CN102379937A - 一种植物提取物组合物在制备防治酒精性肝损伤食品或药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于天然保健食品和制药技术领域，涉及到一种枳椇子、桑椹和青果提取物组合物在制备防治酒精性肝损伤药物中的应用；所述植物提取物组合物由下列重量份的成分组成：枳椇子提取物2-5份，桑椹提取物1-3份，青果提取物2-4份。经实验验证表明本发明所涉及的组合物酒精性肝损伤有辅助保护作用。可以用于各种保肝类的保健食品或药品。

Description

一种植物提取物组合物在制备防治酒精性肝损伤食品或药物中的应用

技术领域

本发明属于天然保健食品和制药技术领域，涉及到枳椇子、桑椹和青果提取物组合物的保肝护肝功效及其制备方法。

背景技术

世界卫生组织统计显示：目前我国长期饮酒者接近2亿人，再加上一般的饮酒者饮酒人数超过5亿，每年有11万人因酒精中毒而死亡。

从生理生化角度来看，饮酒后90%-95%酒精在体内转化为乙醛，再转化为乙酸，5%-10%从肺、肾、皮肤排出。肝脏是酒精代谢的主要器官，少量酒精在肾脏、肌肉、肠道及肺内氧化。过量饮酒，首当其冲受到影响并且损害最为严重的是肝脏。酒精可引发脂肪肝及硬化，主要是乙醇本身和它的氧化物乙醛直接或者间接作用所致。概括起来，有如下损害：

（1）直接损害肝细胞；

（2）改变肝线粒体的结构与功能；

（3）产生自由基，加剧细胞脂质过氧化作用，并且降低了肝细胞内清除自由基系统的活性，从而引发一系列自由基毒性作用；

（4）影响肝内脂类代谢，使得甘油三酯增加，促使脂肪肝形成；

（5）酒精在肝内代谢的过程，使得氧化型辅酶I（NAD^－）变成还原辅酶I（NADH），二者的比值发生改变，使得肝细胞氧化还原反应过程发生障碍，引起一系列代谢失调。脂类在肝内堆积，并促使酮体产生，造成乳酸症；糖代谢紊乱，常发生低血糖；

（6）产生细胞因子，导致肝细胞损害甚至发展成肝硬化；

（7）乙醛对蛋白质有解释作用，影响其生物活性。

如果对嗜酒者采取预防和治疗，可避免酒精性肝损伤的发生，减缓其发展速度。相关研究表明，中药可通过多种机制治疗酒精性肝损伤，往往都直接或者间接涉及到抗脂质过氧化。天然抗氧化剂可针对各种与氧化损伤有关的环节，发挥抗酒精性肝损伤的作用。目前对酒精性肝损伤并无特效药，有些对脂肪肝有效的西药，其本身对肝脏也有一定的损害。因此，从药食兼用天然资源中寻找对酒精性肝损伤进行有效保护的产品具有重要的应用价值。

发明内容

本发明的目的是提供一种对酒精性肝损伤具有辅助保护作用的植物提取物组合物的应用。

本发明首先选择了18种文献报道频率较高的具有解酒护肝功效的药食兼用原料，根据乙醇在体内代谢的机理选取了5个体外指标：酒精计测酒精度、激活（抑制）乙醇脱氢酶的活性、气相色谱法测乙醇保持率、总抗氧化活性及其清除超氧自由基离子活性等进行筛选。最终根据以上筛选实验的结果，综合考虑其解酒功效、口感、色泽、原料成本等因素，确定了作为本组合物配方的3种植物提取物主料：枳椇子提取物、桑椹提取物和青果提取物。

本发明所采用的3种食兼用原料的传统医药学理论依据：

枳椇子为鼠李科植物枳椇（Hovenia duleis Thunb.）的干燥成熟的种子，性味甘酸、平，无任何毒副作用。其功能主治为：解酒毒，止渴除烦，止呕，利大小便；主醉酒，烦渴，呕吐，二便不利。据《滇南本草》记载：枳椇子可治一切左瘫右痪，风湿麻木，能解酒毒；或泡酒服之，亦能舒筋络。小儿服之有化虫，养脾之功效。

桑椹为桑科植物桑（Morus alba L.）的干燥果穗，性味甘酸、寒，无任何毒副作用。其功能主治为：补血滋阴，生津润燥；用于眩晕耳鸣，心悸失眠，须发早白，津伤口渴，内热消渴，血虚便秘。据《本草纲目》记载：捣汁饮，解酒中毒，酿酒服，利水气，消肿之功效。

青果为橄榄科植物橄榄（Canarium album Raeusch.）的干燥成熟果实，其性味甘酸、平，无任何毒副作用。用青果煮汁饮即可治疗酒精中毒；醉酒后去核青果肉，煎汤代茶饮，可治酒伤昏闷。据《中国药典记载》，其功能主治为：清热，利咽，生津，解毒；亦用于咽喉肿痛，咳嗽，烦渴，鱼蟹中毒等。

本发明公开了一种植物提取物组合物在制备防治酒精性肝损伤食品或药物中的应用，所述植物提取物组合物由下列重量份的成分组成：枳椇子提取物2-5份，桑椹提取物1-3份，青果提取物2-4份。

所述的枳椇子提取物、桑椹提取物和青果提取物通过下述方法制得：

（1）将枳椇子、青果和桑椹粉碎，分别过20-30目筛；

（2）分别加入3-5倍重量的水煎煮3-5次，每次1-2小时，去渣取药汁合并滤液；

（3）将得到的滤液在70-90℃条件下减压浓缩，得到浸膏；

（4）将浸膏经过超低温冷冻一昼夜、真空干燥、粉碎后过80-120目筛，分别得到3种提取物的浸膏冻干粉。

本发明的组合物依照《保健食品检验与评价技术规范实施手册（2003版）》中介绍的对化学性肝损伤有辅助保护作用的功能学评价检验方法，将各样品组及模型对照组小鼠造成急性肝损伤，分别测定小鼠肝脏组织中丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）、甘油三酯（TG）的含量。实验结果表明，三项检测指标均显示出明显的功效，因此可判定该组合物对酒精性肝损伤有辅助保护作用。

本发明将这3种植物提取物按照一定的比例进行混合以后的组合物，可用于各种解酒（醒酒）类和/或保肝类的保健食品或药品，使用范围包括在以上3种主料基础上，适量添加其它提取物、和/或添加其它原料和/或添加食品添加剂的各种配方，包括应用于各种液剂、粉剂、片剂、膏剂、丸剂等各种剂型的食品和药品。

本发明原料来源广泛、成本低廉、制备工艺简单，且具有显著的解酒（醒酒）保肝（护肝）功效。

具体实施方式

在本发明中所使用的术语，除非有另外说明，一般具有本领域普通技术人员通常理解的含义。

下面结合具体的实施例，并参照数据进一步详细地描述本发明。应理解，这些实施例只是为了举例说明本发明，而非以任何方式限制本发明的范围。

在以下的实施例中，未详细描述的各种过程和方法是本领域中公知的常规方法。所用试剂的来源、商品名以及有必要列出其组成成分者，均在首次出现时表明，其后所用相同试剂如无特殊说明，均以首次标明的内容相同。

实施例1：

制备提取物（以制备“冻干粉”为例）：

（1）将枳椇子和青果和桑椹粉碎，分别过20~30目筛；

（2）分别加入3~5倍重量的水煎煮3~5次，每次1~2小时，去渣取药汁合并滤液；

（3）将得到的滤液在70~90℃条件下减压浓缩，得到浸膏；

（4）将浸膏超经过低温冷冻一昼夜、真空干燥、粉碎后过80~120目筛，分别得到3种提取物的浸膏冻干粉。

实施例2：

制备保健食品或药品（以制备“醒酒口服液”为例）：

（1）将3种浸膏冻干粉按照以下重量比例混合：枳椇子提取物4份，桑椹提取物3份，青果提取物3份，然后按质量比添加牛磺酸0.5%、柠檬酸0.02%、维生素C 0.03%、蔗糖7%、稳定剂0.15%等，再添加无菌水配成液剂；

（2）将制成的口服液经过过滤、杀菌、装瓶等处理制成最终的成品。

 

功效评价实验

1 试验材料

1.1 受试药物

药食兼用原料枳椇子、桑椹和青果水提物冻干粉的混合物。

1.2 实验动物

清洁级健康雌性SPF小鼠，体重20~22g；受试小鼠共50只，每组10只。

以人体推荐量的10倍，连续给予受试样品30天。

1.3 主要试剂

无水乙醇；MDA测试试剂盒；GSH测试试剂盒；TG测试试剂盒。

2 实验方法

2.1 受试小鼠的分组

空白组：不做任何灌胃，自由进食、进水；

模型组：生理盐水组；

低剂量组：将枳椇子、桑椹和青果有效成分混合，溶于水，制成50mg/mL溶液；

中剂量组：将枳椇子、桑椹和青果有效成分混合，溶于水，制成100mg/mL溶液；

高剂量组：将枳椇子、桑椹和青果有效成分混合，溶于水，制成150mg/mL溶液。

2.2 实验原理和步骤

2.2.1 实验原理

机体大量摄入乙醇后，在乙醇脱氢酶的催化下大量脱氢氧化，使三羧循环障碍和脂肪酸氧化减弱而影响脂肪代谢，致使脂肪在肝细胞内沉积。同时乙醇能激活氧分子，产生氧自由基导致肝细胞膜的脂质过氧化及体内还原型谷胱甘肽的耗竭。

因肝脏组织中丙二醛（MDA）、还原性谷胱甘肽（GSH）在保护肝功能方面发挥着及其重要的作用，在酒精损害下，会导致MDA的含量升高，GSH的含量降低，导致肝功能损伤，从而导致不能有效的进行体内物质的正常代谢，如甘油三酯（TG）的代谢会受到显著的影响。所以测定肝脏组织中得MDA、GSH及TG的含量，可以很好的评价肝损伤情况。

2.2.2 实验步骤

每日经口灌胃给予受试样品，空白对照组不做任何灌胃，自由进食、进水；模型对照组按体重给予生理盐水。每周称重两次，以调整受试样品剂量。

对样品组小鼠分为高、中、低剂量组，每天分别按体重灌胃受试样品，30天后，将各样品组及模型对照组小鼠分别按12mL/kg·BW一次灌胃给予50%的乙醇，空白对照组给予蒸馏水，禁食16小时后处死动物，分别测定其肝脏组织中丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）和甘油三酯（TG）的含量。

3 统计学方法

计量资料均以                                               

表示，所有的数值变量均采用SPSS 17.0进行单因素分析（One-way ANOVA），以p<0.05确定差异有统计学意义。

4 试验结果与分析

4.1 实验结果

小鼠肝脏组织中MDA、GSH及TG的实验结果见表1、表2和表3。

表1  MDA含量变化的实验结果（

）

组别	剂量（mg/Kg·BW/D）	MDA(nmol/mg·pro)
			空白组	——	5.20±0.47##
模型组	——	11.72±0.61**
			组合物样品低剂量组	50mg/mL	10.39±0.54**##
组合物样品中剂量组	100mg/mL	8.48±0.49**##
			组合物样品高剂量组	150mg/mL	7.38±0.37**##

表2  GSH含量变化的实验结果（

）

组别	剂量（mg/Kg·BW/D）	GSH(mg·GSH/g·pro)
			空白组	——	26.89±1.12##
模型组	——	17.17±0.63**
			组合物样品低剂量组	50mg/mL	18.12±0.79**#
组合物样品中剂量组	100mg/mL	20.42±0.29*##
			组合物样品高剂量组	150mg/mL	24.48±1.19**##

表3  TG含量变化的实验结果（

）

组别	剂量（mg/Kg·BW/D）	TG(mmol/L)
			空白组	——	0.66±0.03##
模型组	——	1.35±0.17**
			组合物样品低剂量组	50mg/mL	1.19±0.08**#
组合物样品中剂量组	100mg/mL	0.83±0.07**##
			组合物样品高剂量组	150mg/mL	0.73±0.03*##

注：^*为p<0.05，表示与空白组之间有显著差异；^**为p<0.01，表示与空白组之间差异极其显著，均有统计学意义。

^#为p<0.05，表示与模型组之间有显著差异；^##为p<0.01，表示与模型组之间差异极其显著，均有统计学意义。

4.2 实验结果分析

从上表可以看出，与空白组对照组比较，乙醇模型组小鼠灌胃酒精后，肝脏组织中MDA含量极显著升高（p<0.01）、GSH含量极显著降低（p<0.01）、TG含量极显著升高（p<0.01），因此从生化指标的变化说明该模型的造模是成功的；

本发明药剂组小鼠肝匀浆中MDA含量明显下降，低、中、高剂量组与模型组小鼠肝匀浆中MDA的含量相比，均有极显著差异（p<0.01）；

本发明药剂组小鼠肝匀浆中GSH含量明显上升，低剂量组与模型组小鼠肝匀浆中GSH的含量比均有显著差异（p<0.05)，中、高剂量组与模型组小鼠肝匀浆中GSH的含量相比有极显著差异（p<0.01）；

本发明药剂组小鼠肝匀浆中TG含量明显上升，低剂量组与模型组小鼠肝匀浆中GSH的含量比均有显著差异（p<0.05)，中、高剂量组与模型组小鼠肝匀浆中GSH的含量相比有极显著差异（p<0.01）。

上述实验结果可以得出，本发明药食兼用原料组合物能减轻小鼠因酒精所致的急性肝损伤的程度，能够起到保肝护肝的效果。

5 小结

在体外实验的5个解酒保肝指标筛选的基础上，选取了3种药食兼用原料提取物，依照《保健食品检验与评价技术规范实施手册（2003版）》中介绍的对化学性肝损伤有辅助保护作用的功能学评价检验方法，将各样品组及模型对照组小鼠分别造成急性肝损伤后，测定小鼠肝脏组织中丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）、甘油三酯（TG）的含量。实验结果表明，三项检测指标均显示出明显的功效，因此可判定本发明所涉及的3种药食兼用原料提取物的组合物对酒精性肝损伤具有辅助保护作用，可以用于各种解酒（醒酒）类和/或保肝类的保健食品或药品的开发及应用。

Claims (1)

1.一种植物提取物组合物在制备防治酒精性肝损伤食品或药物中的应用，其特征在于，所述植物提取物组合物由下列重量份的成分组成：枳椇子提取物2-5份，桑椹提取物1-3份，青果提取物2-4份；所述枳椇子提取物、桑椹提取物和青果提取物通过下述方法制得：

（1）将枳椇子、青果和桑椹，分别过20-30目筛；

（2）分别加入3-5倍重量的水煎煮3-5次，每次1-2小时，去渣取药汁合并滤液； 

（3）将得到的滤液在70-90℃条件下减压浓缩，得到浸膏；

（4）将浸膏经过超低温冷冻一昼夜、真空干燥、粉碎后过80-120目筛，分别得到3种提取物的浸膏冻干粉。