CN100503644C - 一种精制黄芪多糖的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种精制黄芪多糖的方法。目前从黄芪中提取分离黄芪多糖的方法主要为水提醇沉法，这种方法的黄芪多糖提取率和纯度都不高，并且蒸发浓缩时间较长，容易造成多糖分解，给实际操作带来不便。本发明的方法联合应用微波提取、微滤、超滤和醇沉技术来精制黄芪多糖，可以有效提高提取率和产品纯度，而且工艺更加简单，具有省时、节能、高效、简便等特点。

Description

一种精制黄芪多糖的方法
技术领域
本发明涉及生药学领域，具体涉及一种联合应用微波提取、微滤、超滤和醇沉技术来精制黄芪多糖的方法。
背景技术
黄芪(Radix Astragalus)是豆科植物膜荚黄芪(Astragalusmembranaceus(Fisch)Bge)或蒙古黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch)Bge.Var.mongholicus(Bge)Hsiao)的干燥根，是重要的益气中药，味甘，性微温，补气固表，利水托疮。近代药理研究表明，黄芪多糖为黄芪的主要成分之一，具有提高机体免疫力、抗肿瘤、抗辐射损伤、抑菌和抑病毒、调节血糖、抗衰老等广泛的药理作用。
从黄芪中提取分离黄芪多糖的方法主要为水提醇沉法，单用这种方法，所得黄芪多糖提取率和纯度都不高。此外，醇沉前采用的减压蒸发浓缩温度高、易起泡，给蒸发浓缩造成困难，增加蒸发浓缩的时间，容易造成多糖分解并给实际操作带来不便。如倪艳，苏强，刘霞等(黄芪多糖水煎提取工艺的优化实验研究[J].中国中药杂志，1998，23(5)：284.)采用加12倍水回流提取3次，每次回流1.5小时的方法提取黄芪多糖，再用传统的二次醇沉法进行精制，所得黄芪多糖的得率为2.0％，总多糖含量为37.54％。该方法耗时长，且黄芪多糖的得率和含量都较低。
中国专利CN1330082A公开了一种黄芪多糖和黄芪皂苷的提取分离方法，其中采用回流提取(时间长、能耗大、效率低)、絮凝(时间长、有残留)、超滤、过树脂柱工艺分离提取黄芪多糖，步骤烦琐复杂，纯度低，仅为64％。
发明内容
针对目前从黄芪中提取分离黄芪多糖时，受热时间长、能耗大、步骤烦复，致使黄芪多糖提取率和纯度都不高、效率低的问题，提出本发明。
本发明的目的在于提供一种黄芪多糖的得率和纯度都较高的精制方法，采用微波提取(省时、节能、高效)、微滤(省时、无残留)、超滤(无残留)、醇沉1次(简便易操作)，所得黄芪多糖纯度较高。超滤不仅有利于提高纯度，而且同时起到浓缩的作用，可直接进行后续的醇沉操作。
微波提取相对水煎法细胞内杂质流出较少，使后续的膜过滤通量增大，有利于提高膜过滤的效率和延长膜的使用寿命。微波结合超滤、微滤技术可使黄芪多糖的纯度达到80％以上，远高于传统水煎醇沉法所得黄芪多糖的纯度(一般在50％以下)。并且本发明提供的方法有利于连续操作，水煎醇沉法中，醇沉前需要浓缩，而微滤可以达到既除掉小分子杂质，又同时除去水分浓缩的作用。
本发明方法的具体步骤如下：
(1)黄芪多糖水提液过滤，滤液再过微滤膜，在过膜的过程中不断加水稀释，使黄芪多糖尽可能的透过微滤膜，提高收率。
(2)收集滤过液，过超滤膜浓缩。
(3)收集截留液，醇沉，沉淀为黄芪多糖固体。
(4)干燥步骤(3)得到的固体，粉碎，得到黄芪多糖。
其中，步骤(1)中黄芪多糖水提液采用微波提取，微滤膜的孔径大小为0.14～1.4μm，加水量为黄芪多糖水提液的1～5倍。微波提取的优势在于：提取时间短，相对于传统提取方法所需要的数小时，微波提取仅需几十分钟，并且提取过程的能耗低，提取率高，所提取黄芪多糖纯度得以明显提高。由于提取温度低，还可以避免黄芪多糖在高温下分解。
使滤液过微滤膜的作用在于：除去提取液中的不溶性颗粒状杂质，有利于提高黄芪多糖的纯度，同时保护后面的超滤膜，因为不溶性颗粒状杂质易损坏超滤膜。
步骤(2)中超滤膜的截留分子量为1,000～10,000道尔顿。超滤的作用在于：除去提取液中的小分子杂质，同时浓缩提取液。
较佳的方案为：步骤(1)中优选的微滤膜的孔径大小为0.2～0.8μm，加水量为黄芪多糖水提液的2～4倍。步骤(2)中优选的超滤膜的截留分子量为2,000～8,000道尔顿。
与现有的技术相比，本发明具有明显的优点：
(1)微波提取、微滤、超滤和醇沉技术联合应用精制黄芪多糖，显现出明显的优势，大幅度地提高了黄芪多糖的提取率与产品纯度。
(2)膜分离为物理分离过程，中间不需加热过程，避免多糖受热分解。
(3)可实现连续操作，方法简便，工艺时间短，便于工业化生产。
具体实施方式
下面通过实施例进一步说明本发明，但这些实施例不对本发明构成任何限制。实施例中采用的微波提取设备为NJC03—2型(南京杰全)。
实施例1
取黄芪药材1公斤，粉碎，微波提取(70℃，4次，30分钟/次)得水提液。过滤，滤液再过0.2μm微滤膜，在过膜的过程中加4倍量水稀释(根据透过量连续加水)。收集滤过液，过截留分子量为1,000道尔顿的超滤膜浓缩。收集截留液，醇沉，干燥得纯度为86.29％(苯酚—硫酸法测得，下同)的黄芪多糖81.50克。
实施例2
取黄芪药材1公斤，粉碎，微波提取(70℃，4次，30分钟/次)得水提液。过滤，滤液再过1.4μm微滤膜，在过膜的过程中加2倍量水稀释(根据透过量连续加水)。收集滤过液，过截留分子量为10,000道尔顿的超滤膜浓缩。收集截留液，醇沉，干燥得纯度为89.73％的黄芪多糖71.36克。
实施例3
取黄芪药材1公斤，粉碎，微波提取(70℃，4次，30分钟/次)得水提液。过滤，滤液再过0.14μm微滤膜，在过膜的过程中加5倍量水稀释(根据透过量连续加水)。收集滤过液，过截留分子量为5,000道尔顿的超滤膜浓缩。收集截留液，醇沉，干燥得纯度为81.86％的黄芪多糖77.93克。
实施例4
取黄芪药材1公斤，粉碎，微波提取(70℃，4次，30分钟/次)得水提液。过滤，滤液再过0.8μm微滤膜，在过膜的过程中加1倍量水稀释(根据透过量连续加水)。收集滤过液，过截留分子量为2,000道尔顿的超滤膜浓缩。收集截留液，醇沉，干燥得纯度为88.27％的黄芪多糖71.87克。
实施例5
取黄芪药材1公斤，粉碎，微波提取(70℃，4次，30分钟/次)得水提液。过滤，滤液再过0.45μm微滤膜，在过膜的过程中加3倍量水稀释(根据透过量连续加水)。收集滤过液，过截留分子量为8,000道尔顿的超滤膜浓缩。收集截留液，醇沉，干燥得纯度为88.64％的黄芪多糖75.94克。

Claims (6)

1、一种精制黄芪多糖的方法，其特征在于包括下列步骤：
(1)微波提取黄芪多糖得到其水提液，过滤，滤液过微滤膜；
(2)收集滤过液，过超滤膜浓缩；
(3)收集截留液，醇沉，沉淀为黄芪多糖固体；
(4)干燥前一步骤得到的固体，粉碎，得到黄芪多糖；
微滤膜的孔径大小为0.14～1.4μm；
超滤膜的截留分子量为1,000～10,000道尔顿。
2、根据权利要求1所述的方法，其特征在于微滤膜的孔径大小为0.2～0.8μm。
3、根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(1)中滤液过微滤膜时不断加水稀释。
4、根据权利要求3所述的方法，其特征在于加水量为黄芪多糖水提液的1～5倍。
5、根据权利要求4所述的方法，其特征在于加水量为黄芪多糖水提液的2～4倍。
6、根据权利要求1所述的方法，其特征在于超滤膜的截留分子量为2,000～8,000道尔顿。
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