CN101947274B

CN101947274B - 具有抗菌消炎作用的中药组合物的检测方法

Info

Publication number: CN101947274B
Application number: CN2010105186831A
Authority: CN
Inventors: 赵涛
Original assignee: SHAANXI BUCHANG PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: SHAANXI BUCHANG PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date: 2008-09-27
Filing date: 2008-09-27
Publication date: 2012-04-25
Anticipated expiration: 2028-09-27
Also published as: CN101947274A

Abstract

本发明涉及一种具有抗菌消炎作用的中药组合物的检测方法，由鱼腥草800g、金银花200g为原料制成口服液体制剂，具有疗效确切，较好地改善临床症状，剂型合理、副作用少，价格便宜的特点；口服液的检测方法包括：挥发性成分、鱼腥草的鉴别，相对密度、pH值的检查，金银花、鱼腥草的含量测定。

Description

具有抗菌消炎作用的中药组合物的检测方法

技术领域

本发明涉及一种中药组合物的检测方法，特别是一种具有抗菌消炎作用的中药组合物的检测方法。

背景技术

鱼腥草、金银花是临床上常用的有代表性的清热解毒中药，鱼腥草味辛、性凉，具有清热解毒、消肿排脓功效，临床上用于防治多种感染性疾病，金银花味甘寒，其气清香，能清气分、血分之邪热及火毒，亦能通营达表、消肿溃坚，解痈疡之毒，即能清解又长于宣透，故为治温热病，外感风热，疮痈之要药。

鱼金制剂只有注射液一种制剂在临床上使用，鱼腥草，金银花无口服制剂。根据国家药品不良反应管理监测中心监测，鱼金注射液在临床应用中出现了过敏性休克、全身过敏性反应、胸闷、心急、呼吸困难和重症药疹等严重不良反应，甚至有引起死亡的病例报告，现已停止使用和审批，因此，研究开发安全性高、疗效好，生产成本低的鱼金新制剂是当务之急。

目前国内有关鱼腥草和金银花口服制剂的专利申请较多，其中本申请人于2007年10月9号提出的一份申请中，详细地公开了鱼金口服制剂的两味药材配比范围和一种制备方法。该制备方法将挥发成分、水溶性成分及醇溶性成分分别进行提取，然后混合后再加入辅料制成制剂。这样的制备方法虽然理论上可以充分提取药材的有效成分，但存在着操作复杂、药材加热时间过长、有效成分损失较大、生产周期过长、生产成本过高等实际问题。为了解决这个问题，我们进行了更加深入的研究，进一步优化了制剂处方配比，完善了制剂制备工艺，为各种病菌感染患者的治疗和康复提供新的治疗手段。

发明内容

本发明的目的在于提供一种既有确切疗效，又能较好地改善临床症状、副作用少、价格便宜、剂型丰富的具有抗菌消炎作用的中药组合物。

本发明的又一目的在于提供该中药组合物的各种制剂的制法。

本发明的另外一个目的在于提供该中药组合物的质量控制方法。

本发明技术方案是这样实现的：

按照重量份计，制成该中药组合物有效成分的原料为：鱼腥草800g、金银花200g。

本发明中药组合物具有清热解毒功效，可用于热毒内盛而致的上呼吸道感染、支气管肺炎、化脓性疾病、妇科炎症与术后发热。

本发明中药组合物可以是药剂学上可接受的剂型，包括丸剂、颗粒剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、片剂、滴丸剂、口服液体制剂等，其中优选口服液体制剂。

本发明的制备工艺如下：

鱼金注射液采用水蒸气蒸馏法只提取了鱼腥草、金银花挥发油部分，而将其具有提高免疫作用，抗菌消炎、抗病毒的水溶性成分弃之不用，为了提高鱼金口服制剂的临床疗效，合理利用有限资源，发挥鱼金口服制剂多成份、多靶点协同和互补作用，鱼金口服制剂提取工艺设计为：将鱼腥草和金银花水蒸气蒸馏提取挥发油；药渣水煎煮，滤过，与提取挥发油后的药液合并，提取水溶性黄酮类、绿原酸类成分，与挥发油混合，加入适宜辅料制成不同剂型。

更为详细的制备工艺如下：

取鱼腥草切段，与金银花混合，加pH2.0～5.0酸水8～12倍量水浸泡1～4小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油2～6小时，收集初馏液800～1200ml，将初馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液100～400ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过，放置，药渣加6～10倍量水煎煮0.5～2小时，滤过，合并两次滤液，60℃浓缩至相对密度1.06～1.10，加乙醇使含醇量至60～90％，静置12～48小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干燥后粉碎成细粉或用适量水溶解浓缩残留物备用；将挥发油用β-环糊精进行包合制成包合物或加入适宜增溶剂形成溶液，再采用等量递增法与上述操作后的物质混合，加入适宜辅料制成不同剂型。

其中优选的制备工艺如下：取鱼腥草切成2～3cm段，与金银花混合，加pH4.0～4.5酸水10倍量水浸泡3小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液1000ml，将初馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过，放置，药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并两次滤液，60℃浓缩至相对密度1.06～1.10，加乙醇使含醇量至75％，静置24小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干燥后粉碎成细粉或用适量水溶解浓缩残留物备用；将挥发油用β-环糊精进行包合制成包合物或加入适宜增溶剂形成溶液，再采用等量递增法与上述操作后的物质混合，加入适宜辅料制成不同剂型。

本发明中的辅料可以是药剂学上可接受的任意赋形剂或载体。

本发明硬胶囊的制备方法：取鱼腥草切成2～3cm段，与金银花混合，加pH4.0～4.5酸水10倍量水浸泡3小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液1000ml，将初馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过，放置，药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并两次滤液，60℃浓缩至相对密度1.06～1.10，加乙醇使含醇量至75％，静置24小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干燥，粉碎成100目粉；挥发油采用饱和水溶液法，包合比例为挥发油∶β-环糊精＝1∶6，包合温度40℃，包合时间90min制成β-环糊精包合物，等量递增法与细粉混匀，加入适量辅料，混匀，经制粒后装入胶囊，即得。

本发明颗粒剂的制备方法：取鱼腥草切成2～3cm段，与金银花混合，加pH4.0～4.5酸水10倍量水浸泡3小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液1000ml，将初馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过，放置，药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并两次滤液，60℃浓缩至相对密度1.06～1.10，加乙醇使含醇量至75％，静置24小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干燥，粉碎成100目粉；挥发油采用饱和水溶液法，包合比例为挥发油∶β-环糊精＝1∶6，包合温度40℃，包合时间90min制成β-环糊精包合物，等量递增法与细粉混匀，加适量淀粉混匀，烘干，粉碎，加入余量的淀粉、羧甲基纤维素钠、甜菊甙，混匀过80目筛，加适量水制粒，60℃减压干燥，整粒，分装，即得颗粒剂。

本发明丸剂的制备方法：取鱼腥草切成2～3cm段，与金银花混合，加pH4.0～4.5酸水10倍量水浸泡3小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液1000ml，将初馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过，放置，药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并两次滤液，60℃浓缩至相对密度1.06～1.10，加乙醇使含醇量至75％，静置24小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干燥，粉碎成100目粉；挥发油采用饱和水溶液法，包合比例为挥发油∶β-环糊精＝1∶6，包合温度40℃，包合时间90min制成β-环糊精包合物，等量递增法与细粉混匀，与100目可压性淀粉混合，取出15-20％混合粉备用；备用粉加入5～10％聚乙烯吡咯烷酮无水乙醇液混匀，20目制粒两次后形成丸芯，上锅滚动，视湿粒情况撒药粉成丸，出锅干燥、筛分，即得丸剂。

本发明软胶囊剂的制备方法：取鱼腥草切成2～3cm段，与金银花混合，加pH4.0～4.5酸水10倍量水浸泡3小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液1000ml，将初馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过，放置，药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并两次滤液，60℃浓缩至相对密度1.06～1.10，加乙醇使含醇量至75％，静置24小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干燥，粉碎成100目粉；挥发油采用饱和水溶液法，包合比例为挥发油∶β-环糊精＝1∶6，包合温度40℃，包合时间90min制成β-环糊精包合物，等量递增法与细粉混匀，将明胶、水及甘油融胶后保温待用，药粉加适量植物油搅匀，胶体磨研磨成均匀粘稠的糊状物，减压除气，压制，即得软胶囊剂。

本发明片剂的制备方法：取鱼腥草切成2～3cm段，与金银花混合，加pH4.0～4.5酸水10倍量水浸泡3小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液1000ml，将初馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过，放置，药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并两次滤液，60℃浓缩至相对密度1.06～1.10，加乙醇使含醇量至75％，静置24小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干燥，粉碎成100目粉；挥发油采用饱和水溶液法，包合比例为挥发油∶β-环糊精＝1∶6，包合温度40℃，包合时间90min制成β-环糊精包合物，等量递增法与细粉混匀，加淀粉、滑石粉及硬脂酸镁适量，制粒，压制成片，包衣，即得片剂。

本发明滴丸剂的制备方法：取鱼腥草切成2～3cm段，与金银花混合，加pH4.0～4.5酸水10倍量水浸泡3小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液1000ml，将初馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过，放置，药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并两次滤液，60℃浓缩至相对密度1.06～1.10，加乙醇使含醇量至75％，静置24小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干燥，粉碎成100目粉；挥发油采用饱和水溶液法，包合比例为挥发油∶β-环糊精＝1∶6，包合温度40℃，包合时间90min制成β-环糊精包合物，等量递增法与细粉混匀，加入到3～5倍量2∶1～4∶1的熔融聚乙二醇4000-聚乙二醇6000中，搅拌均匀，转移至滴丸机，滴制成丸，除去表面的二甲基硅油，包装，即得滴丸剂。

本发明口服液的制备方法：取鱼腥草切成2～3cm段，与金银花混合，加pH4.0～4.5酸水10倍量水浸泡3小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液1000ml，将初馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，备用；提取挥发油后的药液滤过，放置，药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并两次滤液，60℃浓缩至相对密度1.06～1.10，加乙醇使含醇量至75％，静置24小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，加水稀释至约700ml，加热煮沸5分钟，放置24小时，滤过，备用；将重蒸馏液与吐温-80混匀，加入上述滤液中，混匀，再加入蔗糖、阿斯巴甜、山梨酸，调pH4.0～6.0，加水至1000ml，混匀，分装，灭菌即得口服液。

上述口服液的质量控制方法如下：

一、性状：本发明为棕红色的液体，具鱼腥气，味甜、微苦。

二、鉴别：

(1)挥发性成分鉴别：取本品1ml，加氢氧化钠试验5滴，摇匀，加二硝基苯肼试液1～2滴，放置，生成橙黄色沉淀；

(2)鱼腥草鉴别：取[含量测定]项下的供试品溶液，另取芳樟醇对照品，加正己烷制成每1ml含20μg的溶液，作为对照品溶液，照甲基正壬酮含量测定方法试验，精密吸取对照品溶液和供试品溶液各2μl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，供试品色谱图中应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰。

三、检查：相对密度：应不低于1.07(中国药典2005年版一部附录VIIA)；pH值：应为4.0～6.0(中国药典2005年版一部附录VIIG)；其他：应符合合剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录IJ)。

四、含量测定：

(1)金银花的含量测定：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸＝15∶85∶1为流动相；检测波长：327nm；理论板数以绿原酸峰计应不低于2000；精密称取绿原酸对照品适量，加50％甲醇制成每1ml含40μg的溶液，即得对照品溶液；精密量取本发明1ml，置20ml量瓶中，加50％甲醇至刻度，摇匀，即得供试品溶液；精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪测定，按外标法以峰面积计算，即得；本发明每1ml含金银花以绿原酸C₁₆H₁₈O₉计，不得少于1.0mg；

(2)鱼腥草的含量测定：以聚乙二醇(PEG)-20M(30m×0.32mm×0.25μm)为固定相；柱温120℃；检测器温度为250℃；进样口温度为230℃；理论板数按甲基正壬酮峰计应不低于5000；称取萘适量，加正己烷配制成每1ml含0.5mg的溶液，作为内标溶液；另精密称取甲基正壬酮对照品适量，加正己烷置制成每1ml含20μg的溶液，精密量取2ml，置5ml量瓶中，加入内标溶液0.1ml，加正己烷稀释至刻度，摇匀，吸取2μl，注入气相色谱仪，计算校正因子；精密量取本品50ml，加水50ml，照中国药典2005年版一部附录XD挥发油测定法试验，自挥发器上端加水使充满刻度部分，并溢流入烧瓶为止，加正己烷3ml，连接回流冷凝管，加热回流2小时，待测定器中水冷却至室温后，放冷，分取正己烷层，置5ml量瓶中，测定器再用正己烷洗涤3次，每次0.5ml，合并洗涤液，精密加入内标溶液0.1ml，加正己烷稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；吸取2μl，注入气相色谱仪，测定，即得；本发明每1ml含鱼腥草以甲基正壬酮(C₁₁H₂₂O)计，不得少于0.3μg。

中药制剂疗效不但与处方组成有关而且与处方剂量有关，鱼金注射液处方组成及配比为：鱼腥草2份：金银花1份；本发明的处方配比是在大量实验研究中偶然得出的最佳配比，但药理实验证明其具有显著的疗效，现将其与现有的最接近技术进行比较研究，具体实验如下：

1.处方

处方一：鱼腥草600g、金银花300g。

处方二：鱼腥草800g、金银花200g。

2.制备方法

上述两个处方中鱼腥草分别切成2～3cm的小段，与各处方中金银花混合，分别加10倍量水(pH4～5)浸泡3小时，经水蒸气蒸馏得初馏液1000ml，将初馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，备用。提取挥发油后药液滤过，放置，药渣加水煎煮1小时，滤过，合并二次滤液，浓缩，加乙醇使含醇量达75％以上，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，加入适量水溶解残留物使其形成一定比例浓药液，根据动物给药剂量进行适当稀释后用于实验。

3.药效学试验比较研究

①体外抗菌

两种配比的鱼金制剂对标准菌株MIC测定结果见表1，对标准菌株的MBC测定结果见表2。

表1两种配比鱼金制剂对标准菌株的MIC

表2两种配比鱼金制剂对标准菌株的MBC

从表1可见，处方2配比的体外抗菌效果明显优于处方1，对多个菌株的抗菌效果都有50％以上的优越性，且MIC(最低抑菌浓度)和MBC(最低杀菌浓度)的值保持一致性。

②体内抗菌

两种配比的鱼金制剂对金黄色葡萄球菌ATCC25925株、乙型溶血性链球菌32210株感染ICR小鼠的半数保护量及95％可信限见表3、表4。

表3两种配比的鱼金制剂对金黄色葡萄球菌ATCC25925株

感染ICR小鼠体内保护实验结果

表4两种配比的鱼金制剂对乙型溶血性链球菌32210株

感染ICR小鼠体内保护实验结果

从表3、表4可见，两个配比的鱼金制剂在体内对细菌感染小鼠的保护作用，处方2明显优于处方1。

③体外抗病毒

两种配比鱼金制剂在体外对流感病毒FM1、腺病毒AD3的抑制作用见表5、表6。

表5两种配比鱼金制剂对流感病毒FM1株的作用

表6两种配比鱼金制剂对腺病毒AD3株的作用

从表5、表6可见，两个配比的鱼金制剂在体外对流感病毒FM1、腺病毒AD3的作用处方2明显优于处方1。

④体内抗病毒

两种配比的鱼金制剂对流感病毒FM1、腺病毒AD3感染ICR小鼠的半数保护量及95％可信限见表7、表8。

表7两种配比的鱼金制剂对流感病毒FM1感染小鼠体内保护实验结果

表8两种配比的鱼金制剂对腺病毒AD3感染小鼠体内保护实验结果

从表7、表8可见，两个配比的鱼金制剂在体内对病毒感染小鼠的保护作用处方2号效果优于处方1。

⑤免疫作用

两种配比鱼金制剂对CTX所致免疫功能低下小鼠的吞噬百分率、吞噬指数、血清特异性抗体及淋巴细胞增殖指数的作用见表9、表10、表11和表12。

表9两种配比鱼金制剂对小鼠吞噬百分率的影响

^*P＜0.05 vs CTX对照组

表10两种配比鱼金制剂对小鼠吞噬指数的影响

^*P＜0.05 vs CTX对照组

表11两种配比鱼金制剂对小鼠血清特异性抗体的影响

^*P＜0.05 vs CTX对照组

表12两种配比鱼金制剂对小鼠淋巴细胞增殖的影响

^*P＜0.05 vs CTX对照组

从表9、10、11和12可见，两种配比的鱼金制剂对CTX所致免疫功能低下小鼠的非特异性免疫(吞噬百分比、吞噬指数)、体液免疫(血清特异性抗体)以及细胞免疫(淋巴细胞增殖指数)均有明显的提升作用，其中处方2的疗效明显优于处方1，甚至优于鱼金注射液对照组。

4.结论

通过上述体外抗菌、体内抗菌，体外抗病毒、体内抗病毒和对免疫作用影响等试验证明，鱼金制剂两个处方中，处方2具有明显由于处方1的效果，故选择处方2(即按重量份计鱼腥草4份、金银花1份)为本发明的制剂处方。

具体实施方式：

实施例1

取鱼腥草800g切成2～3cm段，与金银花200g混合，加pH2.0酸水8倍量水浸泡1小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油2小时，收集初馏液800ml，将初馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液100ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过，放置，药渣加6倍量水煎煮0.5小时，滤过，合并两次滤液，60℃浓缩至相对密度1.06，加乙醇使含醇量至60％，静置12小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干燥，粉碎成100目粉；挥发油液采用饱和水溶液法，包合比例为挥发油∶β-环糊精＝1∶6，包合温度40℃，包合时间90min制成β-环糊精包合物，等量递增法与细粉混匀，加入适量辅料，混匀，经制粒后装入胶囊，即得。

实施例2

取鱼腥草800g切成2～3cm段，与金银花200g混合，加pH5.0酸水12倍量水浸泡4小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油6小时，收集初馏液1200ml，将初馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液400ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过，放置，药渣加10倍量水煎煮2小时，滤过，合并两次滤液，60℃浓缩至相对密度1.10，加乙醇使含醇量至90％，静置48小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干燥，粉碎成100目粉；挥发油采用饱和水溶液法，包合比例为挥发油∶β-环糊精＝1∶6，包合温度40℃，包合时间90min制成β-环糊精包合物，等量递增法与细粉混匀，加适量淀粉混匀，烘干，粉碎，加入余量的淀粉、羧甲基纤维素钠、甜菊甙，混匀过80目筛，加适量水制粒，60℃减压干燥，整粒，分装，即得颗粒剂。

实施例3

取鱼腥草800g切成2～3cm段，与金银花200g混合，加pH4.0酸水10倍量水浸泡3小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液1000ml，将初馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过，放置，药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并两次滤液，60℃浓缩至相对密度1.06～1.10，加乙醇使含醇量至75％，静置24小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干燥，粉碎成100目粉；挥发油采用饱和水溶液法，包合比例为挥发油∶β-环糊精＝1∶6，包合温度40℃，包合时间90min制成β-环糊精包合物，等量递增法与细粉混匀，与100目可压性淀粉混合，取出15-20％混合粉备用；备用粉加入5～10％聚乙烯吡咯烷酮无水乙醇液混匀，20目制粒两次后形成丸芯，上锅滚动，视湿粒情况撒药粉成丸，出锅干燥、筛分，即得丸剂。

实施例4

取鱼腥草800g切成2～3cm段，与金银花200g混合，加pH4.5酸水11倍量水浸泡2.5小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油5小时，收集初馏液900ml，将初馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液300ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过，放置，药渣加7倍量水煎煮1.5小时，滤过，合并两次滤液，60℃浓缩至相对密度1.08，加乙醇使含醇量至80％，静置36小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干燥，粉碎成100目粉；挥发油采用饱和水溶液法，包合比例为挥发油∶β-环糊精＝1∶6，包合温度40℃，包合时间90min制成β-环糊精包合物，等量递增法与细粉混匀，将明胶、水及甘油融胶后保温待用，药粉加适量植物油搅匀，胶体磨研磨成均匀粘稠的糊状物，减压除气，压制，即得软胶囊剂。

实施例5

取鱼腥草800g切成2～3cm段，与金银花200g混合，加pH3.5酸水9倍量水浸泡1.5小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油3小时，收集初馏液1100ml，将初馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液250ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过，放置，药渣加9倍量水煎煮1.5小时，滤过，合并两次滤液，60℃浓缩至相对密度1.10，加乙醇使含醇量至85％，静置40小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干燥，粉碎成100目粉；挥发油采用饱和水溶液法，包合比例为挥发油∶β-环糊精＝1∶6，包合温度40℃，包合时间90min制成β-环糊精包合物，等量递增法与细粉混匀，加淀粉、滑石粉及硬脂酸镁适量，制粒，压制成片，包衣，即得片剂。

实施例6

取鱼腥草800g切成2～3cm段，与金银花200g混合，加pH3.0酸水9倍量水浸泡2小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液1000ml，将初馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液350ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过，放置，药渣加9倍量水煎煮1.5小时，滤过，合并两次滤液，60℃浓缩至相对密度1.07，加乙醇使含醇量至65％，静置45小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干燥，粉碎成100目粉；挥发油采用饱和水溶液法，包合比例为挥发油∶β-环糊精＝1∶6，包合温度40℃，包合时间90min制成β-环糊精包合物，等量递增法与细粉混匀，加入到3～5倍量2∶1～4∶1的熔融聚乙二醇4000-聚乙二醇6000中，搅拌均匀，转移至滴丸机，滴制成丸，除去表面的二甲基硅油，包装，即得滴丸剂。

实施例7

取鱼腥草800g切成2～3cm段，与金银花200g混合，加pH4.0酸水10倍量水浸泡3小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液1000ml，将初馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，备用；提取挥发油后的药液滤过，放置，药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并两次滤液，60℃浓缩至相对密度1.06～1.10，加乙醇使含醇量至75％，静置24小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，加水稀释至约700ml，加热煮沸5分钟，放置24小时，滤过，备用；将重蒸馏液与吐温-80混匀，加入上述滤液中，混匀，再加入蔗糖、阿斯巴甜、山梨酸，调pH，加水，混匀，分装，灭菌即得口服液。

Claims

1.一种具有抗菌消炎作用的中药组合物的检测方法，它的制剂按以下方法制备而成：鱼腥草800g、金银花200g，鱼腥草切成2～3cm段，与金银花混合，加pH4.0～4.5酸水10倍量水浸泡3小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液1000ml，将初馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，备用；提取挥发油后的药液滤过，放置；药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过；合并两次滤液，60℃浓缩至相对密度1.06～1.10，加乙醇使含醇量至75％，静置24小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，加水稀释至约700ml，加热煮沸5分钟，放置24小时，滤过，备用；将重蒸馏液与吐温-80混匀，加入上述滤液中，混匀，再加入蔗糖、阿斯巴甜、山梨酸，调pH4.0～6.0，加水至1000ml，混匀，分装，灭菌，即得口服液，其特征在于该口服液的检测方法为：

(1)挥发性成分鉴别：取所述口服液1ml，加氢氧化钠试液5滴，摇匀，加二硝基苯肼试液1～2滴，放置，生成橙黄色沉淀；

(2)鱼腥草鉴别：精密量取所述口服液50ml，加水50ml，照中国药典2005年版一部附录X D挥发油测定法试验，自挥发器上端加水使充满刻度部分，并溢流入烧瓶为止，加正己烷3ml，连接回流冷凝管，加热回流2小时，待测定器中水冷却至室温后，放冷，分取正己烷层，置5ml量瓶中，测定器再用正己烷洗涤3次，每次0.5ml，合并洗涤液，精密加入内标溶液0.1ml，加正己烷稀释至刻度，摇匀，制成供试品溶液，另取芳樟醇对照品，加正己烷制成每1ml含20μg的溶液，作为对照品溶液，照甲基正壬酮含量测定方法试验，精密吸取对照品溶液和供试品溶液各2μl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，供试品色谱图中应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰；

(3)检查方法：相对密度应不低于1.07，pH值应为4.0～6.0；

(4)含量测定方法：(a)以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸＝15∶85∶1为流动相；检测波长为327nm；理论板数以绿原酸峰计应不低于2000；精密称取绿原酸对照品适量，加50％甲醇制成每1ml含40μg的溶液，即得对照品溶液；精密量取所述口服液1ml，置20ml量瓶中，加50％甲醇至刻度，摇匀，即得供试品溶液；精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪测定，按外标法以峰面积计算，即得；所述口服液每1ml含金银花以绿原酸C₁₆H₁₈O₉计，不得少于1.0mg；(b)以聚乙二醇(PEG)-20M为固定相，色谱柱参数为30m×0.32mm×0.25μm；柱温120℃；检测器温度为250℃；进样口温度为230℃；理论板数按甲基正壬酮峰计应不低于5000；称取萘适量，加正己烷配制成每1ml含0.5mg的溶液，作为内标溶液；另精密称取甲基正壬酮对照品适量，加正己烷置制成每1ml含20μg的溶液，精密量取2ml，置5ml量瓶中，加入内标溶液0.1ml，加正己烷稀释至刻度，摇匀，吸取2μl，注入气相色谱仪，计算校正因子；精密量取所述口服液50ml，加水50ml，照中国药典2005年版一部附录X D挥发油测定法试验，自挥发器上端加水使充满刻度部分，并溢流入烧瓶为止，加正己烷3ml，连接回流冷凝管，加热回流2小时，待测定器中水冷却至室温后，放冷，分取正己烷层，置5ml量瓶中，测定器再用正己烷洗涤3次，每次0.5ml，合并洗涤液，精密加入内标溶液0.1ml，加正己烷稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；吸取2μl，注入气相色谱仪，测定，即得；所述口服液每1ml含鱼腥草以分子式为C₁₁H₂₂O的甲基正壬酮计，不得少于0.3μg。