CN102335134B - 一种丁酸氯维地平液态脂质体制剂 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种丁酸氯维地平脂质体制剂及其制备方法。该制剂中含有0.05%（重量百分比）~0.1%（重量百分比）的丁酸氯维地平、40%（重量百分比）~70%（重量百分比）的磷脂酰胆碱、10%（重量百分比）~40%（重量百分比）的磷脂酰甘油、10%（重量百分比）~30%（重量百分比）的甾醇和0.55%（重量百分比）~3.3%（重量百分比）的稳定剂。该稳定剂包含组分A和组分B，其中组分A选自油酸、油酸钠、亚油酸、亚油酸钠中的一种或多种；组分B选自维生素E、辅酶Q10、没食子酸丙酯、抗坏血酸棕榈酸酯中的一种或多种。采用该方法制备的脂质体为液态，并能长期保存，一方面彻底解决了以往丁酸氯维地平乳剂中因使用中、长链甘油三酯所带来的安全性隐患；另一方面省去了以往脂质体制备中的冻干操作，降低了生产成本，同时便于临床应用，克服了脂质体冻干制剂复溶后质量不均一的缺陷，提高了患者的顺应性和用药安全性。

Description

一种丁酸氯维地平液态脂质体制剂

技术领域

本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种丁酸氯维地平脂质体制剂，特别是一种包含稳定剂的丁酸氯维地平液态脂质体制剂及其制备方法。 

背景技术

丁酸氯维地平（clevidipine butyrate）是新一代超短效二氢吡啶类钙通道阻抗剂，该药是十年来美国FDA首个批准上市的新型静脉注射用抗高血压药物。该药曾由阿斯利康公司作为围术期高血压短期控制药物进行开发。2002年美国药物公司（The Medicines Company）从阿斯利康公司获得产品授权，并于2008年8月1日在美国上市。丁酸氯维地平的化学结构与非洛地平相似，易被血液和组织中的酯酶所代谢，水解为没有活性的代谢物，因此在体内活性极短。丁酸氯维地平在水中几乎不溶，具有一定的脂溶性，美国药物公司将丁酸氯维地平制成静脉注射用乳剂，其采用的辅料为精制大豆油、精制卵磷脂、浓甘油、氢氧化钠及注射用水。 

由于目前已上市的丁酸氯维地平注射液中采用的大豆油为长链甘油三脂（LCT），长链甘油三酯在血中酯解成长链脂肪酸，长链脂肪酸不溶于水，需要依赖于蛋白结合后进入细胞，进入细胞内的长链脂肪酸需在胞浆内活化，即经线粒体或内质网外膜上的脂肪酸硫基酶活化成相应的脂酰辅酶A，再经线粒体内膜上的肉毒碱脂酰转移酶的作用，方能进入线粒体内进行β氧化。因此，长链甘油三酯容易被肝、脾、肺等脏器的网状内皮细胞所吞噬、沉积而危害免疫功能。因此专利申请CN102000027A中采用中链甘油三酯（MCT）代替长链甘油三酯（LCT），以减轻长链甘油三酯带来的安全性隐患。 

但正如专利申请CN102000027A所述，采用中链甘油三酯（MCT）也会导致中枢神经系统作用，比如嗜睡、恶心及困倦等。因此有必要开发一种新型的丁酸氯维地平制剂，以克服上述的各种缺点。 

经过研究，我们发现可以采用脂质体技术来解决该问题。丁酸氯维地平脂质体是利用磷脂双分子层膜形成的囊泡包裹药物分子而制成的具有靶向给药功能的新型药物制剂，与普通乳剂相比，由于脂质体所采用的辅料为高纯度卵磷脂，且不含有会引起问题的甘油三酯，因此可以彻底解决上述乳剂中使用中、长链甘油三酯而带来的各种安全隐患。 

此外，考虑到常用的脂质体制剂为了保证制剂的稳定性，通常需要冻干操作，临床上复溶后使用，但复溶后的脂质体制剂存在粒径不均一、药物易渗漏、质量下降等的缺点，给药时会增加不良反应的发生率。本发明人为了克服上述缺陷，提供了一种不需冻干操作，可液态保存的脂质体制剂及其制备方法。该方法解决了液态脂质体在长期保存过程中的稳定性问题，省去了冻干步骤，大大降低了脂质体开发的时间成本和经济成本。 

发明内容

本发明提供了一种能长期以液态形式稳定保存的丁酸氯维地平脂质体的制备方法，该方法使得制备的丁酸氯维地平脂质体能够以液体状态在2~8℃下稳定保存1年及以上，期间脂质体的各项主要质量指标（如含量浓度、粒径、ZETA电位以及包封率）均能保持稳定，未发生明显变化。该方法一方面彻底解决了以往丁酸氯维地平乳剂中因使用中、长链甘油三酯所带来的安全性隐患；另一方面解决了液态脂质体在长期保存过程中的稳定性问题，省去了冻干步骤，大大降低了脂质体开发的时间成本和经济成本，本发明通过以下技术方案实现： 

一种丁酸氯维地平液态脂质体制剂，含有0.05%（重量百分比）~0.1%（重量百分比）的丁酸氯维地平、40%（重量百分比）~70%（重量百分比）的磷脂酰胆碱、10%（重量百分比）~40%（重量百分比）的磷脂酰甘油、10%（重量百分比）~30%（重量百分比）的甾醇和0.55%（重量百分比）~3.3%（重量百分比）的稳定剂。

其中稳定剂包含组分A和组分B，组分A选自油酸、油酸钠、亚油酸、亚油酸钠中的一种或多种；组分B选自维生素E、辅酶Q10、没食子酸丙酯、抗坏血酸棕榈酸酯中的一种或多种。 

组分A占液态脂质体制剂总量的重量百分比为0.5%（重量百分比）~3%（重量百分比），组分B占液态脂质体制剂总量的重量百分比为0.05%（重量百分比）~0.3%（重量百分比）。 

其中磷脂酰胆碱选自大豆磷脂酰胆碱、蛋黄磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、蛋黄卵磷脂中的一种或多种；磷脂酰甘油选自大豆磷脂酰甘油、蛋黄磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油中的一种或多种。 

其中甾醇类选自胆固醇、豆甾醇、谷甾醇中的一种或多种。 

脂质体制剂中脂质体粒径范围为20~200nm。 

该液态脂质体的制备方法包括如下步骤： 

a将丁酸氯维地平在有机溶剂的混合液中搅拌溶解；

b将磷脂酰甘油在与a相同体积比的有机溶剂的混合液中溶解完全后，与a混合；

c将磷脂酰胆碱、甾醇与a相同体积比的有机溶剂的混合液中溶解，再缓缓滴入组分A和组分B，使其完全溶解；

d将b、c溶液混合均匀后，干燥将有机溶剂除尽得到含药粉末；

e取一定量的干燥粉末，加入一定量PBS缓冲液（10mM，pH6.0-8.0），温度控制在50-70℃，并以300-500转的速度搅拌1-2小时，得到水化溶液；

f对所得水化溶液进行高压均质，压力600-1200bar，均质3-10次，得到脂质体液态溶液；

g将所得的脂质体液态溶液通过0.22μm微孔滤膜过滤，装入西林瓶、充氮后密封。

其中步骤a中的有机溶剂为甲醇和氯仿混合溶液，两种有机溶剂的体积比为1:1。 

其中步骤d中干燥方法选自喷雾干燥、旋转蒸发中的任意一种。 

附图说明

图1是本发明的丁酸氯维地平液态脂质体制剂的粒径分布图。 

图2是本发明的丁酸氯维地平液态脂质体制剂的ZETA电位图。 

具体实施方式

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明的范围仅限于以下实施例。凡基于本发明的内容所实现的技术方案均属于本发明的范围。显然，根据本发明的内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明的基本技术思想的前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。 

实施例1   

处方：

             丁酸氯维地平                   1g      

             大豆磷脂酰胆碱               200g   

             大豆磷脂酰甘油                80g    

             胆固醇                            50g    

             油酸                                2g      

维生素E                         0.05g   

                                    

制成1000ml

 制备工艺：

（1）    将丁酸氯维地平于100ml氯仿:甲醇（1:1，体积比）混合溶液中搅拌溶解。

（2）    将大豆磷脂酰甘油于适量氯仿:甲醇（1:1，体积比）混合溶液中溶解完全，之后与（1）溶液混合。 

（3）    将大豆磷脂酰胆碱、胆固醇于100ml氯仿:甲醇（1:1，体积比）混合溶液中溶解，再缓缓滴入油酸及维生素E，使其完全溶解。 

（4）    将（2）所得溶液与（3）所得溶液混合均匀之后，采用喷雾干燥器将有机溶剂除尽，得到喷干粉末。 

（5）    取一定量喷干粉末，加入1000mL PBS缓冲溶液（10mM，pH 7.0），温度控制60℃，并以300rpm的转速搅拌2小时，得到水化溶液。 

（6）    对所得水化溶液进行高压均质，压力800~1000bar，均质5次，得到脂质体液态溶液。 

（7）        将所得脂质体液态溶液通过0.22μm微孔滤膜过滤除菌，装入西林瓶，充氮后密封。 

实施例2 

处方：

             丁酸氯维地平                   1g     

             大豆磷脂酰胆碱               200g    

             大豆磷脂酰甘油                80g    

             胆固醇                            50g    

维生素E                        0.05g   

                                    

制成1000ml

制备工艺：

（1）    将丁酸氯维地平于100ml氯仿:甲醇（1:1，体积比）混合溶液中搅拌溶解。

（2）    将大豆磷脂酰甘油于适量氯仿:甲醇（1:1，体积比）混合溶液中溶解完全，之后与（1）溶液混合。 

（3）    将大豆磷脂酰胆碱、胆固醇于100ml氯仿:甲醇（1:1，体积比）混合溶液中溶解，再缓缓滴入维生素E，使其完全溶解。 

（4）    将（2）所得溶液与（3）所得溶液混合均匀之后，采用喷雾干燥器将有机溶剂除尽，得到喷干粉末。 

（5）    取一定量喷干粉末，加入1000mL PBS缓冲溶液（10mM，pH 7.0），温度控制60℃，并以300rpm的转速搅拌2小时，得到水化溶液。 

（6）    对所得水化溶液进行高压均质，压力800~1000bar，均质5次，得到脂质体液态溶液。 

（7）    将所得脂质体液态溶液通过0.22μm微孔滤膜过滤除菌，装入西林瓶，充氮后密封。 

实施例3   

处方：

             丁酸氯维地平                    1g      

             蛋黄磷脂酰胆碱                230g     

             蛋黄磷脂酰甘油                70 g   

豆甾醇                            70g    

             油酸钠                             4g      

辅酶Q10                         0.1g     

                                    

制成1000ml

 制备工艺：

（1）    将丁酸氯维地平于100ml氯仿:甲醇（1:1，体积比）混合溶液中搅拌溶解。

（2）    将蛋黄磷脂酰甘油于适量氯仿:甲醇（1:1，体积比）混合溶液中溶解完全，之后与（1）溶液混合。 

（3）    将蛋黄磷脂酰胆碱、豆甾醇于100ml氯仿:甲醇（1:1，体积比）混合溶液中溶解，再缓缓滴入油酸及辅酶Q10，使其完全溶解。 

（4）    将（2）所得溶液与（3）所得溶液混合均匀之后，采用喷雾干燥器将有机溶剂除尽，得到喷干粉末。 

（5）    取一定量喷干粉末，加入1000mL PBS缓冲溶液（10mM，pH 6.0），温度控制65℃，并以500rpm的转速搅拌1小时，得到水化溶液。 

（6）    对所得水化溶液进行高压均质，压力600~800bar，均质10次，得到脂质体液态溶液。 

（7）    将所得脂质体液态溶液通过0.22μm微孔滤膜过滤除菌，装入西林瓶，充氮后密封。 

实施例4   

处方：

                丁酸氯维地平                  0.5g       

             二硬脂酰磷脂酰胆碱             270g     

             二硬脂酰磷脂酰甘油             100g      

             谷甾醇                                 80g

亚油酸                                  8g        

没食子酸丙酯                      0.08g      

                                       

 制成1000ml

 制备工艺：

（1）    将丁酸氯维地平于100ml氯仿:甲醇（1:1，体积比）混合溶液中搅拌溶解。

（2）    将二硬脂酰磷脂酰甘油于适量氯仿:甲醇（1:1，体积比）混合溶液中溶解完全，之后与（1）溶液混合。 

（3）    将二硬脂酰磷脂酰胆碱、谷甾醇于100ml氯仿:甲醇（1:1，体积比）混合溶液中溶解，再缓缓加入亚油酸及没食子酸丙酯，搅拌至油酸完全溶解。 

（4）    将（2）所得溶液与（3）所得溶液混合均匀之后，使用旋转蒸发仪将有机溶剂旋干，得到干燥脂膜。 

（5）    往干燥脂膜中加入1000mL PBS缓冲溶液（10Mm，pH 8.0），温度控制70℃，并以400rpm的转速搅拌1.5小时，得到水化溶液。 

（6）    将所得水化溶液进行高压均质，压力1000~1200bar，均质3次，得到脂质体液态溶液。 

（7）    将所得脂质体液态溶液通过0.22μm微孔滤膜过滤除菌，装入西林瓶，充氮后密封。 

实施例5   

处方：

             丁酸氯维地平                        1g      

             二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱            250g     

             二肉豆蔻酰磷脂酰甘油            90g      

             胆固醇                                 70g             

亚油酸钠                              10g       

抗坏血酸棕榈酸酯                   0.1g     

                                       

 制成1000ml

 制备工艺：

（1）    将丁酸氯维地平于100ml氯仿:甲醇（1:1，体积比）混合溶液中搅拌溶解。

（2）    将二肉豆蔻酰磷脂酰甘油于适量氯仿:甲醇（1:1，体积比）混合溶液中溶解完全，之后与（1）溶液混合。 

（3）    将二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、胆固醇于100ml氯仿:甲醇（1:1，体积比）混合溶液中溶解，再加入亚油酸钠，并滴入抗坏血酸棕榈酸酯，搅拌至完全溶解。

（4）    将（2）所得溶液与（3）所得溶液混合均匀之后，使用旋转蒸发仪将有机溶剂旋干， 

得到干燥脂膜。

（5）    往干燥脂膜中加入1000mL PBS缓冲溶液（20mM，pH 7.5），温度控制55℃，并以500rpm的转速搅拌1小时，得到水化溶液。 

（6）    将所得水化溶液进行高压均质，压力1000~1200bar，均质3次，得到脂质体液态溶液。 

（7）    将所得脂质体液态溶液通过0.22μm微孔滤膜过滤除菌，装入西林瓶，充氮后密封。 

实施例6   

处方：

             丁酸氯维地平                 0.5g       

             蛋黄卵磷脂                   350g      

             胆固醇                          75g

油酸                               8g        

维生素E                      0.08g      

                                         

 制成1000ml

 制备工艺：

（1）    将丁酸氯维地平于100ml氯仿:甲醇（1:1，体积比）混合溶液中搅拌溶解。

（2）    将蛋黄卵磷脂、胆固醇于100ml氯仿:甲醇（1:1，体积比）混合溶液中溶解，再缓缓加入油酸及维生素E，搅拌至油酸完全溶解。 

（3）    将（2）所得溶液与（3）所得溶液混合均匀之后，使用旋转蒸发仪将有机溶剂旋干，得到干燥脂膜。 

（4）    往干燥脂膜中加入1000mL PBS缓冲溶液（10mM，pH 7.0），温度控制60℃，并以4000rpm的转速搅拌1.5小时，得到水化溶液。 

（5）    将所得水化溶液进行高压均质，压力1000~1200bar，均质3次，得到脂质体液态溶液。 

（6）    将所得脂质体液态溶液通过0.22μm微孔滤膜过滤除菌，装入西林瓶，充氮后密封。 

比较实施例1  液态脂质体稳定性试验 

采用本专利申请实施例1所制得的丁酸氯维地平液态脂质体进行药物稳定性试验。具体过程如下：

试验方法：将上述丁酸氯维地平液态脂质体样品分别在25℃、60±5%RH条件下放置，进行稳定性试验考察，于放样0、3、7、14、21、30天取样进行检测。

检测指标：粒径、含量 

试验结果：见表1

表1  稳定性试验结果（丁酸氯维地平液态脂质体）

时间（天）	粒径（μm）	含量（mg/ml）
			0	0.090±0.017	0.50
3	0.090±0.016	0.50
			7	0.091±0.017	0.49
14	0.094±0.018	0.51
			21	0.096±0.020	0.49
30	0.096±0.017	0.50

从结果来看，在加速放置30天后，丁酸氯维地平液态脂质体的粒径及含量均无明显变化，稳定性良好。

比较实施例2  添加油酸脂质体与未添加油酸脂质体的稳定性对比试验 

采用对本专利申请实施例1中制备的丁酸氯维地平液态脂质体（添加油酸）与实施例2中制备的丁酸氯维地平液态脂质体（未添加油酸）进行药物稳定性比较。具体过程如下：

试验方法：将上述未添加油酸制备的丁酸氯维地平脂质体以及添加油酸后制备的丁酸氯维地平液态脂质体样品分别在6±2℃条件下放置，进行稳定性试验考察，于放样0、1、2、3、4、6个月取样进行检测。

检测指标：pH、Zeta电位、粒径、含量 

试验结果：见表2~3

表2  稳定性对比试验结果（普通丁酸氯维地平脂质体）

表3  稳定性对比试验结果（丁酸氯维地平脂质体（添加油酸））

时间（月）	pH	Zeta电位（mV）	粒径（μm）	含量（mg/ml）
					0	6.9	-60.3	0.088±0.017	0.51
1	6.9	-59.2	0.091±0.016	0.51
					2	6.8	-61.5	0.090±0.018	0.50
3	6.9	-60.9	0.093±0.017	0.49
					4	6.8	-62.3	0.095±0.020	0.50
6	6.8	-63.9	0.097±0.018	0.49

从结果来看，未添加油酸的丁酸氯维地平液态脂质体在放置过程中不断变化，到3个月的时候已经产生明显的絮凝，而添加油酸的丁酸氯维地平液态脂质体却能在6个月稳定性试验期间保持稳定。

丁酸氯维地平液态脂质体的血管刺激性实验

本试验观察了丁酸氯维地平液态脂质体制剂对家兔的血管刺激性反应，试验共设2组，分别为单次给药组和多次给药组，每组各3只动物，单次给药组每只动物给药1次，多次给药组每天给药1次，连续给药7天。两组均采用同体自身对照，丁酸氯维地平液态脂质体 (0.5mg/ml,1ml/kg)右耳注射给药，1ml/只/次，对照侧(左耳)给予等容量生理盐水。

结果显示：给药和观察期间以及取材时观察，给药局部未见明显充血、红肿、溃疡和硬结等异常现象。病理组织学检查给药局部血管未见与药物相关的异常改变。在本试验条件下，丁酸氯维地平液态脂质体浓度为0.5mg/ml，容量1ml/kg时，对血管组织无刺激性损伤作用。 

 液态丁酸氯维地平脂质体的给予豚鼠的全身主动过敏反应试验

试验共用12只动物，设3个组，每组4只动物，分为供试品组(动物号为1-4)、空白脂质体组(动物号为5-8)，阳性对照组（人血白蛋白）(动物号为9-12)致敏时腹腔注射给药，隔日一次，共3次。激发为致敏末次给药14天后静脉给药。在约40-60秒内注射完毕，实验结果如表4所示。

表4 丁酸氯维地平液态脂质体给予豚鼠的全身主动过敏试验激发后动物反应情况 

*记录表示：阴性- ，阳性+。  

结果显示：激发后，供试品组和空白脂质体组豚鼠未见过敏反应症状。阳性对照组豚鼠表现为不同程度的搔鼻、咳嗽、步态不稳、痉挛、潮式呼吸等过敏反应症状。

丁酸氯维地平液态脂质体对兔红细胞的体外溶血试验

取洁净试管12只编号，1~5号管为供试品溶液管， 6号管为阴性对照管，7号管为阳性对照管。按下表所示依次加入2%兔红细胞悬液和5％葡萄糖注射液，混匀后，放置于37℃±0.5℃恒温箱放置半小时；然后分别加入不同量的丁酸氯维地平液态脂质体或蒸馏水，摇匀，置37℃±0.5℃恒温箱中温育。开始时每隔15分钟观察一次，1小时后，每隔1小时观察一次，观察3小时，测定方法如表5所示。溶液澄明红色，管底无红细胞残留时为完全溶血；溶液澄明红色或棕色，管底有少量红细胞残留为部分溶血；红细胞全部下沉，上层液体无色澄明为无溶血；虽不溶血，溶液中有棕红色或红棕色絮状沉淀，振摇后不分散，表明有红细胞凝聚，实验结果如表6所示。            表5 丁酸氯维地平液态脂质体（0.5mg/ml）测试方法

试管编号	1	2	3	4	5	6	7
								2%红细胞混悬液（ml）	2.5	2.5	2.5	2.5	2.5	2.5	2.5
5%葡萄糖注射液（ml）	2.0	2.1	2.2	2.3	2.4	2.5	-
								供试品（ml）	0.5	0.4	0.3	0.2	0.1	-	-
注射用水（ml）	-	-	-	-	-	-	2.5

表 6 浓度为0.5mg/ml的丁酸氯维地平液态脂质体对2％兔红细胞混悬液的溶血试验结果

   注： 1～5号管为供试品A液管，6号管为阴性对照，7号管为阳性对照

由上述结果可知，在本试验条件下，浓度为 0.5mg/ml丁酸氯维地平液态脂质体在体外对兔红细胞无溶血作用，不引起红细胞凝聚，可供注射使用。

Claims (8)

1.一种丁酸氯维地平液态脂质体制剂，其处方组成包括：0.05%（重量）～0.1%（重量）的丁酸氯维地平、40%（重量）～70%（重量）的磷脂酰胆碱、10%（重量）～40%（重量）的磷脂酰甘油、10%（重量）～30%（重量）的甾醇和0.55%（重量）～3.3%（重量）的稳定剂；其中，稳定剂为组分A和组分B组成的混合物，组分A选自油酸、油酸钠、亚油酸、亚油酸钠中的一种或多种；组分B选自维生素E、辅酶Q10、没食子酸丙酯、抗坏血酸棕榈酸酯中的一种或多种；

其中，组分A占液态脂质体制剂总量的重量百分比为0.5%（重量）～3%（重量），组分B占液态脂质体制剂总量的重量百分比为0.05%（重量）-0.3%（重量）。

2.根据权利要求1所述的丁酸氯维地平液态脂质体制剂，其中磷脂酰胆碱选自大豆磷脂酰胆碱、蛋黄磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、蛋黄卵磷脂中的一种或多种；磷脂酰甘油选自大豆磷脂酰甘油、蛋黄磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的丁酸氯维地平液态脂质体制剂，其中甾醇类选自胆固醇、豆甾醇、谷甾醇中的一种或多种。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的丁酸氯维地平液态脂质体制剂，所述脂质体制剂中脂质体粒径范围为20～200nm。

5.根据权利要求1所述的丁酸氯维地平液态脂质体制剂，其制备方法包括如下步骤：

a.将处方量的丁酸氯维地平在有机溶剂的混合液中搅拌溶解；

b.将磷脂酰甘油在与a相同比例的有机溶剂的混合液中溶解完全后，与a混合；

c.将磷脂酰胆碱、甾醇在与a相同比例的有机溶剂的混合液中溶解，再缓缓滴入组分A和组分B，使其完全溶解；

d.将b、c溶液混合均匀后，干燥将有机溶剂除尽得到含药粉末；

e.取一定量的干燥粉末，加入一定量的浓度为10mM、pH6.0-8.0的PBS缓冲液，温度控制在50-70℃，并以300-500转的速度搅拌1-2小时，得到水化溶液；

f.对所得水化溶液进行高压均质，压力600～1200bar，均质3～10次，得到脂质体液态溶液；

g.将所得的脂质体液态溶液通过0.22μm微孔滤膜过滤，装入西林瓶、充氮后密封。

6.根据权利要求5所述的丁酸氯维地平液态脂质体制剂，其中步骤a中的有机溶剂为甲醇和氯仿混合溶液。

7.根据权利要求6所述的丁酸氯维地平液态脂质体制剂，其中两种有机溶剂的体积比为1:1。

8.根据权利要求5所述的丁酸氯维地平液态脂质体制剂，其中步骤d中干燥方法选自喷雾干燥、旋转蒸发中的任意一种。

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