CN102112427A - 新型二芳基庚酸类化合物及其使用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及具有病毒抑制活性的化学式（1）的新型二芳基庚酸类化合物；其药物学上可接受的盐；或水合物，前述任何物质的溶剂化物或前药，和包含其的药物组合物，和其治疗剂的用途。二芳基庚酸类化合物具有抑制病毒活性的卓越功效，这样作为对抗病毒相关的疾病的治疗剂是有用的。

Description

新型二芳基庚酸类化合物及其使用

技术领域

本发明涉及一种具有病毒抑制活性的化学式（1）的新型二芳基庚酸类化合物，或者其药物学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药，和包含其的药物组合物，以及其治疗剂的使用。

背景技术

病毒引起多种疾病，尤其是，在病原性病毒中典型的一个病毒，其变成畜牧业中的问题的是禽流感病毒。禽流感病毒属于正黏液病毒科，导致家禽的严重损害，比如母鸡和火鸡。禽流感病毒根据其致病性分为高致病性禽流感病毒、低致病性禽流感病毒和非致病性禽流感病毒。高致病性禽流感病毒由世界动物卫生组织（Office International des Epizootics (OIE)）分为“列表A种类”和作为在韩国的传染性家畜疾病的I型。

流感病毒根据它们的细胞间质蛋白和核壳体蛋白的抗原物质性分为三个型，A、B和C。而且，根据血凝素（HA）的抗原结构的不同，其帮助宿主细胞受体结合以及宿主细胞膜和病毒包膜之间的融合，导致病毒感染，神经氨酸苷酸（NA）其在病毒在细胞中增殖之后从细胞出芽时起重要作用，流感病毒进一步每个分成16个HA和9个NA亚型。理论上，144个种类的病毒亚型可通过两个蛋白的结合存在。

禽流感病毒的感染主要通过直接接触鸟类排泄物发生，还通过水滴、水、人类的脚、饲养车、设备、仪器、粘附在鸡蛋外表面的粪便等等。在病毒感染的症状中，虽然症状根据感染的病毒的致病性而不同，常见的有呼吸系统症状、腹泻和产蛋量的快速减少。在某些情况下，头脑部分、比如鸡冠、显示紫绀，某些时候脸部出现浮肿或者羽毛粘结在一起。由病毒感染导致的死亡率由于病毒致病性从0%到100%不定。病毒感染需要准确诊断，因为其症状与某些其它疾病的症状相似，比如鸡新城疫、传染性家禽呼吸气管病、支原体感染等等。

在1959-2003年期间高致病性禽流感的爆发在全球有记录的已经有大约23次，但大多数都是局部事件。2003年的12月在韩国爆发的H5N1亚型高致病性禽流感发展到超过30个国家，包括欧洲、非洲和东南亚的大多数国家比如日本、中国、泰国、越南和印度尼西亚，从而变成全世界流行。

即使已知人类不会感染禽流感，但禽流感的预防因为1997年香港的H5N1的人类H5N1感染的事件，1999年从人体分离的H9N2禽流感病毒和2004年加拿大的H7 禽流感的人类感染事件，因而禽流感的预防成为公共卫生机构最重要的事件。根据世界卫生组织（WHO）(http://www.who.int/csr/disease/avian_influenza/country/cases_table_2006_06_20/en/index.html)的报告，已确认228个人在10个国家感染过H5N1亚型禽流感，其中130个在从2003年至2006年6月20日期间死亡。在韩国，自从1996年发生的经H9N2亚型感染的低致病性禽流感，在1999年再次发生。

当禽流感病毒爆发时，大多数国家通过杀死在爆发中感染的所有动物作出反应，并经历爆发的国家不能出口家禽产品。因此，禽流感病毒被认为是阻碍家畜业发展的根本因素之一。此外，当存在人类感染的风险时，损失扩散至广泛的行业，包括旅游业和运输业。

最近，全球已付出相当大的努力发展抗病毒药。商业上可用的抗病毒药包括拉米夫定（lamibudine）其用于HIV（艾滋病毒）-1和乙型肝炎的治疗，更昔洛韦（丙氧鸟苷（gancyclovir））是用于疱疹病毒感染的治疗的丙氧鸟苷（gancyclovir），主要用于呼吸道合胞体病毒感染的症状的，但紧急情况下也可用于不同病毒感染的症状的处理的三氮唑核苷（ribavirin）。另外，扎那米韦（zanamivir）RELENZA™和奥塞米韦（oseltamivir）TAMIFLU™都是为流感病毒的神经氨酸苷酶抑制剂而人工合成的也都在商业上可用。

然而，氨基三环癸烷(amantadine)及其类似物、金刚烷乙胺（rimantadine）的使用，用于流感病毒A的治疗，受限于抗性病毒的出现和其副作用。最近，病毒对于奥塞米韦（oseltamivir）的耐药性在H5N1型禽流感病毒中出现，这样，就迫切需要发展不同的抗病毒剂。

同时，日本桤木（Alnus japonica）是属于桦木科（Betulaceae ）的日本桤木皮（ Alnus ）种的落叶树，其通常称为日本桤木（Alnus japonica）树。日本桤木（Alnus japonica）的大约30种分布于北半球和南美，日本桤木的大约9个品种分布于韩国。它生长于沼泽附近区域，它的高度大约为20m，它的茎皮是深紫褐色。它的冬芽是长椭圆形，似蛋倒置的形状，其具有三条脊线和梗。日本桤木的叶子生长是不同，它们是卵形、蛋形或者披针状。叶子的两边是有光泽的，叶缘是锯齿形的。日本桤木的花从三月份开到四月份，是雌雄异体的，形成柔荑花。有雄性花蕊的刺苞具有雄花，每个苞叶具有3-4朵花。每朵花有四个花被和四个雄性花蕊。果实在十月份成熟，生成2-6个果实。它是长蛋形的，看起来像松果球。

同时，三萜系化合物包含α-香树精（α-amyrin）、α-乙酸香树脂醇酯（α-amyrin acetate）、降香萜烯乙酸酯（baurenol acetate）、β-香树精（β-amyrin）、β-乙酸香树脂醇酯（β-amyrin acetate）、曼陀罗萜醇酮豆甾乙酸酯（daturaolone germanicol acetate）、醋酸羽扇豆醇酯（lupeol acetate）、Lup-20(29)-en-3-酮，olean-18-en-3-酮、蒲公英甾醇（taraxasterol）和倍半萜烯化合物包括11,13-α-脱氢葡萄糖中美菊素C（11,13-α-dehydroglucozaluzanin C）、10-α-羟基 -8-脱氧葡萄糖苷（10-α-hydroxy-8-dseoxyglucosid）、8-epideacylcynaropicrin、8-epideacylcynaropicrin葡萄糖苷（8-epideacylcynaropicrin glucoside）、葡萄糖中美菊素C半萜内酯（glucozaluzanin C ixerin）、毛连菜甙B（picriside B）等等(M. Tamai 等人., Planta Med., 1989; S. Seo等人., J. Am. Chem. Soc., 1981; T. Akihisa等人., Phytochemistry, 1994; W. Kisiel, Phytochemistry, 1992; H. Fuchino等人., Chem. Pharm. Bull., 1995; K. Shiojima等人., Chem. Pharm. Bull., 1996; A. Hisham等人., Phytochemistry, 1995)。

韩国专利登记号为10-0721703和10-0769050的韩国专利中，本发明人证实日本桤木提取物的抗病毒活性。然而，日本桤木提取物具有限制的用途，因为它们的缺点是仅在以高浓度时才显示它们的抗病毒活性。

相应得，本发明人做了许多努力发明天然材料，其对于正常细胞具有低毒性，并在低浓度时业显示抑制病毒繁殖的卓越效果。结果，本发明人发现从日本桤木中提取的三萜系化合物或者二芳基庚酸类化合物显示抑制禽流感病毒活性的卓越效果，从而完成了本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新型具有卓越的抗病毒活性的二芳基庚酸类化合物，其药物学上可接受的盐、水合物、溶剂化物和前药。

本发明的另一个目的是提供一种药用组合物包括所述的二芳基庚酸类化合物，它的异构体、其药物学上可接受的盐；前述任何物质的溶剂化物、水合物或前药作为活性成分。

本发明的另一个的目的是提供所述二芳基庚酸类化合物的用途；它的药物学上可接受的盐；前述任何物质的溶剂化物化物、水合物或者前药作为活性成分。

本发明的另一个的目的是提供所述二芳基庚酸类化合物的用途；它的药物学上可接受的盐；前述任何物质的溶剂化物、水合物或者前药作为活性成分。

为达到上述目的，本发明提供一种如下化学式（1）新型二芳基庚酸类化合物，它的异构体或者其药物学上可接受的盐；或者前述任何物质的溶剂化物、水合物或者前药。

［化学式1］

其中R是氢或羟基，Z是氢或羟基，虚线是可选的双键。

本发明提供一种抑制病毒活性的组合物，其包含化学式（1）的所述新型二芳基庚酸类化合物，或者它的异构体，药物学上可接受的盐，前述任何物质的溶剂化物、水合物或者前药作为活性成分。

本发明的其它特征和实施方式将从以下详细描述和所附的权利要求书中更为明确。

附图说明

图1是表明从日本桤木的茎皮中获取表现抗病毒活性的有机溶剂化物馏分（12B-AJ-5A, 12B-AJ-5B, 12B-AJ-5C和12B-AJ-5D）的方法的示意图。

图2是表明根据本发明从12B-AJ-5C馏分中通过实施硅胶柱层析法获取12B-AJ-7A馏分的方法的示意图。

图3是表明根据本发明从12B-AJ-5C馏分中通过实施硅胶柱层析法获取12B-AJ-15A的方法的示意图。

具体实施例

在一方面，本发明涉及由以下化学式（1）表征的二芳基庚酸类化合物：

［化学式1］

其中R是氢或者羟基，Z是氢或者羟基，虚线是可选的双键。

本发明化合物的化学式（1）的典型例子包括1-(4'-羟苯基)-7-(3",4"-二羟基苯基)-4(E)-庚烯-3-酮和(5R)-1,7-二(3,4-二羟基苯基)-5-羟庚烷-3-酮。

本发明的化合物可通过，使用如下所述的本领域常用技术，从日本桤木提取物中分离的有机溶剂化物馏分中，在经过分离的纯化合物中获得。

在本发明的一个实施例，日本桤木的茎皮(RNL BIO Co., Ltd., Korea) 大约在55℃，在95%的乙醇中经三次超声处理，然后浓缩获取乙醇馏分。然后，如图1所示，所获得的馏分经乙醇再次分馏，从而获得乙醇馏分（12B-AJ-5C）。因此，12B-AJ-5C显示抗禽流感病毒的抗病毒活性如图2所示通过重复柱层析法，从而获取一种混合物，12B-AJ-17A。 其构成混合物的12B-AJ-17A1和 12B-AJ-17A2，均识别为新型化合物。

从而，在一个方面，本发明涉及制备具有化学式（1）的化合物的制备方法。以下制备方法仅仅是其解说法，本发明的化合物可基于有机合成领域技术的不同方法制得。这样本发明的范围不仅限于此。例如，本发明的非例证化合物的合成可通过本领域技术人员的修改实施，例如，通过合适的保护干扰基团，通过改变其它本领域已知的合适的试剂，或者通过制造反应条件的路径修改。作为选择，在此揭示的或本领域已知的其它反应将识别为具有用于制备本发明其它化合物的适应性。

通过制备实施例和将描述的实施例，本发明所属技术领域的普通技术人员能够理解制备本发明的化合物（1）的特殊反应条件，这样其具体描述将在此被略去。

在另一方面，本发明涉及化学式（1）的二芳基庚酸类化合物，其异构体，其药物学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或者前药。

术语“药物学上可接受的盐”是指化合物的剂型不会对于所实施的生物体引起强烈刺激，不使化合物的生物活性和化合物的特性消失。术语“水合物”、“溶剂化物”和“异构体”具有如上相同的意思。药物学上可接受的盐可通过允许本发明的化合物与无机酸反应而获得，比如盐酸、溴酸、硫酸、硝酸、磷酸；磺酸类比如甲磺酸、乙磺酸和对甲苯磺酸；或者有机石炭酸族比如酒石酸、蚁酸、柠檬酸、醋酸、三氯乙酸、三氟乙酸、发酸、异丁烯酸、丙二酸、琥珀酸、邻苯二甲酸、葡萄糖酸、苯甲酸、乳酸、富马酸、马来酸和水杨酸；氢溴酸和氢碘酸（hydroiodic acid）。药物学上可接受的盐还可通过本发明的化合物与碱，形成碱金属基比如铵盐、钠盐或者钾盐；，碱土金属族基比如钙盐和镁盐；具有有机基团的盐比如二环已基胺、N-甲基-D-葡糖胺和三甲基（羟甲基）胺（tris(hydroxymethyl)methylamine）；或者具有氨基酸的盐比如精氨酸和赖氨酸。

术语“水合物”指的是本发明的化合物或者其盐类，其进一步包括通过非共价键分子间力结合的化学计量或者非化学计量的水。

在此使用的术语“溶剂化物”意指本发明的化合物或者其盐类，其进一步包括化学计量的或者非化学计量的通过非共价键分子间力结合的溶剂化物量。优选的溶剂化物是易挥发的、非毒性的和/或可接受实施予人类的。

术语“异构体”意指本发明的化合物或者其盐类，其具有相同的化学式或分子式，但是其光学上或者立体化学上不同。例如，本发明的含有化学式1的化合物具有在取代基的选择上的不对称中心，在这种情况下，化学式1的化合物可存在光学异构体比如对映体和非对映体。

术语“前药”意指在体内转化母体药物的试剂。前药是经常有用的，因为在某些情况下，它们比母体药物更易于用药。作为举例，它们可通过口服而生物可利用，而其母体药物是不可以的。前药还具有超过母体药物的，在药物组合物里的具有更好的溶解性。例如，前药在水溶解度有害于流动的细胞膜运输，但一旦进入在细胞中其水溶性有益的细胞内，其代谢水解成活性体的羧酸，有利于通过细胞膜的酯（“前药”）形式的化合物。前药的进一步实施例可为短肽（聚合氨基酸）结合到酸性基团，在那里肽被代谢成显示活性部分。

术语“本发明的化合物”或者“化学式（1）的化合物”除非另有声明，其意指包括它自身所有的化合物，其药物学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、异构体和前药。

本发明的化合物在病毒活性的抑制方面是有效的，也即，治疗和预防由流感病毒引起的疾病上是有效的。尤其是，本发明的化合物在流感病毒的活性抑制方面显示卓越效果，包括人流感病毒、猪流感病毒、马流感病毒和禽流感病毒。本发明的化合物在预防和治疗由禽流感病毒的感染引发的疾病方面尤其有用。

因此，另一方面，本发明涉及一种通过施予有效剂量的化学式（1）的化合物给患者以降低或抑制病毒活性的方法。也即，本发明提供一种使用化学式（1）的化合物处理和预防由病毒活性导致的疾病的方法。

如在此使用的，术语“处理”，除非另有说明，意指反转、减轻、抑制过程，或者预防紊乱或这样的术语应用的状态，或者一个或多个这样的紊乱或状态。这里使用的术语“治疗”除非另有说明，是指即刚如上所述的“处理”的处理的动作。

在另一方面，本发明涉及一种包括治疗上有效剂量的化合物（1）和其药物学上可接受的载体的药物组合物。如果需要，组合物可另外包含稀释剂、赋形剂等等。

术语“药物组合物”意指本发明的化合物和其它化学成分比如溶剂化物或载体的混合物。

上述药物组合物便于化合物给生物体用药。本领域存在的化合物的许多用药技术包括，但不限于，口服、注射、喷雾剂、非肠道给药和外用。药物组合物还可通过化合物与无机酸或者有机酸反应获取， 比如盐酸、溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等等。

在这里使用的术语“治疗的有效剂量”是指活性成分的量可以有效得减轻或去除一个或多个需治疗的紊乱的症状，或者延迟临床指标或预防疾病的初期症状。这样，治疗上有效量是指该量具有如下效果：（1）在癌症中逆转疾病增加肿瘤的大小进程的速率，（2）抑制疾病的进一步发展或者延迟癌症的进程（更好地阻止肿瘤转移）和/或（3）减轻（更好地，去除）一个或多个与疾病相关的症状。

术语“载体”定义为化学化合物，其便于化合物进入细胞或组织。例如二甲亚砜（DMSO）是常用载体，如它便于摄取有机化合物到生物体的细胞或者组织中。

术语“稀释剂”定义为稀释在水中的化学化合物，其会溶解对象化合物以及稳定化合物的生物活性形式。溶解在缓冲液溶液中的盐是本领域常用的稀释剂。一个常用的缓冲溶液是磷酸盐缓冲液，因为它拟态人体血液的盐条件。因为缓冲盐可在低浓度时能够控制溶液的pH，缓冲稀释剂很少改变化合物的生物活性。

术语“生理学上可接受的”定义为载体或稀释剂，其不会使生物活性失活，和化合物特性消失。

在此使用的化合物可以以化合物本身或者作为包含有化合物和其它活性成分的组合物在结合治疗中用药或者与其它合适的载体或赋形剂用药给患者。

（a）用药途径

用药的合适路径可以为，例如，包括口服、鼻内投药、粘膜吸收、或者肠内投药；非肠道给药，包括肌肉注射、皮下注射、静脉注射、髓内注射，和直接脑室内注射、腹膜内注射、眼球注射。

可选得，化合物局部用药的方式是优于系统给药的方式，例如，通过直接向固体肿瘤中注射化合物，经常以缓释或保留释放的形式。此外，在靶向药物运输系统中的一个用药方式，例如，脂质体包覆肿瘤特异性抗体。脂质体将选择性地靶向到肿瘤上并被肿瘤摄取。

（b）组合物/剂型

本发明的药物组合物可以其自身已知的方式制备，例如，通过传统的混合、溶解、成粒、糖衣制造、成粉、乳化、胶囊化、包埋（entrapping）或者冻干处理。

这样，本发明使用的药物组合物可以用传统方式制备，其用一个或多个生理上可接受的载体，包括赋形剂和助剂，其便于药物学上可接受的化合物的处理。合适的制剂根据所选的用药途径选择。可以使用合适的和本领域已理解的任何已知技术，载体，和赋形剂，例如，上述的雷明顿药物科学（Remington's Pharmaceutical Sciences）中所述的。

用于注射，本发明的制剂可制成水溶液或者脂质乳状液，尤其是生理上相容的缓冲液比如翰克氏平衡溶液（Hanks's solution）、林格氏溶液（Ringer's solution）、或者生理盐溶液。用于经粘膜用药，使用合适于渗透屏障的渗透剂在配方中，这样的渗透剂是本领域通常已知的。

用于口服，化合物能够容易通过将活性化合物结合本领域公知的药用可接受载体形成制剂。这样的载体能够使本发明的化合物制成如片剂、丸剂、糖剂、胶囊、液体、凝胶、糖浆、软膏、悬浮液等等形式对于要治疗的患者用于口服。口服使用的药用制备方法能够通过将一个或多个固体赋形剂与本发明的药物组合物混合而制得，随意得研磨混合后的混合物，并处理颗粒的混合物，如果需要的话在增加合适的助料之后，以获得片制或糖制的核心。合适的赋形剂，尤其是，填充剂比如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或者山梨糖；纤维素制备比如玉米淀粉、小麦淀粉、米淀粉、马铃薯淀粉、凝胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮（PVP）。如果需要的话，可加入分裂剂，比如交叉连接的聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、或者褐藻酸或其盐比如藻酸钠。

糖制的核心提供合适的涂层。为这个目的，可使用浓缩的糖溶液，其可随意得包含阿拉伯树胶、云母、聚乙烯吡咯烷酮、卡拉泊尔凝胶剂、聚乙二醇和/或二氧化钛、漆溶液、和合适的有机溶剂化物或溶剂化物混合物。染料或颜料可加入到药片或糖制涂层中为了识别或表征活性化合物剂量的不同组合。

用于口服的药物制备方法包括由凝胶制成的推进式（push-fit）胶囊，由凝胶和可塑剂制成的软的密封胶囊，比如甘油或山梨醇。推进式胶囊在混合物中可包含活性成分，以及填充剂比如乳糖，粘合剂比如淀粉，和/或润滑剂比如云母或硬脂酸镁和可选得稳定剂。在软胶囊中，活性化合物可溶解或悬浮在合适的液体，比如脂肪油、液体石蜡或者液体聚乙二醇中。另外可加入稳定剂。此外，本发明的剂型可涂敷涂层肠溶聚合物。口服的所有制剂应该以适合于这样用药的剂量。

用于口腔含化给药法，组合物可以采用以传统的方式制成药片或口含片的形式。

用于吸入用药，本发明的化合物的使用是传统得以从加压的包装或雾化器里喷雾剂的形式递送，使用合适的推进物，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、三氯四氟乙烷、二氧化碳或者其它合适的气体。在加压喷雾剂情况下，剂量单位可由提供阀递送测定的量确定。其胶囊和药筒，例如在吸入器或者吹药器中使用的凝胶可以制成包含化合物的粉末混合和合适的粉末基质，例如乳糖或淀粉。

化合物可制成通过注射非肠道给药，例如通过弹丸药注射或者连续注入。注射制器可以单位制量的形式存在，例如，以一次用量的针剂或多次用量的容器的形式存在，具有添加的防腐剂。组合物可以采用这样的形式，如在油性或水性媒介中的悬浮剂、溶液或乳液，并可包含配方剂比如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂。

非肠道给药的药物制剂包括以水溶解形式存在的活性化合物的水溶液。另外，活性成分的悬浮剂可以合适的油性注射悬浮剂制备成。合适的亲脂性溶剂化物或媒介包括脂肪油比如芝麻油、或者合成的脂肪酸酯比如油酸乙酯或者甘油三酸酯、或者脂质体。水注射悬浮液可包括增加悬浮剂粘性的物质，比如羧甲基纤维素钠、山梨醇或者右旋糖苷。悬浮剂还可任意包含合适的稳定剂或者说增加化合物的溶解度的试剂，以允许制备高浓度溶剂化物。

可选得，活性成分以粉末形式与合适的媒介构造形成，例如在使用前的灭菌无热原水。

化合物还可以以直肠组合物的形式比如栓剂或者保留灌肠剂制成，例如包含传统的栓剂基质比如可可油或者其它甘油酯。

另外如前所述的制剂，化合物还可以以长效制剂制备方式制成。这样长时间发挥活性的制剂可以通过植入的方式（例如皮下或者肌内的）或者通过肌内注射。这样，例如，化合物可以与合适的聚合材料或者疏水材料（例如，作为在可接受油中的乳剂）或者在离子交换树脂、或者略溶性衍生物制成，例如，形成略溶性盐。

用于本发明的疏水化合物的药用载体是包括苯甲醇、非极性表面活性剂、水溶性有机聚合物和水相共溶系统。普遍使用的共溶系统是VPD共溶系统，其是3% w/v的苯甲醇、85w/v的非极性表面活性剂的聚山梨醇酯80^TM和65%w/v聚乙二醇300的溶剂化物，制成在无水乙醇中的量。VPD共溶系统（VPD:D5W）经5% testrose的溶液1：1稀释的VPD组成。自然地，在不破坏它的溶解度或毒性特性下，共溶系统的比例可以有相当大的变化。而且，助溶剂化物成分的一致性可以变化：例如，可以使用其它低毒性的非极性表面活性剂，而不是POLYSORBATE 80，聚乙二醇的馏分大小可以变化；其它生物相容性聚合物可取代聚乙二醇，例如，聚乙烯吡咯烷酮；其它糖类或聚糖可代替葡萄糖。

可选得，可采用疏水药用化合物的其它传递系统。脂质体和乳剂是用于疏水药物的传递媒介或载体中众所周知的实施例。还可采用某些有机溶剂化物比如二甲亚砜，虽然通常具有更大毒性的代价。另外，化合物可使用缓释系统递送，比如包含治疗剂的固相疏水聚合物的半透性基质。不同的缓释材料已经被制定并被本领域技术人员熟知。缓释胶囊可以依赖它们的化学特性，在2-3周至大于100天的时间释放化合物。根据治疗剂的化学特性和生物稳定性，可使用使蛋白质稳定的额外战略。

可提供本发明的许多化合物与药用相容性补抗衡离子结合为盐的形式。药用相容性盐可以与许多酸形成，包括但不限于盐酸、硫酸、乙酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、琥珀酸等等。盐比其相应的游离酸或碱的形式更易于溶解在水中或其它质子溶剂中。

（c）有效剂量

合适于本发明的可用的药物组合物包含以有效达到它预期效果的量的其活性成分的组合物。更特别的是，治疗上的有效剂量意味着化合物的有效预防量、减轻或改善疾病的症状或者延长治疗对象的生存时间。治疗有效剂量的确定是在本领域技术人员的能力范围内，尤其是根据在此提供详细的公开内容。

在创造性的方法中使用的任何化合物，治疗上有效剂量最初可从细胞培养试验中估计。剂还可以在动物模型中测算达到循环血浆浓度范围，其包括如其在细胞培养中所测定的IC₅₀。这样的信息可用于更准确得确定在人体中的有用剂量。

在此描述的化合物的毒性和治疗功效可通过标准制药程序确定，使用在培养中的细胞或者实验动物以确定LD50（致死50%的群体的剂量）和ED50（在50%群体的治疗上有效剂量）。在毒性和治疗功效之间的剂量比率是治疗指数，它可以LD50和ED50之间的比率表达。优选的是显示高治疗指数的化合物。从细胞培养试验中获取的数据可用在制备用于人类的一定范围的剂量。这样的化合物的剂量优选得依赖于循环浓度的范围内，其包括具有很少或无毒性的ED50。剂量可在这个范围内变化，根据使用的剂量和使用的给药途径。本发明的药用组合物的精确的配方、给药途径和的剂量可通过个体医师考虑到患者的情况（参见例如Fingl et al. 1975, in “The Pharmacological Basis of Therapeutics”, Ch. 1, p. 1) 。典型得，用药于患者的组合物的剂量范围可为从大约0.5到1000 mg/kg的患者体重。按患者所需，剂量可以为单独一次或两次或更多次以一天或更多天给予。

剂量和时间间隔可以单独调整以提供活性成分的血浆水平其足以保持激酶调整效果，或者最小化有效浓度（MEC）。MEC根据每个化合物不同而变化，但能够从体外数据中估计，如需要达到使用在此所述的试验的50-90%的激酶的抑制效果的浓度。达到MEC所需的剂量将取决于个体特征和给药途径。然而，可使用的HPLC鉴定或者生物鉴定以确定血浆浓度。剂量的时间间隔还能够使用MEC值确定。施用化合物的方法应该使用在10-90%的时间上保持血浆水平在MEC之上的方法，更好地在30-90%之间和最好在50-90%之间的时间上。需要达到MEC值的剂量将根据每个特性和给药途径。

在局部用药或者所选的摄入方法的情况下，药物的有效的局部浓度可与血浆浓度不相关。

施用组合物的量，当然依赖于所处理的对象，根据对象的体重、痛苦的严重程度、给药途径的方式和开药医师的评估。

实施例

以下，本发明将参考以下实施例进一步得描述。对于本领域普通技术人员明确的是这些实施方式仅用于说明目的，而不应该理解为限制本发明的范围在上述实施方式中。

实施例 1 ：日本桤木提取物的制备

3.5kg的日本桤木的茎皮（RNL BIO Co., Ltd.）加入9L的95%的乙醇，在55℃时超声降解三次，然后浓缩，这样获取900g的乙醇馏分（12B-AJ-5A）。如图1中所示，获取的12B-AJ-5A的馏分先后经CH₂Cl₂和乙醇分馏以获取二氯甲烷（CH₂Cl₂）馏分（12B-AJ-5B,139g），乙醇馏分（12B-AJ-5C, 400g）和水馏分（12B-AJ-5D）。

实施例 2 ：日本桤木提取物和来源于日本桤木提取物的化合物的抗病毒活性的测量

为了测量日本桤木提取物和来源于日本桤木提取物的化合物的抗病毒活性，具有卓越的增殖能力的KBNP-0028 (KCTC 10866BP)用作为禽流感病毒。在此，KBNP-0028 (KCTC 10866BP)通过A/chicken/Korea/SNU0028/2000(H9N2)的接种获得，在2000年韩国分离并克隆其培养的病毒。

为了孵卵所的卵壳片的培养，10-11天大的SPF孵化场蛋(Sunrise Co., NY)的蛋壳用70%的乙醇清洗，去除鸡胚胎和体液。结果卵壳切成大约8 mm x 8 mm的尺寸，这样粘在蛋壳内表面的鸡胚绒毛尿囊膜分离下来。切下的卵壳加入到24孔培养板的每个孔中。在这个实验中使用的培养基通过将199培养基（GIBCO-BRL,NY,USA）与F10培养基(GIBCO-BRL,NY,USA）在1:1的比例下混合，加入0.075%的碳酸氢钠和100 ㎍/ml庆大毒素制备成。

未稀释KBNP-0028的尿囊液如上所述制备，按4-10倍稀释，100 ㎕的稀释液体加入到10-11天大的孵化蛋蛋片的鸡胚绒毛尿囊膜表面，然后在37℃培养30分钟，从而将蛋片感染病毒。1,000 ㎕的上述制备的培养基加入到培养板的每个孔中，然后把不同浓度的日本桤木提取物加入到每个孔中。将每个日本桤木提取物加入病毒感染的溶液在37 ℃ 培养7天。

培养的肉汤是经收集并作用于平板血细胞凝集试验（plate hemagglutination test）。为了这个目的，25 ㎕的每个培养的肉汤（分别具有15.6, 31.3, 62.5, 125, 250 和 500 ㎍/ml的浓度）和25 ㎕的洗过的鸡红血细胞（0.1%）加入到24孔平板中并均匀混合。平板垂直水平移动，以红血球凝集是否发生在检测操作之后2分钟以确定病毒的增殖。

制备实施例 1 ： 1,7- 二 (3,4- 二羟基苯基 )-4(E)- 庚烯 -3- 酮的分离和纯化

如图2所示，从实施例1中获取的12B-AJ-5C馏分施加于重复柱层析从而获取纯化合物12B-AJ-7A(9.0㎎)。然后，12B-AJ-7A馏分的结果识别是基于其器械分析的结果实施。结果，发现12B-AJ-7A馏分是两个化合物的混合物，12B-AJ-7A-1和12B-AJ-7A-2。在两个化合物之间，12B-AJ-7A-2化合物被识别为具有如下化学结构式的1,7-二(3,4-二羟基苯基)-4(E)-庚烯-3-酮的新型化合物：

以下表1显示分析化合物1,7-二(3,4-二羟基苯基)-4(E)-庚烯-3-酮的结果。

[表1]

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制备实施例 2 ：（ 5R ） -1 ， 7- 二（ 3 ， 4- 二羟基苯基） -5- 羟庚烷 -3- 酮的分离和纯化

如图3所示12B-AJ-5C馏分施加于重复柱层析法从而获取纯化化合物12B-AJ-15A。然后，化合物12B-AJ-15A被识别具有如下化学结构式的（5R）-1，7-二（3，4-二羟基苯基）-5-羟庚烷-3-酮的新型化合物：

以下表2显示分析（5R）-1，7-二（3，4-二羟基苯基）-5-羟庚烷-3-酮的化合物的结果。

[表2]

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实施例 3 ：从日本桤木提取物中分离的二芳基庚酸类化合物的抗病毒活性和细胞毒性的分析

为了检测制备的来源于日本桤木提取物衍生的新型二芳基庚酸类化合物的抗病毒活性和细胞毒性，根据实施例2的病毒活性测量方法测量二芳基庚酸类化合物的病毒抑制活性，化合物的细胞毒性是通过MTT鉴定使用CEF（鸡胚胎纤维原细胞）（表3和表4）分析。

结果，发现12B-AJ-15A馏分具有抗病毒活性并显示即使在200 ㎍/mL的浓度时也不显示细胞毒性。

[表3]：来源于日本桤木提取物的二芳基庚酸类化合物的抗病毒活性

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[表4]: 来源于日本桤木提取物的二芳基庚酸类化合物的细胞毒性的分析

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工业实用性

如上详细所述，本发明化学式（1）的化合物在治疗和/或预防由病毒活性引起的疾病方面是有用的。尤其是本发明的化合物在抑制禽流感病毒的活性方面是有用的。

即使本发明已参考特征详细描述，对于本领域技术人员而言这种描述仅作为优选实施方式而不限制本发明的范围是明确的。这样本发明的实质性范围将由所附权利要求书及其等同物限定。

Claims (7)

1.一种如下化学式（1）的抑制病毒活性的化合物，其异构体或者其药物学上可接受的盐；或前述任何物质的溶剂化物、水合物或者前药：

[化学式1]

其中R是氢或者羟基；

Z是氢或者羟基；和

虚线是可选的双键。

2.根据权利要求1所述的化合物，其异构体或者其药物学上可接受的盐；或者前述任何物质的溶剂化物、水合物或者前药，其特征在于，当R是氢时，Z是氢，虚线是双键。

3.根据权利要求1所述的化合物，其异构体或者其药物学上可接受的盐；或者前述任何物质的溶剂化物、水合物或者前药，其特征在于，当R是羟基时，Z是羟基，虚线是单键。

4.根据权利要求1所述的化合物，其异构体或者其药物学上可接受的盐，或者前述任何物质的溶剂化物、水合物或者前药，其特征在于，病毒是流感病毒。

5.根据权利要求4所述的化合物，其异构体或者药物学上可接受的前述任何物质的盐；或者前述任何物质的溶剂化物、水合物或者前药，其特征在于，病毒是禽流感病毒。

6.一种治疗和/或预防由病毒感染引发的疾病的药物组合物，其包括权利要求1至5中任何一项所述的化合物和药物学上可接受的载体。

7.根据权利要求6所述的药物组合物，其特征在于，病毒是流感病毒。

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