CN102114226B

CN102114226B - 一种治疗儿童性早熟的中药组合物及其制备和质检方法

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Publication number: CN102114226B
Application number: CN2011100041309A
Authority: CN
Inventors: 胡斯; 李江奇; 姚国英; 王申东; 李嫔; 刘兆康; 沈阳; 张武标
Original assignee: Shanghai City Children Hospital
Current assignee: Shanghai City Children Hospital
Priority date: 2011-01-11
Filing date: 2011-01-11
Publication date: 2013-01-02
Anticipated expiration: 2031-01-11
Also published as: CN102114226A

Abstract

本发明属中药领域，公开了一种治疗阴虚旺火型儿童性早熟的中药组合物及其制备方法和质量检测方法。本发明依据中医理论，采用当归、广郁金、香附、知母、黄柏、生地黄、山萸肉、赤芍、泽泻、茯苓、熟地黄、黄芩、女贞子、栀子，按一定重量配比，经过浸泡、煎煮、滤过、浓缩制成治疗阴虚旺火型儿童性早熟的中药组合物的口服溶液。本发明具有滋阴泻火、理气活血的作用，能有效治疗阴虚旺火型儿童早期性性早熟。

Description

一种治疗儿童性早熟的中药组合物及其制备和质检方法

技术领域

本发明涉及一种中药组合物及其制备和质量检测方法，特别涉及一种治疗阴虚旺火型儿童性早熟的中药组合物及其制备方法和质量检测方法，属中药领域。

背景技术

儿童性早熟(Child Precocious Puberty.CPP)是小儿常见的一种内分泌疾病，是一种生长发育异常现象，表现为青春期特征提前出现，即女孩子在8岁以前、男孩子在10岁以前出现第二性征、或女孩子月经初潮发生在10岁以前的一种内分泌疾病。流行病学调查发现，上海地区目前儿童性早熟患病率大约为1000/10万，男女比例约为1：5。而且由于种种原因，近年来发病率有逐年增高的趋势。该症主要由于下丘脑的神经内分泌功能失调致下丘脑-垂体-性腺轴(hypothalamic-pituitary-gonadal axis,HPGA)提前发动、功能亢进，导致第二性征提前出现、骨龄提前、骨骺提早闭合，从而影响患儿的预期最终身高。同时CPP造成患儿青春期提前，而其智力和心理尚未成熟，易引发社会问题；因此CPP日益受到家庭和社会的关注，积极探寻有效的治疗方法，进行早期干预具有非常重要的意义。

当前，国际上推荐治疗女童性早熟所采用的促性腺激素释放激素拟似剂（gonadotropin-releasing hormone agonist，GnRHa）疗效肯定，但其一般应连续治疗数月至数年，直至接近青春发育的年龄时为止，药价昂贵，不能为中国大多数患儿家庭所接受；也有采用孕酮类激素治疗，使性激素水平降低，性证消退，但对延缓骨骼成熟，控制骨骼生长加速无效，故不能防止身材矮小，临床已很少单独使用。对于治疗临床符合早期性性早熟女童时，中医药治疗疗效明确，且具有独特的价格优势，容易为大多数中国家庭所接受。

中医对儿童性早熟发病机制的认识主要与阴虚火旺、肝郁化火及痰湿凝聚等有关。针对上述病机特点，目前中医界对CPP治疗方法以滋阴降火及疏肝泻火法为主，或结合采用化痰散结法。

本发明的中药组合物全方由当归、广郁金、香附、知母、黄柏、生地黄、山萸肉、赤芍、泽泻、茯苓、熟地黄、黄芩、女贞子、栀子等十几味中药材组成。处方从中医整体观念出发，组方适宜，中医理论依据明确，标本兼治。具有滋阴泻火，理气活血，能有效治疗阴虚旺火型儿童早期性性早熟。临床观察表明其疗效确切，可有效抑制性腺过早、过快发育和骨骺快速闭合，延缓骨龄的增长速度，维持儿童的正常生长速度，改善患儿的最终身高。患儿使用后无明显毒副作用发生且价格便宜，为GnRHa同期治疗费用的1/10。患儿和家长普遍反响良好，具有很好的社会效应和经济效应，市场开发前景广阔。

发明内容

本发明目的在于提供一种中药组合物及其制备方法和质量检测方法，本发明另一目的在于提供该中药组合物质量检测方法及其用途。

本发明目的是通过如下技术方案实现的：

本发明中药组合物的原料组成如下：

知母100-140重量份、黄柏 100-140重量份、生地黄 100-140重量份、

山萸肉150-210重量份、赤芍 100-140重量份、泽泻 150-210重量份、

茯苓 150-210重量份、熟地黄 100-140重量份、黄芩 100-140重量份、

女贞子 100-140重量份、香附 150-210重量份、栀子100-140重量份、

广郁金 150-210重量份、当归 100-140重量份、苯甲酸钠 3重量份、

甜菊总苷 0.5重量份。

上述原料的优选重量配比如下：

知母100重量份、黄柏 100重量份、生地黄 100重量份、

山萸肉150重量份、赤芍 100重量份、泽泻 210重量份、

茯苓 150重量份、熟地黄 100重量份、黄芩 100重量份、

女贞子 100重量份、香附 210重量份、栀子 100重量份、

广郁金 150重量份、当归 100重量份、苯甲酸钠 3重量份、

甜菊总苷 0.5重量份。

上述原料的优选重量配比如下：

知母140重量份、黄柏 140重量份、生地黄140重量份、

山萸肉210重量份、赤芍 140重量份、泽泻 150重量份、

茯苓210重量份、熟地黄140重量份、黄芩 140重量份、

女贞子140重量份、香附 150重量份、栀子140重量份、

广郁金210重量份、当归 140重量份、苯甲酸钠 3重量份、

甜菊总苷 0.5重量份。

上述原料的优选重量配比如下：

知母120重量份、黄柏 120重量份、生地黄 120重量份、

山萸肉180重量份、赤芍 120重量份、泽泻 180重量份、

茯苓 180重量份、熟地黄 120重量份、黄芩 120重量份、

女贞子 120重量份、香附 180重量份、栀子120重量份、

广郁金 180重量份、当归 120重量份、苯甲酸钠 3重量份、

甜菊总苷 0.5重量份。

本发明中药组合物原料，按照常规工艺，制成临床可接受的口服制剂。

本发明中药组合物的具体制备工艺如下：

取中药组合物原料当归、广郁金、香附饮片用水适量浸泡，充分湿润10-30分钟后加水过药面，煮沸后保持微沸约15分钟，滤过，滤液另器保存。再取知母、黄柏、生地黄、山萸肉、赤芍、泽泻、茯苓、熟地黄、黄芩、女贞子、栀子饮片加水浸泡充分湿润30分钟后与上述药渣合并，加水过药面2～4cm，煎煮3次，每次保持微沸1.5小时，时加搅拌，以煮透为度，过筛滤过合并滤液放置12小时以上，取上清液浓缩4小时左右至适量，加入上述另煎保存液，搅匀，再浓缩至相对密度不低于1.10的口服溶液。趁热加入苯甲酸钠、甜菊总苷至上述药液中，搅匀，使成全量。

本发明的质量检测方法包括如下鉴别方法和/或含量测定方法：

鉴别方法包括如下鉴别中的一种和/或几种：

A：取中药组合物10ml，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，取上清液作为供试品溶液。另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1 ml含20μg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨水为展开剂，苯：醋酸乙酯：异丙醇：甲醇：浓氨水=6：3：1.5：1.5：0.5，置氨蒸汽饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置波长λ=365nm的紫外灯下检视。供试品色谱中；在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

B：取中药组合物15ml，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml,合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次50ml,再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次50ml, 正丁醇液置水浴上蒸干，残渣加乙醇3ml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下层溶液为展开剂，氯仿：醋酸乙酯：甲醇：水=15：40：22：10，展开，取出，晾干，喷以体积比为10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

C: 精密量取中药组合物2mL，置25mL量瓶中，加甲醇适量，水浴中充分振摇，放冷至室温，加甲醇定容，摇匀，过滤，取续滤液为供试品溶液；取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。对照品溶液、供试品溶液均点样1μl在聚酰胺薄膜上，36%乙酸展开，在展开槽中加入展开剂，预平衡30min，上行展开，置置波长λ=275nm的紫外灯下检视，显色，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

质量检测方法中的含量测定方法如下：

照薄层色谱法：供试品溶液的制备：精密量取中药组合物2ml，置回流瓶中，精密加入甲醇25ml,称定重量，置水浴上回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。对照品溶液的制备：精密称取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.15mg的溶液，作为对照品溶液。测定法：精密吸取供试品溶液1μl，对照品溶液1μl与3μl，分别交叉点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，照薄层色谱法进行扫描，波长：λs=323nm, λR=500nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度分值，计算，即得。

本发明的中药组合物含有有效治疗剂量的有效成分。具有滋阴泻火，理气活血，能有效治疗阴虚旺火型儿童早期性性早熟。

附图说明：

图1是黄芩苷的标准曲线图

具体实施方式

下述实验和实例用于进一步说明但不限于本发明。

实验例1：中药组合物中黄芩苷的含量测定实验研究

1. 溶液配制

对照品溶液：取黄芩苷对照品，加甲醇制成0.3mg／ml的溶液，作为对照品溶液。

供试品溶液：精密量取合剂2ml，置25ml量瓶中，加甲醇适量，水浴中充分振摇，冷至室温，加甲醇定容，摇匀，过滤，取续滤液为供试品溶液。

2. 色谱条件

分别取对照品溶液、供试品溶液各1μl ，点于同一聚酰胺薄膜上，以乙酸为展开剂。展开后取出晾干。用薄层扫描法测定，波长：λs=323nm，λR=500nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度分值，计算即得。空白样品不干扰测定。

3. 线性试验

分别取浓度为0.15mg/mL的对照品溶液1μL，2μL ，3μL，4μL，5μL点于同一聚酰胺薄膜上，展开后取出晾干，扫描。以峰面积积分值A为纵坐标，点样量Q为横坐标，进行线性回归，得回归方程为：A=1.611×104Q+ 141.6，r = 0.9999（见图1）。表明黄芩苷在0.15-0.75μg时线性关系良好。

4. 稳定性试验

取同一批样品按“含量测定”项下供试品溶液制备方法制成供试品溶液，精密吸取同一供试品溶液lμL，分别于配制后0、1、 2、 4、8小时进样，依法测定，结果表明供试品溶液在8小时内基本稳定。

5. 精密度试验

取黄芩苷对照品溶液，在同一聚酸胺薄膜上，点样5个，结果表明黄芩苷峰面积的RSD为1.06%。

6. 重现性试验

对同一批号样品，共5份，分别制备成供试品溶液，依法测定，结果表明黄芩苷的平均含量为5.40mg/mL，RSD为1.1%。

7. 回收率试验

取缺黄芩的模拟样品2mL，共5份，各置25mL量瓶中，精密加入黄芩苷对照品适量，按"1.”项下方法制成回收率试验用溶液，依法测定。结果表明方法平均回收率为100.6 %，RSD为1.53%。

8. 样品测定

分别取对照品溶液和供试品溶液点样，测得3批样品中黄芩苷含量分别为5.41、 5.63、 5.07 mg/mL。

9. 讨论

经对多批样品中黄芩苷含量的测定结果，建议本品中含黄芩苷不小于1.5mg／ml较好。

下述实施例均能实现上述实验例的效果。

实施例1：中药组合物的制备

知母100重量份黄柏 100重量份生地黄 100重量份

山萸肉150重量份赤芍 100重量份泽泻 210重量份

茯苓 150重量份熟地黄 100重量份黄芩 100重量份

女贞子 100重量份香附 210重量份栀子100重量份

广郁金 150重量份当归 100重量份苯甲酸钠 3重量份

甜菊总苷 0.5重量份

取中药组合物原料当归，广郁金、香附饮片用水适量浸泡，充分湿润10-30分钟后加水过药面，煮沸后保持微沸约15分钟，滤过，滤液另器保存。再取知母、黄柏、生地黄、山萸肉、赤芍、泽泻、茯苓、熟地黄、黄芩、女贞子、栀子饮片加水浸泡充分湿润30分钟后与上述药渣合并，加水过药面2～4cm，煎煮3次，每次保持微沸1.5小时，时加搅拌，以煮透为度，过筛滤过合并滤液放置12小时以上，取上清液浓缩4小时左右至适量，加入上述另煎保存液，搅匀，再浓缩至相对密度不低于1.10的口服溶液。趁热加入苯甲酸钠、甜菊总苷至上述药液中，搅匀，使成全量。

实施例2：中药组合物的制备

知母140重量份黄柏 140重量份生地黄140重量份

山萸肉210重量份赤芍 140重量份泽泻 150重量份

茯苓210重量份熟地黄140重量份黄芩 140重量份

女贞子140重量份香附 150重量份栀子140重量份

广郁金210重量份当归 140重量份苯甲酸钠 3重量份

甜菊总苷 0.5重量份

实施例3：中药组合物的制备

知母120重量份黄柏 120重量份生地黄 120重量份

山萸肉180重量份赤芍 120重量份泽泻 180重量份

茯苓 180重量份熟地黄 120重量份黄芩 120重量份

女贞子 120重量份香附 180重量份栀子120重量份

广郁金 180重量份当归 120重量份苯甲酸钠 3重量份

甜菊总苷 0.5重量份

实施例4：质量检测中的鉴别方法

A：取实施例1中药组合物10ml，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，取上清液作为供试品溶液。另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1 ml含20μg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨水为展开剂，苯：醋酸乙酯：异丙醇：甲醇：浓氨水=6：3：1.5：1.5：0.5，置氨蒸汽饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置波长λ=365nm的紫外灯下检视。供试品色谱中；在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

B：取实施例1中药组合物15ml，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml,合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次50ml,再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次50ml，正丁醇液置水浴上蒸干，残渣加乙醇3ml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下层溶液为展开剂，氯仿：醋酸乙酯：甲醇：水=15：40：22：10，展开，取出，晾干，喷以体积比为10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

C: 精密量取实施例1中药组合物2mL，置25mL量瓶中，加甲醇适量，水浴中充分振摇，放冷至室温，加甲醇定容，摇匀，过滤，取续滤液为供试品溶液；取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。对照品溶液、供试品溶液均点样1μl在聚酰胺薄膜上，36%乙酸展开，在展开槽中加入展开剂，预平衡30min，上行展开，置波长λ=275nm的紫外灯下检视，显色，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

实施例5：质量检测中的含量测定方法

照薄层色谱法：供试品溶液的制备：精密量取实例2中药组合物2ml，置回流瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，置水浴上回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。对照品溶液的制备：精密称取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.15mg的溶液,作为对照品溶液。测定法：精密吸取供试品溶液1μl，对照品溶液1μl与3μl，分别交叉点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，照薄层色谱法进行扫描，波长：λs=323nm，λR=500nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度分值，计算，即得。

实施例6：质量检测方法

A：取实施例3中药组合物10ml，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，取上清液作为供试品溶液。另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1 ml含20μg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨水为展开剂，苯：醋酸乙酯：异丙醇：甲醇：浓氨水=6：3：1.5：1.5：0.5，置氨蒸汽饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置波长λ=365nm的紫外灯下检视。供试品色谱中；在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

B：取实施例3中药组合物15ml，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次50ml，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次50ml，正丁醇液置水浴上蒸干，残渣加乙醇3ml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下层溶液为展开剂，氯仿：醋酸乙酯：甲醇：水=15：40：22：10，展开，取出，晾干，喷以体积比为10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

C: 精密量取实施例3中药组合物2mL，置25mL量瓶中，加甲醇适量，水浴中充分振摇，放冷至室温，加甲醇定容，摇匀，过滤，取续滤液为供试品溶液；取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。对照品溶液、供试品溶液均点样1ul在聚酰胺薄膜上，36%乙酸展开，在展开槽中加入展开剂，预平衡30min，上行展开，置波长λ=275nm的紫外灯下检视，显色，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

薄层色谱法测定：供试品溶液的制备：精密量取实例3中药组合物2ml，置回流瓶中，精密加入甲醇25ml,称定重量，置水浴上回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。对照品溶液的制备：精密称取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.15mg的溶液，作为对照品溶液。测定法：精密吸取供试品溶液1μl，对照品溶液1μl与3μl，分别交叉点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，照薄层色谱法进行扫描，波长：λs=323nm，λR=500nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度分值，计算，即得。

实施例7：中药组合物的急性毒性实验

实验目的:观察受试物一日给予动物后所产生的急性毒性反应和死亡情况。

实验动物:昆明种小鼠，体重19-21克，雌雄各半。于实验开始前禁食12小时。

剂量：以本品受试物原液，一次给予最大体积0.8mlg/20g一日2次，两次给药间隔6小时。

给药途径：口服灌胃

方法：取健康小鼠20只，雌雄各半，给予一日二次口服灌胃上述量的受试液，给药后即刻观察动物反应情况并继续观察七天。

结果：表1 实验动物阳性反应结果

毒性反应（症状）：

本品经口服后，即刻未见小鼠出现异常反应，连续观察七天，小鼠均存活。

结论：小鼠一日二次口服本品的最大给药量为80ml/kg。

实施例8：中药组合物治疗儿童性早熟的疗效观察

一．对象与方法

1．对象为67例中医定型为阴虚旺火型性早熟女童，年龄为8.3±0.66岁。

2．乳房发育按Ｔanner分期法判断，每二月判断一次，共3次并作记录。

3．B超检查，在治疗前分别测量子宫，卵巢的体积。

体积=纵径×横径×前后径×0.5，治疗前后各检查一次。

4．骨龄测定，治疗前摄左手腕骨掌骨正位片，按照Greulich-Pyle图谱法确定骨龄。

5．服药方法：50例女童全部服用本口服溶液，服法：25ml/次、2次/日，治疗均达6月以上。

6．疗效观察指标：乳房发育度，B超观察子宫、卵巢的体积变化，骨龄。

二．结果

1．67例女童治疗前骨龄平均为9.68±1.01岁，骨龄超前实际年龄1年半左右；治疗后仍有16例骨龄超前实际年龄，其余51例骨龄与实际年龄基本同步。

2．67例女童乳房、子宫、卵巢体积在治疗后变化。（表2）

表2， 67例女童子宫、卵巢体积在治疗前后的变化

	治疗前	治疗后
			子宫cm3	2.74±1.89	1.76±1.03
卵巢（左）cm3	2.98±0.72	1.88±1.16
			卵巢（右）cm3	2.9±0.99	1.75±1.34

治疗前后比较：子宫、卵巢较治疗前明显缩小， p均＜0.01。

3. 67例女童乳房发育在治疗后均有明显缩小，其中36例恢复至ＴannerⅠ期水平。

三．讨论

一般认为男孩9岁以前,女孩8岁以前出现第二性征，或女孩在10岁以前有月经初潮称为性早熟。性早熟可分为真性性早熟和假性性早熟二大类。真性性早熟在临床上表现为第二性征早现、生长加速，骨龄提前。本文病人符合真性性早熟的诊断。对于真性性早熟的女童，在治疗上最佳方法是注射GHRHa，该药能阻止性发育。但是GHRHa治疗费用昂贵，经济不富裕家长往往不能接受。因此，本文研究应用中药治疗，以达到既延缓性早熟儿童性发育，又费用较少家长易接受目的。

中医对儿童性早熟发病机制的认识主要与阴虚火旺、肝郁化火及痰湿凝聚等有关。针对上述病机特点，目前中医界对性早熟治疗方法以滋阴降火及疏肝泻火法为主，或结合采用化痰散结法。

本实验针对阴虚旺火类性早熟，治疗上采用滋阴泻火，理气活血的治本方法。给予我院自制复方地黄合剂服用6个月进行治疗。本研究结果表明，复方地黄合剂治疗真性性早熟的病人，服用半年，患儿的子宫、卵巢均明显缩小，骨龄的增长速度延缓，乳房发育明显缩小。提示该治疗对延缓性早熟女童的性发育是有效的。

本文67例女童服用复方地黄合剂6月余，有少数患者述说胃部不适，但经嘱饭后服用后，胃部不适减轻，无不良反应，无副作用，费用不高，在临床上可推广应用。

通过对治疗阴虚旺火型性早熟女童的临床观察，表明其疗效确切，具有滋阴泻火、理气活血的作用，可有效抑制性腺过早、过快发育和骨骺快速闭合，延缓骨龄的增长速度，维持儿童的正常生长速度，改善患儿的最终身高。患儿使用后无明显毒副作用发生且价格便宜，患儿和家长普遍反响良好，2具有很好的社会效应和经济效应，市场开发前景广阔。

Claims

1.一种治疗阴虚旺火型儿童性早熟的中药组合物，其特征在于该中药组合物由下列重量份的原料制成：

知母100-140重量份、黄柏100-140重量份、生地黄100-140重量份、

山萸肉150-210重量份、赤芍 100-140重量份、泽泻150-210重量份、

茯苓150-210重量份、熟地黄 100-140重量份、黄芩100-140重量份、

女贞子100-140重量份、香附150-210重量份、栀子100-140重量份、

甜菊总苷 0.5重量份；

步骤1：取中药组合物原料当归、广郁金、香附饮片用水适量浸泡，充分湿润10-30分钟后加水过药面，煮沸后保持微沸15分钟，滤过，滤液另器保存；

步骤2：再取知母、黄柏、生地黄、山萸肉、赤芍、泽泻、茯苓、熟地黄、黄芩、女贞子、栀子饮片加水浸泡充分湿润30分钟后与上述药渣合并，加水过药面2～4cm，煎煮3次，每次保持微沸1.5小时，时加搅拌，以煮透为度，过筛滤过合并滤液放置12小时以上，取上清液浓缩4小时左右至适量，加入上述另煎保存液，搅匀，再浓缩至相对密度不低于1.10的口服溶液；

步骤3：趁热加入苯甲酸钠、甜菊总苷至上述药液中，搅匀，使成全量。

2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于上述原料的优选重量为：

知母100重量份、黄柏100重量份、生地黄100重量份、

山萸肉150重量份、赤芍100重量份、泽泻 210重量份、

茯苓 150重量份、熟地黄 100重量份、黄芩100重量份、

女贞子 100重量份、香附210重量份、栀子100重量份、

广郁金 150重量份、当归 100重量份、苯甲酸钠 3重量份、

甜菊总苷 0.5重量份。

3.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于上述原料的优选重量为：

知母140重量份、黄柏140重量份、生地黄140重量份、

山萸肉210重量份、赤芍140重量份、泽泻150重量份、

茯苓210重量份、熟地黄140重量份、黄芩140重量份、

女贞子140重量份、香附150重量份、栀子140重量份、

广郁金210重量份、当归140重量份、苯甲酸钠 3重量份、

甜菊总苷 0.5重量份。

4.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于上述原料的优选重量为：

知母120重量份、黄柏120重量份、生地黄120重量份、

山萸肉180重量份、赤芍120重量份、泽泻 180重量份、

茯苓180重量份、熟地黄120重量份、黄芩 120重量份、

女贞子120重量份、香附 180重量份、栀子120重量份、

广郁金 180重量份、当归120重量份、苯甲酸钠 3重量份、

甜菊总苷 0.5重量份。

5.如权利要求1或2或3或4所述的中药组合物的质量检测方法，其特征在于该方法包括如下鉴别：

A：取中药组合物10ml，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，取上清液作为供试品溶液；另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1 ml含20μg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨水为展开剂，苯：醋酸乙酯：异丙醇：甲醇：浓氨水=6：3：1.5：1.5：0.5，置氨蒸汽饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置波长λ=365nm的紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

B：取中药组合物15ml，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次50ml，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次50ml，正丁醇液置水浴上蒸干，残渣加乙醇3ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下层溶液为展开剂，氯仿：醋酸乙酯：甲醇：水=15：40：22：10，展开，取出，晾干，喷以体积比为10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

C: 精密量取中药组合物2mL，置25mL量瓶中，加甲醇适量，水浴中充分振摇，放冷至室温，加甲醇定容，摇匀，过滤，取续滤液为供试品溶液；取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；对照品溶液、供试品溶液均点样1μl在聚酰胺薄膜上，36%乙酸展开，在展开槽中加入展开剂，预平衡30min，上行展开，置波长λ=275nm的紫外灯下检视，显色，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

6.如权利要求1或2或3或4所述的中药组合物的质量检测方法，其特征在于该方法包括如下含量测定：

照薄层色谱法

供试品溶液的制备：精密量取中药组合物2ml，置回流瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，置水浴上回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；

对照品溶液的制备：精密称取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.15mg的溶液，作为对照品溶液；

测定法：精密吸取供试品溶液1μl，对照品溶液1μl与3μl，分别交叉点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，照薄层色谱法进行扫描，波长：λs=323nm，λR=500nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度分值，计算，即得。