CN102068673A - 中药制剂健胃宽胸丸的质量控制方法 - Google Patents
中药制剂健胃宽胸丸的质量控制方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明属于中成药的技术领域，涉及以中药材为原料制成的中药制剂健胃宽胸丸的质量控制方法，质量标准中设置以苍术对照药材、以厚朴酚为对照品，薄层色谱法鉴别健胃宽胸丸处方中是否含有苍术、厚朴成分，可更加准确地检验出绝假药和劣药，提高了使用中的安全性；液相色谱法检测健胃宽胸丸处方中黄芩苷的含量，每克含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于1.0mg的定量指标及检验方法，提高了健胃宽胸丸质量标准的可控性，进一步确保产品内在质量和疗效，使质量标准较为完善，修订后的质量标准，提高了药品的质量控制。
Description
技术领域
本发明属于中成药的技术领域，涉及以中药材为原料制成的中药制剂健胃宽胸丸的质量控制方法。
背景技术
健胃宽胸丸是《卫生部药品标准》中药成方制剂第九册第一百九十二页收载的制剂，记载处方及质量标准：
处方：
制法：以上十四味，粉碎成细粉，过筛，混匀，用水制丸，干燥，即得。
但是上述标准存在如下问题：无鉴别手段存在定性分析差；另外没有反映药物内在质量的指标成分的含量测定项，对于质量控制标准而言，还是有所欠缺，为提高中药的产品质量，需要完善产品质量标准。
发明内容
本发明的目的是本发明的目的在于克服现有技术的健胃宽胸丸标准不足之处，提供一种能够定性、定量检测药物成分的健胃宽胸丸的质量控制方法。
为了达到本发明的目的采用的技术方案是：一种中药制剂健胃宽胸丸的质量控制方法，其中所述的药物配方由中药材：
制法：以上十四味，粉碎成细粉，过筛，混匀，用水制丸，干燥，即得，其特征在于：其方法的步骤是：
(1)以苍术对照药材、以厚朴酚为对照品，薄层色谱法鉴别健胃宽胸丸处方中是否含有苍术、厚朴成分；
(2)以黄芩苷为对照品，高效液相色谱法检测健胃宽胸丸处方中黄芩苷的含量。
所述的中药制剂健胃宽胸丸的质量控制方法，其特征在于：所述的薄层色谱法鉴别健胃宽胸丸处方中否含有苍术的方法为：取本品粉末6g，加正己烷5mL，超声处理15分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取苍术药材粉末0.5g，加正己烷5mL，超声处理15分钟，滤过，滤液作为苍术药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各2～6μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60～90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂，以60～90℃石油醚∶乙酸乙酯＝20∶1，展开，取出，晾干，喷以5％对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，加热至显色清晰。供试品色谱中，与苍术药材相应位置上，显相同颜色的斑点(污绿色斑点)；
所述的薄层色谱法鉴别健胃宽胸丸处方中是否含有厚朴成分的方法为：取本品粉末5g，加甲醇5mL，密塞，振摇30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取厚朴酚对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-甲醇为展开剂，苯∶甲醇＝27∶1，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛硫酸溶液，在100℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
所述的中药制剂健胃宽胸丸的质量控制方法，其特征在于：以黄芩苷为对照品，液相色谱法检测健胃宽胸丸处方中黄芩苷的含量的方法为：
(1)色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶磷酸＝47∶53∶0.2为流动相，检测波长280nm，理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500；
(2)对照品溶液的制备：称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含20μg对照品溶液，即得；
(3)供试品溶液的制备：称取本品0.5g，精密称定，置100mL具塞锥形瓶中，加70％乙醇50mL，称定重量，超声处30分钟，放冷，再称定重量，用70％乙醇补足损失的重量，摇匀，经0.45μm滤膜滤过，取续滤液，即得；
(4)测定法：分别吸取上述两种对照品溶液与供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每克含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于1.0mg
发明有益效果：质量标准中设置以苍术对照药材、以厚朴酚为对照品，薄层色谱法鉴别健胃宽胸丸处方中是否含有苍术、厚朴成分，可更加准确地检验出绝假药和劣药，提高了使用中的安全性；液相色谱法检测健胃宽胸丸处方中黄芩苷的含量，每克含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于1.0mg的定量指标及检验方法，提高了健胃宽胸丸质量标准的可控性，进一步确保产品内在质量和疗效，使质量标准较为完善，修订后的质量标准，提高了药品的质量控制。
附图说明
图1健胃宽胸丸中苍术的薄层色谱图。
图2-1健胃宽胸丸中厚朴的薄层色谱图。
图3黄芩苷线性关系考察曲线图。
图4黄芩苷对照品(批号：110715-200514)曲线图。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明进一步说明，实施例1改进后的健胃宽胸丸质量标准：
处方：
制法：以上十四味，粉碎成细粉，过筛，混匀，用水制丸，干燥，即得。性状：本品为黄棕色至深棕色的水丸；味甘、苦。
鉴别：薄层色谱鉴别
1.苍术的定性薄层色谱鉴别
取本品粉末6g，加正己烷5mL，超声处理15分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取苍术药材粉末0.5g，加正己烷5mL，超声处理15分钟，滤过，滤液作为苍术药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各2～6μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(20∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，加热至显色清晰。供试品色谱中，与苍术药材相应位置上，显相同颜色的斑点(污绿色斑点)。
2.厚朴的定性薄层色谱鉴别
取本品粉末5g，加甲醇5mL，密塞，振摇30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取厚朴酚对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-甲醇(27∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛硫酸溶液，在100℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
检查：本品应符合中国药典2005年版第一部附录(附录IA)丸剂项下有关的各项规定
含量测定：照高效液相色谱法(中国药典2005年版第一部附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性实验 以十八烷基键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2)为流动相，检测波长280nm，理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500。
对照品溶液的制备 称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含20μg对照品溶液，即得。
供试品溶液的制备 称取本品0.5g，精密称定，置100mL具塞锥形瓶中，加70％乙醇50mL，称定重量，超声处30分钟，放冷，再称定重量，用70％乙醇补足损失的重量，摇匀，经0.45μm滤膜滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别吸取上述两种对照品溶液与供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每克含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于1.0mg。
功能与主治：健胃宽胸，除湿化痰。用于胸腹胀满，气滞不舒，脾胃不和，痰饮湿盛。用法与用量：口服，一次6g，1日1～2次规格：每袋装6g贮藏：密封。
实施例2健胃宽胸丸质量标准起草说明：健胃宽胸丸原质量标准中没有鉴别、含量测定项，此次提高标准增加了苍术、厚朴的薄层鉴别和黄芩苷的含量测定对原标准进行了修订。
鉴别：薄层色谱鉴别
1.苍术的薄层色谱鉴别
1.1仪器、试药
超声仪：KUDOS SK8200LH
电子天平：Sartorius CP224S电子天平Max220g，d＝0.1mg
苍术药材
健胃宽胸丸：由中新药业天津乐仁堂制药厂提供批号为：D042005、D042006、A042008
1.2实验方法及结果：供试品溶液的制备取本品粉末6g，加正己烷5ml，超声处理15分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。
苍术药材溶液的制备：取本品粉末0.5g，加正己烷5ml，超声处理15分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。
阴性对照溶液制备：除苍术外，按处方配制诸药，照供试品制备工艺操作，取0.5g研匀，照供试品溶液制备方法项下操作，作为苍术阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各2～6μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(20∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，加热至显色清晰。供试品色谱中，与药材相应位置上，显相同颜色的斑点(污绿色斑点)，而阴性对照色谱中则无此斑点。说明该方法专属，可靠。(结果见图1)
1：苍术药材、2：健胃宽胸丸供试品(批号：D042005)、3：阴性、4：双阴性
2.厚朴的薄层色谱鉴别
2.1仪器、试药
厚朴酚对照品：购自中国药品生物制品检定所，批号：110729-200309
厚朴药材：购自天津市中药饮片厂，批号：0510013
健胃宽胸丸：同苍术的薄层色谱鉴别所用样品
甲醇：分析纯，天津市康科德科技有限公司生产
苯：分析纯，天津市永大化学试剂开发中心生产
5％香草醛硫酸显色剂
2.2实验方法及结果
供试品溶液的制备 取本品粉末5g，加甲醇5mL，密塞，振摇30分钟，滤过，作为供试品溶液。
厚朴药材溶液的制备 取厚朴药材粉末0.5g，加甲醇5mL，密塞，振摇30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。
对照品溶液的制备 取厚朴酚对照品，加甲醇制成每1mL各含1mg的溶液，作为对照品溶液。
阴性对照溶液制备 除厚朴药材外，按处方配制诸药，照供试品制备工艺操作，取5g研匀，照供试品溶液制备方法项下操作，作为厚朴阴性对照溶液。
照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VIB)试验，吸取上述四种溶液各5～10μL，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以苯-甲醇(27∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛硫酸溶液，在100℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，而阴性对照色谱中则无此斑点。说明该方法专属，可靠。结果见图2-1。
1：厚朴酚对照品(批号：110729-200309)、2：厚朴药材(批号：0510013)3：健胃宽胸丸供试品(批号：D042005)、4：阴性
含量测定：照高效液相色谱法(中国药典2005年版第一部附录VID)测定
一、仪器与试药
1.仪器
岛津LC-2010AHT型高效液相色谱仪
检测器：UV/VIS
检测波长：280nm
流速：0.8mL/min
柱温：40℃
Sartorius CP224S.电子天平
超声仪：KUDOS SK8200LH(上海科导超声仪器有限公司)
2.色谱条件
色谱柱：
C185μm 4.6×150mm
流动相：甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2)
流速：0.8mL/min
进样量：5μL
3.试剂与试药
黄芩苷对照品：购自中国药品生物制品检定所，批号：110715-200514
健胃宽胸丸：由中新药业天津乐仁堂制药厂提供
批号为：D042005、D042006、A042008
磷酸、乙醇均为分析纯(天津市北方天医化学试剂厂生产)
甲醇：色谱纯 Fisher Chemicals，水为去离子水
二、实验方法的考察
1.色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2)为流动相，检测波长280nm，柱温为40℃。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500。
2.样品的前处理
2.1对照品溶液的制备
称取黄芩苷对照品适量，精密称定，置25mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成浓度为C标＝0.82mg/mL的黄芩苷对照品贮备溶液。精密量取0.5mL至25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，制成对照品溶液，浓度C标＝0.0164mg/mL。
2.2提取溶媒的考察：
本实验对30％乙醇、50％乙醇、70％乙醇、甲醇四种不同的提取溶媒利用超声法进行考察。
称取供试品粉末0.5g，4份，精密称定，置100mL具塞锥形瓶中，各精密加入30％乙醇，50％乙醇，70％乙醇，甲醇各50mL，称重，超声处理30min。放冷，再称定重量，补足损失的重量，经0.45μm滤膜滤过，为供试品溶液。
分别精密吸取黄芩苷对照品溶液与供试品溶液各5μL，注入高效液相色谱仪，测定峰面积，计算，即得。结果见表1图4。
表1不同浓度提取溶媒的黄芩苷含量
经考察：选择70％乙醇为最佳提取溶媒。
3.测定条件的选择
3.1波长的选择
照中国药典2005年版第一部第211页黄芩苷含量测定项下选择280nm为检测波长。
3.2流动相的选择
照中国药典2005年版第一部第211页黄芩苷含量测定项下选择流动相为甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2)。
4.空白实验
按样品处方称取除黄芩的药味适量，按供试品制备方法制成空白对照，用与样品相同的色谱条件测定，同时测定对照品及样品，结果表明，供试品色谱中，在与对照品色谱相同的保留时间上出色谱峰，而空白样品在与对照品色谱相同的保留时间上无峰。
5.纯度实验
吸取黄芩苷对照品母液5μL(C标＝0.164mg/mL)进样，数据采集时间为15钟(大于黄芩苷保留时间两倍)，黄芩苷峰面积所占比例为95.21％，即纯度为95.21％。结果见表2
6.线性关系考察
黄芩苷对照品溶液的制备：精密称取黄芩苷对照品适量，用甲醇制成每1mL含黄芩苷0.0164mg的对照品溶液。吸取上述溶液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0μL，依次进样，测定峰面积，结果见表3。
表2黄芩苷对照品纯度
表3线性关系考察
以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，见下图3经统计学计算得线性回归方程：Y＝4.583×106X-6.929×104r＝0.9999结果表明黄芩苷在0.0164～0.164μg范围内线性关系良好。
7.精密度实验
吸取黄芩苷对照品溶液5μL(浓度为0.0164mg/mL)，重复进样6次，按上述色谱条件测定峰面积积分值，计算相对标准偏差为RSD＝1.00％。结果见表4
8.加样回收实验
称取样品0.25g，6份，精密称定，置100mL具塞锥形瓶中，分别加入对照品储备液(浓度为0.82mg/mL)0.5mL，精密加入70％乙醇50mL，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用70％乙醇补足损失的重量，摇匀，经0.45μm滤膜滤过，即得供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液(C标＝0.0164mg/mL)与供试品溶液各5μL，注入高效液相色谱仪，测定，计算得回收率为98.62％。计算相对标准偏差为RSD＝1.37％，结果见表5
表4精密度实验结果
表5加样回收率实验结果
9.重现性实验：精密称取0.5g同一批号的样品粉末(批号：D042005)6份，置100mL具塞锥形瓶中，精密加入70％乙醇50mL，超声处理30min，放冷，再称定重量，用70％乙醇补足损失的重量，摇匀，经0.45μm滤膜滤过，即得供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液(C标＝0.0164mg/mL。)与供试品溶液各5μL，注入高效液相色谱仪，测定，即得。计算相对标准偏差为RSD＝0.36％，结果表明重现性良好，结果见表6
表6重现性实验结果
10.稳定性实验
将制备好的供试品溶液进行分析，每隔一小时进样一次，按上述色谱条件测定峰面积积分值，计算相对标准偏差为RSD＝1.31％。结果见表7
表7稳定性实验结果
经实验考察，表明在四小时内稳定，相对标准偏差为RSD＝1.31％。
11.健胃宽胸丸中黄芩苷含量测定
供试品溶液的制备：称取药品健胃宽胸丸0.5g，精密称定，置100mL具塞锥形瓶中，加70％乙醇50mL，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用70％乙醇补足损失的重量，摇匀，经0.45μm滤膜滤过，滤液作为供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液(C标＝0.0164mg/mL。)与供试品溶液各5μL，注入高效液相色谱仪，测定，计算黄芩苷含量。共测定了3批健胃宽胸丸中黄芩苷含量，结果见表8
表8供试品中黄芩苷含量测定的结果
本品每克含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于1.0mg。
Claims (3)
1.一种中药制剂健胃宽胸丸的质量控制方法，其中所述的药物配方由中药材：
制法：以上十四味，粉碎成细粉，过筛，混匀，用水制丸，干燥，即得，其特征在于：其方法的步骤是：
(1)以苍术对照药材、以厚朴酚为对照品，薄层色谱法鉴别健胃宽胸丸处方中是否含有苍术、厚朴成分；
(2)以黄芩苷为对照品，高效液相色谱法检测健胃宽胸丸处方中黄芩苷的含量。
2.根据权利要求1所述的中药制剂健胃宽胸丸的质量控制方法，其特征在于：所述的薄层色谱法鉴别健胃宽胸丸处方中否含有苍术的方法为：取本品粉末6g，加正己烷5mL，超声处理15分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取苍术药材粉末0.5g，加正己烷5mL，超声处理15分钟，滤过，滤液作为苍术药材溶液，照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各2～6μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60～90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂，以60～90℃石油醚∶乙酸乙酯＝20∶1，展开，取出，晾干，喷以5％对二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，加热至显色清晰；供试品色谱中，与苍术药材相应位置上，显相同颜色的斑点(污绿色斑点)；
所述的薄层色谱法鉴别健胃宽胸丸处方中是否含有厚朴成分的方法为：取本品粉末5g，加甲醇5mL，密塞，振摇30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取厚朴酚对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版第一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-甲醇为展开剂，苯∶甲醇＝27∶1，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛硫酸溶液，在100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3.根据权利要求1所述的中药制剂健胃宽胸丸的质量控制方法，其特征在于：以黄芩苷为对照品，液相色谱法检测健胃宽胸丸处方中黄芩苷的含量的方法为：
(1)色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2)为流动相，检测波长280nm，理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500；
(2)对照品溶液的制备：称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含20μg对照品溶液，即得；
(3)供试品溶液的制备：称取本品0.5g，精密称定，置100mL具塞锥形瓶中，加70％乙醇50mL，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用70％乙醇补足损失的重量，摇匀，经0.45μm滤膜滤过，取续滤液，即得；(4)测定法：分别吸取上述两种对照品溶液与供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每克含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于1.0mg。
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2009
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