CN102491940B - 尼索地平化合物的制法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种包括如下制法制得的高纯度尼索地平化合物：(1)将一定量的尼索地平粗品溶解于有机溶剂中，加入活性炭吸附，过滤，收集滤液，减压浓缩，获得初级提纯的尼索地平；(2)将上述初级提纯的尼索地平用制备型色谱柱进行分离纯化，收集洗脱液，获得二级提纯的尼索地平；(3)将洗脱液减压浓缩，搅拌下加入纯水，加热回流，冷却进行结晶，将析出的晶体离心洗涤，干燥，获得三级提纯的尼索地平。本发明方法所得到的尼索地平纯度高，减少了制备用于治疗缺血性心脑疾病、高血压等药物中的毒副作用，提高了制剂的产品质量，适合于工业化大生产。

Description

尼索地平化合物的制法

技术领域

本发明涉及一种尼索地平化合物及其新制法，可以得到高纯度的尼索地平化合物，属于医药技术领域。 

背景技术

尼索地平(Nisoldipine)，黄色结晶性粉末，化学名称为：(±)-2，6-二甲基-4-(2-硝基苯基)-1，4-二氢-3，5-吡啶二甲酸甲酯异丁酯，分子式：C₂₀H₂₄N₂O₆，分子量：388.41，结构式如下： 

尼索地平是目前选择性扩张血管作用最强的长效二氢吡啶类钙拮抗剂。自1971年硝苯吡啶问世至今，先后已有20多个新药研制成功。这些药物的作用机制相同(抑制Ca进入组织细胞内)。由于每个化合物与受体结合性质有差异，组织选择性有差异，表现出的药理活性也不一样。因此每个药物可选择性治疗某些组织疾病，使副作用的产生可能性大大减少。尼索地平和尼卡地平选择性作用于脑血管，用于治疗各种脑血管疾病，后者对外围血管也有较强的作用，因此还可以治疗高血压。尼群地平、尼瓦地平、氨氯地平的药理作用相似于硝苯地平，还可以治疗高血压和心绞痛，依拉地平选择性地作用于血管平滑肌。药理学研究表明尼索地平作用机理是直接阻滞钙离子 进入血管平滑肌质膜中电压敏感的慢钙通道，减少流入细胞内的钙离子浓度，抑制ATP酶活性。其对心血管作用较其他钙拮抗剂具有更高的选择性，对心率及心脏收缩影响极小，而对扩张冠状血管有一定的选择性，并比硝苯吡啶强4至10倍，可明显地降低外周血管的阻力，增加冠脉血流量，改善缺血区灌流，解除冠脉痉挛，预防致命性心室颤动，也具有明显持久的降压效果。不同动物的药动学研究表明在其体内吸收快且完全，持续时间最长的一个，血浆清除半衰期长达42至54小时，大量的临床研究表明尼索地平确实是一个预防心肌缺血、稳定型和变异型心绞痛、高血压以及长期高血压引起的慢性充血性心率衰竭方面的有效药物。因此，尼索地平的研制开发，将为我国提供一个新的特色的防治心绞痛、高血压等心血管疾病的优良药物。 

CN1628663A公开了尼索地平的合成路线，由乙酰乙酸甲酯与氨反应制得β-氨基巴豆酸甲酯；邻-硝基苯甲醛与乙酰乙酸异丁酯反应制得邻-硝基苯苄叉乙酰乙酸异丁酯；β-氨基巴豆酸甲酯与邻-硝基苯苄叉乙酰乙酸异丁酯反应制得尼索地平，粗品用无水乙醇重结晶，得尼索地平精品，收率75％，熔点：150～151℃。 

CN101092390A公开了“一种尼索地平标准品的制备方法”提供了一种尼索地平标准品的制备方法，是在避光下将尼索地平粗品溶解在C3～C6低级酮中重结晶，或将溶解在C3～C6低级酮中的尼索地平粗品再与C1～C3低级醇混合重结晶。所述C3～C6低级酮是指丙酮、甲乙酮、异丁基甲基酮或相似化合物，优选丙酮；C1～C3低级醇为甲醇、乙醇、正丙醇和异丙醇。由于标准品的制备方法考虑的仅仅是产品纯度，其收率不超过收率85％，不适合工业化生产的需要。 

US3932645、US 4154839、EP 7293、EP 124743、EP 3l98l4、EP 534520、WO 9807698、WO 0047560、WO2004002958、WO2005023768、DE 3222367、和DE 21117573均公开了尼索地平的制备方法，然而这些方法存在副产品过多，或者步骤繁多，或者收率较低，或者耗费了大量昂贵的原料，或者使用了毒性溶剂造成药物的毒性残留，或者中间体不容易获得，主要还是生成的杂质醛醇缩合副产物与尼索地平结构上具有很大的相似性，因此分离纯化是非常困难的。 

经研究发现主要杂质为2，6-二甲基-4-(2-硝基苯基)-1，4-二氢-3，5-吡啶二甲酸二甲基酯和2，6-二甲基-4-(2-硝基苯基)-1，4-二氢-3，5-吡啶二甲酸二异丁基酯，经乙醇或二异丙醚或者丙酮/水重结晶只能得到合格的而不是高纯度的尼索地平。事实上一般的重结晶纯化技术难于获得高纯度的尼索地平，因而现有技术的方法不容易得到高产率高纯度的尼索地平，造成成本高昂和药物的毒性残留，影响了制剂产品质量。 

另外，在化合物存放不当或存放时间过长时，会导致药物活性成分含量降低，色泽加强，有关物质的含量升高。在某些情况下，由于生产工艺控制不当，导致药物纯度也不符合要求。现有技术对此没有公开专门的纯化方法，因此有必要对不合格的产品或粗品进一步进行纯化，以高产率提供高纯度的化合物。本领域迫切需要研究出一种低成本、收率高、适用于大生产的尼索地平的精制方法，以克服上述缺点。 

本发明需要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种尼索地平化合物的纯化方法，该方法简单，产品纯度高，收率高，易于工业化生产。 

发明内容

为了克服上述现有技术的缺陷，提高尼索地平纯度，减少毒性溶剂的残留，本发明提供了一种尼索地平化合物的纯化方法，本发明的制备方法能够提高制剂产品质量，减少毒副作用，适合于工业化大生产。 

在分离纯化方面，本领域技术人员清楚地知道在获得高纯度高收率化合物方面由于化合物的特异性而面临种种困难，所有这些绝非按现有一般分离纯化的理论就可以预期解决的，需要克服许多难题，解决的方法往往是偶然意外的发现。 

一般而言，常规分离方法有，例如包括反应混合物的冷却，然后经过滤收集结晶的方法；包括加热结晶的方法：经乙醇或二异丙醚或者丙酮/水重结晶并用醇例如乙醇或水等洗涤，然后蒸馏除去溶剂并冷却获得结晶；溶剂萃取法；稀释法；重结晶法；柱色谱；制备薄层色谱等方法。 

申请人在大量现有文献的基础上，通过大量筛选的实验，发现上述文献以及一般的纯化分离方法例如结晶等方法难于获得高纯度高产率的化合物，而其他各种分离纯化方法以及多种条件参数又可能存在多种多样的组合性和不可预测性。本发明人经过长期认真的研究，经过组合应用特定的方法并优化参数后，意外发现了一种尼索地平化合物的纯化方法，令人惊奇地获得了高产率高纯度的产品。 

本发明提供的精制方法所针对的尼索地平是目前已知的合成方法所制得的尼索地平粗品或者市售的尼索地平原料药，以下统称为本发明采用的尼索地平粗品，一般而言尼索地平粗品的纯度低于99％，甚至低于90％。 

本发明人经过研究发现，通过包括如下处理步骤的制备方法，能够大幅度提高原料尼索地平的纯度： 

(1)将一定量的尼索地平粗品溶解于有机溶剂中，加入活性炭吸附，过滤，收集滤液，减压浓缩，获得初级提纯的尼索地平； 

(2)将上述初级提纯的尼索地平用制备型色谱柱进行分离纯化，收集洗脱液，获得二级提纯的尼索地平； 

(3)将洗脱液减压浓缩，搅拌下加入纯水，加热回流，冷却进行结晶，将析出的晶体离心洗涤，干燥，获得三级提纯的尼索地平。 

以下具体描述本发明。 

步骤1 

将一定量的尼索地平粗品溶解于有机溶剂中，活性炭吸附，过滤，收集滤液，减压浓缩，获得初级提纯的尼索地平。 

所述的有机溶剂为能溶解尼索地平的与水互溶的有机溶剂。 

所述有机溶剂选自能够使尼索地平均匀化的低级醇或非醇类极性溶剂，选自甲醇、乙醇、丙醇、丙酮、乙腈、环丁砜、羟基丙酸、乙二醇中的一种或几种的混合物，优选为丙酮。 

在本发明的一个方面，药物的分离和纯化方法包括吸附方法，如使用活性炭。不幸的是，除了去除颜色和其它不需要的物质外，活性炭还不可逆地吸附药物，这导致产率明显降低。本发明证实活性炭可用于尼索地平的制备方法，且其中所述的加入活性炭的量为溶液总体积的0.1-0.5％(g/ml)。 

上述所述的制备方法，其中所述的搅拌吸附的温度为40-50℃，搅拌吸附的时间为10-15分钟。 

本发明所述的制备方法，其中减压浓缩的温度为50-60℃。 

本发明步骤1采用活性炭吸附之所以能够达到提纯的效果可能的原因是：活性炭分子能够吸附溶液中的有色物质等大分子有机物。 

步骤2 

用制备型色谱柱进行分离纯化，收集洗脱液，获得二级提纯的尼索地平。 

一般情况下，尼索地平中含有制备过程中引入的溶剂、各种原料、中间产物，由于引湿性而带入的水分，细菌内毒素，以及各种无机物和重金属等，这些物质以杂质的形式存在，影响了尼索地平的纯度。本发明使用制备型色谱柱的分离纯化功能，将溶液中的尼索地平部分与杂质部分分离，达到提纯尼索地平的目的。 

本申请人经过长期认真的大量研究，分离纯化过程中，筛选了硅胶、氧化铝或大孔树脂等各种填料色谱柱，例如硅胶的粒径为45-250μm、孔径为 

的硅胶；氧化铝或中性氧化铝粒径为18-200μm的氧化铝或中性氧化铝，大孔树脂型号为AmberliteXAD-6、AmberliteXAD-7、AmberliteXAD-8、Diaion HP2MG、GDX-501、HPD400、HPD450、HPD750、AmberliteXAD-9、AmberliteXAD-10、GDX-401、GDX-601、AB-8等大孔树脂，本发明人意外发现应用大孔树脂对产品的纯度并没有明显改善，硅胶也不理想，而专用的中性氧化铝不仅可以充分吸附上柱物中的成分杂质及其它色素，还对本品纯化有着独到的意外效果，而且操作较简易。 

在本发明的一个方面，所述固定相为粒径为18-200μm，孔径为约6nm的细孔中性氧化铝或粒径为50-200μm，孔径为6nm的柱层析专用中性氧化铝，pH 7.0或pH 7.5。 

在本发明的一个方面，中性氧化铝可以例如为供应商ICN的粒径为18-63μm，孔径为6nm的细孔中性氧化铝，pH 7.5，优选粒径为18-32μm，孔径为6nm的细孔中性氧化铝，pH 7.5。或者，中性氧化铝例如为供应商Baker柱层析专用中性氧化铝，粒径为50-200μm，孔径为6nm，pH 7.0或pH 7.5。 

在本发明的一个方面，作为优选，每次纯化药物的质量与色谱柱填料的质量之比为1∶10-200，优选质量比为1∶15-100。流动相的用量只要满足将药物基本上完全洗脱即可，洗脱后的流分分段收集，不同段的流分中药物的含量不同，为了获得高纯度的药物(例如纯度大于99.5％)，需将药物纯度含量大于85％的流分合并，优选将药物含量大于90％的流分合并。在本发明的一个方面，在本发明方法中得到的所需纯度在某种程度上依赖于杂质的量和色谱柱的操作环境。在流动相中有机溶剂的选择和用量必须是可控的，使得不会过早地把杂质洗脱出来。一般而言，本发明所用色谱柱的色谱柱包括直径为约0.1至约20cm，优选为至少3cm。此方法中色谱柱长度范围优选为约10厘米至约100厘米，更优选长度范围为约20厘米至约30厘米，最优选的长度为25厘米。 

本发明所述的制备方法，其中色谱柱使用的流动相为体积比为30∶50∶20的丙酮∶乙醇∶水的混合溶液，固定相填料选自中性氧化铝，流速1-2ml/min，柱温为室温，波长237nm，柱层析的压力为0.5-5.0MPa，优选为1.0-2.5MPa。 

步骤3 

将洗脱液在40～60℃减压浓缩至约一半的体积，搅拌下加入纯水，加热回流，冷却至0-4℃，进行结晶，将析出的晶体离心洗涤，干燥，制得尼索地平。 

在本发明所述的制备方法中，40～60℃减压浓缩，使体积减少至收集的尼索地平洗脱液约一半的体积，然后补充等量体积的纯水使体积恢复至所收集的尼索地平洗脱液的体积。 

本发明所述的制备方法，其中所述的尼索地平结晶用固体干燥剂干燥。本发明所述的制备方法，其中所述固体干燥剂选自无水硫酸镁、无水氯化钙、无水硫酸钙和活性氧化铝中的一种，优选无水氯化钙。 

鉴于尼索地平的粉末流动性、特性溶出速率、固体稳定性以及制备可操作性对其活性的发挥以及所配制的制剂的影响巨大，而纯度得到大幅提高的尼索地平在溶出速率、可配制性以及稳定性方面也相应明显改善。 

本发明从根本上改变了国内外尼索地平原料纯度较低的现状，解决了粗制尼索地平和尼索地平原料药面临的难题，改善了由于杂质较多引发的一系列临床不良反应。 

此外，本发明方法纯度高，得到纯度不低于99.6％。本发明在高效液相色谱法测定实施例的尼索地平纯度时，发现基本上只有一个色谱峰，尼索地平的纯度不低于99.6％，没有检测到杂质2，6-二甲基-4-(2-硝基苯基)-1，4-二氢-3，5-吡啶二甲酸二甲基酯(杂质A)和2，6-二甲基-4-(2-硝基苯基)-1，4-二氢-3，5-吡啶二甲酸二异丁基酯(杂质B)的色谱峰，而对比实施例的色谱图具有多个杂质峰，纯度相对较差。 

本发明的纯度检测方法是本领域已知的，可应用高效液相色谱法，例如参见邢玉仁等，《药物分析杂志》1999年05期，高效液相色谱法测定尼索地平片含量及含量均匀度，采用色谱柱为C18柱，流动相为甲醇-水(65∶35)，检测波长为237nm。也可以参考马金飞等，《药物分析杂志》2009年10期，液相色谱-串联质谱法测定人血浆中的尼索地平。本申请所引用的各个参考文献，在此全文引入作为参考。 

作为优选，本发明提供一种尼索地平的精制方法，其特征在于该方法包括如下步骤： 

(1)将一定量的尼索地平粗品溶解于4-10倍重量的与水互溶的有机溶剂中，加入占溶液总体积0.1-0.5％(g/ml)的活性炭，40-50℃搅拌吸附10-15分钟，过滤脱碳，收集滤液，50-60℃减压浓缩，获得初级提纯的尼索地平； 

(2)将上述初级提纯的尼索地平与适量固定相填料拌匀后上样，用制备型中性氧化铝色谱柱进行分离纯化，收集尼索地平洗脱液，获得二级提纯的尼索地平；其中色谱柱使用的流动相为体积比为30∶50∶20的丙酮∶乙醇∶水的混合溶液，固定相填料选自中性氧化铝，流速1-2ml/min，柱温为室温，波长237nm，柱层析的压力为0.5-5.0MPa，优选为1.0-2.5MPa； 

(3)将洗脱液在40～60℃减压浓缩至约一半的体积，搅拌下加入纯水以恢复至浓缩前的体积，加热回流，冷却至0-4℃，进行结晶，将析出的晶体离心洗涤，经固体干燥剂干燥，获得三级提纯的尼索地平。 

本发明的一方面涉及本发明方法制备的尼索地平在制备用于治疗缺血性心脑疾病、高血压等药物中的用途。 

实施例

以下通过实施例来进一步解释或说明本发明内容。但所提供的实施例不应被理解为对本发明保护范围构成限制。 

实施例1尼索地平的精制 

将10g纯度96.52％的尼索地平粗品溶解于40ml丙酮中，搅拌，使其完全溶解，然后加入0.2g的活性炭，40℃搅拌吸附15分钟，过滤脱碳，收集滤液；60℃减压浓缩后再加入10g中性氧化铝搅拌均匀，挥去溶剂后加到制备的色谱柱上端，然后用制备型色谱柱进行分离纯化，其中色谱柱使用的流动相为体积比为30∶50∶20的丙酮∶乙醇∶水的混合溶液，流速1ml/min，固定相填料为粒径为18-32μm、孔径为6nm的ICN中性氧化铝，柱温为室温，波长237nm，柱压1.0MPa，收集洗脱液，然后在50℃减压浓缩至约一半的体积；搅拌下向浓缩液中加入纯水以恢复至浓缩前的体积，加热回流，冷却至4℃，结晶，500rpm离心，用少许水洗，无水氯化钙干燥，得尼索地平9.23g，收率95.27％，纯度99.63％，熔点：151-152℃。 

¹H NMR(CDCl₃)δ：0.681(3H，d)，0.743(3H，d)，1.83(1H，m)，2.23(3H，s)，2.32(3H，s)，3.54(3H，s)，3.72(2H，m)，5.71(1H，s)，5.80(1H，s)，7.20(1H，m)，7.39(1H，m)，7.48(1H，m)，7.64(1H，m)。MS(m/z)：389[M+H]⁺。 

对比实施例1尼索地平的精制 

将10g纯度96.52％的尼索地平粗品溶解于40ml丙酮中，搅拌，使其完全溶解，然后加入0.2g的活性炭，40℃搅拌吸附15分钟，过滤脱碳，收集滤液；60℃减压浓缩后再加入10g硅胶搅拌均匀，挥去溶剂后加到制备的色谱柱上端，然后用制备型色谱柱对滤液进行分离纯化，其中色谱柱使用的流动相为体积比为30∶50∶20的丙酮∶乙醇∶水的混合溶液，流速1ml/min， 固定相填料为粒径为18-32μm、孔径为6nm的ICN硅胶，柱温为室温，波长237nm，柱压1.0MPa，收集洗脱液，然后在50℃减压浓缩至约一半的体积；搅拌下向浓缩液中加入纯水以恢复至浓缩前的体积，加热回流，冷却至4℃，结晶，500rpm离心，用少许水洗，无水氯化钙干燥，得尼索地平8.93g，收率91.25％，纯度98.63％，熔点：151-154℃。杂质A和杂质B的含量分别为0.66％和0.45％。 

实施例2尼索地平的精制 

将10g纯度96.52％的尼索地平粗品溶解于100ml丙酮中，搅拌，使其完全溶解，然后加入0.1g的活性炭，50℃搅拌吸附10分钟，过滤脱碳，收集滤液；50℃减压浓缩后再加入10g中性氧化铝搅拌均匀，挥去溶剂后加到制备的色谱柱上端，然后用制备型色谱柱对滤液进行分离纯化，其中色谱柱使用的流动相为体积比为30∶50∶20的丙酮∶乙醇∶水的混合溶液，流速2ml/min，固定相填料为粒径50-200μm，孔径6nm的Baker柱层析专用中性氧化铝，柱温为室温，波长237nm，柱压2.5MPa，收集洗脱液，然后在60℃减压浓缩至约一半的体积；搅拌下向浓缩液中加入纯水以恢复至浓缩前的体积，加热回流，冷却至0℃，结晶，500rpm离心，用少许水洗，无水氯化钙干燥，得尼索地平9.20g，收率94.94％，纯度99.60％，熔点：151-152℃。 

¹H NMR(CDCl₃)δ：0.681(3H，d)，0.743(3H，d)，1.83(1H，m)，2.23(3H，s)，2.32(3H，s)，3.54(3H，s)，3.72(2H，m)，5.71(1H，s)，5.80(1H，s)，7.20(1H，m)，7.39(1H，m)，7.48(1H，m)，7.64(1H，m)。MS(m/z)：389[M+H]⁺。 

对比实施例2尼索地平的精制 

将10g纯度96.52％的尼索地平粗品溶解于100ml丙酮中，搅拌，使其完全溶解，然后加入0.1g的活性炭，50℃搅拌吸附10分钟，过滤脱碳，收集滤液；50℃减压浓缩后再加入10g硅胶搅拌均匀，挥去溶剂后加到制备的色谱柱上端，然后用制备型色谱柱对滤液进行分离纯化，其中色谱柱使用的流动相为体积比为25∶50∶25的丙酮∶乙醇∶水的混合溶液，流速2ml/min，固定相填料为粒径50-200μm，孔径6nm的柱层析专用硅胶，柱温为室温，波长237nm，柱压2.5MPa，收集洗脱液，然后在60℃减压浓缩至约一半的体积；搅拌下向浓缩液中加入纯水以恢复至浓缩前的体积，加热回流，冷却至0℃，结晶，500rpm离心，用少许水洗，无水氯化钙干燥，得尼索地平8.57g，收率87.61％，纯度98.67％，熔点：150-153℃。杂质A和杂质B的含量分别为0.69％和0.43％。 

实施例3尼索地平的精制 

将10g纯度96.52％的尼索地平粗品溶解于60ml丙酮中，搅拌，使其完全溶解，然后加入0.3g的活性炭，45℃搅拌吸附10分钟，过滤脱碳，收集滤液；55℃减压浓缩后再加入15g中性氧化铝搅拌均匀，挥去溶剂后加到制备的色谱柱上端，然后用制备型色谱柱对滤液进行分离纯化，其中色谱柱使用的流动相为体积比为30∶50∶20的丙酮∶乙醇∶水的混合溶液，流速1.7ml/min，固定相填料为粒径为18-32μm、孔径为6nm的ICN中性氧化铝，柱温为室温，柱压2.0MPa，波长237nm，收集洗脱液，然后在45℃减压浓缩至约一半的体积；搅拌下向浓缩液中加入纯水以恢复至浓缩前的体积，加热回流，冷却至2℃，结晶，500rpm离心，用少许水洗，无水氯化钙干燥，得尼索地平9.16g，收率94.69％，纯度99.78％，熔点：151-152℃。 

¹H NMR(CDCl₃)δ：0.681(3H，d)，0.743(3H，d)，1.83(1H，m)，2.23(3H，s)，2.32(3H，s)，3.54(3H，s)，3.72(2H，m)，5.71(1H，s)，5.80(1H，s)，7.20(1H，m)，7.39(1H，m)，7.48(1H，m)，7.64(1H，m)。MS(m/z)：389[M+H]⁺。 

对比实施例3尼索地平的精制 

将10g纯度96.52％的尼索地平粗品溶解于60ml丙酮中，搅拌，使其完全溶解，然后加入0.3g的活性炭，45℃搅拌吸附10分钟，过滤脱碳，收集滤液；55℃减压浓缩后再加入15g经过预处理的AB-8树脂搅拌均匀，挥去溶剂后加到AB-8大孔吸附树脂柱上端，依次用水、30乙醇％、60％乙醇洗脱，流速1.7ml/min，收集尼索地平洗脱液，45℃减压浓缩至约一半的体积；搅拌下向浓缩液中加入纯水，加热回流，冷却至2℃，结晶，500rpm离心，用少许水洗，无水氯化钙干燥，得尼索地平8.23g，收率83.95％，纯度98.45％，熔点：150-153℃。杂质A和杂质B的含量分别为0.72％和0.39％。 

实施例4尼索地平的精制 

将10g纯度96.52％的尼索地平粗品溶解于80ml丙酮中，搅拌，使其完全溶解，然后加入0.4g的活性炭，45℃搅拌吸附15分钟，过滤脱碳，收集滤液；55℃减压浓缩后再加入8g中性氧化铝搅拌均匀，挥去溶剂后加到制备的色谱柱上端，然后用制备型色谱柱对滤液进行分离纯化，其中色谱柱使用的流动相为体积比为30∶50∶20的丙酮∶乙醇∶水的混合溶液，流速1.5ml/min，固定相填料为粒径为18-32μm、孔径为6nm的ICN中性氧化铝，柱温为室温，波长237nm，柱压1.8MPa，收集洗脱液，然后在50℃减压浓缩至约一半的体积；搅拌下向浓缩液中加入纯水以恢复至浓缩前的体积，加 热回流，冷却至4℃，结晶，500rpm离心，用少许水洗，无水氯化钙干燥，得尼索地平9.30g，收率96.02％，纯度99.65％，熔点：151-152℃。 

¹H NMR(CDCl₃)δ：0.681(3H，d)，0.743(3H，d)，1.83(1H，m)，2.23(3H，s)，2.32(3H，s)，3.54(3H，s)，3.72(2H，m)，5.71(1H，s)，5.80(1H，s)，7.20(1H，m)，7.39(1H，m)，7.48(1H，m)，7.64(1H，m)。MS(m/z)：389[M+H]⁺。 

对比实施例4尼索地平的精制 

将10g纯度96.52％的尼索地平粗品溶解于80ml丙酮中，搅拌，使其完全溶解，然后加入0.4g的活性炭，45℃搅拌吸附15分钟，过滤脱碳，收集滤液；50℃减压浓缩至20ml的体积，在20-30℃加入纯水10ml，在20-30℃搅拌2小时，直到完成沉淀。在20-25℃加入纯水4ml，在20-25℃搅拌1小时，500rpm离心，用少许水洗，用少量丙酮和纯水洗涤，40-50℃干燥，得尼索地平9.42g，收率94.95％，纯度97.28％，熔点：151-154℃。杂质A和杂质B的含量分别为1.02％和0.50％。 

上述中性氧化铝为制备型色谱柱的固定相填料，为粒径为约18-200μm，孔径为约6nm的细孔中性氧化铝，pH 7.0-7.5；例如固定相填料为粒径为18-32μm、孔径为6nm的ICN中性氧化铝，或者粒径50-200μm，孔径6nm的Baker柱层析专用中性氧化铝。 

上述实施例和对比例从不同方面充分说明了本发明特定组合方法的优越性，尤其是包括制备型色谱柱的色谱条件以及优化的参数，带来了意想不到的效果，是理论上无法合理预期的。不受理论限制，可能是各种纯化方法对药物中不同杂质的除去效果不同，本发明组合的纯化方法对药物中的杂质 具有协同的分离作用，本发明提供的精制方法具有实质的特点和显著的进步，取得的意想不到的技术效果，获得了高产率高纯度的产品。 

根据上述的实施例对本发明作了详细描述，并且本发明通过与之相关的对比实施例证实本发明取得了令人意外的优异效果。需说明的是，以上的实施例仅仅为了举例说明本发明而已。在不偏离本发明的精神和实质的前提下，本领域技术人员可以设计出本发明的多种替换方案和改进方案，其均应被理解为在本发明的保护范围之内。 

Claims (3)

1.一种式（I）所示的尼索地平化合物的制法，其特征在于其制法包括以下步骤：

（1）将一定量的尼索地平粗品溶解于4-10倍重量的与水互溶的有机溶剂中，加入占溶液总体积0.1-0.5％g/ml的活性炭，40-50℃搅拌吸附10-15分钟，过滤脱碳，收集滤液，50-60℃减压浓缩，获得初级提纯的尼索地平；其中所述的与水互溶的有机溶剂选自乙醇、丙醇、或丙酮；

（2）将上述初级提纯的尼索地平与适量固定相填料拌匀后上样，用制备型中性氧化铝色谱柱进行分离纯化，收集尼索地平洗脱液，获得二级提纯的尼索地平；其中色谱柱使用的流动相为体积比为30∶50∶20的丙酮∶乙醇∶水的混合溶液，固定相填料选自中性氧化铝，流速1-2ml/min，柱温为室温，波长237nm，柱层析的压力为0.5-5.0MPa；且所述固定相填料为粒径为18-200μm，孔径为6nm的细孔中性氧化铝，pH为7.0-7.5；

（3）将洗脱液在40～60℃减压浓缩至一半的体积，搅拌下加入纯水，加热回流，冷却至0-4℃，进行结晶，将析出的晶体离心洗涤，干燥，经固体干燥剂干燥，获得三级提纯的尼索地平。

2.根据权利要求1所述的制法，其特征在于步骤（1）中所述的与水互溶的有机溶剂为丙酮。

3.根据权利要求1-2任一项所述的制法，其特征在于步骤（2）中色谱柱使用的柱层析的压力为1.0-2.5MPa。