CN102133335A - 一种尿路康颗粒质量检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明是一种尿路康颗粒质量检测方法。尿路康颗粒处方为：益母草1000g，墨旱莲1000g，车前草1000g，灯心草300g，金钱草1000g，甘草200g，黄精1000g，山药500g，并制成颗粒剂。本发明以金钱草中重檞皮素（C15H11O7）和山奈素（C15H10O6）为质量控制指标，该成份较益母草中盐酸水苏碱性质稳定，检测误差小。另外，含量测定用高效液相色谱法，其分辩率高于其它色谱法，速度快，十几分钟到几十分钟可完成；重复性高；高效相色谱柱可反复使用；自动化操作，分析精确度高。提高了产品质量控制过程中检测结果的准确性、专属性、可信性。
Description
技术领域
本发明涉及药品的检测技术领域，具体地说是一种尿路康颗粒质量检测方法。
背景技术
尿路康颗粒具有清热燥湿，健脾益肾的功能。用于下焦湿热，脾肾两虚所致的淋证，小便不利，淋沥涩痛；非淋菌性尿道炎见上述证候者。尿路康颗粒处方为：益母草1000g，墨旱莲1000g，车前草1000g，灯心草300g，金钱草1000g，甘草200g，黄精1000g，山药500g。 制法：以上八味，山药粉碎成粗粉，用稀乙醇回流提取二次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10～1.15（80℃）的稠膏；其余金钱草等七味药材粉碎成粗粉，加水浸泡4小时，煎煮3次，每次1.5小时，滤过，合并煎液，浓缩至相对密度为1.38～1.40（60℃）的稠膏，与上述山药稠膏混合；加入蔗糖，混匀，制成颗粒，干燥，制成1000g。本品为浅棕色至棕褐色的颗粒；味甜，微苦。现有的质量检测标准中规定了本方中含有益母草、金钱草、黄精的薄层色谱鉴别；含量测定项用薄层扫描色谱法测定处方中主要成份之一的益母草中盐酸水苏碱，由于盐酸水苏碱性质不稳定，加上影响薄层扫描结果的因素很多，该方法重显性差，结果偏差大，专属性不好。
发明内容
本发明的目的是提供一种尿路康颗粒质量检测方法，提高了产品质量控制过程中检测结果的准确性、可信性。
尿路康颗粒处方为：益母草1000g，墨旱莲1000g，车前草1000g，灯心草300g，金钱草1000g，甘草200g，黄精1000g，山药500g， 制成颗粒剂。
本发明的尿路康颗粒质量检测方法如下：
1）鉴别
(1)取本品2g，加乙醇20ml，超声处理60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸水苏碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录Ⅵ B薄层色谱法试验，吸取上述二种溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以丙酮-无水乙醇-盐酸为10：6：1体积比作为展开剂，展开，取出，晾干，在105℃加热10分钟，取出，放冷，喷以稀碘化铋钾-质量浓度1%三氯化铁为2：1体积比的溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱点相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(2)取本品1g，加甲醇5ml，充分振摇，放置过夜，上清液作为供试品溶液；另取金钱草对照药材2g，加甲醇20ml粉碎，超声处理60分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录Ⅵ B薄层色谱法试验，吸取上述二种溶液各4μl～6μl，分别点于同一聚酰胺薄层板上，以水-乙醇-丙酮为20：20：10体积比作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以质量浓度2%三氯化铝乙醇溶液，置110℃加热5分钟，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；
(3)取本品2g，加无水乙醇20ml，超声处理60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣用丙酮溶解使成1ml，作为供试品溶液；另取黄精对照品药材2g，同法制成对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录Ⅵ B薄层色谱法试验，吸取上述二种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-冰醋酸为5：4：1体积比作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以质量浓度5%磷钼酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的斑点；
2）含量测定（高效液相色谱法）
（1）色谱条件与系统适用性试验： 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.4%磷酸为35～50：45～60体积比溶液作为流动相；检测波长为360m，理论塔板数按檞皮素峰计算不低于2500；
（2）对照品溶液的制备： 取檞皮素、山奈素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml各含0.05mg、0.015mg的混合溶液；
（3）供试品溶液的制备：取本品，研细，取约3.0g，精密称定，加水80mL，超声处理10min使溶解，滤过，滤渣用水20mL洗涤，合并滤液，滤液用体积浓度10%盐酸调pH至1，用水饱和的正丁醇液振摇提取三次，每次50ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加体积浓度80%甲醇30mL使溶解，并转移至烧瓶中，加入浓盐酸5mL，在90℃以上的水浴中加热回流1小时，放冷，转移至50mL量瓶中，用体积浓度80%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液；
（4）测定法：分别精密量取对照品溶液和供试品溶液10ul，注入液相色谱仪，测定，本品每袋含金钱草以檞皮素（C15H11O7）和山奈素（C15H10O6）总量计，应不低于8.0mg。
本发明以金钱草中重檞皮素（C15H11O7）和山奈素（C15H10O6）为质量控制指标，该成份较益母草中盐酸水苏碱性质稳定，检测误差小。另外，含量测定用高效液相色谱法，高效液相色谱法较薄层扫描色谱法比，有如下优点：（1）分辩率高于其它色谱法⑵速度快，十几分钟到几十分钟可完成；⑶重复性高；⑷高效相色谱柱可反复使用；（5）自动化操作，分析精确度高。
该方法经过多次试验后制订，并经云南省食品药品检验所经行了复核，该方法操作简便，专属性强，重显性好，使该方质量控制检测更加可信、有效。提高了产品质量控制过程中检测结果的准确性、专属性、可信性。
具体实施方式
实施例1：
尿路康颗粒质量检测方法如下：
1、鉴别
(1)取本品2g，加乙醇20ml，超声处理60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸水苏碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述二种溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以丙酮-无水乙醇-盐酸（10：6：1）为展开剂，展开，取出，晾干，在105℃加热10分钟，取出，放冷，喷以稀碘化铋钾-1%三氯化铁溶液（2：1），供试品色谱中，在与对照品色谱点相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(2)取本品1g，加甲醇5ml，充分振摇，放置过夜，上清液作为供试品溶液；另取金钱草对照药材2g，加甲醇20ml粉碎，超声处理60分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液；照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述二种溶液各4μl～6μl，分别点于同一聚酰胺薄层板上，以水-乙醇-丙酮（20：20：10）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铝乙醇溶液，置110℃加热5分钟，置紫外光灯（365nm）下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；
(3)取本品2g，加无水乙醇20ml，超声处理60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣用丙酮溶解使成1ml，作为供试品溶液；另取黄精对照品药材2g，同法制成对照品溶液；照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述二种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-冰醋酸（5：4：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%磷钼酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的斑点；
2、含量测定
（1）色谱条件与系统适用性试验： 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.4%磷酸溶液（45：55）为流动相；检测波长为360m，理论塔板数按檞皮素峰计算不低于2500；
（2）对照品溶液的制备： 取檞皮素、山奈素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml各含0.05mg、0.015mg的混合溶液，即得；
（3）供试品溶液的制备：取本品，研细，取约3.0g，精密称定，加水80mL，超声处理10min使溶解，滤过，滤渣用水20mL洗涤，合并滤液，滤液用10%盐酸调pH至1，用水饱和的正丁醇液振摇提取三次，每次50ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加80%甲醇30mL使溶解，并转移至烧瓶中，加入浓盐酸5mL，在90℃以上的水浴中加热回流1小时，放冷，转移至50mL量瓶中，用80%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液；
（4）测定法：分别精密量取对照品溶液和供试品溶液10ul，注入液相色谱仪，测定，本品每袋含金钱草以檞皮素（C15H11O7）和山奈素（C15H10O6）总量计，应不低于8.0mg。
实施例2：
1、鉴别与实施例1相同。
2、含量测定（高效液相色谱法）
（1）色谱条件与系统适用性试验： 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.4%磷酸为35：45体积比溶液作为流动相；检测波长为360m，理论塔板数按檞皮素峰计算不低于2500；
其余步骤与实施例1相同。
实施例3：
1、鉴别与实施例1相同。
2）含量测定（高效液相色谱法）
（1）色谱条件与系统适用性试验： 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.4%磷酸为50：60体积比溶液作为流动相；检测波长为360m，理论塔板数按檞皮素峰计算不低于2500；
其余步骤与实施例1相同。
尿路康颗粒质量标准
尿路康颗粒
NiaoLuKang KeLi
【处 方】 益母草1000g 墨旱莲1000g 车前草1000g
灯心草300g 金钱草1000g 甘 草200g
黄 精1000g 山 药500g
【制 法】以上八味，山药粉碎成粗粉，用稀乙醇回流提取二次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10～1.15（80℃）的稠膏；其余金钱草等七味药材粉碎成粗粉，加水浸泡4小时，煎煮3次，每次1.5小时，滤过，合并煎液，浓缩至相对密度为1.38～1.40（60℃）的稠膏，与上述山药稠膏混合；加入蔗糖，混匀，制成颗粒，干燥，制成1000g，即得。
【性 状】本品为浅棕色至棕褐色的颗粒；味甜，微苦。
【鉴 别】 (1)取本品2g，加乙醇20ml，超声处理60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取盐酸水苏碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述二种溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以丙酮-无水乙醇-盐酸（10：6：1）为展开剂，展开，取出，晾干，在105℃加热10分钟，取出，放冷，喷以稀碘化铋钾-1%三氯化铁溶液（2：1）。供试品色谱中，在与对照品色谱点相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)取本品1g，加甲醇5ml，充分振摇，放置过夜，上清液作为供试品溶液。另取金钱草对照药材2g，加甲醇20ml粉碎，超声处理60分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述二种溶液各4μl～6μl，分别点于同一聚酰胺薄层板上，以水-乙醇-丙酮（20：20：10）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铝乙醇溶液，置110℃加热5分钟，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点。
(3)取本品2g，加无水乙醇20ml，超声处理60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄精对照品药材2g，同法制成对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述二种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-冰醋酸（5：4：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%磷钼酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的斑点。
【检 查】应颗粒剂项下有关的各项规定（中国药典2010年版一部附录Ⅵ D）。
【含量测定】照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥD）测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.4%磷酸溶液（45：55）为流动相；检测波长为360nm。理论塔板数按檞皮素峰计算不低于2500。
对照品溶液的制备 取檞皮素、山奈素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml各含0.05mg、0.015mg的混合溶液，即得。
供试品溶液的制备 取本品，研细，取约3.0g，精密称定，加水80mL，超声处理10min使溶解，滤过，滤渣用水20mL洗涤，合并滤液，滤液用10%盐酸调pH至1，用水饱和的正丁醇液振摇提取三次，每次50ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加80%甲醇30mL使溶解，并转移至烧瓶中，加入浓盐酸5mL，在90℃以上的水浴中加热回流1小时，放冷，转移至50mL量瓶中，用80%甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密量取对照品溶液和供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每袋含金钱草以檞皮素（C15H11O7）和山奈素（C15H10O6）总量计，应不低于8.0mg。
【功能主治】彝医：西弗色哩哩诺奴诺，夫撒凯奴，吐土希。
中医：清热燥湿，健脾益肾。用于下焦湿热，脾肾两虚所致的淋证，小便不利，淋沥涩痛；非淋菌性尿道炎见上述证候者。
【用法用量】用法用量： 口服，一次10g，一日3次；或遵医嘱。
【规 格】每袋装10g。
【贮 藏】密封。
【有效期】2年。
Claims (1)
1.一种尿路康颗粒质量检测方法，尿路康颗粒处方为：益母草1000g，墨旱莲1000g，车前草1000g，灯心草300g，金钱草1000g，甘草200g，黄精1000g，山药500g，并制成颗粒剂；尿路康颗粒质量检测方法如下：
1）鉴别
(1)取本品2g，加乙醇20ml，超声处理60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸水苏碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录Ⅵ B薄层色谱法试验，吸取上述二种溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以丙酮-无水乙醇-盐酸为10：6：1体积比作为展开剂，展开，取出，晾干，在105℃加热10分钟，取出，放冷，喷以稀碘化铋钾-质量浓度1%三氯化铁为2：1体积比的溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱点相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(2)取本品1g，加甲醇5ml，充分振摇，放置过夜，上清液作为供试品溶液；另取金钱草对照药材2g，加甲醇20ml粉碎，超声处理60分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录Ⅵ B薄层色谱法试验，吸取上述二种溶液各4μl～6μl，分别点于同一聚酰胺薄层板上，以水-乙醇-丙酮为20：20：10体积比作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以质量浓度2%三氯化铝乙醇溶液，置110℃加热5分钟，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；
(3)取本品2g，加无水乙醇20ml，超声处理60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣用丙酮溶解使成1ml，作为供试品溶液；另取黄精对照品药材2g，同法制成对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录Ⅵ B薄层色谱法试验，吸取上述二种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-冰醋酸为5：4：1体积比作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以质量浓度5%磷钼酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的斑点；
2）含量测定
（1）色谱条件与系统适用性试验： 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.4%磷酸为35～50：45～60体积比溶液作为流动相；检测波长为360m，理论塔板数按檞皮素峰计算不低于2500；
（2）对照品溶液的制备： 取檞皮素、山奈素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml各含0.05mg、0.015mg的混合溶液；
（3）供试品溶液的制备：取本品，研细，取约3.0g，精密称定，加水80mL，超声处理10min使溶解，滤过，滤渣用水20mL洗涤，合并滤液，滤液用体积浓度10%盐酸调pH至1，用水饱和的正丁醇液振摇提取三次，每次50ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加体积浓度80%甲醇30mL使溶解，并转移至烧瓶中，加入浓盐酸5mL，在90℃以上的水浴中加热回流1小时，放冷，转移至50mL量瓶中，用体积浓度80%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液；
（4）测定法：分别精密量取对照品溶液和供试品溶液10ul，注入液相色谱仪，测定，本品每袋含金钱草以檞皮素（C15H11O7）和山奈素（C15H10O6）总量计，应不低于8.0mg。
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