CN102058547A - 冻干制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种含本说明书中所述的嘧啶化合物的冻干制剂的药盒。还公开了制备这种冻干制剂的冻干方法。
Description
背景技术
一些在水溶液中的活性药物组分在储存期间不稳定，容易分解。因此需要能满足保存限期要求的合适制剂。
发明内容
本发明是基于以下出人意料的发现，即，与嘧啶化合物本身相比，在一些制剂中的药物活性的嘧啶化合物的吸湿性更低，稳定性更高。
一个方面，本发明涉及一种药盒，该药盒包括密封的容器和设置在该容器中的药物活性化合物的冻干制剂，该化合物具有通式(I)：
其中，Q和U各自独立地是CH或N，前提是，Q和U中至少一个是N；X、Y和Z各自独立地是：C1-5亚烷基或不存在；m是0、1、2、3、4或5；n是0、1或2；R1是H、C1-C10烷基、C3-C20环烷基、C3-C20杂环烷基、芳基、杂芳基、卤素、CN、ORa、COORa、OC(O)Ra、C(O)Ra、C(O)NRaRb或NRaRb；R2是C1-C10烷基、C3-C20环烷基、C3-C20杂环烷基、芳基、杂芳基或C1-C10烷基，任选被C1-C10烷基、C3-C20环烷基、C3-C20杂环烷基或N(RcRd)取代；各R3基团独立地是C1-C10烷基、C3-C20环烷基、C3-C20杂环烷基、芳基、杂芳基、卤素、CN、ORe、COORe、OC(O)Re、C(O)Re、C(O)NReRf或NReRf；或者，(R3)m是与它所结合的环上的两个碳原子相连的C1-5亚烷基或者是与它所结合的环上的一个碳原子相连的C2-8亚烷基；R4是P(＝O)(ORg)(ORi)、P(＝O)(NHRg)(ORi)、P(＝O)(NRg)(NRi)、S(＝O)2ORg或S(＝O)2Rg；其中，Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf、Rg和Ri各自独立地是H、C1-C10烷基、C3-C20环烷基、C3-C20杂环烷基、芳基、杂芳基或-C(O)R，R是H、C1-C10烷基、C3-C20环烷基、C3-C20杂环烷基、芳基或杂芳基；或者，Ra和Rb连接一起形成C2-8亚烷基，Rc和Rd相连一起形成C2-8亚烷基，Re和Rf相连一起形成C2-8亚烷基或者Rg和Ri相连一起形成C1-5亚烷基。
上述化合物的亚组的特征在于：U是N；X是-CH2-、-CH2CH2-或-CH2CH2CH2-；Y是-CH2或不存在；Z是-CH2-；m是0、1或2；n是1或2；R1是NH2；R2是C1-5烷基取代的N(RcRd)，如-CH2CH2-N(RcRd)或-CH2CH2CH2-N(RcRd)，其中Rc是H，Rd是C1-C10烷基、C3-C20环烷基、C3-C20杂环烷基、芳基或杂芳基或者，Rc和Rd相连一起形成C4-6亚烷基；R3是C1-C3烷基、C3-C8环烷基、C3-C8杂环烷基、芳基、杂芳基、卤素、CN、ORe或C(O)NReRf；或者R3是是与它所结合的环上的两个碳原子相连的C1-2亚烷基或是与它所结合的环上的一个碳原子相连的C2-5亚烷基；R4是P(＝O)(OH)2、P(＝O)(OH)(OCH2CH3)、P(＝O)(OCH2CH3)2、S(＝O)2OH、S(＝O)2CH3或S(＝O)2Ph。
术语“烷基”表示饱和或不饱和的直链或支链烃部分，如-CH3、-CH2-CH＝CH2或支链-C3H7。术语“亚烷基”表示饱和或不饱和的直链或支链的二价烃基，如CH2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-或-CH＝CH-。术语“环烷基”表示饱和或不饱和的非芳族的单环、二环、三环或四环的烃部分，如环己基、环己烯-3-基或金刚烷基。术语“杂环烷基”表示饱和或不饱和的非芳族的单环、二环、三环或四环部分，该部分基于一个或多个环杂原子(如，N、O或S)，如4-四氢吡喃基或4-吡喃基。术语“芳基”表示有一个或多个芳环的烃部分。芳基部分的例子包括：苯基(Ph)、亚苯基、萘基、亚萘基、芘基、蒽基和菲基。术语“杂芳基”表示包含一个或多个具有至少一个杂原子(例如N、O或S)的芳环的部分。杂芳基部分的例子包括：呋喃基、亚呋喃基、芴基、吡咯基、噻吩基、
唑基、咪唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、喹唑啉基、喹啉基、异喹啉基和吲哚基。
除非另外说明，本文所述的烷基、亚烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基同时包括取代的和未取代的部分。环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基上可能的取代基包括，但不限于：C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C20环烷基、C3-C20环烯基、C3-C20杂环烷基、C3-C20杂环烯基、C1-C10烷氧基、芳基、芳氧基、杂芳基、杂芳氧基、氨基、C1-C10烷基氨基、C1-C20二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、羟基、卤素、硫代、C1-C10烷硫基、芳硫基、C1-C10烷基磺酰基、芳基磺酰基、酰基氨基、氨基酰基、氨基硫代酰基、脒基、胍基、脲基、氰基、硝基、酰基、硫代酰基、羧基和羧酸酯基。另一方面，烷基和亚烷基上可能的取代基包括上述所有的取代基，但是C1-C10烷基、C2-C10烯基和C2-C10炔基除外。环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基也可以相互稠合。
上述化合物包括这些化合物本身，如果可能的话，还可包括这些化合物的盐、前药和溶剂合物。例如，盐可以是阴离子与上述式之一的化合物上带正电荷的基团(例如氨基)形成的盐。合适的阴离子包括氯离子、溴离子、碘离子、硫酸根、硝酸根、磷酸根、柠檬酸根、甲磺酸根、三氟乙酸根、乙酸根、苹果酸根、甲苯磺酸根、酒石酸根、富马酸根、谷氨酸根、葡糖醛酸根、乳酸根、戊二酸根和马来酸根。类似地，可以由阳离子与上述式之一的化合物上的带负电荷的基团(例如羧酸根)形成盐。合适的阳离子包括钠离子、钾离子、镁离子、钙离子和铵离子，例如四甲基铵离子。化合物还可包括含有季氮原子的盐。除非另外指出，为简化计算，本文所述化合物的重量指化合物的游离碱形式的重量。前药的例子包括酯和其它药学上可接受的衍生物，它们在给予目标的时候，能够得到活性化合物。溶剂合物表示活性化合物与药学上可接受的溶剂之间形成的络合物。药学上可接受的溶剂的例子包括水、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。
下面列出用于本发明的组合物的示例性的嘧啶化合物：
在上述药盒中的冻干制剂还包含填充剂、张力调节剂(tonicityadjuster)，或者两种都存在。作为例子，组合物包含甘露醇或右旋糖苷作为填充剂，氯化钠作为张力调节剂。所述化合物，填充剂和张力调节剂的重量比可以为1至25∶10至50∶0.01至6，或者1至50∶0.01至50∶0.01至0.9。在另一个方面，本发明涉及制备上述冻干制剂的方法。该方法包括提供含通式(I)的化合物的水溶液；将该溶液冷却至-80℃至-10℃；将在-80℃至-10℃的溶液抽真空15-100小时，然后在-9℃至35℃之间抽真空10-200小时。
任选地，该水溶液还包含填充剂、张力调节剂或者同时包含填充剂和张力调节剂。作为例子，所述溶液包含通式(I)的化合物、甘露醇或右旋糖苷(作为填充剂)，和/或氯化钠或甘油(作为张力调节剂)，所述化合物、甘露醇/右旋糖苷、氯化钠/甘油的浓度分别为1-25毫克/毫升，10-50毫克/毫升和0.01-6毫克/毫升，或者1-50毫克/毫升，0.01-50毫克/毫升和0.01-0.9毫克/毫升。
通式(I)的化合物能有效抑制SDF-1和趋化因子受体(如CXCR4受体)之间的结合。参见美国专利申请序列号12/263,671。因此，在另一个方面，本发明涉及所述药盒在治疗与CXCR4/SDF-1途径例如炎性疾病或免疫疾病，发育疾病或退行性疾病，组织损害或癌症相关病症的用途，所述药盒包含这些药物活性化合物之一的冻干制剂。
所述冻干制剂在制造用于上述治疗的药物中的应用也在本发明范围之内。
炎症疾病表现为局部或全身性、急性或慢性炎症。例子包括：视网膜病变(例如，糖尿病视网膜病和增殖性视网膜病)，炎性皮肤病(例如，皮炎、湿疹、特应性皮炎、过敏性接触皮炎、荨麻疹、坏死性血管炎、皮肤血管炎、超敏感性血管炎、嗜酸性肌炎、多肌炎、皮肌炎和嗜酸性筋膜炎)，炎性肠病(例如，克罗恩氏病和溃疡性结肠炎)，超敏感性肺病(例如，超敏感性肺炎、嗜酸性肺炎、迟发型超敏反应、间质性肺病(ILD)、特发性肺纤维化和与类风湿性关节炎相关的ILD)、黄斑水肿，哮喘和过敏性鼻炎。
免疫疾病表现为免疫系统的反应过度或反应低下。例子包括但不限于：自身免疫病(例如，类风湿性关节炎、银屑病关节炎、系统性红斑狼疮、重症肌无力、I型糖尿病、肾小球肾炎、自身免疫性甲状腺炎、强直性脊柱炎、全身性硬皮病和多发性硬化)、急性和慢性炎性疾病(例如，全身过敏反应或超敏反应、药物变态反应、昆虫螫伤变态反应、移植物排斥，包括同种异体移植物排斥和移植物抗宿主病)、舍格伦(Sjogren)综合征和人体免疫缺陷病毒感染。
发育异常是可导致功能缺失或功能增益的生长或分化相关病症。变性疾病通常是指朝功能较低或较少形式的组织变化。发育异常或变性疾病的例子包括：年龄相关的黄斑变性、角膜新血管形成、虹膜新血管形成、脊髓性肌萎缩、迪谢内肌营养不良、帕金森病和阿耳茨海默病。组织损伤可以是以下原因引起的：氧化应激(例如，中风或心肌梗塞中的缺血-再灌注)，补体激活，移植物排斥，化学物质(例如，酒精诱导的肝损伤或癌症疗法中的粘膜组织损伤)，病毒感染(例如，与丙型肝炎感染有关的肾小球损伤)和机械力(例如，运动损伤)。组织损伤的例子包括：脑损伤、神经损伤、心脏损伤、肝损害、骨骼肌损伤、肾损害、胰脏损伤、肺损伤、皮肤损伤、四肢缺血、无症状缺血、心肌缺血和胃肠道损伤。
癌症是一类细胞群具有自发生长能力的疾病，即表现为快速增殖的细胞生长、有时是肿瘤转移的异常状态或病症。癌症的例子包括但不限于：癌和肉瘤，例如白血病、肉瘤、骨肉瘤、淋巴瘤、黑色素瘤、卵巢癌、皮肤癌、睾丸癌、胃癌、胰腺癌、肾癌、乳腺癌、前列腺癌、结肠直肠癌、头颈癌、脑癌、食道癌、膀胱癌、肾上腺皮质癌、肺癌、支气管癌症、子宫内膜癌、鼻咽癌、宫颈癌或肝癌、结肠癌、肾癌、甲状腺癌、造血系统癌症以及原发部位未知的癌症。
上述组合物在生产用于上述治疗的药剂的应用也在本发明范围之内。
下面对本发明的一个或多个实施方式进行了详细描述。由说明书和权利要求书可以显而易见地看出本发明地其它特征、目标和优点。
具体实施方式
用于本发明的通式(I)的化合物可以采用本领域已知的方法制备。以下方案I显示合成特定示例化合物的合成路线。含两个卤素基团的嘧啶化合物(i)(R3和R6是卤素)与氨基化合物(ii)选择性反应，产生2-氨基嘧啶化合物(iii)，该化合物与哌嗪化合物(iv)偶合，形成6-哌嗪基-2-氨基嘧啶化合物(v)。对化合物(v)进一步修饰，获得所需的膦酸酯化合物(vi)或膦酸(phophonic acid)(vii)。合成的该化合物可以通过如柱层析法、高压液相色谱或重结晶的方法进行纯化。
方案I
方案1所示的合成路线可以用各种方式改进，以制备通式(I)的其他化合物。例如，可以使用化合物(ii)之外的氨基化合物，或者哌嗪化合物(iv)可以被咪唑烷或二氮杂化合物替代。
上述方法中使用的化学试剂或可以商购或者采用本领域已知的方法制备。上述方法还包括在进行上面具体描述的步骤之前或者最后进行的步骤，即添加或去除合适的保护基，以最终合成化合物。此外，可以按照其他顺序进行各合成步骤，以得到所需化合物。用于合成可应用的化合物的合成化学转化和保护基方法(保护和去保护)为本领域已知，并包括例如在以下文献中所述的那些方法：R.Larock，Comprehensive Organic Transformations(综合有机转化)，VCH出版社(VCH Publishers)(1989)；T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis(有机合成保护基)，第二版，约翰威利父子公司(John Wiley and Sons)(1991)；L.Fieser和M.Fieser，Fieserand Fieser’s Reagents for Organic Synthesis(有机合成试剂)，约翰威利父子公司(1994)；以及L.Paquette等，Encyclopedia of Reagents for OrganicSynthesis(有机合成百科全书和试剂)，约翰威利父子公司(1995)以及它的后续版本。
通式(I)的化合物可包含非芳族双键以及一个或多个不对称中心。因此，所述化合物可以是外消旋物和外消旋混合物、单一对映体、单独非对映体、非对映体混合物、以及顺-或反-异构体形式。可预期所有的异构体形式。
为实施本发明，可以制备包含预定浓度的通式(I)的化合物的水溶液。填充剂提供了最终固体产品体积，并可产生具有良好机械性质的晶体结构。填充剂的例子包括：甘露醇、蔗糖、葡萄糖、葡聚糖和右旋糖苷。化合物与填充剂的浓度分别为1-25毫克/毫升和10-50毫克/毫升，或者1-50毫克/毫升和0.01-50毫克/毫升。还可以使用填充剂来控制溶液的重量克分子渗透浓度，以获得接近等渗的溶液。需要时，所述溶液还可以包含张力调节剂，以进一步改善溶液的重量克分子渗透浓度。张力调节剂的例子包括：蔗糖、甘氨酸、甘油、氯化钠、氯化钾、溴化钠和溴化钾。优选的重量克分子渗透浓度为250-300毫摩尔/千克。在一个实例中，水溶液含5毫克/毫升所述化合物，30毫克/毫升甘露醇和3毫克/毫升氯化钠。
该溶液还包含一种或多种组分，如缓冲剂和稳定剂。缓冲剂用来稳定溶液的pH。缓冲剂的例子包括：乙酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、乳酸盐、琥珀酸盐、苹果酸盐和磷酸盐。稳定剂可以是形成无定形糖玻璃因此能使溶液中化合物稳定的物质。稳定剂的例子包括：蔗糖、海藻糖、葡萄糖、乳糖和麦芽糖。
所有这些组分可以在制备溶液的任意阶段加入。提供预期效应的组分的适当浓度能方便地理解并可以通过常规方法确定。
可以将溶液过滤以去除颗粒和微生物。因此可获得清澈和无菌的溶液。过滤用膜的孔径在0.1-10微米范围，例如0.22微米。
可能需要改变溶液的pH至使化合物最稳定的值。用来改变pH的试剂可以是有机或无机的酸或碱，例如HCl、乙酸、氢氧化钠或氨水。
为制备药盒，可以将溶液转移至容器，例如小瓶中的预定体积，然后对溶液进行冻干处理。或者，可以将大体积的溶液冻干，然后将预定量的冻干制剂放置在一容器中。
冻干处理包括三个步骤：冷冻、初级干燥和二次干燥。
在冷冻步骤中，用10分钟至5小时将溶液的温度降低至低温(如-40℃至-50℃)。由一部分溶液形成纯的冰晶体。这会使剩余溶液的浓度和粘度增大，使溶液不能进行结晶。最后，这种高度浓缩且粘稠的溶液固化产生晶体-无定形混合相。
在初级干燥步骤中，冷冻溶液中的冰通过升华去除。例如，升华可以在10-655微巴(μbar)和-20℃至-50℃的温度条件下进行15-100小时。应注意，优选将产物保持在固态，以保留冷冻期间形成的结构。
在二次干燥步骤中，升高温度(如，-9℃至35℃之间)或者降低压力，以除去残留的结合水。该阶段可持续10-200小时以提供具有所需残留水分的固态制剂。
可将由此获得的冻干制剂储存以备以后使用。优在包含冻干制剂的容器中充入惰性气体(如氮气)并密封，以进一步防止降解和被微生物污染。
通过给药需要治疗的对象有效量的包含在药盒中的冻干制剂，可以使用药盒治疗病症。
如本文所用，术语“治疗”定义为给予对象有效量的冻干制剂，所述对象患有与CXCR4/SDF-1途径相关的疾病，具有这种疾病的症状，或者具有易受这种疾病的倾向，其目的是治愈、缓解、减轻、治疗或改善这种疾病，这种疾病的症状、或者易受这种疾病的倾向。术语“有效量”表示使得被治疗的对象获得治疗效果所需的冻干制剂的量。
为治疗与CXCR4/SDF-1途径相关的疾病，本发明的组合物可以肠道外给药、口服给药、鼻内给药、直肠给药、局部给药或向颊给药。术语“肠道外”表示皮下注射、皮内注射、静脉注射、肌内注射、关节内注射、动脉内注射、滑膜内注射、胸骨内注射、鞘内注射、损伤区注射或颅内注射，以及任何合适的输注技术。
无菌可注射组合物可以通过将本发明的药盒中的冻干制剂与可接受的无毒肠道外给药的稀释剂或溶剂例如水或者1，3-丁二醇混合形成溶液或悬浮液制备。此外，通常使用不挥发性油作为溶剂或悬浮介质(例如合成的单甘油酯或二甘油酯)。脂肪酸，例如油酸及其甘油酯衍生物可用来制备可注射药品，例如可使用药学上可接受的天然油类，例如橄榄油或蓖麻油，特别是它们的聚氧乙烯化形式。这些油溶液或悬浮液还可包含长链醇稀释剂或分散剂、羧甲基纤维素或类似的分散剂。其它常用的表面活性剂，例如吐温(Tween)或司盘(Span)或通常用于生产药学上可接受的固体、液体或者其它剂型的其它类似的乳化剂或生物利用度促进剂，也可用于配制目的。
包含在药盒中的冻干制剂也可以口服给予病人。此外，冻干制剂可以进一步加工形成任何可以接受的口服剂型，包括胶囊、片剂、乳液和水性悬浮液、分散体和溶液。对于片剂，常用的载体包括乳糖和玉米淀粉。通常还可以在本发明的组合物中加入润滑剂，例如硬脂酸镁。对于胶囊形式的口服给药，可用的稀释剂包括乳糖和干燥的玉米淀粉。当水悬浮液或乳液口服给药时，可以将活性成分悬浮或溶解在与乳化剂或悬浮剂合并的油相中。如果需要，可以加入某些甜味剂、香料或着色剂。
眼用滴剂或软膏也可以按照本发明的方法制备和使用。
我们相信，基于本文的描述，无需另外的工作便可实施本发明。因此以下实施例仅仅是说明性的，不会对说明书的其它部分构成限制。本文引用的所有出版物的全文都全部以引用的方式纳入本文。
化学合成
(1)制备化合物1
在反-4-氨基甲基-环己烷甲酸(化合物1-I，2.0千克，12.7摩尔)和碳酸氢钠(2.67千克，31.8摩尔)的溶液中加入水(10.0升)和(Boc)2O(3.33千克，15.3摩尔)。环境温度下搅拌该反应混合物18小时。水层用浓盐酸(2.95升，pH＝2)酸化后过滤。收集所得固体，用水洗涤三次(15升)，在热箱体(60℃)中干燥，获得反-4-(叔丁氧基羰基氨基-甲基)-环己烷甲酸(化合物1-II，3.17千克，97％)，为白色固体。Rf＝0.58(EtOAc)。LC-MS m/e 280(M+Na+)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.58(brs，1H)，2.98(t，J＝6.3Hz，2H)，2.25(td，J＝12、3.3Hz，1H)，2.04(d，J＝11.1Hz，2H)，1.83(d，J＝11.1Hz，2H)，1.44(s，9H)，1.35-1.50(m，3H)，0.89-1.03(m，2H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)δ181.31、156.08，79.12、46.41、42.99，37.57，29.47，28.29，27.96。M.p.134.8-135.0℃。
将化合物1-II(1.0千克，3.89摩尔)在THF(5升)的悬浮液于10℃冷却，在低于10℃下加入三乙胺(1.076升，7.78摩尔)和氯甲酸乙酯(0.441升，4.47摩尔)。环境温度下搅拌该反应混合物3小时。然后于10℃再次将反应混合物冷却，并在低于10℃温度加入NH4OH(3.6升，23.34摩尔)。环境温度下搅拌该反应混合物18小时后过滤。收集固体，并用水洗涤三次(10升)并且在热箱体(60℃)中干燥，获得反-4-(叔丁氧基羰基-氨基-甲基)-环己烷羧酸酰胺(化合物1-III，0.8千克，80％)，为白色固体。Rf＝0.23(EtOAc)。LC-MS m/e 279，M+Na+。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ6.63(brs，1H)，2.89(t，J＝6.3Hz，2H)，2.16(td，J＝12.2、3.3Hz，1H)，1.80-1.89(m，4H)，1.43(s，9H)，1.37-1.51(m，3H)，0.90-1.05(m，2H)。13C NMR(75MHz，CD3OD)δ182.26，158.85，79.97，47.65，46.02、39.28，31.11、30.41、28.93。M.p.221.6-222.0℃。
将化合物1-III(1.2千克，4.68摩尔)在CH2Cl2(8升)的悬浮液于10℃冷却，在低于10℃下加入三乙胺(1.3升，9.36摩尔)和三氟乙酸酐(0.717升，5.16摩尔)。环境温度下搅拌该反应混合物3小时。然后加入水(2.0升)，分离有机层，并用水(3.0升)洗涤两次。然后使有机层通过硅胶并浓缩。得到的油用二氯甲烷结晶。晶体用己烷洗涤，获得反-(4-氰基-环己基甲基)-氨基甲酸叔丁酯(化合物1-IV，0.95千克，85％)，为白色晶体。Rf＝0.78(EtOAc)。LC-MS m/e261、M+Na+。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.58(brs，1H)，2.96(t，J＝6.3Hz，2H)，2.36(td，J＝12、3.3Hz，1H)，2.12(dd，J＝13.3、3.3Hz，2H)，1.83(dd，J＝13.8，2.7Hz，2H)，1.42(s，9H)，1.47-1.63(m，3H)，0.88-1.02(m，2H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)δ155.96，122.41、79.09，45.89，36.92、29.06，28.80、28.25，28.00。M.p.100.4-100.6℃。
将化合物1-IV(1.0千克，4.196摩尔)溶解于1，4-二烷(8.0升)和水(2.0升)的混合物中。在该反应混合物中加入一水合氢氧化锂(0.314千克，4.191)、拉尼镍(0.4千克，2.334摩尔)和10％钯碳(0.46千克，0.216摩尔)作为50％的水悬液。于50℃氢气氛下搅拌反应混合物20小时。过滤去除催化剂和真空除去溶剂后，加入水(1.0升)和CH2Cl2(0.3升)的混合物。相分离后，有机相用水洗涤(1.0升)并浓缩获得反-(4-氨基甲基-环己基甲基)-氨基甲酸叔丁酯(化合物1-V，0.97千克，95％)，为淡黄色粘稠油状物。Rf＝0.20(MeOH/EtOAc＝9/1)。LC-MS m/e 243、M+H+。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.67(brs，1H)，2.93(t，J＝6.3Hz，2H)，2.48(d，J＝6.3Hz，2H)，1.73-1.78(m，4H)，1.40(s，9H)，1.35(brs，3H)，1.19-1.21(m，1H)，0.77-0.97(m，4H)。13C NMR(75MHz，CDCl3)δ155.85，78.33、48.27，46.38，40.80、38.19，29.87，29.76，28.07。
化合物1-V(806克)和Et3N(1010克3当量)的1-戊醇(2.7升)溶液于90℃和化合物1-VI(540克，1当量)反应15小时。TLC显示反应完成。
于25℃，将乙酸乙酯(1.5升)加入反应混合物中。搅拌该溶液1小时。过滤Et3NHCl盐。然后，于50℃将滤液真空浓缩至1.5升(原体积的1/6)。然后，在该浓缩溶液中加入二乙醚(2.5升)，25℃过滤后获得所需产物1-VII(841克，产率为68％)。
将4N HCl/二
烷(2.7升)溶液加入中间体1-VII(841克)的MeOH(8.1升)溶液中反应，并于25℃搅拌15小时。TLC显示反应完成。在50℃将该混合物真空浓缩至1.5升(原体积的1/7)。然后，在该溶液中缓慢加入二乙醚(5升)，形成1-VIII的盐酸盐(774克)，过滤并真空(＜10托)干燥。为进行中和，于25℃，在1-VIII的盐酸盐的MeOH(17升)溶液中加入K2CO3(2.5千克，8当量)。在同样温度下搅拌混合物3小时(pH＞12)，然后过滤(估计滤液中1-VIII的量为504克)。
于0-10℃，在1-VIII的滤液中加入醛1-IX(581克，以1-VII的摩尔数为基准为1.0当量)。于0-10℃搅拌反应3小时。TLC显示反应完成。然后，在低于10℃加入NaBH4(81克，以1-VII的摩尔数为基准为1.0当量)，于10-15℃搅拌溶液1小时。将该溶液浓缩得到残余物，该残余物然后用CH2Cl2(15升)处理。混合物用饱和NH4Cl水溶液(300毫升)洗涤，用水(1.2L)稀释。将CH2Cl2层浓缩，残余物通过硅胶层析纯化(短柱，EtOAc为用于除去其他组分的流动相；MeOH/28％NH4OH＝97/3为用于收集1-X的流动相)，获得粗1-X(841克)。
然后，于25℃，将Et3N(167克，1当量)和Boc2O(360克，1当量)加入1-X(841克)在CH2Cl2(8.4升)的溶液中。25℃搅拌混合物15小时。由TLC显示反应完成后，将溶液浓缩，并在形成的残余物中加入EtOAc(5升)。在50℃和低压条件下将该溶液浓缩至3升(原体积的1/2)。然后，在浓缩溶液中加入正己烷(3升)。于50℃通过晶种形成固体产物，过滤和蒸发后获得粗产物1-XI(600克，产率为60％)。
25℃，向化合物1-XI(120.0克)和哌嗪(1-XII，50.0克，3当量)的1-戊醇(360毫升)溶液中加入Et3N(60.0克，3.0当量)。于120℃搅拌混合物8小时。于25℃，在反应混合物中加入乙酸乙酯(480毫升)。搅拌该溶液1小时。过滤Et3NHCl盐，将溶液浓缩，并通过硅胶纯化(EtOAc/MeOH＝2∶8)，获得1-XIII(96克)，产率为74％。
于25℃，在1-XIII(120克)的MeOH(2.4升)溶液中加入乙烯基膦酸二乙酯(1-XIV，45克，1.5当量)。于65℃搅拌混合物24小时。TLC和HPLC显示反应完成。将溶液浓缩并通过硅胶进行纯化(MeOH/CH2Cl2＝8/92)，通过HPLC分析产物的纯度后，获得87克1-XV(产率为53％，纯度＞98％，每一种杂质＜1％)。
将20％TFA/CH2Cl2溶液(36毫升)加入到中间体1-XV(1.8克)在CH2Cl2(5毫升)的溶液中。室温下搅拌反应混合物15小时，并通过除去溶剂使溶液浓缩，获得化合物1的三氟乙酸盐(1.3克)。
CI-MS(M++1)：623.1
(2)制备化合物2
按照实施例1中所述制备中间体1-XV。
于10-15℃用1小时在1-XV(300克)的CH2Cl2溶液(1800毫升)中加入TMSBr(450克，8当量)。25℃搅拌该混合物15小时。于40℃下将该溶液真空浓缩以除去TMSBr和溶剂。在该混合物中加入CH2Cl2以溶解残余物。真空条件下再次除去TMSBr和溶剂，真空(＜1托)干燥3小时后获得360克粗固体。然后，将该粗固体用7.5升IPA/MeOH(9/1)洗涤，过滤并在25℃下真空(＜1托)干燥3小时后，获得化合物2(280克)。通过EtOH结晶获得化合物2的氢溴化物盐(190克)。
CI-MS(M++1)：567.0。
将化合物2的氢溴化物盐(5.27克)溶于20毫升水中，用浓氨水(pH＝9-10)进行处理，混合物真空蒸发。将水(30毫升)中残余物施加于Dowex 50WX8(H+形式，100-200目)的柱(100毫升，4.5×8厘米)，并洗脱(洗脱速率6毫升/分钟)。用水(2000毫升)和0.2M氨水进行洗脱。将有UV吸收的氨洗脱液蒸发至干，获得化合物2的氨盐(2.41克)。
CI-MS(M++1)：567.3。
将化合物2的氨盐(1.5克)溶解于水(8毫升)中，用浓氨水(pH＝11)进行碱化，将该混合物溶液应用于Dowex 1X2(乙酸盐形式，100-200目)的柱(75毫升，3×14厘米)，并洗脱(洗脱速率3毫升/分钟)。用水(900毫升)然后用0.1M乙酸进行洗脱。将有UV吸收的乙酸洗脱液蒸发，残余物与水(5×50毫升)共蒸馏，获得化合物2(1.44克)。
CI-MS(M++1)：567.4。
(3)制备化合物3
在制备化合物1的过程中获得中间体1-XIII。
向乙烯基膦酸二乙酯(3-I，4克)的CH2Cl2(120毫升)溶液中加入草酰氯(15.5克，5当量)，于30℃搅拌混合物36小时。混合物在旋转蒸发器中在真空浓缩，定量获得相应的氯化膦(phosphochloridate)，将该化合物加入环己胺(3-II，5.3克，2.2当量)、CH2Cl2(40毫升)和Et3N(6.2克，2.5当量)的混合物中。35℃搅拌混合物36小时，然后用水洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤和蒸发，获得棕色油状物3-III(4.7克，产率为85％)。
将化合物3-III(505毫克)加入中间体1-XIII(500毫克)的MeOH(4毫升)溶液。于45℃搅拌溶液24小时。将溶液浓缩，残余物通过硅胶柱层析纯化(EtOAc/MeOH＝4∶1)，获得中间体3-IV(420毫克)，产率为63％。
将HCl的醚(5毫升)溶液加入中间体3-IV(420毫克)在CH2Cl2(1.0毫升)的溶液中。室温搅拌反应混合物12小时，通过除去溶剂进行浓缩。所得残余物用醚洗涤，获得化合物3的盐酸盐(214毫克)。
CI-MS(M++1)：595.1。
(4)制备化合物4
按照实施例2中所述的相同方式制备化合物4，除了在45℃，在DMF中的Et3N存在下使用2-溴代乙磺酸钠代替乙烯基膦酸二乙酯。通过盐酸使氨基-保护基去保护，获得化合物4的盐酸盐。
CI-MS(M++1)：567.3
(5)制备化合物5
按照实施例2中所述的相同方式制备化合物5，除了在CH3CN中的K2CO3存在下使用1-溴丙基膦酸二乙酯代替乙烯基膦酸二乙酯。
CI-MS(M++1)：581.4
(6)制备化合物6
按照实施例5中所述的相同方式制备化合物6，除了使用1，4-二氮杂-螺[5.5]十一烷的二盐酸盐代替哌嗪。
CI-MS(M++1)：649.5
(7)制备化合物7
按照实施例1所述制备中间体1-II。
于25℃用1小时向中间体1-II(31.9克)在甲苯(150毫升)的悬浮液中加入叠氮磷酸二苯酯((phosphorazidic acid diphenyl ester)(7-I，32.4克)和Et3N(11.9克)。于80℃下搅拌反应混合物3小时，然后冷却至25℃。加入苯甲醇(7-II，20克)后，于80℃下再搅拌反应混合物3小时，并加热至120℃后过夜。然后浓缩并再次溶解于EtOAc和H2O。收集有机层。水层用EtOAc萃取。合并的有机层用2.5N HCl、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，用无水MgSO4干燥，过滤，并浓缩。获得的残余物通过硅胶柱层析纯化(EtOAc/己烷＝1∶2)获得中间体7-III(35克)，产率为79％。
将4N HCl/二烷(210毫升)溶液加入中间体7-III(35克)的MeOH(350毫升)溶液反应，并于室温搅拌过夜。加入醚(700毫升)后，将溶液过滤。固体真空干燥。室温用10分钟向该固体在CH3CN和异丙醇的悬浮液中加入K2CO3。加入水后，室温搅拌该反应混合物2小时，过滤，在无水MgSO4上干燥，并浓缩。形成的残余物通过硅胶柱层析纯化(使用CH2Cl2和MeOH作为洗脱液)，获得中间体7-IV(19克)，产率为76％。
将中间体1-IX(21克)加入中间体7-IV(19克)的CH2Cl2(570毫升)溶液中。于25℃下搅拌该混合物2小时。然后，25℃加入NaBH(OAc)3(23克)过夜。将该溶液浓缩后，在形成的残余物中加入饱和NaHCO3水溶液。然后，该混合物用CH2Cl2萃取。将溶液浓缩，残余物通过硅胶柱层析纯化(使用EtOAc和MeOH作为洗脱液)，获得中间体7-V(23.9克)，产率为66％。
Boc2O(11.4克)和中间体7-V(23.9克)在CH2Cl2(200毫升)溶液中于25℃下加入Et3N(5.8毫升)反应过夜。然后将该溶液浓缩，形成的残余物通过硅胶柱层析纯化(使用EtOAc和己烷作为洗脱液)，获得中间体7-VI(22克)，产率为77％。将10％Pd/C(2.2克)加入中间体7-VI(22克)在MeOH(44毫升)的悬浮液中。在氢气氛环境温度下搅拌混合物过夜，将该混合物过滤和浓缩。通过硅胶柱层析纯化(使用EtOAc和MeOH作为洗脱液)，获得中间体7-VII(16.5克)，产率为97％。
中间体7-VII(16.5克)和Et3N(4.4毫升)的1-戊醇(75毫升)溶液与2，4-二氯-6-氨基嘧啶(1-VI，21克)于120℃下反应过夜。然后除去溶剂，残余物通过硅胶柱层析纯化(使用EtOAc和己烷作为洗脱液)，获得中间体7-VIII(16.2克)，产率为77％。
中间体7-VIII(16.2克)和哌嗪(1-XII，11.7克)的1-戊醇(32毫升)溶液中加入Et3N(3.3毫升)，于120℃下反应过夜。将溶液浓缩后，残余物用水处理，用CH2Cl2萃取。收集有机层并浓缩。将获得的残余物通过硅胶柱层析纯化(使用EtOAc/MeOH至28％NH4OH/MeOH作为洗脱液)，获得中间体7-IX(13.2克)，产率为75％。
按照实施例3所述，用7-IX与乙烯基膦酸二乙酯(2-I)反应，获得化合物7的氢溴酸盐。
CI-MS(M++1)：553.3
(8)制备化合物8
于0℃在顺-1，4-环己烷二羧酸(8-I，10克)的THF(100毫升)溶液中加入草酰氯(8-II，15.5克)，然后加入DMF(几滴)。室温搅拌混合物15小时。将溶液浓缩，残余物溶解于THF(100毫升)。将该混合物溶液加入氢氧化铵(80毫升)并搅拌1小时。将溶液浓缩并过滤，获得粗产物8-III(7.7克)。
于0℃，将化合物8-III(7.7克)的THF(200毫升)溶液缓慢加入LiAlH4(8.6克)的THF(200毫升)溶液。与65℃搅拌混合物溶液15小时。室温下加入NaSO4·10H2O，并搅拌1小时。将形成的混合物过滤，获得滤液，并浓缩。将残余物溶解于CH2Cl2(100毫升)。室温加入Et3N(27克)和(Boc)2O(10克)。搅拌该溶液15小时，然后浓缩获得形成的残余物。在形成的残余物中加入醚。过滤并真空干燥，获得固体粗产物8-IV(8.8克)。
化合物8-IV(1.1克)和Et3N(1.7克)的1-戊醇(10毫升)溶液与2，4-二氯-6-氨基嘧啶(1-VI，910毫克)于90℃下反应15小时。TLC显示反应完成。与25℃在反应混合物中加入乙酸乙酯(10毫升)。搅拌该溶液1小时。除去Et3NHCl盐。将滤液浓缩，通过硅胶纯化(EtOAc/己烷＝1∶2)，获得所需产物8-V(1.1克，产率为65％)。
将4N HCl/二烷(10毫升)溶液加入中间体8-V(1.1克)的MeOH(10毫升)溶液反应，并于25℃搅拌15小时。TLC显示反应完成。将混合物浓缩，过滤并真空(＜10托)干燥。为了中和，于25℃在盐酸盐的MeOH溶液(20毫升)中加入K2CO3(3.2克)。同样温度下搅拌混合物3小时(pH＞12)后过滤。于0-10℃，在滤液中加入醛1-IX(759毫克)。于0-10℃搅拌反应3小时。TLC显示反应完成。然后，在低于10℃加入NaBH4(112毫克)，于10-15℃搅拌溶液1小时。将该溶液浓缩得到残余物，该残余物用CH2Cl2(10毫升)处理。混合物用饱和NH4Cl(水溶液)溶液洗涤。将CH2Cl2层浓缩，残余物通过硅胶层析纯化(MeOH/28％NH4OH＝97/3)，获得中间体8-VI(1.0克，产率为66％)。
于25℃，将Et3N(600毫克)和Boc2O(428毫克)加入8-VI(1.0克)的CH2Cl2(10毫升)溶液。25℃搅拌该混合物15小时。TLC显示反应完成。将溶液浓缩，并通过硅胶层析纯化(EtOAc/己烷＝1∶1)，获得中间体8-VII(720毫克，产率为60％)。
于25℃向化合物8-VII(720毫克)和哌嗪(1-XII，1.22克)的1-戊醇(10毫升)溶液中加入Et3N(1.43克)。于120℃搅拌混合物24小时。TLC显示反应完成。25℃加入乙酸乙酯(20毫升)。搅拌该溶液1小时。除去Et3NHCl盐，将溶液浓缩并通过硅胶进行纯化(EtOAc/MeOH＝2∶8)，获得8-VIII(537毫克)，产率为69％。
于25℃向8-VIII(537毫克)的MeOH(11毫升)溶液中加入乙烯基膦酸二乙酯(2-I，201毫克)。于65℃搅拌混合物24小时。TLC和HPLC显示反应完成。将溶液浓缩并通过硅胶进行纯化(MeOH/CH2Cl2＝1∶9)，得到8-IX(380毫克)，产率为57％。
于10-15℃用1小时向8-IX(210毫克)的CH2Cl2(5毫升)溶液中加入TMSBr(312毫克)。25℃搅拌该混合物15小时。40℃下将该溶液真空浓缩除去TMSBr和溶剂，然后，加入CH2Cl2以溶解残余物。然后在真空条件下进一步除去TMSBr和溶剂，分四次加入CH2Cl2。将该溶液浓缩，得到化合物8的氢溴酸盐(190毫克)。
CI-MS(M++1)：566.9
(9)制备化合物9
按照实施例1所述制备中间体1-XIII。
于0℃，向乙烯基膦酸(9-I，550毫克)在无水CH2Cl2(17毫升)的溶液中缓慢加入草酰氯(3.9克)和DMF(0.4毫升)。将该混合物回流3小时，浓缩后定量获得相应的氯化膦。于-70℃，将该氯化膦加入到2，2-二甲基-1，3-丙二醇(9-II，530毫克)、无水CH2Cl2(17毫升)和Et3N(3.1克)的混合物中。该混合物缓慢加热至室温并搅拌15小时。然后用水洗涤。有机层用(MgSO4)干燥，过滤和蒸发。残余物通过硅胶柱层析纯化(EtOAc/MeOH＝9∶1)，获得9-III(65毫克，产率为7％)，为棕色油状物。
将化合物9-III(65毫克)加入到中间体1-XIII(202毫克)在MeOH(4毫升)的溶液中。于65℃搅拌该溶液24小时。将溶液浓缩，残余物通过硅胶柱层析纯化(CH2Cl2/MeOH＝9∶1)，获得中间体9-IV(147毫克)，产率为48％。
将20％TFA/CH2Cl2(3毫升)溶液加入到中间体9-IV(147毫克)在CH2Cl2(2.0毫升)的溶液中。室温下搅拌反应混合物12小时，浓缩获得化合物9的三氟乙酸盐(267毫克)。
CI-MS(M++1)：635.4
(10)制备化合物10
按照与实施例9所述相同的方式制备化合物10，除了使用2-氨基苯甲醇替代2，2-二甲基-1，3-丙二醇。
CI-MS(M++1)：654.4
(11)制备化合物11
于0℃，搅拌11-I(1000毫克)和外-2-氨基降冰片烷(11-II，257毫克)的MeOH(10毫升)溶液3小时。然后，于0℃用1小时加入NaBH4(87.5毫克)。将溶液浓缩，用NH4Cl(水溶液)猝灭，用CH2Cl2萃取。将有机层合并，用MgSO4干燥，浓缩后获得残余物，该残余物通过硅胶层析纯化(MeOH/28％NH4OH＝97/3)，获得中间体11-III(1000毫克，产率为82％)。
于25℃，搅拌中间体11-III(1000毫克)、Et3N(210毫克)和Boc2O(455毫克)的CH2Cl2(10毫升)溶液15小时。将溶液浓缩，并通过硅胶层析纯化(EtOAc/己烷＝1/1)，获得中间体11-IV(907毫克，产率为76％)。
于25℃，在H2(气球)下搅拌中间体11-IV(907毫克)和Pd/C(20毫克)的MeOH(10毫升)溶液18小时。溶液通过硅藻土(celite)柱过滤获得滤液，除去MeOH，获得中间体11-V(740毫克)。
将Et3N(454毫克)加入中间体11-V(740毫克)和2，4-二氯-6-氨基嘧啶(1-VI，246毫克)的1-戊醇(10毫升)溶液中。于120℃搅拌反应混合物15小时，并真空浓缩。形成的残余物通过硅胶层析纯化(EtOAc/己烷＝1/2)，获得中间体11-VI(420毫克，产率为45％)。
于25℃，向化合物11-VI(1.7克)和哌嗪(1-XII，1.4克，6当量)的1-戊醇(30毫升)溶液中加入Et3N(1.66克，6.0当量)。于120℃搅拌混合物15小时。将溶液浓缩并通过硅胶进行纯化(EtOAc/MeOH＝8∶2)，获得11-VII(1.5克)，产率为82％。
于25℃，在11-VII(1.5克)的MeOH(30毫升)溶液中加入乙烯基膦酸二乙酯(1-XIV，0.556克，1.5当量)。于65℃搅拌混合物24小时。TLC和HPLC显示反应完成。将溶液浓缩并通过硅胶进行纯化(MeOH/CH2Cl2＝8/92)，得到1.1克11-VIII，产率为59％。
于10-15℃用1小时向11-VIII(1.0克)的CH2Cl2(5毫升)溶液中加入TMSBr(1.46克，8当量)。25℃搅拌该混合物15小时。将该溶液浓缩，在40℃下真空除去TMSBr和溶剂。在该混合物中加入CH2Cl2以溶解残余物。再次于真空除去TMSBr和溶剂，获得粗固体，该固体用IPA/MeOH(9/1)洗涤，过滤并于25℃下真空(＜1托)干燥3小时后获得化合物11。在EtOH中结晶，得到化合物11的氢溴酸盐(530毫克)。
CI-MS(M++1)：579.4
(12)制备化合物12
按照于实施例11所述相同的方式制备化合物12，除了使用环己基六甲基四胺(cyclohexylmethanamine)代替外-2-氨基降冰片烷。
CI-MS(M++1)：581.4
冻干
(1)制备水溶液
在一个玻璃烧杯中，将3.00克甘露醇和0.7622克测试化合物(为HBr盐形式)溶解于少于100毫升的0.2％(w/v)NaCl溶液中。将该溶液移至100毫升的容量瓶中。烧杯用0.2％NaCl溶液冲洗，将该溶液转移到该容量瓶中。用0.2％NaCl溶液将容量瓶中溶液的体积调节至100毫升。因此，制备的溶液含有5毫克/毫升测试化合物(游离碱)、3％(w/v)甘露醇和0.2％(w/v)NaCl。制成的溶液首先预过滤，然后通过已灭菌的0.22微米Millipore DuraporeTM微滤器过滤。这种无菌-过滤的溶液用于冻干。
按照类似的方式，制备含5毫克/毫升测试化合物、3％(w/v)甘露醇和0.3％(w/v)NaCl的溶液以及含5毫克/毫升测试化合物、3％(w/v)甘露醇和0.4％(w/v)NaCl的溶液。
(2)溶液冻干
将溶液转移至小瓶中。将这些小瓶冷却至20℃并达到平衡。用20分钟进一步冷却至5℃，并保持该温度30分钟。然后用180分钟冷却至-45℃，并保持该温度保持4小时。在小瓶上施加133微巴真空。真空下用60分钟使小瓶的温度升高至-38℃，并保持6小时。然后，于-29℃保持真空5小时，-27℃保持真空15小时。
保持133微巴真空条件的同时，使小瓶的温度在60分钟内升高至-3℃。6小时后，在60分钟内使温度升高至5℃。小瓶在48微巴真空条件下保持99小时，然后在氮气下密封。
(3)冻干组合物的按照比例增加制备
制备2升含5毫克/毫升测试化合物、3％(w/v)甘露醇和0.2％(w/v)NaCl的溶液。将该溶液通过Millipak 20、0.22微米PVDF滤器过滤。将该溶液转移至10毫升Schott 1型透明玻璃小瓶中，并按照下面表中列出的条件进行冻干：
| 温度 | 压力 | 时间 | |
| 冷却 | 20℃ | 常压 | N/A |
| 冷却 | 5℃ | 常压 | 50分钟 |
| 冷却 | 5℃至-45℃ | 常压 | 3小时 |
| 冷冻 | -45℃ | 常压 | 6小时 |
| 干燥 | -45℃至-38℃ | 133微巴 | 1小时 |
| 干燥 | -38℃ | 133微巴 | 3小时 |
| 干燥 | -38℃至-29℃ | 133微巴 | 2小时 |
| 干燥 | -29℃ | 133微巴 | 5小时 |
| 干燥 | -29℃至-27℃ | 133微巴 | 2小时 |
| 干燥 | -27℃ | 133微巴 | 20小时 |
| 干燥 | -27℃至-3℃ | 133微巴 | 1小时 |
| 干燥 | -3℃ | 133微巴 | 3小时 |
| 干燥 | -3℃至12℃ | 133微巴 | 1小时 |
| 干燥 | 12℃ | 133微巴 | 12小时 |
| 干燥 | 12℃至5℃ | 133微巴 | 0.5小时 |
| 干燥 | 5℃ | 48微巴 | 99小时 |
在氮气下，用Helvoet Omniflex Rubber Lyo-塞子将小瓶密封。
稳定性研究
将小瓶在5℃/环境相对湿度，25℃/60％相对湿度，或40℃/75％相对湿度条件下储存1个月、2个月、3个月或6个月。与冻干后立刻得到的结果相比，储存了1个月、2个月、3个月和6个月的组合物在其化合物含量、水分含量、外观和pH方面的变化很小或者没有变化。即使增加其重溶的时间但依然很短，即约30-40秒。
其他实施方式
说明书中所揭示的所有特征可以以任意的组合方式结合。说明书中所揭示的各种特征可以被起到相同、等价或类似目的的特征代替。因此，除非另外说明，所揭示的各种特征仅仅是一系列等价或类似特征的一个例子。
通过以上说明，本领域技术人员可以很容易地确定本发明的主要特征，同时可以在不背离本发明的精神和范围的前提下，对本发明进行各种改变和改良，以使其适用于各种应用和条件。因此，其他的实施方式也在所附权利要求书的范围之内。
Claims (27)
1.一种药盒，该药盒包含下面通式的化合物的冻干制剂：
其中，
Q和U各自独立地是CH或N，前提是，Q和U中至少一个是N；
X、Y和Z各自独立地是C1-5亚烷基或被消除；
m为0、1、2、3、4或5；
n为0、1或2；
R1是：H、C1-C10烷基、C3-C20环烷基、C3-C20杂环烷基、芳基、杂芳基、卤素、CN、ORa、COORa、OC(O)Ra、C(O)Ra、C(O)NRaRb或NRaRb；
R2是：C1-C10烷基、C3-C20环烷基、C3-C20杂环烷基、芳基、杂芳基或C1-C10烷基，可任选地被C1-C10烷基、C3-C20环烷基、C3-C20杂环烷基或N(RcRd)取代；
R3各自独立地是：C1-C10烷基、C3-C20环烷基、C3-C20杂环烷基、芳基、杂芳基、卤素、CN、ORe、COORe、OC(O)Re、C(O)Re、C(O)NReRf或NReRf；或者(R3)m是与它所结合的环上的两个碳原子相连的C1-5亚烷基或者是与它所结合的环上的一个碳原子相连的C2-8亚烷基；和
R4是：P(＝O)(ORg)(ORi)、P(＝O)(NHRg)(ORi)、P(＝O)(NRg)(NRi)、S(＝O)2ORg或S(＝O)2Rg；
其中，Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf、Rg和Ri各自独立地是：H、C1-C10烷基、C3-C20环烷基、C3-C20杂环烷基、芳基、杂芳基或-C(O)R，R是H、C1-C10烷基、C3-C20环烷基、C3-C20杂环烷基、芳基或杂芳基；或者，Ra和Rb相连一起形成C2-8亚烷基，Rc和Rd相连一起形成C2-8亚烷基，Re和Rf相连一起形成C2-8亚烷基，或者Rg和Ri相连一起形成C1-5亚烷基；和
密封容器；
其中冻干制剂设置在该密封容器中。
2.如权利要求1所述的药盒，其特征在于，Q是CH或N，U是N。
3.如权利要求1所述的药盒，其特征在于，X是-CH2-、-CH2CH2-或-CH2CH2CH2-，Y是-CH2或被消除，Z是-CH2-。
4.如权利要求1所述的药盒，其特征在于，R1是NH2；R2是烷基取代的N(RcRd)；m为0、1或2；n为1或2；R3是C1-C3烷基、C3-C8环烷基、C3-C8杂环烷基、芳基、杂芳基、卤素、CN、ORe或C(O)NReRf；或者，R3是与它所结合的环上的两个碳原子相连的C1-2亚烷基或是与它所结合的环上的一个碳原子相连的C2-5亚烷基。
5.如权利要求1所述的药盒，其特征在于，R4是P(＝O)(OH)2、P(＝O)(OH)(OCH2CH3)、P(＝O)(OCH2CH3)2、S(＝O)2OH、S(＝O)2CH3或S(＝O)2Ph。
6.如权利要求1所述的药盒，其特征在于，所述冻干的化合物是以下所示化合物之一：
7.如权利要求1所述的药盒，其特征在于，所述药盒还包含填充剂。
8.如权利要求7所述的药盒，所述药盒不含张力调节剂。
9.如权利要求7所述的药盒，其特征在于，所述药盒不含氯化钠。
10.如权利要求7所述的药盒，其特征在于，所述填充剂是甘露醇或右旋糖苷。
11.如权利要求10所述的药物组合物，其特征在于，m为0、1或2；n为1或2；Q是CH或N，U是N；X是-CH2-、-CH2CH2-或-CH2CH2CH2-；Y是-CH2或被消除，Z是-CH2-；R1是NH2；R2是C1-5烷基取代的N(RcRd)；R3是C1-C3烷基、C3-C8环烷基、C3-C8杂环烷基、芳基、杂芳基、卤素、CN、ORe或C(O)NReRf；或者，R3是与它所结合的环上的两个碳原子相连的C1-2亚烷基或者是与它所结合的环上的一个碳原子相连的C2-5亚烷基。
12.如权利要求11所述的药物组合物，其特征在于，R4是P(＝O)(OH)2、P(＝O)(OH)(OCH2CH3)、P(＝O)(OCH2CH3)2、
S(＝O)2OH、S(＝O)2CH3或S(＝O)2Ph。
13.如权利要求12所述的药物组合物，其特征在于，所述冻干的化合物是以下所示化合物之一：
14.如权利要求1所述的药盒，还包含张力调节剂。
15.如权利要求14所述的药盒，其特征在于，张力调节剂是氯化钠。
16.如权利要求1所述的药盒，其特征在于，所述药盒还包含填充剂和张力调节剂，所述化合物、填充剂和张力调节剂的重量比为1-25∶10-50∶0.01-6。
17.如权利要求1所述的药盒，其特征在于，所述药盒还包含填充剂和张力调节剂，所述化合物、填充剂和张力调节剂的重量比为1-50∶0.01-50∶0.01-0.9。
18.如权利要求17所述的药盒，其特征在于，所述冻干的化合物是以下所示化合物之一：
19.一种制备以下通式的化合物的冻干制剂的方法：
其中，
Q和U各自独立地是CH或N，前提是，Q和U中至少一个是N；
X、Y和Z各自独立地是C1-5亚烷基或被消除；
m为0、1、2、3、4或5；
n为0、1或2；
R1是H、C1-C10烷基、C3-C20环烷基、C3-C20杂环烷基、芳基、杂芳基、卤素、CN、ORa、COORa、OC(O)Ra、C(O)Ra、C(O)NRaRb或NRaRb；
R2是C1-C10烷基、C3-C20环烷基、C3-C20杂环烷基、芳基、杂芳基或C1-C10烷基，或任选地被C1-C10烷基、C3-C20环烷基、C3-C20杂环烷基或N(RcRd)取代；
R3各自独立地是：C1-C10烷基、C3-C20环烷基、C3-C20杂环烷基、芳基、杂芳基、卤素、CN、ORe、COORe、OC(O)Re、C(O)Re、C(O)NReRf或NReRf；或者(R3)m是与它所结合的环上的两个碳原子相连的C1-5亚烷基或者是与它所结合的环上的一个碳原子相连的C2-8亚烷基；和
R4是P(＝O)(ORg)(ORi)，P(＝O)(NHRg)(ORi)，P(＝O)(NRg)(NRi)，S(＝O)2ORg或S(＝O)2Rg；
其中，Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf、Rg和Ri各自独立地是：H、C1-C10烷基、C3-C20环烷基、C3-C20杂环烷基、芳基、杂芳基或-C(O)R，R是H、C1-C10烷基、C3-C20环烷基、C3-C20杂环烷基、芳基或杂芳基；或者，Ra和Rb相连一起形成C2-8亚烷基，Rc和Rd相连一起形成C2-8亚烷基，Re和Rf相连一起形成C2-8亚烷基，或Rg和Ri相连一起形成C1-5亚烷基；
所述方法包括：
提供包含化合物的水溶液；
将该溶液冷却至-80℃和-10℃之间；和
将-80℃和-10℃之间的冷却溶液抽真空15-100小时，然后在-9℃和35℃之间抽真空10-200小时。
20.如权利要求19所述的方法，其特征在于，所述水溶液还包含填充剂。
21.如权利要求19所述的方法，其特征在于，所述水溶液还包含张力调节剂。
22.如权利要求19所述的方法，其特征在于，所述水溶液还包含填充剂和张力调节剂。
23.如权利要求22所述的方法，其特征在于，所述填充剂是甘露醇或右旋糖苷，张力调节剂是氯化钠。
24.如权利要求23所述的方法，其特征在于，在进行冷却步骤之前，所述水溶液包含1-50毫克/毫升的基于其游离碱形式的化合物、0.01-50毫克/毫升甘露醇或右旋糖苷和0.01-6毫克/毫升氯化钠。
25.如权利要求19所述的方法，其特征在于，在进行冷却步骤之前，所述水溶液通过微过滤进行灭菌。
26.一种通过权利要求19所述方法制备的冻干制剂。
27.一种通过权利要求25所述方法制备的冻干制剂。
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|---|---|---|---|---|
| CN107427513A (zh) * | 2014-09-30 | 2017-12-01 | 太景生物科技股份有限公司 | 治疗癌症及心肌梗塞的方法 |
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2009
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Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107427513A (zh) * | 2014-09-30 | 2017-12-01 | 太景生物科技股份有限公司 | 治疗癌症及心肌梗塞的方法 |
| CN109689112A (zh) * | 2016-09-01 | 2019-04-26 | 柏林合作研究学会 | 化学选择性的巯基与烯基或炔基磷酰胺的偶联 |
| US11746124B2 (en) | 2016-09-01 | 2023-09-05 | Forschungsverbund Berlin E.V. | Chemoselective thiol-conjugation with alkene or alkyne-phosphonamidates |
| CN109689112B (zh) * | 2016-09-01 | 2023-10-13 | 柏林合作研究学会 | 化学选择性的巯基与烯基或炔基磷酰胺的偶联 |
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