CN102239876B - 冠菌素作为棉花脱叶剂的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了冠菌素的新用途。该新用途是冠菌素在制备植物脱叶剂中的应用，特别是在制备棉花脱叶剂中的应用。本发明利用冠菌素进行脱叶，具有用量少、效果好、环境污染小的特性。本发明的冠菌素来自于微生物发酵液，当100mg/L冠菌素喷到棉株14天后脱叶率达到80％以上，与300mg/L噻苯隆处理效果等同，但冠菌素处理的吐絮率可达72.7-76.8％，明显优于噻苯隆处理。
Description
技术领域
本发明涉及脱叶剂领域，特别是涉及新型物质冠菌素作为一种脱叶剂在棉花作物中的应用。
背景技术
冠菌素(Coronatine，简称COR)作为茉莉酸甲酯(MeJA)的环戊烷结构类似物，是由植物病原菌丁香假单胞菌的几个致病变种产生的一种非寄主专化性毒素(Benderet al.，1999；Palmer et al.，1993)。目前，关于COR的生理作用研究已经取得了一定的研究进展，研究表明，COR具有多种生理功能，它的活性是JA类物质的100-10000倍左右，在抗胁迫方面尤其显著，可作为一种新型的植物生长调节剂(Uppalapati etal.，2005；Block et al.，2005；Brooks et al.，2005)。除此之外，COR作为一种新型环境友好型物质，其潜在的其他生理作用有待于进一步研究。
随着棉花采收机械化的发展，机械采收前棉花脱叶剂的使用较为广泛，目前，国内外使用的棉花脱叶剂种类较多，效果各不相同，但仍旧需要不断研究和发现新的效果好、成本低、毒性小、残留少的环境友好型脱叶剂。
发明内容
本发明的目的是提供冠菌素的新用途。
本发明所提供的一个新用途是冠菌素在制备植物脱叶剂中的应用。
所述植物脱叶剂具体可为棉花脱叶剂。
本发明所提供的另一个新用途是冠菌素在制备增强棉花脱叶和吐絮的产品中的应用。
所述冠菌素可通过发酵冠菌素产生菌获得。
上述棉花脱叶剂可按照包括如下步骤的方法制备：在液体培养基中发酵冠菌素产生菌，收集发酵液，从得到的发酵液中提取冠菌素，得到的冠菌素即为棉花脱叶剂。
所述冠菌素产生菌可包括以下几种：丁香假单胞菌绛红致病变种(P.s.pv.atropurpruea)、丁香假单胞菌大豆致病变种(P.s.pv.glycinea)、丁香假单胞菌番茄致病变种(P.s.pv.tomato)、丁香假单胞菌李死致病变种(P.s.pv.morsprunorum)、丁香假单胞菌斑生致病变种(P.s.pv.maculicola)、丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(P.s.pv.actinidiae)、野油菜黄单胞菌栖新西兰麻致病变种(X.c.pv.Phormiicola)(Palmer D A，Bender C L.Effects of environmental andnutritional factors on production of the polyketide phytotoxin coronatine byPseudomonas syringae pv.glycinea.Appl.Environ.Microbiol.1993，59，1619-1626.)。
其中的丁香假单胞菌大豆致病变种(P.s.pv.glycinea)具体可为保藏号为CGMCC1412的丁香假单胞菌大豆致病变种，或为保藏号为CGMCC1276的丁香假单胞菌大豆致病变种，或为保藏编号为CGMCC No.2533的丁香假单胞菌大豆致病变种(Pseudomonas syringae pv.glycinea)MW123。
可用现有的培养丁香假单胞菌的液体培养基培养上述冠菌素产生菌，如由A、B液分开进行灭菌后，混合得到的培养基。其中，A液可为：氯化铵1.0g，KH2PO4 4.1g，K2HPO4 3.6g，MgSO4·7H2O 0.2g，KNO3 0.3g，2mM FeCl3 10ml，水890ml，pH 6.8；B液可为：葡萄糖20g，水100ml。
所述发酵中采用的温度为适宜丁香假单胞菌生长的温度，如18℃-24℃。
冠菌素可按照Palmer D A工艺制备，其主要方法如下：发酵液经离心后弃去沉淀，用有机溶剂提取上清液，提取液减压浓缩得冠菌素粗品，该粗品含有大量脂溶性物质，需要精制，进一步精制一般将粗品溶解于溶剂中，然后用硫酸铵溶液反萃，再用溶剂提取，然后减压浓缩直接干燥得到产品(Palmer D A and C L Bender.Effects ofenvironmental and nutritional factors on production of the polyketidephytotoxin coronatine by Pseudomonas syringae pv.glycinea.Appl.Environ.Microbiol.1993，59，1619-1626.)。
冠菌素还可按照专利号为ZL200710099033.6中的方法得到纯度为95％以上的纯品。
本发明所提供的另一个用途是利用冠菌素进行棉花脱叶的一种方法。
本发明所提供的棉花脱叶的方法，包括如下步骤：向吐絮率达到35％-75％(具体可为40％-50％)的棉花植株的茎叶喷施冠菌素水溶液或上述方法制备的棉花脱叶剂水溶液，所喷施的冠菌素水溶液的浓度为10-1000mg/L(如100-300mg/L)，所喷施的棉花脱叶剂水溶液的浓度以冠菌素计为10-1000mg/L(如100-300mg/L)。
本发明所提供的再一个用途是利用冠菌素提高棉花脱叶率和吐絮率的一种方法。
本发明所提供的提高棉花脱叶率和吐絮率的方法，包括如下步骤：向吐絮率达到35％-75％(具体可为40％-50％)的棉花植株的茎叶喷施冠菌素水溶液或上述方法制备的棉花脱叶剂水溶液，所喷施的冠菌素水溶液的浓度为10-1000mg/L(如100-300mg/L)，所喷施的棉花脱叶剂水溶液的浓度以冠菌素计为10-1000mg/L(如100-300mg/L)。
本发明利用冠菌素进行脱叶，具有用量少、效果好、环境污染小的特性。本发明的冠菌素来自于微生物发酵液，当其喷到棉株14天后脱叶率达到80％以上，棉铃吐絮率可达78％左右。通过试验比较，处理后7天，100mg/L的COR与300mg/L的目前广泛使用的脱叶剂噻苯隆(TDZ)处理效果等同，200-300mg/L的COR脱叶效果优于300mg/L的TDZ处理。处理后14天，100mg/L的COR处理脱 叶率可达80％，较清水对照高41.9％，效果与300mg/L的TDZ相近。同时，处理后7天，COR处理的吐絮率显著增加，TDZ处理与清水对照无显著差异。处理后14天，COR处理的吐絮率可达72.7-77.5％，较对照高6.8-13.8％。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
下述实施例中冠菌素的纯度均用高效液相色谱法检测。高效液相色谱检测中用到的流动相由0.05％的三氟乙酸(pH2.9)和乙腈按1∶9的体积比混合而成。检测波长为208nm、流速2mL/min、进样量20μL、样品保留10min。用冠菌素标准品(广州伟伯化工有限公司)进行定量。
实施例1、利用COR进行棉花脱叶
一、制备COR
1、发酵
挑取冷冻保存的丁香假单胞菌大豆致病变种MW123 CGMCC 2533(记载在中国专利200810119153.2中)于斜面培养基(溶质为甘露醇1％，L-谷氨酸钠0.2％，KH2PO4 0.05％，NaCl 0.02％，MgSO4·7H2O 0.02％，1.3％的琼脂粉，溶剂为水；该培养基的pH 7.0)上，28℃培养48-60h使其活化，然后挑取一环活化好的菌体，接入含有10ug/ml的卡那霉素和30ug/ml的链霉素的液体培养基(含有甘露醇1％，L-谷氨酸钠0.2％，KH2PO4 0.05％，NaCl 0.02％，MgSO4·7H2O 0.02％，pH 7.0；121℃灭菌30min)中，28℃培养36-48h，到对数期时，取培养菌液按2％(体积比)接种量接入发酵培养基(该发酵培养基由A液和B液混合而成。A液：氯化铵1.0g，KH2PO4 4.1g，K2HPO4 3.6g，MgSO4·7H2O 0.2g，KNO3 0.3g，2mM FeCl3 10ml，蒸馏水890ml，pH 6.8；B液：葡萄糖20g，蒸馏水100ml。A、B液分开进行115℃灭菌20min，接种前混合)中，在温度为18℃-24℃、转速为260rpm/min的条件下发酵7天，即得到成熟发酵液，经高效液相色谱法检测冠菌素产量达到100mg/L。
2、纯化
取5000ml上述发酵液离心弃菌体沉淀，得到发酵液上清液。将25克HPD300大孔吸附树脂用乙醇充分浸泡溶胀后，用蒸馏水洗涤至无乙醇，装入吸附柱中，用水平衡；用盐酸将上述收集得到的发酵液上清液的pH值调节至pH2.5，加入到上述装有大孔吸附树脂的吸附柱中，以5.5升/小时的吸附速率过柱；吸附完毕后，用蒸馏水冲洗吸附柱至流出液无色后，再用丙酮洗脱，洗脱速率为7.5升/小时；将丙酮洗脱液在温度为45℃，0.06-0.09Mpa Mpa的条件下减压浓缩得到浸膏，干燥后得到冠菌素产品。用高 效液相色谱法方法检测该冠菌素产品的纯度，结果表明该冠菌素产品中冠菌素的质量百分含量为96％。
二、植物实验
供试棉花品种：国欣棉3号。
实验处理：将步骤一得到的COR配成COR的浓度分别为50mg/L、100mg/L、200mg/L、300mg/L、400mg/L的水溶液，分别作为5个处理，另外设清水对照(CK)和300mg/L的噻苯隆(TDZ)水溶液对照。共7个处理。
试验于2010年9月在河北省河间市国欣农研会试验田进行。采用随机区组实验设计，小区实验随机排列，7个处理，重复3次，每小区面积为6m×4m＝24m2。施药当天晴，试验期间无大风。采用微型喷雾器对吐絮率达45％的棉株进行茎叶喷施处理，每小区喷药液量为0.8L。7天后和14天后统计脱叶率和吐絮率。
每小区选取6株挂牌，在施药前调查各小区叶片数、总铃数和吐絮数，在施药后7天和施药后14天分别调查各小区叶片数和吐絮数，以计算各处理叶片脱落率和棉铃吐絮率。其中，脱叶率(％)＝(施药前叶片数-施药后7天或14天的叶片数)/施药前叶片数×100％
施药前吐絮率(％)＝施药前吐絮数/总铃数×100％
施药后吐絮率(％)＝施药后7天或14天吐絮数/总铃数×100％
7天后统计脱叶率和吐絮率，结果显示，清水对照的脱叶率为28.6±2.3％，50mg/LCOR水溶液的脱叶率为36.4±4.1％，100mg/L COR水溶液的脱叶率为47.2±4.5％，200mg/L COR水溶液的脱叶率为51.3±3.9％，300mg/L COR水溶液的脱叶率为52.4±3.2％，400mg/L COR水溶液的脱叶率为50.9±2.8％，300mg/L的噻苯隆(TDZ)水溶液的脱叶率为48.6±2.4％。喷施7天后，清水对照的吐絮率为50.8±4.1％，50mg/L COR水溶液的吐絮率为47.8±2.3％，100mg/L COR水溶液的吐絮率为53.9±3.2％，200mg/LCOR水溶液的吐絮率为63.8±3.3％，300mg/L COR水溶液的吐絮率为66.0±3.5％，400mg/L COR水溶液的吐絮率为66.8±4.1％，300mg/L的噻苯隆(TDZ)水溶液的吐絮率为53.5±3.1％。
喷施14天后，清水对照的脱叶率为55.3±4.8％，50mg/L COR水溶液的脱叶率为68.4±2.7％，100mg/L COR水溶液的脱叶率为79.8±3.6％，200mg/L COR水溶液的脱叶率为83.3±4.2％，300mg/L COR水溶液的脱叶率为84.8±3.2％，400mg/L COR水溶液的脱叶率为83.6±5.1％，300mg/L的噻苯隆(TDZ)水溶液的脱叶率为80.4±3.9％。喷施14天后，清水对照的吐絮率为66.1±3.3％，50mg/L COR水溶液的吐絮率为67.6±2.5％，100mg/L COR水溶液的吐絮率为73.8±4.2％，200mg/L COR水溶液的吐絮率为75.8±2.6％，300mg/L COR水溶液的吐絮率为77.3±3.8％，400mg/L COR水溶液的 吐絮率为77.8±4.7％，300mg/L的噻苯隆(TDZ)水溶液的吐絮率为71.3±3.5％。
结果表明，处理7天后，100mg/L COR与300mg/L的TDZ脱叶效果等同，200mg/LCOR脱叶效果优于300mg/L的TDZ处理，较清水对照高79.4％；处理14天后，100mg/LCOR处理脱叶率可达79.8％，较CK高44.3％，效果与300mg/L的TDZ相近。同时，处理后14天，100mg/L以上浓度COR处理的吐絮率可达75％左右，较清水对照高11.6-17.7％。
实施例2、利用COR进行棉花脱叶
一、制备COR
1、发酵
除菌种为丁香假单胞菌大豆致病变种CGMCC1276(记载在中国专利ZL200510011466.2中)，其它方法均与实施例1的步骤一相同。
2、纯化
取5000ml上述发酵液离心弃菌体沉淀，得到发酵液上清液。将25克HPD300大孔吸附树脂用乙醇充分浸泡溶胀后，用蒸馏水洗涤至无乙醇，装入吸附柱中，用水平衡；用盐酸将上述收集得到的发酵液上清液的pH值调节至pH2.5，加入到上述装有大孔吸附树脂的吸附柱中，以5.5升/小时的吸附速率过柱；吸附完毕后，用蒸馏水冲洗吸附柱至流出液无色后，再用丙酮洗脱，洗脱速率为7.5升/小时；将丙酮洗脱液在温度为45℃，0.06-0.09Mpa Mpa的条件下减压浓缩得到浸膏，干燥后得到冠菌素产品。用高效液相色谱法方法检测该冠菌素产品的纯度，结果表明该冠菌素产品中冠菌素的质量百分含量为96％。
二、植物实验
供试棉花品种：国欣棉8号。
实验处理：将步骤一得到的冠菌素产品配成COR的浓度分别为50mg/L、100mg/L、200mg/L、300mg/L、400mg/L的水溶液，分别作为5个处理，另外设清水对照(CK)和300mg/L的噻苯隆(TDZ)水溶液对照。共7个处理。
试验于2010年9月在河北省河间市国欣农研会试验田进行。采用随机区组实验设计，小区实验随机排列，7个处理，重复3次，每小区面积为6m×4m＝24m2。施药当天晴，试验期间无大风。采用微型喷雾器对吐絮率达40％的棉株进行茎叶喷施处理，每小区喷药液量为0.8L。7天后和14天后统计脱叶率和吐絮率。
每小区选取6株挂牌，在施药前调查各小区叶片数、总铃数和吐絮数，在施药后7天和施药后14天分别调查各小区叶片数和吐絮数，以计算各处理叶片脱落率和棉铃吐絮率。其中，脱叶率(％)＝(施药前叶片数-施药后7天或14天的叶片数)/施药前叶片数×100％
施药前吐絮率(％)＝施药前吐絮数/总铃数×100％
施药后吐絮率(％)＝施药后7天或14天吐絮数/总铃数×100％
7天后统计脱叶率和吐絮率，结果显示，清水对照的脱叶率为30.9±1.2％，50mg/LCOR水溶液的脱叶率为39.4±2.1％，100mg/L COR水溶液的脱叶率为47.8±2.8％，200mg/L COR水溶液的脱叶率为52.4±3.2％，300mg/L COR水溶液的脱叶率为52.8±2.3％，400mg/L COR水溶液的脱叶率为53.6±2.6％，300mg/L的噻苯隆(TDZ)水溶液的脱叶率为48.1±2.6％。喷施7天后，清水对照的吐絮率为48.7±3.1％，50mg/L COR水溶液的吐絮率为49.1±2.1％，100mg/L COR水溶液的吐絮率为50.8±1.8％，200mg/LCOR水溶液的吐絮率为56.7±2.4％，300mg/L COR水溶液的吐絮率为62.3±3.1％，400mg/L COR水溶液的吐絮率为63.6±5.4％，300mg/L的噻苯隆(TDZ)水溶液的吐絮率为49.9±2.4％。
喷施14天后，清水对照的脱叶率为55.6±2.8％，50mg/L COR水溶液的脱叶率为72.2±6.1％，100mg/L COR水溶液的脱叶率为78.5±4.2％，200mg/L COR水溶液的脱叶率为83.6±5.3％，300mg/L COR水溶液的脱叶率为83.9±3.7％，400mg/L COR水溶液的脱叶率为84.2±4.7％，300mg/L的噻苯隆(TDZ)水溶液的脱叶率为79.1±4.9％。喷施14天后，清水对照的吐絮率为61.4±3.2％，50mg/L COR水溶液的吐絮率为64.5±3.8％，100mg/L COR水溶液的吐絮率为72.7±4.5％，200mg/L COR水溶液的吐絮率为75.3±3.3％，300mg/L COR水溶液的吐絮率为75.7±5.1％，400mg/L COR水溶液的吐絮率为74.8±4.3％，300mg/L的噻苯隆(TDZ)水溶液的吐絮率为70.4±3.6％。
结果表明，处理7天后，100mg/L COR与300mg/L的TDZ脱叶效果几乎等同，200mg/LCOR脱叶效果优于300mg/L的TDZ处理，较清水对照高69.5％，处理14天后，100mg/LCOR处理脱叶率可达78.5％，较CK高41.2％，效果与300mg/L的TDZ相近。同时，处理后14天，100mg/L以上浓度COR处理的吐絮率可达72.7-75.7％，较清水对照高18.4-23.3％。
实施例3、利用COR进行棉花脱叶
一、制备COR
1、发酵
除菌种为丁香假单胞菌大豆致病变种(Pseudomonas syringae pv.glycinea)MW123外，其它方法均与实施例1的步骤一相同。其中的MW123菌株，已于2008年5月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，保藏编号为CGMCC No.2533。丁香假单胞菌大豆致病变种(Pseudomonas syringae pv.glycinea)MW123已在中国专利ZL 200810119153.2得到授权。
2、纯化
取5000ml上述发酵液离心弃菌体沉淀，得到发酵液上清液。将25克HPD300大孔吸附树脂用乙醇充分浸泡溶胀后，用蒸馏水洗涤至无乙醇，装入吸附柱中，用水平衡；用盐酸将上述收集得到的发酵液上清液的pH值调节至pH2.5，加入到上述装有大孔吸附树脂的吸附柱中，以5.5升/小时的吸附速率过柱；吸附完毕后，用蒸馏水冲洗吸附柱至流出液无色后，再用丙酮洗脱，洗脱速率为7.5升/小时；将丙酮洗脱液在温度为45℃，0.06-0.09Mpa Mpa的条件下减压浓缩得到浸膏，干燥后得到冠菌素产品。用高效液相色谱法方法检测该冠菌素产品的纯度，结果表明该冠菌素产品中冠菌素的质量百分含量为96％。
二、植物实验
供试棉花品种：鲁棉研28号。
实验处理：将步骤一得到的冠菌素产品配成COR的浓度分别为50mg/L、100mg/L、200mg/L、300mg/L、400mg/L的水溶液，分别作为5个处理，另外设清水对照(CK)和300mg/L的噻苯隆(TDZ)水溶液对照。共7个处理。
试验于2010年10月在北京市中国农业大学上庄实验站进行。采用随机区组实验设计，小区实验随机排列，7个处理，重复3次，每小区面积为6m×4m＝24m2。施药当天晴，试验期间无大风。采用微型喷雾器对吐絮率达45％的棉株进行茎叶喷施处理，每小区喷药液量为0.8L。7天后和14天后统计脱叶率和吐絮率。
每小区选取8株挂牌，在施药前调查各小区叶片数、总铃数和吐絮数，在施药后7天和施药后14天分别调查各小区叶片数和吐絮数，以计算各处理叶片脱落率和棉铃吐絮率。其中，脱叶率(％)＝(施药前叶片数-施药后7天或14天的叶片数)/施药前叶片数×100％
施药前吐絮率(％)＝施药前吐絮数/总铃数×100％
施药后吐絮率(％)＝施药后7天或14天吐絮数/总铃数×100％
7天后统计脱叶率和吐絮率，结果显示，清水对照的脱叶率为27.9±1.4％，50mg/LCOR水溶液的脱叶率为48.6±2.7％，100mg/L COR水溶液的脱叶率为50.2±2.6％，200mg/L COR水溶液的脱叶率为52.9±3.8％，300mg/L COR水溶液的脱叶率为54.5±4.2％，400mg/L COR水溶液的脱叶率为55.1±2.4％，300mg/L的噻苯隆(TDZ)水溶液的脱叶率为50.4±3.2％。喷施7天后，清水对照的吐絮率为52.9±3.1％，50mg/L COR水溶液的吐絮率为52.7±2.6％，100mg/L COR水溶液的吐絮率为61.3±5.4％，200mg/LCOR水溶液的吐絮率为63.4±5.1％，300mg/L COR水溶液的吐絮率为65.2±4.3％，400mg/L COR水溶液的吐絮率为64.9±3.5％，300mg/L的噻苯隆(TDZ)水溶液的吐絮率为56.7±4.2％。
喷施14天后，清水对照的脱叶率为59.8±5.6％，50mg/L COR水溶液的脱叶率为69.2±5.4％，100mg/L COR水溶液的脱叶率为81.4±6.1％，200mg/L COR水溶液的脱叶率为83.1±3.7％，300mg/L COR水溶液的脱叶率为84.6±4.2％，400mg/L COR水溶液的脱叶率为84.7±4.7％，300mg/L的噻苯隆(TDZ)水溶液的脱叶率为81.6±6.4％。喷施14天后，对照的吐絮率为68.4±3.2％，50mg/L COR水溶液的吐絮率为70.8±3.5％，100mg/L COR水溶液的吐絮率为73.8±4.2％，200mg/L COR水溶液的吐絮率为75.2±3.1％，300mg/L COR水溶液的吐絮率为77.5±4.4％，400mg/L COR水溶液的吐絮率为76.6±3.9％，300mg/L的噻苯隆(TDZ)水溶液的吐絮率为72.3±2.8％。
结果表明，处理7天后，100mg/L COR与300mg/L的TDZ脱叶效果等同，200mg/LCOR比300mg/L的TDZ处理效果要好，脱叶率较清水对照高89.5％；处理14天后，100mg/LCOR处理脱叶率可达81.4％，较CK高36.1％，效果与300mg/L的TDZ相近。同时，处理后14天，100mg/L以上浓度COR处理的吐絮率可达73.8-77.5％，较清水对照高7.9-13.3％。
实施例4、利用COR进行棉花脱叶
一、制备COR
1、发酵
同实施例3的步骤1。
2、纯化
取5000ml上述发酵液离心弃菌体沉淀，得到发酵液上清液。将25克HPD300大孔吸附树脂用乙醇充分浸泡溶胀后，用蒸馏水洗涤至无乙醇，装入吸附柱中，用水平衡；用盐酸将上述收集得到的发酵液上清液的pH值调节至pH2.5，加入到上述装有大孔吸附树脂的吸附柱中，以5.5升/小时的吸附速率过柱；吸附完毕后，用蒸馏水冲洗吸附柱至流出液无色后，再用丙酮洗脱，洗脱速率为7.5升/小时；将丙酮洗脱液在温度为45℃，0.06-0.09Mpa Mpa的条件下减压浓缩得到浸膏，干燥后得到500.6mg冠菌素产品，收率为63.5％；用高效液相色谱法方法检测该冠菌素产品的纯度，结果表明该冠菌素产品中冠菌素的质量百分含量为97％。
二、植物实验
供试棉花品种：鲁棉研28号。
实验处理：将步骤一得到的纯度为97％的冠菌素产品配成COR的浓度分别为50mg/L、100mg/L、200mg/L、300mg/L、400mg/L的水溶液，分别作为5个处理，另外设清水对照(CK)和300mg/L的噻苯隆(TDZ)水溶液对照。共7个处理。
试验于2010年10月在北京市中国农业大学上庄实验站进行。采用随机区组实验设计，小区实验随机排列，7个处理，重复3次，每小区面积为6m×4m＝24m2。施药当 天晴，试验期间无大风。采用微型喷雾器对吐絮率达50％的棉株进行茎叶喷施处理，每小区喷药液量为0.8L。7天后和14天后统计脱叶率和吐絮率。
每小区选取8株挂牌，在施药前调查各小区叶片数、总铃数和吐絮数，在施药后7天和施药后14天分别调查各小区叶片数和吐絮数，以计算各处理叶片脱落率和棉铃吐絮率。其中，脱叶率(％)＝(施药前叶片数-施药后7天或14天的叶片数)/施药前叶片数×100％
施药前吐絮率(％)＝施药前吐絮数/总铃数×100％
施药后吐絮率(％)＝施药后7天或14天吐絮数/总铃数×100％
7天后统计脱叶率和吐絮率，结果显示，清水对照的脱叶率为33.8±1.3％，50mg/LCOR水溶液的脱叶率为49.2±2.6％，100mg/L COR水溶液的脱叶率为52.2±3.1％，200mg/L COR水溶液的脱叶率为55.9±3.6％，300mg/L COR水溶液的脱叶率为56.8±2.4％，400mg/L COR水溶液的脱叶率为58.7±3.8％，300mg/L的噻苯隆(TDZ)水溶液的脱叶率为52.5±2.7％。喷施7天后，清水对照的吐絮率为56.9±2.4％，50mg/L COR水溶液的吐絮率为57.4±3.2％，100mg/L COR水溶液的吐絮率为59.9±3.5％，200mg/LCOR水溶液的吐絮率为65.3±3.1％，300mg/L COR水溶液的吐絮率为67.4±2.3％，400mg/L COR水溶液的吐絮率为67.9±4.1％，300mg/L的噻苯隆(TDZ)水溶液的吐絮率为60.5±3.7％。
喷施14天后，清水对照的脱叶率为60.5±3.3％，50mg/L COR水溶液的脱叶率为71.2±3.5％，100mg/L COR水溶液的脱叶率为80.6±3.2％，200mg/L COR水溶液的脱叶率为82.7±4.1％，300mg/L COR水溶液的脱叶率为85.3±3.8％，400mg/L COR水溶液的脱叶率为84.9±4.6％，300mg/L的噻苯隆(TDZ)水溶液的脱叶率为80.4±3.8％。喷施14天后，清水对照的吐絮率为69.5±2.9％，50mg/L COR水溶液的吐絮率为71.8±4.5％，100mg/L COR水溶液的吐絮率为76.8±3.9％，200mg/L COR水溶液的吐絮率为77.2±3.6％，300mg/L COR水溶液的吐絮率为78.9±5.2％，400mg/L COR水溶液的吐絮率为78.4±4.3％，300mg/L的噻苯隆(TDZ)水溶液的吐絮率为69.7±3.4％。
结果表明，处理7天后，100mg/L COR与300mg/L的TDZ脱叶效果等同，200mg/LCOR比300mg/L的TDZ处理效果要好，脱叶率较清水对照高65.4％；处理14天后，100mg/LCOR处理脱叶率可达80.6％，较CK高33.2％，效果与300mg/L的TDZ相近。同时，处理后14天，100mg/L以上浓度COR处理的吐絮率可达76.8-78.9％，较清水对照高10.5-13.5％。
Claims (8)
1.冠菌素在制备棉花脱叶剂中的应用。
2.冠菌素在制备增强棉花脱叶和吐絮的产品中的应用。
3.一种棉花脱叶的方法，包括如下步骤：向吐絮率达到35%-75%的棉花植株的茎叶喷施冠菌素水溶液或棉花脱叶剂的水溶液，所喷施的冠菌素水溶液的浓度为10-1000mg/L；所喷施的棉花脱叶剂的水溶液的浓度以冠菌素计为10-1000mg/L；
所述棉花脱叶剂，其制备方法包括如下步骤：在液体培养基中发酵冠菌素产生菌，收集发酵液，从得到的发酵液中提取冠菌素，得到的冠菌素即为棉花脱叶剂。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述的所喷施的冠菌素水溶液的浓度均为100-300mg/L，所述的所喷施的棉花脱叶剂的水溶液的浓度以冠菌素计均为100-300mg/L。
5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于：所述吐絮率均为40%-50%。
6.一种提高棉花脱叶率和吐絮率的方法，包括如下步骤：向吐絮率达到35%-75%的棉花植株的茎叶喷施冠菌素水溶液或棉花脱叶剂的水溶液，所喷施的冠菌素水溶液的浓度为10-1000mg/L；所喷施的棉花脱叶剂的水溶液的浓度以冠菌素计为10-1000mg/L；
所述棉花脱叶剂，其制备方法包括如下步骤：在液体培养基中发酵冠菌素产生菌，收集发酵液，从得到的发酵液中提取冠菌素，得到的冠菌素即为棉花脱叶剂。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述的所喷施的冠菌素水溶液的浓度均为100-300mg/L，所述的所喷施的棉花脱叶剂的水溶液的浓度以冠菌素计均为100-300mg/L。
8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于：所述吐絮率均为40%-50%。
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