CN102421742A

CN102421742A - 3-戊基苯乙酸的盐及其药物用途

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Publication number: CN102421742A
Application number: CN2010800201405A
Authority: CN
Inventors: B·扎卡里; C·彭尼; L·加农; J-F·比恩韦奴; V·佩龙; B·格鲁伊克斯
Original assignee: Prometic Biosciences Inc
Current assignee: The general Midike Pharmaceutical Co. Ltd. SMT
Priority date: 2009-05-04
Filing date: 2010-05-03
Publication date: 2012-04-18
Anticipated expiration: 2030-05-03
Also published as: HK1169379A1; MX2011011756A; DK2427417T3; KR20120090011A; JP2012526053A; TWI458481B; TW201043226A; BRPI1015118A2; WO2010127448A1; CA2761061A1; US8637574B2; ES2441800T3; CN102421742B; EP2427417A1; JP5844251B2; US20120095102A1; EP2427417B1; PT2427417E; EP2427417A4; PL2427417T3

Abstract

本发明涉及3-戊基苯乙酸的盐及其药物用途。本发明的特别方面涉及这些盐在预防和/或治疗受试者的多种疾病和病症中的用途，包括治疗和预防(i)血液疾病；(ii)肾疾患及肾疾患并发症；(iii)炎性相关疾病；和/或(iv)氧化性应激相关疾患。

Description

3-戊基苯乙酸的盐及其药物用途

发明领域

本发明涉及3-戊基苯乙酸的盐及其药物用途。更加具体地，本发明涉及3-戊基苯乙酸的钠盐、其制备方法、包含其的组合物、以及其在预防或治疗受试者的多种疾病和病症中的用途。

背景技术

血液疾患

血细胞(hema＝血液)指所有类型的血细胞形成、发育和分化的过程。所有的细胞血液组分源自造血干细胞，包括白细胞和红细胞。白细胞(leukocyte)或白细胞(white blood cell)(WBC)是保护身体抵抗传染病和异物两者的免疫系统细胞。红细胞是含有血红蛋白的无核双凹形的碟样细胞，并且这些细胞是氧气运输必不可少的。白细胞数量的减少被称为包细胞减少症，而贫血指血液中红细胞的数目、血红蛋白的量或红细胞的压积减少到低于正常时出现的病症。血液的疾患和几种白细胞减少症和贫血可由多种根本病因产生，所述疾病包括化学治疗(例如化学治疗诱导的贫血)和癌症(例如癌症相关的贫血)。因此，存在对促进血细胞生成并致力于由化学治疗和放射治疗诱导的骨髓抑制的不期望的副作用的新型组合物和方法的需要。

肾脏疾病

肾是已进化成进行许多重要功能的结构复杂的器官，所述功能为：代谢废物的排泄、体内水和盐的调节、合适的酸平衡的维持以及多种激素和内分泌物的分泌。肾的疾病与其结构一样复杂，但通过按照它们对四个基本形态学组成部分：肾小球、小管、间质和血管的作用将它们划分，进而促进了对它们的研究。不幸的是，一些疾患影响多于一种结构，并且肾中的结构解剖学相互依赖性暗示，对一种结构的损伤几乎总是继发地影响其它结构。因此，无论起因在何处，所有形成的肾脏病有最终破坏肾的所有四个组成部分，最终成为慢性肾衰竭的倾向。例如，在诸如糖尿病的自身免疫病中，肾是遭受组织破坏或损伤的第一目标。肾切除术或肾切除是有时对肾癌(例如肾细胞癌)患者进行的处置，其可不利地影响剩余的肾的肾功能。化学治疗和免疫抑制治疗也是对肾有有害作用的来源。因此，存在对可施用于肾脏疾病患者的具有良好安全特征的药物的需要。还存在对可延长肾健康或保护肾免于衰退到肾不能够起作用的程度的药物化合物的需要。

炎症

免疫介导的炎性疾病(IMID)指缺少明确的病因学但由产生炎症的常见炎性途径表征的，并可由正常免疫反应的失调产生或触发的一组病症或疾病中的任一种。自身免疫疾病指其中组织损伤与体液和/或细胞介导的对身体组成部分(body constituent)的免疫反应，或更广泛地说对自身的免疫反应相关的一组疾病或疾患中的任一种。目前对自身免疫疾病的治疗可广泛地分为两组：抑制或阻抑对自身的免疫反应的那些药物，和致力于解决由慢性炎症引起的症状的那些药物。更加详细地说，对自身免疫疾病(例如主要是关节炎)的常规治疗是(1)非甾体抗炎类药(NSAID)，诸如阿司匹林、布洛芬、萘普生、依托度酸和酮洛芬；(2)皮质甾类，例如强的松和地塞米松；(3)改变病情的抗风湿药(DMARD)，诸如甲氨蝶呤、硫唑嘌呤、环磷酰铵、环孢素A、Sandimmune^TM、Neoral^TM和FK506(他克莫司)；(4)生物制品，诸如重组蛋白质Remicade^TM，Enbrel^TM和Humira。尽管许多治疗是可获得的，但常规治疗通常不是有效的。更大的问题是经常阻止慢性疾病所需的长期使用的伴随毒性。因此，对可用于治疗炎性相关疾病，包括慢性和非慢性自身免疫疾病的化合物存在需要。

氧化性应激

氧化性应激是由活性氧的产生和生物系统容易解除反应性中间体的毒性或容易修复产生的损伤的能力之间的不平衡引起的。尽管由于活性氧被用于细胞信号传导，并被免疫系统使用，因此它们可以是有益的，但是它们也参与许多疾病。因此，仍然存在对一种化合物的需要，该化合物可辅助维持活性氧水准的适当平衡从而防止可由这种反应性物质的毒性效应引起的对细胞或其组分的破坏。

本发明解决了对新的治疗方法、化合物和药物组合物的需要。

作为对他们对用于治疗上述疾病的新化学实体的进行中的研究的一部分，本发明的发明人已经发明了3-戊基苯乙酸的盐。本发明不涉及3-戊基苯乙酸的非盐形式，因为这种酸非常难于处理，且因其吸湿性而难于表征。

在本发明之前，本文定义的3-戊基苯乙酸的盐是未知的。使用3-戊基苯乙酸的盐预防和/或治疗(i)血液疾病；(ii)肾疾患及肾疾患并发症；(iii)炎性相关疾病；和/或(iv)氧化性应激相关疾患也是未知的。

按照本发明公开内容的综述、以下本发明的附图和描述，本发明的其他特征也是显而易见的。

发明概述

本发明涉及预防和/或治疗受试者的多种疾病和病症的盐、组合物和治疗方案。

本发明一个特别方面涉及3-戊基苯乙酸的盐及它们在预防和/或治疗(i)血液疾病(例如贫血、中性白细胞减少)；(ii)肾疾患及肾疾患并发症；(iii)炎性相关疾病(例如自身免疫疾病)；和(iv)氧化性应激中的用途。

本发明的另一相关方面涉及由本文定义的任何一个分子式表示的盐用于治疗一种药物和/或用于制备多种药物和药物组合物的用途。一个特定的实例是肾保护性组合物，其包含本文定义的3-戊基苯乙酸的盐和药学可接受的载体。

本发明还涉及预防和/或治疗多种疾病和疾患的方法，所述疾病和疾患包括但不限于：(i)血液疾病(例如贫血、中性白细胞减少)；(ii)肾疾患及肾疾患并发症；(iii)炎性相关疾病(例如自身免疫疾病)；和(iv)氧化性应激。该方法包括向需要的人类患者施用药理学上有效量的本文定义的任何一个分子式表示的盐。该盐可选自由锂盐、钠盐和钾盐组成的组。优选地，该盐是钠盐。

本发明涉及作为针对受试者的多种疾病和疾患的预防有效的和/或治疗有效的药剂的本文定义的盐。

由以下描述，以及申请专利范围和其中的归纳，本发明的进一步方面对本领域技术人员是显而易见的。

附图说明

为了更容易地理解本发明，通过在附图中示例的方式阐述本发明的实施方案。

图1显示的是在对照小鼠和环磷酰胺处理的小鼠中化合物I对总骨髓细胞数的影响的点状图。

图2显示的是对照小鼠和免疫抑制小鼠中化合物I对总骨髓细胞数的影响的点状图。

图3显示的是在大鼠中化合物I对LPS诱导的炎症中PGE2产生的影响的点状图。

图4显示的是在5/6肾切除大鼠中化合物I对GFR(肌酸酐清除率)的影响的柱状图。

图5显示的是在5/6肾切除大鼠中化合物I对经过190天处理时间的GFR提高百分比的影响的线图。

图6显示的是在5/6肾切除大鼠中化合物I对血压的心脏保护性作用的线图。

图7显示的是在小鼠中化合物I对多柔比星诱导的血清蛋白浓度降低的肾保护性作用的线图。

图8显示的是在小鼠中化合物I对多柔比星诱导的血清肌酸酐浓度升高的肾保护性作用的线图。

图9显示的是在小鼠中化合物I对多柔比星诱导的组织学肾(小管)损伤的肾保护性作用的柱状图。

图10显示的在多柔比星诱导的肾毒性模型中对照小鼠和化合物I处理的小鼠组织学显微照片(40×)的图片。

图11显示的是化合物I对多柔比星处理的小鼠中肾中CTGF mRNA表达的影响的放射自显影图的图片。

图12显示的是化合物I对多柔比星处理的小鼠的肾中TGF-βmRNA表达的影响的放射自显影图的图片。

发明详述

A)发明总述

本发明人已经合成了3-戊基苯乙酸的盐。本发明人已经发现3-戊基苯乙酸的盐具有有益的药物性质，和这些盐可有效地用于血细胞的发育、肾保护、炎性疾病和抵抗氧化性应激相关病症。

B)本发明的盐

本发明的盐由下式表示：

其中X⁺是碱加成盐。

碱加成盐是药学上可接受的碱加成盐。

在本文描述的所有实施例中，游离酸(即非盐形式)的3-戌基苯乙酸被明确地排除在本发明的范围之外。

如本文所用，术语”药学上可接受的碱加成盐”意在指保留游离酸的生物有效性和性质，且非生物学不期望的或其它方面不期望的那些盐。通过将无机碱或有机碱与游离酸加成而制备这些盐。源自无机碱的盐包括但不限于钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐、镁盐、铁盐、锌盐、铜盐、锰盐、铝盐等等。源自有机碱的盐包括但不限于以下物质的盐：伯胺、仲胺和叔胺，包括天然存在的取代胺的取代铵，环胺和酸性离子交换树脂，诸如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、2-二乙基氨基乙醇、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、海巴、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、嘌呤、呱嗪、呱啶、N-乙基呱啶、聚胺树脂等等。

本发明的盐的一个实例是钠盐，并由下式表示：

有利地，如下文所述，良好地表征了3-戌基苯乙酸的钠盐(此后的“化合物I”)。该盐是具有明确熔点的白色固体，并且容易处理。此外，该钠盐是不吸湿的，并且具有非常好的水溶性。

药学上可接受的碱盐可由含有酸性部分的母体药剂通过常规化学方法合成。一般说来，这种盐通过将这些药剂的游离酸形式与化学计算量的合适的碱在水或在有机溶剂、或在两者的混合物中反应来制备。可在药剂的最后分离或纯化期间，或通过使纯化的游离酸形式的合成中间体化合物与所需的相应碱单独反应，并分离由此形成的盐，而原位制备盐。药学上可接受的盐的实例描述于，例如Berge等人“Pharmaceutical Salts”，J.Pharm.Sci.66，1-19(1977)。

如果用于合成以上描述的盐的中间体化合物中的任何取代基与本发明的合成方法不相容，则该取代基可用在这些方法中使用的反应条件下稳定的合适的保护基保护。该保护基可在该方法的反应顺序中的合适时间点处除去以提供所需的中间体或目标盐。合适的保护基和使用这种合适的保护基保护和脱保护不同的取代基的方法是本领域技术人员公知的：该保护基和方法的实例可参见T.Greene和P.Wuts，Protecting Groups in ChemicalSynthesis(第3版)，John Wiley & Sons，NY(1999)，其通过引用整体并入本文。在一些实例中，可特别挑选在本发明的方法中使用的反应条件下反应性的取代基。在这些情况下，反应条件将所选的取代基转化成另一取代基，该另一取代基是在本发明的方法中的中间体化合物中有用的，或是盐中所需的取代基。

水合物

此外，本发明的盐还可以水合形式和无水形式存在。本发明的盐包括本文描述的任何一种盐的水合物，本发明的盐可作为单水合物或以多水合物的形式存在。

C)制备方法

本发明人已经发现，改良的Sonogashira偶联反应可用于合成在合成本发明的盐中使用的中间体化合物。一般来说，Sonogashira偶联反应可由以下表示：

其中X是卤素，通常是溴，R₃N是诸如三乙胺的碱，且R¹是碳链。

通常，这一反应需要两种催化剂，即零价钯络合物和铜(I)的碱盐。钯络合物活化有机卤化物，且铜(I)卤化物与末端炔反应，并产生铜(I)乙炔化物，其用作偶联反应的活化物质。反应介质必须是碱性的以中和作为这一偶联反应的副产物产生的卤化氢，因此诸如三乙胺和二乙胺等烷基胺化合物通常被用作溶剂，尽管还可使用DMF或乙醚作为溶剂。

在这一改良的程式中，发明人使用Pd(ll)，并取消使用第二催化剂(铜(I)卤化物)和烷基胺(三乙胺)。该反应一般应用于全卤代取代的苯基烷基羧酸酯。此外，这有利地便于更简单的后处理。因此，发明人的发现被用于合成[3-[戌炔-1-基]苯基]乙酸乙酯，一种用于合成乙酸3-戌基苯基酯的纳盐的中间体。合成方案在例证部分中提供。因此，提供了用于制备3-戌基苯乙酸的纳盐的方法，所述方法包括：

a)在四丁基氟化铵水合物和PdCl₂(PPh₃)₂存在下，加热[3-溴苯基]乙酸乙酯和1-戌炔的混合物以提供[3-[戊炔-1-基]苯基]乙酸乙酯；

b)还原[3-[戌炔-1-基]苯基]乙酸乙酯以提供[3-[戌基-1-基]苯基]乙酸乙酯；以及

c)水解[3-[戊基-1-基]苯基]乙酸乙酯，以制备3-戌基苯乙酸的钠盐。

在一个实例中，所述加热步骤在密对管中进行。在一个实施方案中，该管在80℃下加热2h。

在一个实例中，在作为催化剂的钯碳存在下，使用氢化来还原[3-[戌炔-1-基]苯基]乙酸乙酯。

在一个实例中，该乙酯使用氢氧化锂在包括四氢呋喃、甲醇和水的溶剂混合物中水解。本领域技术人员将容易地了解，该乙酯可使用有机化学领域已知的许多水解技术的任何一种水解。

在一个实例中，中间体游离酸3-戌基苯乙酸使用碳酸氢钠在乙醇/水溶剂混合物中水解。

D)药物应用

如本文之前所示和之后所示例，本发明的盐具有有益的药物性质，且这些盐可具有预防和/或治疗受试者的多种疾病和病症的药物应用。发明人涵盖的医学应用和药物应用包括但不限于致力于血液疾患、肾衰竭、炎性相关疾病和与活性氧相关的疾患的那些医学应用和药物应用。

术牾“受试者”包括其中可发生血液疾患、肾衰竭、炎性相关疾病和/或氧化性应激相关疾患，或易感这种病症的活生物体。术捂“受试者”包括动物，诸如哺乳动物或鸟类。优选地，该受试者是哺乳动物。更优选地，该受试者是人类。更加优选地，该受试者是需要治疗的人类患者。

如本文所用，“预防(preventing)”或“预防(prevention)”意在指至少减少获得疾病或疾患的风险的可能性(或对疾病或疾患易感性)(即，使得疾病的临床症状中的至少一种不在患者中发展，该患者可能暴露于或易感该疾病，但还没有经历或表现出疾病的症状)。鉴别这种患者的生物学和生理学参数在本文中提供，且还为医生所公知。

术语受试者的“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”包括为了延迟、稳定、治愈、愈合、减轻、缓解、改变、补救、延缓恶化、改善、提高或影响疾病或疾患、疾病或疾患的症状或疾病或疾患的风险(或易感性)的目的，向受试者应用或施用本发明的盐(或向来自受试者的细胞或组织应用或施用本发明的盐)。术话“治疗”指治疗或缓解损伤、病理或病症的成功的任何迹象，包括任何客观或主观参数，诸如消除；减轻；降低恶化速率；降低疾病的严重性；症状的稳定、减少或使得损伤、病理或病症更能被受试者忍受；延缓恶化或衰退的速率；使得恶化的终点的虚弱减轻；或改善受试者的身体健康或精神健康。在一些实施例中，术语“治疗”可包括增加受试者的预期寿命和/或在需要额外的治疗(例如透析或肾移植)之前拖延。

血液疾患和血细胞生成

致力于血液疾患属于本发明涵盖的医学应用和药物应用。术话“血液疾患”指红细胞、白细胞和/或血小板的正常生理学、形成、增殖和/或功能的任何改变。因此，在其方面之一中，本发明涉及刺激需要的受试者，优选人类患者的血细胞生成的方法、盐和组合物。

因此，本发明的一个方面涉及本文描述的盐用于刺激受试者的白细胞产生的用途和/或用于抑制受试者的白细胞的减少(即白细胞减少症或白血球减少)的用途。相关方面包括使用这些盐用于刺激受试者的免疫系统，并减少受试者感染的风险。在一些实施例中，白细胞是嗜中性粒细胞，且该疾患是中性白细胞减少。如所知，低白细胞数通常与化学治疗、放射治疗、白血病、骨髓纤维化和再生障凝性贫血相关。此外，许多常见药物可引起白细胞减少症(例如米诺环素(minocyclen)，一种常见的处方抗生素)。因此，本发明遗涉及本文描述的盐用于预防和/或治疗那些特定疾病和病症的用途。

为了评估、评价和/或确认本发明的方法、盐和/或组合物的效力，可确定连续测量。血细胞数、血细胞生成和红细胞生成的定量评价在本领域中是公知的。

通常人类的正常总白细胞数的范围是4 300至10 000/mm³(或mL)，且平均值被认为是7 000/mm³。人类血液的正常中性白细胞数的范围是1 800至7 200/mm³。因此，白细胞减少症指其中血白细胞或白细胞数减少至5000/mm³或更少的病症。在一些实施例中，受试者是具有低于约8000/mm³，或低于约5 000/mm³，或低于约4 000/mm³或低于3 000/mm³的总白细胞数的人类患者。在一些实施方案中，受试者是具有低于约5 000/mm³，或低于约4 000/mm³，或低于3 000/mm³，或低于2 000/mm³，或低于1 000/mm³的嗜中性粒细胞数的人类患者。在一些实施方案中，本发明的方法、化合物或组合物将患者的总白细胞数(和/或嗜中性粒细胞数)有效地增加了至少5 00/mm³，至少1 000/mm³，至少2 000mm³或更多。

本发明的另一方面涉及本文描述的盐用于刺激受试者的红细胞产生(即红细胞生成)的用途和/或用于抑制受试者的红细胞的减少(即贫血)的用途。相关方面包括使用这些盐用于补偿过度的失血(例如出血或慢性通过低容量损失(chronically through low-volume loss》、过度的血细胞破坏(例如溶血)或缺陷性红细胞产生(例如无效的血细胞生成)。相关方面包括使用这些盐用于血细胞分化，包括刺激由红系祖细胞产生红细胞。

发明人特别关注的是致力于解决与在癌症治疗中化学治疗或放射治疗的使用相关的贫血。遗特别关注的是与末期肾脏病相关的贫血，如需要规律的透析或肾移植而生存的患者的病例。因此，本发明的一些方面涉及用于刺激人类的这血系统，例如用于治疗化学治疗和/或放射治疗的骨髓抑制作用和其中刺激造血系统可具有治疗价值的任何其他情况，诸如但不限于贫血的方法、化合物和组合物。本发明的其它方面涉及有效增加人类患者的化学治疗和/或放射治疗的效力的方法。根据本发明的方法、化合物和组合物还可有用地用于增加实现更好的治疗益处所需的化疗组合物的剂量，同时避免增加的副作用。其它方面涉及用于减少或消除人类的化学治疗诱导的贫血的根据本发明的方法、化合物和组合物。

通常在正常成年人中，女性和男性的红细胞数(百万个/mm³)、血红蛋白(g/100mL)和血细胞比容或红细胞压积(mL/100mL)的平均值(海平面处)分别是4.8+/-0.6和5.4+/-0.9、14.0+/-2.0和16.0+/-2.0以及52.0+/-5.0和47.0+/-5.0。贫血指当血液中红细胞的数目、血红蛋白的量或红细胞压积减少到低于正常时出现的病症，其通过确定血细胞比容来表征。在一些实施例中，受试者是具有40和30之间的，或低于约40的血细胞比容的人类患者。在一些实施例中，本发明的方法、化合物或组合物有效地延缓患者的总红细胞数和/或血细胞比容的减少，或有效地维持患者的总红细胞数和/或血细胞比容。在一些实施例中，本发明的方法、化合物或组合物有效地稳定患者的血细胞比容，和/或有效地将血细胞比容增加了多达约5或约10或实现正常值所需的任何值。在一些实施例中，本发明的方法、化合物或组合物有效地减少了输血的需要。

肾保护

在一些方面，本发明涉及预防和/或治疗需要的受试者的肾疾患的方法、盐和组合物。术捂“肾疾患(renal disorder)”、“肾脏病(renal disease)”或“肾脏疾病(kidney disease)”指肾的正常生理学和功能的任何改变。这可能是因为宽范围的急性和慢性病症和事件，包括物理、化学或生物学损伤、剑伤、外伤或疾病，诸如例如肾切除术、化学治疗、高血压、糖尿病、充血性心力衰竭、狼疮、镰状细胞贫血，以及多种炎性疾病、传染病和自身免疫疾病、HIV相关肾病等。这一术捂包括但不限于诸如以下的疾病和病症，诸如肾移植、肾病；慢性肾脏疾病(CKD)；肾小球性肾炎；遗传疾病，诸如多囊性肾脏疾病；肾肥大(一个或两个肾极度肥大)；肾病综合症：肾终末期疾病(ESRD)；急性和慢性肾衰竭；间质病；肾炎；硬化症，由包括例如源自疾病或损伤的炎症的病因引起的组织和/或血管的硬结或硬化；肾纤维化和瘢痕形成；肾相关的增生疾患：以及其它原发性或继发性肾原性病症。也包括肾衰竭和导管置入后与透析相关的纤维化，例如腹膜和血管通路纤维化。

在一些实施例中，本发明更特别地涉及用于肾保护的方法、化合物和组合物。如本文所用，“肾保护”指延迟或停止肾的疾病这展的速率，并因此随之保护肾的过程。在优选的实施方案(例如药物诱导的肾毒性)中，式I的化合物在施用细胞毒性剂或抗炎药或免疫抑制药之前、期间或之后施用。“细胞毒性剂”指杀死高度增生的细胞的药剂，所述细胞例如肿瘤细胞、病毒感染细胞或造血细胞。细胞毒性剂的实例包括但不限于环磷临胺、多柔比星、柔红霉素、长春碱、长春新碱、博来霉素、依讬泊苷、托泊替康、伊立替康、泰索帝、紫杉醇、5-氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、吉西他滨、顺铂、卡铂或苯丁酸氮芥，以及以上化合物的任何一个的激动剂。细胞毒性剂还可以是抗病毒剂：例如AZT(即3’-叠氮-3’-脱氧胸苷)或3TC/拉米夫定(即3-硫胞苷)。这种药物可诱导哺乳动物，包括人类患者的贫血。在一些实施例中，肾保护指向哺乳动物提供针对由用化疗剂治疗哺乳动物引起的毒性效应的保护。例如，式I的化合物可用于保护乳动物，或促进动物从用化疗剂治疗哺乳动物引起的毒性效应恢复。

在一些实施例中，肾疾患(renal disorder)或肾脏疾病(kidney disease)一般可定义为一种或多种“肾病(nephropathy)”。术捂一种或多种“肾病”包括肾的所有临床病理学改变，其可导致肾纤维化和/或肾小球疾病(例如肾小球硬化症、肾小球肾炎)和/或慢性肾功能不全，并可引起肾终末期疾病和/或肾衰竭。本发明的一些方面涉及预防和/或治疗高血压性肾病、糖尿病性肾病和其它类型的肾病，诸如镇痛剂肾病、免疫介导的肾小球病(例如IgA肾病或Berger病、狼疮性肾炎)、缺血性肾病、HIV相关肾病、膜性肾病、肾小球性肾炎、肾小球硬化症、放射这影剂诱导的肾病、中毒性肾病、止痛剂诱导的肾毒性、顺铂肾病、移植肾病和其它形式的肾小球异常或损伤；肾小球毛细血管损伤(小管纤维化)的组合物及其用途。在一些实施方案中，术语一种或多种“肾病”特别指其中在受试者的尿中存在蛋白质(即蛋白尿)和/或存在肾功能不全的疾患或疾病。

本发明还涉及预防和/或治疗肾疾患并发症的方法、盐和组合物。术语“肾疾患并发症”指与肾疾患、肾疾患过程中发生的健康状况、意外情况或负反应相关的继发性疾患，其最重性可能变得更坏。“肾疾患并发症”通常与受困于症状或病理学变化的受试者的渐增的肾脏病最重性相关，所述症状或病理学变化可遍及全身，或影响其它器官系统。如本文所用，术话“肾疾患并发症”包括但不限于血管疾病(例如大血管并发症、微血管并发症等)、心血管疾病(例如动脉硬化、动脉粥样硬化、冠心病、充血性心力衰竭、中风、心绞痛、缺血性心脏病(ischemic heat disease)、心肌梗塞等)、糖尿病性血脂障碍、高脂血症(例如高胆固醇血症、高甘油三酸酯血症、高脂蛋白血症)、代谢综合症、肥胖、贫血、水膻、胰腺炎、骨质脆弱(weak bones)、营样不良(poor nutritional health)和神经损害。

根据一些实施例，本发明涉及预防或治疗肾病的特征方面或迹象的方法、盐和组合物，所述肾病的特征方面或迹象包括肾小球硬化症、肾血管结构的变形和小管间质性疾病。预防肾细胞凋亡、纤维化、硬化症和/或小管区蛋白质的积累属于本发明涵盖的肾病的特征方面。相关方面涉及本文定义的盐和药物组合物用于减少肾细胞中CTGF mRNA表达和/或TGF-βmRNA表达的用途。

在一些实施例中，受试者可能患有诸如例如糖尿病、末期进行性肾脏病和纤维化肾脏病的疾患，和/或本文描述的肾脏病(renal disease)、肾疾患(renal disorder)或肾疾患并发症中的任何一种。在一些实施方案中，受试者是具有或倾向于具有肾小球滤过问题和/或肾衰竭的人类患者。在一些实施方案中，受试者是在进行或已经接受化学治疗或放射治疗的治疗的人类患者。因此，相关方面涉及使用本文定义的盐或药物组合物用于保护肾免受化疗剂的影响，所述化疗剂包括但不限于多柔比星、柔红霉素、长春碱、长春新碱、博来霉素、紫杉醇、5-氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、吉西他滨、顺铂、卡铂和苯丁酸氮芥。本发明的方法可包括向需要的受试者，例如人类患者施用预防或治疗有效量的本文定义的盐或药物组合物。

为了评估、评价和/或确认本发明的方法、盐和/或组合物的效力，可确定连续测量。肾功能的定量评价和肾功能不全的参数在本领域中是公知的，并可参见例如Levey(Am J Kidney Dis.1993，22(1)：207-214)。确定肾功能/功能不全的测定的实例是：血清肌酸酐水平；肌酸酐清除率；抑半胱氨酸蛋白酶蛋白C清除率；24小时尿肌酸酐清除率；24小时尿蛋白分泌：肾小球滤过速率(GFR)：尿白蛋白肌酸酐比(ACR)；白蛋白排泄率(AER)：和肾活组织检查。

在一些实施例中，受试者处于肾病的风险，或已经被诊断为肾病。通常，人类的正常肾小球滤过速率(GFR)是从约100至约140ml/min。在一些实施方案中，受试者是具有末期肾病的人类患者(即低于75ml/min的GFR)。在一些实施例中，受试者是具有ESRD的人类患者(即低于10ml/min的GFR)。在一些实施例中，本发明的方法、盐或组合物有效地将患者的GFR值增加了至少1、5、10、15、20或25ml/min或更多。

在一些实施方案中，受试者处于肾病的风险，或已经被诊断为肾病。在不同的实施方案中，受试者是具有或正发展为I期肾脏疾病、II期肾脏疾病、III期肾脏疾病、IV期肾脏疾病或V期肾脏疾病的人类患者。在一些实施例中，本发明的方法、盐或组合物有效地稳定或改善患者的肾脏疾病(例如从V期至IV期，或从IV期至III期，或从III期至II期，或从II期至I期)。

肾病的首要临床指症之一是存在白蛋白尿(albuminuria)或蛋白尿。其指当尿中白蛋白的量低于或等于＜300mg/天时的微白蛋白尿和当尿中的蛋白质绝量大于1g/天时的蛋白尿。在一些实施例中，受试者处于蛋白尿的风险，或已经被诊断为蛋白尿。在一些实施例中，受试者是在其尿中产生小于约300mg/天的蛋白质的人类患者。在一些实施方案中，受试者是在其尿中产生大于约1g/天的蛋白质的人类患者。在一些实施例中，受试者是具有微白蛋白尿的人类患者。在一些实施方案中，受冶疗者是尿中白蛋白量超过200μg/min的人类患者。在一些实施方案中，本发明的方法、盐或组合物有效地将患者的白蛋白尿降低了至少10、25、50、75、100、150、200μg/min或更多。

本发明的方法、盐和组合物的效力可通过副作用的减少来评价。例如通过与治疗前功能相比的肾功能的改善可确定这种减少。这种治疗可明显地延缓肾衰竭(包括透析或移植)的发作，或明显地降低肾功能的衰退速率，其如例如通过蛋白尿增加速率的降低或血清肌酸酐升高速率的降低，或通过肌酸酐清除率或GFR的参数的回落或住院率或死亡率的降低所确定。在一些实施例中，该盐是3-戊基苯乙酸的钠盐。

在一个实施例中，本发明的盐与目前被用于或开发用于预防或治疗诸如肾病的肾疾患或相关疾患或并发症的至少一种其它已知化合物组合使用。这种已知化合物的实例包括但不限于：ACE抑制剂药物(例如卡托普利(Capoten

)、依那普利(lnnovace

)、福辛普利(Staril)、赖诺普利(Zestril

)、培哚普利(Coversyl

)、喹那普利(Accupro

)、群多普利(trandanalopriI)(Gopten)、洛汀新、莫昔普利、雷米普利)；RAS阻断剂：血管紧张素受体阻断剂(ARB)(例如奥美沙坦、厄贝沙坦、氯沙坦、缬沙坦、坎地沙坦、依普罗沙坦、替米沙坦等等)；蛋白激酶C(PKC)抑制剂(例如鲁伯斯塔(ruboxistaurin))；AGE依赖性途径抑制剂(例如氨基胍、ALT-946、吡多胺(pyrodoxamine)(pyrododorin)、OPB-9295、alagebrium)；抗炎剂(例如环氧合酶(cyclooxigenase)-2抑制剂、微酚酸酯(mycophenolate mophetil)、咪唑立宾、己酮可可碱)、GAG(例如舒洛地希(美国专利第5,496,807号))；吡多胺(美国专利第7,030,146号)；内皮缩血管肽拮抗剂(例如SPP 301)、COX-2抑制剂、如氨磷汀的PPAR-γ拮抗剂和其它化合物(用于顺铂肾病)、卡托普利(用于糖尿病性肾病)、环磷酸胺(用于特发性膜性肾病)、硫代硫酸钠(用于顺铂肾病)、曲尼司特等等。

炎症

本发明的另一方面涉及本发明的盐用于预防和/或治疗炎性相关疾病的用途。术语“炎性相关疾病”指与炎症相关的任何的和所有的异常，包括慢性和急性炎性疾病，包括但不限于免疫介导的炎性疾病(IMID)和自身免疫疾病、关节炎、ITP、肾小球性肾炎、血管炎、银屑病关节炎、全身性红斑狼疮(SLE)、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、银屑病、克罗恩病、炎性肠病、强直性脊柱炎、舍葛兰氏综合症、斯提耳氏病(巨噬细胞活化综合症)、葡萄膜炎、硬皮病、肌炎、赖特尔综合症和韦格纳氏综合症。一般来说，预防和治疗用途包括向需要的受试者，优选人类患者施用本文描述的化合物。本发明的盐可与任何常规治疗一起施用，所述常规治疗更加具体地包括本文前述背景部分中定义的当前治疗。为了评估、评价和/或确认本发明的方法、盐和/或组合物的效力，可确定连续测量。评价炎症的定量方法和技术在本领域中是公知的，且包括，例如与实施例中提供的方法类似的方法。

此外或可选地，本发明的盐可抑制包括但不限于PGE2的前到腺素类的产生，并因此可用于减少发烧、疼痛、僵硬和肿胀。

氧化性应激

本发明的另一方面涉及用于预防和/或治疗氧化性应激相关疾患的方法、盐和组合物。术语“氧化性应激相关疾患”指其中具有活性氧的产生和生物系统容易地解除反应性中间体的毒性或容易地修复产生的损伤的能力之间的不平衡的任何疾病。这种疾病的实例包括但不限于心血管疾病、癌症、糖尿病、关节炎、动脉粥样硬化、帕金森病、心力衰竭、心肌梗塞、阿耳茨海默病、慢性疲劳综合症和自身免疫疾病。

一般来说，预防和治疗用途包括向需要的受试者，优选人类患者施用本文描述的盐。在一些实施例中，受试者处于本文此前定义的氧化性应激相关疾患的风险，或已被诊断为患有本文此前定义的氧化性应激相关疾患。

本发明的相关方面涉及用于维持活性氧(且更加具体地为氧化氮(NO))的水平的适当平衡，从而防止对细胞或其组分的破坏的方法、盐和组合物。其它相关方面涉及用于防止可由反应性物质，且更加具体地由NO引起的对细胞或其组分(包括但不限于蛋白质、脂质和DNA)的破坏的方法、盐和组合物。另外，本发明的进一步方面涉及根据本发明的方法、盐和组合物用于抑制NO产生和/或用于抑制酶氧化氮合酶的用途。这些方法包括使细胞、组分或酶与本文定义的盐和/或组合物接触。用于评价活性氧水平的体外和体内定量方法和技术在本领域中是公知的。

一般来就，预防和治疗用途包括向需要的受试者，优选人类患者施用本文描述的盐。本发明的盐可与多种抗氧化剂一起施用，所述抗氧化剂包括但不限于金属螯合剂/清除剂(例如去铁草酰胺[Desferal]，一种能够清除Fe³⁺和其它金属离子的低分子量化合物)：^·O₂ ^-(超氧化物)、^·OH(氢氧基)或NO(氧化氮)自由基的低分子量清除剂(例如乙酰水杨酸，^·O₂ ^-的清除剂；甘露醇或卡托普利，^·OH的清除剂；精氨酸衍生物，产生NO的氧化氮合酶的抑制剂)；和可有助于抵抗活性氧的保护性作用的蛋白质或其片段(例如破坏^·O₂ ^-的超氧化物歧化酶：捕获NO的血红蛋白、可消除过氧化氢的过氧化氢酶或谷胱甘肽过氧化物酶)。

E)药物组合物及制剂

本发明的相关方面涉及包含本文描述的本发明的盐的药物组合物。如本文此前所述，本发明的盐可用于：(i)预防和/或治疗血液疾患(例如通过刺激血细胞生成)；预防和/或治疗肾疾患、肾病和/或肾疾患并发症；(iii)预防和/或治疗炎性相关疾病(例如自身免疫疾病)：和/或(iv)预防和/或治疗氧化性应激相关疾患。

如本文所用，术语“治疗有效量”指当施用于受试者用于治疗或预防特定疾患、疾病或病症时，足以实现该疾患、疾病或病症的这种治疗或预防的盐的量。例如，剂量和治疗有效量可依据多种因素变化，所述因素包括所用的具体药剂的活性，受试者的年龄、体重、一般健康、性别和饮食，施用时间、施用途径、排泄率和任何药物组合，适当时，医生期望该盐对受试者的影响和盐的性质(例如生物利用度、稳定性、效力、毒性等)，以及受试者患有的具体疾患。此外，治疗有效量可依赖于受试者的血液参数(例如血脂特征、胰岛素水率、血糖)、疾病状态的严重性、器官功能，或潜在疾病或并发症。可使用任何可用的测定，包括本文描述的测定确定该合适的剂量。当本发明的一种或多种盐将被施用于人类时，医生可例如首先开出相对低剂量的处方，随后增加剂量，直到获得合适的反应。

如本文所用，术语“药物组合物”指存在本文定义的本发明的盐和至少一种药学上可接受的媒介物。本发明的盐的实例是3-戌基苯乙酸的钠盐。

“药学上可接受的媒介物”指与盐一起施用的稀释剂、佐剂、赋形剂或载体。术语“药学上可接受的”指适合于与人类和低等动物的组织接触使用，且没有不适当的毒性、不兼容性、不稳定性、刺激、变态反应等等，相应具有合理的效益/风险比的药物、药品、惰性成分等。其优选地指美国联邦政府或州政府的管理机构批准的或能批准的，或美国药典或其它普遍认可的药典中所列的，在动物且特别在人类中使用的盐或组合物。药学上可接受的媒介物可以是溶剂或分散介质，含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液态聚乙二醇)、其合适的混合物和植物油。药学上可接受的媒介物的其它实例包括但不限于：注射用水USP；水媒介物，诸如但不限于氯化钠注射液、格林注射液、葡萄糖注射液、葡萄糖和氯化钠注射液和乳酸化的格林注射液；水可混溶的媒介物，诸如但不限于乙醇、聚乙二醇和聚丙二醇；和非水媒介物，诸如但不限于玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、油酸乙酯、十四烷酸异丙酯和苯甲酸苄酯。微生物作用的预防可通过加入多种抗菌剂和抗真菌剂来实现，所述抗菌剂和抗真菌剂例如对羟苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、抗坏血酸、硫柳汞等等。在许多情况下，组合物包含等渗剂，例如糖、氯化钠或多元醇，诸如甘露醇和山梨醇。通过在注射组合物中包含延迟吸收的剂，例如单硬脂酸铝或明胶，可使得组合物的吸收延长。

在一个实施方案中，通过将3-戌基苯乙酸的钠盐与药学上可接受的媒介物混合，可制备本发明的组合物。

在一些实施例中，本发明的组合物包含有效量的3-戌基苯乙酸的钠盐。

在一些实施例中，本发明涉及用于预防和/或治疗血液疾患的包含本文定义的3-戌基苯乙酸的钠盐的药物组合物。

在一些实施例中，本发明涉及用于预防和/或治疗肾疾患、肾病和/或肾疾患并发症的药物组合物，所述组合物包含本文定义的3-戌基苯乙酸的钠盐。

在一些实施例中，本发明涉及用于预防和/或治疗炎性相关疾病的药物组合物，所述组合物包含本文定义的3-戌基苯乙酸的纳盐。

在一些实施方案中，本发明涉及用于预防和/或治疗氧化性应激相关疾患的药物组合物，所述组合物包含本文定义的3-戌基苯乙酸的钠盐。

施用前，使用可用的技术和程序，可将发发明的盐配制成药物组合物。例如，药物组合物可被配制成合适的(口服、肠胃外(静脉内(IV)、动脉内(IA)、肌肉(IM)、depo-式肌肉(depo-IM)、皮下(SC)和depo-皮下(depo SC))、舌下、鼻内(吸入)、鞘内、局部或直肠)。

优选地，本发明的盐可以被口服施用。制剂可以单位剂量形式方便地提供，且可通过药剂学领域中已知的任何方法制备。制备这些制剂或组合物的方法包括使本发明的盐与药学上可接受的媒介物(例如惰性稀释剂或可同化的可食载体)和任选地一种或多种配合剂结合的步骤。一般来说，通过使本发明的盐与液体载体或精细分开的固体载体或两者均匀地和紧密地结合，然后必要时使该产品成形，来制备制剂。这种治疗上有用的组合物中治疗剂的量是获得合适的剂量的量。

适合于口服施用的本发明的制剂可以是以下形式：胶囊(例如硬壳或软壳明胶胶囊)、扁囊剂、丸剂、片剂、锭剂、粉剂、粒剂、小丸、糖锭，例如为包衣(例如肠溶衣的)或未包衣的，或为在水性液体或非水液体中的溶液或悬浮液，或为水包油或油包水液体乳剂，或药酊剂或糖聚剂，或为软锭剂或为漱口水等等，其各自含有预定量的作为活性成分的本发明的盐。本发明的盐还可作为大丸剂、药糖剂或糊剂施用，或直接掺入受试者的饮食。此外，在某些实施方案中，可配制这些小丸以(a)提供暂能或快速的药物释放(即在其上无包衣)：(b)被包衣，例如以提供经一定时间的持续药物释放；(c)为了更好的胃肠耐受性而用肠溶衣包衣。包衣可通通常规方法，通常用pH或时间依赖性包衣完成，以致本发明的盐在期望的位置附近或不同的时间释放以扩大期望的作用。这种剂型通常包括但不限于醋酸邻苯二甲酸纤维素、聚醋酸乙烯邻苯二甲酸酯、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、蜡和虫胶中的一种或多种。

在用于口服施用的固体剂型中，本发明的盐可与一种或多种学上可接受的载体(诸如柠檬酸钠或磷酸二钙)或与以下的任何物质混合：填充剂或增稠剂，诸如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇或硅酸：粘合剂，诸如例如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖或阿拉伯明胶；湿润剂，诸如甘油；崩解剂，诸如琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；溶液阻滞剂，诸如石蜡：吸收促进剂，诸如季铵化合物；润湿剂，诸如例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；吸收剂，诸如高岭土和膨润土黏土：润滑剂，诸如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固态聚乙二醇、十二烷基硫酸钠及其混合物；和着色剂。在胶囊、片剂和丸剂的实例中，药物组合物还可包含缓冲剂。相似类型的固体组合物也可用作软填充和硬填充明胶胶囊中的填充剂，使用诸如乳糖或奶糖以及高分子量的聚乙二醇等等的赋形剂。

口服组合物通常包括液态溶液、乳剂、悬浮液等等。适合于这种组合物的制备的药学上可接受的媒介物在本领域中是公知的。糖浆剂、酊剂、乳剂和悬浮液的载体的典型组分包括乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇、液态蔗糖、山梨醇和水。对于悬浮液，典型的悬浮剂包括甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、黄明胶和海藻酸钠：典型的润湿剂包括卵磷脂和聚山梨醇酯80；且典型的防腐剂包括对羟基苯甲酸甲酯和苯甲酸钠。口服液态组合物还可含有一种或多种组分，诸如以上公开的增甜剂、调味剂和着色剂。

适合于注射使用的药物组合物可包括无菌水溶液(如果是水溶的)或分散体，和临时制备无菌可注射溶液或分散体的无菌粉末。在所有的情况下，组合物必须是无菌的，且必须是以存在容易的可注射性(syringability)的程度流动。其在制备和储存条件下必须是稳定的，且必须免受诸如细菌和真菌等微生物的污染作用的影响。可通过将所需量的治疗剂与以上列举的成分之一或组合一起掺入合适的溶剂，必要时接着过滤灭菌来制备无菌注射溶液。一般来说，通过将治疗剂掺入含有基础分散介质和来自以上所列的那些的所需其它成分的无菌媒介物来制备分散体。在用于制备无菌注射溶液的无菌粉末的情形中，制备方法是真空干燥和冷冻干燥，这产生活性成分(即治疗剂)的粉末加来自其先前无菌过滤溶液的任何其它所需成分。

还提供了适合作为气溶胶通过吸入施用的药物制剂。这些制剂包括本文描述的盐的溶液或悬浮液，或这种盐的许多固体颗粒。可将所需的制剂置于小室中，并雾化。可通过压缩空气，或通过超声以形成包含药剂或盐的许多液滴或固体颗粒来实现雾化。液滴或固体颗粒应具有约0.5微米至约5微米的粒径范围。通过以本领域已知的任何合适方式，诸如通过微粉化处理本文描述的任何形式的固体药剂或其盐，可获得固体颗粒。固体颗粒或液滴的大小将是，例如1微米至约2微米。在这方面，商业雾化器可用于实现这一目的。适合于作为气溶胶施用的药物制剂可以是液体形式，该制剂将包含在包括水的载体中的本文描述的盐。可存在表面活性剂，其降低制剂的表面张力，足以使得当进行雾化时，在所需大小范围内形成液滴。

本发明的组合物还可(例如)通过将组合物直接敷于或铺展到受试者的表皮组织或上皮组织或经“贴片”透皮地局部施用于受试者。这种组合物包括，例如洗液、乳膏、溶液、凝胶和固体。这些局部组合物可包含有效量的，通常是至少约0.1％的，或甚至是约1％至约5％的本发明的盐。用于局部施用的合适载体通常在皮肤上就地作为连续薄膜保留，且直至通过流汗或在水中浸泡而除去。一般来说，载体的性质是有机的，且载体能够在其中分散或溶解治疗剂。载体可包括药学上可接受的润肤剂、乳化剂、增稠剂、溶剂等等。

用于实现所述药剂的全身递送的其它组合物包括舌下剂型、类面剂型和鼻剂型。这种组合物通常包含以下的一种或多种：可溶填充剂物质，诸如蔗糖、山梨醇和甘露醇；和黏合剂，诸如阿拉伯明胶、微晶纤维素、羧甲基纤维素和羟丙基甲基纤维素。还可包含本文公开的助流剂、润滑剂、增甜剂、着色剂、抗氧化剂和调味剂。

还可肠胃外、腹膜内、脊椎内或大脑内施用本发明的盐。对于这种组合物，可在甘油、液态聚乙二醇及其混合物和在油中配制本发明的盐。在储存和使用的普通条件下，这些制剂可含有防腐剂以防止微生物的生长。

本发明的治疗方法还可施用包括本发明的盐与用于预防和/或治疗(i)血液疾患：(ii)肾疾患和/或肾疾患并发症；(iii)炎性相关疾病：和/或(iv)氧化性应激相关疾患的另一治疗有效药剂共同使用。因此，本发明的其它方面涉及对受试者的同时治疗性治疗的方法，所述方法包括向需要的受试者施用有效量的第一药剂和第二药剂，其中所述第一药剂为本发明的盐，且第二药剂用于预防或治疗本文上述的(i)至(V)的疾患或疾病中的任何一种。如本文所用，如在短语“同时的治疗性治疗”或“与...同时地”中的术话“同时的”或“同时地”包括在第二药剂存在下施用第一药剂。同时治疗性治疗方法包括其中共同施用第一药剂、第二药剂、第三药剂或其它药剂的方法。同时治疗性治疗方法还包括其中在第二药剂或其它药剂存在下施用第一药剂或其它药剂的方法，其中所述第二药剂或其它药剂例如，可先前已经被施用。同时治疗性治疗方法可由不同的执行者逐步执行。例如，一个执行者可向受试者施用第一药剂，且第二轨行者可向受试者施用第二药剂，且施用步骤可同时、或接近同时或在不同时间执行，只要第一药剂(和/或其它药剂)在第二药剂(和/或其它蔡剂)存在时施用。执行者和受试者可以是相同的实体(例如人类)。

因此，本发明遗涉及用于预防、减少或消除上述疾病或病症中的任何一种的症状或并发症。该方法包括向需要的受试者施用包含本发明的盐的第一药物组合物和包含一种或多种其它活性成分的第二药物组合物，其中所有活性成分以足以抑制、减少或消除所治疗的疾病或病症的一种或多种症状或并发症的量施用。在一个方面中，以至少约2分钟的时间间隔施用第一和第二药物组合物。优选地，所述盐是本文定义的3-戌基苯乙酸的钠盐。第二药剂可选自本文以上给出的化合物的列表。

F)试剂盒

本发明的盐可包装为试剂盒的一部分，该试剂盒任选地包含容器(例如包装袋、盒子、小瓶等)。试剂盒可根据本文描述的方法在商业上使用，并且可包含在本发明的方法中使用的说明书。任何或所有的试剂盒组成任选地这一步包含缓冲剂。

本发明的盐可以同时或通过相同的施用途径施用于患者或可以不同时或通过相同的施用途径施用于患者。因此，本发明的方法包括当被从业医生使用时，可简化向患者施用合适量的两种或更多种活性成分的试剂盒。

本发明的典型试剂盒包含单位剂量形式的本文定义的盐和单位剂量形式的至少一种其它活性成分。可与根据本发明的盐联合使用的其它活性成分的实例包括但不限于可与本文以上所示的本发明的盐组合使用的化合物中的任何一种。

本发明的试剂盒还可包含用于施用活性成分的装置。这种装置的实施例包括但不限于注射器、滴注包、贴片、吸入器、灌肠器和用于施用栓剂制剂的分配器。

本发明的试剂盒还可包含可用于施用一种或多种活性成分的药学上可接受的媒介物。例如，如果提供必须重新构建用于肠胃外施用的固体形式的活性成分，则该试剂盒可包含其中可溶解活性成分以形成通合于肠胃外施用的无颗粒无菌溶液的合适媒介物的密封容器。上文中提供了药学上可接受的媒介物的实例。

本文包括标题用于参照，并辅助定位某些部分。这些标题不意为限制其中描述的概念的范围，且这些概念可适用于整个说明书的其它部分。因此，本发明不意为被限定于本文所示的实施例，而是与符合本文公开的原理和新颖特征的最宽泛的范围一致。

单数形式“一个(a)”、“一种(an)”和“所述(the)”包括复数涵义，除非上下文清楚地另外说明。

除非另有申明，否则说明书和申请专利范围中使用的表示成分的量、反应条件、浓度，性质质等等的所有数位在所有情况下均被理解为由术语“约”修饰。最少，每个数位参数至少应该依照报道的有效数字的数目并通过应用普通的约数方法解释。因此，除非相反地指出，否则本说明书和所附申请专利范围中所列的数字参数是可依据试图被获得的性质而变化的近似值。尽管列举实施例的宽范围的数字范围和参数是近似值，但在具体实施例中列举的数值被尽可能精确地报告。然而，任何数值固有地含有由实验、试验测量、统计分析等等的变化引起的某些误差。

应理解本文描述的实施例和实施方案仅为示例目的，且依据其的多种改良或变化将被建议给本领域技术人员，并且被包括在本发明和所附的申请专利范围的范围内。

实施例

本文以下所列的实施例提供了制备3-戊基苯乙酸的钠盐的示例性方法。还提供了用于测定本发明的3-戌基苯乙酸的钠盐的体外和体内效力的示例性方法。

实施例1：3-戌基苯乙酸的钠盐(此后为化合物I)的制备的详细实验程序仪器：

所有HPLC色谱图和质谱在使用分析C18柱((250x4.6mm，5微米)的HP 1100 LC-MS Agilent仪器上记录，以含0.01％TFA的15-99％CH₃CN-H₂O作为洗脱液、梯度洗脱5分钟，流速2mL/min。

化合物I：以Sonogashira程序合成

步骤1：

室温下，将浓硫酸(1mL)加入到3-溴苯基乙酸(5.02g，23.33mmol)的乙醇(100mL)溶液/悬浮液中。然后，在80℃下将无色固体搅拌过夜。将溶液减压浓缩。残留物用乙酸乙酯(25mL)、水(25mL)稀释，并将两层分离。水层用2x乙酸乙酯(25mL)和盐水(20mL)萃取。合并有机层用2xNaHCO₃饱和溶液(25mL)、盐水(25mL)洗涤，用硫酸钠干燥。过滤后，将溶液蒸发至干。得淡黄色油状物(5.4g，95％)。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ1.26(t，J＝4.7Hz，3H)，3.57(s，2H)，4.15(Q，J＝7.0和14.3Hz，2H)，7.17-7.26(m，2H)，7.38-7.44(m，IH)，7.44(d，J＝1.56Hz，1H).

步骤2：

在密封管中，用PdCl₂(PPh₃)₂(26mg，0.037mmol；3mole％)和1-戌炔(367μL，3.72mmol)处理(3-溴苯基)乙酸乙酯(0.39，1.24mmol)和四丁基氟化铵水合物(0.97 9，3.72mmol)的混合物。将该管在80℃下加热2H。混合物用水处理，并用乙醚萃取。有机萃取物用硫酸钠干燥，过滤并真空蒸发以获得粗产物。在BiotageTM 25M柱(硅石)上纯化，用乙酸乙酯/己烷0∶1至2∶98洗脱，获得淡黄色油状(3-(戌炔-1-基)苯基)乙酸乙酯(0.23g，79％)。

步骤3：

氮气保护下，将在乙醇(5mL)中钯碳(10％，25mg，10％W/W)加入到[3-[戌炔-1-基]苯基]-乙酸乙酯(0.23 9，0.98mmol)中。室温下，将混合物在氮气保护下剧烈搅拌过夜。将溶液过滤，并用乙醇(20mL)洗涤钯/碳。滤液用硅胶浓缩。粗产物通过快速色谱使用10％己烷/乙酸乙酯混合物纯化。获得澄清油状物(0.21g，90％)。

步骤4：

0℃下，在四氢呋喃(5mL)、甲醇(1.5mL)和水(1.5mL)混合液中，将氢氧化锂(0.09g，3.6mmol)加入到酯(0.2g，0.9mmol)中。反应混合物在室温下搅拌过夜。过滤不溶物质，并减压浓缩滤液。然后，用2M HCl处理残留物，并用乙酸乙酯萃取。有机相用硫酸钠干燥，并减压蒸发。粗物质在40L Biotage柱(硅石)上，使用乙酸乙酯/己烷(0∶10至4∶6)作为洗脱液纯化。获得白色黏性固体的纯的(3-戌基苯基)乙酸(0.19g，99％)。¹HNMR(400MHz，CD₃OD)：δ0.90(t，J＝7.0Hz，3H)，1.28-1.38(m，4H)，1.61(qt，J＝7.6Hz，15.0Hz，2H)，2.58(t，J＝7.6Hz，2H)，3.56(s，2H)，7.07(m，3H)，7.20(m，1H)；LRMS(ESI)：m/z 207(MH⁺)；HPLC：4.3min。

步骤5：

在乙醇(4mL)和水(1mL)的溶液中，搅拌下将碳酸氢钠(0.07g，0.82mmol)加入到酸(0.19g，0.82mmol)中。反应混合物在室温下搅拌过夜。将溶剂蒸发，将白色黏性固体溶解于水中，并将溶液冻干。获得白色固体的纯的(3-戌基苯基)乙酸的钠盐(0.17g，92％)。mp 110-112℃；¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：60.89(t，J＝6.8Hz，3H)，1.28-1.37(m，4H)，1.60(qt，J＝7.4Hz，15.0Hz，2H)，2.56(t，J＝7.6Hz，2H)，3.43(s，2H)，6.96(m，IH)，7.12(m，3H)；LRMS(ESI)：m/z 207(MH+)；HPLC：4.3min.

实施例2：化学保护研究

6至8周龄雌性C57BL/6小鼠通过在第0天静脉内施用200mg/kg环磷临胺处理，进行免疫抑制。为了检查化合物I的免疫保护效应，对小鼠在第-3、-2和-1天用化合物I口服进行预处理。小鼠在第+5天通过心脏穿刺和颈脱位法处死。然后，观察、记录股骨(作为骨髓细胞源)的总病理学。处死后，将组织在PBS缓冲液中粉碎，并且在血细胞计数器上对细胞进行计数。

在环磷酰胺处理的小鼠中观察到用化合物I口服预应理显著增加了总骨髓细胞数(第1图)。此外在环磷酰胺免疫抑制的小鼠中观察到用化合物I口服预处理增加了骨髓白细胞数(第2图)。

此外在环磷临胺免疫抑制的小鼠中观察到用化合物I口服预处理增加了骨髓红细胞数(表1)。此外，化合物I增加循环红细胞。

表1.化合物I对骨髓红细胞数和红细胞的影响

	骨髓红细胞数(10⁶)	红细胞(10⁹)
			对照	20.3	7.1
环磷酰胺	8.1	5.7
			化合物I	11.5	7.0

实施例3：化合物I对炎症的气囊模型的影响

认为在大鼠气囊模型中，LPS诱导的炎症模拟在诸如关节炎等关节疾病中出现的病理学过程。这是因为沿着气囊形成的结缔组织与慢性关节疾病中发现的那些相似。LPS诱导的炎症与慢性关节疾病共有其它特征，包括显著升高的PGE₂、中性白细胞浸润、细胞因数形成和组织损伤。

在第-6天，通过将20ml无菌空气皮下注入雄性Lewis大鼠(175-200g)背部的肩胛内区域，而产生气腔。在第-3天，将另外的10ml空气注入腔内以保持空间张开。在第0天，静脉内施用化合物I，监在1小时后将脂多糖(LPS：2.5ml，2μg/ml于PBS中)注入囊中以产生炎性反应。LPS处理后两小时，通过CO₂窒息处死动物，并将5ml PBS/肝素(10U/ml)/吲哚美辛(36μg/ml)注入囊中。收集囊液，并通过ELISA确定囊渗出液中的PGE₂。

如第3图所示，在施用LPS后两小时，口服施用化合物I诱导显著的PGE2的抑制。通过化合物I实现的抑制与从阳性对照吲哚美辛获得的抑制相似。

实施例4：化合物I对RAW264.7细胞上氧化氮产生的影响

氧化性应激和炎症涉及几种慢性疾病。由氧化氮合酶产生的氧化氮(NO)被鉴别为涉及炎症和败血症的重要分子。可诱导的氧化氮合酶(iNOS)在正常条件下不表达。然而，在暴露于内源和外源刺激物后，其可在多种细胞(诸如巨噬细胞、平滑肌细胞和肝细胞)中被诱导以出发几种不利的细胞反应，诸如炎症。因此，iNOS的水平可反映炎症的程度，从而允许评价药物对炎性过程的作用。

在RAW264.7(巨噬细胞样)细胞中进行化合物I对NO产生的影响。在化合物存在或不存在下，RAW264.7细胞用1μg/ml的LPS和0.5ng/ml干扰素在37℃下，在95％空气-5％二氧化碳的潮湿气氛中培养16小时。在室温下孵育30分钟后，使用Griess试剂测量培养基中的氧化氮测量结果。读取548nm的吸光度，并与NaNO₂的标准溶液对比。加入50μL MTT评估细胞存活力。孵育4小时后，除去培养基，并将150μL DMSO加入以溶解晶体。读取570nm处每个样本相对由无细胞孔制备的空白的光密度。

尽管未显示，但化合物I以剂量依赖性方式诱导NO产生的显著抑制(约50％)。

实施例5：5/6肾切除大鼠模型中化合物I对肾的体内保护作用

使用以下程序，在5/6肾切除(Nx)大鼠模型中进行化合物I对肾组织的体内保护作用的验证。对雄性6周龄的Wistar大鼠进行5/6肾切除术或假手术。在氟烷麻醉下，通过除去左肾的2/3随后7天后右侧单侧肾切除术完成肾切除。对假手术大鼠进行肾的暴露并去肾周围脂肪。第一次手术后21天，在通过大鼠的指示肾功能不全的肌酸酐的肾小球滤过率(GFR)的减少的研究中使大鼠随机化。经受假手术的动物被给予媒介物(盐水)，并用作对照。Nx动物被划分到接受媒介物或化合物I的组中。通过胃管饲法每天一次提供盐水或化合物I，直到处死。每三周测量GFR，从而评估这一肾终末期疾病模型的严重性。大鼠在第190天被处死。

第4图表示Nx和化合物I处理的Nx大鼠与假手术动物对比的GFR(肌酸酐清除率)。在第190天，化合物I将GFR提高了2倍。

第5图代表与第21天的初始GFR(处理前)对比，Nx和化合物I处理的Nx大鼠中GFR随治疗时间的提高。与在Nx大鼠(对照)中50％GFR恶化对比，观察到在化合物I处理的Nx大鼠中50％GFR提高。

实施例6：在5/6肾切除大鼠中化合物I对心脏的体内保护作用

使用实施例1中描述的程序，在5/6肾切除(Nx)大鼠模型中进行化合物I对体内心脏保护作用的验证。简单地说，用RTBP 2000^TM仪器(KentScientific)记录5/6肾切除大鼠的心脏压力以证实化合物I在严重受影响的5/6肾切除大鼠中对心脏施加保护作用。在化合物I处理的Nx大鼠中观察到血压的显著降低(第6图)。

实施例7：多柔比星诱导的肾毒性模型中化合物I对肾的体内保护作用

使用以下程序，在多柔比星诱导的肾毒性模型中进行口服施用化合物I的体内保护作用的验证。在第-3天至第10天用化合物I预防性处理或在第1天至第10天用化合物I治疗性处理C57BI/6小鼠(6-10周龄)。在第0天，通过静脉内注射10mg/kg多柔比星来诱导肾毒性。在第4、7、9和11天监控血清白蛋白和肌酸酐。

用化合物I预防性处理抑制多柔此星诱导的血清白蛋白的降低。用化合物I治疗性处理对多柔比星诱导的血清白蛋白水平无影响。(第7图)。

用化合物I预防性处理抑制多柔比星诱导的血清肌酸酐的升高。用化合物I治疗性处理也抑制多柔比星诱导的血清肌酸酐水率的升高。(第8图)。

公知多柔比星诱导肾毒性和心脏毒性。第9图表示按照在多柔比星诱导的肾毒性模型中的组织化学确定的组织学肾损伤分数。如第8图所示，多柔比星在第7天和第11天诱导明显的肾损伤。用化合物I的预防性(多柔比星前)和治疗性(多柔比星后)处理减少多柔比星诱导的小管水平的肾损伤。

多柔比星主要在小管区域诱导早期损伤。毒性进一步延伸至肾小球(多柔比星后约第11天)。第10图表示在对照和化合物I处理的(预防性处理)小鼠中多柔比星诱导的损伤的组织学显微照片。多柔比星诱导肾细胞凋亡、纤维化、硬化和蛋白质在受影响的小管区域的积累。用化合物I预防性或治疗性处理保护肾免受多柔比星毒性影响。

化合物I表现出针对多柔比星诱导的肾毒性的保护机制包括如在用化合物I处理的肾中由CTGF表达的显著抑制证实的纤维化抑制。第11图阐述CTGF的mRNA表达。多柔比星将肾中CTGF的mRNA表达增加了24.1％。用化合物I预处理诱导了CTGF表达的显著降低，显示了化合物I的抗纤维化活性。

CTGF还由TGF-β调节。第12图阐述肾中TGF-β的mRNA表达。多柔比星将肾中TGF-β的mRNA表达增加了73％。用化合物I预处理诱导了TGF-β表达的26％的降低。

如本文和所附的申请专利范围中所用的，单数形式“一个(a)”、“一种(an)”和“所述(the)”包括复数涵义，除非上下文清楚地另外说明。因此，例如提及“一种化合物”包括这种化合物的一个或多个，而提及“所述方法”包括提及本领域普通技术人员所知的，可以被修改或取代本文描述的方法的等同步骤和方法。

应理解本文描述的实施例和实施方案仅为示例目的，且依据其的多种改良或变化将被建议给本领域技术人员，并且被包括在本发明和所附权利要求书的范围内。

Claims

1.一种由下式表示的盐：

其中X⁺是碱加成盐。

2.如权利要求1所述的盐，其中所述碱加成盐是钠盐、钾盐或锂盐。

3.如权利要求1所述的盐，其中X⁺是钠。

4.一种由下式表示的盐：

5.一种药物组合物，其包含由下式表示的盐：

和药学上可接受的媒介物。

6.一种制备药物组合物的方法，所述方法包括：

将由下式表示的盐

与药学上可接受的媒介物混合，从而制备所述药物组合物。

7.一种用于预防和/或治疗选自由下列疾病组成的组的疾病的由下式表示的盐：

(i)血液疾患；(ii)肾疾患、肾病和/或肾疾患并发症；(iii)炎性相关疾病；和(iv)氧化性应激相关疾患。

8.一种下式表示的盐：

在制备用于预防和/或治疗选自由(i)血液疾患：(ii)肾疾患、肾病和/或肾疾患并发症：(iii)炎性相关疾病；和(iv)氧化性应激相关疾患组成的组的病症的药物中的用途，其中X⁺是碱加成盐。

9.一种药物组合物，其包含由下式表示的盐：

其中所述药物组合物用于预防和/或治疗选自由(i)血液疾患：(ii)肾疾患、肾病和/或肾疾患并发症；(iii)炎性相关疾病；和(iv)氧化性应激相关疾患组成的组的病症。

10.一种预防和/或治疗选自由(i)血液疾患：(ii)肾疾患和/或肾疾患并发症：(iii)炎性相关疾病；和(iv)氧化性应激相关疾患组成的组的病症的方法，所述方法包括向需要的人类患者施用药理学有效量的

11.一种制备3-戌基苯乙酸的纳盐的方法，所述方法包括：

a)在四丁基氟化铵水合物和PdC₁₂(PPh₃)₂存在下，加热[3-溴苯基]乙酸乙酯和1-戌炔的混合物以提供[3-[戊炔-1-基]苯基]-乙酸乙酯；

b)还原[3-[戌炔-1-基]苯基]-乙酸乙酯以提供[3-[戊基-1-基]苯基]乙酸乙酯；和

c)水解[3-[戊基-1-基]苯基]乙酸乙酯以产生3-戌基苯乙酸的钠盐。

12.如权利要求11所述的方法，其中所述加热步骤a)在密封管中进行。

13.如权利要求12所述的方法，其中所述管在80℃下加热2h。

14.一种预防和/或治疗需要的受试者的血液疾患的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的权利要求1所述的盐或权利要求5所述的药物组合物。

15.如权利要求14所述的方法，其中所述血液疾患是贫血或中性白细胞减少。

16.如权利要求14或15所述的方法，其中所述组合物的施用刺激所述受试者的血细胞生成和/或红细胞生成。

17.一种用于预防和/或治疗需要的受试者的肾疾患和/或肾疾患并发症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的权利要求1所述的盐或权利要求5所述的药物组合物。

18.如权利要求17所述的方法，其中所述肾疾患是肾病。

19.如权利要求17所述的方法，其中施用所述药物组合物用于针对用化疗剂治疗引起的毒性效应的肾保护。

20.如权利要求19所述的方法，其中在所述施用之后，所述受试者的肌酸酐清除率和/或尿酸清除率提高。

21.一种用于改善需要的人类受试者的肾功能的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的权利要求1所述的盐或权利要求5所述的药物组合物。

22.如权利要求14至21中任一项所述的方法，其中所述盐是

23.一种用于预防和/或治疗需要的受试者的炎性相关疾病的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的权利要求1所述的盐或权利要求5所述的药物组合物。

24.如权利要求23所述的方法，其中所述炎性相关疾病是免疫介导的炎性疾病或自身免疫疾病。

25.如权利要求24所述的方法，其中所述炎性相关疾病选自由以下组成的组：关节炎、全身性红斑狼疮(SLE)、ITP、肾小球性肾炎、和血管炎、银屑病关节炎、银屑病、克罗恩病、炎性肠病、强直性脊柱炎、舍葛兰氏综合症、斯提耳氏病、葡萄膜炎、硬皮病、肌炎、赖特尔综合症和辛格纳氏综合症。

26.一种针对受试者的用化疗剂治疗引起的毒性效应的肾保护的方法，所述方法包括在用所述化疗剂治疗之前和/或之后向所述受试者施用有效量的权利要求5所述的药物组合物。

27.一种用于预防和/或治疗需要的受试者的氧化性应激相关疾患的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的权利要求1所述的盐权利要求5所述的药物组合物。

28.如权利要求27所述的方法，其中所述氧化性应激相关疾患选自由以下组成的组：心血管疾病、癌症、糖尿病、关节炎、动脉粥样硬化、帕金森病、心力衰竭、心肌梗塞、阿耳茨海默病、慢性疲劳综合症和自身免疫疾病。