] 本发明人意外发现,应用大孔树脂对产品的纯度并没有明显改善,硅胶也不理想,而专用的中性氧化铝可以充分吸附,有效实现胸腺法新与上述杂质性成分的分离,而且操作较简易。
[0026] 在本发明中,所述固定相为粒径为18-200 μ m,孔径为约6nm的细孔中性氧化铝或粒径为50-200 μ m,孔径为6nm,pH 7.0或pH 7.5的柱层析专用中性氧化铝。
[0027] 所述中性氧化铝可以例如为供应商ICN的ICN alIumina N优选粒径为18_63 μ m,孔径为6nm的细孔中性氧化铝,pH 7.5,优选粒径为18-32 μ m,孔径为6nm的细孔中性氧化铝,PH 7.5。或者,中性氧化铝例如为供应商Baker柱层析专用中性氧化铝,粒径为50-200 μ m,孔径为 6nm, pH 7.0 或 pH 7.5。
[0028] 作为优选,每次纯化药物的质量与色谱柱填料的质量之比为1: 10-200,优选质量比为1: 15-100。流动相的用量只要满足将上柱物基本上完全洗脱即可,洗脱后的流分分段收集,不同段的流分中药物的含量不同,为了获得高纯度的药物(例如纯度大于99.5% ),需将药物含量大于85%的流分合并,优选将药物含量大于90%的流分合并。
[0029] 在本发明方法中得到所需纯度的胸腺法新在某种程度上依赖于杂质的种类及其相对含量和色谱柱的操作环境。在流动相中有机溶剂的选择和用量必须是可控的,使得不会过早地把杂质洗脱出来。一般而言,本发明所用色谱柱的色谱柱包括直径为约0.1至约20cm,优选为至少3cm。此方法中色谱柱长度范围优选为约10厘米至约100厘米,更优选长度范围为约20厘米至约30厘米,最优选的长度为25厘米。
[0030] 在本发明的制备方法中,以上述中性氧化铝为色谱柱固定相填料,使用磷酸二氢钠缓冲液(磷酸二氢钠9.5克,加水1600毫升溶解,用lmol/L氢氧化钠溶液调pH至4.0,加水至2000ml)-乙腈(80: 20)作为流动相A,使用磷酸二氢钠缓冲液(磷酸二氢钠9.5克,加水1600毫升溶解,用lmol/L氢氧化钠的溶液调节pH至4.0,加水至2000ml)-乙腈(20: 80)作为流动相B,采用梯度洗脱,流动相B的比例在30min内由15%— 20%,检测波长为210nm,理论塔板数按胸腺法新峰计应大于1000。柱温为室温。[0031] 对收集的洗脱液依次用板框和滤膜过滤,所述滤膜为0.1-0.5 μ m,优选0.2-0.4 μ m,更优选0.1-0.3 μ m的滤膜,然后再将滤液用超滤膜超滤浓缩,所述超滤膜为5000-15000D,优选8000-12000D,更优选10000D的超滤膜,获得二次浓缩液。
[0032] 在本发明的步骤3中,向以上步骤获得的二次浓缩液中缓慢加入乙醚,搅拌,梯度降温,析出胸腺法新,将析出的胸腺法新进行离心洗涤,经固体干燥剂干燥,获得纯化的胸腺法新。
[0033] 我们研究发现,对于胸腺法新,采用常用的单一溶剂中回流或降温重结晶或悬浮于溶剂中回流搅拌的方法,要么难于结晶,要么析出后杂质含量较高。
[0034] 根据本发明,在步骤3中使用的乙醚具有这样的特点,其降低了胸腺法新在浓缩液中的溶解度,使得不易溶于乙醚的胸腺法新能够从浓缩液中析出,同时乙醚还能溶解浓缩液中微量存在的有机性杂质物质,达到进一步纯化胸腺法新的目的。
[0035] 该步骤中所述的梯度降温是指从二次浓缩液所处的环境温度开始降低到大于0°C的温度,从而有利于胸腺法新的析出。
[0036] 根据本发明,在梯度降温过程中,在I小时内将温度由室温降至15_18°C,然后在I至3小时内将温度降至10-12°C,最后在2至10小时内,优选5至8小时内将温度降至0-81:,优选2-61:,更优选3-51:。在此过程中不断有胸腺法新析出,直至不再出现析出物为止。
[0037] 令人讶地,经过本发明上述处理之后,获得纯度极高的胸腺法新。其原因可能是本发明步骤I和2已经去除了对产生沉淀有不利影响的杂质性物质,并影响到最终胸腺法新体系的沉淀环境。
[0038] 待胸腺法新完全析出后,进行洗涤,干燥,可用固体干燥剂进行干燥,所述固体干燥剂选自无水硫酸镁、无水氯化钙、无水硫酸钙和活性氧化铝中的一种,优选无水氯化钙。为了避免吸湿,不应采用晾干方式,为了避免在较高温度下胸腺法新发生分解或变性,也不应采用真空烘干方式进行干燥。
[0039] 按照高效液相色谱法测定,通过本发明方法获得纯化的胸腺法新的纯度大于99.6%,一般大于99.7%,为白色固体,当将本发明精制的胸腺法新用水制成每Iml中含Img的溶液时,溶液澄清无色。
[0040] 本发明从根本上改变了国内外胸腺法新原料纯度较低的现状,解决了粗制胸腺法新和胸腺法新原料药面临的难题,改善了由于杂质较多引发的一系列临床不良反应。
[0041] 本发明另一方面还涉及根据本发明方法制备的胸腺法新在制备用于治疗慢性乙型肝炎、各种免疫功能受损的药物中的用途。
[0042] 鉴于胸腺法新的粉末流动性、特性溶出速率、固体稳定性以及制备可操作性对其活性的发挥以及所配制的制剂的影响巨大,而纯度得到大幅提高的胸腺法新在溶出速率、可配制性以及稳定性方面也相应明显改善。
具体实施方式
[0043] 以下通过实施例来进一步解释或说明本发明内容。但所提供的实施例不应被理解为对本发明保护范围构成限制。
[0044] 含暈测定:[0045] 按照高效液相色谱法进行测定,参照中国药典2000年版二部附录V D0
[0046] 实施例1:胸腺法新的精制
[0047] 取IOg按CN 1390853A的方法处理过的胸腺法新粗品,经检测其HPLC纯度为94.52%。将其溶解于60ml三氟乙酸中,搅拌,使其完全溶解,加入20ml pH 2.0的磷酸二氢钠和乙酸铵的混合缓冲溶液,然后加入0.4g的活性炭,12°C搅拌吸附15分钟,过滤脱除活性炭,收集滤液,在0.05-0.08Mpa下减压浓缩;
[0048] 然后将浓缩液加到制备型中性氧化铝色谱柱上端,固定相填料为粒径18-53 μ m,孔径6nm的ICN alIuminaN中性氧化铝,pH 7.5,以磷酸二氢钠缓冲液(磷酸二氢钠9.5克,加水1600毫升溶解,用lmol/L氢氧化钠溶液调pH至4.0,加水至2000ml)-乙腈(80: 20)作为流动相A,以磷酸二氢钠缓冲液(磷酸二氢钠9.5克,加水1600毫升溶解,用lmol/L氢氧化钠的溶液调节PH至4.0,加水至2000ml)-乙腈(20: 80)作为流动相B,进行梯度洗脱,流动相B的比例在30min内由15%增加到20%,检测波长为210nm,收集洗脱液,依次用板框和0.2 μ m滤膜过滤,然后再将滤液用8000D超滤膜超滤浓缩;
[0049] 然后向此浓缩液中缓慢加入5mL乙醚,搅拌,在I小时内将温度由室温降至16-18°C,然后在2小时内将温度降至10-12°C,最后在4至5小时内将温度降至3_5°C。在此过程中不断有胸腺法新析出,直至不再出现析出物为止,500rpm离心,无水氯化钙干燥,得胸腺法新9.13g,为白色粉末,纯度99.63%。将所得的胸腺法新用水制成每Iml中含Img的溶液,溶液澄清无色。
[0050] 实施例2:胸腺法新的精制`
[0051] 取IOg胸腺法新原料药(生产厂家为苏州天马医药集团天吉生物制药有限公司,批号0281011001),经检测其HPLC纯度为97.52%。将其溶解于100ml乙醇中,搅拌,使其完全溶解,加入30ml pH 3.0的磷酸二氢钠和乙酸铵的混合缓冲溶液,然后加入0.5g的活性炭,10°C搅拌吸附20分钟,过滤脱除活性炭,收集滤液,在0.05-0.07Mpa下减压浓缩;
[0052] 然后将浓缩液加到制备型中性氧化铝色谱柱上端,固定相填料为粒径50-200 μ m,孔径6nm的Baker柱层析专用中性氧化铝,以磷酸二氢钠缓冲液(磷酸二氢钠9.5克,加水1600毫升溶解,用lmol/L氢氧化钠溶液调pH至4.0,加水至2000ml)-乙腈(80: 20)作为流动相A,以磷酸二氢钠缓冲液(磷酸二氢钠9.5克,加水1600毫升溶解,用lmol/L氢氧化钠的溶液调节PH至4.0,加水至2000ml)-乙腈(20: 80)作为流动相B,进行梯度洗脱,流动相B的比例在30min内由15%增加到20%,检测波长为210nm,收集洗脱液,依次用板框和0.3 μ m滤膜过滤,然后再将滤液用10000D超滤膜超滤浓缩;
[0053] 然后向此浓缩液中缓慢加入8mL乙醚,搅拌,在I小时内将温度由室温降至16-18°C,然后在1.5小时内将温度降至10-12°C,最后在6小时内将温度降至2_4°C。在此过程中不断有胸腺法新析出,直至不再出现析出物为止,500rpm离心,无水氯化钙干燥,得胸腺法新9.41g,为白色粉末,纯度99.63%。将所得的胸腺法新用水制成每Iml中含Img的溶液,溶液澄清无色。
[0054] 实施例3:胸腺法新的精制
[0055] 取IOg过期胸腺法新原料药,经检测其HPLC纯度为91.52%。将其溶解于120ml三氟乙酸中,搅拌,使其完全溶解,加入50ml pH 3.5的磷酸二氢钠和乙酸铵的混合缓冲溶液,然后加入0.Sg的活性炭,5°C搅拌吸附15分钟,过滤脱除活性炭,收集滤液,在0.04-0.05Mpa下减压浓缩;
[0056] 然后将浓缩液加到制备型色谱柱上端,固定相填料为粒径18-32 μ m,孔径6nm的ICN alIuminaN中性氧化铝,pH 7.2,以磷酸二氢钠缓冲液(磷酸二氢钠9.5克,加水1600毫升溶解,用lmol/L氢氧化钠溶液调pH至4.0,加水至2000ml)-乙腈(80: 20)作为流动相A,以磷酸二氢钠缓冲液(磷酸二氢钠9.5克,加水1600毫升溶解,用lmol/L氢氧化钠的溶液调节PH至4.0,加水至2000ml)-乙腈(20: 80)作为流动相B,进行梯度洗脱,流动相B的比例在30min内由15%增加到20%,检测波长为210nm,收集洗脱液,依次用板框和0.4 μ m滤膜过滤,然后再将滤液用12000D超滤膜超滤浓缩;
[0057] 然后向此浓缩液中缓慢加入6mL乙醚,搅拌,在I小时内将温度由室温降至16-18°C,然后在3小时内将温度降至10-12°C,最后在6小时内将温度降至1_3°C。在此过程中不断有胸腺法新析出,直至不再出现析出物为止,500rpm离心,无水氯化钙干燥,得胸腺法新8.84g,为白色粉末,纯度99.63%。将所得的胸腺法新用水制成每Iml中含Img的溶液,溶液澄清无色。
[0058] 上述实施例和对比例从不同方面充分说明了本发明特定组合方法的优越性,尤其是包括制备型色谱柱的色谱条件以及优化的参数,带来了意想不到的效果,是理论上无法合理预期的。不受理论限制,可能是各种纯化方法对药物中不同杂质的除去效果不同,本发明组合的纯化方法对药物中的杂质具有协同的分离作用,本发明提供的精制方法具有实质的特点和显著的进步,取得的意想不到的技术效果,获得了高产率高纯度的产品。
[0059] 根据上述的实施例对本发明作了详细描述,并且本发明通过与之相关的对比实施例证实本发明取得了令人意外的优异效果。需说明的是,以上的实施例仅仅为了举例说明本发明而已。在不偏离本发明的精神和实质的前提下,本领域技术人员可以设计出本发明的多种替换方案和改进方案,其均应被理解为在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种胸腺法新的制法,其特征在于,包括以下步骤: 步骤1,将胸腺法新粗品溶解于醇类溶剂或三氟乙酸中,加入PH2.0-4.0的缓冲溶液,加入活性炭吸附,过滤,收集滤液,减压浓缩,获得一次浓缩液; 步骤2,将上述浓缩液用制备型中性氧化铝色谱柱进行分离纯化,收集洗脱液,依次用板框和滤膜过滤,然后再将滤液用超滤膜超滤浓缩,获得二次浓缩液,其中,制备型中性氧化铝色谱柱的固定相为粒径为18-200 μ m,孔径为6nm的细孔中性氧化铝或粒径为50-200 μ m,孔径为6nm,pH7.0或ρΗ7.5的柱层析专用中性氧化铝; 步骤3,向所获得的浓缩液中缓慢加入乙醚,搅拌,梯度降温,析出胸腺法新,将析出的胸腺法新进行离心洗涤,经固体干燥剂干燥,获得纯化的胸腺法新。
2.根据权利要求1所述的胸腺法新的制法,其特征在于, 步骤I中,所述醇类溶剂是甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇或异丁醇,或者是乙二醇。
3.根据权利要求1或2任一项所述的胸腺法新的制法,其特征在于, 步骤I中,所述缓冲溶液包含磷酸二氢钠和乙酸铵,其PH为2.0-4.0。
4.根据权利要求1或2任一项所述的胸腺法新的制法,其特征在于, 步骤2中,使用80: 20的磷酸二氢钠缓冲液-乙腈作为制备型中性氧化铝色谱柱的流动相A,使用20: 80的磷酸二氢钠缓冲液-乙腈作为制备型中性氧化铝色谱柱的流动相B ; 所述滤膜为0.1-0.5 μ m 的滤膜,所述超滤膜为5000-15000D的超滤膜。
5.根据权利要求4所述的胸腺法新的制法,其特征在于,所述滤膜为0.1-0.3μπι的滤膜,所述超滤膜为8000-12000D的超滤膜。
6.根据权利要求4所述的胸腺法新的制法,其特征在于, 步骤3中,在梯度降温过程中,在I小时内将温度由室温降至15-18°C,然后在I至3小时内将温度降至10-12°C,最后在2至10小时内将温度降至0-8°C。
7.根据权利要求1或2任一项所述的胸腺法新的制法,其特征在于, 步骤3中,固体干燥剂选自无水硫酸镁、无水氯化钙、无水硫酸钙和活性氧化铝中的一种。
CN201210052504.9A 2012-03-02 2012-03-02 一种胸腺法新化合物及其新制法 Expired - Fee Related CN102617727B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201210052504.9A CN102617727B (zh) 2012-03-02 2012-03-02 一种胸腺法新化合物及其新制法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201210052504.9A CN102617727B (zh) 2012-03-02 2012-03-02 一种胸腺法新化合物及其新制法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102617727A CN102617727A (zh) 2012-08-01
CN102617727B true CN102617727B (zh) 2014-02-26

Family

ID=46557976

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201210052504.9A Expired - Fee Related CN102617727B (zh) 2012-03-02 2012-03-02 一种胸腺法新化合物及其新制法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102617727B (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111349152B (zh) * 2018-12-20 2022-04-05 深圳翰宇药业股份有限公司 一种制备胸腺法新的方法
CN109705206B (zh) * 2019-03-12 2021-12-24 江苏诺泰澳赛诺生物制药股份有限公司 一种胸腺法新的纯化方法与用途

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1152052C (zh) * 2002-05-16 2004-06-02 西安迪赛生物药业有限责任公司 一种制备胸腺肽的工艺方法
CN101602802B (zh) * 2009-07-24 2012-04-18 深圳翰宇药业股份有限公司 一种胸腺肽α1脱盐的工艺
CN102199205B (zh) * 2011-03-22 2013-04-24 海南双成药业股份有限公司 一种多肽胸腺法新的合成方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN102617727A (zh) 2012-08-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102516096B (zh) 一种盐酸氨溴索化合物的精制法
CN102775523B (zh) 一种制备高纯度低分子肝素钠的工艺
CN104774182B (zh) 麦角硫因的提取及纯化方法
CN102552340A (zh) 银杏萜类内酯单体及银杏总黄酮的制备方法
CN102617727B (zh) 一种胸腺法新化合物及其新制法
CN1869055A (zh) 一种从人参叶中提取分离人参皂苷单体的方法
CN105348151B (zh) 章鱼脱脂内脏中牛磺酸的提取分离纯化方法
CN108409806B (zh) 一种分离制备矮牵牛素-3-o-葡萄糖苷的方法
CN108822164A (zh) 高质量单唾液酸四己糖神经节苷脂钠的制备工艺
CN112608395A (zh) 一种山茱萸籽多糖的分离纯化方法
CN111437284B (zh) 一种七叶皂苷钠药物组合物及其制备方法
CN101683332B (zh) 高纯度灯盏花乙素盐原料药制备方法
CN108516999B (zh) 一种分离制备矮牵牛素-3-o-半乳糖苷的方法
RU2308267C1 (ru) Способ выделения биологически активных изомеров дигидрокверцетина
CN102351767B (zh) 一种前列地尔化合物及其制法
CN108517000A (zh) 一种分离制备矮牵牛素-3-o-阿拉伯糖苷的方法
CN102603923B (zh) 一种肝素钙化合物及其制法
CN101279978B (zh) 头孢硫脒的分离纯化方法及头孢硫脒粉针剂的制备方法
CN1857717A (zh) 一种毛蚶抗癌肽类提取物及其制备方法
CN101073666A (zh) 一种制备高纯度胰激肽原酶原料药的方法
CN109678981B (zh) 一种红花多糖的制备方法、产品及应用
CN108107141B (zh) 一种脾氨肽内多肽的提取方法
CN105193865A (zh) 一种降血脂虫草培养基提取物的制备方法
CN102875607B (zh) 一种棉籽糖的分离纯化方法
KR20010068749A (ko) 간장에 적합한 감초정제품의 제조방법

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C56 Change in the name or address of the patentee

Owner name: LIONCO PHARMACEUTICAL GROU CO., LTD.

Free format text: FORMER NAME: HAINAN LINGKANG PHARMACEUTICAL CO., LTD.

CP03 Change of name, title or address

Address after: Naidong Zetang County of Tibet autonomous region in 856100 Prefecture is Naidong County Road No. 68 building second building a layer of

Patentee after: Ling Kang Pharmaceutical Group Limited by Share Ltd

Address before: 570216 No. 8 workshop, Haikou Free Trade Zone, Hainan

Patentee before: Hainan Lingkang Pharmaceutical Co., Ltd.

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20140226

Termination date: 20180302