CN102293802B

CN102293802B - 一种治疗心血管疾病的药物组合物及其制备方法

Info

Publication number: CN102293802B
Application number: CN201010209654.7A
Authority: CN
Inventors: 尹笠佥; 殷惠军; 史大卓; 张益胜; 徐芳菲; 单强
Original assignee: JILIN JI'AN YISHENG PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: JILIN JI'AN YISHENG PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date: 2010-06-25
Filing date: 2010-06-25
Publication date: 2014-06-18
Anticipated expiration: 2030-06-25
Also published as: CN102293802A

Abstract

本发明公开了一种治疗心血管疾病的药物组合物及其制备方法，本发明药物组合物的原料药由西洋参茎叶和银杏叶、西洋参茎叶总皂苷提取物和银杏叶提取物组成，本发明药物组合物可有效抵抗急性心肌梗死大鼠梗死心肌缺血损伤，减小心梗面积，提高心肌耐缺氧能力，改善血管内皮功能，抗动脉血栓形成，同时经过协同实验表明本发明药物组合物原料药西洋参茎叶与银杏叶二者配伍具有协同增效作用，比单用西洋参茎叶或银杏叶的效果大大提高，且毒性低，安全性高，稳定性好。

Description

一种治疗心血管疾病的药物组合物及其制备方法

发明领域

本发明涉及一种药物组合物及其制备方法，特别涉及一种治疗心血管疾病的药物组合物及其制备方法。

背景技术

冠心病心绞痛是一种由心肌暂时缺血缺氧所引起的，以发作性胸痛或胸部不适为主要表现的临床综合征。心绞痛常发生于劳力、情绪激动或其它因素使心肌耗氧量增加时，疼痛常可放射至左肩、颈咽或下颌部，休息或含硝酸甘油几分钟内缓解。心绞痛发作时心电图常可见暂时性ST段改变或伴有T波变化，冠脉造影可见冠状动脉管腔狭窄。

上世纪80年代，冠心病介入治疗的开展及普及成为冠心病治疗史上里程碑式的发展。但新近大规模临床研究表明，介入治疗并未减少患者因症状复发而再住院的发生率，也未能降低长期心脏终点事件的发生。对于II、III级稳定型心绞痛及低危不稳定心绞痛患者，药物治疗与介入治疗相比，在减少心源性死亡、非致死性心梗等长期终点事件发生率方面并无显著差异，且药物治疗更为经济。

冠心病心绞痛属于中医“胸痹”、“心痛”、“厥心痛”、“真心痛”等范畴。本病多因中老年脏腑功能渐衰，高粱厚味损伤脾胃，或七情内伤所致气滞、血瘀、痰浊内生，使脉络不通，不通则痛而发病。通过分型辨证选用适宜的中成药，对于改善上述症状、控制病情有较好的疗效。中医药治疗冠心病心绞痛，在缓解心绞痛和改善生活质量等方面具有一定优势，显示了良好应用前景。如何发挥中医优势，进一步提高临床疗效，改善长期预后，是中医或中西医结合防治心血管病领域面对的重大问题。

发明内容

本发明的目的在于公开一种治疗心血管疾病的药物组合物，本发明的另一个目的在于公开该药物组合物的制备方法。

本发明目的是通过如下方案实现的：

本发明药物组合物的原料药组成为：

西洋参茎叶 0.07-0.6重量份银杏叶 1重量份；

本发明药物组合物的原料药组成优选为：

西洋参茎叶 0.14重量份银杏叶 1重量份；

本发明药物组合物的原料药组成优选为：

西洋参茎叶 0.4重量份银杏叶 1重量份。

本发明药物组合物的原料药组成为：

西洋参茎叶总皂苷提取物 0.35-4重量份银杏叶提取物 1重量份；

本发明药物组合物的原料药组成优选为：

西洋参茎叶总皂苷提取物 0.7重量份银杏叶提取物 1重量份；

或

西洋参茎叶总皂苷提取物 2重量份银杏叶提取物 1重量份；

或

西洋参茎叶总皂苷提取物 3重量份银杏叶提取物 1重量份；

或

西洋参茎叶总皂苷提取物 1.4重量份银杏叶提取物 1重量份。

本发明药物组合物的制备方法为：

西洋参茎叶总皂苷提取物的制备方法：取干燥的西洋参茎叶置于多能式中药提取罐中，按干燥的西洋参茎叶与纯化水的质量比为1∶4-20、1∶3-16和1∶3-16分别加入纯化水，分别提取1.5-3h、1-3h、0.5-2.5h，3次提取液分别粗滤，合并滤液，导入醇沉罐中，静置放冷20-30h，吸取上清液，纱网滤过，进D101大孔树脂柱吸附皂苷，控制柱流速1～4L/分，待树脂吸附饱和后，用纯化水洗至无色，再用70-90％V/V的乙醇洗脱，控制柱流速2～6L/分，收集洗脱液，导入真空浓缩回收罐中，回收乙醇，收集浓缩液，浓缩液置乙醇沉淀罐中，加入90-95％V/V的乙醇160-200L充分搅匀后静置20-30h，上清液抽入真空浓缩回收罐中，残渣用90-95％V/V的乙醇洗涤1-3次，洗液抽入真空浓缩回收罐中，与上清液合并，回收乙醇，在20℃下，药液浓缩至相对密度为1.05-1.10，收集浓缩液，浓缩液导入喷雾干燥机中，控制温度177-183℃，控制莫诺泵20-30转/分，进行喷雾干燥，收集西洋参茎叶总皂苷提取物，密封保存；

银杏叶提取物的制备方法：将干燥银杏叶粉碎，取干燥银杏叶粉末适量，按干燥银杏叶粉末与乙醇的质量比为1∶3-16，加入60-80％V/V的乙醇回流提取1-3次，每次1-3h，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，在50℃下浓缩至密度为1.0，浓缩液加水稀释，过滤，滤液上D201大孔树脂，先用2～6重量倍柱体积的水洗脱，再用2～6重量倍柱体积的70-90％V/V的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，减压浓缩，在条件为-0.09Mpa，55℃下真空干燥，粉碎，得到银杏叶提取物。

本发明药物组合物的制备方法优选为：

西洋参茎叶总皂苷提取物的制备方法：取干燥的西洋参茎叶置于多功能式中药提取罐中，按干燥的西洋参茎叶与纯化水的质量比为1∶8、1∶6和1∶6分别加入纯化水，分别提取2.5h、2h、1.5h，3次提取液分别粗滤，合并滤液，导入醇沉罐中，静置放冷24h，吸取上清液，纱网滤过，进D101大孔树脂柱吸附皂苷，控制柱流速2～3L/分，待树脂吸附饱和后，用纯化水洗至无色，再用80％V/V的乙醇洗脱，控制柱流速3～5L/分，收集洗脱液，导入真空浓缩回收罐中，回收乙醇，收集浓缩液，浓缩液置乙醇沉淀罐中，加入95％V/V的乙醇180L，充分搅匀后静置24h，上清液抽入真空浓缩回收罐中，残渣用95％V/V的乙醇洗涤2次，洗液抽入真空浓缩回收罐中，与上清液合并，回收乙醇，在20℃下，药液浓缩至相对密度为1.05-1.10，收集浓缩液，浓缩液导入喷雾干燥机中，控制温度177-183℃，控制莫诺泵25转/分，进行喷雾干燥，收集西洋参茎叶总皂苷提取物，密封保存；见图2。

银杏叶提取物的制备方法：将干燥银杏叶粉碎，取干燥银杏叶粉末适量，按干燥银杏叶粉末与乙醇的质量比为1∶6，加入70％V/V的乙醇回流提取2次，每次2h，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，在50℃下浓缩至密度为1.0，浓缩液加水稀释，过滤，滤液上D201大孔树脂，先用3～4重量倍柱体积的水洗脱，再用3～4重量倍的80％V/V的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，减压浓缩，在条件为-0.09Mpa，55℃下真空干燥，粉碎，得到银杏叶提取物；见图1。

其中本发明西洋参茎叶总皂苷提取物优选参照中国药典2005年版第一部附录VA的方法，采用紫外-可见分光光度法，以人参皂苷Re为对照品，测定西洋参茎叶总皂苷提取物中总皂苷含量为70-90％，优选西洋参茎叶总皂苷提取物中总皂苷含量为75-86％。

其中本发明银杏叶提取物优选参照中国药典2005年版第一部附录VA的方法，测定银杏叶提取物中黄酮苷含量不低于20-30％，银杏萜内脂含量不低于4-10％，优选银杏叶提取物中黄酮苷含量不低于20-24％，银杏萜内脂含量不低于4-6％。

取上述原料药，混合均匀后，加入常规辅料，按照常规工艺制成临床上可接受的颗粒剂、片剂、胶囊剂、丸剂、缓释制剂、口服液体制剂或注射剂等。

本发明药物组合物的比例范围以西洋参茎叶总皂苷提取物中总皂苷和银杏叶提取物中黄酮苷、银杏萜内脂的含量为基础涵盖了不同的提取率，当提取率高时，投放的原料药就少，提取率低，则相应增加原料药的投放。

本发明药物组合物可有效抵抗急性心肌梗死大鼠梗死心肌缺血损伤，减小心梗面积，提高心肌耐缺氧能力，改善血管内皮功能，抗动脉血栓形成；经过协同实验表明本发明药物组合物原料药西洋参茎叶与银杏叶二者配伍具有协同增效作用，比单用西洋参茎叶或银杏叶的效果大大提高，且毒性低，安全性高，稳定性好。

附图说明

图1是银杏叶提取物的提取纯化工艺流程图。

图2是西洋参茎叶总皂苷提取物的提取纯化工艺流程图。

下述实验例和实施例均用于说明但不限于本发明。

实验例1 抗心肌细胞缺氧损伤作用的药效学研究(体外实验)

1.实验方法

(1)心肌细胞培养及缺氧模型的建立：乳鼠无菌操作取出心脏，磷酸缓冲液(PBS)洗去血液，去心房将心室肌用PBS冲洗三遍，并以眼科剪剪成1mm3小块，加入10ml浓度为0.125％(w/w)胰蛋白酶溶液，37℃消化10min，自然沉淀后去上清液，同样方法再消化5次(组织块完全消化为止)。收集上清液，加冷PBS终止消化。1500r/min离心5min，细胞沉淀用20％胎牛血清的DMEM培养基制成细胞悬液，并以1×10⁹个/L浓度接种到培养瓶中。加入5％CO₂(v/v)，37℃培养1～2h，吸出细胞悬液，再接种至培养瓶中继续培养，每2～3d换液。培养出的心肌细胞以透射电镜观察其肌小节结构作为鉴定。实验前24h按1×10¹⁰个/L浓度接种至培养瓶中更换成无血清培养基，24h后将培养瓶转至厌氧培养箱中，抽真空至0.1MPa，以95％N₂(v/v)，5％CO₂(v/v)填充，培养3h后制成缺氧模型，并移至CO₂培养箱中常规继续培养1h。缺氧损伤前8h进行药物干预。

(2)分组：正常对照组仅在CO₂培养箱中培养，不经缺氧处理或药物干预；缺氧损伤组细胞经缺氧处理，不予药物干预；药物干预组细胞用实施例1方法制备的组合物干预后，再予缺氧处理。

(3)指标测定：取各组样本细胞培养上清液，按照试剂盒操作说明书，在340nm处测定乳酸脱氢酶(LDH)含量。收集接种于24孔板的心肌细胞，取各组样本细胞裂解液，用黄嘌呤氧化酶法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性，用硫代巴比妥酸比色法测定细胞内丙二醛(MDA)含量，实验操作按试剂盒说明书进行。接种于24孔板爬片培养的心肌细胞，用细胞凋亡试剂盒染色，37℃孵育5min，PBS清洗2次，在荧光倒置显微镜下观察，计数1000个细胞，计算细胞凋亡率。

2.统计方法

采用SPSS13.0软件进行统计分析，所有数据用均数±标准差

表示，计量资料用单因素方差分析，组间比较用q检验，P＜0.05认为有统计学意义。

3.实验结果

见表1。缺氧后心肌细胞受到损伤，与缺血损伤组比较，LDH、SOD及MDA在正常对照组、组合物干预组明显降低(P＜0.05，P＜0.01)；细胞凋亡率方面，缺血损伤组与正常对照组、组合物干预组比较有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)。

表1组合物抗心肌细胞缺氧损伤的实验结果比较

注：与缺血损伤组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

实验例2抗大鼠心肌缺血损伤作用的药效学研究

1.实验方法

(1)冠状动脉结扎法致大鼠心肌缺血模型的建立和实验分组：健康清洁级SD大鼠80只，体重180±20g，雄性。(中国科学院遗传研究所动物中心提供)，随机分为4组：假手术组、模型对照组、阳性药对照组(给与倍他乐克)和组合物组(组合物由实施例1方法制备，按成人剂量换算成大鼠剂量后给药)，每组20只，分别给予相应药物2周后，腹腔注射20％乌拉坦(w/w)麻醉，给药剂量为5mL·kg^-1。钝性分离肌肉，打开胸腔，轻挤出心脏，在肺动脉圆锥与左心耳交界处下1～2mm用无创手术线结扎左冠状动脉前降支，以结扎部位下心肌组织变白和体表心电图肢体II导联出现ST段弓背向上抬高，持续半小时以上作为模型成功的标志。假手术组开胸后，在造模对等位置只穿线不结扎。(造模过程中具有一定死亡率，造模后n＝18)，造模8h后开始灌胃假手术组、模型对照组给与等量生理盐水，用药组给与相应药物，连续给药14d后，处死。各组大鼠麻醉后，腹主动脉采血3ml注入含0.2ml的20g/L EDTA-Na₂的塑料管内，于1h内3000r/min离心10min，取血浆分装于EP管内，-80℃保存备用。取出心脏，0.9％盐水(w/w)心脏灌注，至肉眼下流出清液为止，截取缺血部位心肌组织分装后，-80℃保存备用。

(2)心肌缺血面积测定：每组取8只动物，采用定量组织学硝基四氮唑蓝(NBT)染色法测定心肌缺血面积，SONY P72型数码照相机逐层摄片保存，经Image Pro Plus 4.0图像分析系统分别检测计算心肌梗死面积、心肌梗死区占心室及心脏面积的百分率。

(3)心肌病理形态学观察：每组取2只动物，麻醉后处死，立即取出心脏，置于10％甲醛溶液(v/v)中固定，脱水，石蜡包埋，常规切片，苏木精-伊红染色后在光镜下观察梗死及缺血心肌病理改变情况。

(4)心肌酶、心肌损伤标志物的检测：应用化学发光法试剂盒检测血清肌钙蛋白I(cTnI)、免疫法试剂盒检测磷酸肌酸激酶(CK)、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量，严格按照试剂盒说明书操作。

(5)心肌组织内皮活性物质的检测：血清降钙素基因相关肽(calcitoningene-related peptide，CGRP)及内皮素-1(endothelin-1，ET-1)的含量，应用放射免疫试剂盒检测。

(6)心肌组织氧化、抗氧化指标的检测：从心脏取组织块0.2-1.0g，冷盐水冲洗，除去血液，滤纸拭干，称质量，放入10ml小烧杯内，按1∶10加冷盐水，置于冰上尽快剪碎，用内切式匀浆器制成10％的匀浆(w/w)，离心10min(3000r/min)，取上清液，收集组织匀浆。应用生化试剂盒检测心肌组织匀浆的超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽-S转移酶(GST)活性及丙二醛(MDA)的含量。

2.统计方法

采用SPSS13.0软件进行统计分析，所有数据用均数±标准差

3.实验结果

(1)心肌缺血面积

见表2。假手术组大鼠心肌染成暗蓝色，梗死区心肌不着色；模型组大鼠梗死严重；阳性药组、组合物组大鼠梗死面积明显缩小，梗死区/心室(心脏)百分率降低，与模型组比较差异有显著性(P＜0.05)，SMI高、低剂量组比较无显著性差异。

表2大鼠心肌NBT染色结果比较

注：与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

(2)病理形态学观察

HE染色光镜观察见：假手术大鼠心肌细胞排列整齐，着色均匀，胞膜完整，无变性、坏死等改变；模型组大鼠梗死区心肌细胞排列紊乱，着色不均匀，部分区域心肌细胞浊肿，心肌纤维横纹不清或消失，核裂解消失；阳性药组、组合物组梗死区亦有心肌细胞变性、坏死改变，但程度较轻，着色相对均匀，水肿变性减轻，心肌坏死范围较小。图略。

(3)心肌酶、心肌损伤标志物

见表3。与模型组比较，组合物能显著降低梗死后大鼠血清、心肌损伤标志物cTnI、心肌酶CK、CK-MB的含量(P＜0.05，P＜0.01)。

表3大鼠血清心肌酶、心肌损伤标志物结果比较

注：与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

(4)心肌组织内皮活性物质

见表4。与模型组比较，组合物能显著降低内皮活性物质ET-1水平(P＜0.05，P＜0.01)，但对于CGRP只有促使其降低的趋势。

表4大鼠心肌组织内皮活性物质检测结果比较

注：与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

(5)心肌组织氧化、抗氧化指标

见表5。与模型组比较，组合物能显著升高梗死后大鼠心肌T-SOD和GSH-Px活性，降低MDA和GST含量(P＜0.05，P＜0.01)。

表5大鼠心肌氧化、抗氧化指标结果比较

注：与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

4.结论

综合上述结果，本发明药物组合物可有效抵抗急性心肌梗死大鼠梗死心肌缺血损伤，减小心梗面积，提高心肌耐缺氧能力，改善血管内皮功能。

实验例3 本发明药物组合物原料药的制备及协同实验

1.样品及给药剂量

(1)西洋参茎叶总皂苷提取物与银杏叶提取物组合物样品

按质量比为0.7∶1的比例取实施例1制备的西洋参茎叶总皂苷提取物和银杏叶提取物混合物700mg，按308mg/kg剂量灌胃给予大鼠，观察药效作用。

(2)西洋参茎叶总皂苷提取物样品

取实施例1制备的西洋参茎叶总皂苷提取物700mg(含西洋参总皂苷340mg)，按308mg/kg剂量灌胃给予大鼠，观察药效作用。

(3)银杏叶提取物样品

取实施例1制备的银杏叶提取物700mg(含银杏黄酮168mg，银杏萜内酯42mg)，按308mg/kg剂量灌胃给予大鼠，观察药效作用。

2.药效作用研究

采用大鼠对本发明药物组合物和其原料药的药效作用进行了比较。实验分组：假手术组、模型组、阳性药组、本发明药物组合物组、银杏叶提取物组和西洋参茎叶总皂苷组。观测指标：

表6药效比较结果

实验结果说明，本发明药物组合物组的药效作用明显优于西洋参茎叶总皂苷提取物或银杏叶提取物单独用药组。

实验例4本发明药物制剂的配比筛选试验

根据益气活血配伍原则，通过筛查了西洋参茎叶总皂苷与银杏叶有效组分比例为1∶1、2∶1、3∶1和4∶1的组合物(组合物由实施例1方法制备，分别相当于西洋参茎叶总皂苷提取物与银杏叶提取物的质量比为0.35∶1、0.7∶1、1.1∶1和1.4∶1)的药效作用，以大鼠的心肌坏死标志物TnI含量、心肌梗死面积为考察指标，比较各不同比例提取物的药效作用，结果见表7。

表7不同比例的西洋参茎叶总皂苷与银杏叶有效组分的药效差异比较

注：与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

实验结果说明，西洋参茎叶总皂苷与银杏叶有效组分的最佳比例为2∶1(相当于西洋参茎叶总皂苷提取物与银杏叶提取物的质量比为0.7∶1)。

下述实施例均能实现上述实验例的效果。

具体实施方式

实施例1：胶囊剂

取干燥的西洋参茎叶置于多能式中药提取罐中，按干燥的西洋参茎叶与纯化水的质量比为1∶8、1∶6和1∶6分别加入纯化水，分别提取2.5h、2h、1.5h，3次提取液分别粗滤，合并滤液，导入醇沉罐中，静置放冷24h，吸取上清液，纱网滤过，进D101大孔树脂柱吸附皂苷，控制柱流速2～3L/分，待树脂吸附饱和后，用纯化水洗至无色，再用80％V/V的乙醇洗脱，控制柱流速3～5L/分，收集洗脱液，导入真空浓缩回收罐中，回收乙醇，收集浓缩液，浓缩液置乙醇沉淀罐中，加入95％V/V的乙醇180L，充分搅匀后静置24h，上清液抽入真空浓缩回收罐中，残渣用95％V/V的乙醇洗涤2次，洗液抽入真空浓缩回收罐中，与上清液合并，回收乙醇，在20℃下，药液浓缩至相对密度为1.05-1.10，收集浓缩液，浓缩液导入喷雾干燥机中，控制温度177-183℃，控制莫诺泵25转/分，进行喷雾干燥，收集西洋参茎叶总皂苷提取物，密封保存。

其中西洋参茎叶总皂苷提取物参照中国药典2005年版第一部附录VA的方法，采用紫外-可见分光光度法，以人参皂苷Re为对照品，测定西洋参茎叶总皂苷提取物中总皂苷含量为85％。

将干燥银杏叶粉碎，取干燥银杏叶粉末适量，按干燥银杏叶粉末与乙醇的质量比为1∶6，加入70％V/V的乙醇回流提取2次，每次2h，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，在50℃下浓缩至密度为1.0，浓缩液加水稀释，过滤，滤液上D201大孔树脂，先用3～4重量倍柱体积的水洗脱，再用3～4重量倍柱体积的80％V/V的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，减压浓缩，在条件为-0.09Mpa，55℃下真空干燥，粉碎，得到银杏叶提取物。

其中银杏叶提取物参照中国药典2005年版第一部附录VA的方法，测定银杏叶提取物中黄酮苷含量不低于24％，银杏萜内脂含量不低于6％。

取上述西洋参茎叶总皂苷提取物47.1g和银杏叶提取物66.7g，充分混匀，加入常规辅料，按照常规工艺，制成胶囊剂，每粒胶囊0.3g，含西洋参茎叶总皂苷40mg，含银杏黄酮苷16mg，银杏萜内脂4mg。成人日用量：2粒/次，3次/日。

实施例2：片剂

取干燥的西洋参茎叶置于多能式中药提取罐中，按干燥的西洋参茎叶与纯化水的质量比为1∶12、1∶9和1∶8分别加入纯化水，分别提取2h、1.5h、1h，3次提取液分别粗滤，合并滤液，导入醇沉罐中，静置放冷20h，吸取上清液，纱网滤过，进D101大孔树脂柱吸附皂苷，控制柱流速1～2L/分，待树脂吸附饱和后，用纯化水洗至无色，再用75％V/V的乙醇洗脱，控制柱流速2～4L/分，收集洗脱液，导入真空浓缩回收罐中，回收乙醇，收集浓缩液，浓缩液置乙醇沉淀罐中，加入90％V/V的乙醇160L，充分搅匀后静置20h，上清液抽入真空浓缩回收罐中，残渣用90％V/V的乙醇洗涤3次，洗液抽入真空浓缩回收罐中，与上清液合并，回收乙醇，在20℃下，药液浓缩至相对密度为1.05-1.10，收集浓缩液，浓缩液导入喷雾干燥机中，控制温度177-183℃，控制莫诺泵20转/分，进行喷雾干燥，收集西洋参茎叶总皂苷提取物，密封保存。

其中西洋参茎叶总皂苷提取物参照中国药典2005年版第一部附录VA的方法，采用紫外-可见分光光度法，以人参皂苷Re为对照品，测定西洋参茎叶总皂苷提取物中总皂苷含量为83％。

将干燥银杏叶粉碎，取干燥银杏叶粉末适量，按干燥银杏叶粉末与乙醇的质量比为1∶10，加入65％V/V的乙醇回流提取3次，每次3h，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，在50℃下浓缩至密度为1.0，浓缩液加水稀释，过滤，滤液上D201大孔树脂，依次用2～3重量倍柱体积的水洗脱，再用2～3重量倍柱体积75％V/V的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，减压浓缩，在条件为-0.09Mpa，55℃下真空干燥，粉碎，得到银杏叶提取物。

其中银杏叶提取物参照中国药典2005年版第一部附录VA的方法，测定银杏叶提取物中黄酮苷含量不低于20％，银杏萜内脂含量不低于4％。

取上述西洋参茎叶总皂苷提取物52.9g和银杏叶提取物50g，充分混匀，加入常规辅料，按照常规工艺，制成片剂。

实施例3：颗粒剂

取实施例1制备的西洋参茎叶总皂苷提取物56.5g和银杏叶提取物40g，充分混匀，加入常规辅料，按照常规工艺，制成颗粒剂。

实施例4：丸剂

按质量比为0.5∶1的比例取西洋参茎叶总皂苷提取物与银杏叶提取物，充分混匀，加入常规辅料，按照常规工艺，制成丸剂，其中西洋参茎叶总皂苷提取物中总皂苷含量为88％，银杏叶提取物中黄酮苷含量不低于26％，银杏萜内脂含量不低于4％。

实施例5：口服液体制剂

按质量比为2∶1的比例取西洋参茎叶总皂苷提取物与银杏叶提取物，充分混匀，加入常规辅料，按照常规工艺，制成口服液体制剂，其中西洋参茎叶总皂苷提取物中总皂苷含量为75％，银杏叶提取物中黄酮苷含量不低于28％，银杏萜内脂含量不低于8％。

实施例6：滴丸剂

按质量比为3∶1的比例取西洋参茎叶总皂苷提取物与银杏叶提取物，充分混匀，加入常规辅料，按照常规工艺，制成滴丸剂，其中西洋参茎叶总皂苷提取物中总皂苷含量为82％，银杏叶提取物中黄酮苷含量不低于25％，银杏萜内脂含量不低于4％。

实施例7：片剂

西洋参茎叶 0.14kg 银杏叶 1kg

取干燥的西洋参茎叶置于多能式中药提取罐中，按干燥的西洋参茎叶与纯化水的质量比为1∶8、1∶6和1∶6分别加入纯化水，分别提取2.5h、2h、1.5h，3次提取液分别粗滤，合并滤液，导入醇沉罐中，静置放冷24h，吸取上清液，纱网滤过，进D101大孔树脂柱吸附皂苷，控制柱流速2～3L/分，待树脂吸附饱和后，用纯化水洗至无色，再用80％V/V的乙醇洗脱，控制柱流速3～5L/分，收集洗脱液，导入真空浓缩回收罐中，回收乙醇，收集浓缩液，浓缩液置乙醇沉淀罐中，加入95％V/V的乙醇180L，充分搅匀后静置24h，上清液抽入真空浓缩回收罐中，残渣用95％V/V的乙醇洗涤2次，洗液抽入真空浓缩回收罐中，与上清液合并，回收乙醇，在20℃下，药液浓缩至相对密度为1.05-1.10，收集浓缩液，浓缩液导入喷雾干燥机中，控制温度177-183℃，控制莫诺泵25转/分，进行喷雾干燥，收集西洋参茎叶总皂苷提取物，密封保存；

将干燥银杏叶粉碎，取干燥银杏叶粉末适量，按干燥银杏叶粉末与乙醇的质量比为1∶6，加入70％V/V的乙醇回流提取2次，每次2h，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，在50℃下浓缩至密度为1.0，浓缩液加水稀释，过滤，滤液上D201大孔树脂，先用3～4重量倍柱体积的水洗脱，再用3～4重量倍柱体积的80％V/V的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，减压浓缩，在条件为-0.09Mpa，55℃下真空干燥，粉碎，得到银杏叶提取物；

取上述西洋参茎叶总皂苷提取物和银杏叶提取物，充分混匀，加入常规辅料，按照常规工艺，制成片剂。

实施例8：胶囊剂

西洋参茎叶 0.4kg 银杏叶 1kg

取干燥的西洋参茎叶置于多能式中药提取罐中，按干燥的西洋参茎叶与纯化水的质量比为1∶10、1∶9和1∶8分别加入纯化水，分别提取2h、1.5h、1h，3次提取液分别粗滤，合并滤液，导入醇沉罐中，静置放冷20h，吸取上清液，纱网滤过，进D101大孔树脂柱吸附皂苷，控制柱流速1～2L/分，待树脂吸附饱和后，用纯化水洗至无色，再用75％V/V的乙醇洗脱，控制柱流速2～4L/分，收集洗脱液，导入真空浓缩回收罐中，回收乙醇，收集浓缩液，浓缩液置乙醇沉淀罐中，加入90％V/V的乙醇160L，充分搅匀后静置20h，上清液抽入真空浓缩回收罐中，残渣用90％V/V的乙醇洗涤3次，洗液抽入真空浓缩回收罐中，与上清液合并，回收乙醇，在20℃下，药液浓缩至相对密度为1.05-1.10，收集浓缩液，浓缩液导入喷雾干燥机中，控制温度177-183℃，控制莫诺泵20转/分，进行喷雾干燥，收集西洋参茎叶总皂苷提取物，密封保存；

将干燥银杏叶粉碎，取干燥银杏叶粉末适量，按干燥银杏叶粉末与乙醇的质量比为1∶10，加入65％V/V的乙醇回流提取3次，每次3h，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，在50℃下浓缩至密度为1.0，浓缩液加水稀释，过滤，滤液上D201大孔树脂，依次用2～3重量倍柱体积的水洗脱，再用2～3重量倍柱体积75％V/V的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，减压浓缩，在条件为-0.09Mpa，55℃下真空干燥，粉碎，得到银杏叶提取物；

取上述西洋参茎叶总皂苷提取物和银杏叶提取物，充分混匀，加入常规辅料，按照常规工艺，制成胶囊剂。

实施例9：滴丸

取西洋参茎叶0.5kg和银杏叶1kg，按照常规工艺，加入常规辅料，制成滴丸。

Claims

1.一种治疗心血管疾病的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为：

该药物组合物中的西洋参茎叶总皂苷提取物中总皂苷含量为75-86%，银杏叶提取物中黄酮苷含量不低于20%或24%，银杏萜内脂含量不低于4%或6%。

2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为：

西洋参茎叶总皂苷提取物 0.7重量份银杏叶提取物 1重量份。

3.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为：

西洋参茎叶总皂苷提取物 2重量份银杏叶提取物 1重量份。

4.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为：

西洋参茎叶总皂苷提取物 3重量份银杏叶提取物 1重量份。

5.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物的原料药组成为：

西洋参茎叶总皂苷提取物 1.4重量份银杏叶提取物 1重量份。

6.如权利要求1-5任一所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

取干燥的西洋参茎叶置于多能式中药提取罐中，按干燥的西洋参茎叶与纯化水的质量比为1：4-20、1：3-16和1：3-16分别加入纯化水，分别提取1.5-3h、1-3h、0.5-2.5h，3次提取液分别粗滤，合并滤液，导入醇沉罐中，静置放冷20-30h，吸取上清液，纱网滤过，进D101大孔树脂柱吸附皂苷，控制柱流速1～4L/分，待树脂吸附饱和后，用纯化水洗至无色，再用70-90%V/V的乙醇洗脱，控制柱流速2～6L/分，收集洗脱液，导入真空浓缩回收罐中，回收乙醇，收集浓缩液，浓缩液置乙醇沉淀罐中，加入90-95%V/V的乙醇160-200L充分搅匀后静置20-30h，上清液抽入真空浓缩回收罐中，残渣用90-95%V/V的乙醇洗涤1-3次，洗液抽入真空浓缩回收罐中，与上清液合并，回收乙醇，在20℃下，药液浓缩至相对密度为1.05-1.10，收集浓缩液，浓缩液导入喷雾干燥机中，控制温度177-183℃，控制莫诺泵20-30转/分，进行喷雾干燥，收集西洋参茎叶总皂苷提取物，密封保存；

将干燥银杏叶粉碎，取干燥银杏叶粉末适量，按干燥银杏叶粉末与乙醇的质量比为1：3-16，加入60-80%V/V的乙醇回流提取1-3次，每次1-3h，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，在50℃下浓缩至密度为1.0，浓缩液加水稀释，过滤，滤液上D201大孔树脂，先用2～6重量倍柱体积的水洗脱，再用2～6重量倍柱体积的70-90%V/V的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，减压浓缩，在条件为-0.09Mpa，55℃下真空干燥，粉碎，得到银杏叶提取物；

取上述原料药，混合均匀后，加入常规辅料，按照常规工艺制成临床上接受的颗粒剂、片剂、胶囊剂、丸剂或口服液体制剂。

7.如权利要求1-5任一所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

取上述原料药，混合均匀后，加入常规辅料，按照常规工艺制成临床上接受的缓释制剂。

8.如权利要求6所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

9.如权利要求1-5任一所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

10.如权利要求6所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

取干燥的西洋参茎叶置于多功能式中药提取罐中，按干燥的西洋参茎叶与纯化水的质量比为1：8、1：6和1：6分别加入纯化水，分别提取2.5h、2h、1.5h，3次提取液分别粗滤，合并滤液，导入醇沉罐中，静置放冷24h，吸取上清液，纱网滤过，进D101大孔树脂柱吸附皂苷，控制柱流速2～3L/分，待树脂吸附饱和后，用纯化水洗至无色，再用80%V/V的乙醇洗脱，控制柱流速3～5L/分，收集洗脱液，导入真空浓缩回收罐中，回收乙醇，收集浓缩液，浓缩液置乙醇沉淀罐中，加入95%V/V的乙醇180L，充分搅匀后静置24h，上清液抽入真空浓缩回收罐中，残渣用95%V/V的乙醇洗涤2次，洗液抽入真空浓缩回收罐中，与上清液合并，回收乙醇，在20℃下，药液浓缩至相对密度为1.05-1.10，收集浓缩液，浓缩液导入喷雾干燥机中，控制温度177-183℃，控制莫诺泵25转/分，进行喷雾干燥，收集西洋参茎叶总皂苷提取物，密封保存；

将干燥银杏叶粉碎，取干燥银杏叶粉末适量，按干燥银杏叶粉末与乙醇的质量比为1：6，加入70%V/V的乙醇回流提取2次，每次2h，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，在50℃下浓缩至密度为1.0，浓缩液加水稀释，过滤，滤液上D201大孔树脂，先用3～4重量倍柱体积的水洗脱，再用3～4重量倍的80%V/V的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，减压浓缩，在条件为-0.09Mpa，55℃下真空干燥，粉碎，得到银杏叶提取物；

11.如权利要求1-5任一所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

12.如权利要求7所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

13.如权利要求7所述的药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：