CN102405838A

CN102405838A - 一种栀子花组织培育及其无公害种植方法

Info

Publication number: CN102405838A
Application number: CN2011102885218A
Authority: CN
Inventors: 董永武
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2011-09-22
Filing date: 2011-09-22
Publication date: 2012-04-11

Abstract

本发明涉及栀子花组培方法，属于植物组织培养领域，具体的说是一种栀子花组织培育及其无公害种植方法。其特征在于：将栀子花外植体消毒清洗，经过愈伤组织诱导与分化，不定芽增殖，不定根诱导，炼苗，无公害种植即达到本发明的实验目的。有益效果在于：可获得大批组培苗满足种植需要，并采用天然林区种植克服农药及重金属污染，成活率达95.5％，单株重量高于同年野生和无繁种植药材2倍，并有效成分含量高于同年野生药材；并满足制药企业对原药材的需求，既可成批培育又可全面积种植组培苗，并且提早二年获得无公害药材，具有实用价值。

Description

一种栀子花组织培育及其无公害种植方法

技术领域

本发明涉及栀子花组培方法，属于植物组织培养领域，具体的说是一种栀子花组织培育及其无公害种植方法。

背景技术

栀子花又名栀子，为龙胆目、茜草科、栀子属的常绿灌木，喜欢温暖湿润和阳光充足的环境，较耐寒，耐半阴，怕积水，要求疏松、肥沃和酸性的沙壤土，原产于中国，其花枝叶繁茂，叶色四季常绿，花芳香素雅，除观赏外，其花、果实、叶和根可入药，有泻火除烦，清热利尿，凉血解毒之功效，作为园林观赏植物和药用植物在世界各地被广泛应用。

目前公知的就栀子花栽培方法是采用扦插法、压条法、分株和播种法进行繁殖，在欧美及日本等地区对栀子属植物的分类、栽培及育种等方面有较为系统深入的研究，而我国对栀子属种质资源的利用和开发力度尚显不足。在国内各类文献资料中只有少量的关于玉簪属种质资源及园林应用、观赏用栀子品种的组织培养等方面的报到，而关于栀子花的组织培养及种植的全套种植方法则未见报道。

发明内容

针对现在技术的上述不足，本发明的目的在于提供一种栀子花组织培育及其无公害种植方法，操作简单，繁殖率高，可大量生产栀子花试管苗。

本发明所述的一种栀子花组织培育及其无公害种植方法，其特征在于：将栀子花外植体消毒清洗，经过愈伤组织诱导与分化，不定芽增殖，不定根诱导，炼苗，无公害种植即达到本发明的实验目的。

为了实现本发明的目的，提供了如下具体技术方案：

a.外植体的选择和消毒：选用当年新发的叶片，剪下叶片经水洗，在超净工作台上用70％的乙醇处理10s，再用0.1％升汞消毒，浸泡并振荡6～8min，无菌水清洗4～6次，用滤水纸吸干水分备用；

b.培养：将消毒后的栀子花叶片剪成小块，形成愈伤组织接种在MS培养基上培养30天，培养温度为20～25℃，光照强度2000Lux，每天光照14小时，进行愈伤组织诱导与分化；分化形成丛芽，培养的不定芽单个切开转接在培养基上增殖培养，形成增殖体的幼苗转接到1/2MS+IBA 0.2mg/L的培养基中，25～30天即有愈伤组织分化形成的芽丛；

c.生根培养：将大而健壮的芽转接至生根培养基MS+NAA0～0.05mg/L 15～21天生根；

d.炼苗：是将试菅苗从组培室取出后置于温棚中，放置5～7天，取出幼苗洗净培养基后移植在装有腐质土和红土1∶1并加少许腐质叶为基质的营养袋内，浇水，在1000～2000Lx中光照8～12小时，湿度大于70％条件下练苗1个月，当叶达6～10片，高达6～8cm时移栽种植；

e.无公害种植是在天然条件下进行种植，选择海拔800～2500m，林下，沟边，瀑布两旁或有遮阴条件的荒土；满足日照年平均6小时/日、年平均最高温度不高于18℃、月平均最高温度在11～23℃、最低可达0℃的条件；满足地下5cm土温年平均最高温度不高于16℃、月平均最高温度在9～20℃、最低可达9℃以下的条件；建立隔离区，防牛马进入而踏坏。

所述愈伤组织诱导接种在MS培养基加含6-BA0.25～0.5mg/L，NAA0.2～0.3mg/L培养基上，光照10～16小时，湿度大于70％条件下直接诱导产生丛芽，25～30天开始萌动；再经8～14天有丛芽出现；7～15天丛芽长叶。

所述不定芽增殖接种在1/2MS+IBA 0.2mg/L的培养基中，25～30天便可形成幼苗；增殖培养产生的新丛芽，叶变绿，2～3cm时，进一步转接进行增殖培养或继代培养。

所述生根培养是接至生根培养基MS+NAA 0～0.05mg/L 15～21天生根，练苗后移栽。

本发明所述的一种栀子花组织培育及其无公害种植方法，有益效果在于：可获得大批组培苗满足种植需要，并采用天然林区种植克服农药及重金属污染，成活率达95.5％，单株重量高于同年野生和无繁种植药材2倍，并有效成分含量高于同年野生药材；并满足制药企业对原药材的需求，既可成批培育又可全面积种植组培苗，并且提早二年获得无公害药材，具有实用价值。

具体实施方式

通过本发明的实施例，对本发明的上述内容再做进一步的详细说明

实施例1：

1.外植体材料的采取和处理：

选择栀子花6月生长茂盛无病的母株新发幼嫩叶片叶为外殖体材料，采集野生或家种栀子花全株移种在花盒中，用清水洗叶，待新叶长出，从母株上剪下活叶片用自来水冲洗15分钟，除去叶表面的尘土和绒毛，将叶片放入70％的乙醇中翻转20秒钟，除去叶表面的蜡质物后用清水冲洗叶面除去乙醇，放入0.1％升汞液中浸泡15分钟消毒，无菌水洗净后剪成1cm²小方块，叶背面平放于培养基中，每瓶放4块外植体，盖紧瓶盖，用保鲜袋封好瓶口，在无菌操作台上完成接种；

2.愈伤组织诱导与分化，不定芽增殖和不定根诱导：

①愈伤组织诱导与分化：在无菌条件下，从消毒后叶片上剪下1cm2小叶块，接种在MS培养基加含6-BA 0.25mg/L+NAA 0.2mg/L培养基上，在25℃，光照1000Lx，光照12小时，湿度大于70％条件下：直接诱导产生丛芽，30天开始萌动；再经14天有丛芽出现，15天丛芽长叶；

②不定芽增殖：取出已长叶丛芽单个切开，在MS培养基加含6-BA0.5mg/L+NAA 0.3～0.4mg/L培养基上，进行增殖培养；40～60天便可形成幼苗，取其高4～5cm的幼苗进行生根培养，增殖培养产生的新丛芽，叶变绿，2～3cm，可一进转接进行增殖培养或继代培养；

③不定根诱导：取出增殖培养长出高4～5cm的幼苗，单个切开，转接到1/2MS+IBA 0.2mg/L培养中，转接后15～21天，开始生根，40～60天根达3条以上，叶6～10片，高6～8cm的试菅苗可取出练苗；

3.炼苗：

将试菅苗从组培室取出后置于温棚中，放置5天，取出幼苗用清水洗净培养基移植在营养袋中，营养袋内装有腐质土和红土1∶1混均，加少许腐质叶为基质，绕清水，保湿控制光照2000Lx，光照12小时，湿度大于70％条件下，练苗1月成活达92.5％，叶10片，高6cm移栽在大田中；

4.天然条件下种植：

选择海拔800～2500m，林下，沟边，瀑布两旁或有遮阴条件的成遍土地，满足日照要求：0.8小时/日，年平均6小时/日，株行距依环境而定，可稀，可密；

气候条件：气温：年平均最高温度不高于18℃，月平均最高温度在11～23℃，最低达0℃。地下5cm土温：最高温度年平均不高于16℃，月平均最高温度在9～20℃，最低达9℃以下。湿度：最高达90％，最低不低于70％，月平均湿度在70～90％之间，天然树遮阴。天然条件下种植，建立隔离区，防牛马进入而踏坏。

Claims

1.一种栀子花组织培育及其无公害种植方法，其特征在于：具体技术方案为：

2.如权利要求1所述一种栀子花组织培育及其无公害种植方法，其特征在于：愈伤组织诱导接种在MS培养基加含6-BA0.25～0.5mg/L+NAA 0.2～0.3mg/L培养基上，光照10～16小时，湿度大于70％条件下直接诱导产生丛芽，25～30天开始萌动；再经8～14天有丛芽出现；7～15天丛芽长叶。

3.如权利要求1所述一种栀子花组织培育及其无公害种植方法，其特征在于：不定芽增殖接种在6-BA0.5mg/L+NAA 0.3～0.4mg/L培养基中，25～30天便可形成幼苗；增殖培养产生的新丛芽，叶变绿，2～3cm时，进一步转接进行增殖培养或继代培养。

4.如权利要求1所述一种栀子花组织培育及其无公害种植方法，其特征在于：生根培养是接至生根培养基1/2MS+IBA 0.2mg/L 15～21天生根，练苗后移栽。