CN102379936B - 一种解酒护肝软胶囊的生产工艺 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种软胶囊的配方及工艺，一种解酒护肝软胶囊的生产工艺，其特征是：包括以下步骤：（1）取枳椇子、银杏叶和香榧果，洗净、晾干和粉碎；（2）加入到超临界二氧化碳提取釜中，提取到提取物a；（3）将提取物a加入大孔树脂柱中，使用紫外检测器于波长260nm处监测，收集目标产物b，目标产物b包括总黄酮和木脂素类物质；于波长210nm处收集到目标产物c，于波长445nm处收集目标产物d，目标产物c包括聚戊烯醇，目标产物d包括叶黄素，将收集到的目标产物b、目标产物c和目标产物d混合得到混合物e，真空脱气得到混合物f；（4）将混合物f与植物油混合后经均均质，制备成软胶囊。提取方法简单，萃取效率高。

Description

一种解酒护肝软胶囊的生产工艺

技术领域

本发明涉及一种软胶囊的配方及工艺，特别涉及一种具有解酒护肝功能软胶囊的配方及其生产工艺，属于多种药食两用植物提取物混合制备软胶囊的技术。

背景技术

饮酒是人类文明盛传已久的习惯之一，大多数人都有过饮酒的行为，但酒精滥用和酒精依赖也已成为当今世界上日益严重的公共卫生问题。适量的饮酒对健康并无明显损害，甚至还具有调解神经兴奋度、改善血液循环、扩张血管、调解内分泌等功能，但过度饮酒会导致内分泌紊乱、降低肾功能、损伤肝细胞，长期大量过度饮酒会引发酒精性肝病，影响身体健康，甚至引起酒精性肝炎、肝硬化，乃至肝癌，危及生命。

《本草纲目》和《滇南本草》等书中均记载：枳椇子，性甘、酸、平，入肺、脾、胃经，止渴去烦，解酒毒，舒筋络。

现代研究表明，枳椇子总黄酮具有延缓酒精吸收、防止酒精中毒的功能。银杏叶黄酮和聚戊烯醇具有护肝作用，特别是对酒精性肝损伤和CCl₄肝损伤具有修复作用。

许多研究发现，黄酮类物质具有抗心肌缺血和抗氧化用用，对心肌细胞氧化损伤有明显的保护作用，并具有抗自由基和保护CCl₄和乙醇造成的肝损伤作用。许多木脂素进入体内后可以激活依赖DNA的RNA聚合酶I，促进核糖体RNA（rNRA）合成和快速形成完整核糖体，从而促进整体细胞蛋白的生物合成，因而有利于肝细胞的修复和再生，有研究发现香榧酯和弥罗松酚对酒精性肝损伤和胃损伤具有明显预防和修复作用。

申请号为200880118393.9的中国专利，公开了一种用于缓解酒精引起的宿醉的包含枳椇子的双和汤组合物，其中也用枳椇子作为原料。该发明用热水提取原料药材中的有效成分，提取效率低，对药材中有效成分提取率不足而使大量有用的物质留在药材当中，造成浪费；该发明成品采用汤的形式，使用起来不太方便，而且不易携带和运输。

申请号为200610047699.2的中国专利，公开了一种解酒护肝药剂，该药剂用枳椇子、葛花、L-半胱氨酸、葡萄糖酸钙、泛酸钙、牛磺酸和蜂蜜作为原料，该发明使用水提取枳椇子和葛花中的有效成分，使得枳椇子和葛花中的黄酮类容易和钙离子发生络合而影响其活性，起不到很好的解酒功能。

现有的解酒保肝类中药配方，多存在着有效物质的成份比较单一，如采用枳椇子和葛花药对，主要以黄酮类化合物为主，其作用机理以抗氧化和扩张血管促进血液循环为主，不宜多服。《本草逢源》记载：葛花，能解酒毒，葛花解酒汤用之，必兼人参，但无酒者不可服，服之损人灭元，以大开肌肉，而发泄伤津也，表明葛花存在安全性隐患。莱服子类解酒药，主要是利尿为主，同样存在伤津之虞。至于动物提取物类护肝解酒制剂，如海王金樽片，主要以牡蛎提取物为主，其作用主要是护肝，所以解酒作用不强，起效慢。     综上所述，目前还没有一种效果好、起效快、安全性高，无酒服用亦不会伤身，具有保健功能的解酒护肝软胶囊。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的上述不足，而提供一种结构设计合理，工艺简单的解酒护肝软胶囊的生产工艺。

本发明解决上述问题所采用的技术方案是：（1）取枳椇子、银杏叶和香榧果，洗净、晾干和粉碎。 

（2）将经过步骤（1）处理后的枳椇子、银杏叶和香榧果混合，然后加入到超临界二氧化碳提取釜中，提取到提取物a。

（3）将提取物a加入大孔树脂柱中，先用酸性洗脱剂洗脱，使用紫外检测器于波长260nm处监测，收集目标产物b，目标产物b包括总黄酮和木脂素类物质；再用质量比为（8～9）：（1～2）的石油醚和乙酸乙酯的混合物洗脱，用紫外检测器同时监测波长210nm和波长445nm处，于波长210nm处收集到目标产物c，于波长445nm处收集目标产物d，目标产物c包括聚戊烯醇，目标产物d包括叶黄素，将收集到的目标产物b、目标产物c和目标产物d混合得到混合物e，混合物e真空脱气得到混合物f。

（4）将混合物f与植物油以质量比1:（1～5）混合后经均质机均质，加入软胶囊成型机，制备成软胶囊。

作为优选，本发明所述步骤（2）中的超临界二氧化碳提取釜的提取条件是绝对压力35Mpa，温度50℃，静态提取1.5小时，动态提取1.5小时，再将超临界二氧化碳提取釜压力降至20Mpa，温度降至35℃，以乙醇和水体积比1∶(0.5～2)的混合物作为夹带剂，将夹带剂以0.5ml/min速率泵入超临界二氧化碳提取釜，动态提取2.5小时。此为最佳的提取条件，可以提高提取效率和提取率，以乙醇和水体积比1∶(0.5～2)作为夹带剂可以提高提取率，同时提取极性有效物质和非极性有效物质，避免浪费；而且二氧化碳、乙醇和水本身容易除去，且无毒无害。

作为优选，本发明所述步骤（2）中枳椇子、银杏叶和香榧果按质量比（5～10）：（5～15）：（1～10）混合。使得本发明中的软胶囊可以发挥更好的效果。

作为优选，本发明所述步骤（3）中的酸性洗脱剂由质量百分比为85%乙醇和15%蒸馏水混合再用有机酸调节pH值至4.5～5.5而得，所述有机酸为食用醋酸、柠檬酸、果酸和乳酸中的一种或几种的混合物。微酸性条件，可以将目标产物更好的洗脱出来，而且不同有机酸具有特异的洗脱效果。

作为优选，本发明所述步骤（3）中的混合物f的总黄酮的质量含量为15～35%，木脂素的质量含量为0.2～2.0%，叶黄素的质量含量为0.5～3.0%，聚戊烯醇的质量含量为10～25%。使得本发明中的软胶囊具有很好的解酒和护肝作用。

作为优选，本发明所述步骤（3）中的混合物e真空脱气条件是绝对压力0.1mbar，温度45℃，搅拌脱气50min，去除溶剂残留，得到混合物f。除去混合物e中的低沸物，提高本发明中软胶囊的质量。

作为优选，本发明所述混合物f溶剂残留在1ppb以下。使本发明中的软胶囊可以有很高的产品质量，还可以除去本发明中的软胶囊中的低沸物，防止这些低沸物对软胶囊质量造成不利影响，还可以防止这些低沸物带来不好的味道，影响产品品质。

作为优选，本发明所述步骤（4）中的植物油是冷榨山茶油。使得本发明中的软胶囊中的有效成分可以发挥最佳的药效。

本发明与现有技术相比，具有以下优点和效果：

本发明利用超临界二氧化碳技术，乙醇和水混合物为夹带剂，一次性提取枳椇、银杏叶和香榧中的黄酮、聚戊烯醇、叶黄素和木脂素，即提取出极性物质，又可以提取出非极性物质，提取方法简单，萃取效率高；

上述混合提取物即可以解酒，又可以护肝，防止酒精对肝、胃等器官造成的损伤，具有双重功效；

本发明的冷榨山茶油中的维生素、甾醇、多酚和类胡萝卜素等营养功效成份，对于产品护肝效果具有增效作用。

附图说明

图1是护肝效果实验中第一组实验小鼠肝组织Sirus Red染色图。

图2是护肝效果实验中第二组实验小鼠肝组织Sirus Red染色图。

图3是护肝效果实验中第三组实验小鼠肝组织Sirus Red染色图。

图4是护肝效果实验中第四组实验小鼠肝组织Sirus Red染色图。

图5是护肝效果实验中第五组实验小鼠肝组织Sirus Red染色图。

图6是护肝效果实验中第六组实验小鼠肝组织Sirus Red染色图。

图7是本发明的流程图。

具体实施方式

下面结合附图并通过实施例对本发明作进一步的详细说明，以下实施例是对本发明的解释而本发明并不局限于以下实施例。

实施例1：如图7所示解酒护肝软胶囊的生产工艺包括以下步骤：

（1）取枳椇子、银杏叶和香榧果，依次洗净、晾干和粉碎。

（2）将经过步骤（1）处理后的枳椇子、银杏叶和香榧果按质量比10：15：10混合，加入超临界二氧化碳提取釜，于绝对压力35Mpa，温度50℃下，静态提取1.5小时，动态提取1.5小时，再将压力降至20Mpa，温度降至35℃，以乙醇和水（体积比1∶1）作为夹带剂，0.5ml/min速率泵入提取釜，动态提取2.5小时，收集提取物a；静态提取是指在一定的压力和温度条件下将物料放置在密封的提取釜内一定时间，使物料和CO₂ 流体充分接触，建立平衡，提高互溶效率；动态提取是在指在一定的压力和温度条件下，让CO₂ 流体以一定的流速从物料中经过，从而把其中的物质萃取出去的过程。

（3）将提取物a加入大孔树脂柱，先用质量百分比为85%乙醇和15%蒸馏水混合再用有机酸调节pH值至5而得的酸性洗脱剂洗脱，本实施例中有机酸为柠檬酸，本发明中该有机酸可以为食用醋酸、柠檬酸、果酸和乳酸中的一种或几种的混合物。本发明中的酸性洗脱剂的PH值一般在4.5～5.5之间，如4.8、5.2或5.4等。紫外检测器260nm处检测，收集目标产物b，目标产物b主要成分为总黄酮和木脂素类物质；再用石油醚和乙酸乙酯质量比8∶2洗脱，双波长紫外检测器同时检测210nm和445nm处，于波长210nm处收集到目标产物c，于波长445nm处收集目标产物d，目标产物c主要成分是聚戊烯醇，目标产物d主要成分是叶黄素，将目标产物b、目标产物c和目标产物d混合得到混合物e，混合物e于绝压0.1mbar，温度45℃下，搅拌脱气50min，去除溶剂残留，得到溶剂残留在1ppb以下混合物f；溶剂残留包括石油醚、乙酸乙酯或乙醇。

（4）将混合物f与植物油以质量比1:1混合后经均质机均质，加入软胶囊成型机，制备成软胶囊本发明中混合物f与植物油以质量通常为1:（1～5），可以是1:2、1:3或1:4等。

 本实施例(2)中枳椇子、银杏叶、香榧果的质量比可以是表1中的任意一组数据。

表1：枳椇子、银杏叶、香榧果比例表

实施例	枳椇子	银杏叶	香榧果
				2	5	5	1
3	5	5	5
				4	5	5	10
5	5	10	1
				6	5	10	5
7	5	10	10
				8	5	15	1
9	5	15	5
				10	5	15	10
11	8	5	1
				12	8	5	5
13	8	5	10
				14	8	10	1
15	8	10	5
				16	8	10	10
17	8	15	1
				18	8	15	5
19	8	15	10
				20	10	5	1
21	10	5	5
				22	10	5	10
23	10	10	1
				24	10	10	5
25	10	10	10
				26	10	15	1
27	10	15	5

效果实验：

（1）实验材料及实验仪器

实验材料：

购自浙江省动物实验中心的体重为20g±2g的昆明种雄性小鼠120只，蒸馏水，市售白酒（酒精含量52°），混合物i，混合物j，混合物k，混合物l，枳椇提取物，葛根提取物。

枳椇提取物的制取方法是：枳椇子，60℃干燥4小时，粉碎，加4倍枳椇子重量的水和1倍枳椇子重量的乙醇，回流提取1小时，共提取三次，合并提取液，真空浓缩，得枳椇提取物。

葛根提取物的制取方法是：葛根，50℃干燥3小时，粉碎过40目筛，加4倍葛根重量的水和1倍葛根重量的乙醇，回流提取1小时，共提取三次，合并提取液，真空浓缩，得葛根提取物。

混合物i的制取方法是：将枳椇提取物与色拉油混合，至黄酮质量含量为10%，入均质机均质。

混合物j的制取方法是：将葛根提取物与色拉油混合，至黄酮质量含量为10%，入均质机均质。

混合物k的制取方法是：将实施例1中得到的混合物f与色拉油混合，至黄酮含量10%，入均质机均质。

混合物l的制取方法是：将实施例1中得到的混合物f与冷榨山茶油混合，至黄酮含量10%，入均质机均质。

实验仪器：全自动生化仪测定仪，显微镜，液相色谱。

（2）解酒实验

取雄性昆明种小鼠50只，体重20±2g，统一进食后，空腹6小时，称重，随机分成5组，分别为对照组、第一组、第二组、第三组和第四组，每组10只。对照组灌喂等体积蒸馏水，其余各组按200mg/kg剂量分别灌喂不同配制的混合物，30分钟后灌喂1%体重白酒，分别观察和记录其活动状态。活动状态以前肢向上抬举次数作为计数标准。

对照组：灌喂等体积蒸馏水，30分钟后灌喂1%体重白酒；

第一组：灌喂200mg/kg体重的混合物i，30分钟后灌喂1%体重白酒；

第二组：灌喂200mg/kg体重的混合物j，30分钟后灌喂1%体重白酒；

第三组：灌喂200mg/kg体重的混合物k，30分钟后灌喂1%体重白酒；

第四组：灌喂200mg/kg体重的混合物l，30分钟后灌喂1%体重白酒。

解酒效果实验结果:

从表2可以看出，第四组小鼠的活动能力最接近于正常状态，第三组与第四组差别不大，但均优于第一组和第二组，给药各组均优于对照组，除第二组有一只死亡外，其它药物处理组均未有死亡，对照组小鼠死亡3只，死亡率为30%。三、四两组与一、二两组比，差异显著，说明三、四两组药物的解酒效果较为突出；而三、四两组之间，后者效果要优于前者，表明添加冷榨山茶油比添加色拉油作为溶剂的解酒效果更好，冷榨山茶油主要对药物护肝功能有较强的增效作用。

（3）护肝效果实验

分组：将70只昆明种雄性小鼠，体重20±2g，分成6组，除第二组为20只外，其余组均为10只。

六组小鼠统一进食，空腹6小时后称重并记录数据。

每天灌胃给药一次，连续8周，末次给药后，禁食6小时后，腹腔主动脉取血测定ALT(丙氨酸转氨酶)和AST(天冬氨酸转氨酶)水平，取肝脏组织固定并切片观察肝组织病理学变化。各组用药剂量及种类如下：

第一组为空白组：1%体重的蒸馏水；

第二组为模型组：1%体重的市售白酒（52°）；

第三组:200mg/kg体重的混合物l和1%体重的市售白酒；

第四组:200mg/kg体重的混合物k和1%体重的市售白酒；

第五组:200mg/kg体重的混合物j和1%体重的市售白酒；

第六组:200mg/kg体重的混合物i和1%体重的市售白酒。

结果与结论

连续灌胃8周后测量每组小鼠的死亡数量并检测每只小鼠的ALT和AST，得到每组小鼠的平均ALT和平均AST。

如图1～图6分别为第一～六组实验小鼠肝组织切片Sirus Red染色图。

第一组为正常组，第一组的肝组织颜色红润，表面光滑，边缘锐利，包膜完整，质地柔软，无纤维化病理改变现象。肝小叶结构清晰，细胞索排列整齐，肝细胞以中央静脉为中心呈放射状，肝组织内无脂肪空泡，汇管区和中央静脉有少许胶原纤维存在，肝血窦正常，肝细胞无病变，核结构清晰（见图1）；第二组为模型组，其肝颜色呈暗褐色，肝肿大，质脆，包膜，表面均匀分布颗粒状突起；肝细胞增大，胞浆内脂滴大小不一，呈中度至重度肝细胞脂肪变性，细胞水肿严重，肝纤维组织增生明显，将肝小叶分隔成大小不等的肝细胞团，肝细胞广泛变性坏死，汇管区扩大、胶原沉积（见图2）。

第三组为本研究成果处理组，其肝脏色泽介于第一组和第二组之间，表面分布着少量的颗粒状突起，肝脏大小及质地较第二组模型组有明显改善；肝细胞变性坏死亡程度及肝小叶结构破坏程度降低，肝胶原纤维增生亦明显减轻，纤维条索疏松变窄（见图3）；第四组（见图4）为色拉油替代冷榨山茶油处理组，其肝脏色泽略差于第三组，肝细胞坏死面积、肝胶原纤维增生程度均略多于第三组，但好于第五组和第六组（见图5和图6）；第五组和第六组，其肝脏色泽均为深褐色，肝脏表面颗粒状突起只略少于第二组，明显多于第三组；肝细胞水肿较为严重，肝小叶纤维组织增生明显，肝细胞坏死亡区域、胶原沉积面积均严重高于第三组。

上述实验说明，和其它三个处理组相比较，第三组的药物处理效果最佳，肝细胞脂肪空泡现象最轻，胶原纤维数量最少。

安全性实验：

取实施例6中原料枳椇子、银杏叶、香榧质量比为5：10：5所生产出来的混合物f与冷榨山茶油质量比1:1混合后的产物为实验试剂h。

取昆明种小鼠70只，雌雄各半，体重20g±2g，随机分为7组，每组10只，分别用实验试剂h灌胃。小鼠给药前禁食不禁水12hr，按体重每20g给药0.4ml/d，连续14d，观察小鼠中毒反应，累计14d中各组小鼠死亡数，以改良寇氏法计算其LD₅₀值及95%的可信限。

根据表4计算LD₅₀=20400mg/Kg=20.4g/Kg

95%置信区间Z=17.76～23.47g/Kg

根据GB 15193.1-1994，LD₅₀=20.4g/Kg，属于实际无毒级别。

本说明书中所描述的以上内容仅仅是对本发明结构所作的举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，只要不偏离本发明的结构或者超越本权利要求书所定义的范围，均应属于本发明的保护范围。

Claims (6)

1.一种解酒护肝软胶囊的生产工艺，其特征是：包括以下步骤：

（1）取枳椇子、银杏叶和香榧果，洗净、晾干和粉碎； 

（2）将经过步骤（1）处理后的枳椇子、银杏叶和香榧果混合，然后加入到超临界二氧化碳提取釜中，提取到提取物a；

（3）将提取物a加入大孔树脂柱中，先用酸性洗脱剂洗脱，使用紫外检测器于波长260nm处监测，收集目标产物b，目标产物b包括总黄酮和木脂素类物质；再用质量比为（8～9）：（1～2）的石油醚和乙酸乙酯的混合物洗脱，用紫外检测器同时监测波长210nm和波长445nm处，于波长210nm处收集到目标产物c，于波长445nm处收集目标产物d，目标产物c包括聚戊烯醇，目标产物d包括叶黄素，将收集到的目标产物b、目标产物c和目标产物d混合得到混合物e，混合物e真空脱气得到混合物f；

（4）将混合物f与植物油以质量比1:（1～5）混合后经均质机均质，加入软胶囊成型机，制备成软胶囊；

所述步骤（2）中枳椇子、银杏叶和香榧果按质量比（5～10）：（5～15）：（1～10）混合；

所述步骤（4）中的植物油是冷榨山茶油。

2.根据权利要求1所述的解酒护肝软胶囊的生产工艺，其特征是：所述步骤（2）中的超临界二氧化碳提取釜的提取条件是绝对压力35Mpa，温度50℃，静态提取1.5小时，动态提取1.5小时，再将超临界二氧化碳提取釜压力降至20Mpa，温度降至35℃，以乙醇和水体积比1∶(0.5～2)的混合物作为夹带剂，将夹带剂以0.5ml/min速率泵入超临界二氧化碳提取釜，动态提取2.5小时。

3.根据权利要求1所述的解酒护肝软胶囊的生产工艺，其特征是：所述步骤（3）中的酸性洗脱剂由质量百分比为85%乙醇和15%蒸馏水混合再用有机酸调节pH值至4.5～5.5而得，所述有机酸为食用醋酸、柠檬酸、果酸和乳酸中的一种或几种的混合物。

4.根据权利要求1所述的解酒护肝软胶囊的生产工艺，其特征是：所述步骤（3）中的混合物f的总黄酮的质量含量为15～35%，木脂素的质量含量为0.2～2.0%，叶黄素的质量含量为0.5～3.0%，聚戊烯醇的质量含量为10～25%。

5.根据权利要求1所述的解酒护肝软胶囊的生产工艺，其特征是：所述步骤（3）中的混合物e真空脱气条件是绝对压力0.1mbar，温度45℃，搅拌脱气50min，去除溶剂残留，得到混合物f。

6.根据权利要求1所述的解酒护肝软胶囊的生产工艺，其特征是：所述混合物f溶剂残留在1ppb以下。