CN102218049B - 抗衰老的药物或保健食品组合物及用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种抗衰老的药物或保健食品组合物,该组合物按重量百分比包括如下成分:白藜芦醇0%-42%、花青素0%-65%、槲皮素20%-98%和维生素C 0.9%-11%,本发明的组合物的各组成成分之间具有协同作用,能在抗氧化、抗衰老、治疗心脑血管疾病方面提高药效并优于组方中的单方的功效,预示可明显提高临床治疗的有效率。由于本发明组合物相对减少了单方组分的用量,从而减轻或减少单独使用组成本发明组合物的组分引起的不良反应。本发明的组物合具有疗效确切、无毒副作用、服用方便、价格低廉的优点。
Description
技术领域
本发明属于药品和保健食品领域。涉及一种营养药物或保健食品组合物及用途。
背景技术
随着医疗技术的发达以及人们生活水平的提高,人类的寿命越来越长,85岁及以上年龄的人越来越多。在衰老群体中也存在更多的疾病。和30岁的人相比,90岁的人的神经机能会下降15%,心脏机能下降30%,肺机能下降50%,肾脏机能甚至下降了70%。内脏的衰老会引发糖尿病、心肌梗死等各种疾病。衰老往往还意味着死亡的临近。延缓衰老过程并降低年龄相关疾病发病率的营养药物组合物成为人们的迫切需要。自由基衰老理论认为,衰老是由机体正常代谢过程中产生的自由基对生命大分子物质、器官组织细胞以及免疫功能的破坏导致的。因此,要抗衰老就要从清除自由基做起。
流行病学研究发现酷好美食的法国人心脏血管疾病的发病率却不高,这就是著名的法兰西悖论(French Paradox)。研究发现这主要与法国人喜欢以红酒来搭配美食有关。由于红酒当中富含红酒多酚等多种有效成分,对身体非常有益。红酒多酚是一类包含白藜芦醇以及黄酮类的原花青素、槲皮素、儿茶素等的超强的抗氧化分子,可有效抵抗自由基的伤害。因此,长期饮用红酒可以有效延缓衰老、预防心血管疾病和肿瘤。
白藜芦醇(resveratrol,Res),化学名称为反式-3,4,5-三羟基-1,2-二苯乙烯(亦称芪三酚),是一种植物在恶劣环境下或遭到病原体侵害时,自身分泌的一种可抵御霉菌感染的抗毒素。其具有许多重要的生理活性,如:抗癌、保护心血管系统、雌激素样作用、抗氧化、延缓衰老、影响骨代谢等作用。相关资料显示,在虎杖、葡萄、花生、毛穗藜芦、毛脉酸模、买麻藤等70多种植物中提取的白藜芦醇(resveratrol)不仅能降低血脂及冠心病的发病率,对心血管系统起特殊保护作用,同时能调节低密度脂蛋白(LDL)的比例,减少血小板凝集等作用,更能延缓衰老,具有抗癌活性。所以,白藜芦醇被喻为继紫杉醇之后又一新的绿色抗癌药物。同时,被美国专著《抗衰老圣典》一书列为“100种最热门有效抗衰老物质之一”。
花青素(anthocyanin)是一类广泛存在于植物中的水溶性色素,属于类黄酮化合物,也是植物的主要呈色物质。大量研究表明:花青素具有很强的抗氧化作用,可以清除体内的自由基;降低氧化酶的活性;可以降低高血脂大鼠的甘油脂水平,改善高甘油脂脂蛋白的分解代谢;抑制胆固醇吸收,降低低密度脂蛋白胆固醇含量;抗变异、抗肿瘤、抗过敏、保护胃粘膜等多种功能。,从红葡萄中提取的花青素能有效地清除超氧自由基和羟基,在体外实验中,花青素能明显抑制低密度脂蛋白的氧化和血小板的聚集,这两种物质是引起动脉硬化和心血管疾病的主要因子。
槲皮素是黄酮醇类化合物的典型代表,它最显著的特点是抗氧化性强,是植物界分布最广的黄酮类化合物,也是人类饮食中最主要的生物类黄酮。药理活性表明槲皮素具有抗氧化、抗菌消炎、抗肿瘤、保肝、保肾、保护心血管等功能。因此,红酒多酚已成为抗衰老药物的研发热点。
目前,白藜芦醇和花青素主要从虎杖及葡萄皮、籽等天然植物资源中提取。天然植物的种植占用大量耕地,造成水土流失及生态环境恶化;种植过程中使用的农药、化肥会在提取物中残留,直接影响产品的安全性;由于植物中的白藜芦醇和原花青素含量很低,导致分离纯化成本偏高;因植物生长受环境影响较大,白藜芦醇和原花青素的含量不稳定,导致提取获得的产品质量不稳定。另外,从虎杖中提取的白藜芦醇存在大黄素毒性的问题。因此,资源问题将是制约白藜芦醇和原花青素产业发展的巨大障碍。
植物细胞培养技术是上世纪50年代基于高等植物细胞具有合成并积累次生代谢产物潜力的理论而发展起来的一种技术。迄今为止,全世界已对近1000种植物进行过细胞培养方面的研究,生产的天然产物产品包括药品、香料、色素、食品、化妆品等500多种。利用植物细胞培养技术生产珍惜名贵药用植物的替代品或其活性成分,是一条可以获得珍惜名贵中药材资源的行之有效的重要途径。通过植物细胞培养生产植物次生代谢产物具有如下突出优点:不对自然资源和环境产生破坏;不会发生种植原料的人为污染如农药、重金属残留;不受自然环境的影响如地域、气候、种植时间等;不会由于植物资源的逐渐减少而引起成本波动;可以工厂化生产,因而供应、产量、质量、价格等都有保障。
本发明人采用植物细胞大规模悬浮培养技术,成功实现了分别高产白藜芦醇和花青素的葡萄细胞的大规模培养,能够在极短时间内实现有效成分含量的大量富集。通过该技术获得的白藜芦醇和花青素具有天然来源无法比拟的优势:生长周期短、含量高、制备工艺简单、质量稳定、不存在农药、重金属残留、大黄素污染等。该技术采用天然植物细胞培养获得白藜芦醇和花青素,避免化学合成方法带来的溶剂、有毒物质污染等问题,能够在药品和保健食品领域进行广泛应用。
发明内容
本发明的目的是提供能辅助改善记忆、预防心脑血管疾病的抗衰老的药物或保健食品组合物。
本发明的第二个目的是提供抗衰老的药物或保健食品组合物的用途。
本发明的技术方案概述如下:
抗衰老的药物或保健食品组合物,按重量百分比包括如下成分:白藜芦醇0%-42%、花青素0%-65%、槲皮素20%-98%和维生素C 0.9%-11%。
所述白藜芦醇为0-26%,所述花青素为0-48.5%,所述槲皮素为41%-94%,所述维生素C为2.5%-5.9%。
还加入药学或保健食品可接受的辅料,制成口服制剂。
所述口服制剂为胶囊剂、冲剂、片剂、散剂、颗粒剂或口服液。
抗衰老的药物或保健食品组合物在制备辅助改善记忆、预防心脑血管疾病、抗衰老药物的应用或保健食品中的应用。
本发明的药物或保健食品的各组成成分之间具有协同作用,能在抗氧化、抗衰老、治疗心脑血管疾病方面提高药效,本发明的药物或保健食品组合物功效分别优于本发明组方中的单方的功效,预示本发明药物或保健食品可明显提高临床治疗的有效率。由于本发明组合物相对减少了单方组分的用量,从而减轻或减少单独使用组成本发明组合物的组分引起的不良反应。
实验证明,本发明的组合物具有辅助改善记忆、预防心脑血管疾病及抗衰老的功效。
本发明组合物具有抗氧化功效,能通过清除体内过量自由基发挥延缓衰老、辅助改善记忆、预防心脑血管疾病的作用。特别适合于脑力劳动者及年老体弱者服用。
本发明具有疗效确切、无毒副作用、服用方便、价格低廉的优点。
附图说明
图1为组成本发明的组合物中不同组分单用及联用对H2O2诱导PC12细胞损伤的保护作用。
具体实施方式
下面的实施例可以使本领域的技术人员更全面的理解本发明,但不以任何方式限制本发明。
本发明所使用的原料中:白藜芦醇和花青素可以采用市售产品,也可以选用含白藜芦醇和花青素的葡萄细胞培养标准提取物(天津艾赛博生物技术有限公司);所用的细胞株为葡萄细胞株(Vitis vinifera),是从幼小的葡萄果实诱导愈伤组织,将愈伤组织转入液体培养基悬浮培养,经过多年的细胞株筛选和代谢调控,获得一系列可高产花青素、白藜芦醇苷和白藜芦醇的细胞株和培养条件。本发明所用细胞株编号为VV001-VV010。葡萄细胞的诱导方法参见:Cormier F,Do CB,Nicolas Y.Anthocyanin production in selected cell lines of grape(Vitis viniferaL).In-vitro Cell.Dev.Biol.Plant.1994;30:171-173。葡萄细胞悬浮培养的方法参见:Zhang W,Curtin C,Kikuchi M,Franco C.Integration ofjasmonic acid and light irradiation for enhancementof anthocyanin biosynthesis in Vitis vinifera suspension cultures.Plant Sci.2002;162:459-468。白藜芦醇的提取工艺参见:江曙,朱蓉蓉,张芳,刘春美,吴薛明。虎杖中白藜芦醇提取方法及工艺的优化。南京中医药大学学报。2006;22:197-199。花青素提取工艺参见:王卫东,李超,凌莉。葡萄籽原花青素的提取与分离。中国食品添加剂。2010;3:84-89。槲皮素(质量含量≥98%)购自陕西森弗生物技术有限公司。
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明:
实施例1
抗衰老的药物或保健食品组合物,按重量百分比包括如下成分:白藜芦醇19%、花青素26%、槲皮素52%和维生素C 3%。
实施例2
抗衰老的药物或保健食品组合物,按重量百分比包括如下成分:白藜芦醇26%、花青素48.5%、槲皮素23%和维生素C 2.5%。
实施例3
抗衰老的药物或保健食品组合物,按重量百分比包括如下成分白藜芦醇42%、花青素16.1%、槲皮素41%和维生素C 0.9%。
实施例4
抗衰老的药物或保健食品组合物,按重量百分比包括如下成分:白藜芦醇4%、花青素65%、槲皮素20%和维生素C 11%。
实施例5
抗衰老的药物或保健食品组合物,按重量百分比包括如下成分:白藜芦醇4%、花青素1.1%、槲皮素94%和维生素C 0.9%。
实施例6
抗衰老的药物或保健食品组合物,按重量百分比包括如下成分:白藜芦醇3%、花青素1.1%、槲皮素90%和维生素C 5.9%。
实施例7
抗衰老的药物或保健食品组合物,按重量百分比包括如下成分:花青素32%、槲皮素64%和维生素C 4%。
实施例8
抗衰老的药物或保健食品组合物,按重量百分比包括如下成分:白藜芦醇26%、槲皮素70%和维生素C 4%。
实施例9
抗衰老的药物或保健食品组合物,按重量百分比包括如下成分:槲皮素94%和维生素C6%。
实施例10
抗衰老的药物或保健食品组合物,按重量百分比包括如下成分:槲皮素98%和维生素C2%。
上述原料还可以再加入药学或保健食品可接受的辅料制成口服制剂。
药学或保健食品可接受的辅料如稀释剂、润滑剂、润湿剂、崩解剂、粘合剂、防腐剂、乳化剂、助溶剂、助悬剂、填充剂等。
实施例11
本发明组合物的颗粒剂的制备
取实施例1的抗衰老的药物或保健食品组合物,加入适量淀粉、糊精、微晶纤维素,加入10%聚维酮乙醇溶液,制软材,过16目筛制成湿颗粒,湿颗粒40-60℃烘干,即得颗粒剂。
实施例2-10的抗衰老的药物或保健食品组合物加入实施例11的辅料按常规方法均可以制成颗粒剂。
实施例12
本发明组合物的胶囊剂的制备
取实施例1的抗衰老的药物或保健食品组合物,加入适量淀粉,用体积浓度为70%的乙醇水溶液作为润湿剂,过20目筛制粒,在60℃烘干,再过20目筛整粒,然后装入2号胶囊壳中,即得胶囊。
实施例2-10的抗衰老的药物或保健食品组合物使用实施例12的辅料按常规方法均可以制成胶囊剂。
实施例13
本发明组合物的片剂的制备
取实施例1的抗衰老的药物或保健食品组合物,加入适量淀粉、糊精、微晶纤维素,加入10%聚维酮乙醇溶液,制软材,过16目筛制成湿颗粒,湿颗粒40-60℃烘干,加入低取代羟丙基纤维素75g和硬脂酸镁2g压片,即得片剂。
实施例2-10的抗衰老的药物或保健食品组合物使用实施例13的辅料按常规方法均可以制成片剂。
实施例14
本发明组合物的泡腾片剂的制备
取实施例1的抗衰老的药物或保健食品组合物,加入酒石酸、碳酸氢钠、甜味剂、填充剂混匀,用无水乙醇制粒,干燥,加入润滑剂混匀,压片,即得泡腾片剂。
实施例2-10的抗衰老的药物或保健食品组合物使用实施例14的辅料按常规方法均可以制成泡腾片剂。
实施例15
本发明组合物的分散片剂的制备
取实施例1的抗衰老的药物或保健食品组合物,加入崩解剂、填充剂或稀释剂,混合均匀,加入粘合剂制成软材,制颗粒,干燥,加入部分崩解剂、助流剂或润滑剂混匀,压片,即得分散片剂。
实施例2-10的抗衰老的药物或保健食品组合物使用实施例15的辅料按常规方法均可以制成分散片剂。
实验例一:
1、组成本发明的组合物的组分单用及联用对H2O2诱导PC12细胞损伤的保护作用
1.1实验方法
1.1.1PC12细胞培养:PC12细胞株置于RPMI-1640培养基中,内含10%的特级马血清和5%的优级胎牛血清,青霉素100U/ml,链霉素100μg/ml,环丙沙星20μg/ml。置于37℃,5%CO2的培养箱中培养,每2-3d传代1次,待细胞长至90%接触时,吸去培养液,加入新的培养液,用移液枪把细胞吹散,1:3-1:4分瓶传代,取生长期细胞用于实验,计数板计数为2.4×105cfu/ml。
1.1.2铺板:将上述2.4×105cfu/ml的PC12以每孔190μl的量加入到96孔板中,置于37℃,5%CO2的培养箱中培养24h。
1.1.3换低血清1640完全培养基:将培养板中上清轻轻吸掉,再加入190μl低血清1640完全培养基。
1.1.4加药处理:向96孔板各孔加不同浓度的药物使用液10μl至相应的浓度,DMSO的终浓度控制在0.4%以下。空白组和损伤组中各加入10μl PBS做空白。加药后置于37℃,5%CO2培养箱培养30min。每组设六个复孔。
1.1.5加H2O2损伤:向96孔板中的除空白组外的各孔加2mM H2O2溶液,至终浓度为100μM。空白组中加入等体积PBS做空白。加药后放于37℃,5%CO2培养箱中培养12h。
1.1.6结果测定:分别向各孔内分别加浓度5mg/ml MTT溶液10μl,静置继续孵育4h后轻轻吸掉孔内上清液,每孔加100μl DMSO,震荡10min,使结晶物充分溶解,酶标仪测定OD570。本实验平行操作3次。(这里所说的药物是指本发明的抗衰老的药物或保健食品组合物及白藜芦醇、花青素、槲皮素、维生素C)
1.2实验结果(见图1)
图1中:
Q32:32μg/ml槲皮素;
RES12:12μg/ml白藜芦醇;
ACY16:16μg/ml花青素;
Vc2:2μg/ml维生素C;
Q32Vc2:32μg/ml槲皮素与2μg/ml维生素C联用;(实施例9)
QVcRES:32μg/ml槲皮素、2μg/ml维生素C与12μg/ml白藜芦醇联用;(实施例8)
QVcACY:32μg/ml槲皮素、2μg/ml维生素C与16μg/ml花青素联用;(实施例7)
QVcACYRES:32μg/ml槲皮素、2μg/ml维生素C、16μg/ml花青素与12μg/ml白藜芦醇联用。(实施例1)
##:与空白对照组相比,P<0.01;
*:与损伤组相比,p<0.05;**:与损伤组相比,p<0.01。
如图1所示为不同组分单用及联用对H2O2诱导PC12细胞损伤的保护作用。加H2O2损伤12h,损伤组细胞存活率降至空白对照组的46.01%。槲皮素、白藜芦醇、花青素及维生素C单用对PC12氧化损伤均有不同程度保护作用。槲皮素与维生素C两两联用,槲皮素与维生素C、白藜芦醇联用,槲皮素与维生素C、花青素联用,槲皮素与维生素C、白藜芦醇、花青素联用都表现出良好的药物协同作用。
实验例二、药物对D-半乳糖损伤小鼠脂褐质含量和抗氧化功能酶活力的影响
2.1动物选择
选用三月龄健康昆明种小鼠雌雄各半共90只,18-20g。随机分为5组:正常组、模型组、加药组(实施例2组合物及相应浓度白藜芦醇、花青素、槲皮素及维生素C单用组)。采用单笼饲养,自由摄食与饮水,室温18-20℃,日光灯辅助照明,每日维持光照12小时。
2.2实验方法
以生理盐水配制的0.96%D-半乳糖,5mg/kg体重,皮下注射造模,每日1次,连续造模6周。加药组经口给予不同受试样品,模型组和正常组给予同体积溶剂,在给受试样品的同时,除正常组外,各组继续给予相同剂量D-半乳糖皮下注射,正常组皮下注射生理盐水,实验结束处死动物,测脂褐质含量和抗氧化功能酶活力。测定结果均采用SPSS10.0软件One-way ANOVA(单因素方差分析)统计处理。
2.3实验结果:
表1不同剂量药物组合物对小鼠脂褐质含量和抗氧化功能酶活力的影响
#p<0.05VS正常组,*p<0.05VS模型组
从表1可以看出,本发明的组合物可以显著减少小鼠脂褐质含量,显著降低血清丙二醛(MDA)含量,表明本发明组合物具有体内预防或减少丙二醛(MDA)合成的活性。同时,本发明的组合物能显著增加小鼠的GSH含量,并提高SOD活性,表明本发明药物组合物具有抗氧化活性。且本发明组合物的药效显著优于各组分单用的药效,表明本发明药物组合物各有效成分之间具有协同的药物作用效果。
经试验,实施例1、实施例3-10的组合物也具有抗氧化活性。
Claims (5)
1.抗衰老的药物或保健食品组合物,其特征是按重量百分比包括如下成分:白藜芦醇19%、花青素26%、槲皮素52%和维生素C 3%。
2.抗衰老的药物或保健食品组合物,其特征是按重量百分比包括如下成分:白藜芦醇26%、花青素48.5%、槲皮素23%和维生素C 2.5%。
3.根据权利要求1或2所述的抗衰老的药物或保健食品组合物,其特征是还加入药学或保健食品可接受的辅料,制成口服制剂。
4.根据权利要求3所述的抗衰老的药物或保健食品组合物,其特征是所述口服制剂为胶囊剂、冲剂、片剂、散剂、颗粒剂或口服液。
5.权利要求1-4之一的抗衰老的药物或保健食品组合物在制备辅助改善记忆、预防心脑血管疾病、抗衰老药物的应用或保健食品中的应用。
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