CN102036684A - 用于光动力疗法和坏死肿瘤成像的rgd-(细菌)叶绿素缀合物 - Google Patents
用于光动力疗法和坏死肿瘤成像的rgd-(细菌)叶绿素缀合物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102036684A CN102036684A CN2009801159012A CN200980115901A CN102036684A CN 102036684 A CN102036684 A CN 102036684A CN 2009801159012 A CN2009801159012 A CN 2009801159012A CN 200980115901 A CN200980115901 A CN 200980115901A CN 102036684 A CN102036684 A CN 102036684A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- tumor
- group
- alkyl
- purposes
- formula
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 414
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 title claims abstract description 63
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 title claims abstract description 46
- 238000002428 photodynamic therapy Methods 0.000 title claims abstract description 44
- ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M chlorophyll a Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M 0.000 title claims description 35
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 title claims description 33
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 title claims description 33
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 claims abstract description 16
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 213
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 101
- IYMAXBFPHPZYIK-BQBZGAKWSA-N Arg-Gly-Asp Chemical class NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O IYMAXBFPHPZYIK-BQBZGAKWSA-N 0.000 claims description 88
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 88
- -1 Thiazole Pyridine Quinoline Isoquinolin Pyrimidine Chemical compound 0.000 claims description 53
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 53
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 53
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 claims description 50
- 239000003504 photosensitizing agent Substances 0.000 claims description 47
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 46
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 46
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 46
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 claims description 45
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims description 37
- DSJXIQQMORJERS-AGGZHOMASA-M bacteriochlorophyll a Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC([C@H](CC)[C@H]3C)=[N+]4C3=CC3=C(C(C)=O)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 DSJXIQQMORJERS-AGGZHOMASA-M 0.000 claims description 36
- 108010003118 Bacteriochlorophylls Proteins 0.000 claims description 33
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 33
- 208000037396 Intraductal Noninfiltrating Carcinoma Diseases 0.000 claims description 32
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 32
- 208000028715 ductal breast carcinoma in situ Diseases 0.000 claims description 32
- 108010072041 arginyl-glycyl-aspartic acid Proteins 0.000 claims description 30
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 26
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 25
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 24
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 24
- 241001597008 Nomeidae Species 0.000 claims description 23
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 claims description 23
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 22
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 claims description 21
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 20
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 18
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 18
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 15
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims description 15
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O ammonium group Chemical group [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims description 14
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 claims description 14
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 14
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 claims description 13
- RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N Pyrrolidine Chemical compound C1CCNC1 RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 claims description 12
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 claims description 11
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 11
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 11
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 claims description 10
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims description 10
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 claims description 9
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 claims description 9
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 9
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 9
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims description 9
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims description 9
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N Piperazine Chemical compound C1CNCCN1 GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 125000002837 carbocyclic group Chemical group 0.000 claims description 8
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 239000013522 chelant Substances 0.000 claims description 8
- 229940125961 compound 24 Drugs 0.000 claims description 8
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 claims description 8
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 claims description 8
- 125000004043 oxo group Chemical group O=* 0.000 claims description 8
- 238000002600 positron emission tomography Methods 0.000 claims description 8
- 150000003851 azoles Chemical class 0.000 claims description 7
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 7
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 claims description 7
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 claims description 7
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 7
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 7
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 7
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 6
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 6
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 6
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 claims description 6
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims description 6
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 claims description 6
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 claims description 6
- 238000002603 single-photon emission computed tomography Methods 0.000 claims description 6
- 150000000182 1,3,5-triazines Chemical class 0.000 claims description 5
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 5
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims description 5
- XYOVOXDWRFGKEX-UHFFFAOYSA-N azepine Chemical compound N1C=CC=CC=C1 XYOVOXDWRFGKEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 claims description 5
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 5
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 5
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 claims description 5
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 4
- 150000001447 alkali salts Chemical class 0.000 claims description 4
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 4
- 230000032050 esterification Effects 0.000 claims description 4
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 claims description 4
- 108010064365 glycyl- arginyl-glycyl-aspartyl-seryl-prolyl-lysine Proteins 0.000 claims description 4
- 230000003902 lesion Effects 0.000 claims description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 4
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 claims description 4
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000005298 paramagnetic effect Effects 0.000 claims description 4
- 150000003053 piperidines Chemical class 0.000 claims description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 4
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 claims description 4
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 claims description 4
- BRNULMACUQOKMR-UHFFFAOYSA-N thiomorpholine Chemical compound C1CSCCN1 BRNULMACUQOKMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 claims description 4
- DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N (R)-camphor Chemical compound C1C[C@@]2(C)C(=O)C[C@@H]1C2(C)C DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N 0.000 claims description 3
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052688 Gadolinium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 claims description 3
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims description 3
- 229960000846 camphor Drugs 0.000 claims description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 150000002460 imidazoles Chemical class 0.000 claims description 3
- 238000013507 mapping Methods 0.000 claims description 3
- 150000002892 organic cations Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000003217 pyrazoles Chemical class 0.000 claims description 3
- 125000003226 pyrazolyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N pyridine Substances C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000005493 quinolyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 125000000335 thiazolyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000004642 (C1-C12) alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 2
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 229910052692 Dysprosium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052691 Erbium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 229910052769 Ytterbium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims description 2
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 claims description 2
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 claims description 2
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000004744 fabric Substances 0.000 claims description 2
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052738 indium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000005956 isoquinolyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims description 2
- 208000018223 neoplasm of chest wall Diseases 0.000 claims description 2
- 208000025402 neoplasm of esophagus Diseases 0.000 claims description 2
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 2
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 claims description 2
- 229910052702 rhenium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052703 rhodium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052713 technetium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052716 thallium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052718 tin Inorganic materials 0.000 claims description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 229910052727 yttrium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000004066 1-hydroxyethyl group Chemical group [H]OC([H])([*])C([H])([H])[H] 0.000 claims 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 125000002849 D-tyrosine group Chemical group [H]N([H])[C@@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C1=C([H])C([H])=C(O[H])C([H])=C1[H] 0.000 claims 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 claims 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 claims 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 claims 1
- 150000002390 heteroarenes Chemical class 0.000 claims 1
- 238000012797 qualification Methods 0.000 claims 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 63
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 45
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 41
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 40
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 35
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 35
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 27
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 22
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 21
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 21
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 21
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 21
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 20
- 238000011160 research Methods 0.000 description 20
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 19
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 17
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N palladium Substances [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 108010054624 red fluorescent protein Proteins 0.000 description 17
- 239000002585 base Substances 0.000 description 15
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 14
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 14
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 14
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 13
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 13
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 13
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 13
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 13
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 description 12
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 12
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 12
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N Guanidine Chemical compound NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 11
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 11
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 10
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 10
- 239000000463 material Substances 0.000 description 10
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 10
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 9
- BHPNXACHQYJJJS-UHFFFAOYSA-N bacteriochlorin Chemical compound N1C(C=C2N=C(C=C3NC(=C4)C=C3)CC2)=CC=C1C=C1CCC4=N1 BHPNXACHQYJJJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 9
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 9
- 241000021375 Xenogenes Species 0.000 description 8
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 8
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 8
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 8
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 8
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 8
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 8
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 8
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 229940125846 compound 25 Drugs 0.000 description 7
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 7
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 description 7
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 6
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 6
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 6
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 6
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 6
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 6
- 240000006108 Allium ampeloprasum Species 0.000 description 5
- 235000005254 Allium ampeloprasum Nutrition 0.000 description 5
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 5
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 5
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 5
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 5
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 5
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 5
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 5
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 5
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 5
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 5
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 5
- 238000001465 metallisation Methods 0.000 description 5
- VEEGZPWAAPPXRB-BJMVGYQFSA-N (3e)-3-(1h-imidazol-5-ylmethylidene)-1h-indol-2-one Chemical compound O=C1NC2=CC=CC=C2\C1=C/C1=CN=CN1 VEEGZPWAAPPXRB-BJMVGYQFSA-N 0.000 description 4
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000001409 amidines Chemical class 0.000 description 4
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 4
- 239000004037 angiogenesis inhibitor Substances 0.000 description 4
- 229940121369 angiogenesis inhibitor Drugs 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 208000035269 cancer or benign tumor Diseases 0.000 description 4
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 4
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 4
- 230000034994 death Effects 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 210000003725 endotheliocyte Anatomy 0.000 description 4
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 4
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 description 4
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 4
- 238000010231 histologic analysis Methods 0.000 description 4
- 150000002466 imines Chemical class 0.000 description 4
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 4
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 4
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000004088 microvessel Anatomy 0.000 description 4
- 229960003330 pentetic acid Drugs 0.000 description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 4
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 4
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J ATP(4-) Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J 0.000 description 3
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 3
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 3
- 108010070075 Bacteriochlorophyll A Proteins 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 3
- 206010061309 Neoplasm progression Diseases 0.000 description 3
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 206010054094 Tumour necrosis Diseases 0.000 description 3
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 3
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 3
- 230000001772 anti-angiogenic effect Effects 0.000 description 3
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 3
- XEVRDFDBXJMZFG-UHFFFAOYSA-N carbonyl dihydrazine Chemical compound NNC(=O)NN XEVRDFDBXJMZFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 3
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 3
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 3
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 3
- 206010013990 dysuria Diseases 0.000 description 3
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 3
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 3
- 230000001146 hypoxic effect Effects 0.000 description 3
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 3
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 3
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 3
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 3
- 150000004032 porphyrins Chemical class 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- 206010044412 transitional cell carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 201000007423 tubular adenocarcinoma Diseases 0.000 description 3
- 210000001635 urinary tract Anatomy 0.000 description 3
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 3
- AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 1,4-benzoquinone Chemical compound O=C1C=CC(=O)C=C1 AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OYIFNHCXNCRBQI-UHFFFAOYSA-N 2-aminoadipic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CCCC(O)=O OYIFNHCXNCRBQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RKEBXTALJSALNU-LDCXZXNSSA-N 3-[(3R,21S,22S)-16-ethenyl-11-ethyl-4-hydroxy-3-methoxycarbonyl-12,17,21,26-tetramethyl-7,23,24,25-tetrazahexacyclo[18.2.1.15,8.110,13.115,18.02,6]hexacosa-1,4,6,8(26),9,11,13(25),14,16,18(24),19-undecaen-22-yl]propanoic acid Chemical compound CCC1=C(C2=NC1=CC3=C(C4=C([C@@H](C(=C5[C@H]([C@@H](C(=CC6=NC(=C2)C(=C6C)C=C)N5)C)CCC(=O)O)C4=N3)C(=O)OC)O)C)C RKEBXTALJSALNU-LDCXZXNSSA-N 0.000 description 2
- 206010002660 Anoxia Diseases 0.000 description 2
- 241000976983 Anoxia Species 0.000 description 2
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 2
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 2
- 206010058490 Hyperoxia Diseases 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000581650 Ivesia Species 0.000 description 2
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N L-norVal-OH Natural products CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 2
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010029113 Neovascularisation Diseases 0.000 description 2
- 101150034459 Parpbp gene Proteins 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N Sulphide Chemical compound [S-2] UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N Tamoxifen Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 2
- WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N Tetraxetan Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 2
- 206010064390 Tumour invasion Diseases 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 2
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 2
- 102100035140 Vitronectin Human genes 0.000 description 2
- 108010031318 Vitronectin Proteins 0.000 description 2
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 2
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 2
- CKMXBZGNNVIXHC-UHFFFAOYSA-L ammonium magnesium phosphate hexahydrate Chemical compound [NH4+].O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[O-]P([O-])([O-])=O CKMXBZGNNVIXHC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000002870 angiogenesis inducing agent Substances 0.000 description 2
- 230000007953 anoxia Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 230000009400 cancer invasion Effects 0.000 description 2
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000007942 carboxylates Chemical class 0.000 description 2
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 2
- 150000005829 chemical entities Chemical class 0.000 description 2
- 230000010109 chemoembolization Effects 0.000 description 2
- 229930002868 chlorophyll a Natural products 0.000 description 2
- NSMUHPMZFPKNMZ-VBYMZDBQSA-M chlorophyll b Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C=O)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 NSMUHPMZFPKNMZ-VBYMZDBQSA-M 0.000 description 2
- 229930002869 chlorophyll b Natural products 0.000 description 2
- 229940126543 compound 14 Drugs 0.000 description 2
- 229940125758 compound 15 Drugs 0.000 description 2
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 2
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 238000002597 diffusion-weighted imaging Methods 0.000 description 2
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 2
- MURGITYSBWUQTI-UHFFFAOYSA-N fluorescin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1C1C2=CC=C(O)C=C2OC2=CC(O)=CC=C21 MURGITYSBWUQTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002686 geranylgeranyl group Chemical group [H]C([*])([H])/C([H])=C(C([H])([H])[H])/C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C(C([H])([H])[H])/C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C(C([H])([H])[H])/C([H])([H])C([H])([H])C([H])=C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 125000003147 glycosyl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 2
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 2
- 238000007489 histopathology method Methods 0.000 description 2
- 230000000222 hyperoxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 2
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 2
- 238000001095 inductively coupled plasma mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 2
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 2
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 150000002926 oxygen Chemical class 0.000 description 2
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000001189 phytyl group Chemical group [H]C([*])([H])/C([H])=C(C([H])([H])[H])/C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@](C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@](C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 2
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 2
- RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N puromycin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C[C@H](N)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N2C3=NC=NC(=C3N=C2)N(C)C)O[C@@H]1CO RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N 0.000 description 2
- 229950010131 puromycin Drugs 0.000 description 2
- 238000012207 quantitative assay Methods 0.000 description 2
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 229910052567 struvite Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-O sulfonium Chemical compound [SH3+] RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- 210000000225 synapse Anatomy 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 150000003566 thiocarboxylic acids Chemical class 0.000 description 2
- QVMPZNRFXAKISM-UHFFFAOYSA-N tirapazamine Chemical compound C1=CC=C2[N+]([O-])=NC(=N)N(O)C2=C1 QVMPZNRFXAKISM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229950002376 tirapazamine Drugs 0.000 description 2
- 230000007838 tissue remodeling Effects 0.000 description 2
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 229960001134 von willebrand factor Drugs 0.000 description 2
- IYKLZBIWFXPUCS-VIFPVBQESA-N (2s)-2-(naphthalen-1-ylamino)propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(N[C@@H](C)C(O)=O)=CC=CC2=C1 IYKLZBIWFXPUCS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- FMUMEWVNYMUECA-LURJTMIESA-N (2s)-2-azaniumyl-5-methylhexanoate Chemical compound CC(C)CC[C@H](N)C(O)=O FMUMEWVNYMUECA-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- ZRVZOBGMZWVJOS-VMXHOPILSA-N (2s)-6-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-2-[[(2s)-2-[[2-[[(2s)-2-[(2-aminoacetyl)amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]acetyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]hexanoic acid Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)CN ZRVZOBGMZWVJOS-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N -2-Amino-4-hydroxybutanoic acid Natural products OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N 1H-pyrrole Natural products C=1C=CNC=1 KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YZBAXVICWUUHGG-UHFFFAOYSA-N 2-[[4-[2-[dimethyl(oxido)azaniumyl]ethylamino]-5,8-dihydroxy-9,10-dioxoanthracen-1-yl]amino]-n,n-dimethylethanamine oxide Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCC[N+](C)(C)[O-])=CC=C2NCC[N+](C)([O-])C YZBAXVICWUUHGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- INCAQIRDTKGRNM-UHFFFAOYSA-N 2-cyclopropyl-1h-indole Chemical compound C1CC1C1=CC2=CC=CC=C2N1 INCAQIRDTKGRNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000094 2-phenylethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JRLTTZUODKEYDH-UHFFFAOYSA-N 8-methylquinoline Chemical group C1=CN=C2C(C)=CC=CC2=C1 JRLTTZUODKEYDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150079978 AGRN gene Proteins 0.000 description 1
- 102100040026 Agrin Human genes 0.000 description 1
- 108700019743 Agrin Proteins 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 206010006262 Breast inflammation Diseases 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001598984 Bromius obscurus Species 0.000 description 1
- 108700012439 CA9 Proteins 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 102100024423 Carbonic anhydrase 9 Human genes 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940126657 Compound 17 Drugs 0.000 description 1
- JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N Cu2+ Chemical compound [Cu+2] JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710112752 Cytotoxin Proteins 0.000 description 1
- 229930182832 D-phenylalanine Natural products 0.000 description 1
- 125000001711 D-phenylalanine group Chemical group [H]N([H])[C@@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-MRVPVSSYSA-N D-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 239000004593 Epoxy Substances 0.000 description 1
- 206010063560 Excessive granulation tissue Diseases 0.000 description 1
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 1
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 1
- 208000000571 Fibrocystic breast disease Diseases 0.000 description 1
- 102100037362 Fibronectin Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000766307 Gallus gallus Ovotransferrin Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine Chemical group ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LCWXJXMHJVIJFK-UHFFFAOYSA-N Hydroxylysine Natural products NCC(O)CC(N)CC(O)=O LCWXJXMHJVIJFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010021033 Hypomenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 206010073094 Intraductal proliferative breast lesion Diseases 0.000 description 1
- 208000005168 Intussusception Diseases 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N L-2-aminopentanoic acid Chemical compound CCC[C@H](N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 238000007126 N-alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- BZQFBWGGLXLEPQ-UHFFFAOYSA-N O-phosphoryl-L-serine Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(O)=O BZQFBWGGLXLEPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000006994 Precancerous Conditions Diseases 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 241000190967 Rhodospirillum Species 0.000 description 1
- 108091006296 SLC2A1 Proteins 0.000 description 1
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- 108091008605 VEGF receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000009484 Vascular Endothelial Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 206010068149 Vessel perforation Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- FXXACINHVKSMDR-UHFFFAOYSA-N acetyl bromide Chemical compound CC(Br)=O FXXACINHVKSMDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 125000002015 acyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 102000019997 adhesion receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010013985 adhesion receptor Proteins 0.000 description 1
- 206010064930 age-related macular degeneration Diseases 0.000 description 1
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 125000004453 alkoxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004448 alkyl carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001118 alkylidene group Chemical group 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 125000000320 amidine group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000909 amidinium group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000002344 aminooxy group Chemical group [H]N([H])O[*] 0.000 description 1
- YLFIGGHWWPSIEG-UHFFFAOYSA-N aminoxyl Chemical compound [O]N YLFIGGHWWPSIEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 1
- 230000003527 anti-angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 229910052787 antimony Inorganic materials 0.000 description 1
- WATWJIUSRGPENY-UHFFFAOYSA-N antimony atom Chemical compound [Sb] WATWJIUSRGPENY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940034982 antineoplastic agent Drugs 0.000 description 1
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005129 aryl carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005161 aryl oxy carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004104 aryloxy group Chemical group 0.000 description 1
- DKHKTHAFPUYTLR-UHFFFAOYSA-N azane;hydrazine;hydrate Chemical compound N.O.NN DKHKTHAFPUYTLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KWOZSBGNAHVCKG-WFDCHTCOSA-N bacteriopheophytin a Chemical compound N1C(C=C2[C@H]([C@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)C(=N2)C2=C3NC(=C4)C(C)=C3C(=O)[C@@H]2C(=O)OC)C)=C(C)C(C(C)=O)=C1C=C1[C@H](C)[C@@H](CC)C4=N1 KWOZSBGNAHVCKG-WFDCHTCOSA-N 0.000 description 1
- 210000002469 basement membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 125000003785 benzimidazolyl group Chemical group N1=C(NC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 125000005605 benzo group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000499 benzofuranyl group Chemical group O1C(=CC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 125000001164 benzothiazolyl group Chemical group S1C(=NC2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000029918 bioluminescence Effects 0.000 description 1
- 238000005415 bioluminescence Methods 0.000 description 1
- 229910052797 bismuth Inorganic materials 0.000 description 1
- JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N bismuth atom Chemical compound [Bi] JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 230000036770 blood supply Effects 0.000 description 1
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000011803 breast fibrocystic disease Diseases 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 125000002843 carboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 238000002144 chemical decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000005482 chemotactic factor Substances 0.000 description 1
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000012829 chemotherapy agent Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003040 circulating cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 229940125878 compound 36 Drugs 0.000 description 1
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000392 cycloalkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N delta-DL-hydroxylysine Natural products NCC(O)CCC(N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007682 dermal toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 229950006137 dexfosfoserine Drugs 0.000 description 1
- 238000012631 diagnostic technique Methods 0.000 description 1
- 229910001882 dioxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 239000003596 drug target Substances 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- 201000007273 ductal carcinoma in situ Diseases 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N erythro-5-hydroxy-L-lysine Chemical compound NC[C@H](O)CC[C@H](N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 210000003722 extracellular fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- NOOCSNJCXJYGPE-UHFFFAOYSA-N flunixin Chemical compound C1=CC=C(C(F)(F)F)C(C)=C1NC1=NC=CC=C1C(O)=O NOOCSNJCXJYGPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000588 flunixin Drugs 0.000 description 1
- 238000012921 fluorescence analysis Methods 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 125000002541 furyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000762 glandular Effects 0.000 description 1
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 description 1
- 210000001126 granulation tissue Anatomy 0.000 description 1
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 1
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000002962 histologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013427 histology analysis Methods 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000000717 hydrazino group Chemical group [H]N([*])N([H])[H] 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000743 hydrocarbylene group Chemical group 0.000 description 1
- QJHBJHUKURJDLG-UHFFFAOYSA-N hydroxy-L-lysine Natural products NCCCCC(NO)C(O)=O QJHBJHUKURJDLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 125000000879 imine group Chemical group 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011503 in vivo imaging Methods 0.000 description 1
- 238000012623 in vivo measurement Methods 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 208000030776 invasive breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 150000003951 lactams Chemical class 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 208000002780 macular degeneration Diseases 0.000 description 1
- 230000005291 magnetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 210000004216 mammary stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000009607 mammography Methods 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- MMIPFLVOWGHZQD-UHFFFAOYSA-N manganese(3+) Chemical compound [Mn+3] MMIPFLVOWGHZQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004396 mastitis Diseases 0.000 description 1
- 201000008806 mesenchymal cell neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000003716 mesoderm Anatomy 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 238000002324 minimally invasive surgery Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- PZWUYEZWVSHDPN-UHFFFAOYSA-N morpholine;piperazine;thiomorpholine Chemical compound C1CNCCN1.C1COCCN1.C1CSCCN1 PZWUYEZWVSHDPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 125000000740 n-pentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 208000013435 necrotic lesion Diseases 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N nickel Substances [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004987 nonapoptotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 239000013307 optical fiber Substances 0.000 description 1
- 238000012634 optical imaging Methods 0.000 description 1
- 238000011369 optimal treatment Methods 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 238000006213 oxygenation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 108010013121 palladium-bacteriopheophorbide Proteins 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000007310 pathophysiology Effects 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 238000001050 pharmacotherapy Methods 0.000 description 1
- 125000000951 phenoxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(O*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 125000000843 phenylene group Chemical group C1(=C(C=CC=C1)*)* 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- BZQFBWGGLXLEPQ-REOHCLBHSA-N phosphoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)COP(O)(O)=O BZQFBWGGLXLEPQ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- USRGIUJOYOXOQJ-GBXIJSLDSA-N phosphothreonine Chemical compound OP(=O)(O)O[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O USRGIUJOYOXOQJ-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- 208000017983 photosensitivity disease Diseases 0.000 description 1
- 231100000434 photosensitization Toxicity 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 125000004193 piperazinyl group Chemical group 0.000 description 1
- VJTHAGOTDZKVFF-UHFFFAOYSA-N piperidine pyridine pyrrolidine Chemical class N1=CC=CC=C1.N1CCCC1.N1CCCCC1 VJTHAGOTDZKVFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Polymers 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 231100000438 skin toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- WINHZLLDWRZWRT-ATVHPVEESA-N sunitinib Chemical compound CCN(CC)CCNC(=O)C1=C(C)NC(\C=C/2C3=CC(F)=CC=C3NC\2=O)=C1C WINHZLLDWRZWRT-ATVHPVEESA-N 0.000 description 1
- 229960001603 tamoxifen Drugs 0.000 description 1
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 1
- 229910052714 tellurium Inorganic materials 0.000 description 1
- PORWMNRCUJJQNO-UHFFFAOYSA-N tellurium atom Chemical compound [Te] PORWMNRCUJJQNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000002769 thiazolinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001544 thienyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003556 thioamides Chemical class 0.000 description 1
- 239000011135 tin Substances 0.000 description 1
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000031998 transcytosis Effects 0.000 description 1
- 239000012096 transfection reagent Substances 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 1
- 230000005751 tumor progression Effects 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 108010047303 von Willebrand Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100036537 von Willebrand factor Human genes 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
- BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N xylazine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=C1NC1=NCCCS1 BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001600 xylazine Drugs 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/0474—Organic compounds complexes or complex-forming compounds, i.e. wherein a radioactive metal (e.g. 111In3+) is complexed or chelated by, e.g. a N2S2, N3S, NS3, N4 chelating group
- A61K51/0485—Porphyrins, texaphyrins wherein the nitrogen atoms forming the central ring system complex the radioactive metal
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
- A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
- A61K41/0071—PDT with porphyrins having exactly 20 ring atoms, i.e. based on the non-expanded tetrapyrrolic ring system, e.g. bacteriochlorin, chlorin-e6, or phthalocyanines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
- A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
- A61K49/0036—Porphyrins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/005—Fluorescence in vivo characterised by the carrier molecule carrying the fluorescent agent
- A61K49/0056—Peptides, proteins, polyamino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
- A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
- A61K49/085—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier conjugated systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
- A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
- A61K49/10—Organic compounds
- A61K49/14—Peptides, e.g. proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/082—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins the peptide being a RGD-containing peptide
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/088—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins conjugates with carriers being peptides, polyamino acids or proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
- A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/041—Heterocyclic compounds
- A61K51/044—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/041—Heterocyclic compounds
- A61K51/044—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins
- A61K51/0446—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/041—Heterocyclic compounds
- A61K51/044—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins
- A61K51/0446—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
- A61K51/0451—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil having four such rings, e.g. phorphine derivatives, bilirubin, biliverdine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D257/00—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D257/02—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
- C07D257/04—Five-membered rings
Abstract
本发明提供与非坏死肿瘤区相比在坏死肿瘤区归巢和蓄积长久得多的RGD-叶绿素和RGD-细菌叶绿素缀合物,其用于微创肿瘤靶向成像、肿瘤靶向光动力疗法和/或坏死肿瘤的在线预后。
Description
技术领域
本发明属于肿瘤学领域并涉及通过肿瘤靶向光动力学成像检测坏死肿瘤区以及使用光敏剂(特别是叶绿素和细菌叶绿素衍生物与含有RGD基序或RGD肽模拟物的肽的缀合物)通过肿瘤靶向光动力疗法治疗所述肿瘤。
定义和缩略语
Bchla:细菌叶绿素a:五环7,8,17,18-四氢卟啉,具有第5个碳环(isocyclic ring),一个中心Mg原子,在173位上有一个植基或牻牛儿基牻牛儿基,在132位上有一个COOCH3基团,在132位上有一个H原子,在2、7、12、18位上有甲基,在3位上有一个乙酰基,在8位上有一个乙基,本文称为化合物1;Bphe:细菌脱镁叶绿素a(其中中心Mg被两个H原子置换的Bchl);Bpheid:细菌脱镁叶绿甲酯酸a(由无中心金属原子的Bphe衍生,C-172无甲酸);Chl:叶绿素;红螺菌菌绿素(Rhodobacteriochlorin):四环7,8,17,18-四氢卟啉,17位上有一个-CH2CH2COOH基团,在13位上有一个-COOH,在2、7、12、8位上有甲基,在3和8位上有乙基;Pd-Bpheid:Pd-细菌脱镁叶绿甲酯酸a;EC:内皮细胞;ECM:胞外基质;NIR:近红外;PDT:光动力疗法;RGD-4C:环状九肽CDCRGDCFC-NH2;ROS:活性氧类。
整篇说明书中使用细菌叶绿素衍生物的IUPAC编号。使用该命名法,天然细菌叶绿素在132和172位携带两个羧酸酯,无论如何在133和173位上它们是被酯化的。
背景技术
癌症患者中,原发瘤和转移瘤的坏死和低氧与肿瘤侵袭性和预后差强相关。达到一定大小的实体瘤,生长速度超过其氧气供应,变得低氧并最终坏死。在位于距营养血管超过70μm的肿瘤区,间质氧压力降低,而距离超过150-180μm时,细胞变得几乎缺氧(Vaupel等,2001)。一般认为,坏死是由血管瓦解引起的慢性缺血和超过血管生成速度的快速肿瘤细胞生长的结果(Leek等,1999))。
实体瘤中的坏死区经历了形态改变。开始时,原有结构基本上保持,坏死细胞保持其整体形状,但却变成高度嗜酸性的。一段时间后,这种形式被液化性坏死所替代,其中细胞结构分解(Leek等,1999)。
坏死和低氧两者已被充公证实是预后差的标志。有研究提出,在上尿路移行细胞癌、恶性间皮瘤和肾细胞癌(RCC)中,将坏死作为癌症结果的独立预测物并且作为用于预后目的的极有力的工具(Edwards等,2003;Sengupta等,2005;Lee等,2007)。
在侵袭性乳腺癌中,坏死与高血管密度和血管生成、高水平局灶性巨噬细胞浸润和患者生存期缩短有关(Kato等,1997;Lee等,1997;Leek等,1999;Tomes等,2003)。中心性坏死,这是侵袭性乳腺癌的普遍特征,与结局差和肿瘤侵袭有关。研究表明,巨噬细胞被由低氧或垂死肿瘤细胞释放的趋化因子吸引至坏死肿瘤(Leek等,1999)。与非粉刺型(非侵袭性)原位管癌(DCIS)不同,在粉刺型(侵袭性)DCIS的管腔中发现大量坏死区(Cutuli等,2002)。在达360μm直径的DCIS病灶中心的坏死和低氧,在瘤细胞的性质和行为上有着明显的生物学差异。因此认为导管中坏死的存在与否可作为DCIS分级切实可行的标准(Bussolati等,2000)。
研究显示,这种肿瘤类型的大部分的坏死与低氧有关(Tomes等,2003)。低氧和缺氧使肿瘤细胞受到氧化应激。研究显示,长期的低氧条件提高突变率,加快肿瘤进程,增加血管生成和转移潜力并激活促生长信号转导途径。对氧化应激的适应常常使肿瘤细胞对某些治疗方式产生抗性(Brown等,2001)。
坏死与低氧之间的关联性得到了非常充分的证实,然而可能存在不会达到坏死的低氧条件,或者存在不一定反映急性或严重低氧的坏死(Dewhirst 1998)。低氧有若干种标记基因,其中有低氧诱导因子1(HIF1)、葡萄糖转运蛋白1和碳酸酐酶IX。只有检出所有三种标记才能确定坏死的分类(Tomes等,2003),这使得通过基因表达来鉴定坏死区变得颇为复杂。
已知坏死和低氧条件在癌症疗法中产生大量问题。低氧肿瘤区对放射治疗具有相对抗性,因为放射攻击(radiation assault)推进不良,而且因为可最终存在于肿瘤体积(tumor volume)中的干细胞对治疗的反应不佳,导致了肿瘤再生长(Brown等,1998;Dean等,2005)。因为大多数化疗试剂因与循环细胞相互作用而致细胞死亡,所以因低氧造成的细胞停滞(cell arrest)导致对常规化学疗法产生抗性,使非增殖细胞或慢增殖细胞不受损害(Tannock,1978)。此外,低氧条件通常产生改变药物性质的酸性环境,使药物的活性降低(Tannock等,1989)。
实体瘤化学疗法的更多问题之一包括将治疗剂运输到肿瘤,尤其是运输到低氧和坏死区(domain)。肿瘤通常含有具有异质血流的不规则渗漏微血管和大的血管间距离。除不存在适当淋巴引流和高间质压力以外,这些特征使得扩散成为肿瘤中营养物和药物的血管外运输的最重要的机制。然而,由于无规则血管形成,所以比起正常组织中的细胞,许多肿瘤细胞位于距毛细血管更远的距离,这反映在细胞部位处抗肿瘤药的浓度不足中。而且,因缺乏淋巴引流引起的间质液压升高降低了对流摄取(convection uptake),并进一步抑制药物(特别是大分子)分布到肿瘤细胞内(Minchinton等,2006)。
因此,在体内检测肿瘤内低氧和坏死区的能力极为重要。对低氧肿瘤区的了解可有助于选择正确的治疗法--或者通过在治疗前或治疗期间提高肿瘤氧合作用,或通过利用低氧的策略(Weinmann等,2004)。采用该方法,应用低氧激活的细胞毒素例如2-环丙基-吲哚并醌(indoloquinones)、AQ4N、替拉扎明(TPZ)和PR-104可有助于改进治疗效果(Brown等,2004;Lee等,2007;Patterson等,2007)。
组织病理学和免疫组织化学常常用来鉴定坏死和低氧;然而,它们是有创的,而且不能够进行原位检测。原位方法包括核磁共振成像(MRI)(Kamel等,2003;Metz等,2003)、血氧水平依赖性MRI(Kennan等,1997)、正电子发射断层摄影术(PET)(Lehtio等,2004)和弥散加权MRI(Lang等,1998)。
用于MRI的坏死亲和性造影剂(Necrosis-avid contrast agent,NACA)可分成卟啉型造影剂和非卟啉型造影剂。最为人所知的卟啉型NACA之一是大部分在坏死区边缘表现特异性坏死蓄积(necrosisaccumulation)的gadophrin-2。有研究认为蓄积机制以血清白蛋白(SA)运输为基础,但最新研究对这种方法提出了质疑(Hofmann等,1999;Ni等,2005)。
大多数恶性细胞在血管不存在时无法生长到临床可检测到的肿瘤块。这就是为什么达到一定大小(大约2-3mm3)的肿瘤必须转变成血管生成表型以支持其生长。向血管生成表型的转变可以表示血管生成因子和血管生成抑制物的表达失衡。血管生成因子的过量表达和血管生成抑制物的减量调节两者都是必需的并且足以诱导新血管生长,这两个过程通常同时发生以启动肿瘤血管生成(Cao,2005)。
肿瘤中代表血管的生化特征可包括血管生成相关分子,例如某些整联蛋白。细胞粘附受体的整联蛋白家族包括在胞外基质中或细胞表面上识别糖蛋白配体的截然不同的24种αβ异二聚体。整联蛋白家族的多个成员,包括α5β1、α8β1、αIIbβ3、αVβ3、αVβ5、αVβ6和αVβ8,均识别其配体内的Arg-Gly-Asp(RGD)基序。这些配体包括纤连蛋白、血纤蛋白原、玻连蛋白、冯维勒布兰德因子(von Willebrand factor)和许多其它大的糖蛋白(Takagi,2004)。因此,研究表明含有RGD基序的分子提供用于选择性摄取及随后成像并检测原发瘤病灶、坏死区和靶向疗法的新的机会。这个研究领域受到越来越多的注意。有大量有关使用RGD标记的成分用于成像的报道(Temming等,2005)。文献中报导的主要缺点是在4-5mm下肿瘤部位报告成分(reporting element)的浓度不够。这就是为什么RGD靶向成像的使用主要限于PET扫描这种更灵敏的方法。
了解肿瘤生长、转移形成、肿瘤-宿主相互作用和血管生成需要肿瘤模型,这可容易地跟踪肿瘤细胞,甚至在其各自水平上。用于直接测量肿瘤的最有意义的生物参数的现有方法仅可通过有创终点法(invasive end-point procedure)获得(Lyons,2005)。这类方法大多数包括组织病理学检查或免疫组织化学,它们是缓慢的、有创的,而且不一定是灵敏的方法(Yang等,2000)。因此,有必要引入能够直接显现肿瘤组织、无创的并且能够在细胞和分子两个水平上测量肿瘤相关参数的新方法。
近年来,已开发出若干无创性方法:MRI和光谱法、PET、单光子发射型计算层析X射线照相术(single photon emission computedtomography)和计算层析X射线照相术(Lyons,2005)。
有若干基于转基因的成像方法。这些方法使得无创性测量具有优良肿瘤特异性的多个生物参数、活的模型动物中的整体成像和转移检测成为可能。这些方法中有两种是:生物发光成像和荧光成像。
光学生物发光是以下列三种组分为基础:酶萤光素酶、底物萤光素和腺苷三磷酸(ATP)。在该方法中,不需要光激发来产生光发射。然而,如果这些组分之一不存在,则不能够检测。该方法由于良好的信噪比值而能够高通量地监测细胞存活力或细胞功能(Lyons,2005)。萤光素酶/萤光素方法的主要缺点是解剖和图像分辨率低,因此需要相当长的时间从麻醉动物中采集足够的光子以形成图像。再者,组织深度加大和外源递送底物的需要削弱了体内光发射(Yang等,2000;Lyons,2005)。此外,难以进行离体实验,因为ATP需要酶活性。重要的是,该方法包括主观参数化法,降低了它的定量价值。
通过光学荧光成像监测肿瘤进展的另一种方法是以用稳定的荧光蛋白(例如绿色荧光蛋白(GFP)和红色荧光蛋白(RFP))转染肿瘤细胞为基础。在该方法中,在可检出发射光之前需要外部激发。该方法的主要缺点是(1)随组织深度加大,激发光和发射光易于减弱,和(2)非标记细胞的自身荧光加大噪音(Lyons,2005)。主要优点包括:多个报道分子波长使得能够多重成像;与用于分析方法的多种离体方法(例如新鲜组织分析)高度兼容;对于成像不需要准备步骤,这使得它特别适于在活组织中进行肉眼观察;该方法是外部的并且是无创性的;该方法提供移植动物的内部生长肿瘤和转移的实时荧光光学成像,其可给出整体图像,而且还可给出从原发病灶和转移中提取的单细胞的图像(Yang等,2000;Lyons,2005)。整体成像是了解肿瘤发育最必须的工具之一。因此,通过用GFP或RFP对肿瘤细胞进行遗传标记,可获得原发瘤和转移瘤的外部整体成像(Yang等,2000)。
荧光标记法适于体内、新鲜组织和体外检测。采用表达荧光蛋白的肿瘤细胞能够使活的动物成像并跟踪不同时间点的肿瘤进展。RFP的发射波长比GFP的长,因此能够使显微镜可观察的肿瘤生长的灵敏度和分辨率更高(GFP激发波长-489nm,发射波长-508nm,RFP激发波长-558nm,发射波长-583nm)。
原位管癌(DCIS)包括出现恶变并在乳腺导管腔内蓄积的细胞的克隆增殖,无证据显示侵袭至附近乳腺间质和超过上皮基底膜以外。如果早期不接受治疗,非侵袭性DCIS病灶便非常有可能转变成危及生命的侵袭性疾病。在广泛使用乳房X线摄影术后,诊断患有早期DCIS的患者的数目激增,因此推荐的治疗方式从乳房切除术(接近100%治愈率)向保乳(BC)手术(BCS)转变,例如局部病灶切除术或乳腺微创手术(Kepple等,2004),任选伴RT和内分泌辅助疗法。然而,最近发现与乳房切除术后相比,在BCS后,甚至当同时进行RT时,同侧(同一乳房)或对侧(另一乳房)两者的复发率都较高,特别是年龄≤40的患者(消退率25-35%;Bijker N等,2006;Cutuli等,2002)。此外,多病灶病变给部分切除带来困难,对于被发现对肿瘤完全消退是决定性的边缘的持续受累也是如此(Cellini等,2005)。此外,生理和心理负担以及局部病灶切除术和随后的RT的可能的美容结果都十分重要。在乳腺癌疗法中,这些缺点使现今DCIS的治疗和管理成为有争议的问题,并且激起对治疗和预后的新的和/或补充方式进行研究。
DCIS是一种恶性肿瘤的生物学异质形式,具有不同的临床表现、组织学特征、细胞特征和生物潜能。被归类为粉刺型(侵袭性)癌和非粉刺型(非侵袭性)癌,其中粉刺型是高级级别,具有可能更为侵袭性的亚型,在腺管腔内特征性地包含大的坏死区,细胞为明显的非典型细胞。预期大约2/3患有低级别到中等级别DCIS的患者罹患多病灶同侧疾病,不同病灶之间的间隔可达1cm(Cutuli等,2002)。高级别病灶往往连续的,间隔小于5mm(Cutuli等,2005)。
非侵袭性DCIS自然发展成为侵袭性乳腺肿瘤可能要花15-20年,累及14-60%的确诊女性(Burstein等,2004)。实际上,DCIS似乎代表了乳腺癌发展的某个阶段,其中界定侵袭性乳腺癌的许多分子事件已经存在(Cutuli等,2002;Holland等,1990)。准确地讲,如果不治疗,则约30%的低级别病灶将发展成侵袭性癌症(Sanders等,2005)。直径大于2.5cm的病灶常常伴发可能不超过0.1mm的隐匿性微小侵袭性肿瘤(microinvasive tumor)。肿瘤边缘的受累情况提供重要的预后标志。接近切缘(小于1mm)或阳性边缘、高级别和/或粉刺型坏死区与较大的复发风险有关。
像许多其它癌症一样,在乳腺癌中,新血管形成(血管生成)在局部肿瘤进展和远距离转移发展中起着主要作用(Boehm-Viswanathan,2000;Kieran等,2003)。发现与周围的正常组织相比,DCIS组织中的微血管密度(MVD)显著较高(Guidi等,1994;Guidi等,1997;Guinebretière等,1994)。具有最高血管密度的纤维囊性病灶与较大的乳腺癌风险有关(Guidi等,1994;Guidi等,1997;Guinebretière等,1994)。侵袭性DCIS病灶的组织病理学检查结果与MVD提高和血管内皮生长因子(VEGF)表达增加有关(Guidi等,1997;Schneider等,2005)。临床病理相关性也证实了血管生成在乳腺癌发展中的重要作用,使之成为DCIS疗法和预后的颇有吸引力的靶标(Folkman,1997;Krippl等,2003;Relf等,1997)。由套叠引起的血管共选择、生长(Patan等,1996)、血管拟态和血管发生是天然存在的过程,可降低肿瘤对典型血管生成的依赖。特别重要的是几乎完全依赖于血管发生的炎症性乳腺癌的研究结果,似乎是因为癌细胞无能力与内皮细胞结合。
DCIS对极致密血管床的极度依赖使抗血管生成(抑制新血管形成)和抗血管(现有血管的闭塞/破坏)疗法(Shimizu等,2005;Thorpe,2004)成为局部BC疗法的诱人选择(Schneider等,2005;Folkman,1996)。事实上,抗血管生成药物例如贝伐单抗(一种抗VEGF-A受体抗体)和SU011248(一种VEGF受体酪氨酸的抑制剂)正处于II期临床试验中。有趣的是,发现他莫昔芬也具有抗血管生成活性。然而,日趋增多的大量证据说明抗血管生成方法的不足。这些不足包括需要长期治疗、“抗性-抗性理论(resistance to resistance theory)”(Schneider等,2005;Streubel等,2004)和药代动力学抗性(pharmacokinetic resistance)的部分失效。根据这些障碍,抗血管方法目前似乎更有前景,预期不需要长期治疗就能根除整个肿瘤(Folkman,2004)。血管靶向治疗的一种有前景的新兴手段是通过光动力疗法(VTP)。
同样地,靶向顺磁金属(具有适度驰豫性(relaxivity))、发射正电子的化学实体(例如64Cu),或针对DCIS的致密血管床的荧光探针,将开启检测相关病灶、边缘界定和预后的新途径,正如下文中所述。研究表明乳腺癌病灶的荧光检测在至多10mm的深度是有效的(Britton,2006)。用Gd作为造影剂的动态MRI以肿瘤血管系统的渗漏增加为基础,目前用于乳腺肿瘤定位(Rankin,2000)。然而,目前使用的MRI受可用造影剂积分时间(integration time)短的限制,所述造影剂短暂停留但不被肿瘤组织选择性摄取。
光动力疗法(PDT)在选定的治疗部位产生突发的细胞毒性活性氧类(ROS)。由于其寿命短,ROS毒性局限于发光部位。PDT通常由5个步骤组成:1.静脉内(IV)给予光敏剂;2.使所需浓度的光敏剂到达靶组织的一段时间;3.用高强度激光(对于连续照射高达1W)通过用于深层组织照射的细(0.4mm以下直径)光导纤维经皮或经间质照射靶组织,由此局部产生细胞毒性的ROS;4.出现肿瘤坏死并根除肿瘤;
5.组织重塑和愈合。
血管靶向PDT(VTP)的目的在于在受治疗组织血管内产生ROS,这可通过在给予致敏物(sensitizer)后随即通过组织照射,或通过使用不会从循环中溢出的致敏物来完成。我们的实验室已开发出几代细菌叶绿素致敏物(本文称为“Bchl衍生物”或“BchlD”)。合成的化合物(Rosenbach-Belkin等,1996;US 5,650,292),在能够使光深入穿透受治疗者组织的NIR(750-765nm)中具有非常强的吸收,确保了以高能流率(20mW-1W)在圆柱状纤维周围达4cm的治疗直径。在照射时,通过循环BchlD在肿瘤中和附近产生局部高浓度的ROS(OH-和O2 -根),导致在照射数分钟内血液凝固和肿瘤血管穿孔,随后肿瘤血管系统完全停滞。用一些Bchl衍生物,观察到内皮细胞直接中毒(Gross等,2003;Mazor等,2005)。究其原因还在研究之中,与周围正常组织的血管相比,肿瘤血管反应显著较快较激烈。治疗功效导致高的治愈率(60-90%动物存活)(Mazor等,2005)。重要的是,静脉内注射的致敏物很快从受治疗动物的循环中清除(T1/2约为数分钟至数小时,(Mazor等,2005)),避免了长期的皮肤毒性,并在需要时允许重复治疗。在患者的局限性前列腺癌的II期临床试验中,其中放射疗法失败(Weersink等,2005),基于BchlD的VTP总的来讲导致50-60%受治疗患者中肿瘤病灶成功根除以及组织重塑。在动物模型和人的二次治疗(II/III期临床试验)中,每疗程似乎产生类似或较高的治愈率(取决于药物和光剂量),在2-3疗程后,提高预期的总体成功率达约90%。重要的是,在使用较高剂量致敏物的动物研究中发现每个疗程都有显著较高的治愈率。
肿瘤的光动力疗法(PDT)包括给予光敏剂和局部光照射的组合,两者本身是无害组分,但是在分子氧存在下,它们能够产生可以消除细胞的细胞毒性活性氧类(ROS)。作为二元治疗方式,当与常用的化学疗法或放射疗法相比时,PDT允许较高的特异性,并且具有较高选择性而又并非毁灭性的潜力(Dougherty等,1998)。
近年来本发明的发明人(Zilberstein等,2001;Schreiber等,2002;Gross等,1997;Zilberstein等,1997;Rosenbach-Belkin等,1996;Gross等,2003a;Koudinova等,2003;Preise等,2003;Gross等,2003b)及在以下专利公布号中报导了在PDT中应用新的细菌叶绿素(Bchl)衍生物作为致敏物:US 5,726,169、US 5,650,292、US5,955,585、US 6,147,195、US 6,740,637、US 6,333,319、US6,569,846、US 7,045,117、DE 41 21 876、EP 1 24 6826、WO2004/045492、WO 2005/120573。Bchl衍生物的光谱、光物理学和光化学使之成为最佳集光分子,具有优于现用于PDT的其它致敏物的明显优势。这些Bchl衍生物大部分是极性的,并且在循环中停留非常短的时间,几乎不外渗到其它组织中(Brandis,2003;Mazor等,2005)。因此,这些化合物是血管靶向PDT(VTP)良好的候选分子(candidate),这有赖于在血管内短时(5-10分钟)与光短暂相遇,并且有赖于肿瘤血管对PDT产生的细胞毒性ROS的较高敏感性。
由我们的研究小组进行的最新研究表明,最初的光敏作用是血管内快速发展成缺血性闭塞且在照射期间停滞。这个过程还促进光化学诱导的脂质过氧化作用(LPO)和主要局限于肿瘤血管系统的早期内皮细胞死亡(Koudinova等,2003)。由于自由基链反应的光独立性发展连同进行性低氧,LPO和细胞死亡扩展到血管区室以外以覆盖整个肿瘤间质组织,直到在PDT后24小时左右达到肿瘤完全坏死。因此,PDT的最初作用是阻断供血并诱导低氧,其以第二种方式引发以肿瘤根除告终的一系列分子和病理生理学事件。重要的是,该方法取决于正常血管和肿瘤血管对所产生的ROS的反应之间的差异。
相同申请人的国际申请号WO 2008/023378(通过引用其整体结合到本文中,如同全部公开于本文中一样),公开了卟啉、叶绿素和细菌叶绿素(Bchl)衍生物与含有RGD基序的肽或与RGD肽模拟物的新缀合物及其在体内光动力疗法以及诊断肿瘤和不同血管疾病(例如年龄相关性黄斑变性)的方法中的用途。具体地讲,Bchl衍生物c(RGDfK)-Pd-MLT(化合物24)在原发瘤的异种移植物中蓄积高达4-8μM,并长时间保持在肿瘤部位,能够实现信号蓄积和良好的信噪比。
荧光标记法适于体内、新鲜组织和体外检测。c(RGDfK)-Pd-MLT在近红外(NIR)处具有能够检出的固有荧光。c(RGDfK)-2H-MLT具有高达3倍的发光能力,因此可以成为甚至更好的靶向成像的候选分子。在此项研究中,我们披露了这些分子开启了在人乳腺腺癌模型中精确检测肿瘤边缘和坏死的可能性。检测肿瘤边缘和坏死是迄今为止在肿瘤治疗中存在的两个最具有挑战性的问题。此外,两者是在治疗后肿瘤再生长的可靠预测物。因此,预期在未来临床应用时,前述RGD衍生物适用于在手术台上检测肿瘤和坏死。
发明概述
根据本发明的研究现已发现,与非坏死肿瘤区相比,上述WO2008/023378中披露的RGD-(细菌)叶绿素缀合物在坏死肿瘤区的归巢和蓄积长久得多。
因此,本发明涉及所述RGD-细菌叶绿素和RGD-叶绿素缀合物用于微创肿瘤靶向成像、肿瘤靶向光动力疗法和/或坏死肿瘤的在线预后(on-line prognosis)的用途及其方法。
附图简述
图1表示用于用红色荧光蛋白(RFP)转染肿瘤细胞系的质粒。1A:pDsRed2-N1质粒(Clontech,Palo Alto,CA),1B:pDsRed-Monomer-Hyg-C1(Clontech,Palo Alto,CA),1C:修饰pDsRed-Monomer-Hyg-C1。
图2A-2B表示在暴露3秒钟后用荧光显微镜(Nikon,放大倍数X10)检出的图1的转染细胞的荧光克隆。2A:MDA-MB-231RFP克隆1(G418抗性)。2B:MDA-MB-231RFP克隆3(潮霉素抗性)。
图3A-3B表示切离的肿瘤图像和MDA-MB-231-RFP肿瘤横截面的组织学分析(H&E染色)。3A:大肿瘤(约1cm3)。3B:小肿瘤(约0.5cm3)(ND-坏死区,VD-有活力区)。
图4A-4B表示下述化合物13在MDA-MB-231-RFP常位肿癌(orthotopic tumor)(肿瘤大小约1cm3)中的蓄积。给小鼠注射化合物13。药物注射后从15分钟到24小时拍摄图像。4A(上图):红色荧光成像。4B(下图):NIR荧光成像。
图5A-5B表示化合物13在MDA-MB-231-RFP常位肿瘤(肿瘤大小约1cm3)中的蓄积。给小鼠注射化合物13。药物注射后从第1天到第7天拍摄图像。5A(上图):红色荧光成像。5B(下图):NIR荧光成像。
图6A-6B表示化合物13在MDA-MB-231-RFP常位肿瘤(肿瘤大小约0.5cm3)中的蓄积。给小鼠注射化合物13。药物注射后从20分钟到24小时拍摄图像。6A(上图):红色荧光成像。6B(下图):NIR荧光成像。
图7A-7B表示化合物13在MDA-MB-231-RFP常位肿瘤(肿瘤大小约0.5cm3)中的蓄积。给小鼠注射化合物13。药物注射后从第1天到第3天拍摄图像。7A(上图):红色荧光成像。7B(下图):NIR荧光成像。
图8是表示与旁侧(collateral side)相比肿瘤中化合物13荧光信号测量值的曲线图。在9只动物的肿瘤和旁侧测量了荧光信号,单位为光子/秒/cm2。化合物13注射后从15分钟到216小时采集结果。提供了每个时间点上全部动物的平均结果以及肿瘤和旁侧之间的荧光比。
图9A-9B表示化合物24在MDA-MB-231-RFP常位肿瘤(肿瘤大小约1cm3)中的蓄积。给小鼠注射化合物24。药物注射后从1小时到24小时拍摄图像。9A(上图):红色荧光成像。9B(下图):NIR荧光成像。
图10A-10B表示化合物24在MDA-MB-231-RFP常位肿瘤(肿瘤大小约1cm3)中的蓄积。给小鼠注射化合物24,药物注射后从第1天到第7天拍摄图像。10A(上图):红色荧光成像。10B(下图):NIR荧光成像。
图11A-11B表示化合物24在MDA-MB-231-RFP常位肿瘤(肿瘤大小约0.5cm3)中的蓄积。给小鼠注射化合物24,药物注射后从20分钟到24小时拍摄图像。11A(上图):红色荧光成像。11B(下图):NIR荧光成像。
图12A-12B表示化合物24在MDA-MB-231-RFP常位肿瘤(肿瘤大小约0.5cm3)中的蓄积。给小鼠注射化合物24,药物注射后从第1天到第2天拍摄图像。12A(上图):红色荧光成像。12B(下图):NIR荧光成像。
图13A-13B表示化合物13在MLS-mBanana常位肿瘤(肿瘤大小约1cm3)中的蓄积。给小鼠注射化合物13。药物注射后从1小时至24小时拍摄图像。13A(上图):红色荧光成像。13B(下图):NIR荧光成像。
图14A-15B表示化合物13在MLS-mBanana常位肿瘤(肿瘤大小约1cm3)中的蓄积。给小鼠注射化合物13。药物注射后从第1天到第4天拍摄图像。14A(上图):红色荧光成像。14B(下图):NIR荧光成像。
图15A-15B表示化合物13在MLS-mBanana常位肿瘤(肿瘤大小约0.5cm3)中的蓄积。给小鼠注射化合物13。药物注射后从10分钟到24小时拍摄图像。15A(上图):红色荧光成像。15B(下图):NIR荧光成像。
图16A-16B表示化合物13在MLS-mBanana常位肿瘤(肿瘤大小约0.5cm3)中的蓄积。给小鼠注射化合物13。药物注射后从第1天到第4天拍摄图像。16A(上图):红色荧光成像。16B(下图):NIR荧光成像。
图17A-17B表示化合物13在人卵巢MLS-mBanana原发坏死肿瘤和无坏死肿瘤中蓄积的比较。化合物13注射后2天拍摄图像。拍摄化合物13的体内整体NIR荧光的图像。17A:无坏死肿瘤(约0.5cm3)。17B:坏死肿瘤(约1cm3)。
图18A-18B表示化合物25在MDA-MB-231-RFP常位肿瘤(肿瘤大小约1cm3)中的蓄积。给小鼠注射化合物25,药物注射后从5分钟到24小时拍摄图像。18A(上图):红色荧光成像。18B(下图):NIR荧光成像。
图19A-19B表示化合物25在MDA-MB-231-RFP常位肿瘤(肿瘤大小约1cm3)中的蓄积。给小鼠注射化合物25,药物注射后从第1天到第3天拍摄图像。19A(上图):红色荧光成像。19B(下图):NIR荧光成像。
图20A-20B表示化合物25在MDA-MB-231-RFP常位无坏死肿瘤(肿瘤大小约0.5cm3)中的蓄积。给小鼠注射化合物25,药物注射后从10分钟到24小时拍摄图像。20A(上图):红色荧光成像。20B(下图):NIR荧光成像。
图21A-21B表示化合物25在MDA-MB-231-RFP常位无坏死肿瘤(肿瘤大小约0.5cm3)中的蓄积。给小鼠注射化合物25,药物注射后从第1天到第3天拍摄图像。21A(上图):红色荧光成像。21B(下图):NIR荧光成像。
图22A-22D表示当在给予游离c(RGDfK)后1小时给予时,化合物13在常位人乳腺MDA-MB-231-RFP原发瘤(肿瘤大小约0.5cm3)中蓄积的竞争测定法。在给予化合物13后24小时拍摄图像。22A、22B-红色荧光成像;22C、22D-NIR荧光成像。22A、22C:在给予游离c(RGDfK)后1小时给予化合物13(竞争)。22B、22D:对照,只给予化合物13。
图23A-23F表示药物注射后10分钟测定的在MDA-MB-231-RFP常位肿瘤的活力区对比坏死区中化合物13的蓄积。23A、23B和23C(上图),分别是整个动物的体内整体照片、红色荧光图像和NIR荧光图像;23D、23E和23F(下图),分别是切离肿瘤(将肿瘤切成两半)(ND-坏死区,VD-有活力区)的照片、红色荧光图像和NIR荧光图像。
图24A-24F表示药物注射后1小时测定的在MDA-MB-231-RFP常位肿瘤的活力区对比坏死区中化合物13的蓄积。图24A、24B、24C(上图)和24D、24E、24F(下图)分别如上述图23A、23B、23C和23D、23E、23F中所述。
图25A-25F表示药物注射后4小时测定的在MDA-MB-231-RFP常位肿瘤的活力区对比坏死区中化合物13的蓄积。图25A、25B、25C(上图)和25D、25E、25F(下图)分别如上述图23A、23B、23C和23D、23E、23F中所述。
图26A-26F表示药物注射后24小时测定的在MDA-MB-231-RFP常位肿瘤的活力区对比坏死区中药物化合物13的蓄积。图26A、26B、26C(上图)和26D、26E、26F(下图)分别如上述图23A、23B、23C和23D、23E、23F中所述。
图27A-27F表示药物注射后3天测定的在MDA-MB-231-RFP常位肿瘤的活力区对比坏死区中化合物13的蓄积。图27A、27B、27C(上图)和27D、27E、27F(下图)分别如上述图23A、23B、23C和23D、23E、23F中所述。
图28A-28F表示药物注射后5天测定的在MDA-MB-231-RFP常位肿瘤的活力区比对坏死区中化合物13的蓄积。图28A、28B、28C(上图)和28D、28E、28F(下图)分别如上述图23A、23B、23C和23D、23E、23F中所述。
图29A-29F表示药物注射后7天测定的在MDA-MB-231-RFP常位肿瘤的活力区对比坏死区中化合物13的蓄积。图29A、29B、29C(上图)和29D、29E、29F(下图))分别如上述图23A、23B、23C和23D、23E、23F中所述。
图30A-30F表示药物注射后9天测定的在MDA-MB-231-RFP常位肿瘤的活力区对比坏死区中化合物24的蓄积。图30A、30B、30C(上图)和30D、30E、30F(下图)分别如上述图23A、23B、23C和23D、23E、23F中所述。
图31A-31F表示注射后7天测定的在中心性坏死的MLS-mBanana肿瘤中化合物13的蓄积。图31A、32B、33C(上图)和34D、35E、36F(下图))分别如上述图23A、23B、23C和23D、23E、23F中所述。
图32A-32F表示药物注射后7天测定的在MLS-mBanana肿瘤的非中心性坏死中化合物13的蓄积。图30A、30B、30C(上图)和30D、30E、30F(下图)分别如上述图23A、23B、23C和23D、23E、23F中所述。
图33A-33D表示切离肿瘤图像和MDA-MB-231-RFP肿瘤横截面的组织学分析(H&E染色)。33A:肿瘤横切片表面照片(肉眼可见外观)。33B:横切片表面的组织学图像(显微镜可见外观)。33C:33B中被圈区域的中等放大倍数图(medium power view)。33D:坏死和有活力组织间界面区域的高放大倍数图(high power view)。
图34A-34B表示人MDA-MB-231-RFP对PDT的局部反应的代表性实例。在具有MDA-MB-231-RFP异种移植物(约0.5cm3)的小鼠背部经静脉内注射7.5mg/kg化合物13,8小时后透过皮肤照射。34A:从第0天(治疗前)和治疗后1、4、7、12和90天拍摄的照片。34B:体内整体红色荧光成像。
实施本发明的方式
本发明的主要目的是提供将致敏物特别靶向坏死肿瘤的坏死区的光敏剂缀合物。肿瘤靶向光动力疗法(PDT)具有一些优于用常规化学疗法靶向肿瘤的优势。第一,在常规被靶向药物蓄积期间,它常常是有活性的,除非它是前药,而被靶向光敏剂直到局部照射后才有活性。第二,常规被靶向药物可结合并同样作用于归巢地址存在的不需要的靶标,而靶向光敏剂只在相关照射部位被激活。
因此,从大的方面来看,本发明涉及含RGD的肽或RGD肽模拟物与叶绿素或细菌叶绿素光敏剂的缀合物在微创肿瘤靶向成像、肿瘤靶向PDT和/或坏死肿瘤的在线预后中的用途。
术语“含RGD的肽”或“RGD肽”在本文中可互换使用,是指含有Arg-Gly-Asp(RGD)序列的肽,亦称为RGD基序。本文使用的术语“RGD肽模拟物”是指模拟肽并具有RGD基序的化合物,特别是非肽化合物。
已知RGD肽与细胞的整联蛋白受体相互作用,具有启动细胞信号转导过程的潜力并影响多种疾病。出于这些原因,整联蛋白RGD结合部位被视为颇有吸引力的药物靶标。
含RGD的肽可为线性肽或环肽,由4-100个、优选5-50个、5-30个、5-20个或者更优选5-10个氨基酸残基组成。在一个优选的实施方案中,RGD肽由4、5、6、7、9或25个、最优选由5个氨基酸残基组成。
本文所使用的术语“氨基酸”包括20种天然存在的氨基酸以及非天然氨基酸。
适用于本发明的天然氨基酸的实例包括但不限于Ala、Arg、Asp、Asn、Cys、His、Gln、Glu、Gly、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr和Val。
非天然氨基酸的实例包括但不限于4-氨基丁酸(Abu)、2-氨基己二酸、二氨基丙(Dap)酸、羟赖氨酸、高丝氨酸、高缬氨酸、高亮氨酸、正亮氨酸(Nle)、正缬氨酸(Nva)、鸟氨酸(Om)、TIC、萘丙氨酸(Nal)、Phe的环-甲基化衍生物、Phe的卤化衍生物或邻甲基-Tyr。
本文中的术语“氨基酸”还包括修饰氨基酸例如发生在体内翻译后的修饰,例如羟脯氨酸、磷酸丝氨酸和磷酸苏氨酸;D-修饰;氨基端基团或Lys的游离氨基的酰化或烷基化、优选甲基化;羧端基团或者Asp或Glu的游离羧基的酯化或酰胺化;以及Ser或Tyr的羟基的酯化或醚化。
术语“氨基酸”包括D-氨基酸和L-氨基酸两者。因此,用于本发明缀合物的肽可以是全D-氨基酸(甘氨酸除外)、全L-氨基酸或L,D-氨基酸。为了防止肽被生物体中的酶切割,氨基酸的D-修饰和肽键的N-烷基化是最有利的。在本发明中,D-氨基酸用小写字母表示,如本文使用的SEQ ID NO:1的肽环RGDfK中的D-苯丙氨酸‘f’残基。
本发明还包括环肽。肽可以通过多种方法环化,例如形成二硫化物、硫化物,尤其在N端和C端或氨基酸侧链的羧基和氨基官能团之间形成内酰胺。环化可通过本领域已知的任何方法获得,例如通过酰胺键形成,例如通过在链中的各个位置(-CO-NH或-NH-CO键)上掺入Glu、Asp、Lys、Om、二氨基丁(Dab)酸、二氨基丙(Dap)酸。主链-主链间的环化还可以通过掺入式H-N((CH2)n-COOH)-C(R)H-COOH或H-N((CH2)n-NH2)-C(R)H-COOH的修饰氨基酸来获得,其中n=1-4,且其中R是氨基酸的任何天然或非天然的侧链。
环化还可通过掺入两个Cys残基经形成S-S键而获得。另外的侧链-侧链间环化可通过形成式-(CH2)n-S-CH2-CO-的相互作用键而获得,其中n=1或2,这是可行的,例如通过加入Cys或高Cys以及其游离SH基团与例如溴乙酰化Lys、Om、Dab或Dap反应。
在一些实施方案中,RGD肽可以是US 6,576,239、EP 0927045和WO 2008/023378中所披露的肽,通过引用其整体结合到本文中,如同全部公开于本文一样。
在一个优选的实施方案中,按照本发明使用的肽是SEQ ID NO:1的环戊肽RGDfK,其中‘f’表示D-Phe残基。
在另一个优选的实施方案中,肽是本文用来提高RGD基序在结合整联蛋白受体中的重要性的SEQ ID NO:2的环戊肽RADfK。本发明又一个有用的环肽是SEQ ID NO:9的九肽CDCRGDCGC,本文称为‘RGD-4C’,其含有4个半胱氨酸残基,在分子中形成两个二硫键。
RGD基序的天冬氨酸残基非常易被化学降解,导致丧失生物活性,而这种降解可通过二硫键经环化来防止。在稳定性提高的同时,与线性肽相比,环肽在抑制玻连蛋白对细胞的附着方面具有较高能力。合成肽中RGD序列两侧残基的数目和性质对该序列如何被各整联蛋白受体识别具有重大影响。芳族残基可能在使整联蛋白的结合部位有利于接触方面特别重要。靶向αvβ3的环状RGD肽被不依赖于液相胞吞途径的整联蛋白内化,所述途径不改变细胞表面功能整联蛋白受体的数目。此外,环状RGD肽在溶酶体中于15分钟后达到饱和的过程中保持或降解,只有少部分可离开溶酶体并达到细胞胞质。
在其它优选的实施方案中,RGD肽选自以下环肽:(i)四肽环RGDK(SEQ ID NO:3)、五肽环RGDf-n(Me)K(SEQ ID NO:4),其中f表示D-Phe,f和K之间的肽键是甲基化的;以及五肽环RGDyK(SEQID NO:5),其中y表示D-Tyr。
在另一个实施方案中,含RGD的肽是线性的,可选自六肽GRGDSP(SEQ ID NO:6)、七肽GRGDSPK(SEQ ID NO:7)和25聚物(GRGDSP)4K(SEQ ID NO:8)。在一个更优选的实施方案中,线性肽是GRGDSP。
在本发明的一个实施方案中,RGD肽通过其外围的官能团(例如COOH)与光敏剂叶绿素或细菌叶绿素大环直接连接,与RGD肽的氨基末端基团或游离氨基形成酰胺CO-NH2基团。
在另一个实施方案中,RGD肽通过间隔臂/桥连基与光敏剂大环连接,间隔臂/桥连基例如但不限于被末端官能团例如OH、COOH、SO3H、COSH或NH2取代的C1-C25亚烃基(hydrocarbylene)、优选C1-C10亚烷基或亚苯基,因此形成醚、酯、酰胺、硫代酰胺或磺酰胺基团。
在一些实施方案中,光敏剂与RGd肽模拟物缀合。
在一个优选的实施方案中,RGD肽模拟物是包含被11个原子的链间隔开来的胍和羧基端基的非肽化合物,至少5个所述原子为碳原子,且所述链包含一个或多个O、S或N原子并且可被以下基团任选取代:氧代、硫代、卤素、氨基、C1-C6烷基、羟基或羧基,或者所述链的一个或多个原子可形成3-6元碳环或杂环。该类型的化合物参见相同申请人的WO 93/09795和WO 2008/023378,通过引用其整体结合到本文中,如同全部公开于本文中一样。
在一个优选的实施方案中,上述RGD肽模拟物在链中包含N原子并且被氧代基团取代。在一个更优选的实施方案中,RGD肽模拟物具有下式:
H2N-C(=NH)NH-(CH2)5-CO-NH-CH(CH2)-(CH2)2-COOH或-NH-RGD-CO-NH-(CH2)2-哌嗪子基-(CH2)2-NH-。
用于本发明的光敏剂是叶绿素或细菌叶绿素衍生物,其可以是天然的叶绿素或细菌叶绿素或者叶绿素或细菌叶绿素的合成的非天然衍生物,包括这样化合物,其中在大环中和/或在外围经过修饰,和/或中心Mg原子可不存在或被适用于诊断目的和/或PDT目的的其它金属原子置换。
在一个优选的实施方案中,本发明涉及其中光敏剂为式I、式II或式III的叶绿素或细菌叶绿素的缀合物及其药学上可接受的盐和旋光异构体:
其中
M表示2H或选自以下的原子:Mg、Pd、Pt、Co、Ni、Sn、Cu、Zn、Mn、In、Eu、Fe、Au、Al、Gd、Dy、Er、Yb、Lu、Ga、Y、Rh、Ru、Si、Ge、Cr、Mo、P、Re、Tl和Tc及其同位素和放射性同位素;
X为O或N-R7;
R1、R’2和R6各自独立地为Y-R8、-NR9R’9或-N+R9R’9R”9A-;
或者式II中的R1和R6与它们所连接的碳原子一起形成包含RGD肽或RGD肽模拟物的环;
Y为O或S;
R2为H、OH或COOR9;
R3为H、OH、C1-C12烷基或C1-C12烷氧基;
R4为-CH=CR9R’9、-CH=CR9Hal、-CH=CH-CH2-NR9R’9、-CH=CH-CH2-N+R9R’9R”9A-、-CHO、-CH=NR9、-CH=N+R9R’9A-、-CH2-OR9、-CH2-SR9、-CH2-Hal、-CH2-R9、-CH2-NR9R’9、-CH2-N+R9R’9R”9A-、-CH2-CH2R9、-CH2-CH2Hal、-CH2-CH2OR9、-CH2-CH2SR9、-CH2-CH2-NR9R’9、-CH2-CH2-N+R9R’9R”9A-、-COCH3、C(CH3)=CR9R’9、-C(CH3)=CR9Hal、-C(CH3)=NR9、-CH(CH3)=N+R9R’9A-、-CH(CH3)-Hal、-CH(CH3)-OR9、-CH(CH3)-SR9、-CH(CH3)-NR9R’9、-CH(CH3)-N+R9R’9R’9A-或-C≡CR9;
R’4为甲基或甲酰基;
R5为=O、=S、=N-R9、=N+R9R’9A-、=CR9R’9或=CR9-Hal;
R7、R8、R9、R’9和R”9各自独立地为:
(a)H;
(b)C1-C25烃基;
(c)C1-C25烃基、优选C1-C25烷基、烯基或炔基、更优选C1-C10或C1-C6烷基,其被一个或多个选自以下的官能团取代:卤素、硝基、氧代、OR、SR、桥氧基(epoxy)、桥硫基(epithio)、-CONRR’、-COR、COOR、-OSO3R、-SO3R、-SO2R、-NHSO2R、-SO2NRR’-NRR’、=N-OR、=N-NRR’、-C(=NR)-NRR’、-NR-NRR’、-(R)N-C(=NR)-NRR’、O←NR-、>C=NR、-(CH2)n-NR-COR’、-(CH2)n-CO-NRR’、-O-(CH2)n-OR、-O-(CH2)n-O-(CH2)n-R、-PRR’、-OPO3RR’、-PO2HR和-PO3RR’,其中R和R’各自独立地为H、烃基或杂环基,R”为烃基或杂环基;
(d)C1-C25烃基、优选C1-C25烷基、更优选C1-C10或C1-C6烷基,其被一个或多个选自以下的官能团取代:带正电荷的基团、带负电荷的基团、在生理条件下转化成带正电荷的基团的碱性基团和在生理条件下转化成带负电荷的基团的酸性基团;
(e)C1-C25烃基、优选C1-C25烷基、更优选C1-C10或C1-C6烷基,其含有一个或多个杂原子和/或一个或多个碳环或杂环部分;
(f)C1-C25烃基、优选C1-C25烷基、更优选C1-C10或C1-C6烷基,其含有一个或多个杂原子和/或一个或多个碳环或杂环部分且被上述(c)和(d)中定义的一个或多个官能团取代;
(g)C1-C25烃基、优选C1-C25烷基、更优选C1-C10或C1-C6烷基,其被氨基酸、肽、优选RGD肽、蛋白质、单糖、寡糖、多糖的残基或多齿配体及其与金属的螯合物取代;或者
(h)氨基酸、肽(优选RGD肽或RGD肽模拟物)、蛋白质、单糖、寡糖、多糖的残基或多齿配体及其与金属的螯合物;
R7还可为-NRR’,其中R和R’各自为H或C1-C25烃基、优选C1-C25烷基、更优选C1-C10或C1-C6烷基,其被带负电荷的基团优选SO3 -任选取代;
当R1、R’2和R6各自独立地为Y-R8时,R8还可为H+或阳离子R+ 10;
R+ 10为金属、铵基团(ammonium group)或有机阳离子;
A-为生理上可接受的阴离子;
m为0或1;
在7-8位上的虚线表示任选的双键;
且式I、式II或式III的所述叶绿素或细菌叶绿素衍生物含有至少一个含RGD的肽残基。
在一个实施方案中,在7-8位上的虚线表示双键,光敏剂是式I、式II或式III的叶绿素。式I化合物分别为叶绿素a和b,其中M为Mg,在173位上的R1为植基氧基,在132位上的R2为COOCH3,在132位上的R3为H原子,R5为O,在3位上的R4为乙烯基,在7-8位上的虚线表示双键,或者在7位上的R’4为甲基且在8位上的R4为乙基,或者在7位上的R’4为甲酰基且在8位上的R4为乙基,叶绿素a和b的衍生物可具有不同的金属原子和/或不同的取代基R1、R2、R3、R4、R’4和/或R5。
在另一个实施方案中,7-8位是氢化的,光敏剂为式I、式II或式III的细菌叶绿素。式I化合物为细菌叶绿素a,其中M为Mg,173位上的R1为植基氧基或牻牛儿基牻牛儿基氧基,在132位上的R2为COOCH3,在132位上的R3为H原子,R5为O,R4在3位上为乙酰基且在8位上为乙基,在7-8位上的虚线不存在,且细菌叶绿素a的衍生物可具有不同的金属原子和/或不同的取代基R1、R2、R3、R4和/或R5。
本文所使用的术语“烃基”是指任何直链或支链、饱和或不饱和、无环或环状(包括芳族)烃基原子团,其具有1-25个碳原子、优选1-20个、更优选1-6个、最优选2-3个碳原子。烃基可为烷基,优选1-4个碳原子,例如甲基、乙基、丙基、丁基;或烯基、炔基、环烷基、芳基(例如苯基)或芳烷基(例如苄基),或者在式I、式II或式III化合物的17位,它是衍生自天然Chl和Bchl化合物的原子团,例如牻牛儿基牻牛儿基(2,6-二甲基-2,6-辛二烯基)或植基(2,6,10,14-四甲基-十六碳-14-烯-16-基)。
本文所使用的术语“碳环部分”是指在环中只含碳原子的单环或多环化合物。碳环部分可以是饱和的(即环烷基),或不饱和的(即环烯基),或芳族的(即芳基)。
本文使用的术语“烷氧基”是指基团(C1-C25)烷基-O-,其中C1-C25烷基如上定义。烷氧基的实例为甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基、-OC15H31、-OC16H33、-OC17H35、-OC18H37等。本文使用的术语“芳氧基”是指基团(C6-C18)芳基-O-,其中C6-C18芳基如上定义,例如苯氧基和萘氧基。
本文使用的术语“杂芳基”或“杂环部分”或“杂芳族基”或“杂环基”是指衍生自含有1-3个选自O、S和N的杂原子的单环或多环杂芳族环的原子团。具体实例为吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、唑基、噻唑基、吡啶基、喹啉基、嘧啶基、1,3,4-三嗪基、1,2,3-三嗪基、1,3,5-三嗪基、苯并呋喃基、异苯并呋喃基、吲哚基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、苯并咪唑基、苯并噻唑基和苯并唑基。
任何“碳环”、“芳基”或“杂芳基”可被以下一个或多个原子团取代:例如卤素、C6-C14芳基、C1-C25烷基、硝基、OR、SR、-COR、-COOR、-SO3R、-SO2R、-NHSO2R、-NRR’、-(CH2)n-NR-COR’和-(CH2)n-CO-NRR’。要理解的是,当多环杂芳族环被取代时,取代基可在任何碳环和/或杂环中。
本文使用的术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘。
在本发明的一个实施方案中,缀合物中的光敏剂是式I、式II或式III的叶绿素或细菌叶绿素,其含有至少一个带负电荷的基团和/或至少一个在生理pH下转化成带负电荷的基团的酸性基团。
本文中定义的“带负电荷的基团”是衍生自酸的阴离子,包括羧酸根(COO-)、硫代羧酸根(COS-)、磺酸根(SO3 -)和磷酸根(PO3 2-),“在生理条件下转化成带负电荷的基团的酸性基团”包括羧酸基(-COOH)、硫代羧酸基(-COSH)、磺酸基(-SO3H)和磷(-PO3H2)酸基。具有在生理条件下转化成一个或多个带负电荷的基团的BChl衍生物参见相同申请人的WO 2004/045492,通过引用其整体结合到本文中,如同全部公开于本文一样。
在一个更优选的实施方案中,本发明缀合物中的光敏剂是式II的叶绿素或细菌叶绿素,其中R6为-NR9R’9,R9为H,R’9为被SO3H或其碱性盐取代的C1-C10烷基。缀合物最优选包含式II的细菌叶绿素衍生物,其中R6为-NH-(CH2)2-SO3K或-NH-(CH2)3-SO3K。
在本发明的另一个实施方案中,缀合物中的光敏剂是式I、式II或式III的叶绿素或细菌叶绿素,其含有至少一个带正电荷的基团和/或至少一个在生理pH下转化为带正电荷的基团的碱性基团。
本文中定义的“带正电荷的基团”是指衍生自含N基团或不含N的基团的阳离子。由于肿瘤内皮的特征在于阴离子部位的数目增多,因此带正电荷的基团或在生理条件下转化成带正电荷的基团的碱性基团可提高本发明缀合物的靶向效率。
本文使用的“衍生自含N基团的阳离子”是指例如但不限于铵-N+(RR’R”)、肼-(R)N-N+(R’R”)、铵氧基(ammoniumoxy)O←N+(RR’)-、亚胺(iminium)>C=N+(RR’)、脒(amidinium)-C(=RN)-N+R’R”或胍-(R)N-C(=NR)-N+R’R”基团,其中R、R’和R”各自独立地为H、烃基、优选如本文中定义的C1-C6烷基、苯基或苄基、或杂环基,或者在铵基团中,R、R’和R”中的一个可为OH,或者铵基团中R、R’和R”中的两个,或者肼铵氧基、亚胺脒或胍基团中的R和R’,与它们所连接的N原子一起形成3-7元饱和环,其任选含有一个或多个选自O、S或N的杂原子且任选在另外的N原子上被进一步取代,或者所述阳离子衍生自杂芳族环中含有一个或多个N原子的化合物。
在一个更优选的实施方案中,本发明的缀合物含有式-N+(RR’R”)的铵基团,其中R、R’和R”各自独立地为H或任选取代的如本文中定义的烃基或杂环基,或者其中之一可为OH。-N+(RR’R”)铵基团可为仲铵(secondary ammonium),其中原子团R、R’或R”中的任两个为H;叔铵,其中R、R’或R”中仅一个为H;或季铵,其中R、R’或R”中的每一个为任选取代的如本文中定义的烃基或杂环基。当R、R’或R”中的一个为OH时,该基团为羟基铵基团。优选铵基团为季铵基团,其中R、R’和R”各自为C1-C6烷基,例如甲基、乙基、丙基、丁基、己基。铵基团在分子中可为端基,或者它可存在于分子的烷基链中。
在肼-(R)N-N+(R’R”)、脒-C(=NR)-N+R’R”和胍-(R)N-C(=NR)-N+R’R”基团中,R、R’和R”各自可独立地为H或烃基或杂环基,或者R’和R”与它们所连接的N原子一起形成如本文定义的3-7元饱和环。这类基团的实例包括其中R为H,R’和R”各自为C1-C6烷基(例如甲基、乙基、丙基、丁基、己基)的基团。
在另一个优选的实施方案中,叶绿素或细菌叶绿素衍生物含有式-N+(RR’R”)的环状铵基团,其中R、R’和R”中的两个与N原子一起形成下文中定义的3-7元饱和环。
本文中定义的由R、R’和R”中的两个与它们所连接的N原子一起形成的“3-7元饱和环”可以是只含N的环,例如氮杂环丙烷、吡咯烷、哌啶、哌嗪或氮杂或者它可含有选自O和S的其它杂原子,例如吗啉或硫代吗啉。哌嗪环中另外的N原子可被烷基(例如C1-C6烷基)任选取代,该烷基可被卤素、OH或氨基取代。衍生自所述饱和环的基团包括丫丙啶吡咯烷哌啶哌嗪吗啉硫代吗啉和氮杂
如本文定义的“衍生自含N杂芳族原子团的阳离子”是指衍生自N-杂芳族化合物的阳离子,其可为任选含有O、S或额外N原子的单环或多环化合物。阳离子衍生自其中的环应含有至少一个N原子并且为芳族,但是其它环(如有的话),可以是部分饱和的。N-杂芳族阳离子的实例包括吡唑咪唑唑噻唑吡啶嘧啶喹啉异喹啉1,2,4-三嗪1,3,5-三嗪和嘌呤
带正电荷的基团还可以是基团但不含氮,例如但不限于[-P+(RR’R”)]、[-As+(RR’R”)]、氧[-O+(RR’)]、锍[-S+(RR’)]、硒[-Se+(RR’)]、碲[-Te+(RR’)]、锑[-Sb+(RR’R”)]或铋[-Bi+(RR’R”)]基团,其中R、R’和R”各自独立地为H、烃基或杂环基,优选C1-C6烷基(例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基),或芳基,优选苯基。
式-P+(RR’R”)基团的实例包括其中R、R’和R”各自为甲基、乙基、丙基、丁基或苯基,或者R为甲基、乙基、丙基、丁基或己基以及R’和R”均为苯基的基团。式-As+(RR’R”)钟基团的实例包括其中R、R’和R”各自为甲基、乙基、丙基、丁基或苯基的基团。式-S+(RR’)锍基团的实例包括其中R和R’各自为甲基、乙基、丙基、丁基、苯基、苄基、苯乙基、或取代烃基的基团。
本文中定义的“在生理条件下转化为带正电荷的基团的碱性基团”从理论上讲至少是在生理条件下可产生如本文定义的带正电荷的基团的任何碱性基团。应当注意的是,本文使用的生理条件不仅仅是指血清,而且还是指机体内不同的组织和细胞区室。
这类含N碱性基团的实例包括而不限于可产生铵基团的任何氨基、可产生亚胺基团的任何亚胺基团、可产生肼基团的任何肼基团、可产生铵氧基基团的任何氨基氧基(aminoxy)、可产生脒基团的任何脒基团、可以产生胍基团的任何胍基团,所有基团如本文中定义。其它实例包括膦基和巯基。
因此,本发明的缀合物可含有至少一个在生理条件下转变为带正电荷的基团的碱性基团,例如-NRR’、-C(=NR)-NR’R”、-NR-NR’R”、-(R)N-C(=NR)-NR’R”、O←NR-或>C=NR,其中R、R’和R”中的每一个独立地为H、烃基,优选C1-C25烷基,更优选C1-C10或C1-C6烷基,或杂环基,或者R、R’和R”中的两个与N原子一起形成3-7元饱和环,其任选含有O、S或N原子且任选在另外的N原子上被进一步取代,或者碱性基团为含N杂芳族原子团。
3-7元饱和环可以是氮杂环丙烷、吡咯烷、哌啶、吗啉、硫代吗啉、氮杂或哌嗪,其在额外N原子上被C1-C6烷基任选取代,该烷基被卤素、羟基或氨基任选取代,且含N杂芳族原子团可以是吡唑基、咪唑基、唑基、噻唑基、吡啶基、喹啉基、异喹啉基、嘧啶基、1,2,4-三嗪基、1,3,5-三嗪基或嘌呤基。
具有带正电荷的基团或在生理条件下向其转变的基团的BChl衍生物参见相同申请人的WO 2005/120573,通过引用其整体结合到本文中,如同全部公开于本文一样。
在一个实施方案中,光敏剂为式II的叶绿素或细菌叶绿素,且R6为碱性基团-NR9R’9,其中R9为H,R’9为被碱性基团-NRR’或-NH-(CH2)2-6-NRR’取代的C1-C6烷基,其中R和R’各自独立地为H、被NH2任选取代的C1-C6烷基或者R和R’与N原子一起形成5-6元饱和环,其任选含有O或N原子且在另外的N原子上任选被-(CH2)2-6-NH2进一步取代。
在另一个实施方案中,光敏剂为式II的细菌叶绿素,且R6为-NH-(CH2)3-NH-(CH2)3-NH2、-NH-(CH2)2-1-吗啉代或-NH-(CH2)3-哌嗪子基-(CH2)3-NH2。
在一个进一步的实施方案中,R1和R6一起形成包含RGD肽或RGD肽模拟物的环。
在另一个实施方案中,光敏剂为式III的叶绿素或细菌叶绿素,且X为-NR7,R7为-NRR’,R为H,R’为被SO3-或其碱性盐取代的C1-C6烷基,光敏剂优选为细菌叶绿素,且X为-NR7,R7为-NH-(CH2)3-SO3K。
在另一个实施方案中,R7、R8、R9或R’9各自为被一个或多个-OH基团取代的C1-C6烷基。例如,光敏剂为式II的叶绿素或细菌叶绿素且R6为-NR9R’9,R9为H,R’9为HOCH2-CH(OH)-CH2-。
在另一个实施方案中,光敏剂为式II的叶素或细菌叶绿素,且R6为-NR9R’9,R9为H,R’9为被多齿配体或其与金属的螯合物取代C1-C6烷基。多齿配体的实例包括而不限于EDTA(乙二胺四乙酸)、DTPA(二亚乙基三胺五乙酸)或大环配体DOTA。在一个优选的实施方案中,多齿配体为DTPA,R6为-NH-(CH2)3-NH-DTPA,金属为Gd。
阳离子R8 +可以是衍生自碱金属或碱土金属的一价或二价阳离子,例如K+、Na+、Li+、NH4 +、Ca2+,更优选K+;或R8 +为衍生自胺或含N基团的有机阳离子。
如本文中的定义,R7、R8、R9和R’9中定义的C1-C25烃基可被一个或多个选自以下的官能团任选取代:卤素、硝基、氧代、OR、SR、桥氧基、桥硫基、氮杂环丙烷、-CONRR’、-COR、COOR、-OSO3R、-SO3R、-SO2R、-NHSO2R、-SO2NRR’-NRR’、=N-OR、=N-NRR’、-C(=NR)-NRR’、-NR-NRR’、-(R)N-C(=NR)-NRR’、O←NR-、>C=NR、-(CH2)n-NR-COR’、-(CH2)n-CO-NRR’、-O-(CH2)n-OR、-O-(CH2)n-O-(CH2)n-R、-PRR’、-OPO3RR’、-PO2HR、-PO3RR’;一个或多个带负电荷的基团,例如COO-、COS-、-OSO3 -、-SO3 -、-OPO3R-、-PO2H-、-PO3 2-和-PO3R-;和/或一个或多个带正电荷的基团,例如-P+(RR’R”)、-As+(RR’R”)、-O+(RR’)、-S+(RR’)、-Se+(RR’)、-Te+(RR’)、-Sb+(RR’R”)、-Bi+(RR’R”)、O←N+(RR’)-、>C=N+(RR’)、-N+(RR’R”)、-(R)N-N+(RR’R”)、-(R)N-C(=HN)-N+RR’R”、-C(=NH)-N+(RR’R”)、或N-杂芳族阳离子,例如吡唑咪唑 唑噻唑吡啶喹啉嘧啶1,2,4-三嗪1,3,5-三嗪和嘌呤其中n为1-6的整数,R、R’和R”各自独立地为H、烃基或杂环基,或者R、R’和R”中的两个与它们所连接的N原子一起形成3-7元饱和环,其任选含有一个或多个选自O、S或N的杂原子且任选在另外的N原子上被进一步取代。R7、R8、R9和R’9中定义的C1-C25烃基还可被单糖、寡糖或多糖残基(例如糖基)、或氨基酸残基、肽或蛋白质、优选RGD-肽取代。另外,R8、R9和R’9各自可独立地为单糖、寡糖或多糖的残基(例如糖基),或氨基酸残基、肽或蛋白质,或多齿配体例如DTPA、DOTA、EDTA等及其与金属的螯合物。
在基团OR和SR中,当R为H时,该基团分别表示羟基和巯基,当R不是H时,则代表醚和硫化物。在基团-PRR’中,当R和R’为H时,表示膦基。在基团-COR中,当R为H时,表示醛的甲酰基-CHO,而当R不是H时,它便是酮的残基,例如烷基羰基和芳基羰基。在基团COOR中,当R不是H时,这便是羧酸酯基团,例如烷氧基羰基和芳氧基羰基。同样地,在基团-OSO3R、-SO3R、-SO2R、-OPO3RR’、-PO2HR和-PO3RR’中,当R和R’不是H时,表示酯。
在本发明的一个优选的实施方案申,光敏剂是未金属化的,即M为2H。在其它优选的实施方案中,光敏剂为如上文中定义的金属化的,M更优选为Pd、Cu或Mn,最优选为Pd或Cu。
在本发明的一些优选实施方案中,光敏剂为式I、式II或式III、更优选式II的Bchl,M为2H、Cu、Mn或Pd。在其它实施方案中,光敏剂为式I、式II或式III、更优选式II的Chl,M为2H、Cu或Mn。
在一些优选的实施方案中,缀合物包含式II的光敏剂Bchl,其中M为Pd、Mn、Cu或2H;m为0;R1为NH-P,其中P为与NH-直接连接或通过间隔物连接的含RGD的肽或RGD肽模拟物的残基;R’2为甲氧基;R4在3位上为乙酰基且在8位上为乙基;R’4为甲基;R6为-NH-(CH2)n-SO3 -Me+,其中n为2或3,Me+为Na+或K+。
在本发明的一个最优选的实施方案中,缀合物包含式II的Bchl,其中M为2H,R1为NH-P,其中P为SEQ ID NO:1的含RGD的肽c(RGDfK)的残基,R’2为甲氧基,R4在3位上为乙酰基且在8位上为乙基,R’4为甲基,R6为-NH-(CH2)2-SO3K,本文称为化合物13或c(RGDfK)-2H-MLT。
在另一个最优选的实施方案中,M为Pd,R1、R’2、R4、R’4、R6如上定义,P为SEQ ID NO:1的c(RGDfK),本文称为化合物24或c(RGDfK)-Pd-MLT。
在一个更优选的实施方案中,M为Mn,R1、R’2、R4、R’4、R6如上定义,P为c(RGDfK),本文称为化合物14或c(RGDfK)-Mn-MLT,或者M为Cu,该缀合物在本文中称为化合物15或c(RGDfK)-Cu-MLT。
在又一个更优选的实施方案中,式II中Bchl的M为2H,R’2、R4、R’4和R6如上定义,R1为NH-P,其中P为SEQ ID NO:2的C(RADfK),本文称为化合物45或c(RADfK)-2H-MLT,或者P为SEOID NO:5的c(RGDyK)。
在其它更优选的实施方案中,M为2H,R1、R’2、R4、R’4和R6如上定义,P为选自以下的线性肽:SEQ ID NO:6的GRGDSP或SEQID NO:7的GRGDSPK或SEQ ID NO:8的(GRGDSP)4,最优选P为GRGDSP,该缀合物在本文中称为化合物26或线性GRGDSP-2H-MLT。
在还更优选的实施方案中,在式II的Bchl中,M为Pd,m为0,R1为NH-P,其中P为c(RGDfK),R’2为甲氧基,R4在3位上为乙酰基且在8位上为乙基,R’4为甲基,和R6为-NH-(CH2)3-SO3K,或者P为SEQ ID NO:4的环肽RGDf-n(Me)K,和R6为-NH-(CH2)2-SO3K。
另外更优选的实施方案涉及与SEQ ID NO:7的线性肽GRGDSPK或SEQ ID NO:8的(GRGDSP)4的缀合物,其中式II的Bchl的中心金属原子为Pd;m、R’2、R4、R’4如上定义,R1为HH-P,且R6为-NH-(CH2)2-SO3K。
在甚至还更优选的实施方案中,缀合物包含式II的Bchl,其中M为Pd;m、R’2、R4、R’4如上定义,R1为NH-CH[(-(CH2)2-CO-NH-P]2,其中P为SEQ ID NO:5的含RGD的肽c(RGDyK)的残基,且R6为-NH-(CH2)2-SO3K,本文称为化合物36或c(RGDyK)2-2H-MLT。
在本发明另外两个更优选的实施方案中,在式II的Bchl中,M为Pd或2H;m为0;R1为NH-P,其中P为c(RGDfK)(SEQ ID NO:1)的残基,R’2为甲氧基;R4在3位上为乙酰基且在8位上为乙基;R’4为甲基,R6为-NH-CH2-CH(OH)-CH2OH。
在再一个更优选的实施方案中,缀合物包含如上所述的RGD肽,优选与式II的Bchl缀合的c(RGDfK),其中M为2H;m、R1、R’2、R4、R’4如上定义,且R6为NH-(CH2)3-NH-(CH2)3-NH2、-NH-(CH2)2-吗啉代或-NH-(CH2)3-哌嗪子基-(CH2)3-NH2。
另外更优选的实施方案涉及包含式II的Bchl的缀合物或其与Gd的螯合物,其中M为2H;m为0;R1为NH-c(RGDfK),R’2为甲氧基,R4在3位上为乙酰基且在8位上为乙基,R’4为甲基;且R6为-NH-(CH2)3-NH-CO-DTPA。
本发明还涉及优选的缀合物,其包含式II的光敏剂Bchl,其中M为Pd或2H;m为0;R1为NH-P,其中P为与NH-直接连接或通过间隔物连接的RGD肽模拟物的残基;R’2为甲氧基;R4在3位上为乙酰基且在8位上为乙基;R’4为甲基;且R6为-NH-CH2-CH(OH)-CH2-OH或-NH-(CH2)2-SO3K。
在本发明的另一个实施方案中,缀合物包含式III的Bchl,其中M为Pd;R1为NH-P,其中P为与NH-直接连接或通过间隔物连接的含RGD的肽或RGD肽模拟物的残基;R4在3位上为乙酰基且在8位上为乙基;R’4为甲基;X为N-R7,且R7为-NH-(CH2)3-SO3 -Me+,其中Me+为Na+或K+。
在另一个实施方案中,缀合物包含式I的Bchl,其中M为Mn;R1为NH-P,其中P为与NH-直接连接或通过间隔物连接的含RGD的肽或RGD肽模拟物的残基;R2为OH;R3为COOCH3,R4在3位上为乙酰基且在8位上为乙基;R’4为甲基;且R5为O。在更优选的实施方案中,M为2H或Mn,P为SEQ ID NO:1的含RGD的肽c(RGDfK)或SEQ ID NO:3的c(RGDK)的残基。
在另一个实施方案中,缀合物包含式II的Chl,其中M选自Mn、Cu或2H;R1为NH-P,其中P为与NH-直接连接或通过间隔物连接的含RGD的肽或RGD肽模拟物的残基;R4在3位上为乙烯基且在8位上为乙基;R’4为甲基;且R6为-NH-(CH2)2-SO3 -Me+,其中Me+为Na+或K+。
在更优选的实施方案中,在式II的Chl中,M为2H或Cu或Mn,R4、R’4和R6如上定义,光敏剂与SEQ ID NO:1的五环的含RGD的肽c(RGDfK)缀合。
在另一个实施方案中,R1和R6一起形成包含-NH-RGD-CO-NH-(CH2)2-NH-或-NH-RGD-CO-NH-(CH2)2-哌嗪子基-(CH2)2-NH-的环。在一个实施方案中,缀合物包含式II的Bchl,其中m为0;R’2为甲氧基;R4在3位上为乙酰基且在8位上为乙基;R’4为甲基;且R1和R6两个一起形成包含-NH-RGD-CO-NH-(CH2)2-NH-的环,且M为Pd或M为2H,或者R1和R6一起形成包含-NH-RGD-CO-NH-(CH2)2-哌嗪子基-(CH2)2-NH-的环,且M为Pd。
工业实用性
对于在本发明中的应用,将缀合物配制在包含药学上可接受的载体的药物组合物中。
在一个实施方案中,药物组合物用于光动力疗法(PDT),更准确地讲是用于肿瘤靶向PDT。在另一个实施方案中,药物组合物用于诊断目的,用于坏死肿瘤区的可视化。
可按照本发明,通过使中心金属原子适合特定的技术,来应用若干诊断技术。
对于通过动态荧光成像进行的坏死肿瘤区诊断,光敏剂中的M为2H或选自Pd和Zn的金属。
对于通过放射性诊断技术进行的坏死肿瘤区诊断,光敏剂中的M为选自以下的放射性同位素:64Cu、67Cu、99mTc、67Ga、201Tl、195Pt、60Co、111In和51Cr。在一个实施方案中,放射性诊断技术是正电子发射断层摄影术(PET),且M为64Cu或67Cu。在另一个实施方案中,放射性诊断技术是单光子发射断层摄影术(SPET),且M为选自以下的放射性同位素:99mTc、67Ga、195Pt、111In、51Cr和60Co。
对于通过分子核磁共振成像(MRI)进行的坏死肿瘤区诊断,M为选自以下的顺磁金属:Mn3+、Cu2+、Fe3+、Eu3+、Gd3+和Dy3+,或者光敏剂被多齿配体的金属螯合物取代,所述金属如前文中定义。
在一个实施方案中,本发明涉及用于通过动态荧光成像使坏死肿瘤区成像的方法,所述方法包括:
(a)给予疑似患有带有坏死区的肿瘤的受治疗者本发明的缀合物,其中M为2H或选自Pd和Zn的金属;
(b)在给予缀合物后至少24-48小时期间以1-8小时的时间间隔照射受治疗者并测定可疑区域的荧光,其中在24-48小时或更长时间后具有荧光的区域表示存在坏死肿瘤区。
在一个优选的实施方案中,用于上述方法的缀合物是化合物13或化合物24,肿瘤是乳腺肿瘤或卵巢肿瘤,在药物(缀合物)注射后3-8天,优选5-8天可观察到坏死区。
在另一个实施方案中,本发明提供用于通过放射性诊断技术诊断坏死肿瘤区的方法,所述方法包括:
(a)给予疑似患有肿瘤的受治疗者本发明的缀合物,其中M为选自以下的放射性同位素:64Cu、67Cu、99mTc、67Ga、201Tl、195Pt、60Co、111In或51Cr。
(b)在给予缀合物后至少24-48小时期间以1-8小时的时间间隔用成像扫描仪对受治疗者进行扫描,测定可疑区域的放射水平,其中在24-48小时或更长时间具有放射性的区域表示存在坏死肿瘤区。
本发明还提供用于诊断坏死肿瘤区的分子核磁共振成像(MRI)方法,所述方法包括以下步骤:
(a)给予疑似患有肿瘤的受治疗者如本文定义的缀合物,其中M为选自以下的顺磁金属:Mn3+、Cu2+、Fe3+、Eu3+、Gd3+或Dy3+;和
(b)通过在所述给药之前(零时)在患者体内产生目标靶区的至少一幅MR图像以及在所述给药之后至少24-48小时、优选96小时在第二个或更多个时间点上产生一幅或多幅MR图像,而对患者进行核磁共振成像;和
(c)对数据进行加工和分析以诊断所述坏死肿瘤区的存在与否。
本发明还提供在手术前用于对肿瘤边缘作图的方法,所述方法包括给予有需要的受治疗者本文中定义的缀合物,在给予缀合物后头2-24小时,对受治疗者进行照射,并使肿瘤、优选乳腺肿瘤成像而进行扫描,因此在手术准备中给肿瘤边缘作图。
本发明还提供用于局部乳腺癌、尤其原位管癌(DCIS)的微创治疗、检测和预后策略,所述策略包括(i)给予受治疗者本文中定义的缀合物,优选RGD-Bchl缀合物,从而RGD-Bchl缀合物特异性归巢并蓄积在坏死肿瘤区,(ii)通过以高精度用于肿瘤检测和肿瘤边缘界定的上述任何方法对用RGD-BChl衍生物治疗的受治疗者进行肿瘤靶向成像,以及通过MRI、荧光和PET SCAN方法预后;和(iii)允许保乳和重塑的局部坏死区的肿瘤靶向光动力疗法(PDT)。
用于本发明的RGD肽-光敏剂缀合物特别适用于坏死肿瘤的肿瘤靶向PDT,并可用于治疗癌性疾病。
因此,在一个实施方案中,本发明的缀合物可用于肿瘤领域以通过癌前状态和若干癌症类型的PDT用于治疗,所述癌症类型例如但不限于黑素瘤、前列腺、脑、结肠、卵巢、乳腺、结肠直肠、头颈部、由乳腺癌引起的胸壁肿瘤、皮肤、肺、食道和膀胱癌和肿瘤。所述化合物可用于治疗原发移性坏死肿瘤以及转移性坏死肿瘤。
在一个优选的实施方案中,该方法用于治疗局部乳腺癌,尤其原位管癌。
本发明提供用于坏死肿瘤的肿瘤光动力疗法的方法,所述方法包括:(a)给予有需要的个体本发明的RGD肽-光敏剂缀合物;和(b)在注射缀合物后至少24小时,优选2、3、4、5、6、7或8天,通过本文所述的任何方法,在确定存在坏死区后照射肿瘤局部及其坏死区。
在一个方面,本发明涉及检测肿瘤坏死的新的方法,所述方法以荧光Chl/Bchl-RGD缀合物在坏死肿瘤区的选择性摄取和长期蓄积为基础。Chl/Bchl致敏物与归巢于内皮和肿瘤细胞的特异性受体的配体缀合。然后,一旦Chl/Bchl以足够高的浓度蓄积和并从周围组织清除后,便通过照射肿瘤体积和紧接的附近,开始以光动力学的方式产生ROS。
化合物24的Bchl组分在近红外线(NIR)处具有可以检测固有荧光。使用化合物24的最新实验显示,在原发瘤的异种移植物中蓄积高达4-8uM。化合物24长时期保留在肿瘤部位,使得信号蓄积和良好的信噪比成为可能。该分子的这些能力可能取决于Bchl和血清白蛋白之间的相互作用,使该分子成为定向成像和最终定向疗法的良好的候选分子。另一种Bchl衍生物化合物13,具有高达3倍的发光能力,因此可以是甚至更好的靶向成像的候选分子。这些分子开启了在人乳腺腺癌模型中精确检测肿瘤边缘和坏死的可能性。检测肿瘤边缘和坏死是迄今为止在肿瘤治疗中存在的两个最具有挑战性的问题。此外,两者是在治疗后肿瘤再生长的可靠预测物。因此,预期在未来的临床应用时,前述RGD衍生物适用于在手术台上检测肿瘤和坏死。
本发明引进了实现与RGD肽缀合的Chl/Bchl衍生物在有活力肿瘤组织中短暂停留后在坏死肿瘤区长期蓄积的新的方法。蓄积的化合物可用于有活力(在给药后短期内)或坏死(在较长时间内)肿瘤区的体内成像,以及用于通过PDT的肿瘤疗法、通过改变Bchl中心金属或通过与小的治疗剂进一步缀合的化疗或同位素放射疗法。以化合物13和化合物24为例对新的方法进行了说明。已把c(RGDfK)鉴定为在血管生成中上调的αvβ3和αvβ5整联蛋白的高度特异性配体。化合物25部分提供在NIR时具有强自身荧光的缀合物,使之适用于在组织摄取后的荧光成像。
实验数据表明,RGD部分是化合物13和化合物24在小的(无坏死)肿瘤和大的(坏死)肿瘤两者中的特异性蓄积中必不可少的,因为对于未缀合的化合物25,没有观察到短期或长期的蓄积。此外,经治疗小鼠的化合物25的总体清除率比缀合化合物的显著较快。通过本文描述的竞争实验对RGD待定机制作出补充,其中在化合物13后不久或同时注射过量的游离c(RGDfK),防止了稍后被肿瘤组织摄取。
在坏死和无坏死肿瘤之间观察到在化合物13蓄积中的巨大差异。因此,还没有发展成坏死的小的MDA-MB-231-RFP肿瘤(约0.5cm3)显示-在药物注射后1-6.5小时内化合物13在肿瘤中快速蓄积,随后是快速(<24小时)清除。在稍后的时间内,当大部分剩余药物限于清除器官(主要是肾但也可以是肝)中时,在肿瘤中仅可检出非常少量的药物。与其它器官相比,自药物注射后48小时起,已发展成坏死的大的MDA-MB-231-RFP(>1cm3)肿瘤显示出较慢的达到峰值肿瘤浓度比的蓄积。自药物注射后24小时起,肿瘤质量中的平均药物浓度仅轻微降低。这些结果对于坏死肿瘤区是普遍的,但因肿瘤类型而有所不同。此外,对于化合物24,在坏死和无坏死肿瘤中的蓄积方式之间观察到类似差异,不同之处在于在肝中观察到较慢的清除率,使化合物13成为用于临床应用的更好的候选分子。
或许,在乳腺癌模型和卵巢癌肿瘤模型中,本文所观察到的化合物13在坏死区和无坏死区的蓄积速率之间的差异,与两个肿瘤类型的微环境的不同性质有关。在乳腺肿瘤观察到肿瘤体积和微血管密度之间的相反关系:随着肿瘤体积增加,每立方厘米的微血管密度显著降低。因此,整联蛋白的浓度变得按比例地降低,因此整联蛋白依赖性药物蓄积的速率应按比例地降低。
所提供的数据最突出的特征是药物荧光从活力部位明显转移至坏死肿瘤体积,其由给予化合物13后不同时间坏死MDA-MB-231-RFP肿瘤的切离肿瘤荧光成像得到证实。根据药物蓄积对RGD部分的依赖性,多步骤蓄积是可能的,其中第一步包括化合物25部分(2H-MLT)从血清白蛋白分子中解离,被微血管系统、有活力的肿瘤细胞及或许巨噬细胞或嗜中性粒细胞中的αvβ3整联蛋白有效摄取。据信该步骤后接着是化合物13被动转运或胞转迁移进入坏死区,并且在此长时间缺乏从中的引流作用(drainage)。在无坏死肿瘤中,药物通过由整个肿瘤构成的有活力区域快速蓄积,但是因为不存在坏死,所以药物快速清除。当注射化合物24时,切离肿瘤荧光结果与化合物13获得的结果类似。
在其它肿瘤模型(即MLS-mBanana、人卵巢癌)中,观察到坏死和无坏死肿瘤的蓄积率的类似差异。然而,在速率和蓄积方式上存在一些变化,可能反映了不同的肿瘤类型。化合物13在无坏死MLS-mBanana肿瘤中快速蓄积,然后慢慢清除掉。在坏死肿瘤中药物在第一小时内在有活力边缘达到最大浓度,然后转移到坏死区,在给药后24小时在此达到最大浓度。与MDA-MB-231-RFP相比,在MLS-mBanana中以高浓度快速蓄积,反映了在MLS-mBanana细胞中整联蛋白受体的较高浓度。
用化合物13治疗的动物的大肿瘤和小肿瘤的组织学分析似乎支持所提出的蓄积方式,并提供了一些有关潜在机制的线索。在头几小时内有活力肿瘤区和化合物13荧光有非常好的重叠,在给药后24小时和更长时间,13的荧光和坏死区间有非常好的重叠。
有许多药物和造影剂在与淋巴引流差和静脉回流慢有关的肿瘤中蓄积的报道。之前有研究提出这种现象,称为高通透性和保持(EPR)作用,作为以非特异性方式靶向肿瘤组织的方法。有可能的是,EPR说明了化合物13或化合物24在坏死区和无坏死肿瘤中的蓄积方式。最近有研究提出,血清白蛋白(SA)-药物络合物通过肿瘤血管系统渗透到间质肿瘤组织中以说明这类蓄积(Tanaka,Shiramoto等,2004)。文献中有若干实例显示,分子与SA缀合导致将分子递送至肿瘤甚至递送至坏死区。事实上,本发明的发明人之前指出带负电荷的水溶性Bchl衍生物对SA具有高亲和力。因此,在给药后化合物13或化合物24可能通过Bchl部分与SA缔合,在血液中循环,并通过如上阐释的EPR作用与SA一起渗入(extravagate)到肿瘤组织中。如果那样的话,预期化合物25作为突出的化学实体在坏死区蓄积,然而,由于化合物25在所研究的肿瘤中的保留短暂,可排除通过EPR作用蓄积的可能性。
或者,当Bchl-RGD衍生物遇到αVβ3或αVβ5整联蛋白时,它可从SA载体上脱落,并且以比SA分子更高的亲和力通过RGD组成部分与整联蛋白结合。在这种最初的连接后,化合物13或化合物24可通过胞吞扩散至上皮细胞,或跨越上皮细胞进行胞转。药物直接迁移到胞外基质(ECM)中也是可能的。在这些情况下,根据浓度梯度进行的药物移动将趋向于坏死区,在此化合物13或化合物24开始达到其最低浓度。
曾提出的c(RGDfK)-2H/Pd-MLT与整联蛋白的相互作用可能意味着在坏死肿瘤区的蓄积是嗜中性粒细胞/巨噬细胞依赖性的。相当一段时间就已知活化的嗜中性粒细胞和巨噬细胞表达整联蛋白。组织学结果表明,嗜中性粒细胞停留在坏死区(虽然大部分在边缘中)。由文献得知,在侵袭性乳腺癌中存在高的巨噬细胞浸润(Leek,Landers等,1999)。对于NACA(Necrosis Avid Contrast Agents,坏死亲和性造影剂),发现从坏死病灶中的最终清除在给药后要花几天,对应于天然愈合过程,期间坏死组织日渐被浸润,被炎性细胞(主要是嗜中性粒细胞、单核细胞和/或巨噬细胞)吞噬,并且被肉芽组织代替。因此,认为坏死中保留的NACA将通过吞噬作用与坏死材料一道被清除掉。因此,在NACA-坏死结合后第二次巨噬细胞摄取也可解释其局部富集。因此有人提出,有可能是坏死区的吸引及在其中的保留依赖于聚集在坏死区的嗜中性粒细胞和/或巨噬细胞的吸引。
荧光Chl/Bchl在坏死区的可能的靶向和长期保留,使得它们能够被早期检出,并且有助于预测肿瘤预后和治疗方式。此外,它开启了递送引发低氧的药物的途径。
下面通过下列非限制性实施例对本发明进行说明。
实施例
材料与方法
(i)化合物-按照相同申请人的WO 2008/023378中所述,制备Bchl衍生物、RGD-肽及其缀合物。本文这些缀合物和化合物用与WO2008/023378相同的阿拉伯数字表示(化合物45除外)。
化合物13[c(RGDfK)-2H-MLT]:31-氧代-15-甲氧基羰基甲基-红螺菌菌绿素131-(2-磺乙基)酰胺-173-c(RGDfK)酰胺钾盐。
化合物14[c(RGDfK)-Mn-MLT]:锰(III)31-氧代-15-甲氧基羰基甲基-红螺菌菌绿素131-(2-磺乙基)酰胺-173-(环RGDfK)酰胺钾盐。
化合物15[c(RGDfK)-Cu-MLT]:铜(II)31-氧代-15-甲氧基羰基甲基-红螺菌菌绿素131-(2-磺乙基)酰胺-173-(环RGDfK)酰胺钾盐。
化合物24[c(RGDfK)-Pd-MLT]:钯31-氧代-15-甲氧基羰基-甲基-红螺菌菌绿素131-(2-磺乙基)酰胺-173-c(RGDfK)酰胺钾盐。
化合物25[2H-MLT]:31-氧代-15-甲氧基羰基甲基-螺红菌-菌绿素131-(2-磺乙基)酰胺钾盐。
化合物26[线性GRGDSP-2H-MLT]:31-氧代-15-甲氧基羰基甲基-红螺菌菌绿素131-(2-磺乙基)酰胺-173-(GRGDSP)酰胺钾盐。
化合物36[c(RGDyK) 2 -2H-MLT]:31-氧代-15-甲氧基羰基甲基-红螺菌菌绿素131-(2-磺乙基)酰胺-173-双(环RGDfK)酰胺钾盐。
化合物45[c(RADfK)-2H-MLT]:31-氧代-15-甲氧基羰基甲基-红螺菌菌绿素131-(2-磺乙基)酰胺-173-(环RADfK)酰胺钾盐。
(ii)细胞系--从美国典型培养物保藏中心(ATCC,Manassas,VA)获得MDA-MB-231人乳腺癌细胞。MLS-pRSETB-mBanana转染的抗嘌罗霉素的人卵巢癌细胞由Michal Neeman教授(Department ofBiological Regulation,Weizmann Institute of Science,Rehovot,Israel)惠赠。
(iii)用红色荧光蛋白(RFP)转染的MDA-MB-231--两种质粒用于转染:携带新霉素抗性基因的pDsRed2-N1(Clontech,Palo Alto,CA)(图1A),及携带潮霉素抗性基因的修饰的pDsRed-Monomer-Hyg-C1(Clontech,Palo Alto,CA),其中图1B中所示质粒的DsRed-Monomer基因被pDsRed2(得自pDsRed2-N1质粒,图1C)替换。对于转染,按照生产商的方案使用LipofectamineTM 2000(InvitrogenTM)。
(iv)组织培养--将MDA-MB-231-RFP细胞在补充了1mmol/L丙酮酸钠、10%胎牛血清(FCS)、250μg/ml潮霉素、0.06mg/ml青霉素和0.1mg/ml链霉素的RPMI 1640培养基中维持。细胞在潮湿环境(5%CO2,95%空气)中在37℃下生长成为单层细胞。将MLS-mBanana细胞在补充了1mmol/L丙酮酸钠、10%胎牛血清(FCS)、10μg/ml嘌罗霉素、0.06mg/ml青霉素和0.1mg/ml链霉素的MEM-α培养基中维持。细胞在潮湿环境(5%CO2,95%空气)中在37℃中生长成单层细胞。
(v)动物--遵照Weizmann Institute of Science(Rehovot,Israel)的机构动物管理与使用委员会的准则(1996),在动物设施中关养雌性CD1裸小鼠(7-8周龄,约25g),并且按任意进食饮水处理。
(vi)小鼠肿瘤模型--MDA-MB-231-RFP荧光人乳腺癌细胞和MLS-mBanana荧光人卵巢癌细胞(5×106的100μl盐水溶液)用胰蛋白酶消化,在分会合时收集,然后接种到雌性小鼠背部和乳房脂垫。使肿瘤生长成为两种所需大小--坏死肿瘤(约1cm3,3-4周内)和无坏死肿瘤(约0.5cm3,1-2周内)。
(vii)整体荧光成像--通过腹膜内注射30μl 85∶15氯胺酮∶赛拉嗪的混合物使小鼠麻醉。对于监测乳房脂垫中的药物蓄积,按15mg药物/kg体重将化合物13、化合物25或化合物24经静脉内注射到小鼠尾静脉。通过体内光学成像系统100(Xenogen Corp.,Alameda,CA)监测红色荧光蛋白(RFP)、pRSETB-mBanana和光敏剂荧光。用于肿瘤成像的主滤片组包括500-550nm下的激发滤片和575-650nm下的发射滤片;用于减去组织自体荧光的背景滤片组包括460-490nm下的激发滤片和575-650nm下的发射滤片。药物成像主滤片组包括665-695nm下的激发滤片和810-875nm下的发射滤片。图像在相同的曝光时间内获得,用线条彩色标尺说明以供进行定性比较。
(viii)坏死肿瘤中的荧光信号测量--从整体体内图像标出肿瘤边缘(目标区(ROI)),圈出边缘内的荧光信号用光子/秒表示。在旁侧用相同的ROI测量光子/秒。另外,对于背景测量,在3只未治疗小鼠中测量肿瘤和旁侧ROI,取平均值。将各个ROI的荧光测量值除以面积得到归一化萤光信号强度,单位为光子/秒/cm2。化合物13注射后从15分钟到216小时收集信号测量值。在每个时间点上,减去背景,计算得到平均,计算得到肿瘤边缘和旁侧荧光之间的比率。
(ix)化合物13和游离c(RGDfK)结合之间的竞争测定法--在注射化合物13(140nmol)之前1小时给小鼠注射过量(8.5μmol)的游离c(RGDfK)肽。对照组只注射化合物13(140nmol)。化合物13注射后24小时拍摄荧光照片。按(vii)中所述使用荧光成像主滤片组。
(x)切离肿瘤荧光成像--将15mg/kg化合物13经静脉内注射到小鼠尾静脉中。处死小鼠,切除肿瘤,切开两半,使用Xenogen系统在不同的时间间隔成像:对于MDA-MB-231-RFP为10分钟、1小时、4小时和24小时、3天、5天和7天,对于MLS-mBanana为7天。用于荧光成像的滤片组见(vii)。
(xi)组织学--在切除实验后,将肿瘤在3.7%甲醛中固定,并包埋在石蜡块中。切片在标准条件下用苏木精-伊红(H&E)染色。
(xii)PDT方案--将7.5mg/kg或15mg/kg化合物13注射到被麻醉的小鼠静脉内。照射肿瘤10分钟或30分钟。药物光照间隔为药物注射后8小时或24小时。使用755nm二极管激光器以100mW/cm2(CeramOptec,Germany)进行经皮照射。在避光对照组中,将药物注射到小鼠静脉内,将小鼠放入无光笼内24小时。在光照对照组中,小鼠不注射药物,但用100mW/cm2照射10分钟。在PDT后头两天内,按需给小鼠止痛(每天2.5mg/kg氟尼辛(Flunexin))。
实施例1.用荧光蛋白转染肿瘤细胞
为了建立以稳定方式表达RFP的细胞系,进行了转染步骤。可通过荧光显微镜和其它荧光成像方法在体内和体外(组织/细胞)对这类细胞系进行检测。选择已知产生自发性中心性坏死的人乳腺癌MDA-MB-231细胞系用于此目的。使用两种质粒(图1A、图1C),获得稳定克隆后,通过荧光显微镜检测(见图2A-2B)。由修饰的pDsRed-Monomer-Hyg-C1质粒所产生的克隆(图1C)发出较强荧光。选出用修饰的pDsRed-Monomer-Hyg-C1转染的克隆3(图2B)以进一步使用。
组成型表达RFP的转染细胞在体外和体内的荧光强度不随着时间的变化而降低。未转染的细胞无红色自体荧光。
实施例2.坏死肿瘤模型--组织病理学分析
为了证实MDA-MB-231-RFP细胞产生合适的坏死模型,使MDA-MB-231-RFP肿瘤发展成两种大小。按照材料与方法部分(xi)中所述进行了组织学和组织病理学分析。结果见图3A和图3B。约1cm3的大肿瘤具有非常显著的坏死区(图3A),而约0.5cm3的小肿瘤没有坏死区(图3B)。
实施例3.原发坏死MDA-MB-231-RFP异种移植物肿瘤中化合物13摄取的体内荧光成像
对化合物13在坏死MDA-MB-231-RFP肿瘤(≥1cm3)的蓄积方式进行了体内检查。图4A-4B和图5A-5B说明采用Xenogen系统,在CD-1雌性裸小鼠的乳房垫中,化合物13在常位人乳腺MDA-MB-231-RFP原发瘤中的荧光信号蓄积。使用上文材料与方法部分(vii)中所述的滤片组,同时记录了整体动物图像。每1-1.5小时以及在注射化合物13后24小时(图4A-4B),然后接下来7天中每24小时(图5A-5B)获取动态荧光图像达9小时。在注射化合物13后不久,可检测整个动物体的NIR荧光,这反映出循环中的高药物浓度。在注射后头9小时观察到从循环中快速清除,随之在肝中蓄积,在某种程度上在肿瘤中蓄积(图4B)。次日,化合物13保持在肿瘤中的蓄积,而从肝中完全清除,提供了在≥3天直到注射后的7天跟踪期间结束时的肿瘤成像(图5B),之后极缓慢地清除。整个实验中肿瘤大小和位置不变,正如红色体内整体图像中所见(图4A和图5A)。在肿瘤大小≥1cm3的9只研究动物中观察到类似结果。
实施例4.在原发无坏死MDA-MB-231-RFP异种移植物肿瘤中化合物13摄取的体内荧光成像
接着在≤0.5cm3的无坏死肿瘤中对相同参数进行了研究。图6A-6B和图7A-7B表示来自移植了MDA-MB-231-RFP的CD-1雌性裸小鼠中的化合物13和RFP的荧光信号。采用如上所述的系统并按与实施例3相同的时间间隔对药物蓄积方式成像,但只限于3天,因为到那时药物完全清除。这些无坏死肿瘤中的蓄积方式与坏死肿瘤中所观察到的显著不同。在注射后约2小时在肿瘤中及在肝中后不久(药物注射后3.5小时),化合物13NIR荧光达到峰值(图6B)。与得自坏死肿瘤的化合物13的分辨荧光不同,注射后2天,从无坏死肿瘤中几乎无法观测到荧光(图7A)。在16只动物的平均荧光测量值中,药物注射后1-6.5小时检出峰值肿瘤荧光。
实施例5.MDA-MB-231-RFP坏死肿瘤中化合物13摄取和清除的动力学
为了半定量地评价化合物13在坏死肿瘤中的蓄积方式,计算得到化合物13在9只小鼠的坏死肿瘤中的平均荧光信号,并相对于216小时在若干时间点上作图(图8)。自注射后12小时起向前,与旁侧的等同对照区相比,来自肿瘤的荧光信号变得特别地强。肿瘤和旁侧之间的荧光比及时增加并在距192小时约8小时之时达到稳定期。
实施例6.化合物24在常位MDA-MB-231-RFP原发坏死异种移植物肿瘤中的摄取
采用实施例3中所描述的相同实验设置,对金属化缀合物24(c(RGDfK)-Pd-MLT)在坏死原发MDA-MB-231-RFP肿瘤中的体内蓄积方式进行了研究。
结果见图9A-9B和图10A-10B,结果表明在注射化合物24后不久可测出荧光,反映了循环中药物浓度高。在注射后头8小时观察到循环快速清除,随之在肝中蓄积,以及在某种程度上在肿瘤中蓄积(图9B)。次日,化合物24保持在肿瘤中蓄积,然而,观察到未完全从肝中清除(图10B)。显然,从注射后约3天起,化合物24可用作肿瘤的选择性成像分子,其后具有极缓缓的清除率。然而,比起化合物13,它的特异性略微较小。肿瘤大小和位置在整个实验中没有改变,如红色体内整体图像所见一样(图9A和10A)。这些肿瘤大小≥1cm3的结果是在3只动物中观察的。
实施例7.化合物24在常位MDA-MB-231-RFP原发无坏死异种移植物肿瘤中的摄取
如上文实施例4中所述,采用与实施例6中规定相同的时间间隔,在移植在CD-1雌性裸小鼠中的MDA-MB-231-RFP无坏死肿瘤(约0.5cm3)中对来自化合物24和RFP的荧光信号进行了研究,但只限于2天,因为到那时药物完全从肿瘤中清除。结果见图11A-11B和1图12A-12B,结果表明对于化合物13,在无坏死肿瘤中的蓄积方式显著不同于在坏死肿瘤中所观察到的方式。在注射后约2.5小时的肿瘤中和在肝中后不久(药物注射后5.5小时,图11B),化合物24NIR荧光达到峰值。与来自坏死肿瘤的化合物24的分辨荧光不同,在注射后24小时从无坏死肿瘤中几乎无法观察到荧光(图12B)。在药物注射后1-4.5小时检测峰值肿瘤荧光(5只动物的平均荧光测量值)。
实施例8.化合物13在植入在小鼠乳房垫中的MLS-mBanana原发坏死肿瘤中的摄取
为了证实上述实验中所获得的概括性结果,在从MLS-mBanana人卵巢癌细胞系中产生的不同肿瘤类型中,对化合物13在坏死区中的蓄积进行了进一步研究。图13A-13B和图14A-14B所示结果表明,采用如材料与方法部分(vii)中所述的Xenogen系统,化合物13的荧光信号在经皮下(s.c.)移植到CD-1雌性裸小鼠乳房垫中的人卵巢MLS-mBanana原发瘤中蓄积。按与上文实施例3中所述相同的时间间隔监测蓄积方式,限于4天,因为药物到那时完全清除。在注射后不久,从肝和肿瘤中大多检测到化合物13NIR发出荧光。在注射后头8小时发生从循环中快速清除,随之在肝和肿瘤中蓄积(图13B)。2天后,化合物13保持在肿瘤中的蓄积而从肝中完全清除,提供无环境干扰的肿瘤选择性成像(图14B)。从MLS-mBanana坏死肿瘤中的清除比从MDA-MB-231-RFP坏死肿瘤中的清除显著较快,在第3天几乎完成。在整个实验中肿瘤大小和位置没有改变,正如红色体内整体图像中所观察的一样(图13A和14A)。这些结果是在肿瘤大小≥1cm3的3只动物中观察的。
实施例9.化合物13在植入小鼠乳房垫的MLS-mBanana原发无坏死肿瘤中的摄取
鉴于显示无长期药物蓄积的无坏死MDA-MB-231-RFP肿瘤的结果,对MLS-mBanana无坏死肿瘤中的长期蓄积进行了研究。图15A-15B和图16A-16B中所示结果表示化合物13在MLS-mBanana无坏死肿瘤中的荧光信号。按照材料与方法部分(vi)中所述,使用与实施例4中所述相同的时间间隔,限于4天,因为到那时药物几乎完全清除,对蓄积方式进行了监测。无坏死肿瘤中的蓄积方式与坏死肿瘤的有些相似。在注射后1小时的肿瘤中化合物13NIR荧光达到峰值(图15B)。从第1小时起对肝中的蓄积进行了检测。
当在同一线性荧光标尺上比较坏死和无坏死肿瘤时,坏死肿瘤中的化合物13浓度似乎比图17A-17B中所显示的无坏死的高得多。在
药物注射后1-3.5小时检测出峰值肿瘤荧光(4只动物的平均荧光测量值)。
实施例10.化合物13蓄积依赖于c(RGDfK)部分
为了确定化合物13的肿瘤摄取和所得到的NIR荧光信号的蓄积是否由RGD部分驱动,进行了两个实验。在第一个实验中,对在化合物13注射后不同时间的荧光信号的蓄积与注射游离2H-MLT(化合物25)的CD1裸小鼠的进行了比较,所述CD1裸小鼠在乳房垫中移植了MDA-MB-231-RFP的无坏死(≤0.5cm3)和坏死(约1cm3)肿瘤。第二个实验在化合物13和游离c(RGDfK)之间进行了竞争测定法。
10.1化合物25在MDA-MB-231-RFP原发坏死和无坏死肿瘤中的摄取化合物25初次注射后每1-1.5小时持续8.5-9小时和在24小时(图18A-18B和图20A-20B)及余下3天每24小时(图19A-19B和图21A-21B)获取坏死和无坏死肿瘤的动态荧光图像。在注射后5-10分钟,化合物25NIR荧光信号在肿瘤中达到最大浓度,如果观察到任何浓度的话。荧光信号值比化合物13的最大观察值(在长得多的时间间隔下)小约2个数量级。在注射后20分钟荧光信号值已降到无意义。同时,荧光信号大部分在肝和在心脏蓄积。在3只具有坏死肿瘤的动物(图18B)和2只无坏死肿瘤的动物(图20B)中观察到相同的作用方式。
10.2与MDA-MB-231-RFP原发无坏死肿瘤结合的化合物13和游离c(RGDfK)之间的竞争测定法
为了证实特异性结合,通过游离c(RGDfK)配体进行了试图阻断化合物13蓄积的实验。如实施例3中所述在有或没有之前注射c(RGDfK)时给予化合物13。结果见图22A-22D。当在给予游离c(RGDfK)后给予化合物13时,在24小时后在肿瘤中来检测到蓄积(图22C),而当只给予化合物13时,在对照组中,可在肿瘤中检测出蓄积(图22D),说明化合物13通过c(RGDfK)部分与肿瘤结合。
实施例11.化合物13在MDA-MB-231-RFP坏死肿瘤区中的特异性蓄积
坏死和无坏死乳腺肿瘤异种移植物植入乳房垫中显著不同的动态荧光图,激发了对肿瘤组织学与化合物13荧光信号蓄积之间的关系进行研究。因此,在注射化合物13后的规定时间切除肿瘤,并切成两半。在若干时间点(注射后10分钟、1小时、4小时和24小时、3天、5天和7天)使用材料与方法部分(vii)中所述的Xenogen系统拍摄图像。图23-29所示结果表示化合物13在不同时间点的荧光蓄积。对于每个时间点,测试了3只动物。药物注射后从10分钟到4小时,仅观察有活力区域的药物荧光(图23-25)。4小时后,存在向坏死区的某种扩散。自注射后3天起,蓄积方式回复(reverted):荧光完全转移到坏死区,其中有一些残余荧光扩散到周围有活力的细胞中(图27F)。5天和7天同样观察到这些结果(图28-29)。重要的是,在注射后24小时,从坏死区已清楚观察到特异性肿瘤荧光,具有较强的药物荧光,但与3天间隔的相比,肿瘤边界的界线不是十分清晰(图26F)。在这组实验中表明,随着时间推移,化合物13从有活力区向坏死区移动,并在该处长时间特异性蓄积。
实施例12.化合物24在MDA-MB-231-RFP坏死肿瘤区中的特异性蓄积
鉴于所观察到的化合物13的蓄积方式,对其它Bchl衍生物进行了测定。监测了化合物24的蓄积方式,并获得类似结果。药物注射后9天切离肿瘤的结果见图30A-30F。采用如上所述的Xenogen系统拍摄图像。如图30F中所见,药物注射后9天,药物清晰存在于坏死肿瘤区。在全部研究动物中观察到这些结果(N=3)。当在药物注射后3天和5天切离肿瘤时,也观察到类似结果(每个时间点N=3)。
实施例13.化合物13在MLS-mBanana坏死肿瘤区中的特异性蓄积
在MDA-MB-231-RFP肿瘤的坏死区中观察到的化合物13和化合物24的蓄积,为研究这种现象的普遍性及其在疗法和成像中的可能应用提供了动力。因此,使用不同类型的肿瘤-MLS-mBanana人卵巢癌。这里结果有些不同。在大多数情况下,该肿瘤类型的坏死方式不是中心性的,也就是说,存在广泛弥散性坏死,它不是特别局限于肿瘤中部或从肿瘤的一个部位产生。在这些情况下,蓄积并不如此长久。在观察到中心性坏死的几个病例中,蓄积方式与MDA-MB-231-RFP肿瘤中的相似。图31-32表示药物注射后7天所获得的结果。正如所见,当观察到中心性坏死时,药物清晰地存在于肿瘤的坏死区(图31F)当无中心性坏死时,则不存在(图32F)。
实施例14.坏死肿瘤的切离肿瘤图像和组织切片
切离MDA-MB-231-RFP坏死肿瘤,将肿瘤的组织切片染色(苏木精和伊红(H&E))。图33A-33D表示药物注射4小时后切离的有活力肿瘤和坏死肿瘤区的组织切片。这些观察结果可补充之前所获得的RFP和化合物13组织分布成像。如图33A中所见,大部分质量由不透明黄褐色坏死组织组成。从图33B中可见,可注意肉眼可见特征和显微镜可见特征之间的关系。坏死组织在中部是嗜酸性到高嗜酸性的,具有广泛的核溶解及较少的核固缩和核裂。有轻微多病灶嗜中性粒细胞浸润至坏死组织,大部分在坏死区边缘。有活力区域限于肿瘤外围。它们由无序增殖的瘤细胞组成,排列成密集的细胞层(图33D)。瘤细胞为圆形变为不规则,具有高核质比和不规则泡状核。对于有活力和坏死区两者,注射后4小时化合物13的荧光令人满意地与组织学结果一致(图25F)。对于所研究的坏死肿瘤,包括没有注射药物的对照肿瘤,都获得相似关联性。
实施例15.使用化合物13进行体内PDT研究
一般来讲,对于体内PDT研究,如上所述将将荧光MDA-MB-231-RFP乳腺癌细胞或MLS-mBanana卵巢癌细胞经皮下接种到雌性小鼠背部或乳房脂垫,使之生长至坏死(≥1cm3)或无坏死(约0.5cm3)大小,来产生小鼠肿瘤模型。以7.5-15mg/kg之间的不同浓度,经静脉内给麻醉小鼠注射药物。照射肿瘤10分钟或30分钟,药物光照间隔为药物注射后4-24小时之间。
为了获得最佳治疗条件,采用几个方案研究化合物13对CD-1裸小鼠中的MDA-MB-231-RFP肿瘤的作用,结果概括于表1。
如表1中所见,似乎对于坏死和无坏死肿瘤两者,7.5mg药物/kg体重和10分钟照射提供最佳光动力治疗结果。图34A-34B中所示结果表明完全治愈无坏死MDA-MB-231-RFP肿瘤。治疗后1天检查出水肿,接着是轻微坏死,然后在4天后为更大规模的坏死。到第7天,观察到肿瘤变平(flattering)。PDT后90天伤口愈合,动物被治愈。如之前RFP荧光中所述,使用Xenogen系统,同样对结果进行了研究。90天后,没有肿瘤荧光信号。
表1:治疗MDA-MB-231-RFP肿瘤的PDT方案的结果
实施例16.在裸小鼠/大鼠乳房中建立局限性原位管癌(DCIS)模型
在小鼠和大鼠中使用若干细胞系来建立DCIS模型。首先,在大鼠乳房垫中等成功植入(同位)与F-344大鼠同源的MADB106细胞。迄今为止已使用该模型筛选用不同RGD-Bchl衍生物进行PDT随后发展为抗肿瘤、长期免疫力的功效。使用有关大鼠乳房癌肿瘤的同一方案,同位植入两个人细胞系和另一个小鼠细胞系,并获得在肺和淋巴节中转移。头两个细胞系hT47D和HCC1395为按照ATCC规程和文献(Gazdar等,1998)生长的腺管癌细胞系(HCC1395是1期原发腺管癌,这近可能地接近DCIS),并作为同种异体移植物注射到裸动物的乳房垫。第三个(4T1)是将细胞注射到尾静脉后几周产生肺转移的小鼠乳房细胞系。这种细胞系的多样性使我们能够研究(Bchl衍生物/Bchl-RGD)-PDT对作为乳腺癌模型的原发病灶、局部复发病灶和乳腺癌远端转移的作用。4T1细胞用萤光素酶以及其它两种细胞系转染。4T1用pDsRed1-C1的转染目前正在进行当中。这类荧光能够:(1)评价使用基于Bchl-RGD的荧光或MRI检测的准确性;(2)以非常高的灵敏度及时监测对整个动物进行Bchl-PDT时肿瘤的生长和消退。
实施例17.建立作为一般概念的坏死蓄积概念
存在在发育时发生中心性坏死的肿瘤类型。选择两种这类肿瘤用于研究从下列细胞系中发生的肿瘤:人DCIS MCF7乳腺癌、人DCISMCF10DCIS(Tait等、2007)、人成胶质细胞瘤U87、人炎症性乳腺癌(IBC)WIBC-9(Shirakawa等、2001)和RCC。
按照上文材料与方法部分(iii)中所述,使用修饰的pDsRed-Monomer-Hyg-C1质粒和LipofectamineTM 2000转染试剂(InvitrogenTM)对选定的细胞系进行转染。将细胞同位植入(1-5×106细胞,按照各个细胞类型的要求),如有可能,或经皮下植入CD-1裸小鼠内,使之生长到所需要的极限尺寸(约1cm3)并发生坏死。用组织学的方法跟踪坏死区。根据坏死区参数、生长率和成像,选择从上述细胞系开发的两个合适的肿瘤模型用于进一步研究。
对于切离肿瘤荧光成像,经静脉内将15mg/kg化合物13小鼠注射到尾静脉。然后在不同时间点上处死小鼠,切离肿瘤,切成两半。按照上文中材料与方法部分(x)和(xi),进行了切离肿瘤的成像及其用于评价坏死区的组织染色。预期化合物13在肿瘤中心性坏死区的蓄积不依赖于细胞系来源。
实施例18.与不同RGD部分缀合的化合物25的蓄积方式
为了进一步确立RGD寻靶的关系,使用不同的RGD肽和阴性对照研究在MDA-MB-231-RFP肿瘤中的蓄积方式。
把MDA-MB-231-RFP细胞同位植入(5×106细胞)CD-1雌性裸小鼠中,使之生长到1cm3的坏死大小。将小鼠麻醉,并经静脉内将15mg/kg的化合物26(线性GRGDSP-2H-MLT)、化合物45(c(RADfK)-2H-MLT)和化合物36(c(RGDyK) 2 -2H-MLT)注射到尾静脉。分别按上文材料与方法部分(vii)、(x)和(xi)中所述,进行了药物在整个动物中的体内荧光成像和切离肿瘤荧光成像及组织学分析。
实施例19.其它Bchl-RGD衍生物在坏死区的蓄积
为了研究坏死中的蓄积方式对于具有治疗和/或成像潜力的所有Bchl-RGD衍生物是否是一般范例,对另外的Bchl-RGD衍生物进行了研究。准确地讲,对化合物15(c(RGDfK)-Cu-MLT)和化合物14(c(RGDfK)-Mn-MLT)衍生物进行了研究。
将MDA-MB-231-RFP细胞同位植入(5×106细胞)CD-1雌性裸小鼠中,并使之生长到1cm3的肿瘤大小。
在其中Bchl荧光因金属化(例如Cu和Mn)而被猝灭的情况下,按照Brandis等人(Brandis等,2005)所述方法,采用ELAN-6000仪器(Perkin Elmer,CT),通过电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定了肿瘤和非肿瘤组织中的化合物浓度。
实施例20.生物分布测定法
该实验旨在定量测定在机体不同器官中药物扩散和蓄积的进程,以公正方式证实了药物事实上最终在肿瘤内蓄积。
经静脉内给带有MDA-MB-231-RFP肿瘤的麻醉小鼠注射化合物13,15mg/kg。在注射后的几个时间点处死小鼠。采集组织(血液、肾、肝、皮肤、脂肪、肌肉、脾、肠、脑、心脏、肺和肿瘤),装入预称重小瓶中并冷冻。将组织样品匀浆,在甲醇(约1ml甲醇/100mg组织)中提取药物。然后通过荧光分析对样品的药物含量进行了分析。
通过荧光强度测量对化合物13在各种组织中的蓄积进行了定量测定,使用测定不同浓度化合物13的乙醇溶液的荧光强度获得校正曲线作为参比,对药物浓度进行了评价。将上述实施例3中获得的不同时间点的体内NIR荧光图像与生物分布测定法中提取物的荧光强度进行了比较。结果用来验证体内测量。
预期在体内和体外荧光测量值之间存在线性关系。还预期定量分析将更准确地表明肿瘤和正常组织中不同的蓄积和清除。这类测定法可能对临床领域十分有益。
实施例21.用于成像和治疗的具有放射性同位素的金属化RGD-细菌叶绿素衍生物
另一种治疗选择是药物的中心金属被放射性金属置换。其中M具有较长寿命的(对于疗法而言)的这类RGD-M-Bchl衍生物的蓄积可用于肿瘤的放射疗法。还可以其中药物以低浓度停留在体内但在坏死区越来越多地蓄积的这种间隔给予药物。
可通过本发明的发明人的实验室开发的方法,将Cu掺入药物中,使得2H-Bchl-RGD在环境温度下在10-20分钟内进行定量的金属化。所得化合物非常稳定,并且在生理条件下不会发生脱金属化。
预期可证实放射性化合物在肿瘤组织中蓄积,并且可在一次或两次治疗后观察到肿瘤消退。
参考文献
Alfsen,A.,H.Yu等(2005).″HIV-1-infected blood mononuclearcells form an integrin-and agrin-dependent viral synapse to induceefficient HIV-1 transcytosis across epithelial cell monolayer(HIV-1-感染的血液单核细胞形成整联蛋白和聚集蛋白依赖性病毒突触以诱导有效的HIV-1跨上皮细胞单层的胞转)″.Mol Biol Cell 16(9):4267-79。
Becker,A.,B.Riefke等(2000).″Macromolecular contrast agents foroptical imaging of tumors:comparison of indotricarbocyanine-labeledhuman serum albumin and transferrin(用于肿瘤光学成像的大分子造影剂:吲哚三碳菁标记的人血清白蛋白和运铁蛋白的比较)″.PhotochemPhotobiol 72(2):234-41。
Berton,g和C.A.Lowell(1999).″Integrin signalling in neutrophilsand macrophages(嗜中性粒细胞和巨噬细胞中的整联蛋白信号转导)″.Cell Signal 11(9):621-35。
Bijker N等(2006)″Breast-conserving treatment with or withoutradiotherapy in ductal carcinoma-in-situ:ten-year results of EuropeanOrganisation for Research and Treatment of Cancer randomized phase IIItrial 10853(原位腺管癌中在有或没有放射疗法时的保乳治疗:欧洲癌症研究与治疗组织随机化III期临床试验10853的十年结果)″--EORTC乳腺癌合作小组与EORTC放射疗法小组的研究.J Clin Oncol.24(21):3381-7。
Boehm-Viswanathan T.(2000)″Is angiogenesis inhibition theHolygrail of cancer therapy(血管生成抑制是癌症疗法的圣杯吗)?″CurrOpin Oncol.12(1):89-94。
Brandis A.,Mazor O.,Gross S.,Koudinova N.,Hami R.,Kalin-Kammhuber N.,Rosenbach-Belkin V.,Greenwald M.,Bondon A.,Simonneauxg.,Scheer H.,Salomon Y.和Scherz A.(2003)“Novelpalladium-bacteriochlorophyll derivatiyes for antivascular Photodynamictherapy:synthesis,phototoxicity,pharmacokinetics and efficacy(用于抗血管光动力疗法的新的钯-细菌叶绿素衍生物:合成、光毒性、药代动力学特征和功效)”,J.Med.Chem.已提交。
Brandis,A.,O.Mazor等(2005).″Novel water-solublebacteriochlorophyll derivatives for vascular-targeted photodynamictherapy:synthesis,solubility,phototoxicity and the effect of serumproteins(血管靶向光动力疗法的新的水溶性细菌叶绿素衍生物:合成、溶解度、光毒性和血清蛋白的作用).″Photochem Photobiol 81(4):983-93。
Britton MM.(2006)″Nuclear magnetic resonance studies ofconvection in the 1,4-cyclohexanedione-bromate-acid reaction(在1,4-环己烷二酮-溴酸盐-酸性反应中对流的核磁共振研究).J Phys Chem A.″110(15):5075-80。
Brown,J.M.和A.J.Giaccia(1998).″The unique physiology ofsolid tumors:opportunities(and problems)for cancer therapy(实体瘤的独特生理学:癌症疗法的机会(与问题)).″Cancer Res 58(7):1408-16。
Brown,J.M.和W.R.Wilson(2004).″Exploiting tumour hypoxia incancer treatment(在癌症治疗中利用肿瘤低氧).″Nat Rev Cancer 4(6):437-47。
Brown,N.S.和R.Bicknell(2001).″Hypoxia and oxidative stress inbreast cancer.Oxidative stress:its effects on the growth,metastaticpotential and response to therapy ofbreast cancer(乳腺癌中的低氧和氧化应激。氧化应激:对生长、转移潜力的作用及对乳腺癌疗法的反应).″Breast Cancer Res 3(5):323-7。
Burstein HJ,Polyak K,Wong JS,Lester SC,Kaelin CM.(2004)″Ductal carcinoma in situ of the breast(乳腺原位管癌).″N Engl J Med.350(14):1430-41.综述。
Bussolati,G.,M.Bongiovanni等(2000).″Assessment of necrosisand hypoxia in ductal carcinoma in situ of the breast:basis for a newclassification (对乳腺原位管癌的坏死和低氧进行评价:一种新的分类法的基础).″Virchows Arch 437(4):360-4。
Cao,Y.(2005).″Tumor angiogenesis and therapy(肿瘤血管生成与疗法).″Biomed Pharmacother 59,增刊2:S340-3。
Cellini C,Huston TL,Martins D,Christos P,Carson J,Kemper S,Simmons RM.(2005)″Multiple re-excisions versus mastectomy mpatients with persistent residual disease following breast conservationsurgery(在保乳手术后患有持续残留疾病的患者中进行多次重复切除与乳房切除术).″Am J Surg.189(6):662-6。
Cutuli,B.,C.Cohen-Solal-le Nir等(2002).″Breast-conservingtherapy for ductal carcinoma in situ of the breast:the French CancerCenters′experience(乳腺原位管癌的保乳疗法:法国癌症中心的经验).″Int J Radiat Oncol Biol Phys 53(4):868-79。
Dean,M.,T.Fojo等(2005).″Tumour stem cells and drug resistance(肿瘤干细胞和药物抗性).″Nat Rev Cancer 5(4):275-84。
Dewhirst,M.W.(1998).″Concepts of oxygen transport at themicrocirculatory level(在微循环水平下氧转运的构想).″Semin RadiatOncol 8(3):143-50。
Dougherty,T.J.,C.J.Gomer等(1998).″Photodynamic therapy(光动力疗法).″J Natl Cancer Inst 90(12):889-905。
Edwards,J.G.,D.E.Swinson等(2003).″Tumor necrosis correlateswith angiogenesis and is a predictor of poor prognosis in malignantmesothelioma(肿瘤坏死与血管生成有关并且是恶性间皮瘤预后差的预测物).″Chest 124(5):1916-23。
Folkman J.(1996)″Endogenous inhibitors of angiogenesis(血管生成的内源抑制物).″Harvey Lect.92:65-82。
Folkman J.(1997)″Angiogenesis and angiogenesis inhibition:anoverview(血管生成与血管生成抑制的综述).″EXS.79:1-8.综述。
Folkman J.(2004)″A novel anti-vascular therapy for cancer(用于癌症的新的抗血管疗法).″Cancer Biol Ther.3(3):338-9。
Gazdar AF,Kurvari V,Virmani A,Gollahon L,Sakaguchi M,Westerfield M,Kodagoda D,Stasny V,Cunningham HT,Wistuba II,Tomlinsong,Tonk V,Ashfaq R,Leitch AM,Minna JD,Shay JW.(1998)″Characterization of paired tumor and non-tumor cell lines establishedfrom patients witb breast cancer(从乳腺癌患者中建立的配对肿瘤和非肿瘤细胞系的表征).″Int J Cancer.78(6):766-74。
Gross S.,Brandis A.等(1997).″Protein-A-mediated targeting ofbacteriochlorophyll-IgG to Staphylococcus aureus;a modelfor enhancedsite-specific photocytotoxicity(A蛋白介导的靶向金黄色葡萄球菌的细菌叶绿素-IgG:一种用于提高部位特异性光细胞毒性的模型).″Photochem Photobiol 66(6):872-8。
Gross S.,Gilead A.,Brandis A.,Schreiber S.,Machluf Y.,NeemanM.,Scherz A.和Salomon Y.(2003a)“Selective vascular and tumorresponses of photodynamic therapy(PDT)with Pd bacteriopheophorbideonline and offline analyses(具有Pd细菌脱镁叶绿甲酯酸的光动力疗法(PDT)的选择性血管和肿瘤反应:联机与脱机分析)”,美国癌症研究协会(AACR)第94届年会会议记录,Toronto,April 5-9,44:27。
Gross S,Gilead A,Scherz A,Neeman M,Salomon Y.(2003b)Monitoring photodynamic therapy of solid tumors online byBOLD-contrast MRI(通过BOLD对比MRI联机监测实体瘤的光动力疗法).Nat Me d.9(10):1327-31。
Guidi AJ,Fischer L,Harris JR,Schnitt SJ.(1994)″Microvesseldensity and distribution in ductal carcinoma in situ of the breast(乳腺原位管癌中的微血管密度和分布).″J Natl Cancer Inst.86(8):614-9。
Guidi AJ,Schnitt SJ,Fischer L,Tognazzi K,Harris JR,Dvorak HF,Brown LF.(1997)″Vascular permeability factor(vascular endothelialgrowth factor)expression and angiogenesis in patients with ductalcarcinoma in situ of the breast(乳腺原位管癌患者中的血管通透因子(血管内皮生长因子)表达和血管生成).″Cancer.80(10):1945-53。
Guinebretière JM,Moniqueg,Gavoille A,Bahi J,Contessog(1994)″Angiogenesis and risk of breast cancer in women with fibrocysticdisease(患有纤维囊性病的女性中的血管生成和乳腺癌风险).″J NatlCancer Inst.86(8):635-6。
He,X.,P.E.Brenchley等(2004).″Hypoxia increasesheparanase-dependent tumor cell invasion,which can be inhibited byantiheparanase antibodies(低氧增加肝素酶依赖性肿瘤细胞侵袭,其可被抗肝素酶抗体抑制).″Cancer Res 64(11):3928-33。
Hendey,B.,M.Lawson等(1996).″Intracellular calcium andcalcineurin regulate neutrophil motility on vitronectin through a receptoridentified by antibodies to integrins alphav and beta3(胞内钙和钙依赖磷酸酶通过由抗整联蛋白αv和β3的抗体而鉴定的受体调节嗜中性粒细胞在玻连蛋白上移动).″Blood 87(5):2038-48。
Hofmann,B.,A.Bogdanov,Jr.等(1999).″Mechanism ofgadophrin-2 accumulation in tumor necrosis(肿瘤坏死中gadophrin-2蓄积的机制).″J Magn Reson Imaging 9(2):336-41。
Holland R,Hendriks JH,Vebeek AL,Mravunac M,SchuurmansStekhoven JH(1990)″Extent,distribution,andmammographic/histological correlations of breast ductal carcinoma in situ(乳腺原位管癌的范围、分布和乳房X线摄影/组织学关系).″Lancet.335(8688):519-22。
Iyer,A.K.,G.Khaled等(2006).″Exploiting the enhancedpermeability and retention effect for tumor targeting(利用肿瘤寻靶的高的通透性和保留作用).″Drug Discov Today 11(17-18):812-8。
Kamel,I.R.,D.A.Bluemke等(2003).″Role of diffusion-weightedimaging in estimating tumor necrosis after chemoembolization ofhepatocellular carcinoma(在肝细胞癌化疗栓塞后弥散加权成像在评价肿瘤坏死中的作用).″AJR Am J Roentgenol 181(3):708-1O。
Kato,T.,T.Kimura等(1997).″Clinicopathologic study ofangiogenesis in Japanese patients with breast cancer(日本乳腺癌患者血管生成的临床病理学研究).″World J Surg 21(1):49-56。
Kennan,R.P.,B.E.Scanley等(1997).″Physiologic basis for BOLDMR signal changes due to hypoxia/hyperoxia:separation of blood volumeand magnetic susceptibility effects(由于低氧/高氧所引起的BOLD MR信号改变的生理学基础:血量的分离和磁化率作用).″Magn Reson Med37(6):953-6。
Kepple J,Van Zee KJ,Dowlatshahi K,Henry-Tillman RS,Israel PZ,Klimberg VS.(2004)″Minimally invasive breast surgery(乳腺微创手术).″J Am Coll Surg.199(6):961-75.综述。
Kieran MW,Folkman J,Heymach J.(2003)″Angiogenesisinhibitors and hypoxia(血管生成抑制因子与低氧).″Nat Me d.9(9):1104;作者答复1104-5。
Koudinova,N.V.,J.H.Pinthus等(2003).″Photodynamic therapywith Pd-Bacteriopheophorbide(TOOKAD):successful in vivo treatmentof human prostatic small cell carcinoma xenografts(使用Pd-细菌脱镁叶绿甲酯酸的光动力疗法:成功进行人前列腺小细胞癌异种移植物的体内治疗).″Int J Cancer 104(6):782-9。
Krippl P,Langsenlehner U,Renner W,Yazdani-Biuki B,Wolfg,Wascher TC,Paulweber B,Haas J,Samonigg H.(2003)″A common 936C/Tgene polymorphism of vascular endothelial growth factor is associatedwith decreased breast cancer risk(血管内皮生长因子常见的936种C/T基因多态性与乳腺癌风险降低有关).″Int J Cancer.106(4):468-71。
Lang,P.,M.F.Wendland等(1998).″Osteogenic sarcoma:noninvasive in vivo assessment of tumor necrosis with diffusion-weightedMR imaging(骨源性肉瘤:肿瘤坏死的无创体内评价与弥散加权MR成像).″Radiology 206(1):227-35。
Lee,A.H.,L.C.Happerfield等(1997).″Angiogenesis andinflammation in invasive carcinoma of the breast(侵袭性乳腺癌中的血管生成和炎症).″J Clin Pathol 50(8):669-73。
Lee,K.,R.A.Roth等(2007).″Hypoxia,drug therapy and toxicity(低氧、药物疗法与毒性).″Pharmacol Ther 113(2):229-46。
Lee,S.E.,S.K.Hong等(2007).″Prognostic significance of tumornecrosis in primary transitional cell carcinoma of upper urinary tract(原发性上尿路移行细胞癌中肿瘤坏死预后的重要性).″Jpn J Clin Oncol37(1):49-55。
Leek,R.D.,R.J.Landers等(1999).″Necrosis correlates with highvascular density and focal macrophage infiltration in invasive carcinomaof the breast(坏死与侵袭性乳腺癌中的高血管密度和局灶性巨噬细胞浸润有关).″Br J Cancer 79(5-6):991-5。
Lehtio,K.,O.Eskola等(2004).″Imaging perfusion and hypoxia withPET to predict radiothefapy response in head-and-neck cancer(用PET的成像灌注和低氧预测头颈部癌中的放射疗法反应).″Int J Radiat OncolBiol Phys 59(4):971-82。
Lyons,S.K.(2005).″Advances in imaging mouse tumour models invivo(小鼠肿瘤模型体内成像的进展).″J Pathol 205(2):194-205。
Maeda,H.,J.Wu等(2000).″Tumor vascular permeability and theEPR effect in macromolecular therapeutics:a review(大分子疗法中肿瘤血管通透性和EPR作用的综述).″J Control Release 65(1-2):271-84。
Maeshima,Y.,P.C.Colorado等(2000).″Two RGD-independentalpha vbeta 3 integrin binding sites on tumstatin regulate distinctanti-tumor properties(肿瘤抑制蛋白上的两个不依赖RGD的αvβ3整联蛋白结合部位调节截然不同的抗肿瘤性质).″J Biol Chem 275(31):23745-50。
Marugan,J.J.,C.Manthey等(2005).″Design,synthesis,andbiolo gical evaluation of novel potent and selectivealphavbeta3/alphavbeta5 integrin dual inhibitors with improvedbioavailability.Selection of the molecular core(具有生物利用度改进的新型有效的选择性αvβ3/αvβ5整联蛋白双重抑制剂的设计、合成和生物学评价。分子核心的选择).″J Med Chem 48(4):926-34。
Mazor,O.,A.Brandis等(2005).″WST11,a novel water-solublebacteriochlorophyll derivative;cellular uptake,pharmacokinetics,biodistribution and vascular-targeted photodynamic activity usingmelanoma tumors as a model(WST11,新的水溶性细菌叶绿素衍生物;使用黑素瘤作为模型的细胞摄取、药代动力学特征、分布和血管靶向光动力活性).″Photochem Photobiol 81(2):342-51。
Metz,S.,H.E.Daldrup-Unk等(2003).″Detection and quantificationof breast tumor necrosis with MR imaging:value of the necrosis-avidcontrast agentgadophrin-3(乳腺肿瘤坏死用MR成像进行检测和量化:坏死亲和性造影剂Gadophrin-3的价值).″Acad Radiol 10(5):484-90。
Minchinton,A.I.和I.F.Tannock(2006).″Drug penetration in solidtumours(实体瘤中的药物穿透力).″Nat Rev Cancer 6(8):583-92。
Ni,Y.,G.Bormans等(2005).″Necrosis avid contrast agents:functional similaritv versus structural diversity(坏死亲和性造影剂:功能相似性与结构多样性).″Invest Radiol 40(8):526-35。
Nyberg,P.,M.Ylipalosaari等(2006).″Trypsins and their role incarcinoma growth(胰蛋白酶及其在癌生长中的作用).″Exp Cell Res312(8):1219-28。
Patan S,Munn LL,Jain RK.(1996)″Intussusceptive microvasculargrowth in a human colon adenocarcinoma xenograft:a novel mechanismof tumor angiogenesis(人结肠腺癌异种移植物中的内填微血管生长:一种新的肿瘤血管生成机制).″Microvasc Res.51(2):260-72。
Patterson,A.V.,D.M.Ferry等(2007).″Mechanism of action andpreclinical antitumor activity of the novel hypoxia-activated DNAcross-linking agent PR-104(新的低氧激活的DNA交联剂PR-104的作用机制和临床前抗肿瘤活性).″Clin Cancer Res 13(13):3922-32。
Plaks V,Kalchenko V,Dekel N,Neeman M.(2006)″MRI analysisof angiogenesis during mouse embryo implantation(小鼠胚胎植入期间血管生成的MRI分析).″Magn Reson Med.55(5):1013-22。
Preise D.,Mazor O.,Koudinova N.,Liscovitch M.,Scherz A.和Salomon Y.(2003)“Bypass Of Tumor Drug Resistance By AntivascularTherapy(肿瘤药物抗性通过抗血管疗法分流)”,Neopliasia5(6):475-80。
Rankin SC.(2000)″MRI of the breast(乳腺MRI).″Br J Radiol.73(872):806-18.综述。
Relf M,LeJeune S,Scott PA,Fox S,Smith K,Leek R,MoghaddamA,Whitehouse R,Bicknell R,Harris AL.(1997)″Expression of theangiogenic factors vascular endothelial cell growth factor,acidic and basicfibroblast growth factor,tumor growth factor beta-1,platelet-derivedendothelial cell growth factor,placenta growth factor,and pleiotrophin inhuman primary breast cancer and its relation to angiogenesis(人原发乳腺癌中血管生成因子、血管内皮细胞生长因子、酸性和碱性成纤维细胞生长因子、肿瘤生长因子β-1、血小板衍生内皮细胞生长因子、胎盘生长因子和多效营养因子的表达及其与血管生成的关系).″Cancer Res.57(5):963-9。
Rosenbach-Belkin V,Chen L,Fiedor L,Tregub I,Paviotsky F,Brumfeld V,Salomon Y,Scherz A.(1996)″Serine conjugates ofchlorophyll and bacteriochlorophyll:photocytotoxicity in vitro and tissuedistribution in mice bearing melanoma tumors(叶绿素和细菌叶绿素的丝氨酸缀合物:带有黑素瘤的小鼠的体外光细胞毒性和组织分布).″Photochem Photobiol.64(1):174-81。
Rubinstein,E.,A.Brandis等″Vascular-Targeted PhotodynamicTherapy(VTP),Imaging(VTI)and localization of primary lesions andmetastases by novel Bacteriochlorophyll(BCL)-RGD conjugates(用新的细菌叶绿素(BCL)-RGD缀合物进行血管靶向光动力疗法(VTP)、成像(VTI)以及原发病灶的定位和转移)″In preparation。
Sanders ME,Schuyler PA,Dupont WD,Page DL.(2005)″Thenatural history of low-grade ductal carcinoma in situ of the breast inwomen treated by biopsy only revealed over 30 years of long-termfollow-up(仅通过活组织检查的女性轻度乳腺原位管癌自然史显示30年以上的长期随访).″Cancer.103(12):2481-4。
Schaffner,P.和M.M.Dard(2003).″Structure and function of RGDpeptides involved in bone biology(参与骨生物学的RGD肽结构和功能).″Cell Mol Life Sci 60(1):119-32。
Schneider BP,Miller KD.(2005)″Angiogenesis of breast cancer(乳腺癌的血管生成).″J Clin Oncol.23(8):1782-90.综述。
Schreiber S.,Gross S.,Brandis A.,Harmelin A.,Rosenbach-BelkinV.,Scherz A.和Salomon Y.(2002)“Local photodynamic therapy(PDT)of rat C6 glioma xenografts with Pd-bacteriopheophorbide leads todecreased metastases and increase of animal cure compared with surgery(与手术相比大鼠C6神经胶质瘤异种移植物用Pd-细菌脱镁叶绿甲酯酸进行局部光动力疗法(PDT)导致转移减少和动物治愈增多)”,Int.J.Cancer,99:279-285。
Sengupta,S.,C.M.Lohse等(2005).″Histologic coagulative tumornecrosis as a prognostic indicator of renal cell carcinoma aggressiveness(组织凝固性肿瘤坏死作为肾细胞癌侵袭性的预后标志).″Cancer104(3):511-20。
Shimizu K,Asai T,Oku N.(2005)″Antineovascular therapy,a novelantiangiogenic approach(抗血管生成疗法,一种新的抗血管生成方法).″Expert Opin Ther Targets.9(1):63-76。
Shirakawa,K.,H.Tsuda等(2001).″Absence of endothelial cells,central necrosis,and fibrosis are associated with aggressive inflammatorybreast cancer(缺乏内皮细胞、中心性坏死和纤维变性与侵袭性炎症性乳腺癌有关).″Cancer Res 61(2):445-51。
Streubel B,Chott A,Huber D,Exner M,U,Wagner O,Schwarzinger I.(v)″Lymphoma-specific genetic aberrations inmicrovascular endothelial cells in B-cell lymphomas(B细胞淋巴瘤中微血管内皮细胞的淋巴瘤特异性遗传畸变).″N Engl J Med.351(3):250-9。
Tait,L.R.,R.J.Pauley等(2007).″Dynamic stromal-epithelialinteractions during progtession of MCF10DCIS.com xenografts(MCF10DCIS.com异种移植物发展期间动态间质-上皮的相互作用).″Int J Cancer 120(10):2127-34。
Takagi,J.(2004).″Structural basis for ligand recognition by RGD(Arg-Gly-Asp)-dependent integrins(通过RGD(Arg-Gly-Asp)-依赖性整联蛋白的配体识别的结构基础).″Biochem Soc Trans 32(Pt3):403-6。
Tanaka,T.,S.Shiramoto等(2004).″Tumor targeting based on theeffect of enhanced permeability and retention(EPR)and the mechanismof receptor-mediated endocytosis(RME).(基于通透性和保留(EPR)提高及受体介导的胞吞(RME)机制的肿瘤寻靶)″Int J Pharm 277(1-2):39-61。
Tannock,I.(1978).″Cell kinetics and chemotherapy:a criticalreview(细胞动力学和化学疗法:评论性综述).″Cancer Treat Rep 62(8):1117-33。
Tannock,I.F.和D.Rotin(1989).″Acid pH in tumors and itspotential for therapeutic exploitation(肿瘤中的酸性pH及其治疗应用的潜力).″Cancer Res 49(16):4373-84。
Temming,K.,R.M.Schiffelers等(2005).″RGD-based strategies forselective delivery of therapeutics and imaging agents to the tumourvasculature(用于选择性递送治疗剂和成像剂到肿瘤血管系统的基于RGD的策略).″Drug Resist Updat 8(6):381-402。
Thorpe PE(2004)″Vascular targeting agents as cancer therapeutics(作为癌症治疗药的血管靶向药).″Clin Cancer Res.10(2):415-27.综述。
Tomes,L,E.Emberley等(2003).″Necrosis and hypoxia in invasivebreast carcinoma(侵袭性乳腺癌中的坏死和低氧).″Breast Cancer ResTreat 81(1):61-9。
Vaupel,P.,D.K.Kelleher等(2001).″Oxygen status of malignanttumors:pathogenesis of hypoxia and significance for tumor therapy(恶性肿瘤的氧气状况:低氧的发病机制和对肿瘤治疗的重要性).″SeminOncol 28(2 Suppl 8):29-35。
Wapnir,I.L,N.Barnard等(2001).″The inverse relationshipbetween microvessel counts and tumor volume in breast cancer(乳腺癌中微血管计数与肿瘤体积的相反关系).″Breast J 7(3):184-8。
Weersink RA,Bogaards A,Gertner M,Davidson SR,Zhang K,Netchevg,Trachtenberg J,Wilson BC.(2005)″Techniques for deliveryand monitoring of TOOKAD(WST09)-mediated photodynamic therapyof the prostate:clinical experience and practicalities(用于递送和监测前列腺TOOKAD(WST09)介导的光动力疗法的技术:临床经验与实践).″J Photochem Photobiol B.79(3):211-22。
Weinmann,M.,C.Belka等(2004).″Tumour hypoxia:impact onbiology,prognosis and treatment of solid malignant tumours(肿瘤低氧:对实体恶性肿瘤的生物学、预后和治疗的影响).″Onkologie 27(1):83-90。
Yang,M.,E.Baranov等(2000).″Whole-body optical imaging ofgreen fluorescent protein-expressing tumors and metastases(表达绿色荧光蛋白的肿瘤和转移的整体光学成像).″Proc Natl Acad Sci USA97(3):1206-11。
Zilberstein J.,Bromberg A.,Frantz A.,Rosenbaeh-Belkin V.,Kritznann A.,Pfefermann R.,Salomon Y.和Scherz A.(1997)“Light-dependent oxygen consumption inbacteriochlorophyll-serine-treated melanoma tumors:on-linedetermination using a tissue-inserted oxygen microsensor(细菌叶绿素-丝氨酸治疗的黑素瘤中的光依赖性氧气消耗:使用插入组织的氧气微传感器进行联机测定)”,Photochem Photobiol.,65(6):1012-1019。
Zilberstein J.,Schreiber S.,Bloemers M.C.W.M.,Bendel P.,Neeman M.,Schechtman E.,Kohen F.,Scherz A.和Salomon Y.(2001)“Antivascular treatment of solid melanoma tumors withbacteriochlorophyll-serine-based photodynamic therapy(实体黑素瘤用基于细菌叶绿素-丝氨酸的光动力疗法进行抗血管治疗)”,Photochem.Photobiol.,73:257-266。
Claims (38)
1.含RGD的肽或RGD肽模拟物与叶绿素或细菌叶绿素光敏剂的缀合物在微创肿瘤靶向成像、肿瘤靶向光动力疗法(PDT)和/或坏死肿瘤的在线预后中的用途,其中所述光敏剂是下式I、式II或式III的叶绿素或细菌叶绿素及其药学上可接受的盐和旋光异构体:
其中
M表示2H或选自以下的原子:Mg、Pd、Pt、Co、Ni、Sn、Cu、Zn、Mn、In、Eu、Fe、Au、Al、Gd、Dy、Er、Yb、Lu、Ga、Y、Rh、Ru、Si、Ge、Cr、Mo、P、Re、Tc和Tl及其同位素和放射性同位素;
X为O或N-R7;
R1、R’2和R6各自独立地为Y-R8、-NR9R’9或-N+R9R’9R”9A-;或者R1和R6一起形成包含RGD肽或RGD肽模拟物残基的环;
Y为O或S;
R2为H、OH或COOR9;
R3为H、OH、C1-C12烷基或C1-C12烷氧基;
R4为-CH=CR9R’9、-CH=CR9Hal、-CH=CH-CH2-NR9R’9、-CH=CH-CH2-N+R9R’9R”9A-、-CHO、-CH=NR9、-CH=N+R9R’9A-、-CH2-OR9、-CH2-SR9、-CH2-Hal、-CH2-R9、-CH2-NR9R’9、-CH2-N+R9R’9R”9A-、-CH2-CH2R9、-CH2-CH2Hal、-CH2-CH2OR9、-CH2-CH2SR9、-CH2-CH2-NR9R’9、-CH2-CH2-N+R9R’9R”9A-、-COCH3、C(CH3)=CR9R’9、-C(CH3)=CR9Hal、-C(CH3)=NR9、-CH(CH3)=N+R9R’9A-、-CH(CH3)-Hal、-CH(CH3)-OR9、-CH(CH3)-SR9、-CH(CH3)-NR9R’9、-CH(CH3)-N+R9R’9R’9A-或-C≡CR9;
R’4为甲基或甲酰基;
R5为O、S、N-R9、N+R9R’9A-、CR9R’9或CR9-Hal;
R7、R8、R9、R’9和R”9各自独立地为:
(a)H;
(b)C1-C25烃基;
(c)被一个或多个选自以下的官能团取代的C1-C25烃基:卤素、硝基、氧代、OR、SR、桥氧基、桥硫基、-CONRR’、-COR、COOR、-OSO3R、-SO3R、-SO2R、-NHSO2R、-SO2NRR’-NRR’、=N-OR、=N-NRR’、-C(=NR)-NRR’、-NR-NRR’、-(R)N-C(=NR)-NRR’、O←NR-、>C=NR、-(CH2)n-NR-COR’、-(CH2)n-CO-NRR’、-O-(CH2)n-OR、-O-(CH2)n-O-(CH2)n-R、-PRR’、-OPO3RR’、-PO2HR和-PO3RR’,其中R和R’各自独立地为H、烃基或杂环基,R’还可为RGD肽或RGD肽模拟物的残基,或者R和R’与它们所连接的N原子一起形成任选含有另外的选自O、S和N的杂原子的5-7元饱和环,其中另外的N原子可被取代,R”为H、阳离子、烃基或杂环基;
(d)被一个或多个选自以下的官能团取代的C1-C25烃基:带正电荷的基团、带负电荷的基团、在生理条件下转化成带正电荷的基团的碱性基团和在生理条件下转化成带负电荷的基团的酸性基团;
(e)含有一个或多个杂原子和/或一个或多个碳环或杂环部分的C1-C25烃基;
(f)含有一个或多个杂原子和/或一个或多个碳环或杂环部分且被上述(c)和(d)中定义的一个或多个官能团取代的C1-C25烃基;
(g)被氨基酸、肽、优选RGD肽、蛋白质、单糖、寡糖、多糖或多齿配体的残基及其与金属的螯合物取代的C1-C25烃基;或者
(h)氨基酸、肽、优选RGD肽或RGD肽模拟物、蛋白质、单糖、寡糖、多糖的残基;或多齿配体及其与金属的螯合物;
R7还可为-NRR’其中R和R’各自为H或C1-C25烃基,其任选被带负电荷的基团、优选SO3 -取代;
当R1、R’2和R6各自独立地为Y-R8时,R8还可为H+或阳离子R+ 10;
R+ 10为金属、铵基团或有机阳离子;
A-为生理上可接受的阴离子;
m为0或1;
在7-8位上的虚线表示任选的双键。
2.权利要求1的用途,其中任何C1-C25烃基为C1-C25,优选C1-C10,更优选C2-C3的烷基、烯基或炔基。
3.权利要求1的用途,其中在7-8位上的所述虚线表示双键,所述光敏剂是式I、式II或式III的叶绿素。
4.权利要求1的用途,其中在7-8位上的所述虚线不存在,且所述光敏剂为式I、式II或式III的细菌叶绿素。
5.权利要求1的用途,其中每个R4独立地为乙酰基、乙烯基、乙基或1-羟基乙基原子团或所述1-羟基乙基原子团的醚或酯。
6.权利要求1的用途,其中所述光敏剂选自(i)式I或式II的细菌叶绿素,其中在3位上的R4为乙酰基,在8位上的R4为乙基,R’4为甲基,7-8位被氢化,或(ii)式I或式II的叶绿素,其中在3位上的R4为乙烯基,在8位上的R4为乙基,R’4为甲基,在7-8位上有双键。
7.权利要求6的用途,其中所述叶绿素或细菌叶绿素含有至少一个选自以下的带负电荷的基团:COO-、COS-、SO3 -或PO3 2-或至少一个选自以下的在生理pH下转化成带负电荷的基团的酸性基团:COOH、COSH、SO3H或PO3H2,或它们的盐。
8.权利要求7的用途,其中所述叶绿素或细菌叶绿素为式II的叶绿素或细菌叶绿素,R6为-NR9R’9,其中R9为H,且R’9为被SO3H或其碱性盐取代的C1-C10烷基。
9.权利要求8的用途,其中R6为-NH-(CH2)2-SO3K或-NH-(CH2)3-SO3K。
11.权利要求10的用途,其中所述阳离子是式-N+(RR’R”)的铵基团,其中R、R’和R”中的每一个独立地为H、烃基或杂环基,或者R、R’和R”中的两个与N原子一起形成3-7元饱和环,其任选含有O、S或N原子且任选在另外的N原子上被进一步取代,所述环选自氮杂环丙烷、吡咯烷、哌啶、吗啉、硫代吗啉、氮杂或哌嗪,其在额外N原子上被C1-C6烷基任选取代,所述C1-C6烷基被卤素、羟基或氨基任选取代。
14.权利要求1的用途,含有至少一个在生理条件下转变为带正电荷的基团的碱性基团,所述碱性基团为端基或烷基链内的基团,并且选自-NRR’、-C(=NR)-NR’R”-NR-NR’R”、-(R)N-C(=NR)-NR’R”、O←NR-或>C=NR,其中R、R’和R”中的每一个独立地为H、任选取代的烃基或杂环基,或者R、R’和R”中的两个与N原子一起形成3-7元饱和环,其任选含有O、S或N原子且任选在另外的N原子上被进一步取代,或者所述碱性基团为含N杂芳族原子团。
16.权利要求15的用途,其中所述光敏剂为式II的叶绿素或细菌叶绿素,R6为碱性基团-NR9R’9,其中R9为H,R’9为被碱性基团-NRR’或-NH-(CH2)2-6-NRR’取代的C1-C6烷基,其中R和R’各自独立地为H、被NH2任选取代的C1-C6烷基,或者R和R’与N原子一起形成5-6元饱和环,其任选含有O或N原子且任选在另外的N原子上被-(CH2)2-6-NH2进一步取代。
17.权利要求16的用途,其中所述光敏剂为式II的细菌叶绿素,R6为-NH-(CH2)3-NH-(CH2)3-NH2、-NH-(CH2)2-1-吗啉代或-NH-(CH2)3-哌嗪子基-(CH2)3-NH2。
18.权利要求1的用途,其中所述光敏剂为式II的叶绿素或细菌叶绿素,R1和R6一起形成包含RGD肽或RGD肽模拟物的环。
19.权利要求1的用途,其中所述光敏剂为式III的叶绿素或细菌叶绿素,X为-NR7,R7为-NRR’,R为H,R’为被SO3-或其碱性盐取代的C2-6-烷基。
20.权利要求19的用途,其中所述光敏剂为式III的细菌叶绿素,X为-NR7,且R7为-NH-(CH2)3-SO3K。
21.权利要求1的用途,其中M为2H或选自Pd、Mn或Cu的金属,优选式I、式II或式III的细菌叶绿素,更优选式II的细菌叶绿素,其中M为2H、Pd或Cu。
22.权利要求1-21中任一项的用途,其中含RGD的肽为由4-100个、优选5-50个、5-30个、5-20个、更优选5-10个天然氨基酸、修饰天然氨基酸或非天然氨基酸组成的全L、全D或L,D-线性肽或环肽。
23.权利要求22的用途,其中天然氨基酸选自Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、His、Gln、Glu、Gly、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr和Val,所述修饰包括D-修饰、氨基端基团或赖氨酸游离氨基的烷基化或酰化、羧端基团或天冬氨酸或谷氨酸游离羧基的酯化或酰胺化以及丝氨酸或酪氨酸游离羟基的醚化或酯化。
24.权利要求23的用途,其中所述含RGD的肽为环肽。
25.权利要求24的用途,其中所述环肽选自c(RGDfK)(SEQ IDNO:1),其中f表示D-Phe;c(RGDK)(SEQ ID NO:3);c(RGDf-n(Me)K)(SEQ ID NO:4);c(RGDyK)(SEQ ID NO:5),其中y为D-Tyr;或者CDCRGDCGC(SEQ ID NO:9);优选五肽c(RGDfK)。
26.权利要求23的用途,其中含RGD的肽为选自以下的环肽:六肽GRGDSP(SEQ ID NO:6)、七肽GRGDSPK(SEQ ID NO:7)或25聚物(GRGDSP)4K(SEQ ID NO:8)。
27.权利要求1的用途,其中所述缀合物选自本文亦称为c(RGDfK)-2H-MLT的化合物13、本文亦称为c(RGDfK)-Pd-MLT的化合物24。
28.权利要求1的用途,其中所述肿瘤是具有坏死区的原发瘤或转移瘤。
29.权利要求27的用途,其中所述肿瘤是含有坏死区的原发瘤或转移瘤,其选自黑素瘤、前列腺、脑、结肠、卵巢、乳腺、结肠直肠、头颈部、由乳腺癌引起的胸壁肿瘤、皮肤、肺、食道和膀胱癌和肿瘤。
30.权利要求28的用途,其中所述肿瘤是局部乳腺癌,尤其是原位管癌(DCIS)。
31.一种用于通过动态荧光成像对包含坏死区的肿瘤成像方法,所述方法包括:
(a)给予疑似患有带有坏死区的肿瘤的受治疗者权利要求1中限定的缀合物,其中M为2H或选自Pd和Zn的金属;
(b)在给予缀合物后至少24-48小时的时间内以1-8小时的时间间隔照射受治疗者并测定可疑区域的荧光,其中在24-48小时或更长时间后显示荧光的区域表明存在所述坏死肿瘤区。
32.权利要求30的方法,其中所述缀合物是化合物13或化合物24,所述肿瘤是乳腺肿瘤或卵巢肿瘤,并且在药物注射后3-8天坏死区显现。
33.一种用于通过放射性诊断技术诊断包含坏死区的肿瘤的方法,所述方法包括:
(a)给予疑似患有肿瘤的受治疗者权利要求1中限定的缀合物,其中M为选自以下的放射性同位素:64Cu、67Cu、99mTc、67Ga、201Tl、195Pt、60Co、111In或51Cr;
(b)在给予缀合物后至少24-48小时的时间内以1-8小时的时间间隔用成像扫描仪对受治疗者进行扫描,并测定可疑区域的放射水平,其中在24-48小时或更长时间后表现放射性的区域表明存在所述坏死肿瘤区。
34.权利要求33的方法,其中所述放射性诊断技术是正电子发射断层摄影术(PET),且M为64Cu或67Cu。
35.权利要求33的方法,其中所述放射性诊断技术是单光子发射断层摄影术(SPET),且M为选自以下的放射性同位素:99mTc、67Ga、195Pt、111In、51Cr和60Co。
36.一种用于诊断包含坏死区的肿瘤的分子核磁共振成像(MRI)方法,所述方法包括以下步骤:
(a)给予疑似患有肿瘤的受治疗者权利要求1的缀合物,其中M为选自以下的顺磁金属:Mn3+、Cu2+、Fe3+、Eu3+、Gd3+或Dy3+;和
(b)通过在所述给药之前(零时)在患者体内产生目标靶区的至少一幅MR图像以及在所述给药之后至少24-48小时、优选96小时在第二个或更多个时间点上产生一幅或多幅MR图像对患者进行核磁共振成像;
(c)对数据进行处理和分析以诊断所述坏死肿瘤区存在与否。
37.一种用于在手术前对肿瘤边缘作图的方法,所述方法包括给予有需要的受治疗者权利要求1中限定的缀合物,并在给予所述缀合物后头2-24小时使肿瘤边缘优选乳腺肿瘤边缘成像。
38.一种用于局部乳腺癌、尤其原位管癌(DCIS)的微创治疗、检测和预后策略,所述策略包括(i)给予受治疗者权利要求1中限定的缀合物,优选在坏死肿瘤区中特异性归巢和蓄积的RGD-Bchl衍生物,(ii)通过权利要求31-37中任一项的方法对用RGD-BChl衍生物治疗的受治疗者进行肿瘤靶向成像,以实现高精度肿瘤检测和肿瘤边缘界定以及通过MRI、荧光和PET SCAN方法预后;和(iii)对于局部坏死区进行肿瘤靶向光动力疗法(PCT)以进行保乳和重塑。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US6429808P | 2008-02-27 | 2008-02-27 | |
US61/064298 | 2008-02-27 | ||
PCT/IL2009/000228 WO2009107139A1 (en) | 2008-02-27 | 2009-03-01 | Rgd-(bacterio)chlorophyll conjugates for photodynamic therapy and imaging of necrotic tumors |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN102036684A true CN102036684A (zh) | 2011-04-27 |
CN102036684B CN102036684B (zh) | 2017-06-09 |
Family
ID=40677556
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN200980115901.2A Expired - Fee Related CN102036684B (zh) | 2008-02-27 | 2009-03-01 | 用于光动力疗法和坏死肿瘤成像的rgd‑(细菌)叶绿素缀合物 |
Country Status (15)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US8815213B2 (zh) |
EP (2) | EP2257309B1 (zh) |
JP (1) | JP5620279B2 (zh) |
KR (1) | KR101595138B1 (zh) |
CN (1) | CN102036684B (zh) |
AU (1) | AU2009219682B2 (zh) |
BR (1) | BRPI0907791A2 (zh) |
CA (1) | CA2717060C (zh) |
DK (1) | DK2257309T3 (zh) |
ES (1) | ES2764781T3 (zh) |
MX (1) | MX2010009530A (zh) |
PT (1) | PT2257309T (zh) |
RU (1) | RU2518296C2 (zh) |
WO (1) | WO2009107139A1 (zh) |
ZA (1) | ZA201006789B (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111171030A (zh) * | 2018-11-12 | 2020-05-19 | 浙江海正药业股份有限公司 | 细菌叶绿素衍生物及其制备方法 |
CN112933252A (zh) * | 2021-01-28 | 2021-06-11 | 厦门大学附属翔安医院 | 一种乳腺癌特异靶向分子探针及其制备方法和应用 |
Families Citing this family (21)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
NZ569818A (en) * | 2005-12-16 | 2012-07-27 | Catherine M Shachaf | Diagnostic system for the detection and diagnosis of skin cancer |
US9957293B2 (en) * | 2006-08-23 | 2018-05-01 | Yeda Research And Development Company Ltd. | Conjugates of RGD peptides and porphyrin or (bacterio)chlorophyll photosynthesizers and their uses |
WO2011020107A2 (en) * | 2009-08-14 | 2011-02-17 | Georgetown University | Compositions and methods for detection and treatment of breast cancer |
PL219569B1 (pl) | 2010-02-19 | 2015-05-29 | Peptaderm Spółka Z Ograniczoną Odpowiedzialnością | Cykliczne tetrapeptydy i ich zastosowanie |
US8524239B2 (en) | 2010-07-09 | 2013-09-03 | The United States of America as represented by the Secrectary, Department of Health and Human Services | Photosensitizing antibody-fluorophore conjugates |
KR101253709B1 (ko) * | 2011-06-02 | 2013-04-12 | 경북대학교 산학협력단 | 분비형 표적 추적 융합 단백질 |
EP2774625B1 (en) | 2011-09-05 | 2017-04-12 | Hiroshi Maeda | Polymer-type fluorescent molecule probe |
JP6106259B2 (ja) * | 2012-03-21 | 2017-03-29 | コーニンクレッカ フィリップス エヌ ヴェKoninklijke Philips N.V. | 医用イメージングと生検データとを統合する臨床ワークステーション及びこれを使用する方法 |
CN103705532B (zh) * | 2012-10-08 | 2016-09-14 | 浙江海正药业股份有限公司 | 靶向胸苷激酶光敏剂及其药物组合物与治疗癌症的用途 |
JP6741599B2 (ja) * | 2014-06-02 | 2020-08-19 | リ−コール,インコーポレイティド | フタロシアニンプローブ及びその使用 |
AU2015300915B2 (en) | 2014-08-08 | 2020-09-24 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Photo-controlled removal of targets in vitro and in vivo |
WO2016090471A1 (en) * | 2014-12-08 | 2016-06-16 | University Health Network | System and method for enhanced mass spectrometry imaging |
US10682427B2 (en) | 2014-12-19 | 2020-06-16 | Bracco Imaging S.P.A. | Intra-operative imaging |
HUE038696T2 (hu) * | 2015-06-03 | 2018-11-28 | Surgimab S A S | Fluoreszcens konjugátumok |
US11266383B2 (en) | 2015-09-22 | 2022-03-08 | University Health Network | System and method for optimized mass spectrometry analysis |
WO2018115203A1 (en) * | 2016-12-23 | 2018-06-28 | Bicyclerd Limited | Peptide derivatives having novel linkage structures |
KR20190126294A (ko) * | 2016-12-23 | 2019-11-11 | 바이사이클티엑스 리미티드 | Mt1-mmp에 대한 결합용 펩티드 리간드 |
US10933134B2 (en) | 2017-03-16 | 2021-03-02 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Combination therapies for treatment of cancer |
EP3664892A4 (en) * | 2017-08-08 | 2021-04-28 | Board of Trustees of Michigan State University | TUNED LUMINESCENT ORGANIC SALT FOR ENHANCED IMAGING AND PHOTODYNAMIC THERAPY |
JP6920931B2 (ja) * | 2017-09-01 | 2021-08-18 | 富士フイルム株式会社 | 医療画像処理装置、内視鏡装置、診断支援装置、及び、医療業務支援装置 |
RU2700407C1 (ru) * | 2018-07-23 | 2019-09-16 | Михаил Тимофеевич Александров | Способ лечения опухолевых и воспалительных заболеваний с применением фотодинамической терапии |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1088210A (zh) * | 1992-07-26 | 1994-06-22 | 耶达研究及发展有限公司 | 叶绿素、细菌叶绿素衍生物,它们的制备以及含有它们的药物组合物 |
WO1998010795A2 (en) * | 1996-09-10 | 1998-03-19 | The Burnham Institute | Tumor homing molecules, conjugates derived therefrom, and methods of using same |
Family Cites Families (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE4121876A1 (de) | 1991-07-02 | 1993-01-14 | Scheer Hugo | Modifizierte bakteriochlorophylle, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung |
ATE158589T1 (de) | 1991-11-22 | 1997-10-15 | Yeda Res & Dev | Nicht-peptidische surrogate der arg-gly-asp sequenz und entsprechende pharmazeutische zusammensetzungen |
US6147195A (en) | 1993-07-26 | 2000-11-14 | Yeda Research And Development Co., Ltd. | Chlorophyll and bacteriochlorophyll derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions comprising them |
US5789433A (en) * | 1995-01-17 | 1998-08-04 | Quadra Logic Technologies, Inc. | Green porphyrins as immunomodulators |
IL116126A0 (en) | 1995-11-24 | 1996-01-31 | Yeda Res & Dev | Process for the preparation of bacteriochlorophyllis some novel compounds of this type and pharmaceutical compositions comprising them |
US6576239B1 (en) | 1996-09-10 | 2003-06-10 | The Burnham Institute | Angiogenic homing molecules and conjugates derived therefrom |
DE19756773A1 (de) * | 1997-12-19 | 1999-06-24 | Dade Behring Marburg Gmbh | Neues Verfahren und Diagnosemittel zur Hämostase-Diagnostik |
HU228208B1 (en) | 1998-12-09 | 2013-01-28 | Yeda Res & Dev | Palladium-substituted bacteriochlorophyll derivatives and use thereof |
US7045117B2 (en) | 1999-12-01 | 2006-05-16 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Method for tumor diagnosis comprising administering of palladium-substituted bacteriochlorophyll derivatives |
IL133253A0 (en) | 1999-12-01 | 2001-04-30 | Yeda Res & Dev | Chlorophyll and bacteriochlorophyll esters, their preparation and pharmaceutical compositions comprising them |
IL152900A0 (en) | 2002-11-17 | 2003-06-24 | Yeda Res & Dev | Water-soluble bacteriochlorophyll derivatives and their pharmaceutical uses |
PT1753457T (pt) | 2004-06-07 | 2016-11-10 | Yeda Res & Dev | Derivados catiónicos de bacterioclorofilas e utilizações dos mesmos |
AU2007244705A1 (en) * | 2006-04-27 | 2007-11-08 | Barnes-Jewish Hospital | Detection and imaging of target tissue |
CA2661319C (en) * | 2006-08-23 | 2015-12-01 | Yeda Research And Development Co. Ltd | Conjugates of rgd peptides and porphyrin or (bacterio)chlorophyll photosynthesizers and their uses |
WO2009038660A1 (en) * | 2007-09-14 | 2009-03-26 | Health Research, Inc. | Multimodality agents for tumor imaging and therapy |
-
2009
- 2009-03-01 WO PCT/IL2009/000228 patent/WO2009107139A1/en active Application Filing
- 2009-03-01 CA CA2717060A patent/CA2717060C/en not_active Expired - Fee Related
- 2009-03-01 EP EP09714191.5A patent/EP2257309B1/en active Active
- 2009-03-01 KR KR1020107021381A patent/KR101595138B1/ko active IP Right Grant
- 2009-03-01 CN CN200980115901.2A patent/CN102036684B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2009-03-01 DK DK09714191.5T patent/DK2257309T3/da active
- 2009-03-01 BR BRPI0907791-0A patent/BRPI0907791A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2009-03-01 MX MX2010009530A patent/MX2010009530A/es active IP Right Grant
- 2009-03-01 US US12/920,088 patent/US8815213B2/en active Active
- 2009-03-01 RU RU2010139461/15A patent/RU2518296C2/ru active
- 2009-03-01 AU AU2009219682A patent/AU2009219682B2/en not_active Ceased
- 2009-03-01 ES ES09714191T patent/ES2764781T3/es active Active
- 2009-03-01 JP JP2010548248A patent/JP5620279B2/ja active Active
- 2009-03-01 PT PT97141915T patent/PT2257309T/pt unknown
- 2009-03-01 EP EP13186941.4A patent/EP2712627A3/en not_active Withdrawn
-
2010
- 2010-09-22 ZA ZA2010/06789A patent/ZA201006789B/en unknown
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1088210A (zh) * | 1992-07-26 | 1994-06-22 | 耶达研究及发展有限公司 | 叶绿素、细菌叶绿素衍生物,它们的制备以及含有它们的药物组合物 |
WO1998010795A2 (en) * | 1996-09-10 | 1998-03-19 | The Burnham Institute | Tumor homing molecules, conjugates derived therefrom, and methods of using same |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111171030A (zh) * | 2018-11-12 | 2020-05-19 | 浙江海正药业股份有限公司 | 细菌叶绿素衍生物及其制备方法 |
CN112933252A (zh) * | 2021-01-28 | 2021-06-11 | 厦门大学附属翔安医院 | 一种乳腺癌特异靶向分子探针及其制备方法和应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2717060A1 (en) | 2009-09-03 |
US20110064658A1 (en) | 2011-03-17 |
MX2010009530A (es) | 2010-11-30 |
US8815213B2 (en) | 2014-08-26 |
ES2764781T3 (es) | 2020-06-04 |
ZA201006789B (en) | 2012-01-25 |
EP2257309A1 (en) | 2010-12-08 |
RU2010139461A (ru) | 2012-04-10 |
KR20100127798A (ko) | 2010-12-06 |
KR101595138B1 (ko) | 2016-02-18 |
RU2518296C2 (ru) | 2014-06-10 |
WO2009107139A1 (en) | 2009-09-03 |
CN102036684B (zh) | 2017-06-09 |
BRPI0907791A2 (pt) | 2015-08-04 |
JP5620279B2 (ja) | 2014-11-05 |
CA2717060C (en) | 2016-11-01 |
AU2009219682A1 (en) | 2009-09-03 |
EP2712627A3 (en) | 2014-04-16 |
AU2009219682B2 (en) | 2015-06-18 |
JP2011513298A (ja) | 2011-04-28 |
EP2712627A2 (en) | 2014-04-02 |
DK2257309T3 (da) | 2020-01-20 |
EP2257309B1 (en) | 2019-10-16 |
PT2257309T (pt) | 2020-01-22 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102036684A (zh) | 用于光动力疗法和坏死肿瘤成像的rgd-(细菌)叶绿素缀合物 | |
Gong et al. | Engineering of multifunctional nano‐micelles for combined photothermal and photodynamic therapy under the guidance of multimodal imaging | |
US8323621B2 (en) | Multi-use multimodal imaging chelates | |
KR20080015866A (ko) | 세포 흡수 제어형 펩티드 | |
CN107001031A (zh) | 用于光动力疗法、x射线诱导的光动力疗法、放射疗法、化学疗法、免疫疗法及其任意组合的纳米颗粒 | |
CN112574280B (zh) | 一种双酶体系探针及其应用 | |
CA2952509A1 (en) | Peptide containing porphyrin lipid nanovesicles | |
Zhang et al. | NIRF optical/PET dual-modal imaging of hepatocellular carcinoma using heptamethine carbocyanine dye | |
Ma et al. | Nanoprobe-based molecular imaging for tumor stratification | |
Saad et al. | Dual function antibody conjugates for multimodal imaging and photoimmunotherapy of cancer cells | |
Li et al. | Evaluation of physicochemical properties, pharmacokinetics, biodistribution, toxicity, and contrast-enhanced cancer MRI of a cancer-targeting contrast agent, MT218 | |
Miranda Cona et al. | Necrosis avidity of organic compounds: a natural phenomenon with exploitable theragnostic potentials | |
Wang et al. | Theranostics with photodynamic therapy for personalized medicine: to see and to treat | |
Lacerda et al. | Lanthanide containing systems for molecular magnetic resonance imaging and therapy | |
Suh et al. | Exosome Imaging | |
Uddin | World Molecular Imaging Congress 2022 | |
Pandey et al. | Bifunctional agents for imaging and therapy | |
Kalot | Bioevaluation of aza-BODIPYs versatility for cancer NIR-II fluorescence imaging and Boron Neutron Capture Therapy application | |
Martin | Chelation of Luminescent and Radioactive Lanthanides for Targeted In Vivo Bioimaging | |
Broughton | Characterisation of Duramycin as an Anti-cancer Agent | |
Gilson | Photodynamic Therapy: Agents and Mechanisms | |
Li et al. | NIR optical probes targeting glucose transporters | |
Smith | In vivo optical imaging of cell death using fluorescent synthetic coordination complexes | |
Uddin | World Molecular Imaging Congress 2022 | |
Letyagin et al. | Evaluation of magnetic resonance imaging characteristics of new nitroxyl radicals on the model of RLS lymphoma |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20170609 |
|
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |