CN101965912B - 一种替代抗生素的微生物饲料添加剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种替代抗生素的微生物饲料添加剂，主要由枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌、黑曲霉菌、米曲霉菌等组成；其制备方法为：各菌种的母种由液态发酵而成，生产种由母种固态发酵而成，生产种进一步固态发酵得到菌种，将菌种按一定比例混合即得本微生物饲料添加剂。本发明能提高动物非特异免疫力，增强机体抗应激能力，激活动物生长潜能，全面提高生产性能，一揽子解决畜禽产品品质低下、风味缺失，仔猪腹泻、母猪便秘、鸡鸭粪便稀溏，饲料原料抗营养因子多、消化利用低的问题，提供替代抗生素、酶制剂、砷制剂、益生素的廉价简单实用方案。

Description

一种替代抗生素的微生物饲料添加剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种饲料添加剂及其制备方法，尤其涉及一种替代抗生素的微生物饲料添加剂及其制备方法。

背景技术

自20世纪40年代抗生素问世以来，由于其在防病、保健和促进生长、提高饲料效率方面的神奇功效，在养殖业中得到全方位的应用，到了20世纪70年代达到顶峰。

根据2001年世界卫生组织统计，全球每年消耗的抗生素总量中，有90％被用于食用动物，每年约有12000吨和900吨抗生素分别被用于食用动物的饲料添加剂和治疗用药。在动物疾病治疗中，滥用抗生素的现象普遍存在，许多动物养殖场只要发现动物发病，首先使用的是抗生素，一种抗生素不见效，马上换另一种，而且常常超大剂量使用抗生素。抗生素作为饲料添加剂，使用量更大，我国每年有6000吨抗生素用于饲料添加剂，占全球抗生素饲料添加剂使用量的50％。据估计，国内一个万头猪场每年向环境中排泄的金霉素等原形药物约300～500kg。我国的畜牧业对抗生素的依赖性很大，世界每年抗生素花费约50亿美元，我国约5亿美元，占1/10。我国已成了世界上滥用抗生素最为严重的国家。

在被称为抗生素“黄金时代”的上世纪五六十年代，曾有人断言，人类战胜细菌的时代已经到来。具有讽刺意味的是：那时全世界每年死于感染性疾病的人数只有约为700万，而这一数字到了1999年上升到2000万。我国现在每年有20万人死于药品不良反应，其中有8万人直接死于抗生素的滥用。

抗菌药物滥用的危害不仅导致药品不良事件和药源性疾病的发生，而且会导致对抗菌药物的耐药性，不仅严重威胁着人类的生命，而且最近几年传染病集中爆发、畜牧业损失惨重！免疫失败也正是滥用抗生素的直接结果，每年全国因畜禽疾病的直接经济损失高达200-250亿元，间接经济损失更是数额惊人：达1000亿元之巨。在人们生活水平提高的今天，只图吃饱的时代早已一去不复返！滥用抗生素，畜产品药物残留严重超标，面临着畜禽产品出口受阻。

同时，饲料中添加抗生素，动物生长速度快，动物自身及许多致病菌产生的毒性胺、氨、细菌毒素、氧自由基等有毒物质在体内蓄积多；同时由于生长速度快，呈味物质合成慢，与生长速度不同步。故现在许多肉食品表现出肉质苍白、松软、无肉香味，鸡蛋蛋清稀薄、蛋黄松散、蛋味不浓，鱼肉松散、水分含量高、无嚼咬味。使畜产品食之无味，老百姓以前把肉蛋奶作为生活必须品，现在几乎成了“谈肉色变”的地步，这也是畜产品价格持续低迷、肉价不如菜价的根本原因！但菜毕竟是“菜”，动物蛋白的营养作用不是菜能简单替代得了的！而中国畜牧业要想可持续发展，也必须走出抗生素的温柔陷阱！否则不仅疾病频繁流行给畜牧业带来巨额直接损失，而且面临消费群体集体消失的巨大风险。

鉴于有抗食物的危害性，世界卫生组织成立了慎用抗生素联盟，其成员包括90多个国家，采取立法手段禁用抗生素。近年来，发达国家意识到在动物饲料中添加抗生素的危害性，从1996年开始，立法禁止在动物饲料中使用抗生素。欧盟在2006年就已全面禁止在饲料中使用抗生素作为饲料生长添加剂。

研究绿色无抗生素饲料是近来世界各国饲料工业的重要研究方向，许多国家的饲料和畜牧业生产者在政府管理部门限制和禁止使用抗生素的同时，主张用益生素来替代词料中的抗生素。

我国在抗生素的替代方面有所研究，但大多集中在酶制剂方面，单一酶制剂对饲料消化利用率提高作用明显，但其抗病促生长效果仍不敌抗生素。

现有的微生物发酵饲料替代抗生素，但由于其技术与国内的实际养殖情况脱节，无法在日常养殖生产中方便有效地应用，导致其实际效果不佳。比如某产品由于技术的先天原因，虽然理论效果良好，但由于最终产物水分含量高达30％以上，养殖户使用极其不方便，2008年前国内有10多个厂家使用该技术，现大都放弃使用，不能不说是一大遗憾！

另外，国内益生素生产厂家的益生素产品大都集中在提高饲料消化利用率方面的研究，直接全面替代抗生素、砷制剂的产品目前并不多见，对完全取消砷制剂的产品更是空白。

因此研究完全替代抗生素、砷制剂、激素，恢复畜产品本来风味、提高畜产品品质的产品显得尤为紧迫和重要。

这类产品必须价格低廉、使用方便、添加量少，才可能被畜牧养殖者、饲料生产厂广为接受，大面积推广，体现技术的实用性，真正产生技术的价值。

发明内容

针对上述现有技术存在的问题，本发明目的在于提供一种替代抗生素的微生物饲料添加剂及其制备方法，提高动物非特异免疫力，增强机体抗应激能力，激活动物生长潜能，全面提高生产性能，一揽子解决畜禽产品品质低下、风味缺失，仔猪腹泻、母猪便秘、鸡鸭粪便稀溏，饲料原料抗营养因子多、消化利用低的问题，提供替代抗生素、酶制剂、砷制剂、益生素的廉价简单实用方案。

本发明的技术方案是：一种替代抗生素的微生物饲料添加剂，组分及其重量百分比为：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)10-40％、酿酒酵母菌(Saccharomyce cerevisiae)10-40％、黑曲霉菌(Aspergillus niger)10-40％、米曲霉菌(Aspergillus oryzae)10-40％。

作为优选，组分及其重量百分比为：枯草芽孢杆菌25％、酿酒酵母菌25％、黑曲霉菌25％、米曲霉菌25％。

更进一步地，上述各方案中，所述各菌种均由母种经固态发酵成的生产种再经固态发酵而成，其生产种培养基的组分及其重量百分比为：麦麸60％、玉米25％、豆粕10％、棉粕5％。

作为优选，所述各菌种生产种的培养条件为：将培养基放入杀菌釜在1MPa气压下湿热灭菌1小时，冷却到35℃以后，用灭菌好的适量玉米浆和冷开水将培养基调配至含水量在35％后，按1～3％重量比接种母种，再将培养基装入浅盘里，在35-40℃发酵48小时。

作为优选，所述各菌种均由母种经固态发酵成的生产种再经固态发酵而成，其菌种培养基的组分及其重量百分比为：麦麸65％、玉米20％、豆粕10％、棉粕5％。

作为优选，所述各菌种的培养条件为：将培养基用灭菌好的适量玉米浆和冷开水调配至含水量在35％后，按5～10％重量比接种生产种，再将培养基装入发酵池里，在35-40℃发酵48小时，发酵完成后将菌种自然晒干或热风吹干。

作为优选，所述各菌种的母种为液态发酵而成，其枯草芽孢杆菌母种培养基的重量百分比组成为：1％葡萄糖、0.3％牛肉膏、1％蛋白胨、0.5％食盐，余量为开水；其酿酒酵母菌母种培养基的组分及其重量比为：糖化麦芽汁∶玉米浆＝100∶1；其黑曲霉和米曲霉母种培养基的组分及其重量比为：土豆汁∶葡萄糖∶玉米浆＝100∶2∶1。

一种替代抗生素的微生物饲料添加剂的制备方法，步骤为：

(1)、制备母种：

制备枯草芽孢杆菌母种：母种培养基组分及其重量百分比为：1％葡萄糖、0.3％牛肉膏、1％蛋白胨、0.5％食盐，最后加开水调至所需容积，培养液在120℃高温灭菌20分钟，冷却到35℃以后，按1～3％重量比接种菌株，在30-35℃恒温培养培养36-48小时；

制备酿酒酵母菌母种：母种培养基的组分及其重量比为：糖化麦芽汁∶玉米浆＝100∶1，培养液在120℃高温灭菌20分钟，冷却到35℃以后，按1～3％重量比接种菌株，在30-35℃恒温培养培养24-36小时；

制备黑曲霉和米曲霉母种：母种培养基的组分及其重量比为土豆汁∶葡萄糖∶玉米浆＝100∶2∶1，培养液在120℃高温灭菌20分钟，冷却到35℃以后，按1～3％重量比接种菌株，在30-35℃恒温培养培养36-72小时；

(2)、制备各菌种的生产种：

培养基组分及其重量百分比组成为：麦麸60％、玉米25％、豆粕10％、棉粕5％，将培养基放入杀菌釜在1MPa气压下湿热灭菌1小时，冷却到35℃以后，用灭菌好的适量玉米浆和冷开水将培养基调配至含水量在35％后，按1～3％重量比接种母种，再将培养基装入浅盘里，在35-40℃发酵48小时；

(3)、制备各菌种：

培养基组分及其重量百分比为：麦麸65％、玉米20％、豆粕10％、棉粕5％，将培养基用灭菌好的适量玉米浆和冷开水将培养基调配至含水量在35％后，按5～10％重量比接种生产种，再将培养基装入发酵池里，在35-40℃发酵48小时，发酵完成后将菌种自然晒干或热风吹干；

(4)、制备微生物发酵床菌种：

将前述步骤(3)中制得的枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌、黑曲霉菌和米曲霉菌按一定比例混合均匀即得本发明的一种替代抗生素的微生物饲料添加剂，其重量百分比为：枯草芽孢杆菌10-40％、酿酒酵母菌10-40％、黑曲霉菌10-40％、米曲霉菌10-40％。

本发明制作母种的接种菌株由市售购得，优选为：

枯草芽孢杆菌菌株：从中国工业微生物菌种保藏中心购买的20037菌种；

酿酒酵母菌菌株：从中国工业微生物菌种保藏中心购买的31011菌种；

黑曲霉菌株：从中国工业微生物菌种保藏中心购买的40072、40073菌种；

米曲霉菌株：从中国工业微生物菌种保藏中心购买的40001菌种。

本发明的有益效果是：

核心功效：提高动物非特异免疫力，增强机体抗应激能力，激活动物生长潜能，全面提高生产性能。是一揽子解决畜禽产品品质低下、风味缺失，仔猪腹泻、母猪便秘、鸡鸭粪便稀溏，饲料原料抗营养因子多、消化利用低的廉价简单实用方案。能有效替代抗生素、酶制剂、砷制剂、益生素。

主要功效：

①含有呈味物质，促进动物采食、补血健胃、解僵止泻。

②显著提高日增重、生长速度、成活率和整齐度，减少僵猪、弱猪数量和死淘率。实现提前出栏。

③提高饲料消化利用率、大幅度降低料肉比、料蛋比、饵料系数(约5-12％)。

④提高产蛋率、增加蛋重和延长产蛋高峰期约一个月左右，可以使产蛋率处于下降通道的蛋鸡产蛋率再度适度回升。

⑤广谱抗菌：对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和多种病毒均有广谱和而强效的杀灭作用，有效防治呼吸道和消化道疾病，是防治混合感染的最佳选择。

⑥产生非特异性免疫调节因子，提高动物免疫能力。

⑦提高动物健康程度，增强抗应激能力，改善动物外观。

⑧改善动物生殖能力、好配种。

⑨可有效改善动物胃肠道微生态环境、抑制病原菌、抑制恶臭和苍蝇等虫害发生，粪便成型光润，能有效防止防止仔猪腹泻、母猪便秘、鸡鸭粪便稀溏。

⑩改善肉质、蛋质颜色及口感：使肉质红润、蛋清浓稠、蛋黄鲜艳，肉、蛋口感更厚实和耐咀嚼。

本发明的优点：

1、安全可靠：所选用菌株是农业部农业部105号公告允许使用的微生物饲料添加剂菌种，也是美国食品与药物管理局(FDA)批准用作直接饲喂的微生物。

2、成本低廉、节能环保、工艺简单可控，适合国内养殖生产的实际情况，解决了长期以来国内养殖面临的技术与实际的脱节问题，真正使得技术得以被接受和实施，产生技术的巨大经济、社会效益：由于在菌种培育阶段，发酵培养基以廉价可得的农副产品麸皮为主，玉米、豆粕、棉粕等饲料用粮为辅，成本低廉。而且采用固态发酵具有节水、节能，工艺简单可控的独特优势，属于清洁生产技术。最后的产物养殖使用方便，养殖户乐于使用，且效果良好。

3、产物浓度高、代谢产物、生物活性物质多、各种生长因子含量丰富。

4、所选用菌株功能独特：

芽孢杆菌的生理学特性很广，包括：

①降解动植物来源的大分子物质如：纤维素、淀粉和蛋白质等；

②产生抗菌素。已记载的芽孢杆菌生产的抗菌素就有169种，仅枯草芽孢杆菌就产生68种抗菌素。这些抗菌素主要是肽类，多作用于革兰氏阳性细菌；

③硝化作用；

④反硝化作用；

⑤固氮；

⑥沉淀铁离子；

⑦还原硒和镁离子等。

⑧耐高温、抗辐射。

酵母菌天然特性：

①蛋白质含量高

②核酸、维生素、微量元素丰富

③具有多种酶类

④酵母菌细胞壁具有多种活性物质

⑤酵母菌还含有丰富的酶类，如胃蛋白酶、淀粉酶等

黑曲霉的特点：

生长过程中产生淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、葡萄糖氧化酶、柠檬酸、葡糖酸和没食子酸等

米曲霉的特点：

是一类产复合酶的菌株，除产蛋白酶外，还可产淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、植酸酶等。

5、克服了现有技术的误区和偏见，取得预料不到的技术效果：

A、跳出了中国饲料界人为的把酶制剂和益生菌划分的误区，实际上益生菌和产酶菌没有截然的界限：芽孢杆菌、酵母菌在生产过程也产生大量酶，黑曲霉、米曲霉不仅是产生多种酶，而且其菌体也起益生菌的作用。

B、跳出了国内生产饲料益生菌、酶制剂遵循所谓的“纯菌”、“精酶”的教条约束：不进行所谓的“提取”。益生菌生产过程中的提纯生产“纯菌”，实质是将发酵里大量产生的大量酶、抗菌肽、核酸、维生素等活性物质和培养基中营养成份统统作为杂质除掉，酶制剂生产过程中的提纯生产“精酶”“单酶”，实质是将其它的酶连同菌体、培养基中营养成份，统统作为杂质除掉，实在是极大的浪费：因为这些活性物质既是动物生长最好的营养，也是动物增强免疫力的最好物质。而发酵用原料产用的饲料原料，本身动物就可直接食用。这种提纯，既不应该，也没必要，得不丧失：发酵的饲料原料既构成微生物的生活环境，大大提高微生物的各种性能，同时又作为饲料使用，经过微生物处理，富含营养，更易吸收等，两者的结合使得其各自发挥了远超原来的作用，相互构成的系统又发挥了预料不到的效果。

C、固态发酵起源于中国，具有几千年的历史。在中国，固态发酵，特别是传统固态发酵是发酵工业中古老而又落后工艺的代名词。甚至，在发酵工程或生化工程的教科书中，也很少提到固态发酵。在我们盲目将“液态发酵”视为现代科技，对固态发酵不屑一顾的时候，具有讽刺意味的是：固态发酵法也受到美法荷等国的青睐，他们也在探索应用固态发酵法生产酶制剂，有的已形成生产规模。已“中为洋用”：固态发酵产品如奥特奇公司的特威宝SSF在中国大为畅销。但实际上固态发酵、液态发酵优劣互有，现代固态发酵法里也有液态发酵过程。本发明传承中国传统固态发酵之精髓，吸收西方液态发酵之长处，应用现代微生物学，选育菌种，并不断纯化、复壮，经液、固培养发酵，低温干燥等生产工艺生产。最后均采用现代固态发酵体系，产品是非遗传修饰的、采用天然方法生产的具有独特特性的多酶复合物和多菌复合物；

与液体深层发酵法生产的菌(酶)相比，发酵底物更接近饲粮，作用更自然、更适合对各种天然饲料降解。

与液体深层发酵法生产的菌(酶)相比，具有良好的物理化学特性，包括耐热性提高。

与液体深层发酵法生产的菌(酶)相比，微生物是在接近于自然条件的状况下生长，产生一些液体培养中产生不了的酶和其它生物活性物质。

与液体深层发酵法生产的菌(酶)相比，菌(酶)活力更高、更能在小肠复杂的底物环境中保持强大的活性。

保证了所研制的饲用微生物添加剂产品含活菌量高、活性强、休眠状态好，复苏繁殖快、效果好等特点；

保证了所研制的饲用微生物添加剂产品酶活高，对应底物广，应用效果显著，其产品安全高效、无残留、无毒副作用。

6、配伍独特：众所周知，微生物的配比无法像普通无机、有机般较随意的混合搭配即可，出于生物的特性，微生物间会有不同的协同乃至抑制作用，搭配得当，相互协同形成共生发展的微生物群落，反之则某种、某几种微生物无法发挥作用乃至无法成活，同时研究其配比与其食物链、依存抑制关系，使得各种微生物间构成最佳生物群落，这是微生物技术的关键，是最为体现创造性的所在。本发明提供的微生物发酵床菌种及其制备方法经反复的研究、试验，挑选合适的菌种及其恰当的配比，用芽孢杆菌、酵母菌、黑曲霉、米曲霉合理搭配，利用芽孢杆菌产生抗菌素的特点替代抗生素；利用酵母菌细胞壁具有多种活性物质提高动物免疫力，减低疾病发生率；利用黑曲霉、米曲霉产生大量的酶，提高饲料消化利用率，发挥1+1＞2的微生物协同作用，形成有效的益生微生物群落。

具体实施方式

一种替代抗生素的微生物饲料添加剂的制作方法，其步骤为：

(1)制备母种：

制备枯草芽孢杆菌母种：母种培养基的组分及其重量百分比组成为：1％葡萄糖、0.3％牛肉膏、1％蛋白胨、0.5％食盐，最后加开水调至所需容积，培养液在120℃高温灭菌20分钟，冷却到35℃以后，按1～3％重量比接种菌株，在30-35℃恒温培养培养36-48小时；

制备酿酒酵母菌母种：母种培养基的组分及其重量比组成为：糖化麦芽汁∶玉米浆＝100∶1，培养液在120℃高温灭菌20分钟，冷却到35℃以后，按1～3％重量比接种菌株，在30-35℃恒温培养培养24-36小时；

麦芽汁的制备方法：用需要的麦芽汁剂量2倍的水、0.5倍的麦芽：在55-63℃糖化4-6小时后用四层纱布过滤即成麦芽汁滤液(用0.02摩尔/升碘液测定为黄色至无色时，糖化结束)，用波美比重计检测糖化液中糖浓度，将滤液用水稀释到10～15波林，调pH至6.4。

制备黑曲霉和米曲霉母种：母种培养基的组分及其重量比组成为：土豆汁∶葡萄糖∶玉米浆＝100∶2∶1，培养液在120℃高温灭菌20分钟，冷却到35℃以后，按1～3％重量比接种菌株，在30-35℃恒温培养培养36-72小时；

土豆汁的制备方法：将土豆去皮、去芽，称重(需要达到需制作溶液量20％的重量)，切成0.5厘米厚片，加水至需要溶液量，煮沸20～30分钟(能被玻璃棒戳破即可)后，四层纱布过滤即得土豆汁，补足水分至需要溶液量。

(2)、制备各菌种的生产种：

培养基的组分及其重量百分比组成为：麦麸60％、玉米25％、豆粕10％、棉粕5％，将培养基放入杀菌釜在1MPa气压下湿热灭菌1小时，冷却到35℃以后，用灭菌好的适量玉米浆(约10％)和冷开水将培养基调配至含水量在35％左右后，按1～3％重量比接种母种，再将培养基装入浅盘里，在35-40℃发酵48小时；

(3)、制备各菌种：

培养基的组分及其重量百分比组成为：麦麸65％、玉米20％、豆粕10％、棉粕5％，将培养基用灭菌好的适量玉米浆(约10％)和冷开水将培养基调配至含水量在35％左右后，按5～10％重量比接种生产种，再将培养基装入发酵池里，在35-40℃发酵48小时，发酵完成后将菌种自然晒干或热风吹干；

(4)、制备替代抗生素的微生物饲料添加剂：

将前述步骤(3)中制得的枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌、黑曲霉菌和米曲霉菌按一定配方混合均匀即得本发明的一种替代抗生素的微生物饲料添加剂，其重量百分比组成为：枯草芽孢杆菌10-40％、酿酒酵母菌10-40％、黑曲霉菌10-40％、米曲霉菌10-40％。

实施例1：

按上述方法制得一种替代抗生素的微生物饲料添加剂，其组分及其重量百分比组成为：枯草芽孢杆菌25％、酿酒酵母菌25％、黑曲霉菌25％、米曲霉菌25％。

试验例1

替代抗生素的微生物饲料添加剂应用在断奶仔猪上效果很好。

试验在陕西兴平市店张镇张兴社养猪场进行，时间为2009年7月13日至2009年11月21日。

1.试验材料与方法

1.1试验材料

上述生产的替代抗生素的微生物饲料添加剂。

1.2试验动物与分组

选用陕西兴平市店张镇张兴社养猪场10头胎次相近(3-5胎)、产期相近、产仔数相近的哺乳母猪PIC母猪，随机分为2个处理，即对照组和试验组。

1.3试验期：产仔至80日龄

1.4试验日粮设计根据断奶仔猪营养需要配制基础日粮，其营养水平与生产实践相接近，其原料组成和营养水平见表1。对照组：即基础日粮+抗生素；试验组：即基础日粮+上述生产的替代抗生素的微生物饲料添加剂，具体设计方案见表2。

2.饲养管理

2.1试验由专人负责，严格按照试验要求进行管理。

2.2每个保育栏的地板都装有板条，仔猪可通过饮水器和自动投料器进行自由饮水和采食，哺乳仔猪按7日龄开始补料(饲料外购)，30日龄一次断奶，断奶后赶走母猪，仔猪留原栏饲养。

2.3.试验操作规程

2.3.1以组为单位在30日龄和80日龄分别在晨前喂料前空腹称断奶窝重和试验结束窝重

2.3.2以组为单位详细记录仔猪的耗料量。

2.3.3以组为单位每天早晨详细记录每窝仔猪腹泻头、次，计算腹泻率。

2.3.4最后计算全期的平均日采食量、平均增重、腹泻率等生产性能指标。

表1基础日粮组成及营养水平

注：预混料含有维生素、微量元素。

表2试验设计

3.检测指标

生产性能：头均增重、头均采食量、腹泻率、头均治疗用药钱

4.结果分析

4.1对生产性能的影响

表3不同日粮对断奶仔猪生产性能的影响

试验结果见表3，与对照组比较，试验组的平均增重高于对照组，试验组头均增重比对照组高3.67％，饲料转化率试验组比对照组提高了1.65％。试验组腹泻率比对照组降低33.64％，差异显著，治疗用药钱试验组比对照组降低41.43％。

4.2经济效益分析

支出：由于试验组添加替代抗生素的微生物饲料添加剂2千克，每千克按20元计，每吨饲料成本增加40元，但对照组添加0.5千克金霉素，金霉素按1千克12元计，也需支出6元钱。即试验组比对照组多每吨饲料成本增加34元；

收入：同样饲喂1吨饲料，对照组、试验组分别可增重549.45、558.66千克，按出售价10元/千克仔猪价计算，试验组比对照组可多收入人民币92.1元；

综合效益：同样饲喂1吨饲料，试验组比对照组可多收入人民币：92.1元-34元＝58.1元。

节约：试验组比对照组平均每头猪可节约治疗用药钱5.32元。

综上所述，本发明生产的替代抗生素的微生物饲料添加剂为一种绿色饲料添加剂，具有提高动物抗病能力，降低料肉比、提高增重等生产性能的作用。

试验例2

替代抗生素的微生物饲料添加剂应用在鱼饲料上效果很好。

鱼饲料均为陕西省兴平市满堂红饲料有限责任公司生产，饲料里未添加任何抗生素，将上述方法生产的替代抗生素的微生物饲料添加剂在鱼饲料里按2kg/T添加。

1、宝鸡市眉县常兴镇南寨村村民李军林，养鱼鱼塘水面8亩，以鲤鱼为主，占90％，有10％花白鲢，池塘水深平均为1.4-1.6米，水源为地下井水，2009年5月6日放当年夏花1万尾，2009年10月11日卖鱼，共卖成鱼14400市斤，平均每尾重1.5市斤，全年共用满堂红饲料801、802、803套餐系列11.4吨，饵料系数不到1.6，鱼的体型标准，体色正常，鱼的活力程度高，鱼解剖后，肝胆色泽正常，健康，内腑分布条纹、大小合理，鱼背肉宽肉厚，销售的鱼获得了鱼商的欢迎，李军林也获得了很好的经济效益。

2、兴平市庄头渔场郭文刚，现有鱼塘8亩，2009年养鱼苗，水深1.2米，主养草鱼7万尾，套养500尾鲤鱼，8000尾花白鲢，草鱼于2009年5月15日入池，鲤鱼，花白鲢5月28日入池，共用料8.28吨(满堂红192型1吨，180型2吨，181型5.28吨)于当年11月8日草鱼苗出塘6300斤草鱼，2010年4月7日清塘后有草鱼4763斤，鲤鱼1051斤，花白鲢共计3625斤，计算饵料系数1.36，经济效益为历年最高。郭文刚对该料有这样的评价：鱼体质好，条形好，色泽好，耐运输，鱼体内脏分界鲜明。

3、山西省用户：荆洪发，家住山西省永济市栲栳镇文学乡大吕村，养殖水面10亩，水深1.5米左右，2009年1月份放鱼苗：草鱼16000尾，每条50克左右，鲤鱼6000尾，每条150克左右，全年用料802鲤鱼料(34蛋白)17吨，181草鱼料(30蛋白)13吨，出塘时间为2010年4月份，净产成鱼32500市斤，全程饵料系数为1.85左右，经济效益十分可观。鱼病大量减少，长势优良，而且耐越冬，运输，能力强。

试验例3

替代抗生素的微生物饲料添加剂应用在蛋鸡饲料上效果很好。

蛋鸡饲料为陕西省兴平市满堂红饲料有限责任公司生产，饲料里未添加任何抗生素，将上述方法生产的替代抗生素的微生物饲料添加剂在蛋鸡饲料里按2kg/T添加。

陕西省商南县张家岗三角池农场李传明养鸡场8000只海兰灰蛋鸡，从2010年3月产蛋高峰期使用添加了替代抗生素的微生物饲料添加剂的蛋鸡饲料饲料，产蛋率至到2010年7月30日仍维持在80％以上，整个鸡场鸡粪臭味大幅度降低，按他自己的说法：“以前鸡场几公里都闻得到鸡粪臭，现在到了鸡场墙边不听到鸡叫，还不知道这是鸡场，根本不敢相信里面养得有鸡，鸡发病大幅度下降”。而且鸡蛋比市场上所谓的“土鸡蛋”蛋清更浓稠、蛋黄更紧实、色泽更自然、味道更鲜嫩醇香，价格比其它鸡场的鸡蛋可多卖0.5元/斤，经济效益十分可观。

试验例4

在生长育肥猪、母猪、蛋鸡、肉鸡、肉鸭、鱼饲料里完全取代抗生素、酶制剂、砷制剂、益生素，经成都和谐生物科技有限公司、陕西省兴平市满堂红饲料有限责任公司、昆明金满堂饲料有限公司历经近一年，共3万吨饲料充分试验得到的结果是：料肉比、饵料系数均有比较大的降低，在5-12％左右，其促生长效果比抗生素更明显，试用户普遍反映，用不加抗生素而添加按本发明生产的替代抗生素的微生物饲料添加剂猪、鸡、鸭、鱼发病率比使用其它厂家添加抗生素的饲料猪、鸡、鸭、鱼发病率低，而且即使发病用抗生素治疗一治就好，而其它加抗生素的饲料喂猪、鸡、鸭、鱼不仅更容易生病，而且一旦生病用抗生素治疗无效，损失惨重。用不加抗生素而添加按本发明生产的替代抗生素的微生物饲料添加剂猪、鸡、鸭、鱼肉蛋色泽好、水分低，口感好，肉蛋风味明显。

实施例2：

按上述方法制得一种替代抗生素的微生物饲料添加剂，其组分及其重量百分比组成为：枯草芽孢杆菌40％、酿酒酵母菌40％、黑曲霉菌10％、米曲霉菌10％。

试验例5

替代抗生素的微生物饲料添加剂应用在猪浓缩饲料上效果很好。

猪浓缩饲料为陕西省兴平市满堂红饲料有限责任公司生产，饲料里未添加任何抗生素，将上述方法生产的替代抗生素的微生物饲料添加剂在猪浓缩饲料里按10kg/T添加。

陕西省澄县韦庄镇生猪养殖户邓永林2010年4月17日在洛南购良杂小猪104头，均重22市斤左右，同日购满堂红102#全价饲料50件，使用后长势料肉比为2.0∶1，后接着用满堂红999#浓缩饲料45件(用料配比按公司配方要求使用)采用自由采食槽，自由饮水，由于养殖期未结束，现观察结果为均重150-180市斤之间，养殖期为3个半月(105天)，效果好，养殖户十分满意。

实施例3：

按上述方法制得一种替代抗生素的微生物饲料添加剂，其组分及其重量百分比组成为：枯草芽孢杆菌10％、酿酒酵母菌10％、黑曲霉菌40％、米曲霉菌40％。

试验例6

礼泉县泔河水库网箱养殖：养殖户段广良，养网箱5*5*5/米叁个，2010年4月10日放鲤鱼苗(平均重量100克/尾)每箱约4500至5200尾，至今共用满堂红牌饲料193鲤鱼料8吨，194鲤鱼料6吨，2010年7月15日卖成鱼一箱7800市斤，剩下两箱估计有鱼13000至14000斤之间，长势非常明显，效益也高。卖掉之鱼，体型好，体色正常，活力程度高，耐长途运输，买家高兴，段广良也满意。

以上对本发明所提供的替代抗生素的微生物饲料添加剂及其制备方法进行了详尽介绍，本文中应用了具体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想；同时，对于本领域的一般技术人员，依据本发明的思想，在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处，综上所述，本说明书内容不应理解为对本发明的限制。

Claims (9)

1.一种替代抗生素的微生物饲料添加剂，其特征在于：组分及其重量百分比为：枯草芽孢杆菌10-40％、酿酒酵母菌10-40％、黑曲霉菌10-40％、米曲霉菌10-40％。

2.根据权利要求1所述的一种替代抗生素的微生物饲料添加剂，其特征在于：组分及其重量百分比为：枯草芽孢杆菌25％、酿酒酵母菌25％、黑曲霉菌25％、米曲霉菌25％。 

3.根据权利要求1或2所述的一种替代抗生素的微生物饲料添加剂，其特征在于：所述各菌种均由母种经固态发酵成的生产种再经固态发酵而成，其生产种培养基的组分及其重量百分比为：麦麸60％、玉米25％、豆粕10％、棉粕5％。 

4.根据权利要求3所述的一种替代抗生素的微生物饲料添加剂，其特征在于：所述各菌种生产种的培养条件为：将培养基放入杀菌釜在1MPa气压下湿热灭菌1小时，冷却到35℃以后，用灭菌好的适量玉米浆和冷开水将培养基调配至含水量在35％后，按1～3％重量比接种母种，再将培养基装入浅盘里，在35-40℃发酵48小时。 

5.根据权利要求1或2所述的一种替代抗生素的微生物饲料添加剂，其特征在于：所述各菌种均由母种经固态发酵成的生产种再经固态发酵而成，其菌种培养基的组分及其重量百分比为：麦麸65％、玉米20％、豆粕10％、棉粕5％。 

6.根据权利要求5所述的一种替代抗生素的微生物饲料添加剂，其特征在于：所述各菌种的培养条件为：将培养基用灭菌好的适量玉米浆和冷开水调配至含水量在35％后，按5～10％重量比接种生产种，再将培养基装入发酵池里，在35-40℃发酵48小时，发酵完成后将菌种自然晒干或热风吹干。 

7.根据权利要求4所述的一种替代抗生素的微生物饲料添加剂，其特征在于：所述各菌种的母种为液态发酵而成，其枯草芽孢杆菌母种培养基的重量百分比组成为：1％葡萄糖、0.3％牛肉膏、1％蛋白胨、0.5％食盐，余量为开水；其酿酒酵母菌母种培养基的组分及其重量比为：糖化麦芽汁∶玉米浆＝100∶1；其黑曲霉和米曲霉母种培养基的组分及其重量比为：土豆汁∶葡萄糖∶玉米浆＝100∶2∶1。 

8.根据权利要求6所述的一种替代抗生素的微生物饲料添加剂，其特征在于：所述各菌种的母种为液态发酵而成，其枯草芽孢杆菌母种培养基的重量百分比组成为：1％葡萄糖、0.3％牛肉膏、1％蛋白胨、0.5％食盐，余量为开水；其酿酒酵母菌母种培养基的组分及其重量比为：糖化麦芽汁∶玉米浆＝100∶1；其黑曲霉和米曲霉母种培养基的组分及其重量比为：土豆汁∶葡萄糖∶玉米浆＝100∶2∶1。 

9.一种替代抗生素的微生物饲料添加剂的制备方法，其特征在于步骤为： 

(1)、制备母种： 

制备枯草芽孢杆菌母种：母种培养基组分及其重量百分比为：1％葡萄糖、0.3％牛肉膏、1％蛋白胨、0.5％食盐，最后加开水调至所需容积，培养液在120℃高温灭菌20分钟，冷却到35℃以后，按1～3％重量比接种菌株，在30-35℃恒温培养培养36-48小时； 

制备酿酒酵母菌母种：母种培养基的组分及其重量比为：糖化麦芽汁∶玉米浆＝100∶1，培养液在120℃高温灭菌20分钟，冷却到35℃以后，按1～3％重量比接种菌株，在30-35℃恒温培养培养24-36小时； 

制备黑曲霉和米曲霉母种：母种培养基的组分及其重量比为土豆汁∶葡萄糖∶ 玉米浆＝100∶2∶1，培养液在120℃高温灭菌20分钟，冷却到35℃以后，按1～3％重量比接种菌株，在30-35℃恒温培养培养36-72小时； 

(2)、制备各菌种的生产种： 

培养基组分及其重量百分比组成为：麦麸60％、玉米25％、豆粕10％、棉粕5％，将培养基放入杀菌釜在1MPa气压下湿热灭菌1小时，冷却到35℃以后，用灭菌好的适量玉米浆和冷开水将培养基调配至含水量在35％后，按1～3％重量比接种母种，再将培养基装入浅盘里，在35-40℃发酵48小时； 

(3)、制备各菌种： 

培养基组分及其重量百分比为：麦麸65％、玉米20％、豆粕10％、棉粕5％，将培养基用灭菌好的适量玉米浆和冷开水将培养基调配至含水量在35％后，按5～10％重量比接种生产种，再将培养基装入发酵池里，在35-40℃发酵48小时，发酵完成后将菌种自然晒干或热风吹干； 

(4)、制备微生物发酵床菌种： 

将前述步骤(3)中制得的枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌、黑曲霉菌和米曲霉菌按一定比例混合均匀即得的一种替代抗生素的微生物饲料添加剂，其重量百分比为：枯草芽孢杆菌10-40％、酿酒酵母菌10-40％、黑曲霉菌10-40％、米曲霉菌10-40％。