CN103417749A - 一种紫花地丁提取物的制备方法及其在降糖药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及紫花地丁提取物的制备方法及其在降糖药物中的应用,有效解决从紫花地丁提取用于制备降糖药物的物质,方法是,紫花地丁提取物在制备降糖药物中的应用,该提取物是,将紫花地丁粉碎成药粉,用乙醇浸泡0.5h,回流提取2次,弃去滤渣,得提取液,提取液减压浓缩至无醇味,调整药液浓度为相当于含生药0.5g/ml,得样品液;样品液上AB-8型大孔吸附树脂柱;先用水洗脱,得洗脱液Ⅰ弃去;再用乙醇洗脱,得洗脱液,减压回收乙醇,浓缩干燥,得紫花地丁总黄酮;该紫花地丁总黄酮有效用于制备降糖药物,实现紫花地丁总黄酮在制备降糖药物中的应用,本发明原料丰富,制备方法简单,制备的紫花地丁总黄酮具有降糖作用,有效用于制备降糖药物。
Description
技术领域
本发明涉及医药,特别是一种紫花地丁提取物的制备方法及其在降糖药物中的应用。
背景技术
糖尿病是由环境因素和遗传因素相互作用而引起的以慢性高血糖为共同特征的慢性代谢性疾病,国内对其病征通常称作“高血糖”。长期的高血糖会导致微血管内皮产生病变,伴随的蛋白质、脂肪代谢异常会引起心、脑、肾、神经、血管等组织结构和功能的异常,甚至会造成器官功能衰竭而危及生命。趣味给它的别名叫“沉默的杀手”,特别是成人型的糖尿病,糖尿病患者平均可减少十年寿命。并且发生的并发症可遍布全身,糖尿病的并发症包括:自律性神经失调,神经障碍,脑血栓,脑梗塞。白内障,蛀牙,口腔炎,支气管炎,皮肤病,心肌梗塞,尿毒症,足病变等。亚洲糖尿病学会透露,截至2012年,中国患糖尿病的总人数已达到9240万,并且具有以下特征:1发病率高,可达9.7%;2年轻化趋势,青壮年缺乏运动,导致糖尿病高发;3存在治疗误区,中国糖尿病患者注射胰岛素的时间普遍较晚。中国是人口大国,人口所占比例大,同时中国人也是糖尿病的好发人群,研究显示,在富裕国家,华人患病率多在10%以上,且近20年糖尿病的发病率上升迅速,已引起卫生部门和广大医务人员的重视。
糖尿病是由不同病因导致的代谢疾病,特征是由于胰岛素分泌缺陷或胰岛素作用缺陷引起的慢性高血糖状态及碳水化合物、脂肪和蛋白质代谢紊乱。其慢性并发症有肾脏病变、神经病变等,因口服抗糖尿病药方便、快捷、无痛苦、可持续长期应用等优点,临床应用很广泛,目前常用的治疗糖尿病及并发症的药物有一下几类:1双胍类,通过肝细胞膜G蛋白恢复胰岛素对腺苷酸环化酶活性的抑制作用,减少了肝糖原的异声和肝葡萄糖输出,促进肌细胞葡萄糖的无氧酵解,增加肌肉等外周组织对葡萄糖的摄取,加强组织对胰岛素的敏感性,对正常人则无降糖作用。代表药物有二甲双胍等,二甲双胍可增加乳酸在血液中的积聚,可致乳酸中毒并伴有胃肠道的不良反应。2磺脲类,主要作用于胰腺β细胞释放胰岛素。代表药物有格列苯脲、格列齐特、格列喹酮等。3葡萄糖糖苷酶抑制剂,代表药物有阿卡波糖、米格列醇等,在胃肠道内竞争性抑制葡萄糖苷酶,延缓肠腔内双糖、低聚糖及多糖释放葡萄糖,轻度抑制食欲,最终降低餐后血糖,且不引起低血糖。4胰岛素增敏剂,代表药物有罗格列酮、吡格列酮等,是可提高骨骼肌和脂肪细胞对葡萄糖的吸收和降低肝糖的输出,提高对胰岛素的敏感性,改善胰岛素抵抗状态,改善糖代谢,降低血糖值。5非磺脲类类促胰岛素分泌药,代表药物有瑞格列奈、那格列奈等,与胰岛β细胞膜上特异性受体结合,使胰腺β细胞去极化,从而促进胰岛素分泌。6二肽基肽酶-4抑制剂,代表药物有西他列汀,可一直DPP-4的活性,可保护肠促胰岛素不被降解,刺激胰腺β细胞再生。
但西药治疗多具有副作用,会带来肝肾毒性,随着糖尿病患者的患病率不断上升,以往的西药带来的副作用及胰岛素使用过程中国难以控制,使得很多专家学者开始寻找治疗糖尿病的新药,从中药中筛选有效成分是一条新的有效途径,成为国内外专家的研究热点。
中医认为糖尿病属于消渴的范畴,早在《内经》中,对本病之病因、病机、证治都有了明确的论述。糖尿病临床症状表现复杂多变,是由于多个脏腑功能失调所致,与脾、肾的关系最为密切。现代研究发现,血瘀与糖尿病的发生发展有着重要的影响,血瘀贯穿于糖尿病的始终。糖尿病病程中导致血瘀的原因大致如下:1阴虚致瘀,阴虚是糖尿病重要病机之一,阴津不足,由于津血同源,津亏则血少,导致血液循环涩滞,血脉运行不畅而产生血瘀。2燥热致瘀,糖尿病患者由于阴津亏耗,水亏火旺,多有燥热炽盛,煎熬阴血,使血液浓缩,脉道壅塞而产生血瘀。3气虚致瘀,糖尿病患者燥热内炽,不仅伤津亦可耗气,导致气阴两虚,气虚则推动无力,血行迟缓而产生血瘀。4气滞致瘀,情志不畅最易导致气机郁滞,气滞影响血脉运行而产生血瘀。5久病必瘀,糖尿病做为一种慢性终身性疾病,其病程迁延,日久不愈,中医认为久病入络,络脉瘀滞,血行不畅而产生血瘀。血瘀一旦形成,又可做为新的致病因素进一步引起糖尿病的发展和加重。而热毒在糖尿病病程的发生发展过程中起到重要作用,临床上糖尿病患者都伴随着燥热,体质偏颇,加以劳心过度,情志抑郁,劳力不足,及外感温热毒邪,均可导致火热伤阴耗气,而火热炽盛,或蕴结日久,即可化为热毒。我们实验室经过认真的研究并完善了“活血化瘀、清热解毒”的治则治疗糖尿病的治疗大法。
紫花地丁为堇菜科植物紫花地丁的干燥全草,又名地丁草、独行虎、紫地丁,为早春开花的多年生草本植物。生于荒地、田间、山坡草丛、林缘或灌丛中,最早见于《千金方》中,《中国药典》1977年版开始以紫花地丁为名收载。性寒,味微苦,有清热解毒、凉血消肿的功效,用于痈肿疔疮、乳痈肠痈、丹毒肿痛、毒蛇咬伤等症。紫花地丁含有多种化学成分,富含黄酮类、皂苷类、多糖类、氨基酸类等,且其黄酮的含量具有季节差异性。具有抑菌、抗炎、抗内毒素、增强免疫等作用,但尚未见紫花地丁单味药或紫花地丁提取物作用于糖尿病以及如何制备提取物,至今未见有公开报导。
发明内容
针对上述情况,为克服现有技术之缺陷,本发明之目的就是提供一种紫花地丁提取物的制备方法及其在降糖药物中的应用,可有效解决从紫花地丁提取用于制备降糖药物的物质。
本发明解决的技术方案是,紫花地丁提取物在制备降糖药物中的应用,该提取物是,将紫花地丁粉碎成药粉,用乙醇浸泡0.5h,回流提取2次,弃去滤渣,得提取液,提取液减压浓缩至无醇味,调整药液浓度为相当于含生药0.5g/ml,得样品液;样品液上AB-8型大孔吸附树脂柱;先用水洗脱,得洗脱液Ⅰ弃去;再用乙醇洗脱,得洗脱液,减压回收乙醇,浓缩干燥,得紫花地丁总黄酮,含量≥60%;该紫花地丁总黄酮有效用于制备降糖药物,实现紫花地丁总黄酮在制备降糖药物中的应用。
本发明原料丰富,制备方法简单,制备的紫花地丁总黄酮具有降糖作用,有效用于制备降糖药物,开拓治疗糖尿病的新用途,是降糖药物上的创新。
具体实施方式
以下结合具体情况对本发明的具体实施方式作详细说明。
本发明在具体实施中,由以下技术方案给出:紫花地丁提取物在制备降糖药物中的应用,该提取物是,将紫花地丁粉碎成过60-80目筛的药粉,用8倍药粉重量的、体积浓度为75%的乙醇浸泡0.5h,回流提取2次,第1次1.5h,第2次1h;弃去滤渣,得提取液,提取液减压浓缩至无醇味,调整药液浓度为相当于含生药0.5g/ml,得样品液;样品液上AB-8型大孔吸附树脂柱,上样量与树脂体积的比例为1:10,树脂柱径高比为1:10;先用8倍柱体积的水洗脱,得洗脱液Ⅰ弃去;续用6倍量柱体积的、体积浓度为15%的乙醇洗脱,得洗脱液Ⅱ弃去;继续用8倍量柱体积的、体积浓度为75%的乙醇洗脱,得洗脱液Ⅲ,减压回收乙醇,浓缩干燥,得紫花地丁总黄酮,含量≥60%;该紫花地丁总黄酮有效用于制备降糖药物,实现紫花地丁总黄酮在制备降糖药物中的应用。
本发明方法简单,原材料丰富,易于制备紫花地丁总黄酮,该总黄酮具有降糖作用,可用于制备降糖药物,并经实验取得了满意的效果,有关实验资料如下:
1对肾上腺素所致小鼠高血糖模型的影响
1.1药物试剂
本发明紫花地丁总黄酮;
盐酸二甲双胍片,上海信谊药厂有限公司生产,批号120523;盐酸肾上腺素,天津金耀氨基酸有限公司生产,批号20120308:生理盐水,郑州永和制药有限公司,批号12042401;羧甲基纤维素钠,天津市福晨化学试剂厂生产,批号20090826;葡萄糖测定试剂盒,由中生北控生物科技股份有限公司生产提供,批号120491;肝糖原测定试剂盒,由南京建成生物工程研究所生产,批号20120728。
1.2实验仪器
FA(N)/JA(N)系列电子天平,上海民桥精密仪器有限公司;UV-2000紫外可见分光光度计,上海天美科学仪器有限公司生产;TGL-16G台式离心机,上海安亭科学仪器厂生产;DZKW-4型电子恒温水浴锅,北京中兴伟业仪器有限公司生产;KDC-160HR高速冷冻离心机,科大创新股份有限公司中佳分公司生产;BIORAD-680酶标仪,680Microplate Reader,Bio-RadLaboratories;可调式移液器,由上海雷勃分析仪器有限公司生产。
1.3实验动物
昆明种小鼠,雄性,体重18~22g,河北省实验动物中心提供,合格证号:1209018;实验室合格证号SYXK(豫)2010-001。
1.4试验方法
采用腹腔注释肾上腺素的方法来建立小鼠高血糖模型。在造模前,二甲双胍组;紫花地丁总黄酮大、中、小剂量组分别给予相应的药物灌胃,空白组和模型组给予同体积0.1%CMC灌胃,每日1次,连续给药7天。在给药第7天(禁食8h),给药1h后,除正常组外,其他11组腹腔注射盐酸肾上腺素(0.2mg/kg),正常组腹腔注射同体积的生理盐水,0.5h后眼眶静脉采血,采用葡萄糖氧化酶法测定血糖值,剪开腹腔,取同一部位肝组织测定肝糖原含量。
1.5统计方法
数据分析用SPSS17.0for windows医用统计包进行数据资料的统计学处理,计量资料用平均数±标准差表示,各组间比较采用单因素方差分析,方差检验齐者用最小显著差数(LSD)法,方差不齐者用Games-Howell法检验,等级资料采用Ridit检验。
1.6结果
表1对肾上腺素所致小鼠高血糖模型的血糖值和肝糖原含量的影响
**与模型组比P<0.01
从上表可看出:与空白组比,模型组血糖显著升高,肝糖原含量显著降低,说明造模成功。与模型组比,二甲双胍组、紫花地丁总黄酮各剂量组均可显著降低造模小鼠后的血糖值(P<0.01);可显著升高肝糖原含量(P<0.01)。说明紫花地丁总黄酮、二甲双胍均可对抗肾上腺素所致的糖异生加剧和肝糖原分解的现象。
2链脲佐菌素对小鼠糖尿病模型的影响
2.1药物试剂
本发明紫花地丁总黄酮;盐酸二甲双胍片,上海信谊药厂有限公司生产,批号120523;羧甲基纤维素钠,天津市福晨化学试剂厂生产,批号20090826;链脲佐菌素,sigma公司生产,批号Z120315;肝糖原试剂盒,南京建成生物工程研究所生产,批号20120728;Mouse INSELISA Kit试剂盒,R&D公司生产,LOT:20121001A;血糖试剂盒,中生北控生物科技股份有限公司生产,批号120511;糖化血清蛋白试剂盒,南京建成生物工程研究所生产,批号20120807;生理盐水,郑州永和制药有限公司,批号12042401。
2.2实验仪器
FA(N)/JA(N)系列电子天平,上海民桥精密仪器有限公司生产;UV-2000紫外可见分光光度计,上海天美科学仪器有限公司生产;TGL-16G台式离心机,上海安亭科学仪器厂生产;DZKW-4型电子恒温水浴锅,北京中兴伟业仪器有限公司生产;KDC-160HR高速冷冻离心机,科大创新股份有限公司中佳分公司生产;BIORAD-680酶标仪,680Microplate Reader,Bio-RadLaboratories;可调式移液器,由上海雷勃分析仪器有限公司生产。
2.3实验动物
KM种小鼠,雄性,体重18-22g,河北省实验动物中心提供,合格证号:1209018;实验室合格证号SYXK(豫)2010-001。
2.4试验方法
采用尾静脉注射链脲佐菌素的方法来建立小鼠糖尿病模型。购进动物正常饲养三天后,根据体重,尾静脉注射10mg/ml用柠檬酸缓冲液配制的链脲佐菌素溶液,给药剂量为80mg/kg,7日后尾静脉取血,测血清血糖值,选取血糖值>16.0mmol/L,并明显具有多饮多食多尿症状的小鼠,根据血糖值随机均匀分为组,二甲双胍组;紫花地丁总黄酮大、中、小剂量组组分别给予相应药物灌胃,空白组和模型组给予同体积0.1%CMC灌胃,每日1次,每天给药1次,连续给药30天,分别于给药的第10、20、30天测禁食6小时血糖值,于第31天,禁食后12h,灌胃后2h,取血,分离血清,测血清中胰岛素、糖基化血清蛋白的影响,取肝脏作匀浆,测肝糖原含量;取胰脏、肾脏甲醛固定,做组织病理切片。
2.5统计方法
数据分析用SPSS13.0for windows医用统计包进行数据资料的统计学处理,计量资料用平均数±标准差表示,各组间比较采用单因素方差分析,方差检验齐者用最小显著差数(LSD)法,方差不齐者用Games-Howell法检验,等级资料采用Ridit检验。
2.6结果
**与模型组比P<0.01
从上表可看出:与空白组比,模型组糖化血清蛋白含量显著升高(P<0.01),肝糖原含量显著降低(P<0.01),胰岛素含量也显著下降(P<0.01)说明造模成功。与模型组比,二甲双胍组可显著降低(P<0.01)糖化血清蛋白含量,明显升高(P<0.05)肝糖原含量,显著升高(P<0.01)胰岛素含量。紫花地丁总黄酮大、中、小剂量组均可显著的降低(P<0.01)糖化血清蛋白含量,显著升高(P<0.01)肝糖原、胰岛素水平。
**与模型组比P<0.01,*与模型组比P<0.05
从上表可看出:除空白对照组外,各组给药前血糖均无明显差异,说明分组均匀。与空白对照组比,在第10、20、30天,模型组血糖均显著性升高(P<0.01),说明造模型成功。与模型组相比,二甲双胍组可明显降低(P<0.05)第10天血清血糖值,可显著的降低(P<0.01)第20、30天血清血糖值。紫花地丁总黄酮大、中剂量组可显著的降低(P<0.01)第20、30天血清血糖值,紫花地丁总黄酮小剂量组可明显降低(P<0.05)第20天血清血糖值,可显著降低第30天血清血糖值。
表4对链脲佐菌素所致小鼠糖尿病模型胰腺组织的影响
“-”胰腺组织中胰岛在4个以上,胰岛细胞胞浆丰富,细胞核松散;“+”胰腺组织中胰岛在4个以上,少数胰岛细胞胞浆萎缩,少数细胞核密集;“++”胰腺组织中胰岛在2-3个,部分胰岛细胞胞浆萎缩,部分细胞核密集;“+++”胰腺组织中胰岛在0-1个,全部胰岛细胞胞浆几乎消失,全部细胞核密集
正常对照组动物的胰岛呈圆形或椭圆形的细胞团,边界清晰,胰岛内β细胞密集,分布规矩,形态规整,结构正常,胞浆丰富。模型组动物胰岛细胞胞浆减少并萎缩,形态不规则,数目明显减少,细胞核密集想象,β细胞大小不一,经Ridit检验P<0.01说明造模动物的胰腺发生损伤。与模型组对比,二甲双胍组可大部分抵抗β细胞萎缩,使大部分细胞胞浆得到恢复(P<0.01)。紫花地丁总黄酮大、中剂量组大部分胰腺细胞胞浆比较丰满,具有显著性差异(P<0.01);紫花地丁总黄酮小剂量组胰腺细胞部分萎缩,细胞核较密,具有明显差异性(P<0.05).
表5对链脲佐菌素所致小鼠糖尿病模型肾组织的影响
“-”肾小球细胞正常,肾小囊正常;“+”肾小球细胞稍萎缩,肾小囊稍有扩张;“++”肾小球细胞萎缩,肾小囊腔扩张;“+++”肾小球细胞明显萎缩,肾小囊腔明显扩张。
从上表可以看出:空白组小鼠的肾小球、肾小管上皮细胞基本正常,实验过程中处死操作不当造成间质具有充血现象,属于正常状况。模型组小鼠肾脏广泛的肾小管上皮细胞水肿和间质不同程度的炎细胞浸润和肾小球萎缩,经过Ridit检验P<0.01,说明造模动物肾脏发生损伤。与模型组相比,二甲双胍组肾小球稍有萎缩、肾小囊稍有扩张,具有显著性差异(P<0.01);紫花地丁总黄酮大、中、小剂量组肾小球、肾小囊基本恢复正常(P<0.01)。
3对链脲佐菌素所致大鼠糖尿病模型的影响
3.1药物试剂
本发明紫花地丁总黄酮;
盐酸二甲双胍片,上海信谊药厂有限公司生产,批号120523;链脲佐菌素,sigma公司生产,批号Z120315;生理盐水,郑州永和制药有限公司,批号12042401;冰乙酸(分析纯),天津市恒兴化学试剂制造有限公司生产,批号20110103;甲醛,烟台市双双化工有限公司生产,批号20111101;血糖试剂盒,中生北控生物科技股份有限公司生产,批号120511;NOS试剂盒,南京建成生物工程研究所生产,批号20121208;SOD试剂盒,南京建成生物工程研究所生产,批号20121215;糖化血清蛋白(GSP)测试盒,南京建成生物工程研究所生产,批号20121019;氧化氮测试盒,南京建成生物工程研究所生产,批号20121212;甘油三酯试剂盒,北京北化康泰临床试剂有限公司生产,批号20121105;总胆固醇试剂盒,北京北化康泰临床试剂有限公司生产,批号20120808;RatIAA ELISA Kit试剂盒,R&D公司生产,LOT:20121101A;Rat INS ELISA Kit试剂盒,R&D公司生产,LOT:20121101A。
3.2实验仪器
FA(N)/JA(N)系列电子天平,上海民桥精密仪器有限公司;UV-2000紫外可见分光光度计,上海天美科学仪器有限公司生产;TGL-16G台式离心机,上海安亭科学仪器厂生产;DZKW-4型电子恒温水浴锅,北京中兴伟业仪器有限公司生产;KDC-160HR高速冷冻离心机,科大创新股份有限公司中佳分公司生产;BIORAD-680酶标仪,680Microplate Reader,Bio-RadLaboratories;可调式移液器,由上海雷勃分析仪器有限公司生产。
3.3实验动物
清洁级SD大鼠,雄性,180-220g,河北省实验动物中心提供,动物合格证号:1210019,实验室合格证号SYXK(豫)2010-001。
3.4试验方法
采用舌下静脉注释链脲佐菌素的方法来建立大鼠Ⅰ型糖尿病模型。购进动物正常饲养3天,根据体重,舌下静脉注射10mg/ml浓度的链脲佐菌素,给药剂量为40mg/kg,5日后尾静脉取血,侧血清血糖值,并选取血糖值>16.0mg/L,并明显具有多饮多食多尿症状的大鼠,根据血糖值随机均匀分组,二甲双胍组;紫花地丁总黄酮大、中、小剂量组分别给予相应药物灌胃,空白组和模型组给予同体积0.1%CMC灌胃,每日1次,每天给药1次,连续给药30天。分别于给药的第10、20、30天,于灌药2时后,尾静脉采血,分离血清,测禁食6小时血糖值,末次给药2小时后,眼球取血,测血清中胰岛素(Ins)、胰岛素抗体、NO水平和NOS活力、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、超氧化物歧化酶(SOD)、糖基化血清蛋白。取血后处死大鼠,取胰脏、肾脏做切片,通过电镜观察其病理改变。
3.5统计方法
数据分析用SPSS13.0for windows医用统计包进行数据资料的统计学处理,计量资料用平均数±标准差表示,各组间比较采用单因素方差分析,方差检验齐者用最小显著差数(LSD)法,方差不齐者用Games-Howell法检验,等级资料采用Ridit检验。
3.6结果
**与模型组比P<0.01,*与模型组比P<0.05
从上表可看出:除空白对照组外,各组给药前血糖均无明显差异,说明分组均匀。与空白对照组比,在第10、20、30天,模型组血糖均显著性升高(P<0.01),说明造模型成功。与模型组比,在给药第10天,各个给药组对血糖影响不大,在给药第20天、第30天,紫花地丁总黄酮大、中、小剂量组和二甲双胍组均可显著降低血糖水平(P<0.01)。说明紫花地丁总黄酮可有效的降低模型动物血糖值,改善糖尿病症状。
**与模型组比P<0.01,*与模型组比P<0.05
从上表可以看出:与空白组相比模型组可显著升高糖化血清蛋白含量和胰岛素抗体水平(P<0.01),可显著的降低胰岛素含量(P<0.01),说明造模成功。与模型组相比二甲双胍组可显著降低(P<0.01)糖化血清蛋白含量、胰岛素抗体水平,可显著升高胰岛素含量(P<0.01)。紫花地丁总黄酮大、中、小剂量组可显著的降低(P<0.01)糖化血清蛋白含量,显著的升高(P<0.01)胰岛素水平;紫花地丁大、中剂量组可明显的降低(P<0.05)胰岛素抗体水平,有效的改善胰岛素抵抗现象。
表10对链脲佐菌素所致大鼠糖尿病模型胰腺组织的影响
“-”胰腺组织中胰岛在4个以上,胰岛细胞胞浆丰富,细胞核松散;;“+”胰腺组织中胰岛在4个以上,少数胰岛细胞胞浆萎缩,少数细胞核密集;“++”胰腺组织中胰岛在2-3个,部分胰岛细胞胞浆萎缩,部分细胞核密集;“+++”胰腺组织中胰岛在0-1个,全部胰岛细胞胞浆几乎消失,全部细胞核密集
由上表可以看出:正常对照组动物胰岛呈圆形或椭圆形的细胞团,边界清晰,胰岛内β细胞密集,分布规矩,形态规整,结构正常,胞浆丰富,均为正常。模型组动物胰岛细胞胞浆减少并萎缩,形态不规则,数目明显减少,细胞核密集想象,β细胞大小不一,经Ridit检验P<0.01说明造模动物的胰腺发生损伤。与模型组对比,二甲双胍组可部分对抗胰岛β细胞萎缩,使部分胞浆得到恢复(P<0.01)。紫花地丁总黄酮大、中、小剂量组可显著对抗胰岛细胞萎缩的现象(P<0.01)。
由上述资料表明,本发明制备的紫花地丁总黄酮具有降糖的作用,有效用于制备降糖的药物,扩大了紫花地丁的药用价值,是药物制备上的创新,有良好的经济和社会效益。
Claims (2)
1.一种紫花地丁提取物的制备方法,其特征在于,将紫花地丁粉碎成过60-80目筛的药粉,用8倍药粉重量的、体积浓度为75%的乙醇浸泡0.5h,回流提取2次,第1次1.5h,第2次1h;弃去滤渣,得提取液,提取液减压浓缩至无醇味,调整药液浓度为相当于含生药0.5g/ml,得样品液;样品液上AB-8型大孔吸附树脂柱,上样量与树脂体积的比例为1:10,树脂柱径高比为1:10;先用8倍柱体积的水洗脱,得洗脱液Ⅰ弃去;续用6倍量柱体积的、体积浓度为15%的乙醇洗脱,得洗脱液Ⅱ弃去;继续用8倍量柱体积的、体积浓度为75%的乙醇洗脱,得洗脱液Ⅲ,减压回收乙醇,浓缩干燥,得紫花地丁总黄酮。
2.权利要求1所述方法提取的紫花地丁总黄酮在制备降糖药物中的应用。
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