CN102153619B - 一种从僵蚕中提取的小分子量糖肽、其提取分离方法及用途 - Google Patents

一种从僵蚕中提取的小分子量糖肽、其提取分离方法及用途 Download PDF

Info

Publication number
CN102153619B
CN102153619B CN 201010596967 CN201010596967A CN102153619B CN 102153619 B CN102153619 B CN 102153619B CN 201010596967 CN201010596967 CN 201010596967 CN 201010596967 A CN201010596967 A CN 201010596967A CN 102153619 B CN102153619 B CN 102153619B
Authority
CN
China
Prior art keywords
molecular weight
stiff silkworm
small molecular
glycopeptide
gained
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN 201010596967
Other languages
English (en)
Other versions
CN102153619A (zh
Inventor
程显好
刘静
程丽芳
图力古尔
马天云
高兴喜
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Ludong University
Original Assignee
Ludong University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ludong University filed Critical Ludong University
Priority to CN 201010596967 priority Critical patent/CN102153619B/zh
Publication of CN102153619A publication Critical patent/CN102153619A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102153619B publication Critical patent/CN102153619B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种从僵蚕中提取的小分子量糖肽、其提取分离方法及用途，中药材僵蚕粉碎后，通过提取、超滤、浓缩和乙醇沉淀提取分离获得有功能作用的有效部分糖肽，该小分子量糖肽分子量在6000道尔顿以下，固态呈浅棕色或浅黄色，其提取分离方法简单，分离的小分子量糖肽纯度高，回收率高，适宜于工业化生产，得到小分子量糖肽的具有镇痛作用，可研制成具有镇痛作用的药品，具有价格便宜、药效显著、食用安全性好等特点，对于新药开发具有重要意义。

Description

一种从僵蚕中提取的小分子量糖肽、其提取分离方法及用途
技术领域：
本发明涉及一种从僵蚕中提取的小分子量糖肽、其提取分离方法及其用途，属于生药学技术领域。
背景技术：
僵蚕是临床常用的中药，为蚕蛾科昆虫家蚕Bombyx mori L.4～5龄的幼虫感染(或人工接种)白僵菌Beauveria bassiana(Bals.)Vuill.而致死的干燥体。
研究表明，僵蚕醇水浸出液对小鼠、家兔均有催眠、抗惊厥作用；其提取液在体内、外均有较强的抗凝作用；僵蚕粉有较好的降血糖作用；体外试验，对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌有轻度的抑菌作用，其醇提取物体外可抑制人体肝癌细胞的呼吸，可用于直肠瘤型息肉的治疗。化学成分研究表明，僵蚕含蛋白质，脂肪，多种氨基酸以及铁、锌、铜、锰、铬等微量元素，白僵蚕体表的白粉中含草酸铵，对其所含的主要药效成分及其药理作用至今尚不完全了解，从僵蚕中提取的具有镇痛作用的小分子量糖肽的研究目前尚未见报道。已有报道从古尼虫草、古尼拟青霉提取糖肽，但古尼虫草和古尼拟青霉原料来源稀少，价格昂贵，僵蚕作为一种常用中药材，具有原料来源广泛、价格低的优点。
发明内容：
本发明的目的在于克服已有技术的不足而提供一种从僵蚕中提取分离的小分子量糖肽、其提取分离方法及其用途，其提取分离方法简单，分离的小分子量糖肽纯度高，回收率高，适宜于工业化生产，得到小分子量糖肽的具有镇痛作用。
本发明的目的可以通过如下措施来达到：一种从僵蚕中提取的小分子量糖肽，其特征在于其特征在于小分子量糖肽以僵蚕为原料，通过提取、超滤、浓缩和乙醇沉淀制备得到。
一种从僵蚕中提取的小分子量糖肽的提取分离方法，其特征在于其包括如下步骤：
(1)符合国家药典质量标准的僵蚕药材，晾干后粉碎得僵蚕原料；
(2)将僵蚕原料中加入与僵蚕原料体积重量比(L/kg)为5-10∶1的水，80℃-100℃提取1.5-2.5小时，过滤，分离滤液和滤渣；滤渣再加入与僵蚕原料体积重量比(L/kg)为3-5∶1的水，80℃-100℃提取0.5-1.5小时，过滤，分离滤液和滤渣；滤渣再加入与僵蚕原料体积重量比(L/kg)为3-5∶1的水，80℃-100℃提取0.5-1.5小时，过滤，分离滤液和滤渣，合并三次提取的滤液；
(3)将步骤(2)所得的滤液减压浓缩至原体积的1/5-1/10；
(4)将步骤(3)所得的浓缩液加入到3-5倍体积的乙醇中，搅拌后静置、沉淀，除去上层清液部分；沉淀部分离心，收集沉淀物；
(5)将步骤(4)所得的沉淀物加入到去离子水中，去离子水与沉淀物的体积重量比(L/kg)为50-100∶1，搅拌溶解；
(6)将步骤(5)所得的溶液用截留分子量6000的膜进行超滤，收集透过液部分；
(7)对超滤透过液进行减压浓缩，至原来体积的1/5-1/10；
(8)将步骤(7)所得的浓缩液加入到3-5倍体积的乙醇中，搅拌后静置、沉淀，除去上层清液部分；沉淀部分离心，收集沉淀物，获得分子量在6000道尔顿以下的小分子量糖肽产品；
为了进一步实现本发明的目的，将步骤(8)所得沉淀物用丙酮脱水2-3次，60℃-105℃干燥，获得小分子量糖肽产品。
为了进一步实现本发明的目的，将步骤(8)所得沉淀物60℃-105℃烘干、粉碎，获得小分子量糖肽产品。
一种从僵蚕中提取的小分子量糖肽用于镇痛。
本发明同已有技术相比可产生如下积极效果：本发明以僵蚕为原料分离提取小分子量糖肽，僵蚕原料来源广泛易得，价格便宜；其提取分离方法简单，只需要用提取、超滤、浓缩和乙醇沉淀，就能完成分离和纯化，适宜于工业化生产。本发明中分离得到的小分子量糖肽，是首次在僵蚕中发现的具有镇痛作用的成分。本发明中提取分离小分子量糖肽，可为僵蚕在更多方面的开发利用提供理论支撑，可以开发新的镇痛药物。
具体实施方式：下面对本发明的具体实施方式作详细说明：
实施例1：
(1)符合国家药典质量标准的僵蚕药材2Kg，晾干后粉碎至80目大小颗粒；
(2)将粉碎后的僵蚕，加入20L的水，80℃-100℃提取0.5-2.5小时，过滤，分离滤液和滤渣；滤渣再加入10L水，80℃-100℃提取0.5-1.5小时，过滤，分离滤液和滤渣；滤渣再加入10L水，80℃-100℃提取0.5-1.5小时，过滤，分离滤液和滤渣。合并三次提取的滤液。
(3)取步骤(3)所得的滤液30L减压浓缩至3L。
(4)3L浓缩液加入到15L乙醇中，搅拌后静置、沉淀过夜，除去上层清液部分；下层沉淀部分离心，收集沉淀物。
(5)取步骤(4)所得的沉淀物0.05kg加入到5L的去离子水中，搅拌溶解。
(6)将步骤(5)所得的溶液用截留分子量6000的膜进行超滤，收集透过液部分，得到清液。
(7)取4L清液进行减压浓缩至400ml。
(8)将步骤(7)所得的浓缩液400ml加入到2L乙醇中，搅拌后静置、沉淀过夜，除去上层清液部分；沉淀部分离心，收集沉淀物，获得分子量在6000道尔顿以下的小分子量糖肽产品60g；
小白鼠扭体实验法测定小分子量糖肽的口服镇痛效果如下：
Figure BSA00000391776500031
实施例2：
(1)符合国家药典质量标准的僵蚕药材2Kg，晾干后粉碎至60目大小颗粒；
(2)将粉碎后的僵蚕，加入12L的水，80℃-100℃提取0.5-2.5小时，过滤，分离滤液和滤渣；滤渣再加入8L水，80℃-100℃提取0.5-1.5小时，过滤，分离滤液和滤渣；滤渣再加入8L水，80℃-100℃提取0.5-1.5小时，过滤，分离滤液和滤渣。合并三次提取的滤液。
(3)取步骤(3)所得的滤液21L减压浓缩至3L。
(4)3L浓缩液加入到12L乙醇中，搅拌后静置、沉淀过夜，除去上层清液部分；下层沉淀部分离心，收集沉淀物。
(5)取步骤(4)所得的沉淀物0.04kg加入到3L的去离子水中，搅拌溶解。
(6)将步骤(5)所得的溶液用截留分子量6000的膜进行超滤，收集透过液部分，得到清液。
(7)取2L清液进行减压浓缩至300ml。
(8)将步骤(7)所得的浓缩液300ml加入到1.2L乙醇中，搅拌后静置、沉淀过夜，除去上层清液部分；沉淀部分离心，收集沉淀物。丙酮脱水2-3次，60℃-105℃干燥，获得分子量在6000道尔顿以下的小分子量糖肽产品44g；
小白鼠扭体实验法测定小分子量糖肽的口服镇痛效果如下：
Figure BSA00000391776500041
实施例3：
(1)符合国家药典质量标准的僵蚕药材2Kg，晾干后粉碎至60目大小颗粒；
(2)将粉碎后的僵蚕，加入10L的水，80℃-100℃提取0.5-2.5小时，过滤，分离滤液和滤渣；滤渣再加入6L水，80℃-100℃提取0.5-1.5小时，过滤，分离滤液和滤渣；滤渣再加入6L水，80℃-100℃提取0.5-1.5小时，过滤，分离滤液和滤渣。合并三次提取的滤液。
(3)取步骤(3)所得的滤液15L减压浓缩至3L。
(4)3L浓缩液加入到9L乙醇中，搅拌后静置、沉淀过夜，除去上层清液部分；下层沉淀部分离心，收集沉淀物。
(5)取步骤(4)所得的沉淀物0.04kg加入到2L的去离子水中，搅拌溶解。
(6)将步骤(5)所得的溶液用截留分子量6000的膜进行超滤，收集透过液部分，得到清液。
(7)取1.75L清液进行减压浓缩至350ml。
(8)将步骤(7)所得的浓缩液350ml加入到1.05L乙醇中，搅拌后静置、沉淀过夜，除去上层清液部分；沉淀部分离心，收集沉淀物，60℃-105℃烘干、粉碎，获得分子量在6000道尔顿以下的小分子量糖肽产品41g；
小白鼠扭体实验法测定小分子量糖肽的口服镇痛效果如下：

Claims (3)

1.一种从僵蚕中提取的小分子量糖肽的提取分离方法，其特征在于其包括如下步骤：
(1)符合国家药典质量标准的僵蚕药材，晾干后粉碎得僵蚕原料；
(2)将僵蚕原料中加入与僵蚕原料体积重量比(L/kg)为5-10∶1的水，80℃-100℃提取1.5-2.5小时，过滤，分离滤液和滤渣；滤渣再加入与僵蚕原料体积重量比(L/kg)为3-5∶1的水，80℃-100℃提取0.5-1.5小时，过滤，分离滤液和滤渣；滤渣再加入与僵蚕原料体积重量比(L/kg)为3-5∶1的水，80℃-100℃提取0.5-1.5小时，过滤，分离滤液和滤渣，合并三次提取的滤液；
(3)将步骤(2)所得的滤液减压浓缩至原体积的1/5-1/10；
(4)将步骤(3)所得的浓缩液加入到3-5倍体积的乙醇中，搅拌后静置、沉淀，除去上层清液部分；沉淀部分离心，收集沉淀物；
(5)将步骤(4)所得的沉淀物加入到去离子水中，去离子水与沉淀物的体积重量比(L/kg)为50-100∶1，搅拌溶解；
(6)将步骤(5)所得的溶液用截留分子量6000的膜进行超滤，收集透过液部分；
(7)对超滤透过液进行减压浓缩，至原来体积的1/5-1/10；
(8)将步骤(7)所得的浓缩液加入到3-5倍体积的乙醇中，搅拌后静置、沉淀，除去上层清液部分；沉淀部分离心，收集沉淀物，获得分子量在6000道尔顿以下的小分子量糖肽产品。
2.根据权利要求1所述的一种从僵蚕中提取的小分子量糖肽的提取分离方法，其特征在于将步骤(8)所得沉淀物用丙酮脱水2-3次，60℃-105℃干燥，获得小分子量糖肽产品。
3.根据权利要求1所述的一种从僵蚕中提取的小分子量糖肽的提取分离方法，其特征在于将步骤(8)所得沉淀物60℃-105℃烘干、粉碎，即得小分子量糖肽产品。
CN 201010596967 2010-12-10 2010-12-10 一种从僵蚕中提取的小分子量糖肽、其提取分离方法及用途 Expired - Fee Related CN102153619B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN 201010596967 CN102153619B (zh) 2010-12-10 2010-12-10 一种从僵蚕中提取的小分子量糖肽、其提取分离方法及用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN 201010596967 CN102153619B (zh) 2010-12-10 2010-12-10 一种从僵蚕中提取的小分子量糖肽、其提取分离方法及用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102153619A CN102153619A (zh) 2011-08-17
CN102153619B true CN102153619B (zh) 2013-02-27

Family

ID=44435326

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN 201010596967 Expired - Fee Related CN102153619B (zh) 2010-12-10 2010-12-10 一种从僵蚕中提取的小分子量糖肽、其提取分离方法及用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102153619B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111437292A (zh) * 2020-06-08 2020-07-24 西南大学 僵蚕水提物及其应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1908183A (zh) * 2006-08-16 2007-02-07 上海奥利实业有限公司 具内皮素拮抗作用的天然蛋白的酶介混合肽
CN101591231A (zh) * 2009-06-23 2009-12-02 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所 一种白僵蚕草酸铵的提取工艺

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1908183A (zh) * 2006-08-16 2007-02-07 上海奥利实业有限公司 具内皮素拮抗作用的天然蛋白的酶介混合肽
CN101591231A (zh) * 2009-06-23 2009-12-02 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所 一种白僵蚕草酸铵的提取工艺

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
于涛.白僵蚕多糖的甲醇提取与热水提取工艺的比较.《光谱实验室》.2010,第27卷(第1期),305-308.
白僵蚕多糖的甲醇提取与热水提取工艺的比较;于涛;《光谱实验室》;20100131;第27卷(第1期);305-308 *
莫非钧.防惊散防治小儿高热惊厥的疗效观察.《湖南中医药大学学报》.2006,第26卷(第1期),47.
防惊散防治小儿高热惊厥的疗效观察;莫非钧;《湖南中医药大学学报》;20061231;第26卷(第1期);47 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN102153619A (zh) 2011-08-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101323648A (zh) 一种桑黄粗多糖的提取方法及桑黄多糖的纯化方法
CN103463178B (zh) 一种分步制备甘草抗氧化物、甘草酸、甘草多糖的方法
CN103432193A (zh) 一种微波辅助双水相提取分离葛根总黄酮的方法
AU2020103549A4 (en) Novel se-enriched tea-derived ace inhibitory peptide and preparation process thereof
CN103204904B (zh) 一种抗前列腺癌赤魟软骨蛋白多肽及其制备方法和用途
CN106176847A (zh) 一种具有增强抑菌作用的藜麦皂苷及其制备方法
CN102924240A (zh) 醇碱法提取厚朴总酚的方法
CN103613679B (zh) 一种以鲜天麻为原料的天麻多糖制备方法
CN105732250A (zh) 一种高纯度灰树花多酚组分的制备方法
CN104945528A (zh) 一种灵芝孢子多糖的制备方法
Lai et al. Antioxidant and antiedema properties of solid-state cultured honey mushroom, Armillaria mellea (higher Basidiomycetes), extracts and their polysaccharide and polyphenol contents
CN102153619B (zh) 一种从僵蚕中提取的小分子量糖肽、其提取分离方法及用途
WO2015062517A1 (zh) 马甲子提取物及其制备方法和用途
CN100428945C (zh) 一种复方中药多糖制备方法及其用途
CN103864891B (zh) 一种韭菜籽抗氧化三肽及其制备与应用
CN100368421C (zh) 委陵菜有效成分黄酮化合物提取分离方法和应用
CN110538131B (zh) 一种海参面膜及其加工方法
CN105601707B (zh) 一种蒲公英籽抗氧化四肽及其制备方法
CN104628798A (zh) 从紫皮石斛原料中同时制备花色苷及多糖的方法
CN102268100A (zh) 一种委陵菜多糖的制备方法
CN103787885A (zh) 一种从金银花地上部分提取高纯度绿原酸的方法
CN101817831A (zh) 一种从冬凌草中提取纯化冬凌草甲素的方法
KR101156775B1 (ko) 항암활성을 갖는 영지버섯 추출물 및 염기성 알콜을 이용한 추출 방법
CN110302240A (zh) 提取核桃分心木中多酚的方法
RU2656398C1 (ru) Способ получения водорастворимых полисахаридов из листьев лопуха большого

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20130227

Termination date: 20181210

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee