CN102060933A - 一种从莼菜老叶中提取分离体内水溶性多糖的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种从莼菜老叶中提取分离体内水溶性多糖的方法；本发明主要解决莼菜嫩叶加工后剩下的老叶和10月下旬田间不再利用的莼菜老叶体内多糖提取、分离技术。本发明包括以下技术步骤：将新鲜莼菜老叶干燥粉碎；热水提取、离心收集上清液；将上清液减压浓缩，醇沉，离心收集沉淀；沉淀经纯化，喷雾干燥，得莼菜老叶体内水溶性多糖；该方法成本低，产品得率较高，环保，适合工业化生产。

Description

一种从莼菜老叶中提取分离体内水溶性多糖的方法

技术领域

本发明属于天然产物提取技术领域，具体涉及一种从莼菜老叶中提取分离体内水溶性多糖的方法。

背景技术

莼菜，一种原始花被亚纲睡莲科，莼菜属多年生淡水水生草本植物[Braseniaschreberi]。又名马蹄草、湖菜、水葵、露葵。该植物主要分布于浙江、江苏两省太湖流域，湖北省西部利川市境内。4月下旬至10月下旬采摘带有卷叶的嫩稍。民间对莼菜的传统应用历史和现代药理研究表明莼菜多糖通常具有降胆固醇、降血糖、降血脂、抗氧化、抗炎症、抗病毒和免疫调节等功效，莼菜嫩叶体内多糖有一定的还原能力，同时对超氧阴离子自由基和羟自由基也具有一定的清除能力。目前关于莼菜多糖的提取、分离方法研究主要集中在莼菜嫩叶体外多糖的提取、分离。相关的专利文献有：莼菜的凝胶技术(CN：03113443.2)，莼菜多糖粘胶生产菌及莼菜多糖粘胶生产工艺(CN：94112514.9)；莼菜多糖方面的相关文献：①莼菜多糖的提取、分离及某些生物活性的研究(王淑如等，中国药科大学学报，1987，No.3)；②莼菜多糖的提取及其功能特性的研究(王倩等，江南大学，2009)；③莼菜体外胶质分离及组成成分的初步分析(周毅峰，等，食品与发酵工业，2005，No.4)；④莼菜多糖提取工艺研究中的IR光谱分析(顾小曼等，武汉化工学院学报，1997，No.1)；⑤莼菜水溶性多糖提取工艺优化研究(唐巧玉等，北方园艺，2008，No.3)；⑥莼菜多糖提取工艺中的IR、UV光谱分析(余世鑫等，湖北化工，1996，No.3)；⑦莼菜多糖的提取分离工艺技术(今日科技，1999，NO.1)；⑧分光光度法测定莼菜多糖中的葡萄糖醛酸(余世鑫等，分析化学，1997，No.9)。

以莼菜嫩叶为原料进行莼菜体外多糖提取、分离，其资源利用率低，附加值不高，势必影响综合开发利用莼菜资源的经济效益。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从莼菜加工后剩下的老叶和10月下旬田间不再利用的莼菜老叶中提取分离水溶性体内多糖的方法。

本发明一种从莼菜老叶中提取分离体内水溶性多糖的方法，其特征在于一种从老叶中提取水溶性体内多糖的方法包括以下步骤：

a.原料处理：新鲜莼菜老叶干燥、粉碎过100目筛；

b.浸提：莼菜原料粉末以重量1∶20料液比，经100℃热水提取60min，趁热在4000rpm下离心15min，收集上清液，对滤渣重复提取1次，合并两次上清液；

c.浓缩分离：将上清液在50-60℃下减压浓缩至原体积的1/3-1/5，再加入3倍体积的95％乙醇，边加乙醇边搅拌，放置8-24h后，4000rpm离心15min，收集沉淀；

d.洗涤：沉淀经95％乙醇洗涤后，得莼菜水溶性粗多糖；

e.纯化：粗多糖加20倍重量的水复溶；用sevag法脱蛋白；再调节多糖溶液pH至pH8，于50℃下滴加等体积的20％双氧水脱色后，加入3倍体积的95％乙醇沉淀多糖，离心，收集沉淀；再加20倍重量的水复溶得多糖水溶液，用多糖水溶液3倍体积的95％乙醇沉淀多糖，离心，收集沉淀，用20倍重量的水溶解沉淀，水溶解喷雾干燥，得莼菜水溶性多糖。

本发明针对从莼菜加工后剩下的老叶和10月下旬田间不再利用的莼菜老叶，采用热水浸提法提取莼菜老叶体内水溶性多糖，经多次醇沉、脱蛋白、脱色、喷雾干燥，获得莼菜多糖，该方法成本低，提取得率较高，环保，适合工业化连续生产，可实现莼菜资源的综合开发利用和经济效益的提高。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1

原料处理：新鲜莼菜老叶干燥、粉碎过100目筛，备用；

水溶性多糖浸提：原料粉末0.5kg，加10L蒸馏水，加热至100℃，提取60min，趁热4000rpm离心15min，收集上清液，对滤渣加蒸馏水10L，加热至100℃下重复提取1次，合并上清液；

浓缩分离：将上清液在60℃下减压浓缩至原体积的1/3，再加入3倍体积的95％乙醇，边加乙醇边搅拌，放置24h后，4000rpm离心15min，收集沉淀；

纯化：沉淀经95％乙醇洗涤后，加1000ml水复溶得多糖液，以sevag法脱蛋白，即以3∶1(v/v)的糖液∶混合液(4氯仿∶1正丁醇，v/v)脱蛋白1次，再调节多糖溶液pH至pH8，于50℃下滴加等体积的20％双氧水脱色后，加入3倍体积的95％乙醇沉淀多糖，离心，收集沉淀；再加1000水复溶后，加入3倍体积的95％乙醇沉淀多糖，离心，收集沉淀，加1000ml水溶解后喷雾干燥，得初步纯化的莼菜水溶性多糖，产品得率约8.9％(葡萄糖醛酸作标样，咔唑法测定)。

实施例2

原料处理：新鲜莼菜老叶干燥、粉碎过100目筛，备用；

水溶性多糖浸提：原料粉末1.0kg，加20L蒸馏水，加热至100℃，提取60min，趁热4000rpm离心15min，收集上清液，对滤渣加蒸馏水20L，加热至100℃下重复提取1次，合并上清液；

浓缩分离：将上清液在60℃下减压浓缩至原体积的1/3，再加入3倍体积的95％乙醇，边加乙醇边搅拌，放置24h后，4000rpm离心15min，收集沉淀；

纯化：沉淀经95％乙醇洗涤后，加2000ml水复溶得多糖液，以sevag法脱蛋白，即以3∶1(v/v)的糖液∶混合液(4氯仿∶1正丁醇，v/v)脱蛋白1次，再调节多糖溶液pH至pH8，于50℃下滴加等体积的20％双氧水脱色后，加入3倍体积的95％乙醇沉淀多糖，离心，收集沉淀；再加2000水复溶后，加入3倍体积的95％乙醇沉淀多糖，离心，收集沉淀，加2000ml水溶解后喷雾干燥，得初步纯化的莼菜水溶性多糖，产品得率约8.9％(葡萄糖醛酸作标样，咔唑法测定)；

实施例3

原料处理：新鲜莼菜老叶干燥、粉碎过100目筛，备用；

水溶性多糖浸提：原料粉末2.0kg，加40L蒸馏水，加热至100℃，提取60min，趁热4000rpm离心15min，收集上清液，对滤渣加蒸馏水40L，加热至100℃下重复提取1次，合并上清液；

浓缩分离：将上清液在60℃下减压浓缩至原体积的1/3，再加入3倍体积的95％乙醇，边加乙醇边搅拌，放置24h后，4000rpm离心15min，收集沉淀；

纯化：沉淀经95％乙醇洗涤后，加4000ml水复溶得多糖液，以sevag法脱蛋白，即以3∶1(v/v)的糖液∶混合液(4氯仿∶1正丁醇，v/v)脱蛋白1次，再调节多糖溶液pH至pH8，于50℃下滴加等体积的20％双氧水脱色后，加入3倍体积的95％乙醇沉淀多糖，离心，收集沉淀；再加4000水复溶后，加入3倍体积的95％乙醇沉淀多糖，离心，收集沉淀，加4000ml水溶解后喷雾干燥，得初步纯化的莼菜水溶性多糖，产品得率约8.9％(葡萄糖醛酸作标样，咔唑法测定)。

Claims (1)

1.一种从莼菜老叶中提取分离体内水溶性多糖的方法，其特征在于包括以下步骤：

a.原料处理：新鲜莼菜老叶干燥、粉碎过100目筛；

b.浸提：莼菜原料粉末以重量1∶20料液比，经100℃热水提取60min，趁热在4000rpm下离心15min，收集上清液，对滤渣重复提取1次，合并两次上清液；

c.浓缩分离：将上清液在50-60℃下减压浓缩至原体积的1/3-1/5，再加入3倍体积的95％乙醇，边加乙醇边搅拌，放置8-24h后，4000rpm离心15min，收集沉淀；

d.洗涤：沉淀经95％乙醇洗涤后，得莼菜水溶性粗多糖；

e.纯化：粗多糖加20倍重量的水复溶；用sevag法脱蛋白；再调节多糖溶液pH至pH8，于50℃下滴加等体积的20％双氧水脱色后，加入3倍体积的95％乙醇沉淀多糖，离心，收集沉淀；再加20倍重量的水复溶得多糖水溶液，用多糖水溶液3倍体积的95％乙醇沉淀多糖，离心，收集沉淀，用20倍重量的水溶解沉淀，水溶解喷雾干燥，得莼菜水溶性多糖。