CN101965192A - 改善的抗肿瘤治疗 - Google Patents

改善的抗肿瘤治疗 Download PDF

Info

Publication number
CN101965192A
CN101965192A CN2009801081376A CN200980108137A CN101965192A CN 101965192 A CN101965192 A CN 101965192A CN 2009801081376 A CN2009801081376 A CN 2009801081376A CN 200980108137 A CN200980108137 A CN 200980108137A CN 101965192 A CN101965192 A CN 101965192A
Authority
CN
China
Prior art keywords
acceptable salt
materia medica
cancer
gemcitabine
cisplatin
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN2009801081376A
Other languages
English (en)
Inventor
圣地亚哥·拉蒙-卡哈尔阿圭罗
哈维尔·埃尔南德斯洛塞
何塞M·希门尼斯唐纳凯
埃里克·雷蒙
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Pharmamar SA
Original Assignee
Pharmamar SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pharmamar SA filed Critical Pharmamar SA
Publication of CN101965192A publication Critical patent/CN101965192A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/28—Compounds containing heavy metals
    • A61K31/282—Platinum compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/436—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having oxygen as a ring hetero atom, e.g. rapamycin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/243—Platinum; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/15—Depsipeptides; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明涉及PM02734与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的另一种抗癌药物的组合，以及这些组合在治疗癌症中的用途。

Description

改善的抗肿瘤治疗
技术领域
本发明涉及PM02734与其它抗癌药物，特别是选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的其它抗癌药物的组合，以及这些组合在治疗癌症中的用途。
发明背景
当身体中的一部分细胞生长开始不受控制时产生癌症。尽管有许多种癌症，但它们都是由异常细胞的生长不受控制引发的。癌细胞能够侵入周围的组织，并且能够通过血流和淋巴系统扩散至身体的其它部分。癌症有几种主要的类型。恶行上皮肿瘤是一种产生于上皮细胞的恶性肿瘤，其不可控制且进行性异常生长。上皮细胞覆盖身体的内外表面，包括器官、血管内膜(lining of vessels)以及其它小腔室。肉瘤是骨骼、软骨、脂肪、肌肉、血管或其它结缔组织和支持组织中的细胞产生的癌症。白血病是形成血液的组织，如骨髓中发生的癌症，白血病导致产生大量异常的血细胞并进入血流。淋巴瘤和多发性骨髓瘤是由免疫系统的细胞产生的癌症。
此外，癌症具有浸润性并趋向于渗入到周围的组织，导致转移。癌症能够直接扩散进入周围的组织，而且还可以通过淋巴系统和循环系统扩散到身体的其它部分。
许多治疗方法可用于癌症，包括对局部病灶的手术和放疗，以及化疗。然而，现有的治疗方法对多种类型癌症的功效是有限的，需要新的显示临床效果的改进的治疗形式。这对于患有晚期和/或转移性疾病，以及之前已经用已有的疗法治疗又复发进行性疾病的那些患者尤为正确，由于形成耐药性或由于因相关的毒性使治疗的使用受限，已有疗法变得无效或难以忍受。
自从20世纪50年代，在癌症的化疗控制方面已经取得了显著的进步。不幸的是，所有癌症患者中50％以上对于初始治疗没有应答或在对治疗的初始应答后发生复发，并最终死于进行性转移疾病。因此，目前进行的设计和发现新的抗癌药物是非常重要的。
经典形式的化疗主要注重于通过以一般的细胞代谢过程，包括DNA、RNA和蛋白质的生物合成为靶点，杀死快速增殖的癌细胞。根据化疗药物如何影响癌细胞中的特定化学物质，药物干扰何种细胞活动或过程，药物影响细胞周期中的哪个特定阶段将化疗药物分成几类。最常用的化疗药物的类型包括DNA烷基化剂(如环磷酰胺、异环磷酰胺、顺铂、卡铂、氮烯咪胺)，抗代谢物(5-氟尿嘧啶、卡培他滨、6-巯基嘌呤、甲氨蝶呤、吉西他滨、阿糖胞苷、氟达拉滨)，有丝分裂抑制剂(如紫杉醇、多西紫杉醇、长春花碱、长春新碱)，蒽环类抗生素(如柔红霉素、阿霉素、表柔比星、伊达比星、米托蒽醌)，拓扑异构酶I和II抑制剂(如托泊替康、伊立替康、依托泊苷、替尼泊苷)以及激素疗法(如它莫西芬、氟他胺)。
理想的抗癌药物将选择性地杀死细胞，具有相对于非癌细胞的毒性更宽的指数，并且即使在长时间暴露于药物之后，也保留其对癌细胞的功效。不幸的是，目前的采用这些药物的化疗都不具有理想的性质。大多数具有很窄的治疗指数，此外当癌细胞暴露于稍低于致死浓度的化疗药物中时就可能形成对这一药物的耐药性，并常常形成对几种其它抗肿瘤药物的交叉耐药性。
PM02734((4S)-MeHex-D-Val-L-Thr-L-Val-D-Val-D-Pro-L-Orn-D-别-Ile-环(O-别-Thr-D-别-Ile-D-Val-L-Phe-Z-Dhb-L-Val))是与kahalalide化合物家族有关的新型合成缩酚酸肽。该化合物是WO2004/035613的主题并且具有如下结构：
Figure BPA00001214605000031
Kahalalide化合物为最初从夏威夷的食草海洋软体动物物种Elysia rufescens及其食物Briopsis属绿藻分离的环状缩酚肽。Hamann等(J.Am.Chem.Soc.1993，115，5825-5826和J.Org.Chem.1996，61，6594-6600)描述了Kahalalide A-G，并且它们中的多数显示出抗癌活性以及抗与艾滋病相关的机会性感染的活性。一些其它的天然kahalalide化合物也已经被公开，如Scheuer等公开了kahalalide H和J(J.Nat.Prod.1997，60，562-567)，Scheuer等公开了kahalalide O(J.Nat.Prod.2000，63(1)，152-154)，Kan等公开了kahalalide K(J.Nat.Prod.1999，62(8)，1169-1172)。
在天然来源的kahalalide化合物中，kahalalide F由于其抗肿瘤活性而最具前景。EP610.078报道早期临床前体外筛选研究鉴定了kahalalide F抗小鼠白血病(P388)和两种人实体瘤：非小细胞肺癌(A459)和结肠癌(HT-29)的微摩尔活性。kahalalide F作用的主要机制还未被识别，然而已经发现kahalalide F为诱导亚G1期阻滞和独立地诱导MDR、Her2、P53和blc-2的细胞毒性的NCI-COMPARE化合物(Janmaat等，Proceedings of the 2nd International Symposium on Signal Transduction Modulators in Cancer Therapy：23-25October，Amsterdam 2003：60(Abst.B02))。从遗传学和分子水平，特异性针对细胞增殖途径的一组60种人癌细胞系中的COMPARE分析已经将kahalalide F包括在与Ebr/Her-neu途径相互作用的新的化学实体的列表中(Wosikowski等，J.Natl.Cancer Inst.1997，89，1505-1515)。在一组已知的不同来源的细胞系中，kahalalide F的敏感性与EbrB3(HER3)的基线表达水平显著相关，但与其它ErbB3受体无关。此外，与ErbB3受体耦合的下游P13K/Akt途径也受到kahalalide F处理的影响。kahalalide F降低了磷酸化Akt的水平，并且这种降低与kahalalide F敏感细胞系中的细胞毒性有关(Janmaat等，Mol Pharmacol 2005，68，502-510)。
PM02734已经在体外癌症模型中显示出显著改善的功效，该功效与采用天然来源的kahalalide化合物，特别是kahalalide F观察到的那些活性相关。已经证实PM02734在体外具有对抗广谱肿瘤类型的抗肿瘤活性，如白血病、黑色素瘤、乳腺癌、结肠癌、卵巢癌、胰腺癌、肺癌和前列腺癌，并且在使用人肿瘤细胞类型，如乳腺癌、前列腺癌和黑色素瘤的异种移植鼠类模型中显示出明显的体内活性。此外，在PCT/US08/80309中，评估了PM02734与EGFR酪氨酸激酶抑制剂，特别是埃罗替尼联合，用于治疗肺癌。
关于PM02734和其它kahalalide化合物，特别是kahalalide F及其类似物，它们的用途、制剂和合成的更多信息可以见于专利申请EP610.078、WO2004/035613、WO01/58934、WO2005/023846、WO2004/075910、WO03/033012、WO02/36145、WO2005/103072和PCT/US08/80309。我们通过特定地参考将引入每一个申请文本。
由于癌症是动物和人类死亡的首要原因，为了获得有效且安全的向患有癌症的患者实施的治疗手段，许多努力已经并且仍在进行。本发明解决的问题是提供有助于癌症治疗的抗癌疗法。
发明概述
我们已经确定PM02734能够增强其它抗癌药物，特别是顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的效能，因此它们可以成功地用在用于治疗癌症的联合治疗中。
因此，本发明涉及将这些联合治疗用于治疗癌症的药物组合物、试剂盒、方法以及PM02734在制备用于联合治疗的药物中的用途。
根据本发明的一个方面，我们提供了基于PM02734并使用选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的另一种抗癌药物的用于治疗癌症的有效的联合治疗。
在另一个实施方案中，本发明包括一种治疗癌症的方法，该方法包括给予需要这种治疗的患者治疗有效量的PM02734或其药物学上可接受的盐，以及在给予PM02734之前、之中或之后给予治疗有效量的选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物。两种药物可以形成同一组合物的一部分，或者作为用于在相同时间或不同时间给药的单独的组合物来提供。
在另一方面，本发明包括一种增加选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的抗癌药物，在癌症治疗中的治疗效力的方法，该方法包括给予需要这种治疗的患者治疗有效量的PM02734或其药物学上可接受的盐。在给予顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼之前、之中或之后给予PM02734。
在另一个实施方案中，本发明包括PM02734或其药物学上可接受的盐在制备治疗癌症的药物中的用途，其中PM02734或其药物学上可接受的盐与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的另一种抗癌药物联合治疗。
在相关的实施方案中，本发明包括选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的抗癌药物在制备用于治疗癌症的药物中的用途，该抗癌药物与PM02734联合治疗。
在还一方面，本发明包括包含PM02734或其药物学上可接受的盐，和/或选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物的药物组合物，该药物组合物用于治疗癌症的联合治疗。
本发明还包括一种用于治疗癌症的试剂盒，其包括PM02734剂型或其药物学上可接受的盐的剂型，和/或选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物的剂型，以及关于两种药物组合使用的说明书。
在一个优选的方面，本发明涉及PM02734或其药物学上可接受的盐与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物的协同组合。
附图说明
图1PM02734与奥沙利铂的组合在DU145细胞系中的作用。A)PM02734先于奥沙利铂给药；B)奥沙利铂先于PM02734给药；C)PM02734与奥沙利铂同时给药。
图2PM02734与奥沙利铂的组合在Colo205细胞系中的作用。A)PM02734先于奥沙利铂给药；B)奥沙利铂先于PM02734给药；C)PM02734与奥沙利铂同时给药。
图3PM02734与顺铂的组合在DU145细胞系中的作用。A)PM02734先于顺铂给药；B)顺铂先于PM02734给药；C)PM02734与顺铂同时给药。
图4PM02734与5-FU的组合在DU145细胞系中的作用。A)PM02734先于5-FU给药；B)5-FU先于PM02734给药；C)PM02734与5-FU同时给药。
图5PM02734与5-FU的组合在Colo205细胞系中的作用。A)PM02734先于5-FU给药；B)5-FU先于PM02734给药；C)PM02734与5-FU同时给药。
图6PM02734与吉西他滨的组合在DU145细胞系中的作用。A)PM02734先于吉西他滨给药；B)吉西他滨先于PM02734给药；C)PM02734与吉西他滨同时给药。
图7PM02734与曲贝替定的组合在DU145细胞系中的作用。A)曲贝替定先于PM02734于给药；B)PM02734与曲贝替定同时给药。
图8PM02734与雷帕霉素的组合在DU145细胞系中的作用。A)PM02734先于雷帕霉素给药；B)雷帕霉素先于PM02734给药；C)PM02734与雷帕霉素同时给药。
图9PM02734与雷帕霉素的组合在Colo205细胞系中的作用。A)PM02734先于雷帕霉素给药；B)雷帕霉素先于PM02734给药；C)PM02734与雷帕霉素同时给药。
图10PM02734与舒尼替尼的组合在DU145细胞系中的作用。A)PM02734先于舒尼替尼给药；B)舒尼替尼先于PM02734给药；C)PM02734与舒尼替尼同时给药。
图11PM02734与舒尼替尼的组合在Colo205细胞系中的作用。A)PM02734先于舒尼替尼给药；B)舒尼替尼先于PM02734给药。
发明详述
我们惊奇地发现顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼与PM02734组合时抗肿瘤活性大大增强。因此，本发明涉及提供一种基于PM02734与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的另一种抗癌药物的组合对癌症的有效治疗方法。
在本申请中，“癌症”意指包括肿瘤、瘤变以及任何其他引起恶性组织或细胞的疾病。
本发明使用的术语“医治(treating)”，除非特别指明，是指逆转、缓解、抑制该术语针对的障碍或病症的进程，或预防所述障碍或病症，或所述障碍或病症的一种或多种症状。本发明使用的术语“治疗(treatment)”，除非特别指明，是指正如上文定义的医治的行为。
贯穿本说明书使用的术语“组合”是指包括在相同的时间或不同的时间，以同一药物制剂或单独的药物制剂给予患有癌症的患者所述的治疗剂。如果在不同的时间给予治疗剂，它们的给药时间应足够接近用于产生协同反应的时间。
如上所述，PM02734((4S)-MeHex-D-Val-L-Thr-L-Val-D-Val-D-Pro-L-Orn-D-别-Ile-环(O-别-Thr-D-别-Ile-D-Val-L-Phe-Z-Dhb-L-Val))是具有如下结构的合成缩酚酸肽：
此处术语“PM02734”意在涵盖任何药物学上可接受的盐、酯、溶剂化物、水合物、前体药物或一旦对患者给药就能够提供(直接地或间接地)本发明所述的化合物的任何其它化合物。可以通过本领域已知的方法进行盐、酯、溶剂化物、水合物、前体药物和衍生物的制备。
作为PM02734的前体药物的任何化合物在本发明的范围和精神内。以最宽泛的含义使用术语“前体药物”，其包括体内转化成PM02734的那些衍生物。前体药物可以水解、氧化或以其它方式在生物条件下反应提供PM02734。本领域技术人员很容易想到这些衍生物，并且包括例如其中的游离羟基被转化成酯衍生物的化合物。
用于本发明的PM02734可以按照以下合成过程来制备，如WO2004/035613、WO2005/103072、WO01/58934和WO2005/023846中公开的那些，通过引用的方式并入本发明。
可以使用的PM02734或其药物学上可接受的盐的药物组合物包括溶液、混悬液、乳液、冻干组合物等，其具有适用于静脉给药的赋形剂。关于PM02734或其药物学上可接受的盐的药物组合物的进一步说明，参见例如WO2004/035613中描述的制剂，其整体通过引用结合于此。
PM02734或其药物学上可接受的盐，或包含该化合物的药物组合物优选通过静脉输注给药。可以使用的输注时间高达72小时，更优选1至24小时，最优选约1小时或约3小时。短的输注时间使得进行的治疗无需在医院过夜停留，这点特别可取。然而，输注可以为大约24小时或者如果需要甚至更久。
优选地，PM02734的给药周期进行。在优选的实施方法中，每个周期的第一周给予患者静脉输注PM02734，并且使患者在周期的剩余时间恢复。优选的每个周期的持续时间为1、3或4周。如果需要，可以进行多个周期。在可选的服药方案中，PM02734每3或4周连续5天给药约1小时。其它方案可以根据变化进行调整。关于PM02734给药和剂量的进一步说明参见例如WO2004/035613，其通过引用结合于此。
顺铂是具有以下结构式的无机铂药物：
Figure BPA00001214605000101
顺铂形成高反应性、带电的铂复合物，其与亲核基团结合，如DNA中富含GC的位点，诱导DNA链内和链间交联，以及DNA-蛋白质交联。这些交联导致细胞凋亡和细胞生长抑制。该药物最常用于治疗睾丸癌、膀胱癌、肺癌、食道癌(食管癌)、胃癌和卵巢癌。通常，通过静脉输注给药，剂量取决于使用的进度。关于该药物的信息可以从大量现存的关于顺铂的文献中得到。
吉西他滨是具有以下结构式的核苷类似物：
Figure BPA00001214605000102
该药物以其盐酸盐的形式出售，商品名为建
Figure BPA00001214605000103
Figure BPA00001214605000104
目前，该药物适用于治疗某些类型的癌症，具体是用于卵巢癌、乳腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)和胰腺癌。作为单一药物，推荐吉西他滨通过静脉输注给药，剂量为1000mg/m2，每周1次超过30分钟，长达7周，之后停止治疗一周。随后的周期应包括每4周中连续3周输注，每周1次输注。关于该药物的信息可以从网站www.gemzar.com以及从大量关于吉西他滨的文献中获得。
吉西他滨表现出细胞周期特异性，主要杀死经历DNA合成(S期)的细胞，并且还通过G1/S期界限阻断细胞前进。吉西他滨在细胞内被核苷激酶代谢成具有活性的二磷酸核苷(dFdCDP)和三磷酸核苷(dFdCTP)。吉西他滨的细胞毒性作用归因于二磷酸核苷和三磷酸核苷的两种作用的组合，导致DNA合成的抑制。首先，吉西他滨二磷酸抑制核糖核苷酸还原酶，该酶负责催化生成用于DNA合成的脱氧核苷三磷酸的反应。二磷酸核苷对该酶的抑制导致包括dCTP的脱氧核苷酸的浓度降低。其次，吉西他滨三磷酸与dCTP竞争结合到DNA中。细胞内dCTP浓度的降低(由于二磷酸的作用)促进了吉西他滨三磷酸结合到DNA中(自身增强)。在吉西他滨核苷酸结合到DNA之后，只有一种额外的核苷酸被添加到延长的DNA链。这种添加之后，进一步的DNA合成被抑制。DNA聚合酶ε不能去除吉西他滨核苷酸并修复延长的DNA链(遮蔽的链末端)。在CEMT类淋巴母细胞中，吉西他滨诱导DNA核小体间断裂，其是细胞程序性死亡的特征之一。
紫杉醇是具有以下结构式的天然产物：
紫杉醇
Figure BPA00001214605000112
为促进由微管蛋白二聚体组装成微管并通过阻止解聚来稳定微管的微管药物。这种稳定性导致微管网络的正常动态重组被抑制，该微管网络对于生命间期(vital interphase)和细胞有丝分裂功能必不可少。此外，它诱导整个细胞周期中的微管异常排列或成“束”，以及诱导在有丝分裂期间出现多个微管星体。
紫杉醇适用于治疗卵巢癌、乳腺癌和肺癌以及与艾滋病相关的卡波济氏肉瘤。它通常通过静脉输注以一剂量给药，剂量取决于使用的进度。关于该药物的信息可以从现存的关于紫杉醇的大量文献中获得。
舒尼替尼是具有以下结构式的多种激酶抑制剂：
Figure BPA00001214605000121
该药物以其苹果酸盐的形式出售，商品名为索
Figure BPA00001214605000122
Figure BPA00001214605000123
目前，它被指明用于治疗某些类型的癌症，特别是用于胃肠道间质瘤(GIST)和肾细胞癌。作为单一药物，推荐剂量为每天每次口服剂量50mg，进度为治疗4周后停用2周。根据个体安全性和耐受性，推荐的增减剂量为12.5mg。关于该药物的信息可以从网站www.sutent.com和关于舒尼替尼的大量文献中获得。
奥沙利铂为与顺铂相同的家族中的铂基化疗药物。与顺铂相比，奥沙利铂中的两个胺基被环己基二胺取代用于提高抗肿瘤活性。此外，为了提高水溶性，顺铂的氯配合基被由草酸生成的草酸酯双配位基取代。
该药物以商品名乐沙
Figure BPA00001214605000132
Figure BPA00001214605000133
出售，并通常与5-氟尿嘧啶和甲酰四氢叶酸组合给药，用于治疗结肠直肠癌。关于该药物的信息可以从网址www.eloxatin.com和大量关于奥沙利铂的文献中获得。
5-氟尿嘧啶(氟尿嘧啶，5-FU)是属于被称为抗代谢物家族的嘧啶类似物。
Figure BPA00001214605000134
5-氟尿嘧啶用于治疗癌症已有约40年了。它的一些主要用途在于治疗结肠直肠癌和胰腺癌，其中它已经形成化疗形式达数十年。该药物以多种方式起作用，但是主要是作为胸苷酸合成酶抑制剂。阻断该酶的作用就阻断嘧啶胸腺嘧啶的合成，胸腺嘧啶是DNA复制所需的核苷酸。像多数抗癌药物，5-FU的作用被认为是全身性的，但是最主要作用于大量利用核苷酸合成机制的快速分裂的细胞，如癌细胞。有关该药物的进一步信息可以从关于5-氟尿嘧啶的大量文献中获得。
雷帕霉素还被称为西罗莫司，是作为细菌吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)的产物被首次发现的大环内酯。
Figure BPA00001214605000141
雷帕霉素最初被开发为抗真菌剂。然而，当它被发现具有强效的免疫抑制和抗增殖特性时，就不再作为抗真菌剂了。雷帕霉素的抗增殖作用在治疗癌症中发挥作用。关于该药物的信息可以从网站www.rapamune.com和大量有关雷帕霉素的文献中得到。
曲贝替定还被称为ET-743，是来自海洋的抗肿瘤药物，它是在被囊动物加勒比海海鞭子(Ecteinascidia turbinata)中首次发现的。
Figure BPA00001214605000142
该药物以商品名
Figure BPA00001214605000143
出售，用于治疗软组织肉瘤。它还在进行用于治疗卵巢癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌和儿科肿瘤的临床试验。它结合到DNA的小沟，并干扰细胞分裂和基因转录过程以及DNA修复机制。关于该药物的信息可以从网址www.yondelis.com和大量关于曲贝替定的文献中获得。
本发明指出的药物的药物学上可接受的盐作为本发明的组合的一部分，它是由母体化合物通过常规化学方法合成的，包含一个碱性或酸性部分。通常，例如，这种盐通过这些化合物的游离酸或碱形式与化学当量的适宜的碱或酸在水中或有机溶剂中，或两者的混合物中反应来制备。通常，非水介质像醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈是优选的。酸加成盐的例子包括矿物酸加成盐比如，例如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐，和有机酸加成盐比如，例如乙酸盐、三氟乙酸盐、马来酸盐、延胡索酸盐、柠檬酸盐、草酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、苹果酸盐、扁桃酸盐、甲烷磺酸盐和对-甲苯磺酸盐。碱加成盐的例子包括无机盐比如，例如钠、钾、钙和铵盐，有机碱盐比如，例如乙二胺盐、乙醇胺盐、N，N-二烯基乙醇胺盐、三乙醇胺盐和碱性氨基酸盐。
此外，本发明所指的任何药物可以是结晶形式的，或作为游离化合物或作为溶剂化物(例如水合物)，意在将两种形式都包括在本发明的范围内。溶剂化的方法是本领域中通常已知的。
根据肿瘤的类型和疾病的发展阶段，本发明的治疗方法的抗癌效果包括但不限于，肿瘤生长的抑制、肿瘤生长的延迟、肿瘤的衰退、肿瘤的收缩、停止治疗后肿瘤再生长的时间延长、减缓疾病进展以及预防转移。预期当对患者实施本发明的治疗方法时，例如需要这种治疗的人类患者，所述治疗方法将产生效果，如通过例如抗癌作用程度、应答率、疾病进展时间或存活率所测定的。特别地，本发明的治疗方法适用于人类患者，特别是复发或之前的化疗难治愈的那些患者。同时展望了第一线治疗。
本发明的组合可以单独使用或与多种抗癌药物或支持治疗药物中的一种或多种组合使用。
在一个实施方案中，本发明涉及一种应用PM02734或其药物学上可接受的盐，以及选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐另一种抗癌药物的协同组合。协同作用的表征可以通过测试组合和分析结果，例如通过Chou-Talalay方法获得。参照实施例1至4来说明这一点。
在另一方面，本发明涉及PM02734或其药物学上可接受的盐用于制备有效治疗癌症的药物的用途，其通过利用PM02734或其药物学上可接受的盐与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐联合治疗。
在一个相关方面，本发明涉及选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的抗癌药物用于制备有效治疗癌症的药物的用途，其通过利用顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐与PM02734或其药物学上可接受的盐联合治疗。
在还一方面，本发明涉及一种治疗癌症的方法，其包括给予有这种治疗需要的患者治疗有效量的PM02734或其药物学上可接受的盐，和治疗有效量的选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物的组合。
本发明还提供一种治疗癌症的方法，其包括给予有这样的治疗需要的患者治疗有效量的选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的抗癌药物，和治疗有效量的PM02734或其药物学上可接受的盐的组合。
组合药物可以一起给药、一种接着另一种给药，或者单独地以一个组合的单位剂型或者以两个单独的单位剂型分开给药。单位剂型还可以是固定的组合。
同时给药可以例如以具有两种或多种活性成分的一个固定组合的形式进行，或者通过同时给予两种或多种独立制剂的活性成分进行。
优选地，顺序使用给药是指在一个时间点给予组合的一种(或多种)成分，在不同的时间点给予其它成分，即以长期地交错方式，优选这样做以使得组合显示出比单独给予单一化合物更有效(特别是显示出协同作用)。
优选地，单独使用(给药)是指在不同的时间点彼此独立地给予组合的成分。
因此，PM02734或其药物学上可接受的盐，以及选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的其它抗癌药物可以作为用于在相同时间和不同时间给药的单独的药物来提供。优选地，PM02734和其它抗癌药物作为用于在不同时间给药的单独的药物来提供。当在不同时间分开给药时，PM02734或其它抗癌药物可以首次给药。此外，两种药物可以在同一天或在不同天给药，并且在治疗周期期间可以采用相同的进度或不同的进度给药。因此，本发明的药物组合物可以包括在单一的药物学上可接受的制剂中的所有成分(药物)。可选择地，成分可以分开配制并彼此组合给药。本领域技术人员熟知的不同的药物学上可接受的制剂可以用于本发明。此外，可以使用不同的给药途径给予组合药物。例如，药物中的一种可以是适合于口服给药的形式，例如片剂或胶囊，另一种可以是适合于胃肠外注射的形式(包括静脉、皮下、肌肉内、血管内或输注)，例如作为无菌溶液、悬浮液或乳液。可选择地，可以通过相同的给药途径给予两种药物。用于本发明的合适的制剂的选择可以由本领域技术人员根据给药模式和组合物成分的溶解特性来常规进行。
组合的化合物的确切用量将根据特定制剂、应用模式和特定位点、宿主以及待治疗的肿瘤进行变化。其它因素像年龄、体重、性别、饮食、给药时间、排泄率、宿主的病症、药物组合、反应敏感性和疾病的严重程度应被考虑。给药可以在最大耐受剂量范围内连续或间歇进行。
在另一方面，本发明涉及一种用于给予PM02734与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的另一种抗癌药物的组合治疗癌症的试剂盒，其包括用于至少一个周期的剂量单位的PM02734或其药物学上可接受的盐的产品，以及有关两种药物组合使用的打印说明书。
在一个相关方面，本发明涉及一种用于给予选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的抗癌药物与PM02734的组合治疗癌症的试剂盒，其包括用于至少一个周期的剂量单位的选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的抗癌药物产品，以及有关两种药物组合使用的打印说明书。
在一个相关方面，本发明涉及一种用于给予PM02734与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的另一种抗癌药物的组合治疗癌症的试剂盒，其包括用于至少一个周期的剂量单位的PM02734或其药物学上可接受的盐的产品，用于至少一个周期的剂量单位的选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的抗癌药物产品，以及有关两种药物组合使用的打印说明书。
在另一个方面，本发明还提供一种药物组合物，其包括PM02734或其药物学上可接受的盐以及其药物学上可接受的载体，用于与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的另一种抗癌药物组合使用治疗癌症。
在其它方面，本发明还提供一种药物组合物，其包含选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的抗癌药物以及其药物学上可接受的载体，用于与PM02734组合使用治疗癌症。
此外，本发明还提供一种药物组合物，其包含PM02734或其药物学上可接受的盐，选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的抗癌药物以及药物学上可接受的载体，用于治疗癌症。
在另一方面，本发明还提供PM02734或其药物学上可接受的盐在制备与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的另一种抗癌药物组合使用治疗癌症的组合物中的用途。
在一个相关方面，本发明还提供选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的抗癌药物在制备与PM02734组合使用治疗癌症的组合物中的用途。
并且在还一方面，本发明还提供PM02734或其药物学上可接受的盐和选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物在制备用于治疗癌症的组合物的用途。
在另一方面，本发明还提供PM02734或其药物学上可接受的盐在制备用于治疗癌症的药物的用途，其与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的另一种抗癌药物联合治疗。
在一个相关方面，本发明还提供选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的抗癌药物在制备用于治疗癌症的药物的用途，其与PM02734联合治疗。
在一个相关方面，本发明还提供PM02734或其药物学上可接受的盐与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物组合用于制备治疗癌症的药物的用途。
在另一方面，本发明还提供PM02734或其药物学上可接受的盐用于治疗癌症的用途，其与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的另一种抗癌药物联合治疗。
在一个相关方面，本发明还提供选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的抗癌药物用于治疗癌症的用途，其与PM02734联合治疗。
在另一方面，本发明还提供PM02734或其药物学上可接受的盐与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物的组合用于治疗癌症的用途。
在另一方面，本发明还提供PM02734或其药物学上可接受的盐作为药物的用途，其与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的另一种抗癌药物联合治疗。
在一个相关方面，本发明还提供选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的抗癌药物作为药物的用途，其与PM02734联合治疗。
在另一方面，本发明还提供PM02734或其药物学上可接受的盐与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物的组合作为药物的用途。
在另一方面，本发明还提供PM02734或其药物学上可接受的盐作为治疗癌症的药物用途，其与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物联合治疗。
在一个相关方面，本发明还提供选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的抗癌药物作为用于治疗癌症的药物的用途，其与PM02734或其药物学上可接受的盐联合治疗。
在另一方面，本发明还提供PM02734或其药物学上可接受的盐与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物的组合作为用于治疗癌症的药物的用途。
在另一方面，本发明提供用于治疗癌症的PM02734或其药物学上可接受的盐，该治疗包括给予治疗有效量的PM02734或其药物学上可接受的盐，以及治疗有效量的选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的抗癌药物的组合。
在一个相关方面，本发明还提供用于治疗癌症的选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的抗癌药物，所述治疗包括给予治疗有效量的选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的抗癌药物，以及治疗有效量的PM02734或其药物学上可接受的盐的组合。
在另一方面，本发明提供用于癌症治疗的方法，其包括给予治疗有效量的PM02734或其药物学上可接受的盐，以及治疗有效量的选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物的组合，其中组合可以一起或分开给药。
优选地，PM02734或其药物学上可接受的盐与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物的组合用于治疗睾丸癌、膀胱癌、肺癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌、结肠直肠癌(也被称为结肠癌)、白血病、黑色素瘤和前列腺癌。特别优选的是组合用于治疗肺癌、乳腺癌、结肠直肠癌和前列腺癌的用途。
在一个实施方案中，癌细胞接触PM02734或其药物学上可接受的盐与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物的组合，或者用该组合处理。癌细胞优选为人的并且包括恶性上皮肿瘤细胞、肉瘤细胞、白血病细胞、淋巴瘤细胞和骨髓瘤细胞。更优选地，癌细胞包括睾丸癌细胞、膀胱癌细胞、肺癌细胞、食道癌细胞、胃癌细胞、卵巢癌细胞、乳腺癌细胞、胰腺癌细胞、结肠直肠癌细胞、白血病细胞、黑色素瘤细胞和前列腺癌细胞。特别地，癌细胞包括人肺癌细胞、人乳腺癌细胞、人结肠直肠癌细胞和人前列腺癌细胞。此外，该组合针对癌细胞，特别针对人肺癌细胞、人乳腺癌细胞、人结肠直肠癌细胞和人前列腺癌细胞表现出协同抑制作用。
例如，该组合抑制接触的癌细胞的增殖或存活。与未接触的癌细胞相比，接触的癌细胞的增殖或存活水平较低，证明PM02734或其药物学上可接受的盐与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物的组合对于治疗患有特定类型的癌症的患者有效。
在另一方面，本发明提供一种用于抑制癌细胞生长的方法，其包括使所述癌细胞接触有效量的PM02734或其药物学上可接受的盐与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的另一种抗癌药物的组合。
在一个相关方面，本发明提供一种用于抑制癌细胞生长的方法，其包括使所述癌细胞接触有效量的选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的抗癌药物与PM02734的组合。
在一个相关方面，本发明提供一种用于抑制癌细胞生长的方法，其包括使所述癌细胞一起或单独接触PM02734或其药物学上可接受的盐以及选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的抗癌药物的有效组合。
在另一方面，本发明提供一种用于抑制癌细胞生长的方法，其包括使所述癌细胞一起或单独接触PM02734或其药物学上可接受的盐以及选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物的协同组合，其中与(i)，(ii)相比，所述组合针对癌细胞生长表现出改进的抑制。其中(i)为选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的抗癌药物不存在时的PM02734或其药物学上可接受的盐，或者(ii)为PM02734不存在时的选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐。
在另一个方面，本发明提供一种包含有效量的PM02734或其药物学上可接受的盐的药物组合物，其用于与选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的另一种抗癌药物组合使用，用于抑制癌细胞的生长。
在一个相关方面，本发明提供一种包含有效量的选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的抗癌药物的抗癌药物，其用于与PM02734组合使用，用于抑制癌细胞的生长。
在一个相关方面，本发明提供一种用于抑制癌细胞的生长的药物组合物，其包含PM02734或其药物学上可接受的盐以及选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物的有效组合。
在另一个方面，本发明提供一种用于抑制癌细胞的生长的药物组合物，其包含PM02734或其药物学上可接受的盐以及选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物的协同组合，其中与(i)，(ii)相比，所述组合针对癌细胞生长表现出改进的抑制。其中(i)为选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的抗癌药物不存在时的PM02734或其药物学上可接受的盐，或者(ii)为PM02734不存在时的选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的抗癌药物。
以下实施例进一步说明本发明。这些实施例不应解释为对本发明的范围的限制。
为了提供更简洁的说明，本发明给出的一些定量表述没有用术语“大约”限定。应理解的是，无论是否明确地使用了术语“大约”，本发明给出的每个数量都意味着是指实际给定的数值，它还意味着是指基于本领域普通技术人员将合理推导出的该给定数值的近似值，包括针对该给定数值由于实验和/或测量条件所形成的等效值和近似值。
实施例
实施例1确定PM02734与顺铂、吉西他滨和紫杉醇的组合对肺癌细胞系的作用的体外研究
评估了PM02734作为单一药物或者与选自顺铂、吉西他滨和紫杉醇的另一种抗癌药物的组合对于与肺癌有关的若干肿瘤细胞系的作用。具体地，所测试的细胞系为获自ATCC的A549(ATCC编号CCL-185)、获自欧洲保藏中心DSMZ的DV90(ACC编号307)(www.dsmz.de)和获自美国保藏中心DTP(NCI的开发治疗计划)的HOP62(http://dtp.nci.nih.gov/index.html)。这些细胞系在以下培养基中培养：
-A549细胞在补充有2mM L-谷氨酰胺和1.5g/L碳酸氢钠的HAM′SF12培养基中生长；
-DV90和HOP62细胞在补充有2mM L-谷氨酰胺的RPMI培养基中生长。
所有的培养基补充有10％胎牛血清(FBS)、100μg/mL青霉素、100μg/mL链霉素、0.25μg/mL两性霉素B和25mM HEPES.
筛选分两部分进行：
a.在第一组试验中，测定暴露于各肿瘤细胞系中72小时之后各种药物的IC50值。
在24孔板中以70％的汇合度平板培养细胞。具体地，针对平板培养，A549细胞系为40000个细胞/孔，DV90细胞系为75000个细胞/孔，HOP62细胞系为60000个细胞/孔。24小时后，在37℃、5％CO2和80％以上的湿度水平下，将细胞暴露于不同浓度的PM02734三氟醋酸盐、顺铂、紫杉醇或盐酸吉西他滨中72小时。在培养期末，通过结晶紫方法测定活力。简单来说，用PBS清洗细胞，然后固定于2％的戊二醛中20分钟，再在PBS中清洗两次，并以结晶紫染色20分钟，接着以足量的去离子水清洗。用1％的醋酸回收着色剂并测定590nm处的光密度。细胞活力与着色剂在590nm处分光光度的定量值有关。实验重复进行三次。
获得的针对每种药物的各自的IC50值如表I所示。
表I
Figure BPA00001214605000251
b.在第二组试验中，用PM02734分别与以上提及的各种抗癌药物组合培养各细胞系。
PM02734三氟乙酸盐与吉西他滨盐酸盐、顺铂或紫杉醇以固定的剂量比例组合，该固定剂量比例对应于单独每种药物的单一IC50值的0.125、0.25、0.5、1和2倍。例外的是，当PM02734三氟乙酸盐与吉西他滨盐酸盐或紫杉醇组合用在DV90细胞系中时，所测试的固定剂量比例对应于单独每种药物的单一IC50值的0.0625、0.125、0.25、0.5和1倍。
基于Chou-Talalay方程计算联合指数(CI)，该方程既考虑了效价又考虑了剂量-效应曲线的形状。CI＜1、CI＝1、CI＞1分别表示协同、累加和拮抗作用(Chou TC and Talalay P.Adv.Enzyme Regul.1984，22，27-55)。CalcuSyn软件(Biosoft，Ferguson，MO)用于Chou-Talalay联合指数分析。
表II提供了当PM02734与顺铂以不同剂量组合作用于A549细胞系时所获得的联合指数(CI)。
表II
  PM02734(M)   顺铂(M)   CI
  2.5E-08   1.03E-06   4.899
  5E-08   2.06E-06   1.148
  1E-07   4.12E-06   1.069
  2E-07   8.25E-06   0.752
  4E-07   16.5E-06   1.217
表III提供了当PM02734与顺铂以不同剂量组合作用于DV90细胞系时获得的联合指数(CI)。
表III
  PM02734(M)   顺铂(M)   CI
  3.75E-08   2.06E-06   1.325
  7.5E-08   4.12E-06   1.030
  1.5E-07   8.25E-06   1.405
  3E-07   16.5E-06   0.482
  6E-07   33E-06   0.888
表IV提供了当PM02734与顺铂以不同剂量组合作用于HOP62细胞系时获得的联合指数(CI)。
表IV
  PM02734(M)   顺铂(M)   CI
  5E-07   1.03E-06   38.881
  1E-06   2.06E-06   2.129
  2E-06   4.12E-06   3.640
  4E-06   8.25E-06   0.850
  8E-06   16.5E-06   0.751
根据这些试验，发现PM02734与顺铂的组合在肺癌细胞系，特别是DV90和HOP62细胞系中，当两种药物均为高剂量时显示协同作用。
表V提供了当PM02734与紫杉醇以不同剂量组合作用于A549细胞系时获得的联合指数(CI)。
表V
  PM02734(M)   紫杉醇(M)   CI
  2.5E-08   8.75E-10   0.780
  5E-08   1.75E-09   0.816
  1E-07   3.5E-09   0.939
  2E-07   7E-09   1.355
  4E-07   1.4E-08   1.657
表VI提供了当PM02734与紫杉醇以不同剂量组合作用于DV90细胞系时获得的联合指数(CI)。
表VI
  PM02734(M)   紫杉醇(M)   CI
  1.87E-08   1.87E-10   0.736
  3.75E-08   3.75E-10   0.851
  7.5E-08   7.5E-10   0.927
  1.5E-07   1.5E-09   1.130
  3E-07   3E-09   1.739
表VII提供了当PM02734与紫杉醇以不同剂量组合作用于HOP62细胞系时获得的联合指数(CI)。
表VII
  PM02734(M)   紫杉醇(M)   CI
  5E-07   5E-09   0.417
  1E-06   1E-08   0.399
  2E-06   2E-08   0.633
  4E-06   4E-08   0.860
  8E-06   8E-08   1.032
根据这些试验，发现PM02734与紫杉醇的组合在肺癌细胞系中显示协同作用。特别地，在A549和DV90细胞系中，当两种药物均为低剂量时观察到协同作用，在HOP62细胞系中，宽的剂量范围内均观察到协同作用。
表VIII提供了当PM02734与吉西他滨以不同剂量组合作用于A549细胞系时获得的联合指数(CI)。
表VIII
  PM02734(M)  吉西他滨(M)   CI
  2.5E-08   5E-10   0.423
  5E-08   1E-09   0.630
  1E-07   2E-09   0.857
  2E-07   4E-09   1.200
  4E-07   8E-09   1.159
表IX提供了当PM02734与吉西他滨以不同剂量组合作用于DV90细胞系时获得的联合指数(CI)。
表IX
  PM02734(M)   吉西他滨(M)   CI
  1.87E-08   2.5E-08   0.417
  3.75E-08   5E-08   2.460
  7.5E-08   1E-07   2.815
  1.5E-07   2E-07   0.622
  3E-07   4E-07   0.814
表X提供了当PM02734与吉西他滨以不同剂量组合作用于HOP62细胞系时获得的联合指数(CI)。
表X
  PM02734(M)   吉西他滨(M)   CI
  5E-07   9.37E-08   1.178
  1E-06   1.87E-07   0.803
  2E-06   3.75E-07   0.682
  4E-06   7.5E-07   1.290
  8E-06   1.5E-06   1.589
根据这些试验，发现PM02734与吉西他滨的组合在肺癌细胞系中显示协同作用。特别地，在A549和HOP62细胞系中，当两种药物均为低剂量时观察到协同作用，在DV90细胞株中，低剂量和高剂量时均观察到协同作用。
实施例2确定PM02734与顺铂、吉西他滨和紫杉醇的组合对乳腺癌细胞系的作用的体外研究
评估了PM02734三氟乙酸盐作为单一药物或者与选自顺铂、盐酸吉西他滨和紫杉醇的另一种抗癌药物的组合对抗与乳腺癌有关的若干肿瘤细胞系的作用。具体地，测试的细胞株为MDA-MB-231(ATCC编号HTB-26)、MDA-MB-435(ATCC编号HTB-129)和MCF7(ATCC编号HTB-22)，它们均获自ATCC。这些细胞株在以下培养基中培养：
-MDA-MB-231和MDA-MB-435细胞在补充有2mM L-谷氨酰胺和4.5g/L葡萄糖的DMEM中生长；
-MCF-7细胞在补充有2mM L-谷氨酰胺的RPMI培养基中生长。
所有的培养基补充有10％胎牛血清(FBS)、100μg/mL青霉素、100μg/mL链霉素、0.25μg/mL两性霉素B和25mM HEPES。
筛选分两部分进行：
a.在第一组试验中，测定暴露于每种肿瘤细胞系中72小时之后各种药物的IC50值。
在24孔板中以70％的汇合度平板培养细胞。具体地，针对平板培养，MDA-MB-231细胞系为30000个细胞/孔，MDA-MB-435细胞系为40000个细胞/孔，MCF-7细胞系为60000个细胞/孔。使用与实施例1公开的方法相同的方法。
各自的IC50值如表XI所示。
表XI
b.在第二组试验中，用PM02734三氟乙酸盐分别与以上提及的各种抗癌药物的组合来培养各细胞系。使用与实施例1公开的方法相同的方法。
表XII提供了当PM02734与顺铂以不同剂量组合作用于MDA-MB-231细胞系时获得的联合指数(CI)。
表XII
  PM02734(M)   顺铂(M)   CI
  8.12E-07   1.03E-06   0.723
  1.62E-06   2.06E-06   0.608
  3.25E-06   4.12E-06   0.660
  6.5E-06   8.25E-06   0.917
  13E-06   16.5E-06   1.605
表XIII提供了当PM02734与顺铂以不同剂量组合作用于MDA-MB-435细胞系时获得的联合指数(CI)。
表XIII
  PM02734(M)   顺铂(M)   CI
  6.25E-08   3.3E-07   1.422
  1.25E-07   6.6E-07   0.725
  2.5E-07   1.32E-06   1.281
  5E-07   2.64E-06   2.284
  1E-06   5.28E-06   0.667
表XIV提供了当PM02734与顺铂以不同剂量组合作用于MCF7细胞系时获得的联合指数(CI)。
表XIV
  PM02734(M)   顺铂(M)   CI
  7.5E-08   2.06E-06   1.827
  1.5E-07   4.12E-06   1.395
  3E-07   8.25E-06   1.324
  6E-07   16.5E-06   3.458
  1.2E-06   33E-06   0.720
根据这些试验，发现PM02734与顺铂的组合在乳腺癌细胞系中显示协同作用。特别地，在MDA-MB-231细胞系中，当两种药物均为低剂量时观察到协同作用，在MDA-MB-435细胞系中，在低剂量和高剂量时观察到协同作用，在MCF7细胞株中，在高剂量时观察到协同作用。
表XV提供了当PM02734与紫杉醇以不同剂量组合作用于MDA-MB-231细胞系时获得的联合指数(CI)。
表XV
  PM02734(M)   紫杉醇(M)   CI
  8.12E-07   3.12E-09   15.149
  1.62E-06   6.25E-09   0.926
  3.25E-06   1.25E-08   1.175
  6.5E-06   2.5E-08   2.272
  13E-06   5E-08   2.818
表XVI提供了当PM02734与紫杉醇以不同剂量组合作用于MDA-MB-435细胞系时获得的联合指数(CI)。
表XVI
  PM02734(M)   紫杉醇(M)   CI
  6.25E-08   3.12E-09   0.736
  1.25E-07   6.25E-09   0.726
  2.5E-07   1.25E-08   1.355
  5E-07   2.5E-08   2.367
  1E-06   5E-08   0.784
表XVII提供了当PM02734与紫杉醇以不同剂量组合作用于MCF7细胞系时获得的联合指数(CI)。
表XVII
  PM02734(M)   紫杉醇(M)   CI
  7.5E-08   9.34E-10   0.817
  1.5E-07   1.87E-09   1.289
  3E-07   3.75E-09   1.393
  6E-07   7.5E-09   1.058
  1.2E-06   1.5E-08   1.141
根据这些试验，发现PM02734与紫杉醇的组合在乳腺癌细胞系中显示协同作用。特别地，在MDA-MB-435细胞株中，当两种药物为低剂量和高剂量时均观察到协同作用，在MCF7细胞系中，在低剂量时观察到协同作用。
表XVIII提供了当PM02734与吉西他滨以不同剂量组合作用于MDA-MB-231细胞系时获得的联合指数(CI)。
表XVIII
  PM02734(M)   吉西他滨(M)   CI
  8.12E-07   1.25E-07   0.170
  1.62E-06   2.5E-07   0.243
  3.25E-06   5E-07   0.434
  6.5E-06   1E-06   0.780
  13E-06   2E-06   1.170
表XIX提供了当PM02734与吉西他滨以不同剂量组合作用于MDA-MB-435细胞系时获得的联合指数(CI)。
表XIX
  PM02734(M)  吉西他滨(M)   CI
  6.25E-08   5E-09   1.698
  1.25E-07   1E-08   0.609
  2.5E-07   2E-08   0.640
  5E-07   4E-08   0.940
  1E-06   8E-08   1.192
表XX提供了当PM02734与吉西他滨以不同剂量组合作用于MCF7细胞系时获得的联合指数(CI)。
表XX
  PM02734(M)   吉西他滨(M)   CI
  7.5E-08   1.12E-07   9.273
  1.5E-07   2.25E-07   1.712
  3E-07   4.5E-07   1.466
  6E-07   9E-07   0.897
  1.2E-06   1.8E-06   0.769
根据这些试验，发现PM02734与吉西他滨的组合在乳腺癌细胞系中显示协同作用。特别地，在MDA-MB-231和MDA-MB-435细胞系中，两种药物在宽剂量范围内均观察到协同作用，在MCF7细胞系中两种药物均为高剂量时观察到协同作用。
实施例3确定PM02734与顺铂、吉西他滨和紫杉醇的组合对结肠癌细胞系的作用的体外研究
评估了PM02734三氟乙酸盐作为单一药物或者与选自顺铂、盐酸吉西他滨和紫杉醇的另一种抗癌药物的组合对抗与结肠直肠癌有关的若干肿瘤细胞系的作用。具体地，所测试的细胞株为DLD1(ATCC编号CCL-221)和HT29(ATCC编号HTB-38)，它们均获自ATCC。这些细胞系在以下培养基中培养：
-DLD1细胞在补充有2mM L-谷氨酰胺和4.5g/L葡萄糖的DMEM中生长；
-HT29细胞在补充有2mM L-谷氨酰胺的RPMI培养基中生长。
所有的培养基补充有10％胎牛血清(FBS)、100μg/mL青霉素、100μg/mL链霉素、0.25μg/mL两性霉素B和25mM HEPES。
筛选分两部分进行：
a.在第一组试验中，测定暴露于各肿瘤细胞系中72小时之后各药物的IC50值。
在24孔板中以75％的汇合度平板培养细胞。具体地，对于平板培养，DLD1细胞系为60000个细胞/孔，HT29细胞系为75000个细胞/孔。使用与实施例1公开的方法相同的方法。
各自的IC50值如表XXI所示。
表XXI
Figure BPA00001214605000361
b.在第二组试验中，用PM02734三氟乙酸盐分别与以上提及的各抗癌药物的组合来培养各细胞系。使用与实施例1公开的方法相同的方法。
表XXII提供了当PM02734与顺铂以不同剂量组合作用于DLD1细胞系时获得的联合指数(CI)。
表XXII
  PM02734(M)   顺铂(M)   CI
  4.37E-08   3.09E-06   0.633
  8.75E-08   6.19E-06   0.792
  1.75E-07   12.37E-06   1.105
  3.5E-07   24.75E-06   0.607
  7E-07   49.5E-06   0.821
表XXIII提供了当PM02734与顺铂以不同剂量组合作用于HT29细胞系时获得的联合指数(CI)。
表XXIII
  PM02734(M)   顺铂(M)   CI
  6.87E-08   8.25E-07   1.762
  1.37E-07   1.65E-06   1.225
  2.75E-07   3.3E-06   1.285
  5.5E-07   6.6E-06   1.972
  1.1E-06   13.2E-06   1.102
根据这些试验，发现PM02734与顺铂的组合在结直肠腺癌细胞系中显示协同作用。特别地，在DLD1细胞株中，两种药物在宽的范围剂量内均观察到协同作用。
表XXIV提供了当PM02734与紫杉醇以不同剂量组合作用于DLD1细胞系时获得的联合指数(CI)。
表XXIV
  PM02734(M)  紫杉醇(M)   CI
  4.37E-08   5E-09   0.554
  8.75E-08   1E-08   0.754
  1.75E-07   2E-08   1.420
  3.5E-07   4E-08   2.542
  7E-07   8E-08   0.899
表XXV提供了当PM02734与紫杉醇以不同剂量组合作用于HT29细胞系时获得的联合指数(CI)。
表XXV
  PM02734(M)   紫杉醇(M)   CI
  6.87E-08   1.25E-09   0.948
  1.37E-07   2.5E-09   1.113
  2.75E-07   5E-09   1.333
  5.5E-07   1E-08   0.931
  1.1E-06   2E-08   1.183
根据这些试验，发现PM02734与紫杉醇的组合在结直肠腺癌细胞系中显示协同作用。特别地，在DLD1细胞株中，两种药物在宽的范围剂量内均观察到协同作用。
表XXVI提供了当PM02734与吉西他滨以不同剂量组合作用于DLD1细胞系时获得的联合指数(CI)。
表XXVI
  PM02734(M)   吉西他滨(M)   CI
  4.37E-08   2.5E-07   1.590
  8.75E-08   5E-07   0.572
  1.75E-07   1E-06   0.626
  3.5E-07   2E-06   0.908
  7E-07   4E-06   1.171
表XXVII提供了当PM02734与吉西他滨以不同剂量组合作用于HT29细胞系时获得的联合指数(CI)。
表XXVII
  PM02734(M)   吉西他滨(M)   CI
  6.87E-08   6.87E-08   5.061
  1.37E-07   1.37E-07   1.601
  2.75E-07   2.75E-07   1.320
  5.5E-07   5.5E-07   1.128
  1.1E-06   1.1E-06   0.914
根据这些试验，发现PM02734与吉西他滨的组合在结直肠腺癌细胞系中显示协同作用。特别地，在DLD1细胞株中，两种药物在宽的范围剂量内均观察到协同作用。
实施例4确定PM02734与奥沙利铂、顺铂、5-FU、吉西他滨、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的组合对前列腺癌和结肠癌细胞系的作用的体外研究
评估了PM02734与选自奥沙利铂、顺铂、5-FU、吉西他滨、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的另一种抗癌药物的组合抗两种肿瘤细胞系的作用，一种肿瘤细胞系与前列腺癌相关，另一种肿瘤细胞系与结肠癌相关。具体地，所测试的细胞株为DU145(前列腺癌)和Colo205(结肠癌)，它们均获自ATCC(Rockville，MD)。
细胞在补充有10％胎牛血清(InVitrogen，Cergy-Pontoise，France)、2mM谷氨酰胺、100单位/mL青霉素和100μg/mL链霉素的RPMI培养基中长成单层。使用胰蛋白酶/EDTA(分别为0.25％和0.02％；InVitrogen，Cergy-Pontoise，France)使所有的细胞一周分裂两次，并以2.5×104个细胞/mL的浓度接种。使用Stratagene试剂盒(La Jolla，CA)通过PCR定期测试所有细胞系的支原体污染。
同时或者依次将肿瘤细胞株暴露于PM02734和其他药物来测试该组合物：
a.对于同时暴露于药物，将细胞以2×103个细胞/孔接种在96孔平板中，随后同时用两种药物处理24小时，或者单独采用升高浓度的PM02734三氟乙酸盐或者采用对应于IC20、IC40或IC60值的不同浓度的其他药物。在大约四个倍增时间(120小时)之后，通过MTT检测法测定生长抑制作用。进行组合研究，从而与各化合物的单一药物培养相比较。
b.对于依次暴露于药物，将细胞以2×103个细胞/孔接种在96孔板中，生长24小时。然后将细胞暴露于不同浓度的第一药物24小时(48小时)，除去该药物，清洗细胞，加入第二药物。另一次药物暴露之后，除去第二药物，清洗细胞，在无药物的培养剂中后培养72小时。然后通过MTT检测法确定生长抑制。
如前所述的进行MTT检测(Hansen等，J.Immunol.Methods，1989，119(2)，203-210)。简言之，将细胞接种在96孔组织培养板中，密度为2×103个细胞/孔。培养120小时后，通过黄色、水溶性四唑MTT(3-[4，5-二甲基噻唑-2-基]-2，5-二苯基四唑溴化物；Sigma，SaintQuentin Fallavier，France)向紫色，不溶于水的甲臜的比色转变来确定细胞活力。该反应通过线粒体脱氢酶催化，并用来估算活性细胞的相对数量(Mosmann，J.Immunol.Methods，1983，65(1-2)，55-63)。细胞与0.4mg/mL MTT在37℃下培养4小时。培养后，弃掉上清液，将细胞团重悬于0.1mL的DMSO中，使用酶标仪(Molecular Devices，Menlo Park，CA)测量560nm处的吸光度。将含未处理细胞的孔或含药物且不含细胞的培养基的孔分别作为阳性和阴性对照。以未处理的对照细胞的百分比绘制生长抑制曲线。
使用基于中效原则的Chou和Talalay方法来评估药物组合的作用(Chou and Talalay，Adv.Enzyme Regul.1984，22，27-55)。这包括使用以下方程绘制每种药物及多个稀释的、固定比例组合的剂量-效应曲线：fa/fu＝(C/Cm)m，其中C为药物浓度，ICm为半最大效应所要求的浓度(即，IC50＝50％细胞生长抑制)，fa为受药物浓度C影响的细胞分数(例如，如果细胞生长被抑制90％时为0.9)，fu为未受影响的分数，m为浓度-效应曲线的弯曲系数。基于组合中各药物曲线的斜率，可以确定药物是否具有相互非排斥作用(例如，独立或交互式作用)。然后通过以下方程确定联合指数：
CI＝[(C)1/(Cx)1]+[(C)2/(Cx)2]+[α(C)1(C)2/(Cx)1(Cx)2]，
其中，(Cx)1是药物1单独产生x％效应所需的该药物的浓度，(C)1是与(C)2的组合产生相同的x％效应所需的药物1的浓度。如果药物的作用模式为相互排斥或非互斥的，那么α分别为0或1。通过对不同fa值(即细胞生长抑制的不同程度)的方程求解来计算CI值。CI值＜1表示协同作用，该值为1表示累加作用，该值＞1表示拮抗作用。使用浓度-效应分析CalcuSyn软件(Biosoft，Cambridge，UK)对数据进行分析。为了进行统计分析并绘制图表，使用了Prism软件(GraphPad，San Diego，USA)。结果以重复进行至少3次实验的平均值±标准偏差来表达。
以不同安排测试的药物组合对细胞增殖的影响如图1-11所示：
-PM02734与奥沙利铂的组合。在DU145(图1)和Colo205(图2)细胞系中，PM02734与奥沙利铂的组合产生协同作用(CI＜1)，该协同作用与使用的浓度无关。PM02734与奥沙利铂组合的作用似乎没有进度依赖性。
-PM02734与顺铂的组合。在DU145细胞系中(图3)，PM02734与顺铂的组合在两种药物均为高浓度时产生一定的协同作用(CI＜1)。PM02734与顺铂的组合的作用似乎没有进度依赖性。
-PM02734与5-FU的组合。在DU145(图4)和Colo205(图5)细胞系中，PM02734与5-FU的组合在5-FU后加入PM02734时产生协同作用(CI＜1)。在5-FU前或者与5-FU同时给予PM02734时，在DU145中为累加/协同作用，在Colo205细胞中为拮抗作用。
-PM02734与吉西他滨的组合。在DU145细胞系中(图6)，PM02734与吉西他滨的组合在高浓度时且当在吉西他滨之后加入PM02734时产生一定的协同作用(CI＜1)。
-PM02734与曲贝替定的组合。在DU145细胞株中(图7)，PM02734与曲贝替定的组合在当曲贝替定之后或其同时给予PM02734时产生协同作用(CI＜1)。
-PM02734与雷帕霉素的组合。在DU145(图8)和Colo205(图9)细胞系中，PM02734与雷帕霉素的组合在PM02734与雷帕霉素同时加入时产生协同作用(CI＜1)。在雷帕霉素之后给予PM02734时，该作用为累加的，而顺序相反时，几乎为拮抗作用。
-PM02734与舒尼替尼的组合。在DU145(图10)和Colo205(图11)细胞系中，PM02734与舒尼替尼的组合至少为累加作用，产生一定的协同作用(CI＜1)。

Claims (20)

1.一种治疗癌症的方法，其包括给予需要这种治疗的患者治疗有效量的PM02734或其药物学上可接受的盐，以及治疗有效量的选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物。
2.一种提高抗癌药物在治疗癌症中的治疗功效的方法，所述抗癌药物选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼组成的组中，该方法包括给予需要这种治疗的患者治疗有效量的PM02734或其药物学上可接受的盐。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述PM02734或其药物学上可接受的盐以及选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的其它抗癌药物形成同一组合物的一部分。
4.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述PM02734或其药物学上可接受的盐以及选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的其它抗癌药物作为单独的组合物，用于在相同时间或不同时间给药。
5.根据权利要求4所述的方法，其中所述PM02734或其药物学上可接受的盐以及选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼的或其药物学上可接受的盐的其它抗癌药物作为单独的组合物，用于在不同时间给药。
6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述与PM02734组合的抗癌药物是顺铂或其药物学上可接受的盐。
7.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述与PM02734组合的抗癌药物是吉西他滨或其药物学上可接受的盐。
8.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述与PM02734组合的抗癌药物是紫杉醇或其药物学上可接受的盐。
9.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述与PM02734组合的抗癌药物是奥沙利铂或其药物学上可接受的盐。
10.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述与PM02734组合的抗癌药物是5-氟尿嘧啶或其药物学上可接受的盐。
11.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述与PM02734组合的抗癌药物是曲贝替定或其药物学上可接受的盐。
12.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述与PM02734组合的抗癌药物是雷帕霉素或其药物学上可接受的盐。
13.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述与PM02734组合的抗癌药物是舒尼替尼或其药物学上可接受的盐。
14.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述被治疗的癌症选自睾丸癌、膀胱癌、肺癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌、结肠直肠癌、白血病、黑色素瘤和前列腺癌。
15.PM02734或其药物学上可接受的盐用于制备用于根据权利要求1至14中任一项的方法的药物的用途。
16.选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的抗癌药物用于制备用于根据权利要求1至14中任一项的方法的药物的用途。
17.用于根据权利要求1至14中任一项的方法的PM02734或其药物学上可接受的盐。
18.一种抗癌药物，其用于根据权利要求1至14中任一项的方法，选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐组成的组中。
19.一种药物组合物，其包括PM02734或其药物学上可接受的盐，以及选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物。
20.一种用于治疗癌症的试剂盒，其包括PM02734或其药物学上可接受的盐的制剂，选自顺铂、吉西他滨、紫杉醇、奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、曲贝替定、雷帕霉素和舒尼替尼或其药物学上可接受的盐的另一种抗癌药物的制剂，以及关于两种药物组合使用的说明。
CN2009801081376A 2008-03-07 2009-03-06 改善的抗肿瘤治疗 Pending CN101965192A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP08380078.9 2008-03-07
EP08380078 2008-03-07
PCT/EP2009/052649 WO2009109649A1 (en) 2008-03-07 2009-03-06 Improved antitumoral treatments

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN101965192A true CN101965192A (zh) 2011-02-02

Family

ID=40627578

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2009801081376A Pending CN101965192A (zh) 2008-03-07 2009-03-06 改善的抗肿瘤治疗

Country Status (11)

Country Link
US (1) US20110015135A1 (zh)
EP (1) EP2262522A1 (zh)
JP (1) JP2011513370A (zh)
KR (1) KR20100126479A (zh)
CN (1) CN101965192A (zh)
AU (1) AU2009221120A1 (zh)
CA (1) CA2717117A1 (zh)
IL (1) IL208000A0 (zh)
MX (1) MX2010009782A (zh)
RU (1) RU2010140890A (zh)
WO (1) WO2009109649A1 (zh)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8481498B1 (en) 2012-01-17 2013-07-09 Steven Hoffman Pharmaceutical compositions and methods
US10646552B2 (en) 2012-01-17 2020-05-12 Tyme, Inc. Pharmaceutical compositions and methods
US20130183263A1 (en) 2012-01-17 2013-07-18 Steven Hoffman Pharmaceutical compositions and methods
US10272068B2 (en) 2012-01-17 2019-04-30 Tyme, Inc. Pharmaceutical compositions and methods
WO2014010742A1 (ja) * 2012-07-13 2014-01-16 学校法人神戸学院 モノガラクトシルジアシルグリセロール又はその薬学的に許容し得る塩を有効成分として含む医薬組成物又は食品組成物
US9763903B2 (en) 2013-10-22 2017-09-19 Steven Hoffman Compositions and methods for treating intestinal hyperpermeability
US9326962B2 (en) 2013-10-22 2016-05-03 Steven Hoffman Compositions and methods for treating intestinal hyperpermeability
US10813901B2 (en) 2013-10-22 2020-10-27 Yamo Pharmaceuticals Llc Compositions and methods for treating autism
US9585841B2 (en) 2013-10-22 2017-03-07 Tyme, Inc. Tyrosine derivatives and compositions comprising them
US10751313B2 (en) 2013-10-22 2020-08-25 Yamo Pharmaceuticals Llc Compositions and methods for treating autism
JOP20190254A1 (ar) 2017-04-27 2019-10-27 Pharma Mar Sa مركبات مضادة للأورام
WO2020159171A2 (ko) * 2019-02-01 2020-08-06 (주)엠디바이오랩 스트렙토니그린 및 항암제를 포함하는 대장암 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Family Cites Families (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CU22545A1 (es) * 1994-11-18 1999-03-31 Centro Inmunologia Molecular Obtención de un anticuerpo quimérico y humanizado contra el receptor del factor de crecimiento epidérmico para uso diagnóstico y terapéutico
US4943533A (en) * 1984-03-01 1990-07-24 The Regents Of The University Of California Hybrid cell lines that produce monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
CZ282603B6 (cs) * 1991-03-06 1997-08-13 Merck Patent Gesellschaft Mit Beschränkter Haftun G Humanizované a chimerické monoklonální protilátky
AU661533B2 (en) * 1992-01-20 1995-07-27 Astrazeneca Ab Quinazoline derivatives
US6274551B1 (en) * 1994-02-03 2001-08-14 Pharmamar, S.A. Cytotoxic and antiviral compound
GB9302046D0 (en) * 1993-02-03 1993-03-24 Pharma Mar Sa Antiumoral compound-v
GB9508538D0 (en) * 1995-04-27 1995-06-14 Zeneca Ltd Quinazoline derivatives
US5747498A (en) * 1996-05-28 1998-05-05 Pfizer Inc. Alkynyl and azido-substituted 4-anilinoquinazolines
DK0912559T3 (da) * 1996-07-13 2003-03-10 Glaxo Group Ltd Kondenserede heterocykliske forbindelser som proteintyrosinkinaseinhibitorer
US6235883B1 (en) * 1997-05-05 2001-05-22 Abgenix, Inc. Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
RS49779B (sr) * 1998-01-12 2008-06-05 Glaxo Group Limited, Biciklična heteroaromatična jedinjenja kao inhibitori protein tirozin kinaze
US6200598B1 (en) * 1998-06-18 2001-03-13 Duke University Temperature-sensitive liposomal formulation
NZ527718A (en) * 1998-11-19 2004-11-26 Warner Lambert Co N-[4-(3-chloro-4-fluoro-phenylamino)-7-(3-morpholin-4-yl-propoxy)-quinazolin-6-yl]-acrylamide, an irreversible inhibitor of tyrosine kinases
US7311924B2 (en) * 1999-04-01 2007-12-25 Hana Biosciences, Inc. Compositions and methods for treating cancer
UA74803C2 (uk) * 1999-11-11 2006-02-15 Осі Фармасьютікалз, Інк. Стійкий поліморф гідрохлориду n-(3-етинілфеніл)-6,7-біс(2-метоксіетокси)-4-хіназолінаміну, спосіб його одержання (варіанти) та фармацевтичне застосування
GB0002952D0 (en) * 2000-02-09 2000-03-29 Pharma Mar Sa Process for producing kahalalide F compounds
ATE314084T1 (de) * 2000-10-31 2006-01-15 Pharma Mar Sa Kahalalid f formulierung
US20050054555A1 (en) * 2001-10-19 2005-03-10 Jose Jimeno Kahalalide compounds for use in cancer therapy
GB0304367D0 (en) * 2003-02-26 2003-04-02 Pharma Mar Sau Methods for treating psoriasis
JP4430009B2 (ja) * 2002-10-18 2010-03-10 ファーマ・マール・エス・アー・ウー 新規な抗腫瘍化合物
US7507708B2 (en) * 2003-02-26 2009-03-24 Pharma Mar, S.A.U. Antitumoral compounds
GB0321066D0 (en) * 2003-09-09 2003-10-08 Pharma Mar Sau New antitumoral compounds
CA2554755A1 (en) * 2004-01-28 2005-08-11 Cytimmune Sciences, Inc. Functionalized colloidal metal compositions and methods
GB0408958D0 (en) * 2004-04-22 2004-05-26 Pharma Mar Sa Convergent synthesis for kahalalide compounds
KR101512503B1 (ko) * 2006-02-28 2015-04-15 파르마 마르 에스.에이. 개선된 항종양 치료
NZ584695A (en) * 2007-10-19 2011-06-30 Pharma Mar Sa Improved antitumoral treatments using PM02734 and an EGFR tyrosine kinase inhibitor (erlotinib)

Also Published As

Publication number Publication date
WO2009109649A1 (en) 2009-09-11
MX2010009782A (es) 2010-09-30
US20110015135A1 (en) 2011-01-20
JP2011513370A (ja) 2011-04-28
RU2010140890A (ru) 2012-04-20
AU2009221120A1 (en) 2009-09-11
EP2262522A1 (en) 2010-12-22
IL208000A0 (en) 2010-12-30
CA2717117A1 (en) 2009-09-11
KR20100126479A (ko) 2010-12-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101965192A (zh) 改善的抗肿瘤治疗
CN103282037B (zh) 抗肿瘤生物碱的联合治疗
CN106822905B (zh) 含Survivin抑制剂和IRE1抑制剂的药物及用途
EP2435041B1 (en) Therapeutic combination comprising a PLK1 inhibitor and an antineoplastic agent
ES2625492T3 (es) Combinación terapéutica que comprende un inhibidor de Cdc7 y un agente antineoplásico
CN102099025A (zh) Pm00104与另一抗肿瘤剂的联合疗法
CN109906081A (zh) 利用五氮杂大环络合物和抗坏血酸类化合物的联合癌症疗法
CN101355969B (zh) 包含cyc-682和细胞毒性药物的抗增殖性组合
CN112566628A (zh) 预防和治疗癌症的药物组合物，包括棉酚、苯乙双胍和抗癌剂
CN101861159A (zh) 改进的抗肿瘤治疗
Valadares et al. The effect of a titanocene dichloride derivative, Ti IV (C5H5) 2 NCS2, on the haematopoietic response of Ehrlich tumour-bearing mice
US20100240595A1 (en) Improved Antitumoral Treatments
CN101965191A (zh) 改善的抗癌治疗
CN102440987B (zh) 含有芹菜素及芹菜素类衍生物和青蒿素及青蒿素类衍生物的药物组合物及其应用
CN105193810B (zh) 5‑氟尿嘧啶组合物及其在制备抗肿瘤注射剂中的应用
CN102105147B (zh) 包含aurora激酶抑制剂和抗肿瘤药的治疗组合
CN107921134B (zh) 肿瘤基因甲基化调节剂的新用途及抗肿瘤药物
CN103933539B (zh) 一种含有四环素的药物组合物及其应用
CN105250260A (zh) 一种1,3-茚满二酮螺环化合物的抗肿瘤用途
Budillon et al. First international conference on new molecular targets for anticancer therapy, Naples, 22–23 June 1998

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20110202