CN101926865A

CN101926865A - 酸枣仁解郁安神组合物及其制备方法

Info

Publication number: CN101926865A
Application number: CN 201010278726
Authority: CN
Inventors: 乔卫; 段宏泉; 周晶; 李陆; 刘婧姝; 符敬伟; 杨奕
Original assignee: Tianjin Medical University
Current assignee: Tianjin Medical University
Priority date: 2010-09-11
Filing date: 2010-09-11
Publication date: 2010-12-29
Anticipated expiration: 2030-09-11
Also published as: CN101926865B

Abstract

本发明公开了一种酸枣仁解郁安神组合物及其制备方法，包括酸枣仁总皂苷16-200份，酸枣仁总生物碱4-30份，酸枣仁总黄酮0-50份。根据酸枣仁各部位的极性与酸碱性不同，采用酸碱和溶液萃取法分离纯化的工艺制得，制备方法简单，产品价格适中。在现有制备工艺中未见同时分离酸枣仁中三种有效部位的报道。与现有技术相比，以本发明制备的酸枣仁各有效部位组合而成的组合物，其解郁安神药理活性超过酸枣仁药材，且进一步制成的制剂可减少服用量，增强药物的顺应性，无毒副作用。

Description

酸枣仁解郁安神组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种具有解郁安神功效，治疗失眠症、抑郁症的酸枣仁组合物及其制备方法，属于中药领域。

背景技术

失眠是一种最常见的睡眠障碍；抑郁症是一种常见的情感性精神障碍，以显著而持久的心境低落为主要特征的综合症。我国传统中医学认为，不寐即失眠；抑郁症属“郁证”，不寐与郁证均属于情志疾病范畴，均是由于情志刺激导致人体阴阳气血失调，脏腑功能紊乱，以至心神失养或不安所致，是人体致病的重要因素。祖国医学多从调肝养血安神入手治疗情志异常，临床疗效显著。现代医学认为：失眠不单是睡眠生理紊乱过程，同时还是一个心理紊乱过程。研究表明失眠症的患者多伴有焦虑、抑郁和其它精神病理症状。随着社会竞争的日益加剧、生活节奏的加快，抑郁症、失眠等情志疾病的发病率正急剧上升。目前临床应用的抗抑郁与镇静催眠类药物多为西药，毒副作用明显，价格昂贵，有成瘾性等缺点。

人们在长期环境压力下可导致各种情绪障碍，以抑郁为常见的表现，而失眠又是精神疾病早期和常见的症状。临床研究表明：抑郁症患者在情绪低落的同时，又常表现出心烦意乱，焦虑等特征，有80％的病人还可出现严重的失眠，因此采用安神开窍中药治疗实属必要。现今国内外研究解郁安神类中药，还是分别按照抗抑郁、镇静催眠类西药的研究思路进行，不能体现中药多途径、多靶点的整体作用。而临床常采用安神类中药治疗抑郁症，说明此类中药常同时表现解郁、安神两方面的药理活性，按照西药研究模式把它们分割开来，不符合中医药传统理论和用药方式。

在对近10年来抗抑郁复方中药的组成及治法进行分析，发现各类抗抑郁药物中以安神药出现频率为最高，而单味药中，使用最多的是酸枣仁、远志。酸枣仁为传统的解郁安神类中药，具有养肝宁心、敛汗生津之功效，用于治疗虚烦不眠、神经衰弱、体虚多汗等，常以单方或复方形式用于虚烦不眠。近年来的化学研究表明酸枣仁药材中包括皂苷、黄酮、生物碱类成分，虽有文献报道酸枣仁皂苷、黄酮类部位均有镇静催眠作用，但也有研究对皂苷的镇静催眠药效表示质疑。而本课题组多年的研究表明酸枣仁生物碱类也具有明显的镇静催眠和抗抑郁作用，说明这些有效部位的不同配伍变化(包括部位组成和比例的改变)可引起功效上发生改变。基于上述研究思路，本发明以中医药整体理论为基础，以“解郁安神”为治疗原则，研制出一种治疗失眠症、抑郁症的中药有效部位组合物。

发明内容

本发明的目的是提供一种治疗失眠症、抑郁症的药物组合物。

本发明的另一目的是提供酸枣仁各有效部位的制备方法。

本发明的配方的原料组成及重量配比为：

酸枣仁总皂苷16-200份，酸枣仁总生物碱4-30份，酸枣仁总黄酮0-50份。

优选的原料组成及用量为：酸枣仁总皂苷90-160份，酸枣仁总生物碱12-16份，酸枣仁总黄酮0-10份。

最佳方案的原料组成及用量为：酸枣仁总皂苷92份，酸枣仁总生物碱13份。

本发明中所用酸枣仁(SEMEN ZIZIPHI SPINOSAE)为鼠李科植物酸枣Ziziphus jujubaMill.var.spinosa(Bunge)Hu ex H.F.Chou的干燥成熟种子。

所用药材为市售的经过检验合格的中药材。

在本发明中，所述中药组合物的剂型可为口服液、片剂、胶囊、软胶囊、滴丸、合剂和颗粒剂等，优选为口服液。

制备本发明的有效部位的方法包括以下工艺步骤：

①酸枣仁粉碎，通过40目筛，以石油醚脱脂后，加入6～10质量倍的体积百分浓度为60％～80％的乙醇水溶液，加热回流提取2～3次，每次1～3小时，滤过，合并提取液，滤液浓缩乙醇至无醇味后用2～6倍量水溶解，18％HCl调pH 5，用正丁醇萃取4-6次，得正丁醇液1及酸水液；

②酸水液先以正丁醇萃取4-6次，得正丁醇液2，然后酸水液加氨水调pH12，用2～5倍量乙酸乙酯萃取3-6次，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总生物碱粉末；

③将正丁醇液1与正丁醇液2合并，得正丁醇中间提取液A液，中间提取液A液以1％NaOH洗涤6-10次，合并碱水层，用5％HCl调pH 5，再以正丁醇萃取4-6次，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总黄酮粉末；

④中间提取液A液以1％NaOH洗涤后的正丁醇液，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总皂苷粉末；

⑤将酸枣仁有效部位酸枣仁皂苷16-200份，生物碱4-30份，黄酮0-50份混合均匀，加入适宜药用辅料，按常规方法制成各种制剂。

上述制备方法中步骤①中优选方法为酸枣仁粉碎，通过40目筛，以石油醚脱脂后，加入8质量倍的体积百分浓度为70％的乙醇水溶液，加热回流提取2次，每次2小时，滤过，合并提取液，滤液浓缩乙醇至无醇味后用4倍量水溶解，18％HCl调pH 5，用正丁醇萃取5次，得正丁醇液1及酸水液。

优化方法为步骤②中酸水液先以正丁醇萃取5次，得正丁醇液2。然后酸水液加氨水调pH12，用3倍量乙酸乙酯萃取5次，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总生物碱粉末。

优化方法为步骤③中将正丁醇液1与正丁醇液2合并，得正丁醇中间提取液A液。中间提取液A液以1％NaOH洗涤8次，合并碱水层，用5％HCl调pH 5，再以正丁醇萃取5次，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总黄酮粉末。

优化方法为步骤⑤中酸枣仁总皂苷为92份，酸枣仁总生物碱为13份。

本发明的有益效果为：根据酸枣仁各部位的极性与酸碱性不同，采用酸碱和溶液萃取法分离纯化的工艺制得，制备方法简单，产品价格适中。在现有制备工艺中未见同时分离酸枣仁中三种有效部位的报道。与现有技术相比，以本发明制备的酸枣仁各有效部位组合而成的组合物，其解郁安神药理活性超过酸枣仁药材，且进一步制成的制剂可减少服用量，增强药物的顺应性，无毒副作用。

附图说明

图1酸枣仁各有效部位提取、分离流程图。

具体实施方式

以下通过实施例来进一步阐述本发明所述药物组合物的有益效果。

实施例

实施例1-8的药材处理方法相同，不同之处仅在于三种酸枣仁有效部位重量配比的差异，如表1所示，药材处理方法如下：

a.酸枣仁粉碎，通过40目筛，以石油醚脱脂后，加入8质量倍的体积百分浓度为70％的乙醇水溶液，加热回流提取2次，每次2小时，滤过，合并提取液，滤液浓缩乙醇至无醇味后用4倍量水溶解，18％HCl调pH 5，用正丁醇萃取5次，得正丁醇液1及酸水液。

b.酸水液先以正丁醇萃取5次，得正丁醇液2。然后酸水液加氨水调pH12，用3倍量乙酸乙酯萃取5次，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总生物碱粉末。

c.将正丁醇液1与正丁醇液2合并，得正丁醇中间提取液A液。中间提取液A液以1％NaOH洗涤8次，合并碱水层，用5％HCl调pH 5，再以正丁醇萃取5次，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总黄酮粉末。

d.中间提取液A液以1％NaOH洗涤后的正丁醇液，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总皂苷粉末。

e.将酸枣仁的有效部位酸枣仁总皂苷、酸枣仁总生物碱、酸枣仁总黄酮等如表1所示混合均匀，加入适宜药用辅料，按常规方法制成口服液。

表18组中药组合物口服液的原料配比(单位：mg)

对8组实施例制成的口服液进行药效学比较：

1.材料

1.1实验动物：雄性ICR小鼠(SPF级，体重20±2g)购于中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所，合格证号：SCXK(京)2009-0008。实验前在实验室饲养1周，适应环境。室温22±2℃，相对湿度65％～70％。日光照12h，自由饮食、摄水。

1.2药物与试剂：盐酸氟西汀分散片(美国礼来公司，批号：9705A，20mg/片)；戊巴比妥钠(广州化学试剂厂，CP)；利血平注射液(广东邦民制药厂有限公司，批号：090918，1ml∶1mg)；解郁安神颗粒(吉林百姓堂药业有限公司，批号：20100103075，5g/袋)。

1.3实验仪器：水槽、秒表、MC-3数字式温度体温计

2.灌胃药液的配置

2.1不同配比复方灌胃药液的配置：

将表1中酸枣仁有效部位按不同剂量混合均匀，以蒸馏水溶解，折合成小鼠的等效剂量按照0.1ml/10g灌胃给药。

2.2阳性对照药的制备：

取盐酸氟西汀分散片(20mg/片)1片，以40ml蒸馏水溶解，配成0.5mg/ml的药液，按照0.15ml/10g给药，即为抗抑郁阳性对照组。

取解郁安神颗粒(5g/袋)1袋，以40ml蒸馏水溶解，配成0.125mg/ml的药液，按照0.1ml/10g给药，即为催眠阳性对照组。

2.3酸枣仁药材药液的配置：

酸枣仁粉碎，通过40目筛，加入8质量倍的体积百分浓度为70％乙醇溶液，加热回流提取3次，每次2小时，滤过，合并提取液，滤液浓缩至浸膏，真空干燥得酸枣仁粗提物，加蒸馏水配成79.4mg/ml的药液。

3.不同配比的复方酸枣仁口服液药效学评价

3.1将实验动物按表2分组及给药，于每日上午9:00～10:00灌胃一次，连续灌胃14天。分别于第1，5，10天监测体重。

3.2与阈上剂量戊巴比妥钠协同实验：各组小鼠于给药第6天，灌胃0.5h后腹腔注射阈上剂量戊巴比妥钠，剂量为40mg/kg。注射后开始计时，记录睡眠潜伏期及睡眠时间。以翻正反射消失时为睡眠起始时间，翻正反射恢复为睡眠结束时间。腹腔注射后到睡眠起始这段时间为睡眠潜伏期，潜伏期超过15min，按15min记录。

3.3小鼠强迫游泳实验：给药方案同上，末次给药后1h进行实验。实验前(即第13天)小鼠训练游泳6min，24h后测试：将小鼠放入水深10cm的5000ml烧杯内(高20cm，直径14cm)，水温25±2℃。观察6min，记录比较各组后4min内小鼠的不动时间。

3.4动物不动行为的评判标准：悬尾实验中动物不动行为的评判标准是小鼠头部向下，四肢自然下垂，脊背未向两侧弯曲。小鼠前肢有微幅移动仍视为不动。强迫游泳实验中，小鼠微卷躯体，头部露出，但保持总体水平姿势漂浮于水面，即为不动时间。

3.5拮抗利血平诱发的小鼠体温降低实验：动物分组及给药方案同上。体温测定采用数字式电子体温计。事先用少许硅油涂擦电子体温计，使之润滑，将体温计探头轻轻插入小鼠肛门1-2cm，当温度显示稳定后记录读数，作为基础体温。之后灌胃给予相应药物，1h后腹腔给药利血平注射液2.5mg/kg，然后分别在1、4及24小时后测定体温，以体温降低值(ΔT＝T_基础-T)作为指标，进行统计分析。

4统计学分析

数据以均值±标准差的形式表示。采用单因素方差分析法进行统计学分析。数据由SPSS软件处理，p＜0.05或p＜0.01具有显著性差异。

表2实验动物分组及给药方案

组别	组别	动物数	剂量mg/kg
				-	模型对照组(蒸馏水)	10	0.1ml/10g
-	阳性对照组(氟西汀)	10	7.5
				-	阳性对照组(解郁安神颗粒)	10	1250
-	酸枣仁药材组	10	794
				1	药液1组	10	生物碱5+黄酮10+皂苷65
2	药液2组	10	生物碱8+黄酮30+皂苷200
				3	药液3组	10	生物碱11+黄酮50+皂苷20
4	药液4组	10	生物碱14+黄酮0+皂苷155
				5	药液5组	10	生物碱17+黄酮20+皂苷0
6	药液6组	10	生物碱20+黄酮40+皂苷110
				7	药液7组	10	生物碱13+黄酮0+皂苷92
8	药液8组	10	生物碱20+黄酮0+皂苷200

5结果

本实验所得数据以均值±标准差的形式表示。数据由SPSS软件处理，采用单因素方差分析法进行统计学分析，p＜0.05或p＜0.01具有显著性差异。统计内容包括与阈上剂量戊巴比妥钠协同实验中睡眠潜伏期及睡眠时间、小鼠强迫游泳实验中不动时间和拮抗利血平诱发小鼠体温降低幅度。

5.1小鼠体重检测

各组小鼠在第1，5，10，15天的体重统计见表3。结果表明，各组间小鼠体重均无显著性差异，且体重变化的幅度和趋势较为随意，说明药物对小鼠体质无明显影响。

表3小鼠体重监测值(g)

5.28组实施例的中药组合物对阈上剂量戊巴比妥钠镇静催眠协同作用的影响

各组小鼠睡眠潜伏期和睡眠时间结果见表4。

表48组实施例的中药组合物对小鼠阈上剂量戊巴比妥钠镇静催眠协同作用的影响

组别	睡眠潜伏期(s)	睡眠时间(min)
			模型对照组	812.40±148.78	8.90±12.03
氟西汀组	763.30±227.61	31.10±13.18
			解郁安神颗粒组	732.50±189.59	21.22±12.44
酸枣仁药材组	670.11±173.17	27.89±15.59^*
			1	820.08±158.07	17.08±4.84
2	690.75±249.99	36.50±16.61^**
			3	562.83±166.32^**	36.42±11.26^**
4	511.91±202.11^**	38.54±15.56^**
			5	587.91±164.39^**	30.18±11.11^**
6	539.00±153.20^**	36.45±14.84^**
			7	662.10±165.13^*	35.22±13.19^**
8	531.40±122.11^**	39.73±13.91^**

注：^*与模型对照组比较p＜0.05，^**与模型对照组比较p＜0.01

由表4结果显示：给药3、4、5、6、8组与模型对照组比较，睡眠潜伏期差异有高度统计学意义(P＜0.01)，明显缩短各给药组小鼠睡眠潜伏期。给药2、3、4、5、6、7、8组与模型对照组比较，睡眠时间差异有高度统计学意义(P＜0.01)，可以显著延长各给药组小鼠阈上剂量戊巴比妥钠所致睡眠时间。

5.38组实施例的中药组合物对小鼠强迫游泳不动时间的影响

各组小鼠强迫游泳不动时间结果见表5。

表58组实施例的中药组合物对小鼠强迫游泳实验不动时间的影响

注：^*与模型对照组比较p＜0.05，^**与模型对照组比较p＜0.01

小鼠在强迫游泳模型中表现的不动状态反映了动物的绝望行为，可模拟人类的抑郁状态。从表中可以看出，酸枣仁各部位不同配比药液组与模型对照组比较均能不同程度的缩短强迫游泳小鼠的不动时间，药液1、4、6、8组及酸枣仁药材组与模型对照组比较能显著缩短强迫游泳小鼠的不动时间，有统计学意义(p＜0.01，p＜0.05)。其他组虽能不同程度地缩短强迫游泳小鼠不动时间，但差异较小。特别是药液7组小鼠不动时间减少百分率达到61.54％，与模型对照组相比较有显著性差异(p＜0.01)。

5.48组实施例的中药组合物对利血平诱发小鼠体温变化的影响

实验结果见表6。

表68组实施例的中药组合物对利血平诱发小鼠体温变化的影响

注：^*与模型对照组比较p＜0.05，^**与模型对照组比较p＜0.01

从表中可以看出，腹腔注射利血平1h时，各组体温均开始下降，4h内体温明显下降，且24h后体温并未恢复。解郁安神颗粒对照组、药液1、2、3、4、5、7组在1h内具有明显拮抗体温下降的作用，与模型组比较有统计学意义。4h后体温下降幅度最大，1、2、3、5、7组体温下降幅度较模型对照组小，具有明显拮抗体温下降的作用体温变化有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)，其余给药各组也不同程度地降低了利血平的作用幅度，但并无统计学意义。表6可知，24h时，各组体温较4h时均有不同程度的恢复。其中药液3、4、5、7、8组体温上升，尤其是药液4、7组回升明显。

Claims

1.一种酸枣仁解郁安神组合物，其特征在于，它由下列重量份的酸枣仁有效部位所组成：酸枣仁总皂苷16-200份，酸枣仁总生物碱4-30份，酸枣仁总黄酮0-50份。

2.根据权利要求1所述酸枣仁解郁安神组合物，其特征在于，它由下列重量份的酸枣仁有效部位所组成：

酸枣仁总皂苷90-160份，酸枣仁总生物碱12-16份，酸枣仁总黄酮0-10份。

3.根据权利要求1所述酸枣仁解郁安神组合物，其特征在于，所述酸枣仁总皂苷92份，酸枣仁总生物碱13份。

4.根据权利要求1-3任意一项所述酸枣仁解郁安神组合物，其特征在于，通过以下方法制得：

⑤将酸枣仁有效部位酸枣仁总皂苷16-200份，酸枣仁总生物碱4-30份，酸枣仁总黄酮0-50份混合均匀，加入适宜药用辅料，按常规方法制成各种制剂。

5.根据权利要求1-3任意一项所述酸枣仁解郁安神组合物，其特征在于，所述组合物的剂型为口服液、片剂、胶囊剂、滴丸剂和颗粒剂中的一种。

6.一种酸枣仁解郁安神组合物的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

7.根据权利要求6所述酸枣仁解郁安神组合物的制备方法，其特征在于，所述步骤①为酸枣仁粉碎，通过40目筛，以石油醚脱脂后，加入8质量倍的体积百分浓度为70％的乙醇水溶液，加热回流提取2次，每次2小时，滤过，合并提取液，滤液浓缩乙醇至无醇味后用4倍量水溶解，18％HCl调pH 5，用正丁醇萃取5次，得正丁醇液1及酸水液。

8.根据权利要求6所述酸枣仁解郁安神组合物的制备方法，其特征在于，所述步骤②中酸水液先以正丁醇萃取5次，得正丁醇液2，然后酸水液加氨水调pH12，用3倍量乙酸乙酯萃取5次，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总生物碱粉末。

9.根据权利要求6所述酸枣仁解郁安神组合物的制备方法，其特征在于，所述步骤③中将正丁醇液1与正丁醇液2合并，得正丁醇中间提取液A液，中间提取液A液以1％NaOH洗涤8次，合并碱水层，用5％HCl调pH 5，再以正丁醇萃取5次，回收溶剂，浓缩物真空干燥，粉碎，即为酸枣仁总黄酮粉末。

10.根据权利要求1-3任意一项所述酸枣仁解郁安神组合物在制备治疗失眠症、抑郁症药物的应用。