CN102443389B - 具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒 - Google Patents
具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102443389B CN102443389B CN201110267083.7A CN201110267083A CN102443389B CN 102443389 B CN102443389 B CN 102443389B CN 201110267083 A CN201110267083 A CN 201110267083A CN 102443389 B CN102443389 B CN 102443389B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fitc
- rhodamine
- fluorescence
- nano particle
- silicon dioxide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
本发明公开一种具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒，它是由含有分子内酰胺环的罗丹明6G和异硫氰酸荧光素共同负载在二氧化硅上形成的介孔二氧化硅纳米颗粒。本发明还公开了具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒的制备方法，以及作为检测细胞溶酶体内pH值的应用。本发明利用含有碱敏感的FITC荧光分子和酸敏感的罗丹明-内酰胺分子的介孔二氧化硅纳米颗粒通过比率法进行检测溶酶体的pH，在囊胞性纤维症、哮喘等疾病的早期诊断方面有广泛的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及介孔二氧化硅纳米颗粒，具体涉及含有酸敏感的具有分子内酰胺环的罗丹明6G衍生物和异硫氰酸荧光素的双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒。
背景技术
真核细胞内存在pH分布与细胞器特异相关这一特征，例如，细胞质是近乎中性的（pH7.2）而溶酶体内则呈酸性（pH 6.0-4.0）。溶酶体内的酸性环境对于真核细胞的内吞、自吞噬、细胞凋亡等生物学过程至关重要，在诸如细胞成熟、癌细胞扩散等过程中都能观察到溶酶体酸性改变这一现象，因此检测溶酶体内的pH对于科学研究有着重要意义。基于单个发光团的单荧光强度法在实际应用中有很多不足，例如加入量所造成的实验误差大；不可定量测量等。与此相比，比率荧光法则由于引入内参而避免了这些问题。即：在某一个对pH敏感的分子上，同时引入一个对pH不敏感的探针作为分子内参。目前已经有多种基于此方法的探针。例如，在荧光素上配对有罗丹明，量子点以及其他染料作为内参。
目前已有报道含有分子内酰胺环的罗丹明衍生物在中性环境下没有荧光，而在酸性环境中由于分子内酰胺开环会生成具有强荧光的氨基罗丹明，这说明这类罗丹明衍生物是一种对pH有良好响应的染料。然而，基于这种染料的pH荧光比率探针还没有报道。介孔二氧化硅是一种具有良好生物兼容性和稳定性的纳米颗粒，可以利用细胞的内吞作用特异地聚集在溶酶体内。含有分子内酰胺环的罗丹明6G衍生物是一种随pH降低荧光强度显著升高染料，与之相反，荧光素是随着pH降低而荧光强度显著降低。
有鉴于此，本发明提供一种具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒，利用分子内酰胺环的罗丹明6G衍生物和异硫氰酸荧光素对pH的不同响应，实现灵敏的pH比率测定。
发明内容
本发明提供一种具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒。利用罗丹明6G和异硫氰酸荧光素对pH的不同响应，实现灵敏的pH比率测定。
为了实现上述目的，本发明的解决方案如下：
具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒，它是由含有分子内酰胺环的罗丹明6G和异硫氰酸荧光素共同负载在二氧化硅上形成的介孔二氧化硅纳米颗粒。
上述的具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒，，其制备方法包括：
先由罗丹明6G在3-氨基丙基三乙氧基硅烷(简称：APTS)中经过氨解得到含有分子内5-员内酰胺环的衍生物N-(罗丹明6G)-内酰胺-3-氨基丙基三乙氧基硅烷（简称：R6G-APTS）；再由异硫氰酸荧光素与（3-氨丙基）三乙氧基硅烷通过氨基反应生成异硫氰酸荧光素-3-氨基丙基三乙氧基硅烷（简称FITC-APTS）；最后，将N-(罗丹明6G)-内酰胺-3-氨基丙基三乙氧基硅烷（简称：R6G-APTS）和异硫氰酸荧光素-3-氨基丙基三乙氧基硅烷（简称：FITC-APTS）加入到由四乙氧基硅烷、十六烷基三甲基溴化铵（简称：CTAB）和助剂组成的混合溶液中反应，除去杂质后制得产品（简称：R6G-FITC-MSN）。
以及，具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒作为检测细胞溶酶体内pH值的应用。
R6G-APTS 与FITC-APTS的合成路线表示如下：
本发明的具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒（R6G-FITC-MSN）的合成路线如图1所示。
罗丹明6G（R6G，以下简称R6G）在3-氨基丙基三乙氧基硅烷（APTS，以下简称APTS）中氨基水解后反应生成无色、不发荧光的R6G-APTS。FITC和APTS的氨基反应生成FITC-APTS。将R6G-APTS和FITC-APTS放入四乙基原硅酸盐（TEOS，以下简称TEOS）和十六烷基三甲基溴化铵中浓缩得到R6G-FITC-MSNs ，经过除去CTAB和其他溶剂后得到R6G-FITC-MSNs纳米颗粒。通过透射电子显微镜（TEM）和扫描电子显微镜（SEM）显示R6G-FITC-MSNs纳米颗粒呈多孔状，大小均一，平均直径约100 纳米。
对R6G-FITC-MSNs进行表征，表征结果如图2所示。
在图2中，图A、图B、图C和图D分别表示为：
A：R6G-FITC-MSN在pH 7.5, 7.0, 6.5, 6.0, 5.5, 5.0, 4.5, 4.0, and 3.5 缓冲溶液中的荧光发射光谱（FITC的激发波长为488nm, R6G-amide的激发波长为530 nm）; 横坐标为荧光发射波长，纵坐标的荧光发射强度；
B：R6G-FITC-MSN在pH 7.5, 7.0, 6.5, 6.0, 5.5, 5.0, 4.5, 4.0, and 3.5 缓冲溶液中的荧光发射光谱（FITC与 R6G-amide的激发波长均为504 nm）；横坐标为荧光发射波长，纵坐标的荧光发射强度；
C：连接空心点而成的曲线为R6G-FITC-MSNs 在双波长激发下的荧光发射强度比率的酸度滴定曲线（FITC的激发波长为488nm, R6G-amide的激发波长为530 nm）; 连接实心点而成的曲线为R6G-FITC-MSNs 在单波长激发下的荧光发射强度比率的酸度滴定曲线（FITC与 R6G-amide的激发波长均为504 nm）；横坐标为在550 nm 与514 nm的荧光发射强度比率，纵坐标的缓冲溶液pH；
D： R6G-FITC-MSN 在水中对 H+ (0.1 mM) 的选择性，其它的干扰物质为 H2O2 (5mM), HOCl (5mM) 以及Na+, K+ , Ca2+, Co2+, Cu2+, Fe3+, Zn2+, Mg2+等离子 (1 mM) (激发波长为533 nm); 横坐标为干扰分析物质, 纵坐标为在553 nm的荧光发射强度)。
在磷酸缓冲液环境中通过荧光放射光谱的方法检测R6G-FITC- MSNs对pH的响应，另外对含有分子内酰胺环的罗丹明6G衍生物（简称为R6G-内酰胺）和FITC分别在533nm和488nm两个波长下进行激发检测二者对pH的响应（图2，A）。可以看到，当缓冲液pH在5.5至3.5区间变化时，波长在552nm时激发出最高荧光强度（图2，A）。这个结果和R6G在缓冲液pH为4时的检测结果一致，表明制备的R6G-FITC-MSNs纳米颗粒通过酸性介导的内酰胺开环而使之产生强烈的荧光。进一步表明，在pH从7.0-3.5的酸性区间从高到低变化时，R6G-FITC-MSNs中的、在细胞质中不发荧光的R6G-内酰胺是高度敏感的荧光报告单位。例如，pH4.0时发出的荧光强度比pH6.5强250倍。相反地，FITC(其最强激发波长为514nm)随着缓冲液的pH从5.5提高到7.5其荧光强度显著增强。FITC的pH荧光滴定光谱和其（pKa 6.5）在碱性条件下的去质子化相一致。R6G-FITC-MSNs中的R6G-内酰胺在488nm单波长光激发条件下也表现出和FITC非常相似的PH响应比率，显示在FITC（供体）和罗丹明（受体）之间存在足够的荧光能量转移。
R6G-内酰胺和FITC（I550nm/I514nm）的荧光强度比率通过双波长光或单波长光激发通过pH滴定检测。滴定曲线表明，在pH5.5-3.5区间，R6G-FITC-MSNs对pH的比率响应高度敏感（图2，C），当pH从5变化到4时，其荧光强度增强了10倍。R6G-FITC-MSNs这种对pH变化超高灵敏度可归因于其独特的双荧光分子特性—R6G-内酰胺对酸性敏感而FITC对碱性敏感。R6G-FITC-MSNs的pH最佳比率测定区间（Ph6.5-3.5）与溶酶体的pH区间（pH6.0-4.0）重合，说明R6G-FITC-MSNs在监测活细胞溶酶体的酸性环境有很大的潜在应用前景。
和氢离子一样，许多其他阳离子如钾离子、钙离子、镁离子等也广泛分布于细胞中。除此以外，在一定的刺激条件下，细胞会产生一些化学活性物质如次氯酸（HOCl）、双氧水（H2O2）等。荧光素具有优异的选择性，经常被用来检测细胞内的pH。若要将R6G-FITC-MSNs作为pH检测探针来使用，必须保证R6G-内酰胺对上述因素响应沉默。这方面的检测结果可见图2, D：其对各种阳离子（1mM）均不响应，也不会与（H2O2，HOCl,5mM）发生反应而影响其对pH的敏感度。
MSNs能够非常容易地被内吞到细胞中，导致溶酶体内细胞内吞粒子的聚集。为了检测到纳米微粒在细胞中的位置，R6G-FITC-MSNs被进行了聚乙二醇化修饰从而增加胶体的稳定性及最小化细胞试验的非特异性反应。L929细胞与纳米颗粒和Lyso Tracker Blue DND 22（Invitrogen公司出产的一种溶酶体染料）共染。氨基化的R6G信号（红色）可以清晰地被检测到与FITC染色部分（绿色）相似，这表明纳米颗粒上附着了用于溶酶体pH调节的内酰胺化R6G。共聚焦显微镜显示DND-22着色的图像（蓝色）与FITC信号相同。这证明了内酰胺化R6G-MSNs被内吞到细胞中，并且是通过特异位点运送到溶酶体中的。
目前， FITC-葡聚糖被广泛用来检测细胞器内的酸性，其原理是荧光素在双波长光（458/497nm）激发下其发射荧光强度比与pH值响应。虽然其被广泛应用，但这种分析方法有很多缺陷，比如操作不方便以及灵敏度不高等。我们的检测系统以对酸敏感的、可在溶酶体内具备活性的内酰胺罗丹明作为pH报告单位，以荧光素作为内参荧光染料，克服了FITC-葡聚糖的上述缺陷。溶酶体的酸性通过利用单波长光激发荧光素/R6G-内酰胺荧光分子对进而通过比率法测定。荧光素作为最常用的荧光染料之一，和各种传统的流式细胞仪之间具有良好的兼容性。因此，在生物学的研究中，通过本发明检测系统可以很方便地高通量地进行溶酶体的酸性监测。
总之，本发明描述了利用含有碱敏感的FITC荧光分子和酸敏感的罗丹明-内酰胺分子的介孔二氧化硅纳米颗粒通过比率法进行检测溶酶体的pH。相比于现有技术中的溶酶体pH探针，单波长可激发的R6G-FITC-MSN更灵敏，可以利用传统的流式细胞仪以及共聚焦显微镜通过比率法来方便地测定溶酶体的pH。溶酶体的酸化现象存在于多个细胞信号传导通路，囊胞性纤维症、哮喘等疾病都和它有关。R6G-MSN的酸性检测特性表明其对于这些疾病的早期诊断方面有广泛的应用前景。
附图说明
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步的详细描述，但附图和具体实施方式不应理解为是对本发明进行的限定。
图1是本发明具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒（R6G-FITC-MSN）的合成路线图。
图2是本发明具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒（R6G-FITC-MSNs）的表征图。
图3是本发明实施例6中比率法测定L929细胞中溶酶体酸性的分析图。
图4是本发明实施例7中比率法测定L929细胞中溶酶体的酸性的标准曲线图。
具体实施方式
一种具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒，是由具有分子内酰胺环的罗丹明6G衍生物和异硫氰酸荧光素共同负载在二氧化硅上形成的介孔二氧化硅纳米颗粒。
一种具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒，其制备方法包括：
a) 将罗丹明6G与（3-氨丙基）三乙氧基硅烷在室温避光条件下振动混匀, 直至罗丹明6G的荧光消失,得到R6G-APTS；
b) 异硫氰酸荧光素与（3-氨丙基）三乙氧基硅烷室温避光条件下振动混匀2小时，得到FITC-APTS；
c) 将R6G-APTS和FITC-APTS用正硅酸乙酯混匀，再分别加入适量的去离子水、十六烷基三甲基溴化铵和氢氧化钠溶液,在水浴80℃加热条件下振动2小时混匀；然后将溶液离心分离，收集沉淀；再将沉淀用含1%HCl的乙醇处理并超声重新溶解5小时；重新溶解后的样品再通过离心、超声重新溶解，最后离心后得到具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒。
下面结合实施例，具体描述具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒，及其制备和使用效果。
实施例1：R6G-FITC-MSN的合成
1）R6G-APTS的合成：
在一个带盖的管或瓶中将罗丹明6G（0.2 g）加入到10 ml APTS[（3-氨丙基）三乙氧基硅烷]，室温避光条件下振动混匀，直至罗丹明6G的荧光消失，即可制备R6G-APTS；
2）FITC-APTS的合成:
在一个带盖的管或瓶中将FITC（0.1 g）加入到5 ml APTS，室温避光条件下振动混匀2小时，即可制备FITC-APTS；
3）R6G-FITC-MSN的合成：
将100微升R6G-APTS和100微升FITC-APTS用2.3 ml 的TEOS(tetraethyl orthosilicate)混匀，再加入装有240 ml 去离子水、0.5 g CTAB（cetyltrimethylammonium bromide）、1.75ml 氢氧化钠（2 M）的干净三角瓶中，将三角瓶通过水浴调温至80摄氏度，并在此温度下振动2小时混匀，再在10000rpm的离心条件下离心30分钟来收集沉淀（沉淀中主要成分即R6G-FITC-MSN，另外还含有未完全反应的CTAB和其他反应物）。将沉淀用含1%HCl的乙醇处理并超声重溶5小时。重溶后的样品再通过离心、超声重溶、离心然后去掉上清（上清中包含有未完全反应的CTAB和其他反应物），得到R6G-FITC-MSN。
实施例2：双波长光激发下的R6G-FITC-MSN的比率法pH滴定
用不同梯度pH的磷酸钠缓冲液将R6G-FITC-MSN配置成终浓度为1微克/毫升的溶液，分别测定不同pH对应的488nm激发的荧光素激发光谱和533nm激发的罗丹明6G内酰胺激发光谱。
如图2中的C图所示：图中连接空心点而成的曲线为R6G-FITC-MSNs 在双波长激发下的荧光发射强度比率的酸度滴定曲线（FITC的激发波长为488nm, R6G-amide的激发波长为530 nm）。在不同pH下罗丹明6G内酰胺所激发出的荧光随pH降低而升高,而488nm激发的荧光素的荧光随着pH降低而降低。二者的荧光对pH响应不同,显示可以作为对pH敏感的荧光探针。
实施例3：单波长光激发下的R6G-FITC-MSN的比率法pH滴定
用不同梯度pH的磷酸钠缓冲液将R6G-FITC-MSN配置成终浓度为1微克/毫升的溶液，分别测定不同pH对应的488nm激发的荧光素激发光谱。
如图2中的C图所示：图中连接实心点而成的曲线为R6G-FITC-MSNs 在单波长激发下的荧光发射强度比率的酸度滴定曲线（FITC与 R6G-amide的激发波长均为504 nm）；横坐标为在550 nm 与514 nm的荧光发射强度比率，纵坐标的缓冲溶液pH。
在不同pH下罗丹明6G内酰胺所激发出的荧光随pH降低而升高,而488nm激发的荧光素的荧光随着pH降低而降低。二者的荧光对pH响应不同,表明该荧光探针在单波长激发下仍然可以达到双波长激发的效果，更有利于该探针的实际应用。
实施例4：共聚焦成像验证R6G-FITC-MSN纳米颗粒对pH的响应
L929细胞在含有0.05 mg/ml 的R6G-FITC-MSN的培养基中培养2个小时，去除培养液后洗两次，更换新培养基继续培养半个小时。对照组不做任何处理，实验组用含有50 nM BFA（Bafilomycin A, H-ATPase抑制剂，一种使得溶酶体pH从酸性变得中性的试剂）的培养液处理4个小时。接着用共聚焦荧光显微镜观察。发现BFA处理过的细胞内绿色荧光仍然存在，而红色荧光消失，说明FITC对pH没有明显响应，可以作为一个荧光内参；而R6G对pH响应很好。
实施例5：共聚焦成像验证R6G-FITC-MSN纳米颗粒对pH的响应
L929细胞在含有0.05 mg/ml 的R6G-FITC-MSN的培养基中培养2个小时，去除培养液后洗两次，更换新培养基继续培养半个小时。对照组不做任何处理，实验组用含有50 nM BFA（Bafilomycin A, H-ATPase抑制剂，一种使得溶酶体pH从酸性变得中性的试剂）的培养液处理4个小时。接着用共聚焦荧光显微镜观察。发现BFA处理过的细胞内绿色荧光仍然存在，而红色荧光消失，说明FITC对pH没有明显响应，可以作为一个荧光内参；而R6G对pH响应很好。
实施例6：比率法测定L929细胞中溶酶体的酸性
L929细胞在含有0.05 mg/ml 的R6G-FITC-MSN的培养基中培养2个小时，去除培养液后洗两次，更换新培养基继续培养半个小时。再用含有50 nM BFA的培养液处理4个小时。接着进行流式细胞仪分析，10000个细胞样本被分析。相关数据用WinMidi进行分析。如图3所示：纵坐标表示FITC所激发出来的荧光数值比上R6G激发所发射出来的荧光数值。FL2表示Beckman流式细胞仪中555-575nm的通道，对应R6G所激发的荧光，FL1表示Beckman流式细胞仪中525-545nm的通道，对应FITC所激发的荧光。二者的比值显示，该探针可以在细胞内对pH变化响应良好，而且可以用常用的流式细胞仪的方法进行检测。图3中，CTRL 表示对照组， BafilomycinA表示为可以使得溶酶体pH从酸性到中性的一种试剂。
实施例7：比率法测定L929细胞中溶酶体的酸性的标准曲线
L929细胞在含有0.05 mg/ml 的R6G-FITC-MSN的培养基中培养2个小时，去除培养液后洗两次，更换新培养基继续培养半个小时。再用含有尼日尼亚素（nigericin,一种可以使得膜内外pH相同的试剂）的不同pH值的磷酸盐缓冲液孵育10分钟。接着进行流式细胞仪分析，10000个细胞样本被分析。相关数据用WinMidi进行分析。如图4所示，纵坐标表示FITC所激发出来的荧光数值比上R6G激发所发射出来的荧光数值。FL2表示Beckman流式细胞仪中555-575nm的通道，FL1表示Beckman流式细胞仪中525-545nm的通道。二者的比值显示标准曲线线性拟合度良好，可以准确用来测量细胞内pH具体数值。
可以理解，很多细节的变化是可能的，但这并不因此违背本发明的范围和精神，任何所属技术领域的普通技术人员对其所做的适当变化，皆应视为不脱离本发明专利的范畴。
Claims (1)
1.具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒用于检测细胞溶酶体内pH值的用途，其特征在于：它是由含有分子内酰胺环的罗丹明6G和异硫氰酸荧光素共同负载在二氧化硅上形成的介孔二氧化硅纳米颗粒，其粒径为100nm左右；其制备方法包括：
先由罗丹明6G在3-氨基丙基三乙氧基硅烷中经过氨解得到含有分子内5-元内酰胺环的衍生物N-(罗丹明6G)-内酰胺-3-氨基丙基三乙氧基硅烷；再由异硫氰酸荧光素与（3-氨丙基）三乙氧基硅烷通过氨基反应生成异硫氰酸荧光素-3-氨基丙基三乙氧基硅烷；最后，将N-(罗丹明6G)-内酰胺-3-氨基丙基三乙氧基硅烷和异硫氰酸荧光素-3-氨基丙基三乙氧基硅烷加入到由四乙氧基硅烷、十六烷基三甲基溴化铵和助剂组成的混合溶液中反应，除去杂质后，制得产品；产品进行聚乙二醇的修饰后用于检测细胞溶酶体内pH值。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201110267083.7A CN102443389B (zh) | 2011-09-09 | 2011-09-09 | 具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201110267083.7A CN102443389B (zh) | 2011-09-09 | 2011-09-09 | 具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102443389A CN102443389A (zh) | 2012-05-09 |
| CN102443389B true CN102443389B (zh) | 2014-07-09 |
Family
ID=46006331
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201110267083.7A Expired - Fee Related CN102443389B (zh) | 2011-09-09 | 2011-09-09 | 具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102443389B (zh) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104922674B (zh) * | 2015-04-10 | 2017-12-12 | 南京理工大学 | 一种ph‑刺激响应型智能纳米容器及其制备方法 |
| CN105199710B (zh) * | 2015-08-25 | 2017-07-11 | 武汉理工大学 | 一种荧光介孔二氧化硅复合纳米粒子及其制备方法 |
| CN109073556A (zh) * | 2016-04-28 | 2018-12-21 | 国立大学法人名古屋大学 | 荧光探针、荧光检测方法及荧光探针的使用方法 |
| CN107976538A (zh) * | 2017-11-18 | 2018-05-01 | 安徽师范大学 | 一种基于荧光共振能量转移的二氧化硅荧光免疫标记探针、制备方法及应用 |
| AU2019262607A1 (en) * | 2018-05-04 | 2020-12-24 | Becton, Dickinson And Company | Polymeric dyes and uses thereof |
| CN110082321B (zh) * | 2018-11-30 | 2020-06-16 | 中山大学 | 一种用于检测水体中多类有机胺的荧光纳米材料及其应用 |
| CN109439723A (zh) * | 2018-11-30 | 2019-03-08 | 王瑞明 | 一种多层纳米复合粒子的毒性测试方法 |
| CN114027296A (zh) * | 2021-11-10 | 2022-02-11 | 山东农业大学 | 用于防治松材线虫及其媒介昆虫的纳米农药制剂 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101993693A (zh) * | 2010-09-28 | 2011-03-30 | 华东理工大学 | 用于pH比率探针的介孔二氧化硅荧光纳米粒子制备方法 |
-
2011
- 2011-09-09 CN CN201110267083.7A patent/CN102443389B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101993693A (zh) * | 2010-09-28 | 2011-03-30 | 华东理工大学 | 用于pH比率探针的介孔二氧化硅荧光纳米粒子制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102443389A (zh) | 2012-05-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102443389B (zh) | 具有双荧光标记的介孔二氧化硅纳米颗粒 | |
| Pramanik et al. | The rapid diagnosis and effective inhibition of coronavirus using spike antibody attached gold nanoparticles | |
| Liu et al. | A fluorescence and colorimetric dual-mode assay of alkaline phosphatase activity via destroying oxidase-like CoOOH nanoflakes | |
| Kim et al. | Citrate-based fluorescent materials for low-cost chloride sensing in the diagnosis of cystic fibrosis | |
| Tian et al. | Highly sensitive detection of exosomes by SERS using gold nanostar@ Raman reporter@ nanoshell structures modified with a bivalent cholesterol-labeled DNA anchor | |
| Arppe et al. | Photon upconversion sensitized nanoprobes for sensing and imaging of pH | |
| Wu et al. | A ratiometric fluorescent system for carboxylesterase detection with AIE dots as FRET donors | |
| Wu et al. | Aptamer-functionalized magnetic nanoparticle-based bioassay for the detection of ochratoxin a using upconversion nanoparticles as labels | |
| US8168447B2 (en) | Multiple component nanoparticles for multiplexed signaling and optical encoding | |
| Xu et al. | Dual-mode of magnetic assisted Au@ Ag SERS tags and cationic conjugated UCNPs for qualitative and quantitative analysis of multiple foodborne pathogens | |
| Lou et al. | A new turn-on chemosensor for bio-thiols based on the nanoaggregates of a tetraphenylethene-coumarin fluorophore | |
| WO2023185543A1 (zh) | 一种双通道可视化多色荧光探针的制备及检测方法 | |
| CN109762558A (zh) | 一种用于定量检测尿液中PPi含量的比率型荧光探针的制备方法 | |
| Han et al. | A ratiometric nanoprobe consisting of up-conversion nanoparticles functionalized with cobalt oxyhydroxide for detecting and imaging ascorbic acid | |
| CN101855539A (zh) | 内毒素浓度测定方法及浓度测定用试剂盒 | |
| CN105866083B (zh) | 过氧亚硝酸根离子检测探针、其制备方法及应用 | |
| WO2012083064A1 (en) | Silaanthracene as a red and near infrared sensor and a method to manufacture such a sensor | |
| Meng et al. | An “on–off–on” fluorescence assay based on silicon nanoparticles for selective detection of manganese (II) | |
| CN108949171B (zh) | 一种稀土碳纳米粒子及其制备方法和基于荧光色度测定pH值的应用 | |
| Jiang et al. | Preparation and time-resolved luminescence bioassay application of multicolor luminescent lanthanide nanoparticles | |
| Chen et al. | A general colorimetric method for detecting protease activity based on peptide-induced gold nanoparticle aggregation | |
| Zhang et al. | A time-resolved ratiometric luminescent anthrax biomarker nanosensor based on an Ir (iii) complex-doped coordination polymer network | |
| CN108822833A (zh) | 双发光的硅纳米粒子/金纳米簇复合物比率荧光探针及其制备方法和应用 | |
| CN104165876B (zh) | 基于刻蚀纳米银三角的快速荧光检测过氧化氢的方法 | |
| CN114674806B (zh) | 一种基于表面增强拉曼散射的细胞传感器及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20140709 Termination date: 20170909 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |