CN101940224B - 植物抑菌组合物及其用途 - Google Patents
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Abstract
公开了一种植物抑菌组合物，含有活性成分，所述活性成分由按重量计2∶0.5-1.5∶0.5-1.5的野菊花、苦参、和蛇床子组成，以及药物学上可接受的载体。还公开了它在制备抑菌剂中的用途及质量标准。
Description
技术领域
本发明涉及抗菌消毒剂领域，具体是抵抗细菌感染的植物抑菌剂。
背景技术
抑菌剂属于消毒产品。在本领域中公开的抑菌剂通常为化学制品，例如使用季铵化合物作为消毒剂，或蛋白质(复合酶)等，这些抑菌剂有的具有很大的毒性，或者需要苛刻的保存条件。在近年来越来越注重产品安全和环境保护的情况下，开发了一系列的植物天然抑菌剂，但这些抑菌剂常常配方很复杂，需要好几种或者10多种成分，例如使用田七、党参、金银花、黄连、墨旱莲、南鹤虱、薏苡仁等材料的配方，因此配制原料昂贵，且配制过程复杂，而且由于成分繁多，难以确定最终产品的质量。因此，本领域迫切需要配方简单，有效成分易于控制的天然植物抑菌产品。
发明内容
因此，本发明的一个目的是提供一种原料成分简单，而且易于配制的植物抑菌产品。在本发明的一个方面，提供了一种植物抑菌组合物，其含有活性成分，所述活性成分由按重量计2∶0.5-1.5∶0.5-1.5的野菊花、苦参、和蛇床子组成，以及药物学上可接受的载体。优选野菊花、苦参和蛇床子按重量计为2∶1∶1。
在该方面的一个优选例中，野菊花是通过以下步骤提取的提取液：
a)水蒸馏得到挥发油蒸馏液；b)蒸馏得到的残渣加水煎煮，药液过滤并经纯化；c)合并步骤a)得到的挥发油蒸馏液和b)得到的纯化液。
在该方面的另一个优选例中，苦参是通过以下步骤提取的提取液：
加水煎煮苦参，药液过滤并经纯化。
在该方面的还有一个优选例中，蛇床子是通过水蒸馏获得的挥发油蒸馏液。
在该方面的另一个优选例中，药物学上可接受的载体选自赋形剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、稀释剂、缓冲剂、渗透压调节剂、防腐剂、保湿剂、乳化剂、分散剂、稳定剂、助溶剂。
在该方面的还有一个优选例中，组合物选自洗剂，片剂、软膏剂、霜剂、栓剂、膜剂、搽剂、气雾剂、泡沫剂、滴眼剂、滴耳剂。
在该方面的还有一个优选例中，组合物中活性成分的浓度为0.2-0.5g/ml，其中所述重量是野菊花、苦参和蛇床子的总重量。组合物中活性成分的最佳浓度为0.3g/ml。
在该方面的另一个优选例中，组合物活性成分含量标准为：总黄酮大于等于250mg/100ml；绿原酸大于等于15mg/100ml；氧化苦参碱大于等于200mg/100ml；挥发油大于等于0.02ml/100ml。
在本发明的另一个方面，提供了上述组合物在制备抑菌剂中的用途。优选抑菌剂是外用抑菌剂。在另一个优选例中，该抑菌剂优选是洗剂。
具体实施方式
野菊花来源为菊科植物野菊(Chrysanthemum indicum L.)的头状花序。含挥发油，油中含菊醇(chrysol)、菊酮(chrysanthenone)、α-蒎烯、樟脑、龙脑、樟烯等，尚含绿原酸、野菊花内酯(yejunualactone)、野菊花素A(artoglasin-A)、以及黄酮类成分刺槐甙(acaciin)、蒙花甙(linarin)、菊甙、木犀草素等。其性微寒，味苦、辛。功能主治清热解毒。用于疔疮痈肿、目赤肿痛、头痛眩晕。
苦参为为双子叶植物药豆科植物苦参(Sophora flavescens Ait.)的根。根含多种生物碱(1％-2.5％)，以d-苦参碱(d-matrine)及d-氧化苦参碱(d-oxyma-trine)为主，两者含量之比，因产地不同差别很大，我国东北产苦参中氧化苦参碱含量较多。苦参的主要功效是清热，燥湿，杀虫。
蛇床子是为伞形科植物蛇床Cnidium monnieri(L.)Cuss.的果实，含蒎烯、异缬草酸龙脑酯(bornyl isovalerate)欧芹酚甲醚(osthol)、二氢欧山芹醇、佛手柑内酯(bergapten)、蛇床子素(cnidiadin)、异茴芹素(isopimpinellin)等。其性温，味辛、苦。常规用其治疗温肾壮阳，燥湿，祛风，杀虫。用于阳痿、宫冷、寒湿带下、湿痹腰痛；外治外阴湿疹、妇人阴痒、滴虫性阴道炎。
发明人首次配制了仅含有野菊花、苦参和蛇床子作为活性成分的植物抑菌洗剂。这种抑菌剂配方简单，取材方便且生产成本低。野菊花、苦参和蛇床子可以通过简单的水蒸或煎煮，然后过滤和使用常规的纯化方法，例如树脂柱，可采用大孔树脂，例如市售的LSA-33、XDA-1等极性树脂，或离子交换树脂、膜过滤等方法进行纯化。在纯化过程中并不采用任何的有机溶剂或复杂昂贵的实验室方法，从而使得生产成本大大节约。
活性成分可以与药物学上常用的载体一起制成抗菌组合物。药物学上常用的载体选自赋形剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、稀释剂、缓冲剂、渗透压调节剂、防腐剂、保湿剂、乳化剂、分散剂、稳定剂、助溶剂。视使用的场合不同，该组合物可配制成多种剂型，例如洗剂，片剂、软膏剂、霜剂、栓剂、膜剂、搽剂、气雾剂、泡沫剂、滴眼剂、滴耳剂。这些产品可用于各种不同的场合。例如，该制剂作为洗剂时，可以与湿润的擦拭物，例如抹布，百洁布，拭子，纸巾等混合，从而用于拭抹需要抑菌消毒的表面，或者直接用于皮肤；还可以加到各种个人护理产品中，例如擦面纸、浴室织物(例如毛巾、浴球等)，或制成女性用护理产品，或各种香波、浴液、肥皂、厨房用洗涤剂、衣物洗涤剂等各种家用清洁产品。该产品也可广泛的用于公共场所的抑菌消毒，例如用于餐厅、车站、公用电话等公众往来和接触频繁的区域。
配制洗剂中常规使用的添加剂是水；各种表面活性剂，如聚山梨酯20(如Tween 20TM；ICI Americas)，聚山梨酯80(如Tween 80TM；ICI Americas)和泊落沙姆等非离子表面活性剂；溴化四丁铵和氯化苯甲乙氧铵或其纯组分等阳离子表面活性剂；辛酸锡(锡(II)2-乙基己酸)和十四烷基磺酸钠等阴离子表面活性剂；和氢氧化十二烷基二甲基(3-磺丙基)铵，内盐等两性或两性离子表面活性剂(例如十二烷基磺酸钠、十二烷基硫酸钠等阴离子或阳离子表面活性剂；润湿剂(如甘油)、稳定剂、染料、渗透增强剂和抗氧化剂等。视用途不同，还可加入芳香剂等常规添加剂、这些添加剂都是本领域技术人员已知的。
发明人还提供了一种检测植物抑菌洗剂的质量标准，采用总黄酮大于等于200mg/100ml；绿原酸大于等于15mg/100ml；氧化苦参碱大于等于200mg/100ml；挥发油大于等于0.02ml/100ml的标准，可良好的控制植物抑菌洗剂的生产质量。下面的实施例是为了说明本发明，不是为了限制。
实施例1植物抑菌洗剂的制备：
采用了以下配方：
表1 植物抑菌洗剂的原料配方：
| 配方 | 野菊花(公斤) | 苦参(公斤) | 蛇床子(公斤) |
| 1 | 20 | 10 | 10 |
| 2 | 20 | 15 | 10 |
| 3 | 20 | 10 | 15 |
| 4 | 20 | 5 | 5 |
| 5 | 20 | 15 | 15 |
| 6 | 20 | 5 | 15 |
| 7 | 20 | 15 | 5 |
野菊花、苦参和蛇床子购自安徽毫州药材市场。
野菊花经水蒸馏得挥发油蒸馏液备用，残渣加水煎煮1小时，水煎液用滤纸过滤，滤液经大孔树脂吸附柱(规格LSA-33，购自西安蓝晓吸附材料有限公司)纯化，得到野菊花提取液备用。
苦参加水煎煮2小时，水煎液过滤，滤液经大孔树脂吸附柱(规格LSA-33，购自西安蓝晓吸附材料有限公司)纯化，得到苦参提取液备用。
蛇床子用水蒸馏6小时，得挥发油蒸馏液备用。
以上提取液按原生药重量比投料，加入蒸馏水混合，调至pH5-6和0.3g生药总重量/ml，过滤，灌装，即得。
实施例2植物抑菌洗剂的质量检测：
1.试验方法：
(1)目测外观。
(2)pH值：10％样品水溶液用酸度计(上海精密仪器厂)测定。
(3)总黄酮的测定方法：
取本品溶液10ml至100ml容量瓶，以50％甲醇定容，分别取该液、芦丁对照品(来源国家生物制品检验鉴定所)、50％甲醇2.0ml，置25ml容量瓶中，加水至10ml，加1ml 5％(重量/体积比)亚硝酸钠溶液，再加1ml 10％(重量/体积)硝酸铝溶液，摇匀放置5分钟，分别加入5ml 1mol/L氢氧化钠溶液，以水定容，混匀，放置10分钟，用分光光度计(型号UV-1240，日本岛津公司)在波长510±5nm处，以甲醇为参比液，测定其吸光度，并计算总黄酮的含量。
(4)绿原酸含量的测定方法：
可根据多种文献报道的方法用HPLC法进行测定。发明人在此选择流动相为乙腈-水-磷酸-三乙胺(10∶90∶0.36∶0.18)，流速为1.0ml/min，检测波长为327nm，柱温为25℃来进行测定。HPLC柱是来自日本岛津公司的C18键合相色谱柱。
(5)氧化苦参碱含量的测定方法：
可根据多种文献报道的方法用HPLC法进行测定。发明人在此选择流动相为乙腈-水-磷酸-三乙胺(10∶90∶0.36∶0.18)，流速为1.0ml/min，检测波长为222nm，柱温为25℃来进行测定。HPLC柱来自日本岛津公司的C18键合相色谱柱。
(6)挥发油的含量测定
使用中国药典2005版一部附录X D甲法测定，挥发油含量按100ml计应不得低于0.2ml。
(7)总固体含量的测定：
精密称取样品25ml，置105℃干燥至恒重并已称重的蒸发皿中，蒸干溶剂，在105℃干燥至恒重，总固体按100ml计应为3.0g-6.0g。
(8)总灰分的测定：
精密量取样品25ml，置105℃干燥至恒重并已称重的坩埚中，蒸干溶剂，或精密称取总固体检测项下残渣的50％，置于已恒重的坩埚中，先炭化(约300℃)2小时，再移入600±25℃马福炉中灼烧至恒重，总灰份按100ml计应不大于0.3g。
2.植物抑菌洗剂的产品标准如下表2所示：
表2 植物抑菌洗剂的产品标准
| 项目 | 指标 |
| PH | 5.0～6.0 |
| 总黄酮，mg/100ml≥绿原酸，mg/100ml≥氧化苦参碱，mg/100ml≥挥发油，ml/100ml≥ | 250152000.02 |
| 总固体，g/100ml | 2.0-5.0 |
| 总灰分，g/100ml≤ | 0.3 |
3.中试产品的检测结果：
试验中对于实施例1中制备的几批产品进行了检测，其检测结果如下表3所示。所有配方都是深黄色透明液体。
表3 植物抑菌洗剂产品的质量检测结果
| 项目 | 指标 | 配方1 | 配方2 | 配方3 | 配方4 | 配方5 | 配方6 | 配方7 |
| PH | 5.0～6.0 | 5.32 | 5.55 | 5.81 | 5.23 | 5.45 | 5.38 | 5.37 |
| 总黄酮，mg/100ml≥绿原酸，mg/100ml≥氧化苦参碱，mg/100ml≥挥发油，ml/100ml≥ | 250152000.2 | 252252530.30 | 293272800.25 | 248273800.30 | 295282010.25 | 230223980.30 | 312282590.25 | 225213620.30 |
| 总固体，g/100ml | 3.0-6.0 | 3.58 | 4.80 | 3.78 | 3.55 | 3.78 | 3.92 | 4.50 |
| 总灰分，g/100ml≤ | 0.3 | 0.19 | 0.22 | 0.18 | 0.25 | 0.22 | 0.29 | 0.18 |
如上表所述，检测的所有批次的产品都符合质量标准。
实施例3植物抑菌洗剂的抑菌性能测定
1.1采用实施例1中配制的洗剂，未经灭菌进行试验。
1.2菌种活化：将斜面培养基里充分复壮的大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，福氏志贺痢疾杆菌(来源于南京医科大学)接种于肉汤培养基中，37℃培养8h备用。
将活化的菌液以无菌肉汤稀释到浓度相当于0.5麦氏比浊管即107Cfu/ml。在直径9cm的无菌平皿中加菌液1ml，然后到入已熔化冷却到55℃的M-H琼脂培养基，旋转混匀。待凝固后用6mm的灭菌铜管于M-H琼脂上打6个孔，用无菌镊子取出铜管内培养基，于每个孔内加入药液0.05ml，37℃培养12小时。取出平皿测量抑菌圈直径。按常规方法设立阴性对照和阳性对照。
观察：无抑菌圈以″-″表示
抑菌圈直径＜10mm以″+″表示轻度抑菌
10～15mm以″++″表示中度抑菌
＞15mm以″+++″表示高度抑菌
1.3实验结果：
表4 对各菌种的抑制作用
综上所述，各抑菌洗剂对于金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和福氏志贺氏菌都有显著抑制作用，其结果与青霉素相当。
实施例4植物抑菌洗剂的急性毒性测试
为了提供试验安全用药的剂量范围，对该抑菌洗剂进行了急性毒性试验。
在预备试验中，小鼠灌服大剂量抑菌洗剂亦不致死，不能测出半数致死量，故采用浓缩液最大给药量试验。
受试药物抑菌洗剂配方1的10倍浓缩液，供灌胃用。
实验动物ICR小鼠40只，18～21g，雌雄各半，由中国药科大学实验动物中心提供。
试验方法与结果取健康小鼠20只，雌雄各半，1ml/10g灌胃给药，一日内灌胃3次，连续观察7日。
小鼠给药当日，行动缓慢，进食减少。次日恢复食量，活动、大便均正常。观察7日未见死亡，第8日空腹12h称重，尸解未见主要脏器有异常。体重变化见表7。
表5 A-2小鼠急性毒性试验体重变化(X±SD)
与给药前比，***P＜0.01由表5可见，小鼠灌服抑菌洗剂10倍浓缩液，体重正常增长。
在小鼠急性毒性试验中，采用最大给药量法，抑菌洗剂10倍浓缩液小鼠量最大为100ml/kg，抑菌洗剂小鼠量最大应为1000ml/kg，人最大安全用量为100ml/kg，成人以60kg计，每人每天最大安全用量为6000ml。给药后观察7日，均未出现死亡及明显中毒反应，体重正常增长。
以上结果说明该洗剂安全无毒。
Claims (1)
1.一种植物抑菌组合物，其特征在于，所述组合物含有活性成分，所述活性成分由按生药重量投料计的2:0.5-1.5:0.5-1.5的野菊花、苦参、和蛇床子组成，以及药物学上可接受的载体；
其中：
所述野菊花通过以下步骤制备成提取液：
a)水蒸馏得到挥发油蒸馏液；
b)蒸馏得到的残渣加水煎煮，药液过滤并经纯化；
c)合并步骤a)得到的挥发油蒸馏液和b)得到的纯化液；
所述苦参通过加水煎煮苦参，药液过滤并经纯化制备成提取液；
所述蛇床子通过水蒸馏制备成挥发油蒸馏液。
2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述野菊花、苦参和蛇床子按重量计为2:1:1。
3.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述药物学上可接受的载体选自崩解剂、粘合剂、润滑剂、稀释剂、缓冲剂、渗透压调节剂、防腐剂、保湿剂、乳化剂、分散剂、稳定剂、助溶剂。
4.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物选自洗剂，片剂、软膏剂、霜剂、栓剂、膜剂、搽剂、气雾剂、泡沫剂、滴眼剂、滴耳剂。
5.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物中活性成分的浓度为0.2-0.5g/ml。
6.如权利要求5所述的组合物，其特征在于，所述组合物活性成分含量标准为：总黄酮大于等于250mg/100ml；绿原酸大于等于15mg/100ml；氧化苦参碱大于等于200mg/100ml；挥发油大于等于0.02ml/100ml。
7.如权利要求1所述的组合物在制备抑菌剂中的用途。
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