CN102432877B - 酰胺键交联小分子量pei衍生物、制备方法、用途及复合物 - Google Patents

酰胺键交联小分子量pei衍生物、制备方法、用途及复合物 Download PDF

Info

Publication number
CN102432877B
CN102432877B CN 201110327084 CN201110327084A CN102432877B CN 102432877 B CN102432877 B CN 102432877B CN 201110327084 CN201110327084 CN 201110327084 CN 201110327084 A CN201110327084 A CN 201110327084A CN 102432877 B CN102432877 B CN 102432877B
Authority
CN
China
Prior art keywords
molecular weight
pei
small molecular
cross
weight pei
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN 201110327084
Other languages
English (en)
Other versions
CN102432877A (zh
Inventor
苏靖
金拓
袁伟恩
吴飞
何沐
廖美玲
赵仲
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shanghai Jiaotong University
Original Assignee
Shanghai Jiaotong University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shanghai Jiaotong University filed Critical Shanghai Jiaotong University
Priority to CN 201110327084 priority Critical patent/CN102432877B/zh
Publication of CN102432877A publication Critical patent/CN102432877A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102432877B publication Critical patent/CN102432877B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Abstract

本发明公开了一种酰胺键小分子量PEI交联衍生物、制备方法、用途及复合物。所述衍生物结构式为：
Figure 948574DEST_PATH_IMAGE001
，其中，n为1～20，m为1～20。所述酰胺键小分子量PEI交联衍生物的制备方法包括如下步骤：将小分子量PEI与丁二酰氯按摩尔比为3:2的比例加入三乙胺-氯仿体系中；搅拌、摇动或震荡反应体系，使之发生缩合反应，即得所述小分子量PEI交联衍生物。与现有技术相比，本发明制备的含有酰胺键结构的可降解小分子量PEI交联衍生物具有高的转染活性和较小的细胞毒性，在不同的细胞中均具有较好的生物活性，是高效、低毒的基因物质载体，用于输送基因物质。

Description

酰胺键交联小分子量PEI衍生物、制备方法、用途及复合物
技术领域
本发明涉及PEI衍生物、制备方法、用途及复合物，具体涉及一种酰胺键小分子量PEI交联衍生物、制备方法、用途及其复合物。
背景技术
基因疗法是在先天和后天的多种疾病治疗中的一种有力工具，因为它可以通过调节细胞中的生物活性蛋白的表达来预防，治疗，甚至治愈疾病。基因治疗在其发展过程中遇到了一系列技术瓶颈，其中最重要的瓶颈之一是基因物质安全有效的体内输送。
目前常用的基因输送载体可以分为重组病毒载体及人工合成载体(即非病毒载体）。病毒载体虽然显示了高的转染效率，但由于病毒的变异会引起潜在的致病危险，并且病毒表面成分会引起人体免疫反应，同时病毒的制备和纯化困难且携载基因容量小。因此非病毒基因载体被认为是更理想的基因物质输送载体。
传统的生物可降解高分子材料（如PGA、PLA、PLGA）不具有基因内吞逃逸功能，所以转染率不高，改性天然高分子如壳聚糖，其结构在设计改造上具有局限性，而以聚乙烯亚胺（PEI）为代表的能够帮助基因物质内吞逃逸的聚阳离子则因高分子量而引起细胞毒性过大。
PEI是目前研究最为广泛的聚阳离子非病毒载体，分支状分子量为25 kDa的PEI（PEI 25kDa）转染效率最高，但是PEI 25kDa同时因其烷基骨架无法降解而导致细胞累计毒性较大。多数的国内外研究集中在可降解的PEI 交联衍生物。
最早俄亥俄州立大学的Robert J.Lee在结合化学杂志上（Bioconjugate Chemistry2001；12:989-9.发表‘Efficient gene transfer using reversibly cross-linked low molecular weight polyethylenimine’的文章，文中用交联剂二硫代双(琥珀酰亚胺基丙酸酯)(DSP)、双硫二丙二亚氨甲基醚（DTBP）分别与小分子量PEI(PEI 800Da)交联得到两个含有二硫键PEI衍生物。在中国仓鼠卵巢(CHO )细胞中具有与市售高分子量PEI(25KDa)相当的转染活性，二硫键的引入希望该衍生物可以被体内的还原试剂谷胱甘肽还原，从而二硫键断开，降解成为没有细胞毒性的小分子量PEI，但是文献中没有给出具体的细胞毒性数据。
麻省理工学院的M. Klibanov在药学研究杂志上（Pharm.Res.2005;22:373-80.）发表‘Cross-linked small polyethylenimines: while still nontoxic, deliver DNA efficiently to mammalian cells in vitro and in vivo’的文章，文中合成了酯键连接的PEI衍生物，发现其在体内和体外的转染活性都优于bPEI 25 KDa。但是这一类酯键交联的PEI衍生物所含有的伯胺和仲胺易与酯键发生重排反应，致使聚阳离子的结构不稳定。
犹他大学的Sung Wan Kim在缓控释杂志（Journal of Controlled Release 2005，103：209–219）发表《Polyethylenimine with acid-labile linkages as a biodegradable gene carrier》的文章，生成亚胺键连接的可降解PEI，其特点是,中性pH值可稳定存在，在酸性条件下（pH=4.5）亚胺键断开，生成无细胞毒性的小分量PEI，降低了细胞毒性，但是其结构不稳定（亚胺键的引入），其转染活性也不高（与PEI 25KDa对照）。综上所述，目前没有酰胺作为可降解连接键的PEI类衍生物的报道。 
发明内容
本发明的目的在于克服上述现有技术的不足，提供一种酰胺键小分子量PEI交联衍生物、制备方法、用途及其复合物。本发明制备的含有酰胺键结构的可降解小分子量PEI交联衍生物具有高的转染活性和较小的细胞毒性，在不同的细胞中均具有较好的生物活性，是高效、低毒的基因物质载体，用于输送基因物质。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：
第一方面，本发明涉及一种酰胺键交联小分子量PEI交联衍生物，其结构式为：
Figure 19818DEST_PATH_IMAGE001
，
其中，n为1～20，m为1～20。
优选的，所述酰胺键小分子量PEI交联衍生物的基本构建单元为小分子量PEI，所述小分子量PEI的分子量为800Da。
第二方面，本发明还涉及一种制备上述的酰胺键交联小分子量PEI交联衍生物的方法，包括以下步骤：
(a)将小分子量PEI与丁二酰氯按摩尔比为3:2的比例加入三乙胺-氯仿体系中；
(b)搅拌、摇动或震荡反应体系，使之发生缩合反应，即得所述小分子量PEI交联衍生物。
优选的，所述小分子量PEI的分子量为800Da。
优选的，还包括分离纯化的步骤：将所述小分子量PEI交联衍生物用超纯水溶解后，置于活化后的透析袋中透析；透析结束后，用微孔滤膜过滤，冻干。
优选的，所述透析袋的截留分子量为3500Da。
优选的，所述透析的时间为12～48小时。
优选的，所述微孔滤膜的孔径为0.22～0.45
Figure 744148DEST_PATH_IMAGE002
m。
第三方面，本发明还涉及一种上述的酰胺键交联小分子量PEI交联衍生物在制备用于输送基因物质载体中的用途。
第四方面，本发明还涉及一种复合物，该复合物是采用包括如下步骤的方法制备而得：将上述酰胺键交联小分子量PEI交联衍生物溶液加入到质粒溶液中，混合，室温下孵育，即得。
优选的，所述质粒为DNA质粒。
优选的，所述孵育的时间为30～120min。 
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
（1）本发明制备的含有酰胺键结构的可降解小分子量PEI交联衍生物结构简单、易于合成；（2）本发明制备的含有酰胺键结构的可降解小分子量PEI交联衍生物具有高的转染活性和较小的细胞毒性；（3）本发明制备的含有酰胺键结构的可降解小分子量PEI交联衍生物在不同的细胞中均具有较好的生物活性。
附图说明
图1为酰胺键小分子量PEI交联衍生物的制备方法的合成路线示意图；
图2为实施例2中高分子PEI-Sc与质粒质量比不同时合成的复合物的粒径图；
图3为实施例2中高分子PEI-Sc与质粒质量比不同时合成的复合物的电势图；
图4为实施例2中高分子PEI-Sc与DNA质粒质量比为5时合成的复合物的原子力显微镜图；
图5为实施例2中高分子PEI-Sc与DNA质粒的质量比为5时合成的复合物的透射电镜图；
图6为实施例2中高分子PEI-Sc与质粒质量比不同时合成的复合物的Hep G2细胞转染活性示意图；
图7为实施例2中高分子PEI-Sc与质粒质量比不同时合成的复合物的Hela细胞转染活性示意图；
图8为实施例2中高分子PEI-Sc与质粒质量比不同时合成的复合物的COS-7细胞转染活性示意图；
图9为实施例2中不同浓度的PEI-Sc与PEI 2.5kDa的Hep G2细胞毒性比较示意图；
图10为实施例2中不同浓度的PEI-Sc与PEI 2.5kDa的Hela细胞毒性比较示意图；
图11为实施例2中不同浓度的PEI-Sc与PEI 2.5kDa的COS-7细胞毒性比较示意图。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的试验方法，通常按照常规条件，例如萨姆布鲁克等分子克隆：实验手册第三版（科学出版社，2002）中所述的条件，或者按照各制造商所建议的条件。
实施例1、酰胺键小分子量PEI交联衍生物（高分子PEI-Sc）的制备
图1为酰胺键小分子量PEI交联衍生物的制备方法的合成路线示意图，如图1所示，包括如下步骤：
(a)将小分子量PEI（PEI800）与丁二酰氯按摩尔比为3:2的比例加入三乙胺-氯仿体系中；氯仿和三乙胺分别加入氢化钙后在高纯氮保护下加热回流2小时，收集新鲜馏分备用。用氯仿分别溶解PEI800和丁二酰氯，在无水无氧条件下将二者分别配成3mL和20mL的溶液；
(b)冰浴条件下，取PEI800的氯仿溶液，加入2.5倍过量的三乙胺，将丁二酰氯的氯仿溶液在无水无氧条件下逐滴加入到反应体系中，搅拌反应24小时；反应停止后首先用旋转蒸发仪在减压和降温的条件下把其中的大部分氯仿除去，然后再把得到的粗产物至于真空干燥箱内干燥过夜；
(c)分离纯化，产品用少量超纯水溶解后置于截留分子量为3500Da活化后的透析袋中透析48小时（可以是12～48小时中的任意值），透析结束后，产品用0.22
Figure 461568DEST_PATH_IMAGE002
m（可以是0.22～0.45
Figure 732144DEST_PATH_IMAGE002
m中的任意值）的微孔滤膜过滤，然后分别转移到预先准备好的西林瓶中，产品在-20℃冰箱预冻过夜后用冷冻干燥机冻干，24h后停止冻干，得到产品高分子PEI-Sc。
测定高分子PEI-Sc分子量
测定方法为凝胶渗透色谱（GPC）法，聚乙二醇（PEG）标准品以及实施例制备的PEI-Sc为样品，分别用纯水溶解得到10mg/ml的溶液，摇匀静置，用0.45
Figure 421882DEST_PATH_IMAGE002
m 的微孔滤膜过滤，取续滤液，进样20
Figure 119711DEST_PATH_IMAGE002
l，记录色谱图。
将PEG标准品的重均分子量的对数值lgMw与相应的保留时间（tR）进行线性回归, 得回归方程。PEI-Sc样品通过该回归方程的公式计算分子量和分布： 
Figure 324427DEST_PATH_IMAGE003
 
上式中Mn、Mw分别为数均分子量和重均分子量；D指分布系数；RIi为供试品在保留时间i时的峰高；Mi为供试品在保留时间i时的分子量。
计算得：PEI-Sc的分子量Mn=3831，Mw=5809。
实施例2、高分子PEI-Sc与质粒合成的复合物（Polyplex）的制备
称取定量的高分子（PEI-Sc）聚合物，加超纯水配置成2mg/mL的溶液，然后用0.22
Figure 398694DEST_PATH_IMAGE002
m的无菌滤头过滤，质粒的浓度稀释成1mg/mL；
配置不同质量比的复合物溶液，保持质粒溶液的浓度不变，然后按照不同的高分子（PEI-Sc）与质粒的质量比稀释高分子溶液的浓度，保持稀释后的高分子溶液和质粒溶液的体积相等，最后将高分子溶液快速加入到质粒溶液中混合，室温下孵育30～120min，这样就得到一系列质量比的复合物，可用作进一步的物化性质测定。
高分子PEI-Sc与质粒合成的复合物（Polyplex）粒径测定
复合物粒径的测定的样品量为1.6mL，Luciferase（荧光素酶）质粒和高分子溶液的体积各为800
Figure 5255DEST_PATH_IMAGE002
L，质粒的浓度均为20
Figure 936302DEST_PATH_IMAGE002
g/mL，依据质量比对高分子溶液（原始浓度为2mg/mL）进行稀释，所需测定复合物中高分子（PEI-Sc）与Luciferase质粒的质量比分别为0.1，0.5，1，3，5，7，10，15，20，30。
混合时，将高分子溶液加入质粒溶液中，吹打均匀，室温孵育30min。检测采用Brookhaven Instruments公司的粒径仪，每个样品测定3次，取平均值作图；如图2所示，经检测，Polyplex可形成纳米颗粒用于基因输送。
高分子PEI-Sc与质粒合成的复合物（Polyplex）Zeta电位测定
复合物ζ点位的测定的样品量为1.6mL，Luciferase质粒和高分子溶液的体积各为800
Figure 628315DEST_PATH_IMAGE002
L，质粒的浓度均为20
Figure 258271DEST_PATH_IMAGE002
g/mL，依据质量比对高分子溶液（原始浓度为2mg/mL）进行稀释，所需测定复合物中高分子（PEI-Sc）与Luciferase质粒的质量比分别为0.1，0.5，1，3，5，7，10，15，20，30。
混合时，将高分子溶液加入质粒溶液中，吹打均匀，室温孵育120min，然后检测。检测采用Brookhaven Instruments公司的粒径仪，每个样品测定3次，取平均值作图；如图3所示，实验证明，Polyplex的Zeta电势为正，可包裹带负电荷的DNA。
高分子PEI-Sc与质粒合成的复合物（Polyplex）的原子力显微镜表征
依据测量粒径的结果，选取质量比为5：1的复合物，通过原子力显微镜（Atomic Force Microscope）来观察该复合物的形态。
首先PEI-Sc与荧光素酶质粒配制成复合物溶液，然后用移液枪将约5～10
Figure 719339DEST_PATH_IMAGE002
L的复合物溶液小心翼翼的滴加在新鲜获得的云母片上。云母片置于室温和干燥的环境中晾干。待进行原子力显微镜的测试时，检测在轻敲模式（Tapping Mode）下进行，在500nm比例下捕捉复合物颗粒的图片，如图4所示，Polyplex可形成纳米颗粒。
高分子PEI-Sc与质粒合成的复合物（Polyplex）的透射电镜表征
原子力显微镜的结果可以继续通过透射电子显微镜（Transmission Electron Microscopy）进行验证，复合物溶液依然采用测定原子力显微镜时配置的溶液，用移液枪取5～20
Figure 86867DEST_PATH_IMAGE002
L的复合物溶液小心翼翼的滴加在透射电镜专用铜网上面，之后铜网置于白炽灯下烘干。约30min之后，待所有液体挥发后可以进行透射电镜的检测，如图5所示，其中(a)中分辨率为0.2μm；(b)中分辨率为200nm；由图5可知：Polyplex同样形成纳米颗粒。
高分子PEI-Sc与质粒合成的复合物（Polyplex）的细胞转染实验
在48孔细胞培养板中，加入0.5mL的细胞悬液（Cos7,Hep G2或者Hela），密度是5.0～10×104/mL，培养过夜。48孔板转染时，每孔加入质粒的量是500ng，体积25
Figure 203858DEST_PATH_IMAGE002
L，将聚合物配置成2mg/mL的溶液，并用0.22
Figure 416665DEST_PATH_IMAGE002
m的滤膜无菌过滤，按照设置的待测样品与质粒的质量比，稀释成所需的比例，聚合物溶液的总体积为25
Figure 997819DEST_PATH_IMAGE002
L，然后把聚合物溶液加入到质粒的溶液当中去，快速混匀，孵育80min。这样加入每孔的复合物的体积为50L，为总体积（500L）的十分之一，符合规定。每个质量比做三个复孔。阳性对照组PEI 25kDa和Lipofectamine 2000，以其最佳质粒比2时的结果各做三个对照孔，在孵育的这段时间里，从培养箱中拿出细胞，除去有血清的培养基，再用200
Figure 891454DEST_PATH_IMAGE002
L的PBS溶液洗一遍，培养基换成250
Figure 264798DEST_PATH_IMAGE002
L的无血清的培养基，然后将孵育好的复合物按顺序加入到细胞中去。
4小时后，除去无血清的培养基，每孔加入含10%胎牛血清和1%双抗的理想培养基，再培养48小时，检测其在Hep G2、Hela和Cos-7细胞中的转染结果，分别如图6、7、8所示，结果显示， PEI-Sc在不同细胞中均具有担载基因物质的能力，尤其是在Cos-7和Hela细胞株中基因转染效率超过了阳性对照Lipo和PEI 25KDa。
高分子PEI-Sc的细胞毒性实验
接种细胞（Cos-7,Hep G2,Hela），将细胞消化，稀释成密度为5～10×104/mL的细胞悬液，96孔板中每孔加入100
Figure 974128DEST_PATH_IMAGE002
L，培养过夜。
将2mg/mL的高分子DMEM溶液稀释成不同的浓度梯度，终体积为100
Figure 800132DEST_PATH_IMAGE002
L，阳性对照组PEI 25kDa和PEI 800也稀释为与待测样品组一致的浓度梯度。
取出细胞后，移除有血清的培养基，用100
Figure 614461DEST_PATH_IMAGE002
L的PBS（磷酸盐）缓冲液洗一遍，直接把配制好的高分子DMEM溶液加到各个细胞孔中，阴性对照组中加入100
Figure 904628DEST_PATH_IMAGE002
L无血清无酚红DMEM。4小时之后，除去培养液和高分子溶液，每孔加入100
Figure 722543DEST_PATH_IMAGE002
L的无血清无酚红培养基，避光条件下再加入25
Figure 98161DEST_PATH_IMAGE002
L的MTT溶液（3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐溶液溶液，该溶液用PBS缓冲液配制成5mg/mL），置于细胞培养箱中培养6小时。
显微镜下观察活细胞的结晶情况，如果还没有完全结晶，可适当延长放置时间。如果完全结晶，小心翼翼的倒出96孔板中的液体，然后在每孔中各加入150
Figure 456461DEST_PATH_IMAGE002
L的DMSO(二甲亚砜)，轻微摇晃96孔板使甲臢晶体充分溶解。由于加入DMSO后溶液颜色会随时间变化，因此最好酶标仪的检测在20min内进行，检测波长为490nm，通过样品组的在此波长的吸收值和空白对照组做比值，从而得到细胞的成活率。不同浓度的PEI-Sc与PEI 2.5kDa的Hep G2、Hela和Cos-7细胞的毒性比较图分别如图9、10、11所示，细胞活力测试表明：PEI-Sc的细胞毒性远小于阳性对照PEI25KDa。
综上所述，本发明制备的含有酰胺键结构的可降解小分子量PEI交联衍生物结构简单、易于合成；衍生物具有高的转染活性和较小的细胞毒性；本发明制备的含有酰胺键结构的可降解小分子量PEI交联衍生物在具有较好的生物活性。

Claims (12)

1.一种酰胺键交联小分子量PEI交联衍生物，其特征在于，其结构式为：
Figure 85308DEST_PATH_IMAGE001
，
其中，n为1～20，m为1～20。
2.根据权利要求1所述的酰胺键交联小分子量PEI交联衍生物，其特征在于，所述酰胺键小分子量PEI交联衍生物的基本构建单元为小分子量PEI，所述小分子量PEI的分子量为800Da。
3.一种制备权利要求1所述的酰胺键交联小分子量PEI交联衍生物的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(a)将小分子量PEI与丁二酰氯按摩尔比为3:2的比例加入三乙胺-氯仿体系中；
(b)搅拌、摇动或震荡反应体系，使之发生缩合反应，即得所述小分子量PEI交联衍生物。
4.根据权利要求3所述的酰胺键交联小分子量PEI交联衍生物的制备方法，其特征在于，所述小分子量PEI的分子量为800Da。
5.根据权利要求3或4所述的酰胺键交联小分子量PEI交联衍生物的制备方法，其特征在于，还包括分离纯化的步骤：将所述小分子量PEI交联衍生物用超纯水溶解后，置于活化后的透析袋中透析；透析结束后，用微孔滤膜过滤，冻干。
6.如权利要求5所述的酰胺键交联小分子量PEI交联衍生物的制备方法，其特征是，所述透析袋的截留分子量为3500Da。
7.如权利要求5所述的酰胺键交联小分子量PEI交联衍生物的制备方法，其特征是，所述透析的时间为12～48小时。
8.如权利要求5所述的酰胺键交联小分子量PEI交联衍生物的制备方法，其特征是，所述微孔滤膜的孔径为0.22～0.45m。
9.一种权利要求1所述的酰胺键交联小分子量PEI交联衍生物在制备用于输送基因物质载体中的用途。
10.一种复合物，其特征在于，该复合物是采用包括如下步骤的方法制备而得：将权利要求1所述酰胺键交联小分子量PEI交联衍生物溶液加入到质粒溶液中，混合，室温下孵育，即得。
11.如权利要求10所述的复合物，其特征在于，所述质粒为DNA质粒。
12.如权利要求10所述的复合物，其特征在于，所述孵育的时间为30～120min。
CN 201110327084 2011-10-25 2011-10-25 酰胺键交联小分子量pei衍生物、制备方法、用途及复合物 Expired - Fee Related CN102432877B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN 201110327084 CN102432877B (zh) 2011-10-25 2011-10-25 酰胺键交联小分子量pei衍生物、制备方法、用途及复合物

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN 201110327084 CN102432877B (zh) 2011-10-25 2011-10-25 酰胺键交联小分子量pei衍生物、制备方法、用途及复合物

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102432877A CN102432877A (zh) 2012-05-02
CN102432877B true CN102432877B (zh) 2013-08-07

Family

ID=45981245

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN 201110327084 Expired - Fee Related CN102432877B (zh) 2011-10-25 2011-10-25 酰胺键交联小分子量pei衍生物、制备方法、用途及复合物

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102432877B (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103421846B (zh) * 2012-05-24 2016-06-22 中国科学院上海生命科学研究院 二氨基甲酸酯交联的聚乙烯亚胺在基因治疗中的应用
CN104231265A (zh) * 2013-06-19 2014-12-24 中国医学科学院药物研究所 脂肪烃基接枝的低分子量聚乙烯亚胺、制备方法及应用
JP6873418B2 (ja) * 2016-11-11 2021-05-19 国立大学法人北陸先端科学技術大学院大学 遺伝子導入された細胞の製造方法及びポリエチレンイミンの置換体ポリマー

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1893924A (zh) * 2003-11-19 2007-01-10 表达基因公司 一种新的阳离子脂质聚合物作为生物相容性基因递送剂
CN101812179A (zh) * 2009-07-14 2010-08-25 中国科学院长春应用化学研究所 网状聚-β-氨酯/酰胺接枝聚乙烯亚胺共聚物与制法及在基因传递中的应用
CN101918473A (zh) * 2007-11-07 2010-12-15 犹他大学研究基金会 可还原聚(酰胺乙烯亚胺)的可切割修饰以增强核苷酸递送

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6586524B2 (en) * 2001-07-19 2003-07-01 Expression Genetics, Inc. Cellular targeting poly(ethylene glycol)-grafted polymeric gene carrier

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1893924A (zh) * 2003-11-19 2007-01-10 表达基因公司 一种新的阳离子脂质聚合物作为生物相容性基因递送剂
CN101918473A (zh) * 2007-11-07 2010-12-15 犹他大学研究基金会 可还原聚(酰胺乙烯亚胺)的可切割修饰以增强核苷酸递送
CN101812179A (zh) * 2009-07-14 2010-08-25 中国科学院长春应用化学研究所 网状聚-β-氨酯/酰胺接枝聚乙烯亚胺共聚物与制法及在基因传递中的应用

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Chemically Programmed Polymers for Targeted DNA and siRNA Transfection;Eveline Edith Salcher,et al.;《Topics in current chemistry》;20101231;第296卷;全文 *
Eveline Edith Salcher,et al..Chemically Programmed Polymers for Targeted DNA and siRNA Transfection.《Topics in current chemistry》.2010,第296卷227-249.
M. Laird Forrest,et al..Partial Acetylation of Polyethylenimine Enhances In Vitro Gene Delivery.《Pharmaceutical Research》.2004,第21卷(第2期),365-371.
Partial Acetylation of Polyethylenimine Enhances In Vitro Gene Delivery;M. Laird Forrest,et al.;《Pharmaceutical Research》;20040228;第21卷(第2期);全文 *
吕明.聚乙烯亚胺及其衍生物介导siRNA递送的研究进展.《中国药学杂志》.2011,第46卷(第2期),81-84.
聚乙烯亚胺及其衍生物介导siRNA递送的研究进展;吕明;《中国药学杂志》;20110131;第46卷(第2期);全文 *
赵湘云,等.用于基因传输的聚合物载体研究进展.《中国医药工业杂志》.2007,第38卷(第12期),885-889. *

Also Published As

Publication number Publication date
CN102432877A (zh) 2012-05-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Numata et al. Bioengineered silk protein-based gene delivery systems
CN101035835B (zh) 可生物降解的阳离子聚合物
Raftery et al. Highly versatile cell-penetrating peptide loaded scaffold for efficient and localised gene delivery to multiple cell types: From development to application in tissue engineering
CN103626996B (zh) 胍基化的含二硫键聚氨基胺类聚合物及其制备和应用
Nishida et al. Fabrication of PLLA/HA composite scaffolds modified by DNA
Zhai et al. Guanidinylation: A simple way to fabricate cell penetrating peptide analogue‐modified chitosan vector for enhanced gene delivery
CN106916209B (zh) 一种可作为基因载体的两亲性多肽分子
CN107333755B (zh) 具有g-四链体结构的水凝胶制备方法及其在杀灭金黄色葡萄球菌和大肠杆菌中的应用
Zhang et al. PEI grafted hyperbranched polymers with polyglycerol as a core for gene delivery
CN102432877B (zh) 酰胺键交联小分子量pei衍生物、制备方法、用途及复合物
Hou et al. Self-Assembly and Hydrogelation of Coil–Sheet Poly (l-lysine)-block-poly (l-threonine) Block Copolypeptides
CN103275329B (zh) 一种聚乙二醇修饰的聚乙烯亚胺衍生物及其制备方法
Song et al. Self-assembled PEG–poly (l-valine) hydrogels as promising 3D cell culture scaffolds
CN102504250B (zh) 氨酯键小分子量pei交联衍生物、制备方法、用途及其复合物
CN103214672B (zh) 一种低分子量pei衍生物及制备方法和应用
Mullick et al. Probiotic bacteria cell surface-associated protein mineralized hydroxyapatite incorporated in porous scaffold: in vitro evaluation for bone cell growth and differentiation
Wang et al. Synthesis and evaluation of chitosan-graft-polyethylenimine as a gene vector
CN103243122B (zh) 含可降解亚胺键的核酸物质的载体、其制备方法及应用
CN102250348B (zh) 一种聚乙烯亚胺衍生物及其作为基因传递的载体
CN102443169B (zh) 一种氨酯键交联的聚乙烯亚胺类聚阳离子载体制备工艺
Choi et al. Thermoreversible radial growth of micellar assembly for hydrogel formation using zwitterionic oligopeptide copolymer
Alkan et al. A Cationic Stearamide‐based Solid Lipid Nanoparticle for Delivering Yamanaka Factors: Evaluation of the Transfection Efficiency
CN102382856B (zh) 含可降解亚胺键的聚阳离子基因载体、制备方法和复合物
Zhang et al. Guanidinylated allylamine-N-isopropylacrylamide copolymer nonviral transgene vectors
Tokareva et al. Multifunctional spider silk polymers for gene delivery to human mesenchymal stem cells

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20130807

Termination date: 20151025

EXPY Termination of patent right or utility model