CN101974065A - 一种从女贞子中提取含量不低于98%的齐墩果酸的生产方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种从女贞子中提取含量不低于98％的齐墩果酸的生产方法。该方法的工艺流程如下：女贞子原料药破碎→溶剂提取→浓缩→沉降离心→大孔阴离子交换树脂纯化→浓缩-析晶→干燥→成品。使用该方法可以生产出高品质齐墩果酸提取物产品，减少物料损失，缩短生产周期，提高产品收率，降低生产成本，并且适合于工业化生产。利用该方法生产的女贞子提取物中齐墩果酸含量高于98％，产品纯度高，成分较单一；颜色纯白，色泽好；同时克服了工业化生产高含量高品质的女贞子提取物的技术难点，顺利的实现了规模化生产。

Description

一种从女贞子中提取含量不低于98%的齐墩果酸的生产方法 

技术领域

本发明属于植物的有效成分的分离提取技术领域，具体涉及一种从女贞子中提取含量大于98％的齐墩果酸的生产方法。 

背景技术

中药女贞子系木犀科植物女贞子Ligustrum Iuciclum Ait的干燥成熟果实，是我国传统的扶正固本药物。《本草纲目》中记述女贞子气味苦、平、无毒，能补中、安五脏、养精神、除百病。李时珍谓之“果实强阴健腰膝，变白发，明目”。主产于江苏、河南、山西、甘肃、湖南、浙江和四川盆地。具有养阴气、平肝火、健腰膝、壮筋骨、滋补肝肾、乌须发等功效。近年来多用于治疗慢性气管炎、肝炎、高血脂症、糖尿病、更年期综合征、不孕症、动脉粥样硬化等。 

女贞子含有多种化学成分，其中最主要的是两类成分，一类是以齐墩果酸、乙酰齐墩果酸、熊果酸及其糖苷类衍生物为代表的三萜类化合物，另一类则是以对羟基苯乙醇、3，4-二羟基苯乙醇及其糖苷类衍生物、红景天苷等为代表的酚类化合物。 

关于齐墩果酸的研究概况： 

齐墩果酸的性质： 

【产品名称】齐墩果酸 

【英文名称】Oleanic acid 

【化学名】3-hydroxy-olea-12-en-28-oic acid 

【异名】土当归酸Oleanol、Caryophyllia、Astrantigeninc、Giganteumgeninc 

齐墩果酸是一种五环三萜类化合物，它常常以游离体和糖苷的形式存在于多种植物中。高纯的齐墩果酸的性状是白色针晶(乙醇)，无臭，无味，可溶于甲醇、乙醇、苯、乙醚、丙酮和氯仿，几乎不溶于水，对酸碱均不稳定。 

齐墩果酸的药理研究进展：齐墩果酸是一种纯天然的高效低毒的化学成分，具有多种显著的生理活性——抗病毒、消炎、免疫双向调节作用、抑制血小板凝集、降血脂、降糖、保肝、护肾、抗艾滋病毒等。恶性肿瘤是对人类生命威胁最严重的疾病，损害人类健康，研究表明，齐墩果酸对恶性肿瘤化疗造成的免疫功能下降的恢复和对抗结核药物的肝损害的保护意义重大。齐墩果酸所具有的降血脂，降糖、抗病毒作用、特别是抗艾滋病毒活性的发现，对人类社会的未来健康发展有着非常重要的意义。 

齐墩果酸提取物的来源：齐墩果酸是一种齐墩果烷型五环三萜类化合物，它多以游离形式或糖苷形式广泛存在于多种植物中。但由于齐墩果酸结构较复杂，目前仍难以用合成法获得，从植物中提取分离为获取唯一途径。提取分离一般采用物理和化学手段，有实验室方法和生产工艺之别。经调查表明，齐墩果酸在女贞子，楤木，雪胆中含量均高达8％以上。近年来，以齐墩果酸为特征指标的提取物用的原料多大是雪胆，但雪胆比较昂贵，在我国的种植领域狭窄，货源不稳定，随着近两年内齐墩果酸的市场日趋紧俏，雪胆的货源逐渐匮乏，使得生产齐墩果酸提取物的成本越来越高。而女贞子和雪胆相比，二者含量差不多，但它作为一种更为安全，分布更广泛，货源更为充足，价钱更低廉的原料，其成本优势是非常明显的。 

齐墩果酸提取物生产工艺的研究概况 

国内外关于女贞子齐墩果酸提取物生产技术的研究报道很多，但高含量的齐墩果酸工业化生产工艺大多存在着较多缺点，如操作繁琐、环境污染严重、得率不高等等。这说明，现有的技术研究尚处于初级阶段，无法真正达到工业化大生产及市场推广水平。对高含量高品质齐墩果酸生产工艺瓶颈的突破，将使企业拥有行业领先及产品垄断地位，进而成为行业领头羊。 

我国用于制备齐墩果酸提取物的工艺有主要有以下几种： 

1.醇提-酸碱处理法：该方法在制得齐墩果酸的过程中，要两次以上使用醇，在加热过程中，醇损耗量，成本增高； 

2.酸醇提取-碱、氯仿处理法：此法需要使用到有毒的有机溶剂氯仿，对环境造成较大污染，操作不易。 

3.发酵-酸碱处理法：该方法在制得齐墩果酸过程中，药材要发酵处理，药材易霉变长毛，气味严重，而且发酵后变为糊状的药材需长时间干燥后方可进行提取，生产周期很长，成本增高，此外，过多的杂质对后续纯化工序造成巨大的压力。 

4.酸解-碱解-醇提法：该方法反复用到酸碱处理，全过程都需要大量的人力投入，人工成本较高，最后酸醇结晶这一步难以控制，而且重结晶过程中齐墩果酸损失较多，母液难以回收溶剂不高，造成环境污染，而且产品中容易含较多的难溶金属盐类杂质。 

齐墩果酸提取物的市场概况：目前市场中，女贞子提取物的主要规格为高含量的齐墩果酸(≥98％，HPLC)，近两年内，齐墩果酸的市场需求日渐扩大，但是由于雪胆原料逐渐匮乏使得齐墩果酸提取物市场遭遇瓶颈，要攻克这一瓶颈，就必须开发出更安全，更廉价，货源更稳定的原料来生产齐墩果酸提取物。 

目前齐墩果酸提取物产业化进程中的技术难点 

工业化生产高含量高品质的齐墩果酸提取物需要克服如下技术难点：(1)目前，齐墩果酸提取物的原料来源是雪胆等植物，这些植物随着齐墩果酸市场升温，消耗量越来越大，其植物资源日渐匮乏，原料价格逐步攀升，最终使得齐墩果酸的生产成本也大大提高。因此，找到另外的更安全、供货量更稳定而且更大的能替代雪胆的原料如女贞子等，是降低该产品生产成本的有效途径。(2)女贞子提取物生产过程中，应该降低对羟基苯乙醇、3，4-二羟基苯乙醇等酚类物质的干扰，走低毒环保经济高效的技术路线，降低生产的危险系数，降低物料损失，提高产品得率。(3)采用更精细的分离纯化手段，降低产品中乙酰齐墩果酸、熊果酸等同类型杂质对齐墩果酸纯度的影响，从而得到成分较单一的高含量齐墩果酸产品； 

发明内容

本发明的目的是提供一种原料来源广泛，成本低，操作简单，物料损失少，生产周期短，产品得率高，低毒环保，适合于工业化大生产的制备高纯齐墩果酸(含量高于98％)的女贞子提取物生产工艺。 

本发明的目的是通过以下方式实现的： 

一种从女贞子中提取含量不低于98％的齐墩果酸的生产方法，包括以下步骤： 

1)原料药提取： 

以女贞子成熟干燥的果实为原料，破碎至15目以下后投入提取罐中；加入溶媒，采取减压加热回流提取或者常压超声波提取，减压加热回流提取时，提取罐内抽真空，真空度-0.08～-0.1MPa，温度50～80℃，溶媒体积用量至少是原料的4倍，至少提取两次，每次提取时间至少90min；采用常压超声波提取时，超声波输出功率1000W～2000W，温度40～65℃，溶媒用量至少是原料的2倍， 至少提取两次，每次提取时间至少30min；所述的溶媒为30％～70％乙醇或甲醇的自来水溶液； 

2)合并提取液减压浓缩，浓缩条件：真空度范围-0.08～-0.1MPa，温度不高于75℃，浓缩至每升含0.5～1kg生药； 

3)浓缩后用沉降离心机转速2000～4000r/min，离心时间20～40min条件下沉降分离； 

4)大孔阴离子交换树脂纯化：沉降分离后的上清液通过树脂柱，用纯化水洗至流出液呈中性，然后以30％～50％乙醇溶液进行洗脱，收集该梯度乙醇洗脱液2～3倍柱体积；树脂与原料药质量比：1∶10； 

5)浓缩-析晶：将乙醇洗脱液在不高于75℃条件下，真空减压浓缩至11～15波美后，将浓缩液放冷8～12h，过滤，滤饼即为齐墩果酸粗品，最后经过重结晶，真空干燥，可得含量不低于98％的齐墩果酸精品。 

步骤4)所述的大孔阴离子交换树脂包括D-201大孔强碱性阴离子交换树脂或D311型大孔弱碱性丙烯酸系阴离子交换树脂。 

步骤5)所述的重结晶过程抽滤后的母液继续浓缩，析晶、重结晶可得到少量齐墩果酸晶体。 

步骤5)所述的重结晶用的溶剂包括水、甲醇、甲酸、乙酸、乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯、氯仿或石油醚及其复合溶剂。 

步骤5)所述的重结晶温度范围：-4～25℃。 

步骤5)所述的真空干燥温度不超过70℃。 

本发明的优势： 

1)原料成本优势：目前，齐墩果酸提取物的原料来源主要是是雪胆等植物，这些植物随着齐墩果酸市场升温，消耗量越来越大，其植物资源日渐匮乏，原料 价格逐步攀升，最终使得齐墩果酸的生产成本也大大提高。本发明中采用的是更廉价、更安全、供货量更稳定而且产能更大的植物原料女贞子作为雪胆的替代品，有利于缓解齐墩果酸原料紧缺的局面，是降低该产品生产成本的有效途径。 

2)技术上的革新：本发明中，采用的是大孔阴离子交换树脂，由于该树脂对不同离子强度的酸性物质有不同的交换能力；能将女贞子中的酚性物质(如羟基苯乙醇、3，4-二羟基苯乙醇；酚羟基，偏弱酸性)和齐墩果酸(三萜酸，羧基，酸性偏强)分开，产品中能降低酚性物质对齐墩果酸的干扰，保证了产品的纯度；而这些都是以往碱提酸沉旧工艺路线所不能做到的。 

3)在提取方式上采用减压热回流提取或者超声波提取法，可有效提高产品收率，破除女贞子中果胶、淀粉等糖类物质的干扰，有利于活性成分的浸出及分离，同时可有利于控制生产过程中起泡及跑料的现象。该法是生产女贞子提取物工艺的一个新的尝试，实践证明对改善生产过程，效果非常显著。 

4)提取的料液比，提取时间及次数都是经过多次实验及生产实践优化后确定的，保证了较高的提取率。 

5)在浓缩前进行沉降离心，可有效的缩短生产时间，降低浓缩的工作压力提高工作效率，使整个生产工艺可以高效快速进行。 

6)采用大孔强碱型阴离子交换树脂对料液进行纯化，此种树脂综合了大孔树脂的性能和离子交换功能，既可以做到对目标成分进行吸附，还能够脱色，解析和脱色一步可以完成，大大缩短了生产时间，可以较好的去除料液里面的色素及小分子物质，从而优化产品色泽，提高产品纯度。 

7)低毒环保经济高效的技术路线：本发明采取的是一种绿色环保经济的技术路线，该技术路线中采用的提取，浓缩，纯化装置等生产设备均可采用密闭的体系，操作的过程中，能最大限度的避免操作人员接触到试剂，有效地保障了人 体的健康。该方法中采用的溶剂，树脂等都能循环使用，能降低物料损失，提高产品得率。该技术路线于我国可持续发展的模式相呼应，有良好的社会效益。而传统碱提酸沉工艺中，需要消耗大量的人力，用过的试剂也不能循环使用，给环境带来巨大的污染。 

8)该工艺是根据从女贞子中提取高含量齐墩果酸的实际生产情况出发，通过大量的实践摸索，克服了诸多难点，使得产品质量得到有效的提升，而且所用生产设备均为常规设备，不需要对设备有新的要求，更有利于工厂生产的进行和生产成本的降低。 

9)产品市场优势：借助本发明工艺，齐墩果酸的收率6.5～7.5％，含量不低于98％，为纯白色无定形性粉末，是高含量高品质女贞子提取物；而且能工业化批量生产，成为目前市场上产品附加值最高的女贞子提取物产品，满足了市场对高品质齐墩果酸提取物产品的需求问题。 

10)带动我国女贞子的农业产业化、规模化发展，提高农民收入；提高女贞子提取物的附加值，推动植物提取物行业发展；满足下游产业对高含量高品质齐墩果酸原料的需要，促进各行业的共同发展，并为社会创造良好的经济效益和社会效益。 

附图说明

图1为本发明的工艺流程图。 

具体实施方式

以下结合实施例进一步说明本发明，而非限制本发明。 

实施例1 

取女贞子果实500kg(经检测含量为8.3％)，破碎至15目以下后移至提取罐中，加入50％乙醇2000L，减压(真空度-0.09MPa)加热至70℃，回流提取90min， 趁热压滤，药渣中再次加入2000L50％乙醇进行第二次提取，同条件下回流90min后，合并两次提取液真空(真空度-0.09MPa)浓缩至1500L，放冷后管式离心30min，(2000r/min)，离心液加入预处理好的50kg D201大孔强碱型阴离子交换树脂柱中，流速100L//h，上柱流出液呈碱性，上柱完毕后，以纯化水洗至中性，最后以50％乙醇洗脱，收集200L该梯度流出液，真空浓缩该梯度洗脱液至50L后，放冷析晶，12h后抽滤，得到粗品齐墩果酸(含量73％)，最后粗品以30％乙醇重结晶，得到精品齐墩果酸3480g，含量98.3％，收率6.96％。整个过程中齐墩果酸回收率达82％。 

实施例2 

取女贞子果实500kg(经检测含量为8.9％)，破碎至15目后移至超声波提取器中，加入70％乙醇1000L，常压，40℃下超声(功率1500W)提取30min，压滤，药渣中再次加入1000L 70％乙醇进行第二次提取，同条件下提取30min后，合并两次提取液真空(真空度-0.09MPa)浓缩至1000L，放冷后管式离心20min(4000r/min)，离心液加入预处理好的50kg D331大孔弱碱型阴离子交换树脂柱中，流速100L//h，上柱流出液呈碱性，上柱完毕后，以纯化水洗至中性，最后以30％乙醇洗脱，收集200L该梯度流出液，真空浓缩该梯度洗脱液至70L，放冷析晶，12h后抽滤，得到粗品齐墩果酸(含量78％)，最后粗品以30％乙醇重结晶，得到精品齐墩果酸3890g，含量98.4％，收率7.78％。整个过程中齐墩果酸回收率达86％。 

Claims (6)

1.一种从女贞子中提取含量不低于98％的齐墩果酸的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)原料药提取：

以女贞子成熟干燥的果实为原料，破碎至15目以下后投入提取罐中；加入溶媒，采取减压加热回流提取或者常压超声波提取，减压加热回流提取时，提取罐内抽真空，真空度-0.08～-0.1MPa，温度50～80℃，溶媒体积用量至少是原料的4倍，至少提取两次，每次提取时间至少90min；采用常压超声波提取时，超声波输出功率1000W～2000W，温度40～65℃，溶媒用量至少是原料的2倍，至少提取两次，每次提取时间至少30min；所述的溶媒为30％～70％乙醇或甲醇的自来水溶液；

2)合并提取液减压浓缩，浓缩条件：真空度范围-0.08～-0.1MPa，温度不高于75℃，浓缩至每升含0.5～1kg生药；

3)浓缩后用沉降离心机转速2000～4000r/min，离心时间20～40min条件下沉降分离；

4)大孔阴离子交换树脂纯化：沉降分离后的上清液通过树脂柱，用纯化水洗至流出液呈中性，然后以30％～50％乙醇溶液进行洗脱，收集该梯度乙醇洗脱液2～3倍柱体积；树脂与原料药质量比：1∶10；

5)浓缩-析晶：将乙醇洗脱液在不高于75℃条件下，真空减压浓缩至11～15波美后，将浓缩液放冷8～12h，过滤，滤饼即为齐墩果酸粗品，最后经过重结晶，真空干燥，可得含量不低于98％的齐墩果酸精品。

2.根据权利要求1所述的从女贞子中提取含量不低于98％的齐墩果酸的生产方法，其特征在于，步骤4)所述的大孔阴离子交换树脂包括D-201大孔强碱性阴离子交换树脂或D311型大孔弱碱性丙烯酸系阴离子交换树脂。

3.根据权利要求1所述的从女贞子中提取含量不低于98％的齐墩果酸的生产方法，其特征在于，步骤5)所述的重结晶过程抽滤后的母液继续浓缩，析晶、重结晶可得到少量齐墩果酸晶体。

4.根据权利要求1或3所述的从女贞子中提取含量不低于98％的齐墩果酸的生产方法，其特征在于，步骤5)所述的重结晶用的溶剂包括水、甲醇、甲酸、乙酸、乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯、氯仿或石油醚及其复合溶剂。

5.根据权利要求4所述的从女贞子中提取含量不低于98％的齐墩果酸的生产方法，其特征在于，步骤5)所述的重结晶温度范围：-4～25℃。

6.根据权利要求1所述的从女贞子中提取含量不低于98％的齐墩果酸的生产方法，其特征在于，步骤5)所述的真空干燥温度不超过70℃。

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