CN102391283B

CN102391283B - 一种硫酸氢氯吡格雷化合物及其制法

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Publication number: CN102391283B
Application number: CN 201110279621
Authority: CN
Inventors: 陶灵刚
Original assignee: Hainan Lingkang Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Hainan Lingkang Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2011-09-20
Filing date: 2011-09-20
Publication date: 2012-11-21
Anticipated expiration: 2031-09-20
Also published as: CN102391283A

Abstract

本发明涉及一种包括如下处理步骤的硫酸氢氯吡格雷化合物的制法：步骤1，将原料硫酸氢氯吡格雷溶于水中，用硫酸调节pH，加入有机溶剂进行萃取，然后分离有机相，获得初级提纯的含有硫酸氢氯吡格雷的水相；步骤2，向上述水溶液中，加入活性炭，过滤收集滤液，将滤液冷却，过滤并将滤液浓缩至干；步骤3，将上述样品通过制备型中性氧化铝色谱柱进行分离纯化，收集洗脱液，浓缩，喷雾干燥，获得三级提纯的硫酸氢氯吡格雷。本发明提高了产品的质量，减少了在制备血小板聚集抑制剂药物中的毒副作用，适合于工业化大生产。

Description

一种硫酸氢氯吡格雷化合物及其制法

技术领域

本发明涉及一种硫酸氢氯吡格雷化合物及其制法，属于医药技术领域。

背景技术

硫酸氢氯吡格雷(Clopidogrel Hydrogen sulfate)，化学名称：S(+)-2-(2-氯苯基)-2-(4，5，6，7-四氢噻吩)[3，2，C]并吡啶-5)乙酸甲酯硫酸氢盐，分子式：C₁₆H₁₆ClNO₂S·H₂SO₄，分子量：419.90，结构式：

硫酸氢氯吡格雷由法国山诺菲公司研制，是二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集抑制剂，它通过直接抑制ADP与其受体结合以及继发ADP介导的糖蛋白GPIIb/IIIa复合物活化而起到降低动脉粥样硬化性心血管疾病的发病率的作用。临床上用于预防心肌梗死、中风或外周动脉疾病史患者的动脉粥样硬化。

根据已报道的文献，关于氯吡格雷硫酸氢盐合成路线概括起来，主要有3条思路。路线1：先合成后拆分法：专利US4529596具体描述4，5，6，7-四氢噻吩并[3，2-c]吡啶与α-氯(2-氯)苯乙酸甲酯在碳酸钾和四氢呋喃存在下反应生成氯吡格雷的外消旋体，然后进行手性拆分，该路线中合成消旋的氯吡格雷的收率仅有45％。随后专利US5036156报道了对上述路线进行改进，用α-溴(2-氯)苯乙酸甲酯代替α-氯(2-氯)苯乙酸甲酯进行反应，产率有较大提高。虽然其工艺比较简单，原料价廉易得，但收率还不理想；另外放在最后进行手性拆分，目标产物的收率仅为一半。

路线2：先缩合再环合的方法：专利US5204469报道了用邻氯苯甲醛和氰化钠及羟胺反应生成α-氨基(2-氯)苯乙酸，酯化后与对甲苯磺酸噻吩-2-乙酯反应，然后进行手性拆分。用该路线，反应时间较长(40小时)，收率也低(50％)。另外一条路线是由邻氯扁桃酸与溴化磷反应生成α-溴(2-氯)苯乙酸，酯化后再与噻吩乙胺反应，最后拆分得该手性中间体；专利US6080875报道了将上述方法中的α-氨基(2-氯)苯乙酸甲酯先进行拆分，然后与噻吩-2-环氧丙酸钠和氰化硼氢化钠在乙酸的催化下反应生成该中间体。该路线虽然各步收率较高，但所用试剂氰化硼氢化钠不易得，影响其工业化。2001年专利US6180793报道了用2-噻吩乙胺与邻氯苯甲醛和氰化钠反应生成2-(2-噻吩乙胺基)(2-氯苯基)乙腈，继而与氯化氢和甲醇反应生成2-(2-噻吩乙胺基)(2-氯苯基)乙酰胺，再用硫酸的甲醇溶液水解为噻吩乙胺基氯苯基乙酸甲酯，用(+)-樟脑-10-磺酸或(+)-酒石酸拆分得该中间体。采用该工艺路线，可以避免使用催泪的刺激性的α-卤代苯乙酸衍生物作为中间体，且收率也有较大提高。但是总收率只有50％左右，且拆分得到中间体的纯度不高。所以在实际的工艺化大生产中不采用此路线。

路线3：先拆分后合成的方法：专利US5132435以邻氯扁桃酸为原料，首先进行拆分，甲酯化与苯磺酰氯反应生成具有强的离去基团(-OSO₂Ph)的手性中间体，然后与4，5，6，7-四氢噻吩并[3，2-c]吡啶在碳酸钾的催化作用下发生双分子亲核取代反应，构型翻转生成氯吡格雷，专利US5132435中在R-邻氯扁桃酸甲酯化后，与苯磺酰氯的磺酰化反应收率很低，仅为45％；另外最后一步反应时间偏长，均在20小时以上，该专利中使用二氯甲烷作溶剂，二氯甲烷的沸点只有40℃，加热回流的温度受到限定。

然而上述方法制备的硫酸氢氯吡格雷纯度不高，美国USP标准中规定了需要控制氯吡格雷三个已知杂质，杂质A(CLPI-A，CAS号144750-42-5)，杂质B(CLPI-B，CAS号144750-52-7)，杂质C(CLPI-C，CAS号120202-71-3)。其中A是氯吡格雷的水解产物，B是同分异构体，有关物质C主要是右旋硫酸氢氯吡格雷的光学对映体。它们所表示的结构式分别为：

对于硫酸氢氯吡格雷中的有关物质，FDA规定这三种杂质不得超过HPLC积分面积的0.1％。主要是由于三种有关物质A，B，C均对硫酸氢氯吡格雷的药效有一定影响，因此，需要对其含量加以控制。

综上所述，上述方法制备的硫酸氢氯吡格雷纯度不高，所提供的产物处理或纯化方法为有机化学合成中的常规方法，这些方法本身很少能够获得97％或以上的纯度。另外，在硫酸氢氯吡格雷化合物存放不当或存放时间过长时，会导致药物活性成分含量降低。

目前国内外关于氯吡格雷的专利以及期刊文献，主要集中在合成路线和晶型的转化上，本领域迫切需要一种硫酸氢氯吡格雷化合物的精制方法。

发明内容

为了克服上述现有技术的缺陷，特别是克服现有技术制备的硫酸氢氯吡格雷纯度低的缺陷，本发明提供了一种硫酸氢氯吡格雷化合物的精制方法。

本发明提供的精制方法所针对的硫酸氢氯吡格雷是目前已知的合成方法所制得的硫酸氢氯吡格雷粗品或者市售的硫酸氢氯吡格雷原料药，以下统称为本发明采用的原料硫酸氢氯吡格雷。

本发明人经过长期研究发现，通过包括如下处理步骤的精制方法，能够大幅度提高原料硫酸氢氯吡格雷的纯度：

步骤1，将原料硫酸氢氯吡格雷溶于水中，用硫酸调节pH至5-6，升温至60～70℃并搅拌1-2小时，冷却至室温后加入与水不互溶的有机溶剂进行萃取，然后分离掉含有杂质的有机相，获得初级提纯的含有硫酸氢氯吡格雷的水相；

步骤2，向上述硫酸氢氯吡格雷的水溶液中，加入适量的活性炭，保温搅拌，吸附，过滤，收集滤液，将滤液冷却至4～10℃，过滤，并将滤液减压浓缩至近干，加入适量中性氧化铝均匀拌样；

步骤3，将上述样品通过制备型中性氧化铝色谱柱进行分离纯化，洗脱，收集硫酸氢氯吡格雷部位的洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥，获得三级提纯的硫酸氢氯吡格雷。

以下具体描述本发明。

步骤1，将原料硫酸氢氯吡格雷溶于水中，用硫酸调节pH至5-6，升温至60～70℃并搅拌1-2小时，冷却至室温后加入与水不互溶的有机溶剂进行萃取，然后分离掉含有杂质的有机相，获得初级提纯的含有硫酸氢氯吡格雷的水相。

在本发明的一个方面，作为优选，用硫酸调节pH至5-6，升温至60～70℃并搅拌1-2小时以除去少量盐酸盐，并改变溶液的pH以利于后续分离。

在本发明的一个方面，作为优选，所述的有机溶剂选自二氯甲烷、二氯乙烷、丙酮、氯仿和乙酸乙酯中的一种，优选为二氯甲烷。

在本发明的一个方面，作为优选，按体积计每次萃取时有机溶剂的量为水体积的20％-40％，萃取2-3次，为了充分萃取，先进行搅拌，然后通过分液除去含有杂质的有机相。

之所以采用萃取，是基于以下原因：一般情况下，原料硫酸氢氯吡格雷中还含有制备过程中引入的溶剂、各种原料和中间产物、由于引湿性而带入的水分、细菌内毒素，以及各种无机物和重金属等。这些物质以杂质形式存在，影响原料硫酸氢氯吡格雷的纯度。这些物质含量很低，但仍然以痕量溶于硫酸氢氯吡格雷水溶液中。我们注意到，这些杂质性物质有的在有机溶剂中的溶解性较大，而萃取法是比较常见而效果很好的分离方法。

步骤2，向硫酸氢氯吡格雷的水溶液中，加入适量的活性炭，保温搅拌，吸附，过滤，收集滤液，将滤液冷却至4～10℃，过滤，并将滤液减压浓缩至近干，加入适量中性氧化铝均匀拌样。

在本发明的一个方面，作为优选，其中所述的加入活性炭的量为溶液总体积的0.1-0.5％(g/ml)。

在本发明的一个方面，作为优选，其中所述的加入活性炭后35-50℃保温搅拌。

在本发明的一个方面，发明人令人意外地发现，将滤液冷却至4～10℃，过滤，可以分离除去硫酸氢氯吡格雷的S(-)或R构型的异构体(NMR鉴定主要为R(-)构型)。现有技术(例如WO2008062421A、WO2005113559A)报道过氢氯吡格雷的S(-)或R构型在有机溶剂中与氢氯吡格雷S(+)具有差异，而没有任何文献报道过硫酸氢氯吡格雷的S(-)或R构型在pH至5-6的水溶液的溶解度与硫酸氢氯吡格雷S(+)具有差异。

在本发明的一个方面，作为优选，将滤液分离除去硫酸氢氯吡格雷异构体杂质后，在50-60℃减压浓缩。

步骤3，将硫酸氢氯吡格雷通过制备型中性氧化铝色谱柱进行分离纯化，洗脱，收集硫酸氢氯吡格雷部位的洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥，获得提纯的硫酸氢氯吡格雷。

本申请人经过长期认真的大量研究，分离纯化过程中，筛选了硅胶、氧化铝或大孔树脂等各种填料色谱柱，例如硅胶的粒径为45-250μm、孔径为

的硅胶；氧化铝或中性氧化铝粒径为18-200μm的氧化铝或中性氧化铝，大孔树脂型号可为AmberliteXAD-6、Amberlite XAD-7、Amberlite XAD-8、Diaion HP2MG、GDX-501、HPD400、HPD450、HPD750、Hz841、Amberlite XAD-9、Amberlite XAD-10、GDX-401、GDX-601、NKA-II、NKA-9、HPD500/600，本发明人意外发现应用大孔树脂对产品的纯度并没有明显改善，硅胶也不理想，而专用的中性氧化铝不仅可以充分吸附上柱物中的成分杂质及其它色素，还对本品纯化有着独到的意外效果，而且成本相对较低，操作较简易。

在本发明的一个方面，本发明柱固定相填料为粒径为18-200μm、孔径为约6nm的细孔中性氧化铝。

在本发明的一个方面，中性氧化铝可以例如为供应商ICN的ICNallumina N优选粒径为18-63μm，孔径为6nm的细孔中性氧化铝，pH7.5，优选粒径为18-32μm，孔径为6nm的细孔中性氧化铝，pH 7.5。或者，中性氧化铝例如为供应商Baker柱层析专用中性氧化铝，粒径为50-200μm，孔径为6nm，pH 7.0或pH 7.5。

本发明人在上述基础上进行大量的优化实验，筛选得到了适宜的流动相，因此在本发明的一个方面，优选地，上述精制方法中所述的色谱柱纯化条件为：流动相为乙腈-水(4∶1体积比的乙腈∶水)的混合溶液，固定相填料为中性氧化铝，流速0.5-1.5ml/min，柱温30-40℃，波长225nm。

在本发明的一个方面，作为优选，每次纯化药物的质量与色谱柱填料的质量之比为1∶10-250，优选质量比为1∶15-150。流动相的用量只要满足将药物基本上完全洗脱即可，洗脱后的流分分段收集，不同段的流分中药物的含量不同，为了获得高纯度的药物(纯度大于99.8％)，需将药物含量大于90％的流分合并，优选将药物含量大于95％的流分合并。

在本发明的一个方面，作为优选，将硫酸氢氯吡格雷洗脱液在35-40℃减压浓缩。

硫酸氢氯吡格雷鉴定和测定可以应用本领域的常规技术，例如熔点测定仪、旋光仪、NMR和HPLC法，HPLC法例如参见刘雅茹等HPLC法测定原料药中硫酸氢氯吡格雷及有关物质含量，《化学与生物工程》，27(8)。

本发明从根本上改变了国内外硫酸氢氯吡格雷原料纯度较低的现状，解决了粗制硫酸氢氯吡格雷和硫酸氢氯吡格雷原料药面临的难题，改善了由于不溶性微粒或聚合物杂质成分较多引发的一系列临床不良反应，提高了制剂产品质量，减少了毒副作用。本发明方法还具有简便、易于控制和工业化生产的特点。

具体实施方式

以下通过实施例进一步说明本发明，但不应理解为对本发明的限制。

实施例1

将纯度为95％、熔点179-181℃、[α]²⁵ _D＝53.0的硫酸氢氯吡格雷原料10g(浙江车头制药有限公司，H20103664)溶于100ml水中，用硫酸调节pH至5，升温至60℃并搅拌1小时，冷却至室温后搅拌下加入2×20ml二氯甲烷，充分萃取两次，收集含硫酸氢氯吡格雷的水相。

向硫酸氢氯吡格雷的水溶液中加入0.1g活性炭，35℃保温搅拌10分钟，吸附，过滤，收集滤液，将滤液冷却至4℃，过滤，并将滤液50℃减压浓缩至近干，加入适量中性氧化铝均匀拌样。

将硫酸氢氯吡格雷样品经粒径为18-32μm、孔径为6nm的ICNallumina N中性氧化铝色谱柱纯化，泵入乙腈-水(4∶1)的混合溶液洗脱，收集硫酸氢氯吡格雷部位洗脱液，35℃减压浓缩，喷雾干燥，获得精制的硫酸氢氯吡格雷9.3g，纯度99.5％，收率97.4％。熔点185℃，[α]²⁵ _D＝55.0°(c＝1，甲醇)。

对比实施例1

向硫酸氢氯吡格雷的水溶液中加入0.1g活性炭，35℃保温搅拌10分钟，吸附，过滤，收集滤液，将滤液减压浓缩至近干，加入适量中性氧化铝均匀拌样。

将硫酸氢氯吡格雷样品经粒径为18-32μm、孔径为6nm的ICNallumina N中性氧化铝色谱柱纯化，泵入乙腈-水(4∶1)的混合溶液洗脱，收集硫酸氢氯吡格雷部位洗脱液，35℃减压浓缩，喷雾干燥，获得精制的硫酸氢氯吡格雷9.2g，纯度98.5％，收率95.4％。熔点184-185℃，[α]²⁵ _D＝54.10°(c＝1，甲醇)。

实施例2

将纯度为96％、熔点180-182℃、[α]²⁵ _D＝53.7硫酸氢氯吡格雷原料10g(成都名阳药业有限公司，H20103599)溶于100ml水中，用硫酸调节pH至5.5，升温至60℃并搅拌1.5小时，冷却至室温后搅拌下加入2×40ml二氯甲烷，充分萃取两次，收集含硫酸氢氯吡格雷的水相。

向硫酸氢氯吡格雷的水溶液中加入0.5g活性炭，50℃保温搅拌10分钟，吸附，过滤，收集滤液，将滤液冷却至7℃，过滤，并将滤液55℃减压浓缩至近干，加入适量中性氧化铝均匀拌样。

将硫酸氢氯吡格雷样品经粒径50-200μm、孔径6nm的Baker柱层析专用中性氧化铝为固定相填料的色谱柱纯化，泵入乙腈-水(4∶1)的混合溶液洗脱，收集硫酸氢氯吡格雷部位洗脱液，40℃减压浓缩，喷雾干燥，获得精制的硫酸氢氯吡格雷9.4g，纯度99.3％，收率97.1％。熔点185℃，[α]²⁵ _D＝55.0°(c＝1，甲醇)。

对比实施例2

除了将“粒径50-200μm，孔径6nm的Baker柱层析专用中性氧化铝”替换为粒径50-200μm，孔径6nm的硅胶，其余同实施例2。获得精制的硫酸氢氯吡格雷9.2g，纯度97.6％，收率93.5％。熔点184.5℃，[α]²⁵ _D＝54.8°(c＝1，甲醇)。

实施例3

将纯度为95％、熔点180-183℃、[α]²⁵ _D＝53.3的硫酸氢氯吡格雷原料10g(苏州天马医药集团天吉生物制药有限公司，H20103577)溶于100ml水中，用硫酸调节pH至6，升温至60℃并搅拌2小时，冷却至室温后搅拌下加入2×30ml二氯甲烷，充分萃取两次，收集含硫酸氢氯吡格雷的水相。

向硫酸氢氯吡格雷的水溶液中加入0.4g活性炭，50℃保温搅拌10分钟，吸附，过滤，收集滤液，将滤液冷却至10℃，过滤，并将滤液60℃减压浓缩至近干，加入适量中性氧化铝均匀拌样。

将硫酸氢氯吡格雷样品经粒径为18-32μm、孔径为6nm的ICNalluminaN中性氧化铝色谱柱纯化，泵入乙腈-水(4∶1)的混合溶液，收集硫酸氢氯吡格雷部位洗脱液，40℃减压浓缩，喷雾干燥，获得精制的硫酸氢氯吡格雷9.4g，纯度99.5％，收率98.4％。熔点185℃，[α]²⁵ _D＝55.0°(c＝1，甲醇)。

对比实施例3

向硫酸氢氯吡格雷的水溶液中加入0.4g活性炭，50℃保温搅拌10分钟，吸附，过滤，收集滤液，将滤液冷却至10℃，过滤，并将滤液60℃减压浓缩至近干，加入经过预处理的AB-8树脂搅拌均匀。

将硫酸氢氯吡格雷样品经AB-8大孔吸附树脂柱纯化，依次用水、4∶1的乙腈和水的混合溶液洗脱，收集硫酸氢氯吡格雷部位洗脱液，40℃减压浓缩，喷雾干燥，获得精制的硫酸氢氯吡格雷9.1g，纯度98.2％，收率94.1％。熔点184℃，[α]²⁵ _D＝54.20°(c＝1，甲醇)。

实施例4

将过期的纯度为89％、熔点176-179℃、[α]²⁵ _D＝52.4的硫酸氢氯吡格雷原料10g(深圳信立泰药业股份有限公司，H20000541)溶于100ml水中，用硫酸调节pH至5.5，升温至60℃并搅拌1.5小时，冷却至室温后搅拌下加入2×30ml二氯甲烷，充分萃取两次，收集含硫酸氢氯吡格雷的水相。

向硫酸氢氯吡格雷的水溶液中加入0.5g活性炭，35℃保温搅拌10分钟，吸附，过滤，收集滤液，将滤液冷却至6℃，过滤，并将滤液55℃减压浓缩至近干，加入适量中性氧化铝均匀拌样。

将硫酸氢氯吡格雷样品经粒径50-200μm、孔径6nm的Baker柱层析专用中性氧化铝为固定相填料的色谱柱纯化，泵入乙腈-水(4∶1)的混合溶液，收集硫酸氢氯吡格雷部位洗脱液，40℃减压浓缩，喷雾干燥，获得精制的硫酸氢氯吡格雷8.6g，纯度99.3％，收率96.0％。熔点185℃，[α]²⁵ _D＝55.0°(c＝1，甲醇)。

对比实施例4

将过期的纯度为89％、熔点176-179℃、[α]²⁵ _D＝52.4的硫酸氢氯吡格雷原料10g(深圳信立泰药业股份有限公司，H20000541)溶于100ml水中，升温至60℃并搅拌1.5小时，冷却至室温后搅拌下加入2×30ml二氯甲烷，充分萃取两次，收集含硫酸氢氯吡格雷的水相。

将硫酸氢氯吡格雷样品经粒径50-200μm、孔径6nm的Baker柱层析专用中性氧化铝为固定相填料的色谱柱纯化，泵入乙腈-水(4∶1)的混合溶液，收集硫酸氢氯吡格雷部位洗脱液，40℃减压浓缩，喷雾干燥，获得精制的硫酸氢氯吡格雷8.3g，纯度97.3％，收率90.7％。熔点184℃，[α]²⁵ _D＝54.3°(c＝1，甲醇)。

上述实施例和对比例还从不同方面充分说明了本发明特定组合方法的优越性，说明了本发明方案的可行性，说明了本发明优选方案意外的优异效果，尤其说明了包括制备型中性氧化铝色谱柱的色谱条件以及优化的参数，带来了意想不到的效果，是理论上无法合理预期的。不受理论限制，可能是本发明组合的纯化方法对药物中的杂质具有协同的分离作用，本发明提供的精制方法具有实质的特点和显著的进步，取得的意想不到的技术效果，获得了高产率高纯度的产品。

应该理解，虽然本发明结合实例进行了详细的说明，但上述说明旨在举例说明，而不以任何方式限制其发明内容。对本领域技术人来说，基于本文的说明可以最大程度地利用本发明，并可在没有脱离本发明的权利要求范围或精神内进行多种修改或修饰。

Claims

1.一种如下所示结构硫酸氢氯吡格雷化合物的精制方法，其特征在于其方法包括以下步骤：

步骤1，将原料硫酸氢氯吡格雷溶于水中，用硫酸调节pH至5-6，升温至60～70℃并搅拌1-2小时，冷却至室温后加入二氯甲烷，进行2-3次萃取，按体积计，每次有机溶剂的用量为水溶液的20%-40%，然后分离掉有机相，获得含硫酸氢氯吡格雷的水相；

步骤2，向上述溶液中加入0.1-0.5%g/ml的活性炭，35-50℃保温搅拌，吸附，过滤，收集滤液，将滤液冷却至4～10℃，过滤，并将滤液减压浓缩至近干，加入适量中性氧化铝均匀拌样；

步骤3，将上述样品通过制备型中性氧化铝色谱柱进行分离纯化，用4∶1体积比的乙腈∶水洗脱，收集硫酸氢氯吡格雷部位的洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥，获得提纯的硫酸氢氯吡格雷，其中色谱柱的流速为0.5-1.5ml/min，柱温为35-40℃，检测波长为225nm。

2.根据权利要求1所述的硫酸氢氯吡格雷的精制方法，其特征在于步骤2中50-60℃减压浓缩，步骤3中35-40℃减压浓缩。