CN102309689B

CN102309689B - 天麻咀嚼胶剂及其制备及检测方法

Info

Publication number: CN102309689B
Application number: CN 201110279244
Authority: CN
Inventors: 万军; 周霞
Original assignee: Southwest Jiaotong University
Current assignee: Southwest Jiaotong University
Priority date: 2011-09-20
Filing date: 2011-09-20
Publication date: 2013-07-03
Anticipated expiration: 2031-09-20
Also published as: CN102309689A

Abstract

本发明公开了一种天麻咀嚼胶剂及其制备及检测方法，含有：天麻粉12-20％，食品级胶基12-20％，香精0.5-1％，润湿剂20-30％，甜味剂30-50％。本发明产品具有起效快、服用方便、体积小便于携带和储存、含水量少不易受微生物污染和消除口干、不良反应小、释放度良好的优点。在制备上具有易操作的特点。本发明制得释药迅速的咀嚼胶，对于治疗头痛、偏头痛等急性病症具有良好的应用前景。本发明还公开了天麻咀嚼胶剂产品质量控制的检测方法。

Description

天麻咀嚼胶剂及其制备及检测方法

技术领域

本发明涉及中药制剂，尤其是针对头痛、偏头痛等急性病症的嚼胶剂制备技术领域。

背景技术

天麻，为兰科植物天麻Gastrodia elata BL.的干燥块茎，古名赤箭，主产于我国云南、贵州、四川、陕西等地，是我国常用的名贵中药材之一。具有平肝潜阳、息风止痉、祛风通络的功效。主要用于肢体麻木、头痛眩晕、小儿惊风、抽搐癫痫、破伤风等病症。

目前市场上天麻产品有全天麻胶囊、天麻片等常规制剂，但是存在以下问题：(1)起效慢。常规制剂经口服后，药物先在胃肠道中崩解释放，才能被吸收，还存在肝脏首过效应。这一缺点特别不适合用于治疗头痛、偏头痛、过敏、恶心、消化不良、感冒咳嗽、晕动症及某些急性病症。(2)服用不便。常规制剂需要用水送服，不适合儿童及吞咽片剂有困难的老人、有恶心情况的患者。(3)不良反应。由于药物主要通过胃肠道吸收，不可避免肝脏的首过效应，影响生物利用度，为了达到效果需要增加同类药物制剂的用量，使不良反应出现的可能性增加。

发明内容

鉴于现有技术的以上不足，本发明的目的是提供一种天麻咀嚼胶剂。针对治疗头痛、偏头痛等急性病，给出一种新的给药途径和剂型。

本发明的目的还在于，为上述产品研究一种制备方法，使之具有制备操作简单方便，无需昂贵的专用设备，制备成本低的优点。本发明还公开了天麻咀嚼胶剂产品质量控制的检测方法。以保证药品生产全程受控；质量得到有效保证。

本发明的目的是通过如下手段来实现的。

按重量百分比，组料配比为天麻粉12-20％，食品级胶基12-20％，香精0.5-1％，润湿剂20-30％和甜味剂30-50％。具体来说：按重量百分比，组料配比为天麻粉16.5％，食品级胶基16.5％，香精1％，润湿剂25％和甜味剂41％。所述润湿剂是甘油和浓度为60％的山梨醇按1∶1制得的混合物。所述甜味剂是木糖醇和康甜素按2∶3制得的混合物。所述的天麻粉是将天麻直接粉碎或将天麻加水煎煮提取得到的浸膏进行干燥粉碎所得。具体来说：所述的天麻粉是将天麻直接粉碎过九号筛成天麻粉或者将天麻加水煎煮2次，第一次加12倍量水，浸泡1.0小时，煎煮2小时；第二次加10倍量水，煎煮2小时，合并煎液，滤过，滤液高速离心，离心液采用减压浓缩至相对密度1.10的药液，喷雾干燥过九号筛成天麻粉。所述的天麻粉可用其提取物天麻素或天麻多糖替代。

天麻咀嚼胶剂的制备方法：将胶基在60℃的烘箱内软化5h；天麻粉与香精、甜味剂混匀后，加入润湿剂，分三次加入研钵中与胶基挤压混匀，冷却至40℃左右时，投入压面机中挤压成型，经水分平衡老化，老化温度为20℃，相对湿度55％以下，时间10-12h，切割，包装，即得目标咀嚼胶。

为有效控制产品的质量，本发明还给出了天麻咀嚼胶剂主要有效成分天麻素的定性及定量检测方法。

本发明天麻咀嚼胶剂的检测方法：采用薄层色谱法鉴别天麻素，取本品适量，剪碎成直径不超过3mm的颗粒，称取5g，加70％甲醇50ml，超声处理30min，滤过，滤液作为供试品溶液；另取天麻素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；另取缺天麻素阴性样品，同法制成阴性对照溶液；吸取上述供试品溶液10μl，对照品溶液，阴性溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝12∶8∶0.1，10℃放置过夜后的下层液作为展开剂，上行展开，展距12cm，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，观察在供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上的斑点。

本发明中，采用高效液相色谱法测定天麻素含量，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以不同比例乙腈和0.1％磷酸溶液作为流动相梯度洗脱，洗脱条件为：0～10min，乙腈∶0.1％磷酸溶液＝2∶98；10～20min，乙腈∶0.1％磷酸溶液＝2～85∶98～15；20～25min，乙腈∶0.1％磷酸溶液＝85∶15；25～30min，乙腈∶0.1％磷酸溶液＝85～2∶15～98；30～35min，乙腈∶0.1％磷酸溶液＝2∶98；220nm为检测波长；理论板数按天麻素峰计算应不低于2000；精密称取天麻素对照品适量，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液作为对照品溶液；取本品5片，剪碎成直径不超过3mm的颗粒，称取3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称定重量，超声提取30min，取出，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，滤过，取续滤液10ml，浓缩至近干，残渣加乙腈∶水＝2∶98混合溶液溶解，转移至10ml量瓶中，并用乙腈∶水＝2∶98混合溶液稀释至刻度，静置6h，再超声15min，取出，放冷，加40％甲醇补足减失的重量，摇匀，经0.45μm微孔滤膜滤过后，取续滤液作为供试品溶液的制备；分别精密吸取对照品溶液10μl与供试品溶液5～10μl，注入液相色谱仪，测定，用外标一点法计算含量。

与现有技术相比，发明产品存在以下优势：(1)起效快，本产品经人体口腔咀嚼后，从水不溶性胶基中释放，溶解或分散于唾液中，大部分经口腔粘膜下的毛细血管吸收，直接进入体循环，发挥局部或全身治疗作用；少部分经吞咽后进入胃肠道进行吸收，此部分由于无需再经胃肠道消化，其吸收速率大于一般口服制剂，故药物全身性作用起效快。其起效快的特点特别适合用于治疗头痛、偏头痛、过敏、恶心、消化不良、感冒咳嗽、晕动症及某些急性病症。(2)服用方便体积小，便于携带和储存。含水量少，不易受微生物污染。给药时不需要用水送服，且服药时不受时间和地点的影响，能显著改善患者的适应性。适用于儿童及吞咽片剂有困难的老人、有恶心情况的患者。(3)消除口干咀嚼胶可以刺激唾液腺分泌唾液，因而服用咀嚼胶可缓解由于部分药物引起的口干副作用症状。经研究表明，坚持两月每天服用多片咀嚼胶制剂能长期刺激唾液腺，增加唾液流动，特别适合唾液流动慢的患者。而且，口干能引起龋齿发生率增加，咀嚼胶制剂也有利于牙齿的保健。(4)不良反应小由于药物主要通过口腔黏膜吸收，可避免肝脏的首过效应，因而提高了生物利用度。因此，咀嚼胶制剂能降低同类药物制剂的用量，使不良反应相应减少。同时，还可减少与其它药物相互作用带来的副作用。另外，咀嚼胶制剂能控制释药速率，避免产生高的血药达峰浓度，这在一定程度上也减少不良反应的产生。(5)用药危险性小药物需经咀嚼后，方可从咀嚼胶基质内释出。如果意外将咀嚼胶吞入胃肠道，药物需在较长时间后才能释出进入血液循环系统。因此，降低了高浓度血药峰的出现和剂量过量的危险。同时，如果出现药物过敏反应，也能通过及时吐出的方式来减轻过敏反应。

咀嚼类制剂作为一种释药系统，要求必须达到一定的主药释放度。所述的释放度系指口服药物从缓释制剂、控释制剂或肠溶制剂在规定溶剂中释放的速度和程度。对发明产品的制备工艺进行了一系列实验，选择了最优的工艺条件、辅料，使得本产品在20min左右有效成分累积释放度达到90％，做到了释药迅速。

实验例1：制备工艺的正交试验

由于咀嚼胶制剂必须在口腔中停留足够长时间，因而制备咀嚼胶制剂时应特别注意药物的遮味问题。因为大多数药物味觉很难令人满意，如将苦味或金属味放入口中停留10～20min，将引起人体不适。除了口感，处方的组成还会影响产品的外观性状、释放速度等性能，比如润湿剂的用量过多，产品硬度差；用量过少，产品难以成型。经过初步实验研究，食品级胶基12-20％，香精0.5-1％，润湿剂20-30％，甜味剂30-50％可制得质量较好的产品。进一步用正交试验法筛选最优处方配比。

正交试验因素水平表

结果采用9人评分法，从产品的质地、色泽、口感持香性、咀嚼时间等方面进行评分，总分100分，结果见下表。

质量评分表

极差分析表

由实验结果确定，天麻咀嚼胶制备的最佳条件为A₁B₃C₂D₃，即各辅料加入量依次为胶基16.5％，润湿剂25％，甜味剂41％，香精1％，，且通过极差分析确定，影响天麻咀嚼胶品质的主次因素为C＞D＞A＞B。

实验例2：释放度试验

普通口服制剂在胃肠道中崩解释放，通常采用转篮法等模拟胃肠道蠕动；本发明产品采用实验者口腔咀嚼后测定残余药物含量的方法，比较不同释药系统的药物释放速度，结果表明本产品的释药迅速。

(1)市售天麻片的释放度测定

使用转篮法测定释放度。以脱气蒸馏水900mL为溶出介质，温度为(37.0±0.5)℃，转速为100r/min，取天麻片6片分别置于转篮，转篮降入溶出介质中，立即计时至10，20，30，40，50和60min时取样约6mL(同时补充同温介质6mL)，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，精密吸取各时间点续滤液10μL注入液相色谱仪测定天麻素含量。

天麻片累积释放度

(2)本发明的天麻咀嚼胶体外释放度测定

具体操作如下：取一片天麻咀嚼胶样品，由参与实验者咀嚼一定时间，将口腔中残留的咀嚼胶取出，切成小块，冷冻，研磨至细粉，用高效液相色谱法测定其中天麻素含量，咀嚼时所释放的药量是从总成分中减去残余的天麻素量。依次分别咀嚼5，10，15，20，25和30min。6名实验者，依照此法操作，每人6片。

采集数据，分析不同时间天麻咀嚼胶中天麻素的释放行为，确定天麻咀嚼胶中天麻素达最大释放度的咀嚼时间。结果表明在20min时，天麻咀嚼胶的释放度就达到90％。

天麻咀嚼胶累积释放度

实验例3水分测定

水分过高容易软化变质，但是水分含量过低，咀嚼胶制剂又会产生质地过硬，容易折断，咀嚼感和口感均较差的现象。所以本产品经过辅料和工艺的筛选，可以将成品水分控制在不大于3％的范围内。比如本品的老化工艺能使咀嚼胶内部组织达到稳定状态，同时除去多余水分，达到水分平衡而其硬化的目的，以保证成型工序的顺利进行。为了确保品质，冷却不宜过度，否则容易受潮变软、变质。因此必须严格控制温度和湿度。本品最优老化条件为：温度20℃，相对湿度55％以下，时间10-12h。

水分测定方法：取供试品2～5g(先破碎成直径不超过3mm的颗粒或碎片)，平铺于干燥至恒重的扁形称瓶中，厚度不超过5mm，疏松供试品不超过10mm。精密称定，打开瓶盖，在100～105℃干燥5h。将瓶盖盖好，移入干燥器中，冷却30min。精密称定重量，再在上述温度干燥1h，冷却，称重，至两次连续称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量，计算供试品中含水量(％)。差值＝初值(即烘前重量)-烘后重量；含水量(％)＝差值/初值*100％，结果见下表。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的实施作进一步的描述，实施例所用试剂均为食品级或药用级。

实施例1

制备本发明组料配比的咀嚼胶：取天麻粉(将天麻粉碎成粉末过九号筛制得)16.5g、食品级胶基(符合《食品添加剂使用卫生标准》(GB2760-2007)相关要求)16.5g、香精1g、润湿剂25g、甜味剂41g；将香精、甜味剂(木糖醇和康甜素按2∶3制得的混合物)分别过九号筛后与天麻粉混匀；胶基在60℃的烘箱内软化5h，将已与香精、甜味剂混匀的天麻粉、润湿剂(甘油和浓度为70％的山梨醇按1∶1制得的混合物)分三次加入研钵中与胶基挤压混匀，冷却至40℃左右时，投入压面机中挤压成型，经水分平衡老化，老化温度为20℃，相对湿度55％以下，时间10-12h，切割，包装，即得咀嚼胶。所述咀嚼胶的水分≤3％，有效成分天麻素在20min内累计释放度达到90％。本产品一日3次，每次3g，每次咀嚼20min。

实施例2

制备本发明组料配比的咀嚼胶：将天麻加水煎煮2次，第一次加12倍量水，浸泡1.0小时，煎煮2小时；第二次加10倍量水，煎煮2小时，合并煎液，滤过，滤液高速离心，离心液采用减压浓缩至相对密度约1.10(60℃)的药液，喷雾干燥后过九号筛成天麻粉；取天麻粉16.5g、食品级胶基16.5g、香精1g、润湿剂25g、甜味剂41g；将香精和甜味剂(木糖醇和康甜素按1∶2制得的混合物)也分别过九号筛后与天麻粉混匀；胶基在60℃的烘箱内软化5h，将已与香精、甜味剂混匀的天麻粉、润湿剂(甘油和浓度为60％的山梨醇按1∶1制得的混合物)分三次加入研钵中与胶基挤压混匀，冷却至40℃左右时，投入压面机中挤压成型，经水分平衡老化，老化温度为20℃，相对湿度55％以下，时间10-12h，切割，包装，即得咀嚼胶。

实施例3

制备本发明组料配比的咀嚼胶：取天麻粉(将天麻进行超微粉碎后制得)12g、食品级胶基12g、香精0.5g、润湿剂25.5g、甜味剂50g；将香精和甜味剂(木糖醇)分别过九号筛后与天麻粉混匀，胶基在60℃的烘箱内软化5h，将已与香精、甜味剂混匀的天麻粉、润湿剂(甘油)分三次加入研钵中与胶基挤压混匀，冷却至40℃左右时，投入压面机中挤压成型，经水分平衡老化后，切割，包装，即得咀嚼胶。

实施例4

制备本发明组料配比的咀嚼胶：取天麻粉(将天麻粉碎成粉末过九号筛制得)20g、食品级胶基20g、香精1g、润湿剂29g、甜味剂30g；香精和甜味剂(康甜素)分别过九号筛后与天麻粉混匀，胶基在60℃的烘箱内软化5h，将已与香精、甜味剂混匀的天麻粉、润湿剂(浓度为70％的山梨醇溶液)分三次加入研钵中与胶基挤压混匀，冷却至40℃左右时，投入压面机中挤压成型，经水分平衡老化后，切割，包装，即得咀嚼胶。

在具体实施时，天麻粉可用其提取物天麻素、天麻多糖替代。

实施例5

制备本发明组料配比的咀嚼胶：取天麻素17.2g、食品级胶基15g、香精0.8g、润湿剂30g、甜味剂37g；将天麻素、香精和甜味剂(玉米糖浆)分别过九号筛后混匀，胶基在60℃的烘箱内软化5h，将已与香精、甜味剂混匀的天麻素、润湿剂(亚油酸)分三次加入研钵中与胶基挤压混匀，冷却至40℃左右时，投入压面机中挤压成型，经水分平衡老化后，切割，包装，即得咀嚼胶。

实施例6

制备本发明组料配比的咀嚼胶：取天麻多糖18.4g、食品级胶基15g、香精0.6g、润湿剂20g、甜味剂46g；将天麻多糖、香精和甜味剂(木糖醇和康甜素按1∶1制得的混合物)分别过九号筛后混匀，胶基在60℃的烘箱内软化5h，将已与香精、甜味剂混匀的天麻多糖、润湿剂(甘油和浓度为70％的山梨醇按1∶2制得的混合物)分三次加入研钵中与胶基挤压混匀，冷却至40℃左右时，投入压面机中挤压成型，经水分平衡老化后，切割，包装，即得咀嚼胶。

实施例7

制备本发明组料配比的咀嚼胶：将天麻加水煎煮3次，每次加10倍量水，煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浸膏，干燥粉碎得天麻粉；取天麻粉18.5g、食品级胶基16g、香精0.5g、润湿剂20g、甜味剂45g；将香精和甜味剂(木糖醇和康甜素按1∶2制得的混合物)分别过九号筛后与天麻粉混匀；胶基在60℃的烘箱内软化5h，将已与香精、甜味剂混匀的天麻粉、润湿剂(甘油和浓度为60％的山梨醇按1∶1制得的混合物)分三次加入研钵中与胶基挤压混匀，冷却至40℃左右时，投入压面机中挤压成型，经水分平衡老化，老化温度为20℃，相对湿度55％以下，时间10-12h，切割，包装，即得咀嚼胶。

咀嚼胶制剂产品中的水分和活性物质的检测是控制本发明产品的有效方法。

实施例8咀嚼胶中天麻素的含量测定

天麻素标准曲线的绘制：精密称取天麻素对照品10.05mg，置于10ml量瓶中，加70％甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液①(C₁＝1.005mg/ml)备用。从对照品溶液①中精密吸取0.5ml置于10ml量瓶中，加70％甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液②(C₂＝50.25μg/ml)，备用。

分别精密吸取不同浓度对照品溶液②和对照品溶液①10ul，注入HPLC仪，绘制标准曲线，测定结果见下表。

天麻素对照品标准曲线测定结果

天麻素进样量在0.1005～1.005μg范围内与峰面积呈很好的线性关系，回归方程及相关系数：Y＝7.6427×10³+5.24947×10⁵X，R＝0.9996(X为天麻素进样量，单位μg，Y为峰面积)；以进样量(μg)为横坐标(X)，峰面积(A)为纵坐标(Y)绘制标准曲线。

照高效液相色谱法(中国药典2010版一部附录VI D)测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以不同比例乙腈和0.1％磷酸溶液作为流动相梯度洗脱，洗脱条件为：0～10min，乙腈∶0.1％磷酸溶液＝2∶98；10～20min，乙腈∶0.1％磷酸溶液＝2～85∶98～15；20～25min，乙腈∶0.1％磷酸溶液＝85∶15；25～30min，乙腈∶0.1％磷酸溶液＝85～2∶15～98；30～35min，乙腈∶0.1％磷酸溶液＝2∶98；检测波长为220nm。理论板数按天麻素峰计算应不低于2000。

对照品溶液的制备精密称取天麻素对照品适量，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品5片，剪碎成直径不超过3mm的颗粒，称取3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称定重量，超声提取30min，取出，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，滤过，取续滤液10ml，浓缩至近干，残渣加乙腈-水(2∶98)混合溶液溶解，转移至10ml量瓶中，并用乙腈-水(2∶98)混合溶液稀释至刻度，静置6h，再超声15min，取出，放冷，加40％甲醇补足减失的重量，摇匀，经0.45μm微孔滤膜滤过后，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液10μl与供试品溶液5～10μl，注入液相色谱仪，测定。结果见下表。

实施例9：薄层色谱鉴别

取本品适量，剪碎成直径不超过3mm的颗粒，称取5g，加70％甲醇50ml，超声处理30min，滤过，滤液作为供试品溶液；另取天麻素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；另取缺天麻素阴性样品，同法制成阴性对照溶液；吸取上述供试品溶液10μl，对照品溶液，阴性溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝12∶8∶0.1，10℃放置过夜后的下层液作为展开剂，上行展开，展距12cm，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，在供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照品溶液无干扰。

Claims

1.天麻咀嚼胶剂，其特征在于：按重量百分比，组料配比为天麻粉16.5％，食品级胶基16.5％，香精1％，润湿剂25％和甜味剂41％；所述润湿剂是甘油和浓度为60％的山梨醇按1∶1制得的混合物；所述甜味剂是木糖醇和康甜素按2∶3制得的混合物；所述的天麻粉是将天麻加水煎煮2次，第一次加12倍量水，浸泡1.0小时，煎煮2小时；第二次加10倍量水，煎煮2小时，合并煎液，滤过，滤液高速离心，离心液采用减压浓缩至相对密度1.10的药液，喷雾干燥过九号筛成天麻粉；

所述天麻咀嚼胶剂采用如下的工艺制得：将胶基在60℃的烘箱内软化5h；天麻粉与香精、甜味剂混匀后，加入润湿剂，分三次加入研钵中与胶基挤压混匀，冷却至40℃左右时，投入压面机中挤压成型，经水分平衡老化，老化温度为20℃，相对湿度55％以下，时间10-12h，切割，包装，即得目标咀嚼胶。

2.根据权利要求1所述的天麻咀嚼胶剂，其特征在于：所述的天麻粉可用其提取物天麻素或天麻多糖替代。

3.权利要求1或2所述之天麻咀嚼胶剂的检测方法，其特征在于，采用薄层色谱法鉴别天麻素，取本品适量，剪碎成直径不超过3mm的颗粒，称取5g，加70％甲醇50ml，超声处理30min，滤过，滤液作为供试品溶液；另取天麻素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；另取缺天麻素阴性样品，同法制成阴性对照溶液；吸取上述供试品溶液10μl，对照品溶液，阴性溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷：甲醇：水=12∶8∶0.1，10℃放置过夜后的下层液作为展开剂，上行展开，展距12cm，取出，晾干，喷以10％磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，观察在供试品色谱中与对照品色谱相应的位置上的斑点。

4.权利要求1或2所述的天麻咀嚼胶剂的检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱法测定天麻素含量，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以不同比例乙腈和0.1％磷酸溶液作为流动相梯度洗脱，洗脱条件为：0～10min，乙腈：0.1％磷酸溶液=2∶98；10～20min，乙腈：0.1％磷酸溶液=2～85∶98～15；20～25min，乙腈：0.1％磷酸溶液=85∶15；25～30min，乙腈：0.1％磷酸溶液=85～2∶15～98；30～35min，乙腈：0.1％磷酸溶液=2∶98；220nm为检测波长；理论板数按天麻素峰计算应不低于2000；精密称取天麻素对照品适量，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液作为对照品溶液；取本品5片，剪碎成直径不超过3mm的颗粒，称取3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称定重量，超声提取30min，取出，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，滤过，取续滤液10ml，浓缩至近干，残渣加乙腈：水=2∶98混合溶液溶解，转移至10ml量瓶中，并用乙腈：水=2∶98混合溶液稀释至刻度，静置6h，再超声15min，取出，放冷，加40％甲醇补足减失的重量，摇匀，经0.45μm微孔滤膜滤过后，取续滤液作为供试品溶液的制备；分别精密吸取对照品溶液10μl与供试品溶液5～10μl，注入液相色谱仪，测定，用外标一点法计算含量。