CN101974048A

CN101974048A - 一种从山茱萸中提取莫诺苷的方法

Info

Publication number: CN101974048A
Application number: CN2010102107306A
Authority: CN
Inventors: 苏刘花
Original assignee: Nanjing Zelang Agricultural Development Co Ltd
Current assignee: Nanjing Zelang Agricultural Development Co Ltd
Priority date: 2010-06-28
Filing date: 2010-06-28
Publication date: 2011-02-16

Abstract

本发明涉及一种从山茱萸中提取莫诺苷的方法。工艺步骤包括原料加乙醇超声提取，提取液回收乙醇，过极性大孔树脂吸附，水→醇梯度洗脱，生物膜纯化浓缩，水饱和正丁醇萃取，再经乙酸乙酯二氯甲烷混合溶液结晶，减压干燥得产品。本发明生产过程简单、可操作性强，所得产品含量高、成本低。

Description

一种从山茱萸中提取莫诺苷的方法

技术领域：

本发明涉及一种从山茱萸中提取莫诺苷的方法，特别是一种采用超声辅助提取和极性大孔树脂分离提纯莫诺苷的工艺。

背景技术：

莫诺苷

分子式：C₁₇H₂₆O₁₁

分子量：402.38

分子结构：

成分分类：环烯醚萜苷类

物理性质：可溶于乙醇、水等极性较大的溶剂，在一定条件下易水解。

药理作用：研究表明山茱萸中的环烯醚萜总苷能改善糖尿病血管并发症，可用于治疗糖尿病药物的开发。莫诺苷具有抗氧化、抗凋亡、增加神经营养作用、促进神经生长的药理作用，对脑卒中、脑缺血，再灌注损伤、痴呆、帕金森病等脑重大疾病具有显著的治疗或者预防作用。莫诺苷具有保护细胞免于H₂O₂诱导的细胞毒性和细胞凋亡的作用，因此可作为一种神经保护类药物。莫诺苷还具有苦补健胃的功效。

山茱萸中莫诺苷的含量据报道约为14.70-32.30mg/g(闫润红等《不同产地山茱萸中莫诺苷和马钱素含量的研究》)。

有关莫诺苷的研究尚不多，多是小量高成本或含量低。如中国发明专利(公开号1569867A)“山茱萸提取物莫诺苷的制备方法和用途”提到了运用醇提水沉，大孔吸附树脂或活性炭层析，再经反相硅胶分离得到莫诺苷的方法，反相硅胶处理量小，成本高；再如李小娜等发表的“山茱萸中马钱苷和莫诺苷对照品的制备”，该文献公开的方法是孔树脂富集、硅胶柱色分离、制备HPLC法分离莫诺苷。中国专利(申请号200510041480)“一种山茱萸提取物及其制备工艺”，该发明采用乙醇提取、大孔树脂纯化，此法所的产品含量较低。

发明内容：

本发明的目的是为了提供一种从山茱萸中提取莫诺苷的方法，该方法易于放大生产，降低成本，减少能耗。

本发明的目的是这样来实现的：

一种从山茱萸中提取莫诺苷的方法，其特征在于包括以下几个步骤：

1)超声醇提：将山茱萸原料粉碎加4-15倍量乙醇，常温超声提取1-3小时提取2-3次；

2)大孔树脂吸附：将提取液回收乙醇，过滤，加入大孔树脂柱吸附，水→醇梯度洗脱，收集莫诺苷流分；

3)膜过滤：上述莫诺苷流分加入超滤膜超滤，再加入纳滤膜纳滤，收集浓缩液；

4)萃取；将上述浓缩液加水饱和正丁醇萃取3-5次，合并萃取液，减压浓缩，得浓缩浸膏；

5)结晶：将浸膏溶于乙酸乙酯，除去不溶物和水层，加入无水硫酸钠回收乙酸乙酯至小体积，滤过加入乙醚，有白色沉淀析出至，放置结晶，重复结晶2-3次，减压干燥即得莫诺苷产品。

步骤1)中乙醇浓度为20-50％。

步骤1)中超声频率为20-100kHz，功率为1-50kW。

步骤2)的大孔树脂可选LAS-7、ADS-17、NAK-II、S-8中的一种。

步骤2)中水→醇梯度洗脱为8-10BV水→3-6BV10-20％乙醇溶液→5-8BV50-70％乙醇溶液。

步骤3)膜过滤条件：超滤膜为截留分子量3000-6000的中空复合膜，纳滤膜为截留分子量为200的中空复合膜，过滤压滤0.3-0.6MPa。

综上所述，本发明存在以下优点：

1、超声辅助提取速度快，杂质溶出少且能耗低。

2、大孔树脂和膜分离联用，除杂效果好、能耗低，和单纯膜分离相比，延长膜的使用寿命。

3、工艺简单易于操作，所得产品含量高。

具体实施方式：

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

实施例1：

将山茱萸原料粉碎，取3kg(莫诺苷含量为3.0％)投入超声波提取罐加入12L50％乙醇，常温条件下用频率为100kHz，功率1kW，超声提取1小时，提取3次，合并提取液减压回收乙醇，浓缩液加入2LLAS-7大孔树脂柱吸附，流速控制在3L/h，吸附结束后依次用16L水→12L10％乙醇溶液→16L50％乙醇溶液洗脱，收集50％乙醇洗脱液，加入截留分子量3000-6000的中空复合膜超滤，进口压力控制在0.3-0.5MPa，透过液再加入截留分子量200的纳滤膜浓缩，浓缩液转入萃取罐，加入3BV的水饱和正丁醇萃取5次，萃取液浓缩回收正丁醇，得流浸膏。流浸膏加入10BV的乙酸乙酯溶解，除去水层，过滤不溶物，滤液加入无水硫酸钠回收乙酸乙酯至小体积，放出加入二氯甲烷搅匀至有沉淀析出至放置结晶，结晶物再用乙酸乙酯溶解加入二氯甲烷重结晶，过滤减压干燥得莫诺苷产品56g，含量95％。

实施例2：

将山茱萸原料粉碎，取3kg(莫诺苷含量为3.0％)投入超声波提取罐加入30L20％乙醇，常温条件下用频率为20kHz，功率1kW，超声提取2小时，提取3次，合并提取液减压回收乙醇，浓缩液加入2LADS-17大孔树脂柱吸附，流速控制在2L/h，吸附结束后依次用20L水→6L20％乙醇溶液→10L70％乙醇溶液洗脱，收集70％乙醇洗脱液，加入截留分子量3000-6000的中空复合膜超滤，进口压力控制在0.4-0.6MPa，透过液再加入截留分子量200的纳滤膜浓缩，浓缩液转入萃取罐，加入6BV的水饱和正丁醇萃取3次，萃取液浓缩回收正丁醇，得流浸膏。流浸膏加入15BV的乙酸乙酯溶解，除去水层，过滤不溶物，滤液加入无水硫酸钠回收乙酸乙酯至小体积，放出加入二氯甲烷搅匀至有沉淀析出至放置结晶，结晶物再用乙酸乙酯溶解加入二氯甲烷重结晶，过滤减压干燥得莫诺苷产品48g，含量98％。

实施例3：

将山茱萸原料粉碎，取3kg(莫诺苷含量为3.0％)投入超声波提取罐加入45L40％乙醇，常温条件下用频率为80kHz，功率1kW，超声提取1小时，提取2次，合并提取液减压回收乙醇，浓缩液加入2L NAK-II大孔树脂柱吸附，流速控制在3L/h，吸附结束后依次用16L水→10L20％乙醇溶液→14L60％乙醇溶液洗脱，收集60％乙醇洗脱液，加入截留分子量3000-6000的中空复合膜超滤，进口压力控制在0.3-0.6MPa，透过液再加入截留分子量200的纳滤膜浓缩，浓缩液转入萃取罐，加入4BV的水饱和正丁醇萃取4次，萃取液浓缩回收正丁醇，得流浸膏。流浸膏加入13BV的乙酸乙酯溶解，除去水层，过滤不溶物，滤液加入无水硫酸钠回收乙酸乙酯至小体积，放出加入二氯甲烷搅匀至有沉淀析出至放置结晶，结晶物再用乙酸乙酯溶解加入二氯甲烷结晶2次，过滤减压干燥得莫诺苷产品42g，含量99％。

实施例4：

将山茱萸原料粉碎，取10kg(莫诺苷含量为3.0％)投入超声波提取罐加入60L50％乙醇，常温条件下用频率为1000kHz，功率2kW，超声提取2小时，提取3次，合并提取液减压回收乙醇，浓缩液加入6L S-8大孔树脂柱吸附，流速控制在8L/h，吸附结束后依次用90L水→30L10％乙醇溶液→36L65％乙醇溶液洗脱，收集65％乙醇洗脱液，加入截留分子量3000-6000的中空复合膜超滤，进口压力控制在0.3-0.6MPa，透过液再加入截留分子量200的纳滤膜浓缩，浓缩液转入萃取罐，加入4BV的水饱和正丁醇萃取5次，萃取液浓缩回收正丁醇，得流浸膏。流浸膏加入10BV的乙酸乙酯溶解，除去水层，过滤不溶物，滤液加入无水硫酸钠回收乙酸乙酯至小体积，放出加入二氯甲烷搅匀至有沉淀析出至放置结晶，结晶物再用乙酸乙酯溶解加入二氯甲烷结晶2次，过滤减压干燥得莫诺苷产品135g，含量98％。

实施例5：

将山茱萸原料粉碎，取20kg(莫诺苷含量为3.0％)投入超声波提取罐加入80L50％乙醇，常温条件下用频率为80kHz，功率5kW，超声提取1小时，提取3次，合并提取液减压回收乙醇，浓缩液加入13LNAK-II大孔树脂柱吸附，流速控制在20L/h，吸附结束后依次用130L水→48L20％乙醇溶液→80L60％乙醇溶液洗脱，收集50％乙醇洗脱液，加入截留分子量3000-6000的中空复合膜超滤，进口压力控制在0.3-0.6MPa，透过液再加入截留分子量200的纳滤膜浓缩，浓缩液转入萃取罐，加入5BV的水饱和正丁醇萃取4次，萃取液浓缩回收正丁醇，得流浸膏。流浸膏加入10BV的乙酸乙酯溶解，除去水层，过滤不溶物，滤液加入无水硫酸钠回收乙酸乙酯至小体积，放出加入二氯甲烷搅匀至有沉淀析出至放置结晶，结晶物再用乙酸乙酯溶解加入二氯甲烷结晶2次，过滤减压干燥得莫诺苷产品268g，含量99％。

Claims

1.一种从山茱萸中提取莫诺苷的方法，其特征在于包括以下几个步骤：

5)结晶：将浸膏溶于乙酸乙酯，除去不溶物和水层，加入无水硫酸钠回收乙酸乙酯至小体积，滤过加入二氯甲烷，有白色沉淀析出至，放置结晶，重复结晶2-3次，减压干燥即得莫诺苷产品。

2.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于步骤1)中乙醇浓度为20-50％。

3.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于步骤1)中超声频率为20-100kHz，功率为1-50kW。

4.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于步骤2)的大孔树脂可选LAS-7、ADS-17、NAK-II、S-8中的一种。

5.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于步骤2)中水→醇梯度洗脱为8-10BV水→3-6BV10-20％乙醇溶液→5-8BV50-70％乙醇溶液。

6.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于步骤3)膜过滤条件：超滤膜为截留分子量3000-6000的中空复合膜，纳滤膜为截留分子量为200的中空复合膜，过滤压力0.3-0.6MPa。