CN101987100B

CN101987100B - 一种硫酸头孢喹肟混悬注射液的制备方法

Info

Publication number: CN101987100B
Application number: CN2010105384989A
Authority: CN
Inventors: 刘兴金; 张许科; 张晓会
Original assignee: Luoyang Huizhong Animal Medicine Co Ltd
Current assignee: Luoyang Huizhong Animal Medicine Co Ltd
Priority date: 2010-11-10
Filing date: 2010-11-10
Publication date: 2012-07-25
Anticipated expiration: 2030-11-10
Also published as: CN101987100A

Abstract

本发明涉及一种抗菌药物混悬液的制备方法，特别涉及一种硫酸头孢喹肟混悬注射液的制备方法；以5000ml硫酸头孢喹肟混悬注射液计：其中硫酸头孢喹肟微粉1～2.5%（W/V）、维生素E0.15～0.3%（W/V），余量为酯类溶剂或注射用油；在高剪切匀质机中将酯类溶剂或注射用油加热至115~125℃，经过加热的酯类溶剂或注射用油保温4～6小时，放冷至40℃以下，加入经灭菌的硫酸头孢喹肟原料，分散中转速5000-8000rpm，在均匀后，用高压匀质机进行匀质，匀质时工作压力1200bar，灌封，钴60照射灭菌5-6h；本发明制备的硫酸头孢喹肟混悬注射液，安全性高、疗效好，肌肉注射时刺激性小。

Description

一种硫酸头孢喹肟混悬注射液的制备方法

【技术领域】

本发明涉及一种抗菌药物混悬液的制备方法，特别涉及一种硫酸头孢喹肟混悬注射液的制备方法。

【背景技术】

公知的，细菌病是危害我国所有动物的最主要疾病之一。而猪、牛呼吸道疾病以及奶牛乳房炎、子宫炎等都是危害严重的细菌性疾病，这些病可以引起动物饲料报酬降低，发育停滞甚至死亡，给养殖业造成严重的经济损失。抗生素是对付细菌感染的最常用的药物。国内由于抗生素的滥用，耐药菌株逐渐增多，许多抗菌药物疗效下降，加上国内兽药行业的逐渐规范化，国内好的抗菌药物较少，因此广大临床兽医工作者迫切需要好的动物专用的抗菌药物的出现。

头孢喹肟是第四代动物专用头孢类抗生素，优点是抗菌谱广，抗菌作用强，毒性低。临床上主要用于对猪、牛呼吸道疾病以及奶牛、母猪乳房炎、子宫内膜炎的治疗，适合市场的需求，并且头孢喹肟是动物专用的抗生素，使其应用前景不可限量。动力学资料表明，硫酸头孢喹肟口服吸收差，临床常用其硫酸盐制成混悬注射液或软膏，经肌肉注射或乳房灌注。头孢喹肟与其他同类产品相比较，是一种新型的抗生素，具有用量小、毒副作用低，疗效显著等很多优点，因此，具有很强的竞争能力和实用价值，但是由于价格比较高，限制了其在我国的广泛应用。

【发明内容】

为了克服背景技术中的成本高问题，本发明公开了一种硫酸头孢喹肟混悬注射液的制备方法，所述硫酸头孢喹肟混悬注射液的制备方法通过采用低成本的硫酸头孢喹肟微粉和维生素合理配比，本发明药物组合物其它配比的药物对仔猪白痢病均有良好的疗效。

为了实现所述发明目的，本发明采用如下技术方案：

一种硫酸头孢喹肟混悬注射液的制备方法；其中硫酸头孢喹肟混悬注射液包含成分按重量百分比：

以5000ml硫酸头孢喹肟混悬注射液计：

其中

硫酸头孢喹肟微粉1～2.5%（W/V）

维生素E 0.15～0.3%（W/V）

余量为酯类溶剂或注射用油；

硫酸头孢喹肟混悬注射液制备方法如下：

在高剪切匀质机中将酯类溶剂或注射用油加热至115~125℃，经过加热的酯类溶剂或注射用油保温4～6小时，放冷至40℃以下，加入经灭菌的硫酸头孢喹肟原料及维生素E，分散中转速5000-8000 rpm，在均匀后，用高压匀质机进行匀质，其中匀质时工作压力1200 bar，灌封，钴60照射灭菌5-6h。

所述的硫酸头孢喹肟混悬注射液的制备方法，所述酯类溶剂为油酸乙酯、中链脂肪酸三甘油酯 MCT 中的任意一种。

所述的硫酸头孢喹肟混悬注射液的制备方法，所述注射用油为注射用大豆油、白油、花生油或棉籽油中的任意一种。

一种硫酸头孢喹肟混悬注射液的应用：

所述的硫酸头孢喹肟混悬注射液应用于猪呼吸道疾病；

所述的硫酸头孢喹肟混悬注射液应用，肌内注射2～3mg，一日1次，连用3日。

由于采用了上述技术方案，本发明具有如下有益效果：

本发明硫酸头孢喹肟混悬注射液，使用高压匀质机进行匀质后，获得的粒径较小，粒径小于，而未使用本发明方法处理的普通的混悬液，粒径较大，一般为0-50μm，其粒径范围高达约几十微米。因此，本发明方法获得纳米混悬剂粒径小，便于动物机体的吸收。

本发明制备的硫酸头孢喹肟混悬注射液，安全性高、疗效好，肌肉注射时刺激性小。

【具体实施方式】

为使本发明更加容易理解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，下列实施例中未提及的具体实验方法，通常按照常规实验方法进行。

实施例1 ：

硫酸头孢喹肟混悬注射液的制备及性质；

A、硫酸头孢喹肟混悬注射液的制备：

在高剪切匀质机中将油酸乙酯5000ml加热至115~125℃，保温4小时，放冷至40℃，加入经灭菌的硫酸头孢喹肟原料125g及维生素E 7.5g，分散（转速5000 rpm）均匀后，用高压匀质机（型号：NS1001L 2K）进行匀质（匀质时工作压力1200 bar），50ml/瓶进行灌封，钴60照射灭菌5h。

B 、硫酸头孢喹肟混悬注射液粒度测定：

取硫酸头孢喹肟混悬注射液，加入激光粒度分析仪样品桶中，测定其平均粒径为248nm。

C、硫酸头孢喹肟混悬注射液的局部刺激性实验：

下1求口服纳米混悬剂。试验样品为：硫酸头孢喹肟混悬注射液（实施例1方法制备）、健康新西兰兔5只，雄性，体重2.0±0.2kg。试验方法：将兔固定, 剪去两侧注射部位的毛发，在无菌的条件下, 分别在兔子左侧大腿股四头肌注射硫酸头孢喹肟混悬注射液1mL，右侧大腿股四头肌注射生理盐水1mL作为对照，48h后将兔子处死, 解剖取出股四头肌, 纵向切开, 观察注射部位肌肉组织有无刺激现象，如充血、水肿、硬结、变性或坏死的情况。

试验结果判断标准：参照《中药药理研究方法学》（人民卫生出版社，1993年，163-164），肌肉注射刺激反应评分分级标准如下表1，试验家兔的平均反应分值在2 级以下者，可认为符合规定；大于 2 级者则认为不符合规定，不供肌肉注射。

表1 肌肉注射刺激反应评分标准

反应级数	刺激反应
		0	给药部位无明显反应
1	给药部位轻度充血，直径在0.5cm 以下
		2	给药部位中度充血，直径在1cm 以下
3	给药部位重度充血，红肿, 肌肉有变性
		4	出现肌肉褐色变性，坏死, 直径在0.5cm 以下
5	肌肉严重变性，出现大片坏死

试验结果：硫酸头孢喹肟混悬注射液对兔股四头肌的刺激反应结果见表2。

表2 硫酸头孢喹肟混悬注射液对兔股四头肌的刺激反应（n=5）

肉眼观察与生理盐水组比较，硫酸头孢喹肟混悬注射液肌肉注射48h 后，家兔健康如常，解剖观察：有两只兔出现较为明显的充血（小于 1cm）现象，但未见水肿，生理盐水组除一只出现轻微的充血外, 其余 4 只均未出现明显反应。根据评分标准综合计算，结果判断，5只兔平均反应分值为1.2，在2 以下，说明本发明硫酸头孢喹肟混悬注射液的局部刺激性小，可用于肌肉注射。

D、本发明实施例1制备的硫酸头孢喹肟混悬注射液进行安全性试验，结果注射部位未见肿胀结块现象，出10mg/kg剂量组猪出现短时疼痛外，未观察到任何不良反应，硫酸头孢喹肟混悬注射液2 mg/kg -10mg/kg剂量范围内对猪血液生理生化指标无显著影响。

E、硫酸头孢喹肟注射液对仔猪白痢的疗效试验

试验动物：仔猪4-6kg；

毒株：大肠杆菌强度株（血清型：O117：K88ac），购于中国兽医药品监察所；

攻毒剂量：菌液浓度9×10⁸CFU/ml，每头猪口服100亿CFU菌液；

组别：见表3，每组10头；

药物：实施例1制备的硫酸头孢喹肟混悬注射液（2.5%）

试验方法：感染后2天开始给药，开始治疗后15天内观察猪的临床症状变化，对病死猪进行剖检。

疗效评价指标：

治愈：经用药物治疗后临床症状完全消失，精神、饮食欲恢复正常等临床症状为治愈，统计治愈数，计算治愈率；

显效：经用药物治疗后临床症状完全消失，精神、饮食欲好转者等临床症状为显效，统计显效数，计算显效率；

有效：为治愈率和显效率之和；

无效：经用药物治疗后临床症状未改善，病情未好转以及治疗期间因本病死亡的为无效，统计无效数，计算无效率；

15天增重：根据每组猪给药前后的体重以及给药后15天的体重，计算每组猪的15天增重；

相对增重率：按用药组与空白对照组的平均增重之比算出。

用生物学统计进行数据的显著性检验，治愈率、显效率、有效率及无效率采用卡方检验，相对增重率采用t检验，疗效结果见表4。

表3 实验组分组及给药剂量

组号	组别	处理方法	用法、用量、疗程
				1	空白对照组	不感染不给药	—
2	阳性对照组	感染不给药	—
				3	低剂量组	硫酸头孢喹肟混悬注射液	每kg体重1mg肌肉注射，连用3天
4	中剂量组	硫酸头孢喹肟混悬注射液	每kg体重2mg肌肉注射，连用3天
				5	高剂量组	硫酸头孢喹肟混悬注射液	每kg体重4mg肌肉注射，连用3天
6	药物对照组	头孢噻呋冻干粉	每kg体重3mg肌肉注射，连用3天

表4 硫酸头孢喹肟混悬注射液对仔猪白痢的疗效试验

组号	治愈率%	显效率%	有效率%	无效率%	15天增重kg	相对增重率
							1	—	—	—	—	3.6	100.0
2	—	—	—	—	0.7	19.4
							3	30	20	50	50	2.2	61.1
4	50	30	80	20	3.3	91.7
							5	60	30	90	10	3.4	94.4
6	50	10	60	40	2.5	69.4

从表4可以看出，硫酸头孢喹肟混悬注射液高、中、低和药物对照组对于人工感染诱发的猪白痢自主的有效率与阳性对照组比较差异极显著（P＜0.01），硫酸头孢喹肟混悬注射液高、中剂量组的有效率极显著高于药物对照组和硫酸头孢喹肟混悬注射液低剂量组（P＜0.01）。硫酸头孢喹肟混悬注射液高、中剂量组的有效率无显著性差异（P＞0.05）。硫酸头孢喹肟混悬注射液高、中、低和药物对照组对于人工感染诱发的猪白痢的相对增重率与阳性对照组比较差异极显著（P＜0.01），硫酸头孢喹肟混悬注射液高、中剂量组的有效率极显著高于药物对照组和硫酸头孢喹肟混悬注射液低剂量组（P＜0.01）。硫酸头孢喹肟混悬注射液高、中剂量组的相对增重率无显著性差异（P＞0.05）。

实施例2：

在高剪切匀质机中将注射用大豆油5000ml加热至115~125℃，保温6小时，然后在搅拌状态下放冷至40℃以下，加入经灭菌的硫酸头孢喹肟原料125g及维生素E 15g，分散（转速7000 rpm）均匀后，用高压匀质机（型号：NS1001L 2K）进行匀质（匀质时工作压力1200 bar），100ml/瓶进行灌封，钴60照射灭菌5.5h。

参照实施例1进行混悬注射液粒度分析，其平均粒径为242nm。

实施例3：

在高剪切匀质机中将注射用白油5000ml加热至115~125℃，保温5小时，放冷至30℃，加入经灭菌的硫酸头孢喹肟原料100g及维生素E 10g，分散（转速8000 rpm）均匀后，用高压匀质机（型号：NS1001L 2K）进行匀质（匀质时工作压力1200 bar），50ml/瓶进行灌封，钴60照射灭菌6h。

参照实施例1进行混悬注射液粒度分析，其平均粒径为252nm。

实施例4：

在高剪切匀质机中将油酸乙酯5000ml加热至115~125℃，保温5小时，放冷至35℃，加入经灭菌的硫酸头孢喹肟原料100g及维生素E 10g，分散（转速6000 rpm）均匀后，用高压匀质机（型号：NS1001L 2K）进行匀质（匀质时工作压力1200 bar），100ml/瓶进行灌封，钴60照射进行灭菌5h。

参照实施例1进行混悬注射液粒度分析，其平均粒径为238nm。

实施例5：

在高剪切匀质机中将中链脂肪酸三甘油酯5000ml加热至115~125℃，保温4小时，放冷至25℃，加入经灭菌的硫酸头孢喹肟原料50g及维生素E 7.5g，分散（转速6500 rpm）均匀后，用高压匀质机（型号：NS1001L 2K）进行匀质（匀质时工作压力1200 bar），50ml/瓶进行灌封，钴60照射灭菌5h。

参照实施例1进行混悬注射液粒度分析，其平均粒径为246nm。

对实施例2-5制备的硫酸头孢喹肟混悬注射液参照实施例1分别进行局部刺激性试验，平均反应分值均在2 以下，说明局部刺激性小，可用于肌肉注射。

采用实施例2-5制备的硫酸头孢喹肟混悬注射液，分别进行了治疗仔猪白痢的疗效试验，试验参照实施例1，发现药物组合物其他配比的药物对仔猪白痢病均有良好的疗效。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种硫酸头孢喹肟混悬注射液的制备方法，其特征在于：所述硫酸头孢喹肟混悬注射液包含成分按重量百分比：

以5000ml硫酸头孢喹肟混悬注射液计：

其中

硫酸头孢喹肟微粉1～2.5% W/V

维生素E 0.15～0.3% W/V

余量为酯类溶剂或注射用油；

所述硫酸头孢喹肟混悬注射液制备方法如下：

在高剪切匀质机中将酯类溶剂或注射用油加热至115~125℃，经过加热的酯类溶剂或注射用油保温4～6小时，放冷至40℃以下，加入经灭菌的硫酸头孢喹肟原料及维生素E，分散中转速5000-8000 rpm，在均匀后，用高压匀质机进行匀质，其中匀质时工作压力1200 bar，灌封，钴60照射灭菌5-6h；

其中所述酯类溶剂为油酸乙酯、中链脂肪酸三甘油酯 MCT 中的任意一种；

所述注射用油为注射用大豆油、白油、花生油或棉籽油中的任意一种。