CN102283874B

CN102283874B - 一种鸭脚木皮提取物的制备方法及应用

Info

Publication number: CN102283874B
Application number: CN 201110264198
Authority: CN
Inventors: 沈志滨; 陶曙红; 曾凡林; 陈艳芬; 尹永芹; 崔红花
Original assignee: Guangdong Pharmaceutical University
Current assignee: Guangdong Pharmaceutical University
Priority date: 2011-09-07
Filing date: 2011-09-07
Publication date: 2013-09-18
Anticipated expiration: 2031-09-07
Also published as: CN102283874A

Abstract

本发明公开了一种鸭脚木皮提取物的制备方法及提取物和应用。本发明取鸭脚木树皮粉末的乙醇提取物，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，分别合并各萃取液及水溶液，减压回收溶剂得石油醚提取物、氯仿提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水提取物。本发明鸭脚皮木提取物具有很好的抗炎镇痛活性，可应用于制备抗炎镇痛药物。

Description

一种鸭脚木皮提取物的制备方法及应用

技术领域

本发明属于医药产品研究开发技术领域，涉及一种鸭脚木皮提取物的制备方法及其用途。

背景技术

鸭脚木Schefflera octophylla(Lour.)Harms为五加科鸭脚木属植物，其味苦，性平。该植物根皮及皮可入药，具有祛风除湿，活血止痛，主治风湿痹痛、跌打骨折、外伤出血，我国民间多用于治疗风湿骨痛、跌打肿痛、驳骨止血、咽喉肿痛等。鸭脚木主要分布于云南、广东、广西等地，资源丰富，是南方冬季的蜜源植物，并且其药用价值高，具有极大的开发潜力。

炎症是具有血管系统的活体组织对损伤因子所发生的防御性反应，参与多种疾病的发病过程，是一种常见病、多发病，同时也常伴随着各种疼痛。目前用于抗炎的药物主要以甾体和非甾体抗炎药为主，不良反应较多。其中非甾体抗炎药，如吲哚美辛、布洛芬等在临床上广泛应用于抗炎镇痛，然而，长期应用NSAIDs会引起胃肠道特别是胃粘膜的损害，严重的是有相当一部分患者对此毒副作用初期无自觉症状，因而被视为临床上最频繁也最严重的药物副作用之一。

中药的抗炎作用已得到了广泛的关注。临床及实验证实，很多中药具有明显的抗炎镇痛作用，且毒副作用小。因此，从中药中寻找高效低毒的抗炎镇痛药物已成为该类药物研发的一个重要方向。目前，对鸭脚木皮提取物的抗炎镇痛作用研究尚未见报道。

发明内容

本发明的一个目的是克服现有鸭脚木应用技术的不足，提供一种鸭脚木皮提取物的制备方法。

本发明的另一个目的是提供采用制备方法制备得到的鸭脚木皮提取物。

本发明还有一个目的是提供所述鸭脚木皮提取物的应用，为医学、药学等领域开发天然抗炎镇痛药物提供新资源。

本发明的目的通过以下技术方案予以实现：

提供一种鸭脚木皮提取物的制备方法，包括以下步骤：

(1)用乙醇回流提取鸭脚木皮粉末，静置过滤；

(2)合并步骤(1)所得滤液，减压回收溶剂即得总提取物；

(3)将步骤(2)所得总提取物用水混悬，再用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取，可依次萃取3次；

(4)分别合并步骤(3)所得石油醚层、氯仿层、乙酸乙酯层和正丁醇层萃取液；

(5)将步骤(4)合并所得石油醚层、氯仿层、乙酸乙酯层和正丁醇层萃取液及萃取结束后的水层分别减压回收溶剂，得到鸭脚木皮的石油醚提取物、氯仿提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水提取物。

优选地，步骤(1)所述鸭脚木皮粉末采用鸭脚木(Schefflera octophylla(Lour.)Harms)的树皮经常规干燥粉碎制备得到；采用体积比浓度为95％的乙醇回流提取鸭脚木皮粉末，优选乙醇的用量为鸭脚木皮粉末的8～10倍体积，回流提取3次，每次2小时左右，静置过滤。

本发明提供上述方法制备的鸭脚木皮提取物。

本发明同时提供所述鸭脚木皮提取物的应用，所述提取物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用，表现出显著的抗炎活性；对醋酸和甲醛所致小鼠疼痛有明显的镇痛作用。

所述提取物具有优良的活性，可应用于制备天然抗炎镇痛药物，可应用于人体各种炎症及疼痛的治疗，如关节炎、风湿性关节炎、类风湿性关节炎、风湿骨痛、跌打肿痛、咽喉肿痛等。

本发明的有益效果是：

本发明所述鸭脚木皮提取物的制备方法简单，操作方便、快速，生产成本低，利于工业化生产，适宜推广应用；所得鸭脚木皮提取物具有显著的抗炎镇痛活性，为鸭脚木皮提供了新的重要用途。

具体实施方式

下面结合具体实施例本发明所述的涉及一种鸭脚木皮提取物的制备方法及其用途包括以下实施例，下面的实施例可进一步说明本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1鸭脚木皮提取物的制备

(1)取鸭脚木(Schefflera octophylla(Lour.)Harms)的树皮粉末(粉末粒径不做严格限定)，用10倍体积比浓度为95％的乙醇回流提取3次，每次2小时，静置过滤；

(2)合并步骤(1)所得滤液，减压回收溶剂即得总提取物；

(3)将步骤(2)所得总提取物用适量水混悬(水的用量约为总提取物质量的3～5倍)，再用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取各3次，萃取剂用量为水溶液的1～2倍；

实施例2鸭脚木皮提取物的制备

(1)取采用鸭脚木(Schefflera octophylla(Lour.)Harms)的树皮粉末，用8倍体积比浓度为85％乙醇回流提取2次，每次2.5小时，静置过滤；

(2)合并步骤(1)所得滤液，减压回收溶剂即得总提取物；

(3)将步骤(2)所得总提取物用水混悬(水的用量约为总提取物质量的3～5倍)，再用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取各4次；(萃取剂用量为水溶液的1～2倍)

实施例3鸭脚木皮提取物的制备

(1)取采用鸭脚木(Schefflera octophylla(Lour.)Harms)的树皮粉末，用9倍体积比浓度为75％的乙醇回流提取3次，每次2小时，静置过滤；

(2)合并步骤(1)所得滤液，减压回收溶剂即得总提取物；

实施例4鸭脚木皮提取物抗炎镇痛活性实验

将本发明制备得到的鸭脚木皮石油醚提取物、氯仿提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水提取物进行抗炎镇痛试验，其中，氯仿提取物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用，显示出很好的抗炎活性，对醋酸和甲醛所致小鼠疼痛有明显的镇痛作用；其他提取物也表现出不同程度的抗炎镇痛效果。具体实验过程如下：

(一)抗炎作用实验

1实验材料

1.1药物

采用实施例1制备得到的鸭脚木皮提取物，包括石油醚提取物、氯仿提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物或水提取物，分别用0.5％(0.5g CMC-Na：100mL水)CMC-Na水溶液配制成0.0003g/ml、0.03g/ml、0.0016g/ml、0.0028g/ml、0.005g/ml；(以0.0003g/ml为例，表示0.0003g鸭脚木皮提取物：1mL溶液)

吲哚美辛肠溶片(广东华南药业集团有限公司生产，批号：20100906)，取片剂加0.5％CMC-Na配成浓度为0.5mg/ml的混悬液；

二甲苯(分析纯，广东光华化学有限公司生产，批号1004201)；

CMC-Na(分析纯，广东器化医疗设备有限公司生产，批号：20100922)。

1.2实验动物

SPF级NIH小鼠，雌雄兼用，体重18～22g，由广东省实验动物中心提供，合格证号：SCXK(粤)2008-0002。

2实验方法

取NIH小鼠98只，体重18～22g，雌雄各半，随机分为7组，每组14只，即空白对照组(0.5％CMC-Na，20ml/kg)、吲哚美辛组(0.01g/kg)、鸭脚木皮石油醚提取物组(0.006g/kg)、氯仿提取物组(0.6g/kg)、乙酸乙酯提取物组(0.032g/kg)、正丁醇提取物组(0.055g/kg)和水提取物组(0.1g/kg)，实验组每组剂量相当于30g生药/kg。实验前小鼠禁食不禁水12h。连续给药7d，1次/d，末次给药后1h，用二甲苯(0.02ml/只)均匀涂在每只小鼠右耳正反两面致炎，左耳不涂作对照，致炎后60min脱颈椎处死小鼠，沿耳廓基线剪下双耳，用直径9mm的打孔器在相同位置取左右两耳片，于分析天平上称重，计算左耳片和右耳片重量的差值(肿胀度)及抑制率。按下式计算肿胀度和肿胀抑制率。

肿胀度(mg)＝右耳片重-左耳片重

3 实验结果

结果表明，鸭脚木皮提取物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的抑制率大小为氯仿提取物＞正丁醇提取物＞乙酸乙酯提取物＞石油醚提取物＞水提取物。其中，氯仿提取物的抑制率达到85.26％，高于阳性对照药吲哚美辛(抑制率78.09％)，抗炎作用显著。实验结果见表1所示。

表1鸭脚木皮提取物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响(n＝14，

)

注：与空白对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01

(二)镇痛作用实验

1实验材料

1.1药物

本发明制备的鸭脚木皮提取物，包括石油醚提取物、氯仿提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物或水提取物，分别用0.5％CMC-Na水溶液配制成0.0003g/ml、0.03g/ml、0.0016g/ml、0.0028g/ml、0.005g/ml；

吲哚美辛肠溶片，广东华南药业集团有限公司生产，批号：20100906，取片剂加0.5％CMC-Na配成浓度为0.5mg/ml的混悬液；

罗通定，四川康福来药业集团有限公司生产，批号：20100224，取片剂加0.5％CMCNa配成浓度为1mg/ml的混悬液；

冰醋酸，广东化学试剂厂生产，批号：20100901-2，用蒸馏水配制成0.7％的溶液；

甲醛，分析纯，洛阳市化学试剂厂生产，批号：100524-2；

羧甲基纤维素钠(CMC-Na)，分析纯，广东器化医疗设备有限公司生产，批号：20100922。

1.2动物

2实验方法

2.1对醋酸所致小鼠扭体反应的影响

取NIH小鼠98只，体重18～22g，雌雄各半，随机分为7组，每组14只，分组及给药方法同上。未次给药后1h，各组小鼠分别腹腔注射0.7％冰醋酸(10ml/kg)，观察15min内小鼠的扭体次数，扭体反应的表现为腹部收缩内凹，身体扭曲，后肢伸展。各给药组与空白对照组比较，按下式计算镇痛百分率。

2.2对甲醛所致小鼠疼痛反应的影响

取NIH小鼠112只，体重18～22g，雌雄各半，随机分为8组，每组14只，其中阳性对照组为吲哚美辛组(0.01g/kg)和罗通定组(0.02g/kg)，其余分组及给药方法同上。未次给药后1h，用微量注射器抽取体积分数为2.5％甲醛溶液20μL注入小鼠右侧后爪掌心皮下复制甲醛致痛模型。注射后，将动物置于观察笼中，在动物不能察觉的前提下记录其第I期(0～5min)、第II期(15～30min)对注射足的累计舔足时间。各给药组与空白对照组比较，按下式计算各组的镇痛百分率。

3 实验结果

3.1对醋酸所致小鼠扭体反应的影响

结果表明，鸭脚木皮提取物对醋酸所致的小鼠疼痛反应的镇痛作用大小为氯仿提取物＞水提取物＞正丁醇提取物＞石油醚提取物＞乙酸乙酯提取物。其中，鸭脚木皮氯仿提取物和水提取物能显著减少醋酸所致的小鼠扭体次数。

表2鸭脚木皮提取物对醋酸致小鼠疼痛的影响(n＝14，

)

注：与空白对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01

3.2对甲醛所致小鼠疼痛反应的影响

结果表明，鸭脚木皮提取物对甲醛所致小鼠疼痛反应的镇痛作用大小为氯仿提取物＞水提取物＞正丁醇提取物＞乙酸乙酯提取物＞石油醚提取物。其中，氯仿提取物能显著减少小鼠的舔足时间，疼痛抑制率接近阳性对照组(罗通定)。

表3鸭脚木皮提取物对甲醛致小鼠疼痛的影响(n＝14，

)

注：与空白对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01

由表1可知，鸭脚木皮提取物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的抑制率大小为氯仿提取物＞正丁醇提取物＞乙酸乙酯提取物＞石油醚提取物＞水提取物。其中，氯仿提取物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有很强的抑制作用，表现出显著的抗炎活性。

由表2、3可知，鸭脚木皮提取物对甲醛所致小鼠疼痛反应的镇痛作用大小为氯仿提取物＞水提取物＞正丁醇提取物＞石油醚提取物和乙酸乙酯提取物。鸭脚木皮氯仿提取物能显著减少醋酸所致的小鼠扭体次数，明显减少甲醛所致疼痛小鼠的舔足时间，镇痛作用接近阳性对照药罗通定。

鸭脚木皮抗炎镇痛作用明显，尤其是其氯仿提取物具有显著的抗炎镇痛活性，可应用于制备抗炎镇痛药物。

Claims

1. 一种鸭脚木皮提取物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）用乙醇回流提取鸭脚木皮粉末，静置过滤；

（2）将步骤（1）所得滤液减压回收溶剂即得总提取物；

（3）将步骤（2）所得总提取物用水混悬，再用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取；

（4）分别合并步骤（3）所得石油醚层、氯仿层、乙酸乙酯层和正丁醇层萃取液；

（5）将步骤（4）合并所得石油醚层、氯仿层、乙酸乙酯层和正丁醇层萃取液及萃取结束后的水层分别减压回收溶剂，得到鸭脚木皮的石油醚提取物、氯仿提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水提取物；

其中，步骤（1）所述鸭脚木皮粉末采用鸭脚木（Schefflera octophylla（Lour.）Harms）的树皮制备得到。

2.权利要求1所述制备方法制备得到的鸭脚木皮的氯仿提取物。

3、权利要求2所述鸭脚木皮的氯仿提取物的应用，其特征在于应用于制备抗炎药物方面。

4、根据权利要求3所述的应用，其特征在于应用于制备治疗关节炎、风湿性关节炎、类风湿性关节炎、风湿骨痛、跌打肿痛或咽喉肿痛的药物。

5、权利要求2所述鸭脚木皮提取物的应用，其特征在于应用于制备镇痛药物方面。

6、根据权利要求5所述的应用，其特征在于应用于制备治疗关节炎、风湿性关节炎、类风湿性关节炎、风湿骨痛、跌打肿痛或咽喉肿痛的药物。