CN102934799B - 一种含蚕豆提取物的保健品及应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种含蚕豆提取物的保健品，活性成分由蚕豆提取物和葡萄籽提取物组成，优选蚕豆提取物与葡萄籽提取物的重量比为3-18∶1。本发明将蚕豆提取物与葡萄籽提取物有机组合，使得两者天然物质所含的黄酮类、多酚类、磷脂类等成分重新组合，获得了协同保护多巴胺能神经元、减肥降血脂的功效，弥补了蚕豆提取物作为单一成分的保健缺陷，强化产品特定功效，从而更好地发挥和提升产品的保健功能。

Description

一种含蚕豆提取物的保健品及应用

技术领域

本发明属于保健食品制备技术领域，具体而言，涉及一种含蚕豆提取物的保健品及应用。 

背景技术

蚕豆是一种一年生或越年生豆科植物，富含磷、镁、硒等微量元素，还含有具有抗氧化活性的水溶性蛋白组分；新鲜蚕豆则是维生素A和维生素C的上等来源，含有多种具有降血脂、抗动脉硬化、抗肿瘤、抗骨质疏松等作用的黄酮类物质，此外蚕豆中的原花色素具有抗氧化、抑菌、抗癌和抗突变等生理活性。近年来，蚕豆在营养保健与药用价值方面的研究不断深入，蚕豆资源的综合开发利用引起社会各方面的广泛重视。研究并深入开发蚕豆，这对实现蚕豆产业化和延伸产业链具有重要意义。 

目前市场出售的蚕豆保健品，以单一的蚕豆制品居多。从中医养生角度分析，单一的蚕豆制品存在成分固定单纯、功效不够全面，起效不够迅速的弱点。蚕豆提取物来源于同一植物，存在成分固定单纯、同外源性的保健成分和功效不能协同互补，近期保健效果不突出。 

发明内容

为克服现有技术的缺陷，本发明采用以蚕豆提取物为主要成分，通过大量试验筛选后添加具有广泛地生物活性、药食同源的天然物质，组合成系列保健品，从而提供一种含蚕豆提取物的保健品及应用，以扩大蚕豆的使用范围，强化特定的保健功效，满足人们多层次的保健需求。 

本发明的第一个目的是这样实现的： 

一种含蚕豆提取物的保健品，活性成分由蚕豆提取物和葡萄籽提取物组成。 

优选地，所述含蚕豆提取物的保健品，其中蚕豆提取物与葡萄籽提取物的重量比为3-18：1。 

进一步优选地，所述含蚕豆提取物的保健品，其中蚕豆提取物与葡萄籽提取物的重量比为6-10：1。 

再进一步优选地，所述蚕豆提取物按如下方法制备而成：取新鲜蚕豆，筛检，清洗，压榨取汁，榨汁液静置使沉淀，滤过，滤液备用；蚕豆渣加适量75%乙醇提取两次，每次1.5小时，提取液回收乙醇后与所述滤液合并，减压浓缩至60℃相对密度为1.2-1.25的浸膏，喷雾干燥，即得蚕豆提取物。 

再进一步优选地，所述葡萄籽提取物按如下方法制备而成：取葡萄籽，筛检，烘干粉碎后过60目筛，加8倍量的75%乙醇，在70℃条件下浸提两次，每次1小时，提取液静置使沉淀，离心，收集上清液，回收乙醇，将上清液浓缩，将稠膏干燥，粉碎成100目细粉，即得葡萄籽提取物。 

本发明人通过蚕豆提取物联合葡萄籽提取物治疗帕金森病大鼠前后，帕金森病大鼠旋转行为及多巴胺能神经形态学观察，发现蚕豆提取物联合葡萄籽提取物对帕金森病模型大鼠黑质细胞有保护作用。因此，本发明的第二个目的在于提供一种新用途，即活性成分由蚕豆提取物和葡萄籽提取物组成的组合物在制备治疗帕金森病的药品或保健品中的应用。 

另外，本发明人通过动物实验研究发现，蚕豆提取物联合葡萄籽提取物用于肥胖并高血脂模型小鼠，结果是用药后在降低体重、血清总胆固醇、血清甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇方面，蚕豆提取物与葡萄籽提取物存在着明显的协同性作用，在升高高密度脂蛋白胆固醇方面也有着比较明显的优势。因此，本发明的第三个目的在于提供一种新用途，即活性成分由蚕豆提取物和葡萄籽提取物组成的组合物在制备减肥、降血脂的药品或保健品中的应用。 

与现有技术相比，本发明涉及的保健品具有如下优点和显著的进步：采用新鲜蚕豆提取物与葡萄籽提取物有机组合，使得两者天然物质所含的黄酮类、多酚类、磷脂类等成分重新组合，获得了协同治疗帕金森病、降血脂的功效，同时可以辅助减肥，弥补了蚕豆提取物作为单一成分的保健缺陷，强化产品特定功效，从而更好地发挥和提升产品的保健功能。 

具体实施例

以下是本发明的具体实施例，对本发明的技术方案做进一步作描述，但是本发明的保护范围并不限于这些实施例。凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发明的保护范围之内。本发明实施例2、3所用的提取物样品同实施例1。 

实施例1： 

新鲜蚕豆提取物按如下方法制备而得： 

取新鲜蚕豆，筛检，清洗，压榨取汁，榨汁液静置过夜使沉淀，滤过，滤液备用；蚕豆渣加适量75%乙醇提取两次，每次1.5小时，提取液回收乙醇后与上述滤液合并，减压浓缩至60℃相对密度为1.2-1.25的浸膏，喷雾干燥，即得蚕豆提取物。 

葡萄籽提取物按如下方法制备而得： 

取葡萄籽，筛检，烘干粉碎后过60目筛，加8倍量的75%乙醇，在70℃条件下浸提两次，每次1小时，提取液静置使沉淀，离心，收集上清液，回收乙醇，将上清液浓缩，将稠膏干燥，粉碎成100目细粉，即得葡萄籽提取物。 

称取上述新鲜蚕豆提取物88公斤，葡萄籽提取物12公斤，采用现有常规技术制作成口服液、胶囊、片剂或颗粒剂。具体步骤是主药计量、选择并计量辅料，均匀混料，充填胶囊（或灌装口服液、压片、颗粒分装）、检验、灭菌、包装即得。 

实施例2  组合物对帕金森病大鼠多巴胺能神经元的保护作用 

成年健康Wistar雄性大鼠，重量180-200g。按改良的Thomas方法制作帕金森病大鼠模型，将成功帕金森病大鼠模型随机分为组合物组（n=30）、帕金森病组（n=30），选择模型成功后1,7,14d为观察时点。组合物组（ZH组）大鼠每天9点按照体重进行2.5g/（kg·d）蚕豆提取物+0.25g/（kg·d）葡萄籽提取物灌胃，帕金森病组（PD组）大鼠进行生理盐水灌胃，直至观察时点。  

按改良的Thomas方法制作帕金森病大鼠模型：用7%水合氯醛（0.6ml/100g）进行腹腔注射麻醉，将头颅水平位固定在脑立体定位仪上，参照Paxions and Watson图谱确定右侧中脑腹侧被盖部（VTA）、黑质致密部（SNc）的三维坐标位置，暴露大鼠头顶部手术区，用碘酒，乙醇消毒，正中切开大鼠颅颈部皮肤，剥离骨膜、暴露前囟，人字缝。用颅骨钻钻两个直径为4mm的颅孔，按照坐标3.3μl/注射点，以0.5μl/min缓慢注射0.3%6-OHDA，留针10min后以1mm/min的速度缓慢拔针，手术完毕后用医用明胶海绵填塞颅骨孔，缝合切口，大鼠用包被保暖。 

到预定时点，先将待观察的大鼠放在盆内5min以适应环境，并观察有无自发旋转行为，然后按照每千克体重腹腔注射阿扑吗啡0.5mg，用钟式测转仪测量旋转次数。按预定时点将ZH组和PD组大鼠行麻醉后进行2.5%戊二醛、4%多聚甲醛混合透心灌注，固定，断头后取中脑进行石蜡包埋。 

石蜡块切片，脱蜡，片厚5μm，加1：100TBS稀释，蛋白酶K 37℃消化，用蒸馏水洗涤4次，每次3min，加标记缓冲液，每张取DIG-UTP和TDT各1μL，加入17μL标记缓冲液中混匀，放在湿盒中，37℃标记2h，每片加封闭液50μL，在室温中放置30min，1:100封闭液稀释链酶亲和素-过氧化酶，显色采用DAB、苏木素轻度复染，透明，脱水，封片，显微镜观察。 

帕金森病大鼠旋转行为表现为以右足为支撑点向健侧旋转，PD组1,7,14d旋转圈数无明显差异，ZH组随提取物治疗时间增加而圈数减少，其中7,14d旋转圈数明显少于PD组；PD组1,7,14d黑质尼氏细胞数逐渐减少，具有明显差异。ZH组随提取物治疗时间增加其黑质尼氏细胞数也逐渐减少，也具有明显差异，但是ZH组黑质尼氏细胞数1,7,14d均明显多于PD组；PD组1,7,14d黑质凋亡细胞数逐渐增加，且具有明显差异，ZH组随提取物治疗时间增加其黑质凋亡细胞数逐渐减少，且具有明显差异，其中7,14d黑质凋亡细胞数明显少于PD组。 

表3 PD组、ZH组各时点旋转圈数、黑质尼氏细胞数、黑质凋亡细胞数 

与1d比较，^#P<0.05；与7d比较，^△P<0.05, 与PD组比较，^*P<0.05 

研究表明，帕金森病发病过程存在细胞凋亡，自由基、神经毒素损伤等机制引起黑质多巴胺能神经元变性。在自由基-细胞凋亡-PD路径上，自由基起着关键性的作用，抗自由基成为抑制黑质细胞细胞凋亡重要措施。凋亡控制系统可能是调节黑质纹状体退行性关键。Xic采用TUNEl方法观察到帕金森病大鼠黑质损伤呈现细胞凋亡动态改变，并且有凋亡黑质细胞沿着6-OHDA注射针道分布现象，动物实验证实细胞凋亡参与了大鼠帕金森病的发病。本试验发现ZH组大鼠7,14d黑质细胞凋亡数显著低于PD组，表明蚕豆提取物联合葡萄籽提取物对帕金森病模型大鼠黑质细胞有保护作用。 

实施例3  组合物对肥胖并高血脂症小鼠的影响 

4周龄KM小鼠，雌雄各半,喂以高脂饲料（高脂饲料的配方为酪蛋白1kg，L-半胱 氨酸15g，麦芽糊精0.75kg，蔗糖0.35kg，纤维素0.25kg，大豆油0.15kg，猪油1.25kg）。饲养10周后，淘汰体重小于50g的小鼠，然后分为如下各组：模型对照组、阳性对照组、试验组，每组12只。各组大鼠按如下剂量进行灌胃给予受试物，每天12：00灌胃一次，持续8周。 

模型对照组：等体纯化水； 

阳性对照组：5mg/（kg·d）瑞舒伐他汀钙； 

试验组： 1.5g/（kg·d）新鲜蚕豆提取物+0.25g/（kg·d）葡萄籽提取物。 

从给药后第2周开始每隔2周称体重，结果显示，从第4周开始，试验组与模型组相比有显著性差异（P＜0.05）；从第6周起，试验组与模型组相比有极显著性差异（P＜0.01）。另外，从第6周开始，试验组与瑞舒伐他汀组相比，逐渐表现出显著性差异或极显著性差异（P＜0.05或P＜0.01）。这些试验结果均表明蚕豆提取物联合葡萄籽提取物具有很好的减肥功效。实验结果详见表1。  

表1 各组对小鼠体重的影响（单位：g） 

与模型组比较，^*P＜0.05；与模型组比较，^**P＜0.01； 

与阳性对照组比较，^￥P＜0.05；^￥￥P＜0.01。 

给药结束后，检测血清总胆固醇（TC），低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C），高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C），甘油三酯（TG）。结果显示，试验组与模型组相比，总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的水平有显著性差异（P＜0.05）或极显著性差异（P＜0.01）。另外，无论是TC、TG、HDL-C，还是LDL-C的水平，本发明试验组与阳性对照组相比没有显著性差异（P＞0.05），这说明蚕豆提取物联合葡萄籽提取物降低血脂效果接近瑞舒伐他汀钙的疗效，具有意想不到的协同降血脂作用。实验结果详见表2。 

表2 各组对小鼠血液中脂质的影响（mmol/L） 

与模型组比较，^*P＜0.05；与模型组比较，^**P＜0.01； 

与阳性对照组比较，^￥P＜0.05；^￥￥P＜0.01。 

Claims (3)

1.一种含蚕豆提取物的保健品，其特征在于：活性成分由蚕豆提取物和葡萄籽提取物组成，蚕豆提取物与葡萄籽提取物的重量比为3-18：1；

所述蚕豆提取物按如下方法制备而成：取新鲜蚕豆，筛检，清洗，压榨取汁，榨汁液静置使沉淀，滤过，滤液备用；蚕豆渣加适量75%乙醇提取两次，每次1.5小时，提取液回收乙醇后与所述滤液合并，减压浓缩至60℃相对密度为1.2-1.25的浸膏，喷雾干燥，即得蚕豆提取物；

所述葡萄籽提取物按如下方法制备而成：取葡萄籽，筛检，烘干粉碎后过60目筛，加8倍量的75%乙醇，在70℃条件下浸提两次，每次1小时，提取液静置使沉淀，离心，收集上清液，回收乙醇，将上清液浓缩，将稠膏干燥，粉碎成100目细粉，即得葡萄籽提取物。

2.根据权利要求1所述含蚕豆提取物的保健品，其特征在于：蚕豆提取物与葡萄籽提取物的重量比为6-10：1。

3.活性成分由权利要求1所述的蚕豆提取物和葡萄籽提取物按重量比为3-18：1组成的组合物在制备减肥的药品中的应用。