CN101903377A - 6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷衍生的非类固醇矿皮质激素受体拮抗剂 - Google Patents

6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷衍生的非类固醇矿皮质激素受体拮抗剂 Download PDF

Info

Publication number
CN101903377A
CN101903377A CN2008801215272A CN200880121527A CN101903377A CN 101903377 A CN101903377 A CN 101903377A CN 2008801215272 A CN2008801215272 A CN 2008801215272A CN 200880121527 A CN200880121527 A CN 200880121527A CN 101903377 A CN101903377 A CN 101903377A
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
methyl
salt
subunit
oxepane
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2008801215272A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101903377B (zh
Inventor
K·加瓦迪纳斯
P·K·贾达夫
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Eli Lilly and Co
Original Assignee
Eli Lilly and Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=40430143&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CN101903377(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Eli Lilly and Co filed Critical Eli Lilly and Co
Publication of CN101903377A publication Critical patent/CN101903377A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101903377B publication Critical patent/CN101903377B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/06—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/38—Drugs for disorders of the endocrine system of the suprarenal hormones
    • A61P5/40—Mineralocorticosteroids, e.g. aldosterone; Drugs increasing or potentiating the activity of mineralocorticosteroids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/38—Drugs for disorders of the endocrine system of the suprarenal hormones
    • A61P5/42—Drugs for disorders of the endocrine system of the suprarenal hormones for decreasing, blocking or antagonising the activity of mineralocorticosteroids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/06—Antiarrhythmics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)

Abstract

本发明提供式(I)的化合物，和治疗生理病症，特别是充血性心脏衰竭、高血压、糖尿病性肾病或慢性肾病的方法。本发明涉及非类固醇矿皮质激素受体拮抗剂。

Description

6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷衍生的非类固醇矿皮质激素受体拮抗剂
技术领域
本发明涉及可用作治疗对矿皮质激素受体拮抗剂敏感的生理病症的治疗剂的三环化合物，涉及包括该化合物的药物组合物，使用该化合物治疗患者的生理病症的方法，和可用于合成该化合物的中间体和方法。
背景技术
醛甾酮为主要的内原性矿皮质激素，其通过在与矿皮质激素受体(MR)相互作用之后促进钠和水再吸收以及钾排泄，来调节血液动力学体内平衡。由于醛甾酮保持电解质和水平衡的作用，MR拮抗剂已经用于治疗许多生理病症，包括高血压、低钾血症、心肌心律不齐、巴特氏综合征，以及原发性或继发性高醛甾酮症，例如Conn氏综合症。近年来，MR拮抗剂已经用于治疗充血性心脏衰竭和急性心肌梗塞。另外，MR拮抗剂也已证明在临床前肾病模型中且与标准治疗结合可有效减少患有肾病，例如慢性肾病，包括糖尿病性肾病的患者的蛋白尿。
但是，现有MR拮抗剂产生相伴的作用，限制其安全性和/或有效性。例如，螺甾内酯是一种有效的MR拮抗剂，其是非选择性的并且与作为其它生理学过程的媒介的其它核激素受体(例如雄激素受体(AR)、孕酮受体(PR)或糖皮质激素受体(GR))交叉反应。螺甾内酯疗法已经与高钾血症和男性乳房增大症、勃起功能障碍、性欲减退、月经不调以及胃部不适相联系。尽管依普利酮(Eplerenone)相对于其它核激素受体而言对MR是选择性的，但是其也与高钾血症相关。因此，本领域中仍然需要现有MR拮抗剂疗法的替代方法。
本发明的目的是提供具有MR拮抗剂活性的非类固醇MR配体。作为优选实施方案，目的是提供非类固醇MR拮抗剂，相对于AR、PR和GR，其与MR结合具有更大的亲合性。作为更优选实施方案，目的是提供非类固醇MR拮抗剂，相对于AR、PR和GR，其与MR结合具有更大的亲合性，并且具有有效的肾脏或心脏保护活性。作为更优选实施方案，本发明的目的是提供非类固醇MR拮抗剂，相对于AR、PR和GR，其与MR结合具有更大的亲合性，并且其具有有效的肾脏或心脏保护活性，但是产生高钾血症的发生率或可能性降低。
任何治疗剂的重要考虑因素为该试剂是否能够引起QT间隔延长。治疗剂可以引起QT间隔延长的中心机理为通过阻断心肌中的hERG通道。阻断hERG通道防止钾离子通过心脏细胞膜，导致细胞的动作电位延长，这可以导致危险的心脏心律不齐。因此，本发明的另一个优选实施方案提供阻断hERG通道的发生率或可能性降低的MR拮抗剂。
三环MR配体在本领域中是已知的。例如WO 04/052847和WO05/066161公开三环类固醇激素受体调节剂，其可用于治疗对矿皮质激素受体或糖皮质激素受体调节敏感的病症。本发明涉及以下发现：如下式(I)给出的某些新的三环化合物具有如由体外和体内测试证明的特定活性概况，表明它们具有治疗或预防对矿皮质激素受体拮抗剂疗法敏感的病症的功效。具体地，示例的式(I)的化合物是拮抗矿皮质激素受体的有效MR配体。
因此，本发明提供式(I)的化合物
Figure BPA00001160451200021
式(I)
其中，
R1和R2各自独立地表示氢或氟；
L表示-(CH2)2-、-CH(CH3)-CH2-或直接键接；
R3表示氢或下式的基团：
Figure BPA00001160451200031
R4表示-CN或-C(O)NH2，或其药学可接受盐。
在另一个实施方案中，本发明提供一种治疗或预防充血性心脏衰竭、糖尿病性肾病、慢性肾病、高血压、低钾血症、心肌心律不齐、Bartter氏综合征、原发性或继发性高醛甾酮症或Conn氏综合症的方法，包括向有需要的患者施用有效量的式(I)的化合物或其药学可接受盐。作为更具体的方面，本发明提供一种治疗或预防充血性心脏衰竭、高血压、糖尿病性肾病或慢性肾病的方法。
此外，本发明提供一种式(I)的化合物或其药学可接受盐，用于治疗或预防充血性心脏衰竭、糖尿病性肾病、慢性肾病、高血压、低钾血症、心肌心律不齐、Bartter氏综合征、原发性或继发性高醛甾酮症或Conn氏综合症。更具体地，本发明提供一种式(I)的化合物或其药学可接受盐，用于治疗或预防充血性心脏衰竭、高血压、糖尿病性肾病或慢性肾病。另外，本发明提供一种式(I)的化合物或其药学可接受盐，用于治疗。
在另一个实施方案中，本发明提供式(I)的化合物或其药学可接受盐的用途，用于制备治疗或预防充血性心脏衰竭、糖尿病性肾病、慢性肾病、高血压、低钾血症、心肌心律不齐、Bartter氏综合征、原发性或继发性高醛甾酮症或Conn氏综合症的药物。更具体地说，本发明提供式(I)的化合物或其药学可接受盐的用途，用于制备治疗或预防充血性心脏衰竭、高血压、糖尿病性肾病或慢性肾病的药物。
另外，本发明提供一种药物组合物，包括式(I)的化合物或其药学可接受盐，以及一种或多种药学可接受载体、稀释剂或赋形剂。更具体地，本发明提供一种用于治疗或预防充血性心脏衰竭、高血压、糖尿病性肾病或慢性肾病的药物组合物，包括式(I)的化合物或其药学可接受盐，以及一种或多种药学可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
本发明还包括可用于合成式(I)的化合物的新的中间体和方法。
本发明还涉及式(I)的化合物或式(I)的化合物的药学可接受盐的溶剂化物。因此，当在此使用时，术语“式(I)”，或式(I)的任何具体化合物在其含义内包括任何该化合物的溶剂化物。药学可接受盐及其制备方法的实例充分处于本领域技术人员的知识水平内。参见例如Stahl等，“Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties，Selection and Use(药用盐手册：性质、选择和用途)”，VCHA/Wiley-VCH，(2002)；Gould，P.L.，“Salt selection for basic drugs(基本药物盐的选择)”，InternationalJournal of Pharmaceutics，33：201-217(1986)；Berge等，“PharmaceuticalSalts(药用盐)”，Journal of Pharmaceutical Sciences，66，第1期，(1977年1月)；和Bastin等，“Salt Selection and Optimization Proceduresfor Pharmaceutical New Chemical Entities(药用新化学物质的盐选择和优化过程)”，Organic Process Research and Development，4：427-435(2000)。特别提及式(I)的化合物的盐酸盐、马来酸盐和甲磺酸盐。
本发明的化合物可具有一个或多个手性中心，并因此以各种立体异构的构型存在。由于这些手性中心的存在，本发明的化合物可以以外消旋物、对映异构体的混合物和单独的对映异构体以及非对映异构体和非对映异构体的混合物的形式存在。除非在此特别说明，所有这种外消旋物、对映异构体和非对映异构体都在本发明范围内。由本发明提供的化合物的对映异构体可以例如由本领域普通技术人员，使用标准技术，如由J.Jacques等人，“Enantiomers，Racemates，and Resolutions(对映体、消旋物和拆分)”，John Wiley and Sons，Inc.，1981描述的那些技术，以及本文中的流程、制备和实施例中提供的那些技术来，来进行拆分。
式I的化合物的特定立体异构体和对映异构体可以由本领域普通技术人员，使用公知技术和方法，如由Eliel和Wilen，“Stereochemistry ofOrganic Compounds(有机化合物的立体化学)”，John Wiley & Sons，Inc，1994，第7章；Separation of Stereoisomers，Resolution，Racemization(立体异构体的分离、拆分和外消旋化)；和由Collet和Wilen，“Enantiomers，Racemates，and Resolutions(对映体、外消旋物和拆分)”，John Wiley & Sons，Inc.，1981公开的那些，以及本文中的流程、制备和实施例中提供的那些技术来制备。例如，特定立体异构体和对映异构体可以由立体有择合成，使用对映异构和几何异构纯，或对映异构或几何异构富集的起始原料来制备。另外，特定立体异构体和对映异构体可以由一些技术来拆分和回收，所述技术例如是手性固定相层析、酶催拆分或用于此目的的试剂形成的加成盐的分级再结晶。
如在有机化学中通常使用的，术语“R”和“S”在这里用来表示手性中心的特定构型。术语“(±)”、“R/S”或“RS”表示手性中心的外消旋构型。优先物的部分列表和立体化学的论述包含在“Nomenclature ofOrganic Compounds：Principles and Practice(有机化合物的命名：原理和实践)”，(J.H.Fletcher等编，1974)中。如本领域普通技术人员将理解的，含有碳-碳或碳-氮双键的分子可以几何异构体的形式存在。通常使用两种方法来表示特定异构体，“顺式-反式”法和“E和Z”法，取决于连接各双键原子的基团相同或不同。立体异构的论述和特定异构体的命名可以在March，“Advanced Organic Chemistry(高等有机化学)”，John Wiley & Sons，1992，第4章中找到。所有此类几何异构体和单独异构体的混合物均由本发明预期和提供。
本发明的化合物可以配制为药物组合物的一部分。因此，包括式(I)的化合物或其药学可接受盐以及可药用载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物是本发明的重要实施方案。药物组合物及其制备方法的实例是本领域中公知的。参见例如REMINGTON：THE SCIENCE AND PRACTICEOF PHARMACY(雷明顿：药学科学和实践)(A.Gennaro等编，第19版，Mack Publishing(1995))。包括式(I)的化合物的说明性组合物包括例如：净化水中的悬浮体形式的式(I)的化合物，具有0.5％羧基甲基纤维素、0.25％ Polysorbate 80和2.7％NaCl；悬浮体形式的式I的化合物，具有1％羧基甲基纤维素和0.25％ Polysorbate 80；悬浮体形式的式I的化合物，具有1％羧基甲基纤维素、0.25％ Polysorbate 80和0.05％ AntiFoam1510TM。但是应理解本发明的优选组合物包括配制在胶囊或片剂中的式(I)的化合物或其药学可接受盐。
式(I)的化合物或包括式(I)的化合物的组合物可以由使得该化合物生物可用的任何途径施用，包括口服和非肠道途径。
本领域技术人员应理解粒度可能影响药剂的体内溶解，进而可能影响药剂的吸收。如在此使用的，“粒度”表示如通过例如激光散射、激光衍射、Mie散射、沉降场流分级、光子相关光谱等常规方法测定的药剂颗粒的直径。当药剂溶解性差时，小的或减小的粒度可以帮助溶解，并因此增加试剂的吸收。Amidon等，Pharm.Research，12；413-420(1995)。减小或控制粒度的方法是常规的并且包括碾磨、湿磨、微粉化等。控制粒度的另一个方法包括制备纳米悬浮液形式的药剂。本发明的特殊实施方案包括式(I)的化合物或包括式(I)的化合物的药物组合物，其中所述化合物具有低于约50μm的d90粒度(即其中90％颗粒小于或等于的尺寸)。更特殊的实施方案包括d90粒度低于约10μm的式I的化合物。
如在此使用的，术语“患者”表示人类或非人类哺乳动物，例如狗、猫、奶牛、猴子、马或绵羊。更具体地，术语“患者”表示人类。如在此使用的，术语“治疗”包括阻止、预防、限制、减缓、终止或逆转现有症状或病症的进展或严重性。如在此使用的，术语“预防”表示阻止、限制或抑制症状或病症的发生或出现。如本领域技术人员理解的，生理病症可以表现为“慢性”状态，或“急性”发作。因此，病症的治疗预期急性事件和慢性状态。在急性事件中，化合物在症状开始时施用并在症状消失时停用，而慢性状态是在整个疾病过程期间进行治疗。
如在此使用的，术语“有效量”表示向患者施用单一剂量或多个剂量时，在诊断或治疗的患者中提供所需效果的式(I)的化合物的量或剂量。有效量可以由作为本领域技术人员的主治诊断医师，通过考虑以下许多因素，容易地确定：哺乳动物的种类；其体型、年龄和一般健康；所涉及的特定疾病；疾病的程度或严重性；个别患者的反应；施用的特定化合物；施用方式；施用的制剂的生物可用性特征；选择的给药方案；和任何相伴药物的使用。
当结合本发明的方法和用途使用时，本发明的化合物和组合物可以单独施用，或者与用来治疗特定病症或状态的常规治疗剂联合施用。当本发明的化合物或组合物作为组合的一部分使用时，化合物或包括式(I)的组合物可以单独施用，或者作为包括要与其组合的治疗剂的配方的一部分施用。
如在此使用的，符号表示向前突出页面平面的键，而符号
Figure BPA00001160451200062
表示向后突出页面平面的键。
本发明的特殊方面
以下清单列出式(I)的化合物的特定构型、取代基和可变物的若干分组。应理解具有这种特定构型、取代基或可变物满足条件式(I)的化合物，以及方法、用途和包括这种化合物的组合物代表本发明的特定方面。
因此，本发明的一个特定方面为其中式(I)的化合物为L、R3和R4具有在此定义的值的任一个，和满足以下条件的化合物：
(a)R1表示氢，R2表示氢或氟；或
(b)R1表示氢，R2表示氢或氟；或
(c)R1表示氢或氟，R2表示氢；或
(d)R1表示氢或氟，R2表示氟；或
(e)R1和R2各自独立地表示氢。
本发明的其它特定方面为其中式(I)的化合物为R1、R2、R3和R4具有在此定义的值的任一个，和满足以下条件的那些化合物：
(a)L表示-CH(CH3)-CH2-或直接键接；或
(b)L表示-CH(CH3)-CH2-；或
(c)L表示直接键接。
本发明的其它特定方面为其中式(I)的化合物为R1、R2、L和R4具有在此定义的值的任一个，和满足以下条件的那些化合物：
(a)R3表示氢或下式的基团：
Figure BPA00001160451200071
(b)R3表示下式的基团
Figure BPA00001160451200081
本发明的其它特定方面为其中式(I)的化合物为R1、R2、L和R4具有在此定义的值的任一个，和满足以下条件的那些化合物：
(a)R3表示氢或下式的基团：
Figure BPA00001160451200082
Figure BPA00001160451200091
(b)R3表示下式的基团
Figure BPA00001160451200092
(c)R3表示下式的基团
Figure BPA00001160451200093
本发明的其它特定方面为其中式(I)的化合物为R1、R2、L和R3具有在此定义的值的任一个，和满足以下条件的那些化合物：
(a)R4表示-CN或
(b)R4表示-C(O)NH2。
本发明的更特定的方面为式(I)的化合物为以下化合物，其中R1和R2各自独立地表示氢或氟；
L表示-CH(CH3)-CH2-或直接键接；
R3表示氢或下式的基团：
Figure BPA00001160451200101
R4表示-CN或-C(O)NH2，或其药学可接受盐。
本发明的更特定方面为式(I)的化合物，其中，
R1和R2各自独立地表示氢或氟；
L表示-CH(CH3)-CH2-或直接键接，条件是当L表示-CH(CH3)-CH2-时，则R3表示下式的基团：
Figure BPA00001160451200102
和当L表示直接键接时，则R3表示下式的基团：
Figure BPA00001160451200111
R4表示-CN或-C(O)NH2，或其药学可接受盐。
本发明的其它特定方面由以下式I(a)和式I(b)的化合物提供。应理解式I(a)和式I(b)的化合物，以及使用这种化合物的方法和用途，和包括这种化合物的组合物代表本发明的特定的其它方面。
因此，本发明的一个特定方面由式I(a)的化合物提供：
Figure BPA00001160451200112
式I(a)
其中，
R1和R2各自独立地表示氢或氟；
L表示-CH(CH3)-CH2-或直接键接；和
R3表示氢或下式的基团：
Figure BPA00001160451200121
或其药学可接受盐。
本发明的更特定方面由式I(a)的化合物提供，其中：
R1和R2各自独立地表示氢或氟；和
L表示-CH(CH3)-CH2-或直接键接，条件是当L表示-CH(CH3)-CH2-时，则R3表示下式的基团：
Figure BPA00001160451200122
和当L表示直接键接时，则R3表示下式的基团：
Figure BPA00001160451200123
或其药学可接受盐。
本发明的另一个特定方面由式I(b)的化合物提供：
式I(b)
其中，
R1和R2各自独立地表示氢或氟；
L表示-CH(CH3)-CH2-或直接键接；和
R3表示下式的基团：
Figure BPA00001160451200132
或其药学可接受盐。
本发明的更特定方面由式I(b)的化合物提供，其中：
R1和R2各自独立地表示氢或氟；和
L表示-CH(CH3)-CH2-或直接键接，条件是当L表示-CH(CH3)-CH2-时，则R3表示下式的基团：
和当L表示直接键接时，则R3表示下式的基团：
Figure BPA00001160451200134
或其药学可接受盐。
另外，本发明的最特定方面由在此举例说明的那些式(I)的化合物提供，最特别为(E)-N-(5-((E)-3-氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1-(1-甲基-氮杂环丁烷-3-基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基)-氰酰胺；(E)-N-(5-((E)-(3-氟二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11(6H)-亚基)甲基)-1-((3S，4S)-4-羟基-1-甲基吡咯烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-亚基)氰酰胺；顺丁烯二酸(E)-N-(5-((E)-(3-氟二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11(6H)-亚基)甲基)-1-((3S，4S)-4-羟基-1-甲基吡咯烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-亚基)氰酰胺；(E)-N-[5-((E)-3-氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1-((3S，4S)-4-羟基-1-甲基-吡咯烷-3-基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基]-脲；(E)-N-(5-((E)-3-氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1-((R)-1-甲基-2-吗啉-4-基-乙基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基)-脲；或(E)-N-(5-((E)-3-氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1-((7S，8aR)-六氢-吡咯并[2，1-c][1，4]噁嗪-7-基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基)-脲。
式(I)的化合物可以由本领域中已知的各种方法和以下流程、制备和实施例中描述的那些方法制备。但是，以下论述并不希望以任何方式限制本发明的范围。例如，所述各途径的特定合成步骤可以以不同的方式组合，或与不同流程的各步骤相结合，以制备其它式(I)的化合物。以下流程中各步骤的产物可以由包括萃取、蒸发、沉淀、层析、过滤、研磨、结晶等的常规方法回收。
除非另有说明，取代基如前面所定义。试剂和起始原料对于本领域普通技术人员来说是容易获得的。其它必要试剂和起始原料可以通过选自以下的程序来制备：有机和杂环化学的标准技术、与已知的在结构上相似的化合物的合成方法类似的技术，和在下列制备和实施例中描述的程序，包括任何新颖程序。
如在此使用的，以下术语具有标明的含义：“MeOH”表示甲醇；“EtOH”表示乙醇；“EtOAc”表示乙酸乙酯；“DMF”表示二甲基甲酰胺；“DMSO”表示二甲基亚砜；“TFA”表示三氟乙酸；“THF”表示四氢呋喃；“DEAD”表示偶氮二甲酸二乙酯；“DIAD”表示二偶氮二甲酸二异丙酯；“NBS”表示N-溴琥珀酰亚胺；“MCPBA”表示间-氯过氧苯甲酸；“tBOC”或“boc”表示叔丁氧基羰基；“rac”表示外消旋；“prep”表示制备例；“ex”表示实施例；和“HPLC”表示高效液相层析。
流程1
Figure BPA00001160451200151
可以根据流程1中描绘的反应形成式(3)的中间体。
在流程1中，式(1)的胺在亲核性芳香取代(SNAr)置换中与4-溴-1-氟-2-硝基-苯反应，提供式(3)的氨基-硝基-苯基溴化物。例如，胺(1)可以在例如乙酸乙酯、THF的惰性溶剂，或例如乙醇的质子溶剂中，在室温至溶剂的回流温度下反应。
本领域技术人员应理解式(1)的化合物可以由与在此描述的那些方法相似的方法或者通过使用本领域中确定的方法来容易地制备。例如，可以通过N-叔丁基羧基乙醇胺的甲磺酸化，和随后用吗啉置换甲磺酸酯产生所需吗啉基-乙胺，获得甲基取代或未取代的吗啉基乙胺。
同样应认识到适当保护基的选择和使用是本领域中公知和了解的(参见例如Protecting Groups in Organic Synthesis，Theodora Greene(Wiley-Interscience))。胺官能团，例如氮杂环丁烷基部分中存在的胺官能团，可以去保护并且随后进一步反应产生本发明的其它化合物。例如，3-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯在酸性条件下去保护之后，氮杂环丁烷可以在还原性胺化中，例如利用甲醛烷基化，产生N-甲基氮杂环丁烷基中间体。
流程2
Figure BPA00001160451200161
可以根据流程2中描绘的反应形成式(9)的中间体。
在流程2步骤1中，式(4)的酯还原成式(5)的醇。本领域技术人员将认识到存在许多还原酯的方法。例如，式(4)的酯用硼氢化锂在约0至40℃下在例如二乙醚的惰性溶剂中加以处理。10分钟之后结束反应，分离式(5)的叠氮醇，其随后在步骤2中被还原成胺。叠氮化物的还原可以使用本领域中常用的催化氢化条件进行，以获得式(6)的氨基醇。
在流程2步骤3中，4-溴-1-氟-2-硝基-苯与式(6)的胺经历如先前流程1所述的SNAr反应。
在步骤4中，式(7)的苯基-氨基-吡咯烷使用酸性条件，例如氯化氢或三氟乙酸进行去保护，并且产物在步骤5中环化为式(8)的噁嗪酮(oxezinone)。使用氯乙酰氯，在例如氢氧化钠的无机碱存在下，pH保持在pH＝10至12，完成环化。反应在THF和水的混合物(约1∶1)中进行。
在流程2步骤6中，式(8)的噁嗪酮还原成式(9)的噁嗪。使用硼烷-四氢呋喃络合物或硼烷-二甲基硫醚络合物，在例如THF的惰性溶剂，在约0℃至溶剂的回流温度下还原羰基官能团。
式(4)的手性吡咯烷是本领域中已知的，并且可以由3-羟基脯氨酸的立体异构体容易地制备。醇可以进行甲磺酸化，然后利用反转立体化学置换为叠氮化物。可选地，醇可以在Mitsinobu条件下，使用四溴化碳，利用反转立体化学转化成溴化物，随后用叠氮化物离子置换，再次反转立体化学。反式-羟基脯氨酸可以通过在90℃下用乙酸和乙酸酐处理，转化成顺式构型(C.G.Levins和C.E.Schafmeister J.Org.Chem.，2005，70，9002-9008)。
流程3
Figure BPA00001160451200171
可以根据流程3中描绘的反应形成式(14a和b)或(17a和b)的中间体。
在流程3步骤1a中，式(10)的外消旋反式-羟基苯甲基胺吡咯烷可以使用适当的对映纯酸来拆分。例如，在例如具有约1％水的乙腈的适当溶剂中用(+)-扁桃酸处理，使得极高非对映过量的(S，S)羟基苯甲基胺(+)-扁桃酸盐选择性再结晶。该盐然后可以通过使用适当的碱，例如碳酸钾水溶液来中和。在步骤1b中，现在富集(R，R)对映异构体的来自以上再结晶的母液可以蒸发并用例如含有约2.5％水的乙腈的溶剂中的(-)-扁桃酸处理，获得净化的(R，R)对映异构体。
在步骤2中，使用例如碳上的钯的常用催化剂，在例如甲醇、正丁醇或四氢呋喃的常用溶剂中，使游离(S，S)或(R，R)羟基苯甲基胺经历标准氢化条件，获得相应的(S，S)或(R，R)羟胺。
在流程3步骤3中，所得式(12a或b)的氨基吡咯烷与4-溴-1-氟-2-硝基-苯进行SNAr反应，得到式(13a或b)的苯基-氨基吡咯烷。该反应可以在例如三乙胺的适当的碱存在下，在例如四氢呋喃或乙酸乙酯的常用溶剂中进行。
在流程3步骤4中，式(13a或b)的吡咯烷的羟基的手性分别由(S，S)和(R，R)转换为(3R，4S)和(3S，4R)。手性转化使用Mitsunobu反应实现。本领域技术人员将认识到存在各种本领域中使用的Mitsunobu条件。例如，式(15a或b)的醇溶于适当的无水溶剂，例如THF、CH2Cl2、甲苯等，并用三烷基或三芳基膦，例如Me3P、Bu3P或Ph3P和二烷基偶氮-二甲酸酯，例如DEAD或DIAD处理。
在步骤5中，式(15a或b)的3S，4R和4S，3R-氯乙酰氧基酯水解为式(16a或b)的羟基吡咯烷。使用例如氢氧化锂水溶液的无机碱，在例如甲醇的溶剂中，在0至50℃下4至24小时，实现水解。
在流程3步骤6中，使用酸性条件对式(13a或b)和式(16a或b)的四个非对映氨基吡咯烷进行去保护。叔丁氧基羰基基团的去保护是本领域公知的。优选的条件使用惰性溶剂，例如用无水氯化氢气体处理的乙酸乙酯，在约0℃下持续10分钟。所得NH-吡咯烷经受还原性胺化条件，获得式(14a或b)和式(17a或b)的N-甲基吡咯烷。反应在惰性溶剂，例如二氯甲烷、THF或优选乙腈中进行反应，并用甲醛水溶液处理。反应用还原剂，例如硼氢化钠、氰基硼氢钠或优选三乙酰氧基硼氢化钠，在约0至40℃处理4至24小时。
本领域技术人员应理解式(10)的化合物可以由与在此描述的那些方法相似的方法或者通过使用本领域中确定的方法来容易地制备。例如，3-吡咯啉可以用二-叔丁基重碳酸酯加以保护，随后在DMSO/水中溴化，得到反式-3-溴-4-羟基吡咯烷(A.Kamal等，Tetrahedron Lett.，2004，45，8057-8059；A.Kamal等，Tetrahedron Asymmetry，2006，17，2876-2883)。与氢氧化钠反应原位形成环氧化物，其与苯甲基胺反应得到式(10)的外消旋反式-羟基苯甲基胺吡咯烷。以更直接的方式，可以直接形成环氧化物并通过用MCPBA氧化3-吡咯啉来进行分离。在另一个合成备选方案中，2，4-二氯-2-丁烯可以与氨基甲酸叔丁酯反应，产生1-Boc-3-吡咯啉(Y.Tsuzuki等，Tetrahedron Asymmetry，2001，12，2989-2997)。可以通过与甲胺而不是氨基甲酸叔丁酯反应完全避免t-Boc保护基。随后用MCPBA氧化为环氧化物，用氨气开环，产生外消旋反式-4-氨基-1-甲基-吡咯烷-3-醇。其可以与1-溴-4-氟-3-硝基苯反应得到对映异构体混合物形式的式(14a和b)的化合物。可以通过本领域中已知的方法拆分该对映异构体混合物，所述方法例如是手性HPLC或用对映纯羧酸，例如D-(-)或L-(+)-酒石酸等的盐再结晶。
流程4
Figure BPA00001160451200191
在流程4步骤1中，式(18)的反式氨基-羟基-哌啶用苯甲醛经历还原性胺化，得到式(19)的苯甲基氨基哌啶。本领域技术人员将认识到存在各种适合于实现还原性胺化的条件。例如，反应在例如乙醇的溶剂中，在乙酸和例如氰基硼氢钠的还原剂存在下进行。
在流程4步骤2a中，式(19)的外消旋反式-羟基苯甲基胺哌啶可以使用适当的对映纯酸来拆分。例如，在例如具有约5％水的乙腈的适当溶剂中用(+)-酒石酸处理，使得极高非对映过量的式(20a)的(3R，4R)的羟基苯甲基胺(+)酒石酸盐选择性再结晶。类似地，在步骤2b中，外消旋材料在例如含有约2.5％水的乙腈的溶剂中，用(-)酒石酸再结晶，获得净化的式(20b)的(S，S)对映异构体。
在步骤3中，拆分的式(20a)和(20b)的3R，4R和3S，4S对映异构体可以分别通过催化氢化而去苯甲基化为式(21a或b)的氨基羟基哌啶。最初酒石酸盐用碳酸钠或碳酸钾溶液洗涤，随后用二氯甲烷萃取去除酒石酸。然后在例如乙醇或甲醇的惰性溶剂中，使用5或10％碳上的钯氢化游离的苯甲基胺。
在流程4步骤4中，如流程3步骤3中一样将式(21a或b)的氨基羟基哌啶转化成式(22a或b)的苯基-氨基哌啶。
在步骤5中，将式(22a或b)的苯基-氨基哌啶去保护和通过还原性胺化烷基化为式(23a或b)的N-甲基哌啶。反应在乙酸和水的溶剂混合物中，在甲醛和例如氰基硼氢钠的还原剂存在下进行。
式(18)的4-氨基-3-羟基哌啶在本领域中是已知的，并且可以由4-哌啶酮通过还原成4-羟基哌啶，用boc或其它保护基保护来容易地制备。醇可以甲磺酸化，消除为烯烃，然后环氧化形成外消旋顺式-7-氧杂-3-氮杂-二环[4.1.0]庚烷-3-甲酸叔丁酯。环氧化物随后用叠氮化物阴离子开环，引起反式区位化学，随后还原，得到式(18)的氨基羟基哌啶。
流程5
Figure BPA00001160451200201
可以根据流程5中描绘的反应形成式(30)或(31)的化合物。适当的式(24)的化合物是其中R1和R2如式(I)中定义，并且X＝Br或I的化合物。适当的式(30)或(31)的化合物是其中R1、R2、L和R3如式(I)定义的化合物。
在流程5步骤1和步骤2中，式(24)的卤苯甲基苯基醚经历与丙烯酸甲酯或丙烯酸乙酯的双Heck偶联，产生在双键处具有E区位化学的式(26)的乙烯基酯。该反应在钯催化剂，例如四(三苯基膦)钯(0)、氯化钯，或优选乙酸钯(II)存在下发生。包括例如三乙胺、碳酸钾、乙酸钠，或季铵盐，例如溴化四-正丁基铵的碱。反应在例如DMF或N-甲基吡咯烷的惰性溶剂中，在约40至130℃下进行4至48小时，得到式(25)的中间体。将其分离并随后在例如90至150℃的高温下，在基本相似的反应条件下环化为式(26)的乙烯基酯。可选地，式(24)的卤苯甲基苯基醚可以在单釜法中直接转化为式(26)的乙烯基酯，而无需在约90至150℃下分离式(25)的中间体。
在步骤3中，式(26)的酯水解并转化为式(27)的乙烯基溴。水解可以使用无机碱，例如氢氧化钾、氢氧化钠，或优选氢氧化锂来实现。所得羧酸随后可以用乙酸和NBS，在40至100℃下处理。
在流程5步骤4中，式(27)的乙烯基溴转化成式(28)的乙烯基频哪醇硼酸酯。乙烯基溴与双(频哪醇)二硼，在例如乙酸铯或乙酸钾的碱存在下，在例如THF、1，2-二甲氧基乙烷，或优选1，4-二噁烷的惰性溶剂中反应。反应在约40℃至溶剂的回流温度下，在钯催化剂，例如二氯化1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁钯(II)(Pd2(dppf)Cl2)，或三(二亚苯甲基丙酮)二钯(0)(Pd2(dba)3)存在下，在例如三环己基膦的膦配体存在下进行。
在步骤5中，式(28)的乙烯基频哪醇硼酸酯与氨基硝基溴苯在Suzuki交叉偶合条件下反应，形成式(29)的乙烯基硝基苯基中间体。本领域技术人员将认识到存在各种可用于促进这种交叉偶合反应的条件。反应条件使用适当的溶剂，例如二噁烷/水或THF/甲醇。反应在例如碳酸钠、甲醇钠、碳酸钾或乙酸钾的碱存在下完成。反应在钯催化剂，例如四(三苯膦)钯(0)存在下，在惰性气氛下在约70至120℃进行约8至24小时。
在流程5步骤6和7中，式(29)的乙烯基硝基苯基中间体在标准氢化条件下，在例如四氢呋喃、乙酸乙酯或异丙醇的适当溶剂中，用5或10％的碳上铂或5或10％的碳上钯还原为二氨基苯基中间体(未示出)。去除催化剂之后，二氨基苯基中间体可以利用N-氰基碳酰亚胺二苯酯在室温至100℃下转化为式(30)的氰基胍。使用例如异丙醇、吡啶或THF的惰性溶剂，有或没有例如碳酸氢钠的无机碱。可以通过本领域技术人员常用的方法，例如层析或再结晶来净化最终产品。
在流程5步骤8中，式(30)的氰基胍在酸性条件下水解为式(31)的脲。反应用二噁烷/水或TFA/水中的4N盐酸在室温至约80℃下进行4至72小时。
本领域技术人员应理解式(24)化合物可以由与在此描述的那些方法相似的方法或者通过使用本领域中确定的方法来容易地制备。例如，2-溴-5-氟苯酚或2-溴-5-氯酚用2-碘或2-溴苯甲基溴烷基化，得到式(24)的苯基醚。其中R1或R2＝F的式(24)的化合物，所需苯甲基溴通过例如1-溴-3-氟苯加以锂化，并与N-甲基-N-苯基甲酰胺反应形成醛来获得。随后还原为苯甲醇，并与例如三溴化磷的溴化剂反应，得到1-溴-3-氟苯甲基溴。
测定生物活性：
如在此使用的，“Kd”表示配体-受体络合物的平衡解离常数；“Ki”表示药物-受体络合物的平衡解离常数，并且是平衡时将与一半结合位点结合的药物浓度的指示；“Kd”表示拮抗剂-受体络合物的平衡解离常数；“IC50”表示产生试剂可能的最大抑制反应的50％的试剂浓度或者表示产生与受体结合的配体的50％置换的试剂浓度；“EC50”表示产生试剂可能的最大反应的50％的试剂浓度；和“ED50”表示产生试剂可能的最大反应的50％的施用的治疗剂剂量。
类固醇激素核受体结合检测：
来自过度表现(over expressing)人类MR(矿皮质激素受体)、GR(糖皮质激素受体)、AR(雄激素受体)或PR(孕酮受体)的人类胚肾HEK293细胞的细胞溶解产物用于受体-配体竞争结合检测以测定Ki值。
简要地，类固醇受体竞争结合检测在含有20mM HEPES缓冲液(pH＝7.6)，0.2mM EDTA，75mM NaCl，1.5mM MgCl2，20％甘油，20mM钼酸钠，0.2mM DTT(二硫苏糖醇)，20μg/mL抑肽酶(aprotinin)和20μg/mL亮肽素(leupeptin)的缓冲液(检测缓冲液)中进行。通常，类固醇受体结合检测包括放射性标记配体，例如每个孔0.25nM用于MR结合的[3H]-醛甾酮，0.3nM用于GR结合的[3H]-地塞米松，0.36nM用于AR结合的[3H]-甲基去甲雄二烯醇酮(methyltrienolone)，和0.29nM用于PR结合的[3H]-甲基去甲雄二烯醇酮，以及20μg 293-MR溶解产物，20μg293-GR溶解产物，22μg 293-AR溶解产物，或40μg 293-PR溶解产物。检测通常以96-孔格式(well format)进行。竞争测试化合物以约0.01nM至10μM的各种浓度范围添加。在500nM用于MR结合的醛甾酮，500nM用于GR结合的地塞米松，或500nM用于AR和PR结合的甲基去甲雄二烯醇酮存在下测定非特异性结合。将结合反应物(140μL)在4℃培养一夜，然后向各反应物中添加70μL冷炭-葡聚糖缓冲液(每50mL检测缓冲液含有0.75g炭和0.25g葡聚糖)。将培养盘在4℃在轨道振荡器上混合8分钟。培养盘然后在在4℃以3,000rpm离心10分钟。然后将120μL结合反应混合物的等分试样转移至另一个96孔培养盘中并向各孔中添加175μL的Wallac Optiphase Hisafe 3TM闪烁流体。将培养盘密封并在轨道振荡器上剧烈振荡。培养2小时之后，以Wallac Microbeta计数器读取培养盘。
数据用来计算IC50估计值和10μM下的抑制百分比。通过饱和结合测定用于MR结合的[3H]-醛甾酮，用于GR结合的[3H]-地塞米松，用于AR结合的[3H]-甲基去甲雄二烯醇酮，或用于PR结合的[3H]-甲基去甲雄二烯醇酮的Kd。化合物的IC50值使用Cheng-Prusoff公式转化为Ki。
按照基本如上所述的规程，实施例1-50的化合物在MR结合检测中显示Ki≤10nM。优选，本发明的化合物在MR结合检测中显示Ki≤5nM，和更优选Ki≤1nM。特别地，实施例1、8和23的化合物在MR结合检测中显示Ki分别为约0.79nM、0.08nM和0.23nM(以n＝2的几何平均值报告的值)，因此证明本发明范围内的化合物是有效的人类MR配体。
类固醇核激素受体调节的功能检测：
醛甾酮经由其与矿皮质激素受体的相互作用而发挥其生理学作用。醛甾酮与MR细胞质结合之后，配体受体络合物移位至细胞核，在那里与DNA上的激素响应基元结合，引发目标基因的表现。为了证明本发明化合物调节类固醇激素受体活性的能力(即激发(agonize)、部分激发、部分拮抗或拮抗)，进行生物检测，从而检测用核受体蛋白质和激素响应基元-指示基因构造瞬时转染的细胞中目标基因表现的功能调节。用于功能检测的溶剂、试剂和配体能够容易地从商业来源获得，或可以由本领域普通技术人员制备。
A.核激素受体面板筛检(Panel Screen)
用类固醇激素受体和指示基因质体，使用合适的转染试剂，例如FugeneTM转染人类胚肾HEK293细胞。简要地，使用病毒CMV(巨细胞病毒)促进剂，用构成性表现人类雄激素受体(AR)的质体，将莹光素酶指示cDNA上游的含有probasin ARE和TK(胸苷激酶)促进剂的两个副本的指示质体转染进入HEK293细胞中。使用病毒CMV促进剂，用构成性表现人类糖皮质激素受体(GR)、人类矿皮质激素受体(MR)或人类孕酮受体(PR)的质体，转染莹光素酶指示cDNA上游的含有GRE和TK促进剂的两个副本的指示质体。细胞在T150cm烧瓶中，在具有5％炭-剥离胎牛血清(FBS)的DMEM介质中转染。培养一夜之后，使转染的细胞胰蛋白酶化，涂覆在96孔盘中的含有5％炭-剥离FBS的DMEM介质中，培养4小时，然后暴露于约0.01nM至10μM的各种浓度的测试化合物。在拮抗剂检测模式中，将低浓度的各相应受体的促效剂加入到介质(0.08nM用于MR的醛甾酮，0.25nM用于GR的地塞米松，0.66nM用于AR的甲基去甲雄二烯醇酮，和0.08nM用于PR的普美孕酮(promegestone)中。用测试化合物培养24小时之后，使细胞溶解并使用标准技术测定萤光素酶活性。
将数据拟合为四参数拟合对数曲线，以测定EC50值。测定相对于用以下参考促效剂得到的最大刺激的功效百分比(具有饱和最大响应的化合物)或最大刺激百分比(具有不饱和最大响应的化合物)：30nM用于MR检测的醛甾酮，100nM用于AR检测的甲基去甲雄二烯醇酮，30nM用于PR检测的普美孕酮，和100nM用于GR检测的地塞米松。使用拮抗剂测试模式数据类似地测定IC50值。在拮抗剂模式中，通过在低浓度促效剂(0.08nM用于MR的醛甾酮，0.25nM用于GR的地塞米松，0.66nM用于AR的甲基去甲雄二烯醇酮，和0.08nM用于PR的普美孕酮)存在下，比较测试化合物活性和在没有测试化合物的情况下相同低浓度促效剂产生的反应来测定抑制百分比。
B.hMR竞争性拮抗剂检测：
使用如上所述对于核激素受体面板筛检(Panel Screen)相同的转染试剂、质体、促进剂、指示构成物、缓冲液和方法，用人类MR转染人类胚肾HEK293细胞。使转染的细胞胰蛋白酶化，放置在96孔盘中的含有5％炭-剥离FBS的DMEM介质中，培养4小时然后暴露于各种浓度(10次稀释)的醛甾酮(约0.001nM至0.03μM)。在没有和存在固定浓度的测试化合物的情况下测定醛甾酮促效hMR的能力，并通过使用标准技术测量萤光素酶活性来加以监控。然后可以使用以下公式，使用log(剂量比-1)对拮抗剂浓度的对数绘图的Schild分析测定测试化合物Kb：Log(DR-1)＝Log[拮抗剂]-Log Kb，其中剂量比(DR)表示存在测试化合物的情况下的醛甾酮EC50对没有测试化合物的情况下的醛甾酮EC50的比率。
按照基本如上所述的规程，本发明的示例化合物在MR竞争性拮抗剂分析中显示Kb≤200nM。优选，本发明的化合物在MR竞争性拮抗剂分析中显示Kb≤50nM，和更优选Kb≤10nM。
特别地，实施例1、8和23的化合物在MR竞争性拮抗剂分析中显示Kb分别为约1.2nM、1.1nM和2.5nM(以n＝2的几何平均值报告的值)，因此证明本发明范围内的化合物是有效的人类MR拮抗剂。
醛甾酮介导型肾病的体内模型
将雄性单肾切除Sprague Dawley鼠(240-280g)在随意取用舍内水和啮齿动物5001饵料的情况下单独舍饲一周。适应环境之后，收集基准24小时尿样并分析总尿蛋白和肌酸酐。借助于体重和基准尿蛋白将动物随机分入研究组。由尾部-钳(tail-clip)采集基准血浆，并分析血液尿素氮(BUN)、肌酸酐和电解质。采集基准试样之后，在整个研究持续时间期间，除对照组之外的所有鼠维持含有6％盐的饵料和含有0.3％KCl的饮用水。在整个研究持续时间期间，对照动物维持5001饵料和舍内水并且不接受醛甾酮。在异氟烷麻醉下，将Alza微型泵植入非对照动物(例如测试化合物组和仅赋形剂组)中，经皮下(s.c.)以0.75μg/h输送2.5μl/h×28天的0.01％DMSO中的d-醛甾酮。然后从醛甾酮植入次日开始，通过每天一次口服填喂法(10mL/kg)，给予包含1％羧基甲基纤维素(CMC)/0.25％聚山梨酸酯80的赋形剂中的测试化合物或仅赋形剂。在化合物或仅赋形剂给药2和4周之后，收集重复尿样并分析总尿蛋白和肌酸酐。研究终止时，在8个时间点(0.5、1、2、3、6、8、12和24小时)获得药物动力学试样。另外，去除心脏和肾脏，并在10％缓冲福尔马林中固定，用于苏木精和曙红(H&E)和Masson氏三色染色，以检测心脏和肾脏组织中的结构损伤。研究终止时通过心脏穿刺采集血浆，用于血浆BUN、肌酸酐和电解质的额外分析。
按照基本如上所述的规程，在以10mg/kg/天×14天给药时，实施例1、8和23的化合物与赋形剂治疗的动物相比，使尿蛋白排泄分别降低约49、83和64mg/天(对于各化合物，该值表示n＝8的平均值)，由此证明本发明范围内的化合物具有有效的体内肾脏保护活性。
为了证明化合物具有降低的产生高钾血症的发生率或可能性，可以使用以下模型。
电解质调节的体内检测
对雄性Sprague Dawley鼠(240-280g)进行肾上腺切除，然后在手术之后6天内维持5001啮齿动物食物和1％NaCl饮用溶液。然后将动物禁食一夜，用随意舍内水替代1％盐水饮用水。研究当天早晨，基于禁食体重随机治疗禁食动物。通过口服填喂法向对照动物(例如未接受醛甾酮或测试化合物的那些)提供10mL/kg包含0.5％CMC/0.25％聚山梨酸酯80/2.7％NaCl的测试化合物赋形剂，以及通过皮下注射提供1mL/kg醛甾酮赋形剂(0.01％DMSO/水)。通过口服填喂法向赋形剂动物提供相同的测试化合物赋形剂和经皮下提供醛甾酮3μg/kg。将测试材料悬浮于羧基甲基纤维素/NaCl赋形剂中。测试化合物治疗组经皮下接受悬浮在羧基甲基纤维素/NaCl赋形剂中的测试材料和醛甾酮3μg/kg。给药之后立即将动物置于可随意取用舍内水的代谢支架上。剂量给药之后5小时收集尿样并检测电解质排泄。数据以log Na/K排泄比的形式提供。化合物可以在各种剂量下进行测试，以测定化合物是否引起尿Na/K比增加(血清钾浓度增加的指数)。
不用进一步详细描述，据信本领域技术人员可以使用上述说明最大程度地实施本发明。提供以下制备例和实施例来更进一步详细说明本发明并且表示式(I)的化合物的典型合成。但是，它们并不意图以任何方式限制本发明。试剂和起始原料对于本领域普通技术人员来说是容易获得的或可以容易合成的。本领域技术人员将迅速认识到可以根据实施例中所述方法进行适当改变。本发明化合物的名称通常由ChemDraw
Figure BPA00001160451200271
10.0版提供。
制备例1
1-溴-4-氟-2-(2-碘代苯甲氧基)-苯
将2-碘苯甲基溴(0.29mol，90g)，2-溴-5-氟苯酚(0.29mol，57.9g)和碳酸钾(0.46mol，63g)在N，N-二甲基甲酰胺(750mL)中的混合物在室温下搅拌16小时。加水(1L)，将所得混合物搅拌一小时，滤掉固体，用水冲洗并在真空烘箱(20mm Hg/60℃)中干燥，得到标题化合物(121g，＞100％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ5.11(s，2H)，6.81(t，1H)，7.13(t，1H)，7.19(dd，1H)，7.46(t，1H)，7.59(d，1H)，7.62(t，1H)，7.93(d，1H)。
制备例2
3-[2-(2-溴-5-氟-苯氧基甲基)-苯基]-丙烯酸乙酯
在55-60℃向1-溴-4-氟-2-(2-碘代-苯甲氧基)-苯(0.29mol，117.4g)，乙酸钠(0.44mol，36.1g，1.5当量)，溴化四-正丁基铵(0.29mol，90.3g)，乙酸钯(II)(8mmol，1.8g，3mol％)，和N-甲基吡咯烷酮(900mL)的混合物中滴加丙烯酸乙酯(0.32mol，34.3mL)在N-甲基吡咯烷酮(200mL)中的溶液。将反应混合物冷却到室温并用水(2L)和甲基叔丁基醚(2L)处理。经过硅藻土，添加乙酸乙酯(1L)，分离各层，并用水(2L)洗涤。用无水硫酸钠干燥有机部分，过滤和浓缩。将所得固体悬浮于己烷(1L)中，冷冻2小时，过滤并用冷己烷(500mL)洗涤。在真空烘箱(50℃/20mm Hg)中干燥，得到浅黄色固体形式的标题化合物(104.4g，95％)。LC-MS m/z381.0[M+H]+。
制备例3
(E)-(3-氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基)-乙酸乙酯
将3-[2-(2-溴-5-氟-苯氧基甲基)-苯基]-丙烯酸乙酯(0.25mol，94g)，乙酸钠(0.37mol，30g，1.5当量)，溴化四-正丁基铵(0.25mol，81g)，和乙酸钯(II)(7mmol，1.7g，3mol％)在N-甲基吡咯烷酮(850mL)中的混合物在100-110℃加热6小时。冷却至室温，用水稀释(1L)，经由硅藻土过滤，并用乙酸乙酯(2L)洗涤。将滤出液转移至分液漏斗，加水(500mL)并分离各层。用水(2×1.5L)洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥，经过二氧化硅垫过滤，用乙酸乙酯(1.5L)洗涤并浓缩至干燥。向残余固体中添加己烷(1L)，冷冻2小时，过滤，用己烷(500mL)洗涤，并在50℃/20mm Hg干燥，得到标题化合物(64.3g，87％)。LC-MS m/z 299.0[M+H]+。
制备例4
(E)-11-溴亚甲基-3-氟-6，11-二氢-二苯并[b，e]氧杂环庚烷
向(3-氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基)-乙酸乙酯(0.23mol，69.5g)在异丙醇(725mL)中的悬浮液添加氢氧化锂(0.53mol，12.0g)在水(125mL)中的溶液，并加热到70℃持续4小时。使混合物冷却至40℃，然后用冰醋酸(0.44mol，25mL)处理。搅拌15分钟之后，添加N-溴琥珀酰亚胺(0.25mol，44g)。接着鼓泡，温度升高到45℃，几分钟之后形成固体。在40-45℃搅拌该混合物一小时并冷却至室温。添加水(150mL)中的亚硫酸氢钠(4.5g)，饱和碳酸氢钠水溶液(150mL)和水(450mL)。过滤所得悬浮液并用冷1∶1异丙醇/水(300mL)冲洗。在60℃/20mm Hg干燥固体一夜，得到标题化合物(65.8g，93％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ4.9-5.4(br d，2H)，6.63(dd，1H)，6.77(dt，1H)，7.13(s，1H)，7.32-7.46(m，4H)，7.52(dd，1H)。
制备例5
(E)-2-((3-氟二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-(6H)-亚基)甲基)-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊烷
Figure BPA00001160451200281
向(E)-11-(溴亚甲基)-3-氟-6，11-二氢二苯并[b，e]氧杂环庚烷(49mmol，15g)和双(频哪醇)二硼(64mmol，16g)在1，4-二噁烷(250mL)中的搅拌混合物中添加乙酸钾(150mmol，15g)。用氮气冲洗混合物，添加二氯[1，1′-双(二苯基膦基)-二茂铁]钯(II)二氯甲烷加成物(2.46mmol，1.80g)，并在65℃加热一夜。冷却至室温，经由硅藻土过滤，用乙酸乙酯洗涤并在真空中浓缩滤出液。添加甲醇(200mL)并在无真空下在旋转蒸发器上旋转该混合物一小时，引起棕色固体形成。经过过滤收集深褐色晶体并在真空下干燥一夜，得到标题化合物(7.28g，42％)。浓缩滤出液并通过柱层析，用己烷中的0％至16％乙酸乙酯淋洗纯化，得到黄色固体形式的标题化合物(3.46g，20％)。反应的总产量为10.7g(62％)。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.36(dd，J＝8.8，6.8Hz，1H)，7.32-7.27(m，4H)，6.64-6.57(m，1H)，6.48(dd，J＝10.3，2.6Hz，1H)，5.98(s，1H)，5.20(br s，1H)，1.15(s，12H)。
制备例6
1-溴-3-氟苯甲醛
在0℃向5L烧瓶中的二异丙胺(2.27mol，320mL)在无水四氢呋喃(800mL)中的溶液经1.5小时滴加己烷中的1.6M丁基锂(1.16L，1.86mol)。在0℃搅拌得到的黄色溶液30分钟。在一个单独的12L烧瓶中将1-溴-3-氟苯(203mL，1.86mol)溶于无水四氢呋喃(650mL)并冷却至-78℃。经由套管将预先形成的LDA溶液转移至加料漏斗中，经2小时滴加至1-溴-3-氟苯溶液中，使得温度不升到-70℃之上。在-78℃搅拌所得料浆30分钟。在-78℃经一小时滴加N-甲基-N-苯基甲酰胺(230mL，1.86mol，1.00当量)在无水四氢呋喃(1.15L)中的溶液，同时保持温度低于-70℃。搅拌冷反应物2小时，同时一夜使其缓慢升高到室温。用甲基叔丁基醚(3L)稀释反应物，用1M盐酸(4L)终止并有力地搅拌3小时。分离各层和用甲基叔丁基醚(1L)萃取水层。用1M盐酸(2×1L)、水(1L)、盐水(1L)洗涤合并的有机相，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩至橙色油，其缓慢固化得到标题化合物(394g，105％)。1H NMR(CDCl3)δ10.37(s，1H)，7.50(d，1H)，7.44(m，1H)，7.17(t，1H)。
制备例7
1-溴-3-氟苯甲醇
在0℃经30分钟向甲醇(14L)中的1-溴-3-氟苯甲醛(1.60kg，7.91mol)逐份添加硼氢化钠(284g，7.93mol)以控制放热和气体逸出。15分钟之后，用水(500mL)终止，浓缩得到黄色油。将油溶于乙酸乙酯(6L)中并用水(3L)洗涤。用乙酸乙酯(1L)萃取水层。用盐水(2L)洗涤有机相，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到橙色油形式的标题化合物(1614g，100％)。1H NMR(CDCl3)δ7.40(d，1H)，7.18(m，1H)，7.07(t，1H)，4.86(s，2H)。
制备例8
1-溴-3-氟苯甲基溴
在0℃向氯仿(14L)中的1-溴-3-氟苯甲醇(1.61kg，7.85mol)溶液整份添加吡啶(770mL，9.52mol)(轻微放热)并在0℃搅拌5分钟。滴加三溴化磷(900mL，9.49)，同时保持内部温度低于20℃，搅拌所得溶液一夜同时加热至室温。冷却反应物至0℃，用冰水(2L)缓慢终止。转移至50L烧瓶中，分离各层，然后用氯仿(1L)萃取水层。用5％硫酸(2L)、饱和碳酸氢钠水溶液(2L)、盐水(2L)洗涤合并的有机相，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到黄色油形式的标题化合物(1753g，83％)。1H NMR(CDCl3)δ7.43(d，1H)，7.21(m，1H)，7.09(t，1H)，4.68(s，2H)。
制备例9
1-溴-2-(2-溴-6-氟-苯甲氧基)-4-氟-苯
在0℃向1-溴-3-氟苯甲基溴(1.75kg，6.52mol)和2-溴-5-氟苯酚(730mL，16.56mol，1.01当量)在N，N-二甲基甲酰胺(14L)中的溶液整份添加碳酸钾(1.36kg，9.80mol)，搅拌所得冷料浆一小时，然后在室温下搅拌一夜。将反应混合物转移至50升烧瓶中，经30分钟滴加水(14L)，周期性地加冰以控制结晶放热。在室温下搅拌一小时，通过过滤收集灰白色固体，用水洗涤，在50℃干燥一夜得到标题化合物(2.22kg，90％)。1H NMR(CDCl3)δ7.51(m，2H)，7.30(m，1H)，7.14(t，1H)，6.89(dd，1H)，6.67(m，1H)，5.26(d，2H)。
制备例10
(E)-(3，7-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基)-乙酸乙酯
通过抽空和用氮气回充五次将1-溴-2-(2-溴-6-氟-苯甲氧基)-4-氟-苯(886mmol，335g)，丙烯酸乙酯(931mmol，101mL，1.05当量)，Pd(OAc)2(22.2mmol，4.97g)，溴化四丁铵(886mmol，286g)和乙酸钠(4.40mol，363.5g)在N-甲基吡咯烷酮(3.3L)中的混合物脱气。将混合物加热至120℃持续2小时。冷却至35℃并经40分钟加水(5.5L)。过滤沉淀物，用水(2×500mL)冲洗并空气干燥30分钟。在异丙醇(1L)中再料浆化2小时，在冰上冷却一小时。通过过滤收集暗灰色固体，用冷异丙醇(5×100mL)冲洗并在50℃在真空中干燥，得到标题化合物(191g，68％)。
制备例11
(E)-11-溴亚甲基-3，7-二氟-6，11-二氢-二苯并[b，e]氧杂环庚烷
将甲醇(1.9L)中的(E)-(3，7-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基)-乙酸乙酯(601mmol，190g)和5N氢氧化钠(1.20mol，240mL)的搅拌料浆加热至50℃持续2小时。在真空中去除甲醇，将所得黑色淤渣在水(3L)中再料浆化。经45分钟添加5N盐酸(250mL)，搅拌2.5小时，过滤并用水(4×200mL)冲洗残余物。在真空中在60℃干燥灰色固体一夜，在80℃干燥6小时。将固体(仍然潮湿，含有大致95g水)和乙酸锂(60.1mmol，4g，0.1当量)溶于乙腈(1.7L)中并搅拌15分钟。整份添加N-溴琥珀酰亚胺(661mmol，118g)，搅拌2.5小时。添加0.25M硫代硫酸钠(400mL)，接着添加饱和碳酸氢钠水溶液(400mL)和水(900mL)。在室温下搅拌混合物一小时，然后在冰浴中搅拌2小时。过滤该混合物并用冷乙腈(300mL)冲洗。在50℃在真空中干燥一夜，得到浅米色固体形式的标题化合物(173.3g，89％)。1H NMR(DMSO-d6)δ5.25(s，2H)，6.67(dd，1H)，6.81(dt，1H)，7.20(s，1H)，7.22(d，1H)，7.28(t，1H)，7.36(dd，1H)，7.48(m，1H)。
制备例12
(E)-2-((3，7-二氟二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-(6H)-亚基)甲基)-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊烷
向(E)-11-(溴亚甲基)-3，7-二氟-6，11-二氢二苯并[b，e]氧杂环庚烷(46.4mmol，15.0g)和双(频哪醇)二硼(50.3mmol，15.3g)在1，4-二噁烷(150mL)中的混合物中添加乙酸钾(74.3mmol，7.29g)，三环己基膦(6.03mmol，1.69g)和Pd2(dba)3(2.32mmol，2.13g)。通过用氮气鼓泡来冲洗，然后伴随在65℃下加热，搅拌一夜。在冷却到室温之后，经由硅藻土垫过滤混合物，用乙酸乙酯洗涤该垫，以及去除溶剂得到棕色油。用甲醇(180mL)稀释该油，在无真空下在旋转蒸发器上将所得混合物旋转3小时，引起白色沉淀物形成。通过真空过滤收集沉淀物，得到白色固体形式的标题化合物(10.8g，63％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.34(dd，J＝8.8，6.7Hz，1H)，7.24-7.18(m，1H)，7.08-7.01(m，2H)，6.65-6.59(m，1H)，6.50(dd，J＝10.3，2.6Hz，1H)，5.99(s，1H)，5.31(d，J＝0.9Hz，2H)，1.16(s，12H)。
制备例13
(E)-11-溴亚甲基-3，8-二氟-6，11-二氢-二苯并[b，e]氧杂环庚烷
基本如制备例9、10和11所述制备标题化合物，用1-溴-2-溴甲基-4-氟-苯和2-溴-5-氟-苯酚开始。
制备例14
(E)-2-((3，8-二氟二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-(6H)-亚基)甲基)-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊烷
向(E)-11-(溴亚甲基)-3，8-二氟-6，11-二氢二苯并[b，e]氧杂环庚烷(90.0mmol，29.0g)和双(频哪醇)二硼(117mmol，29.5g)在1，4-二噁烷(295mL)中的混合物中添加乙酸钾(144mmol，14.1g)，三环己基膦(11.7mmol，3.28g)和Pd2(dba)3(4.14mmol，3.80g)。通过用氮气鼓泡通过混合物来冲洗，然后在65℃下加热一夜。在冷却到室温之后，经硅藻土垫过滤，用乙酸乙酯洗涤。在真空中浓缩滤出液，得到棕色油。用甲醇(180mL)稀释该油，在无真空下在旋转蒸发器上将所得混合物旋转1.5小时，引起棕色沉淀物形成。通过真空过滤收集沉淀物，得到棕色固体形式的标题化合物(24.2g，73％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.35(dd，J＝8.8，6.7Hz，1H)，7.29-7.24(m，1H)，7.05-6.93(m，2H)，6.65-6.59(m，1H)，6.49(dd，J＝10.2，2.6Hz，1H)，5.99(s，1H)，5.15(br s，2H)，1.16(s，12H)。
制备例15
(R)-甲烷磺酸2-叔丁氧基羰基氨基-丙酯
在0℃在氮气下向(R)-(+)-2-叔-丁氧基-羰基胺基-1-丙醇(0.085mol，15.0g)和三乙胺(0.12mol，17.3g，2.0当量)在二氯甲烷(150mL)中的溶液中滴加甲烷磺酰氯(0.128mol，14.7g，1.5当量)。完成添加时，将反应混合物加热至室温并搅拌2小时。用二氯甲烷稀释反应混合物，用0.1N盐酸和饱和碳酸氢钠溶液洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和在真空下浓缩，得到白色固体形式的标题化合物(20.8g，96％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.24(d，3H)，1.43(s，9H)，3.03(s，3H)，3.97(brs，1H)，4.14(dd，1H)，4.21(br s，1H)，4.64(br s，1H，Boc-NH)。
制备例16
(R)-(1-甲基-2-吗啉-4-基乙基)-氨基甲酸叔丁酯
将(R)-甲烷磺酸2-叔丁氧基羰基氨基-丙酯(0.083mol，20g)和吗啉(0.83mol，72.2g)在乙腈(210mL)中的混合物加热至65℃持续16小时。浓缩反应混合物，用水稀释残余物，用二氯甲烷萃取，合并有机层并用水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和在真空下浓缩，得到黄色稠油形式的标题化合物(12g，62％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.13(d，3H)，1.43(s，9H)，2.21(dd，1H)，2.26-2.32(m，1H)，2.35-2.39(m，2H)，2.48-2.55(m，2H)，3.63-3.70(m，5H)，4.68(br s，1H，-NH)。
制备例17
(R)-1-甲基-2-吗啉-4-基-盐酸乙胺
在0℃向(R)-(1-甲基-2-吗啉-4-基-乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.05mol，12g)在干燥二氯甲烷(75mL)中的溶液添加二噁烷(120mL)中的1.6M氯化氢。将反应混合物加热至室温并搅拌2小时。过滤沉淀物并在真空下干燥，得到白色固体形式的标题化合物(9.2g，86％)。1H NMR(400MHz，OMSO-d6)δ1.29(d，3H)，3.10(br s，2H)，3.38(br s，4H)，3.79(br s，5H)。
制备例18
(R)-(4-溴-2-硝基-苯基)-(1-甲基-2-吗啉-4-基乙基)-胺
将(R)-1-甲基-2-吗啉-4-基-盐酸乙胺(0.04mol，8.7g)，5-溴-2-氟硝基苯(0.048mol，10.5g)，三乙胺(0.20mol，20.2g)和二甲基氨基吡啶(0.0004mol，0.048g)在乙酸乙酯(220mL)中的混合物回流16小时。将反应混合物冷却到室温，用乙酸乙酯稀释，和用水和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和浓缩。使用己烷中的10％乙酸乙酯作为洗脱剂，在硅胶柱上纯化，得到橙色固体形式的标题化合物(12.8g，95％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.29(d，3H)，2.47-2.51(m，5H)，2.53-2.58(m，1H)，3.64-3.69(m，4H)，3.72-3.78(m，1H)，6.78(d，1H)，7.46(dd，1H)，8.30(d，1H)，8.33(d，1H)。
通过基本按照制备例15、16、17和18中所述方法，分别从(S)-(-)-2-叔丁氧基-羰基胺基-1-丙醇或叔丁基-N-(2-羟乙基)氨基甲酸酯开始制备以下表格中的中间体。
  制备例   化学名称   物理数据
  19   (S)-(4-溴-2-硝基-苯基)-(1-甲基-2-吗啉-4-基乙基)-胺   1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.29(d，3H)，2.46-2.58(m，6H)，3.63-3.69(m，4H)，3.71-3.79(m，1H)，6.77(d，1H)，7.45(dd，1H)，8.29(d，1H)，8.33(d，1H).
制备例20
(4-溴-2-硝基-苯基)-(4-甲基-哌嗪-1-基)-胺
将1-氨基-4-甲基哌嗪(0.217mol，25.0g)，5-溴-2-氟硝基苯(0.239mol，52.6g)和三乙胺(0.46mol，46g)在乙酸乙酯(900mL)中的混合物加热回流16小时。将反应混合物冷却到室温，用乙酸乙酯稀释，和用水和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和浓缩。使用二氯甲烷中的5％甲醇作为洗脱剂，在硅胶柱上纯化，得到标题化合物(43.2g，63％)。ES-MS m/z 315[M+1]+。
制备例21
3-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
将5-溴-2-氟硝基苯(28.8mmol，3.55mL)，3-氨基-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(28.8mmol，4.96g)和三乙胺(35.9mmol，5.00mL)溶于乙酸乙酯(100mL)中，在氮气下回流48小时。冷却到室温。用0.5M盐酸洗涤两次，用无水硫酸钠干燥，过滤，在真空中浓缩，得到亮橙色固体(11.04g，＞100％)。LC-MS m/z(79Br/81Br)394.0/396.0[M+H]+。
制备例22
氮杂环丁烷-3-基-(4-溴-2-硝基-苯基)-盐酸胺
在室温下在氮气下搅拌3-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(29.66mmol，11.04g)在二噁烷(40mL)中的4.0M氯化氢中的溶液一夜。固体自溶液中析出。用醚(200mL)稀释，滤掉固体，用充足的醚冲洗并干燥(8.54g，93％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)：4.12(dd，2H)，4.45(dd，2H)，4.72(m，1H)，6.76(d，1H)，7.62(dd，1H)，8.30(d，1H)。LC-MS m/z(79Br/81Br)272.0/274.0[M+H]+。
制备例23
(4-溴-2-硝基-苯基)-(1-甲基-氮杂环丁烷-3-基)-胺
在0℃向氮杂环丁烷-3-基-(4-溴-2-硝基-苯基)-盐酸胺(27.7mmol，8.54g)在乙腈(100mL)和37％甲醛水溶液(83.0mmol，6.28mL，3.00当量)中的混合物中缓慢添加三乙酰氧基硼氢化钠(88.6mmol，18.8g)。在室温下在氮气下搅拌一夜。在减压下去除挥发物。用乙酸乙酯稀释，用10％碳酸氢钠水溶液洗涤两次，用无水硫酸钠干燥，过滤，并在减压下浓缩，得到8.5g橙色固体。用二氯甲烷中的5％甲醇作为洗脱剂淋洗，在120g二氧化硅柱上纯化，得到标题化合物(5.92g，75％)。LC-MS m/z(79Br/81Br)286.0/288.0[M+H]+。
制备例24
(2S，4R)-4-羟基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯
在0℃在氮气气氛下向(2S，4R)-4-羟基-吡咯烷-2-甲酸(0.70mol，93.0g)在干燥甲醇(2L)中的溶液中滴加亚硫酰氯(1.07mol，128.2g)。完成添加时，将反应混合物加热至室温并搅拌6小时。在减压下浓缩反应混合物，得到相应的盐酸甲酯。在0℃向盐酸甲酯在干燥二氯甲烷(2L)中的溶液中添加三乙胺(1.56mol，157.5g)并搅拌30分钟。然后连续添加N，N-二甲基氨基吡啶(0.10mol，13g)和重碳酸二叔丁酯(0.85mol，185.7g)。将反应混合物加热至室温并搅拌18小时。用水终止反应混合物，分离有机层，用水和饱和碳酸氢钠溶液洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和在减压下浓缩，得到粘性油形式的标题化合物(160g，91％)。ES-MSm/z 246.1[M+1]+。
制备例25
(2R，4R)-4-羟基-吡咯烷-2-甲酸盐酸盐
在50℃向乙酸酐(408g)和乙酸(1.2L)的混合物整份添加反式-4-羟基-L-脯氨酸(0.36mol，94g)。在90℃加热反应混合物5.5小时，然后浓缩。将残余物溶于2N盐酸中并回流3小时。将反应混合物冷却到室温，经由硅藻土过滤，并在真空下浓缩直到形成白色针状体。过滤该晶体，用醚洗涤，在真空下干燥得到标题化合物(90.0g，75％)。[α]D20+10.0(c＝1.0，甲醇中)。1H NMR(400MHz，D2O)，δ2.34-2.39(m，1H)，2.45-2.53(m，1H)，3.38(dd，1H)，3.45(d，1H)，4.50(dd，1H)，4.58(br s，1H)。
制备例26
(2R，4R)-4-羟基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯
在0℃在氮气气氛下向(2R，4R)-4-羟基-吡咯烷-2-甲酸盐酸盐(1.19mol，200g)在干燥甲醇(2L)中的溶液滴加亚硫酰氯(1.81mol，213.8g，1.5当量)。完成添加时，将反应混合物加热至室温并搅拌6小时。在减压下浓缩反应混合物，得到相应的盐酸甲酯。在0℃向盐酸甲酯在干燥二氯甲烷(2L)中的溶液中添加三乙胺(265.9g，2.63mol)并搅拌30分钟。然后连续添加N，N-二甲基氨基吡啶(0.18mol，21.9g)和重碳酸二叔丁酯(1.43mol，313.5g)。将反应混合物加热至室温并搅拌18小时。用水终止反应混合物，分离有机层，用水和NaHCO3溶液洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和在真空下浓缩，得到稠油形式的标题化合物(260g，88％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.43(s，9H)，1.46(s，9H)，2.05-2.10(m，2H)，2.26-2.35(m，2H)，3.48-3.56(m，2H)，3.58-3.61(m，1H)，3.64-3.70(m，2H)，3.77(s，3H)，3.79(s，3H)，4.27-4.29(m，1H)，4.34-4.38(m，2H)。
制备例27
(2S，4R)-4-甲烷磺酰氧基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯
在0℃在氮气气氛下向(2S，4R)-4-羟基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(0.65mol，160g)在吡啶(600mL)中的溶液中滴加甲烷磺酰氯(1.56mol，179g)。完成添加时，将反应混合物加热至室温并搅拌2小时。用二氯甲烷稀释反应混合物，用0.1N盐酸和饱和碳酸氢钠溶液洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和在真空下浓缩，得到稠油形式的标题化合物(185g，91％)。ES-MS m/z 324.1[M+1]+，224.0[M-BoC]+。
制备例28
(2R，4R)-4-甲烷磺酰氧基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯
基本如制备例27中所述由(2R，4R)-4-羟基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯制备标题化合物。ES-MS m/z 324.1[M+1]+。
制备例29
(2S，4S)-4-溴-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯
在0℃向(2S，4R)-4-羟基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(0.58mol，144g)和CBr4(0.88mol，292g)在干燥二氯甲烷(1.44L)中的溶液中分批添加三苯基膦(0.88mol，231g)。完成添加时，将反应混合物加热至室温并搅拌4小时。添加乙醇(1.44L)并另外搅拌2小时。向反应混合物添加二乙醚(1.44L)，过滤沉淀的三苯基氧膦，并在减压下浓缩滤出液。使用己烷中的5％乙酸乙酯作为洗脱剂，由柱层析纯化，得到稠油形式的标题化合物(155g，85％)。ES-MS m/z 308[M+1]+。
制备例30
(2R，4S)-4-溴-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯
基本如制备例29中所述由(2R，4R)-4-羟基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯制备标题化合物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.45-1.47(s，9H)，2.38-2.45(m，1H)，2.54-2.59(m，1H)，3.72-3.74(s，3H)，3.84-3.87(m，1H)，3.92-3.94(m，1H)，4.44-4.54(m，2H)。
制备例31
(2S，4S)-4-叠氮基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯
将(2S，4R)-4-甲烷磺酰氧基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(0.60mol，185g)和叠氮化钠(1.20mol，78g)在N，N-二甲基甲酰胺(1L)中的混合物加热至80℃持续16小时。用水稀释反应混合物并用乙酸乙酯萃取。用0.5N盐酸、饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤合并的有机层。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和在真空下浓缩，得到黄色稠油形式的标题化合物(140g，88％)。ES-MS m/z 271.2[M+1]+，171.0[M-Boc]+。
基本按照如制备例31中所述，从适当的溴或甲磺酰基-吡咯烷开始制备以下表格中的中间体。
  制备例   化学名称   物理数据
  32*   (2S，4R)-4-叠氮基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯
  33   (2R，4R)-4-叠氮基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯   1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.40-1.41(s，9H)，2.09-2.13(m，1H)，2.40-2.44(m，1H)，3.37-3.45(m，1H)，3.61-3.65(m，1H)，3.67-3.69(s，3H)，4.09-4.15(m，1H)，4.25-4.38(m，1H).
  34   (2R，4S)-4-叠氮基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯   ES-MS m/z 271[M+1]+，171.1[M-Boc]+基线峰
*65℃，16小时
制备例35
(2S，4S)-4-叠氮基-2-羟甲基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在-10至-20℃下在氮气气氛下向(2S，4S)-4-叠氮基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(0.16mol，40g)在无水二乙醚(400mL)中的溶液中添加硼氢化锂(0.16mol，3.6g)。完成添加时，在相同的温度搅拌反应混合物30分钟。用饱和碳酸氢钠溶液在-70℃终止反应混合物，使其缓慢达到室温。分离有机层和用二氯甲烷萃取水层。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和在真空下浓缩，得到黄色稠油形式的标题化合物(32g，粗品)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.46(s，9H)，2.32-2.35(m，1H)，3.30(dd，1H)，3.65-3.79(m，4H)，4.07-4.29(m，2H)。
基本按照如制备例35中所述，从适当的吡咯烷-2-甲酸甲酯开始制备以下表格中的中间体。
  制备例   化学名称
  36   (2S，4R)-4-叠氮基-2-羟甲基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
  37   (2R，4R)-4-叠氮基-2-羟甲基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
  38   (2R，4R)-4-叠氮基-2-羟甲基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
制备例39
(2S，4S)-4-氨基-2-羟甲基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
Figure BPA00001160451200391
将(2S，4S)-4-叠氮基-2-羟甲基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(32g)溶于甲醇(150mL)中。添加10％碳上钯(3.2g)和在室温下氢化(1大气压)16小时。经由硅藻土柱塞滤掉催化剂，在真空下浓缩，得到黄色稠油形式的标题化合物(28g，粗品)。
基本按照如制备例39中所述，从适当的叠氮基-吡咯烷开始制备以下表格中的中间体。
Figure BPA00001160451200392
制备例43
(2S，4S)-4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-2-羟甲基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
Figure BPA00001160451200401
将(2S，4S)-4-氨基-2-羟甲基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.14mol，31g)，5-溴-2-氟硝基苯(0.29mol，64.0g)和三乙胺(0.58mol，59g)在乙酸乙酯(320mL)中的混合物加热回流16小时。将反应混合物冷却到室温，用乙酸乙酯稀释，和用水和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和浓缩，得到暗橙色稠油形式的标题化合物(42g，粗品)。
制备例44
(2S，4S)-[4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-吡咯烷-2-基]-甲醇盐酸盐
Figure BPA00001160451200402
在室温下向(2S，4S)-4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-2-羟甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.22mol，95g)在干燥二氯甲烷(475mL)中的溶液中缓慢添加二噁烷(950mL)中的4.0M氯化氢，搅拌2小时。过滤沉淀的固体，在真空下干燥得到橙色固体形式的标题化合物(70g，87％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.98-2.05(m，1H)，2.71-2.79(m，1H)，3.36(dd，1H)，3.58-3.63(m，1H)，3.76(dd，1H)，3.88-3.95(m，2H)，4.55-4.58(m，1H)，7.03(d，1H)，7.66(dd，1H)，8.30(d，1H)。
基本按照如制备例43和44中所述，从适当的氨基-吡咯烷开始制备以下表格中的中间体。
  制备例   化学名称   物理数据
  45   (2S，4R)-[4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-吡咯烷-2-基]-甲醇盐酸盐   1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.01-2.10(m，2H)，3.06-3.10(m，2H)，3.47-3.60(m，3H)，3.62-3.71(m，2H)，3.83(br s，1H)，4.49-4.50(m，1H)，7.09(d，1H)，7.72(dd，1H)，7.94(d，1H)，8.2(d，1H)，9.10(br s，1H，HCl)，9.60(br s，1H，HCl).
  46   (2R，4R)-[4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-吡咯烷-2-基]-甲醇盐酸盐   1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.80-1.85(m，1H)，2.54-2.59(m，1H)，3.43-3.51(m，3H)，3.56-3.63(m，1H)，3.69-3.72(m，2H)，4.50-4.51(m，1H)，7.10(d，1H)，7.55(dd，1H)，8.14(d，1H，-NH)，8.20(d，1H).
  47   (2R，4S)-[4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-吡咯烷-2-基]-甲醇盐酸盐   1H NMR (400MHz，DMSO-d6)δ2.08-2.21(m，2H)，3.27(d，1H)，3.57-3.61(m，2H)，3.68-3.71(m，1H)，3.83(br s，1H)，4.47-4.51(m，1H)，5.44(br s，1H)，7.08(d，1H)，7.72(dd，1H)，7.94(d，1H)，8.20(d，1H)，9.06(br s，1H)，9.59(br s，1H).
制备例48
(7S，8aS)-7-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-四氢-吡咯并[2，1-c][1，4]噁嗪-4-酮
Figure BPA00001160451200411
在室温下向(2S，4S)-[4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-吡咯烷-2-基]-甲醇盐酸盐(0.22mol，79g)在四氢呋喃/水(1∶1)混合物(1180mL)中的溶液中滴加氯乙酰氯(0.49mol，55.7g)。通过连续添加4M氢氧化钠溶液，将反应物pH保持在10-12。完成氯乙酰氯添加后，在室温下搅拌反应混合物4小时。在减压下去除四氢呋喃并用二氯甲烷萃取水层。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和浓缩，得到橙色固体形式的标题化合物(50g，62％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.59-1.67(m，1H)，2.58-2.64(m，1H)，3.40(t，1H)，3.71(dd，1H)，3.91-4.01(m，2H)，4.09(d，1H)，4.20(dd，1H)，4.29-4.35(m，2H)，6.75(d，1H)，7.54(dd，1H)，8.05(d，1H)，8.32(d，1H)。
制备例49
(4-溴-2-硝基-苯基)-((7S，8aS)-六氢化-吡咯并[2，1-c][1，4]噁嗪-7-基)-胺
Figure BPA00001160451200421
在0至-5℃下在氮气下向(7S，8aS)-7-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-四氢-吡咯并[2，1-c][1，4]噁嗪-4-酮(0.028mol，10g)在四氢呋喃(150mL)中的溶液中滴加BH3THF(1.0M，四氢呋喃中，0.056mol，56mL)。完成添加后，使反应混合物回流3小时。将反应混合物冷却到0℃，用1N盐酸终止，然后添加1N氢氧化钠水溶液。在减压下去除四氢呋喃并用二氯甲烷萃取水层。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和浓缩。将残余物溶于甲醇(160mL)，添加二噁烷(160mL)中的4N氯化氢，在80℃加热反应混合物4小时。冷却至室温，通过添加4N氢氧化钠水溶液调节pH为10-12。在减压下去除甲醇并用二氯甲烷萃取水层。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和浓缩，得到结晶黄色固体形式的标题化合物(8.0g，83％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.32-1.38(m，1H)，2.19-2.22(m，1H)，2.34(dt，1H)，2.42-2.47(m，1H)，2.54-2.58(m，1H)，2.92(d，1H)，3.07(d，1H)，3.34(t，1H)，3.61(dt，1H)，3.85(dd，1H)，3.97(dd，1H)，4.01-4.07(m，1H)，6.67(d，1H)，7.48(dd，1H)，8.17(d，1H)，8.35(d，1H)。
基本按照如制备例48和49中所述，从适当的苯基-氨基-吡咯烷开始制备以下表格中的中间体。例如对于制备例50和51，用硼烷-四氢呋喃络合物或硼烷-二甲硫醚络合物进行四氢-吡咯并[2，1-c][1，4]噁嗪-4-酮的还原。
  制备例   化学名称   物理数据
  50   (7R，8aS)-(4-溴-2-硝基-苯基)-(六氢化-吡咯并[2，1-c][1，4]噁嗪-7-基)-胺   1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.30-1.36(m，1H)，2.18-2.25(m，1H)，2.31-2.38(m，1H)，2.42-2.47(m，1H)，2.53-2.58(m，1H)，2.90(d，1H)，3.06(d，1H)，3.34(t，1H)，3.62(dt，1H)，3.86(dd，1H)，3.97(dd，1H)，4.01-4.09(m，1H)，6.67(d，1H)，7.49(dd，1H)，8.16(d，1H，-NH)，8.32(d，1H).
  51   (7R，8aR)-(4-溴-2-硝基-苯基)-(六氢化-吡咯并[2，1-c][1，4]噁嗪-7-基)-胺   1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.30-1.36(m，1H)，2.18-2.25(m，1H)，2.31-2.38(m，1H)，2.42-2.47(m，1H)，2.53-2.58(m，1H)，2.90(d，1H)，3.06(d，1H)，3.34(t，1H)，3.62(dt，1H)，3.86(dd，1H)，3.97(dd，1H)，4.01-4.09(m，1H)，6.67(d，1H)，7.49(dd，1H)，8.16(d，1H，-NH)，8.32(d，1H).
  52   (7S，8aR)-(4-溴-2-硝基-苯基)-(六氢化-吡咯并[2，1-c][1，4]噁嗪-7-基)-胺   1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.69(dd，1H)，1.88-1.96(m，1H)，2.17-2.24(m，1H)，2.42-2.48(m，2H)，2.93(d，1H)，3.27(t，1H)，3.57(t，1H)，3.68-3.75(m，1H)，3.87(d，1H)，3.97(d，1H)，4.09-4.17(m，1H)，6.69(d，1H)，7.50(d，1H)，8.07(d，1H)，8.32(d，1H).
制备例53
2，5-二氢-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯
在0℃经1.5小时向3-吡咯啉(40.0g，0.57mol)在二氯甲烷(400mL)中的溶液中滴加重碳酸二-叔丁酯(0.69mol，151.0g)在二氯甲烷(200mL)中的溶液并在室温下搅拌10小时。去除溶剂并将粗产物用于下一步制备例47中(95.0g，98％)。
制备例54
外消旋反式-3-溴-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在0℃经15分钟向2，5-二氢-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(0.29mol，50.0g)在二甲亚砜(360mL)和水(18mL)中的搅拌混合物中逐渐添加N-溴琥珀酰亚胺(0.325mol，58.0g)。在室温下搅拌2小时之后，加水(500mL)并用乙酸乙酯萃取。
用盐水洗涤有机层，用硫酸钠干燥，在真空中浓缩得到浅棕色油形式的标题化合物(75.0g，95％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ4.43-4.53(m，1H)，4.12-4.20(m，1H)，3.96-4.11(m，2H)，3.68-3.94(m，2H)，3.32-3.48(m，1H)，1.47(s，9H)。
制备例55
外消旋反式-3-苯甲基氨基-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在室温下搅拌粗的外消旋反式-3-溴-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(75.0g)和1N氢氧化钠水溶液(400mL)的混合物2小时。添加苯甲基胺(0.86mol，80.0g)，在65℃搅拌4.5小时，然后冷却至0℃。通过过滤收集所得沉淀物，用水和异丙醚洗涤，干燥得到白色固体形式的标题化合物(50.0g，63％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.21-7.38(m，5H)，4.06-4.15(m，1H)，3.84(d，J＝5.0Hz，2H)，3.57-3.75(m，2H)，3.10-3.35(m，3H)，1.65(br s，2H)，1.46(s，9H)。
制备例56
(3S，4S)-3-苯甲基氨基-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯，(+)-扁桃酸盐
在70℃将外消旋反式-3-苯甲基氨基-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.343mol，100.0g)和(+)-扁桃酸(0.378mol，57.83g)在乙腈(1L)和水(10mL)中的混合物加热一小时，然后在4小时内冷却至室温。通过过滤收集所得结晶沉淀物，用乙腈洗涤，从乙腈/水(20∶1)中再结晶，得到白色结晶固体形式的标题化合物(62.0g，40％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.19-7.44(m，8H)，5.05(br s，2H)，4.97(s，1H)，3.95-4.02(m，1H)，3.73(s，2H)，3.28-3.50(m，4H)，2.95-3.18(m，3H)，1.39(s，9H)；熔点185-188，[α]23 D+50.0°(c 0.50，MeOH)。
制备例57
(3S，4S)-3-苯甲基氨基-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向(3S，4S)-3-苯甲基氨基-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(+)-扁桃酸盐(60.0g)中添加3％碳酸钾水溶液(300mL)，用乙酸乙酯(3×250mL)萃取游离胺。用盐水洗涤合并的有机层，用无水硫酸钠干燥。在减压下蒸发溶剂，得到白色固体形式的(S，S)-对映异构体(34.0g，65％)。APCI MSm/z 293[M+H]+；熔点69-70℃，[α]23 D+18.0°(c，0.50，MeOH)。
制备例58
(3S，4S)-3-氨基-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向(3S，4S)-3-苯甲基氨基-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.054mol，16.0g)在正丁醇(225mL)中的溶液添加10％Pd/C(5.0g)，在50psi氢化该混合物10小时。经硅藻土柱塞过滤反应混合物，用乙醇洗涤。蒸发滤出液，得到白色固体形式的标题化合物(11.10g，99％)。APCI MS m/z203[M+H]+；[α]23 D+7.8°(c，0.50，MeOH)。
制备例59
(3S，4S)-3-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向1-溴-4-氟-3-硝基苯(0.125mol，26.0g)在乙酸乙酯(300mL)中的溶液中添加(3S，4S)-3-苯甲基氨基-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.113mol，23.0g)和三乙胺(0.339mol，35.0g)，回流14小时，冷却至室温，用水和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥，蒸发溶剂，通过快速柱层析提纯，得到黄色固体形式的标题化合物(43.0g，90％)。APCI MS m/z 403[M+H]+。
制备例60
(3R，4R)-3-苯甲基氨基-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯，(-)-扁桃酸盐
在70℃将外消旋反式-3-苯甲基氨基-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.085mol，25.0g)和(-)-扁桃酸(0.094mol，14.45g，1.1当量)在乙腈(200mL)和水(5mL)中混合一小时。在4小时内冷却至室温。通过过滤收集所得结晶沉淀物，用乙腈洗涤，从乙腈/水(20∶1)中再结晶，得到白色结晶固体形式的(-)-扁桃酸盐(34.0g，88％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.19-7.44(m，8H)；5.05(br s，2H)，4.97(s，1H)，3.95-4.02(m，1H)，3.73(s，2H)，3.28-3.50(m，4H)，2.95-3.18(m，3H)，1.39(s，9H)；[α]23 D-58.0°(c 0.50，MeOH)。
制备例61
(3R，4R)-3-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
基本按照如制备例58、59和60中所述的，从(3R，4R)-3-苯甲基氨基-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(-)-扁桃酸盐开始制备标题化合物。
制备例62
(3S，4R)-3-(4-溴-2-硝基苯基氨基)-4-(2-氯乙酰氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向(3S，4S)-3-(4-溴-2-硝基苯基氨基)-4-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(2.50mmol，1.0g)，氯乙酸(3.0mmol，300mg)和三苯基膦(3.0mmol，850mg)在四氢呋喃(40mL)中的混合物中添加偶氮二甲酸二乙酯(3.0mmol，600mg)，并在室温下搅拌12小时。去除溶剂，向残余物添加乙酸乙酯(50mL)，用水和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥和蒸发。通过柱层析纯化残余物，用二氯甲烷中的20％乙酸乙酯淋洗，得到黄色固体形式的标题化合物(1.10g，98％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.35(s，1H)，8.20(m，1H)，7.60(m，1H)，6.82(m，1H)，5.55(d，J＝6.8Hz，1H)，4.32(m，1H)，4.13(bd，J＝8.2Hz，2H)，3.90(m，1H)，3.79(m，1H)，3.74(dd，J＝4.2，10.4Hz，1H)，3.25(t，J＝7.20Hz，1H)，1.41(s，9H)。
制备例63
(3S，4R)-3-(4-溴-2-硝基苯基氨基)-4-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
向(3S，4R)-3-(4-溴-2-硝基苯基氨基)-4-(2-氯乙酰氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(2.20mmol，1.0g)在甲醇中的溶液添加2.0M氢氧化锂水溶液(5mL)，在室温下搅拌3.5小时。去除溶剂，用乙酸乙酯(50mL)稀释残余物，并用水和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥，过滤和蒸发溶剂。通过柱层析纯化，用二氯甲烷中的50％乙酸乙酯淋洗，得到黄色固体形式的标题化合物(900mg，98％)。APCI MS m/z 462[M+H]+。
制备例64
(3R，4S)-3-(4-溴-2-硝基苯基氨基)-4-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
基本按照如制备例62和63所述的，从(3R，4R)-3-(4-溴-2-硝基苯基氨基)-4-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯开始制备标题化合物。
制备例65
(3S，4S)-4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-吡咯烷-3-醇，盐酸盐
在0℃向(3S，4S)-3-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.106mol，43.0g)在乙酸乙酯(500mL)中的悬浮液鼓入无水氯化氢气体10分钟，在室温下搅拌一小时。去除溶剂，在真空下干燥所得固体，得到黄色固体形式的标题化合物(35.0g，98％)。APCI MS m/z 302[M+H]+。
制备例66
(3S，4S)-4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-1-甲基-吡咯烷-3-醇
Figure BPA00001160451200471
在0℃向乙腈中的(3S，4S)-4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-吡咯烷-3-醇盐酸盐(0.104mol，35.0g)添加三乙酰氧基硼氢化钠(0.37mol，78.0g)。经10分钟向该混合物中缓慢添加37％甲醛水溶液(30mL)，在室温下搅拌10小时。添加饱和碳酸氢钠水溶液，搅拌一小时。用乙酸乙酯萃取，用水和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸发溶剂，得到黄色固体形式的标题化合物(34.0g，98％)。APCI MS m/z 302[M+H]+；[α]23 D+58.6°(c，0.50，MeOH)。
基本按照如制备例65和66中所述的制备以下表格中的中间体，其中适当的3-(4-溴-2-硝基苯基氨基)-4-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯用无水HCl气体处理10-30分钟，然后搅拌1-4小时。用甲醛处理所得去保护的吡咯烷15分钟至10小时。
  制备例   化学名称   物理数据
  67   (3R，4R)-4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-1-甲基-吡咯烷-3-醇   1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.21(d，J＝7.9Hz，1H)，7.57(dd，J＝3.5，8.8Hz，1H)，7.08(d，J＝8.1Hz，1H)，4.11(m，1H)，3.92(m，1H)，3.21(dd，J＝3.8，7.9Hz，1H)，3.12(dd，J＝4.8，8.9Hz，1H)，2.71(dd，J＝3.8，8.8Hz，1H)，2.59(dd，J＝4.8，8.9Hz，1H)，2.41(s，3H)
  68   (3R，4S)-4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-1-甲基-吡咯烷-3-醇   ESI MS m/z318[M+H]+
  69   (3R，4R)-4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-1-甲基-吡咯烷-3-醇   1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.66(d，J＝5.4Hz，1H)，8.33(d，J＝2.4Hz，1H)，7.48(dd，J＝9.2，2.1Hz，1H)，6.67(d，J＝9.3Hz)，4.43-4.41(m，1H)，4.05-4.00(m，1H)，2.90-2.73(m，3H)，2.68-2.63(m，1H)，2.38(s，3H)
制备例70
4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯
在0℃向1-(叔丁氧基羰基)-4-哌啶酮(0.74mol，150g)和三乙胺(1.5mol，151.6g)在二氯甲烷(1L)中的溶液中分批添加硼氢化钠(0.82mol，31.3g)。完成添加时，将反应混合物加热至室温并搅拌4小时。用饱和氯化铵溶液终止反应混合物，在减压下去除乙醇。将残余物溶于水中并用二氯甲烷萃取。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和浓缩，得到粘稠固体形式的标题化合物(150g，99％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.45(s，9H)，1.53(d，2H)，1.83-1.87(m，2H)，3.02(dt，2H)，3.8-3.85(m，3H)。
制备例71
4-甲烷磺酰氧基-哌啶-1-甲酸叔丁酯
在0℃向4-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.74mol，150g)和三乙胺(1.5mol，151.6g)在二氯甲烷(1L)中的溶液中滴加氯化硫酰甲烷(1.12mol，128.8g)。完成添加时，将反应混合物加热至室温并搅拌16小时。用二氯甲烷稀释反应混合物，用饱和碳酸氢钠溶液和水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和浓缩，得到棕色固体形式的标题化合物(192g，92％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.45(s，9H)，1.78-1.85(m，2H)，1.93-1.98(m，2H)，3.03(s，3H)，3.26-3.32(m，2H)，3.68-3.71(m，2H)，4.85-4.90(m，1H)。
制备例72
3，6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯
在80℃加热4-甲烷磺酰基氧基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.69mol，193g)在DBU(400mL)中的溶液16小时。用水稀释反应混合物，用二乙醚萃取，用1N盐酸和饱和碳酸氢钠溶液洗涤有机层。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和浓缩，得到棕色油形式的标题化合物(116g，92％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.46(s，9H)，2.12(br s，2H)，3.47(t，2H)，3.87(s，2H)，5.65(br s，1H)，5.81(br s，1H)。
制备例73
外消旋顺式-7-氧杂-3-氮杂-二环[4.1.0]庚烷-3-甲酸叔丁酯
在0℃向3，6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁酯(0.64mol，117.8g)在二氯甲烷(1L)中的溶液中滴加m-氯过氧苯甲酸(0.77mol，133.1g)在二氯甲烷(200mL)中的溶液。完成添加时，将反应混合物加热至室温并搅拌16小时。用二氯甲烷稀释反应混合物，用4N氢氧化钠溶液、水和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和浓缩，得到浅黄色油形式的标题化合物(112g，87％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.44(s，9H)，1.87-1.93(m s，1H)，2.04(br s，1H)，3.11(br s，1H)，3.20(br s，1H)，3.28(s，1H)，3.44(br s，1H)，3.68(br s，1H)，3.81-3.92(m，1H)。ES-MS m/z 204[M+H]+。
制备例74
外消旋反式-4-叠氮基-3-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯
在65℃将外消旋反式-7-氧杂-3-氮杂-二环[4.1.0]庚烷-3-甲酸叔丁酯(0.56mol，112g)，叠氮化钠(1.12mol，73.08g)，氯化铵(0.56mol，30.07g)和甲醇/水(3∶1)(1L)的混合物加热16小时。用水稀释反应混合物，用二氯甲烷萃取，用饱和碳酸氢钠和盐水溶液洗涤有机层。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和浓缩。使用己烷中的6％乙酸乙酯作为洗脱剂，在硅胶柱上纯化残余物，得到浅黄色油形式的标题化合物(42.3g，42％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.48(s，9H)，1.84(br s，1H)，1.97-2.01(m，1H)，2.74-2.82(m，1H)，2.88(br s，1H)，3.37-3.40(m，1H)，3.50(br s，1H)，3.91(br s，1H)，4.09(dd，1H)。ES-MS m/z 143[M-BoC]+。
制备例75
外消旋反式-4-氨基-3-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯
将外消旋反式-叠氮基-3-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.23mol，56.6g)溶于甲醇(500mL)中，添加10％碳上钯(12.0g)，在室温下氢化(1大气压)16小时。经由硅藻土柱塞滤掉催化剂，浓缩滤出液，得到浅黄色稠油形式的标题化合物(53.7g，99％)。
制备例76
外消旋反式-4-苯甲基氨基-3-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯
向外消旋反式-4-氨基-3-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.24mol，53.7g)和乙酸(92mL)在乙醇(400mL)中的溶液中添加苯甲醛(0.24mol，26.3g)，在室温下搅拌反应混合物30分钟。添加氰基硼氢钠(0.49mol，31.2g)，搅拌反应混合物3小时。用碳酸氢钠溶液终止反应混合物，用二氯甲烷萃取。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和浓缩。将残余物溶于最低量二氯甲烷中，添加0.1N盐酸水溶液，保持pH为4-5。丢弃有机层。用二氯甲烷洗涤酸性水层三次，丢弃有机层。调节水层pH为10-12，用二氯甲烷萃取。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和浓缩，得到浅黄色油形式的标题化合物(35.7g，46％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.35-1.40(m，2H)，1.45(s，9H)，2.05(br s，1H)，2.43(t，1H)，2.57(t，1H)，2.69(brs，1H)，3.27(br s，1H)，3.70(d，1H)，3.94(d，1H)，4.15(br s，1H)，4.26(d，1H)，7.23-7.29(m，1H)，7.30-7.32(m，2H)，7.33-7.36(m，2H)。
制备例77
(3R，4R)-4-苯甲基氨基-3-羟基-4-哌啶-1-甲酸叔丁酯，L-(+)-酒石酸盐
在75℃将外消旋反式-4-苯甲基氨基-3-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.11mol，35.0g)和L-(+)-酒石酸(0.12mol，18.9g，1.2当量)和乙腈/水(20∶1)(175mL)的混合物加热4小时。在减压下浓缩反应混合物，得到酒石酸盐(53.0g)。从乙腈中将残余物结晶三次。过滤该晶体，在真空下干燥得到标题化合物(18.3g，67％)。HPLC(柱：Chiralcel OD-H(250mm×4.6mm)；溶剂体系：异丙醇/己烷中的0.1％三乙胺(8∶92)；流速：0.800ml/min；波长：258nm)：99.9％ee.tR 9.502分钟。相反对映异构体((3S，4S)-3-羟基-4-苯乙基-哌啶-1-甲酸叔丁酯，L-(-)-酒石酸盐)的tR为8.714分钟。
制备例78
(3R，4R)-4-氨基-3-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯
将(3R，4R)-4-苯甲基-3-羟基-4-苯乙基-哌啶-1-甲酸叔丁酯，L-(+)-酒石酸盐(0.04mol，18.3g)溶于4％碳酸钾溶液(500mL)中并搅拌30分钟。用二氯甲烷萃取游离胺。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和浓缩，得到游离胺(11.3g，92％)。将胺溶于甲醇(110mL)中，添加10％碳上钯(2.5g)，在室温下氢化(1大气压)16小时。经由硅藻土柱塞滤掉催化剂，浓缩滤出液，得到浅黄色稠油形式的标题化合物(7.6g，95％)。[α]D 26.1+2.141(c1.0，甲醇)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.08(dq，1H)，1.38(s，9H)，1.67(dd，1H)，1.80(br s，1H)，2.37-2.45(m，2H)，2.67(br s，1H)，2.90(br s，1H)，3.79(br s，1H)，3.88(br s，1H)，5.0(br s，1H)。ES-MSm/z 217[M+H]+。
制备例79
(3R，4R)-4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-3-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯
将(3R，4R)-4-氨基-3-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.02mol，6.0g)，5-溴-2-氟硝基苯(0.03mol，6.71g)和三乙胺(0.058mol，5.88mL)在乙酸乙酯(180mL)中的混合物加热回流16小时。将反应混合物冷却到室温，用乙酸乙酯稀释，和用水和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和浓缩，得到标题化合物(12.35g，粗品)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.46(s，9H)，1.50-1.51(m，1H)，2.08-2.12(m，1H)，2.93(dd，1H)，3.01(brs，1H)，3.55-3.61(m，1H)，3.62-3.68(m，1H)，3.68(br s，1H)，4.13-4.18(m，1H)，6.97(d，1H)，7.48(dd，1H)，8.08(d，1H)，8.30(d，1H)。ES-MS m/z 316[M-Boc]+。
制备例80
(3R，4R)-4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-哌啶-3-醇，盐酸盐
在室温下向(3R，4R)-4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-3-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.027mol，11.5g)在干燥二氯甲烷(40mL)中的溶液中缓慢添加二噁烷(70mL)中的4.0M氯化氢，并搅拌16小时。过滤沉淀物并在真空下干燥，得到黄色固体形式的标题化合物(8.68g，89％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.81-1.86(m，1H)，2.39-2.44(m，1H)，3.02-3.07(m，1H)，3.18-3.26(m，1H)，3.34-3.40(m，1H)，3.45(dd，1H)，3.87-3.91(m，2H)，7.17(d，1H)，7.61(dd，1H)，8.28(d，1H)。
制备例81
(3R，4R)-4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-1-甲基-哌啶-3-醇
向(3R，4R)-4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-哌啶-3-醇，盐酸盐(0.024mol，8.68g)和乙酸(10.2mL)在水(42mL)中的溶液中添加甲醛(20.5mL，37-41％水溶液)，并在室温下搅拌反应混合物30分钟。添加氰基硼氢钠(0.073mol，4.6g)，搅拌反应混合物3小时。用碳酸氢钠溶液终止反应混合物，用二氯甲烷萃取。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和浓缩，得到标题化合物(7.8g，97％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.63-1.71(m，1H)，2.16-2.21(m，2H)，2.33(s，3H)，2.35-2.38(m，1H)，2.60(br s，1H)，2.80(d，1H)，3.54-3.56(m，1H)，3.75-3.79(m，1H)，6.92(d，1H)，7.48(dd，1H)，8.14(d，1H)，8.30(d，1H)。
制备例82
(3S，4S)-4-苯甲基氨基-3-羟基-4-哌啶-1-甲酸叔丁酯，D-(-)-酒石酸盐
浓缩制备例77的母液，得到对映富集的(3S，4S)-3-羟基-4-苯乙基-哌啶-1-甲酸叔丁酯L-(+)-酒石酸盐(0.0377mol，17.2g)。添加4％碳酸钾水溶液(500mL)并搅拌30分钟。用二氯甲烷萃取游离胺。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和浓缩，得到游离胺(11.0g)。在75℃将4-苯甲基氨基-3-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.0361mol，11.0g)和D-(-)-酒石酸(0.0397mol，5.97g，1.1当量)在乙腈/水(20∶1)(100ml)中的混合物加热4小时。在减压下浓缩反应混合物，得到粗酒石酸盐。从乙腈中将残余物结晶三次。过滤该晶体，在真空下干燥得到标题化合物(14.8g，90％)。HPLC(柱：Chiralcel OD-H(250mm×4.6mm)；溶剂体系：异丙醇/己烷中的0.1％三乙胺(8∶92)；流速：0.800ml/min；波长：258nm)：96.4％ee.tR 8.714分钟。相反对映异构体((3R，4R)-3-羟基-4-苯乙基-哌啶-1-甲酸叔丁酯，L-(+)-酒石酸盐)的tR为9.502分钟。
制备例83
(3S，4S)-4-氨基-3-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯
将(3S，4S)-4-苯甲基氨基-3-羟基-4-苯乙基-哌啶-1-甲酸叔丁酯，D-(-)-酒石酸(0.036mol，16.4g)溶于4％碳酸钾水溶液(500mL)中并搅拌30分钟。用二氯甲烷萃取，用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和浓缩，得到游离胺(11.0g，99％)。将胺溶于甲醇(110mL)中，添加10％碳上钯(5.5g)，在室温下氢化(50psi)2小时。经由硅藻土滤掉催化剂，浓缩得到浅黄色稠油形式的标题化合物(7.7g，99％)。
制备例84
(3S，4S)-4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-3-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯
将(3S，4S)-4-氨基-3-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.035mol，7.5g)，5-溴-2-氟硝基苯(0.038mol，8.48g)和三乙胺(0.073mol，7.44g)在乙酸乙酯(250mL)中的混合物加热回流16小时。将反应混合物冷却到室温，用乙酸乙酯稀释，和用水和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和浓缩，得到标题化合物(16.16g，粗品)。
制备例85
(3S，4S)-4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-哌啶-3-醇，盐酸盐
在室温下向(3S，4S)-4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-3-羟基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.035mol，14.6g)在干燥二氯甲烷(50mL)中的溶液中添加二噁烷(90mL)中的4M氯化氢并搅拌16小时。过滤沉淀物并在真空下干燥，得到黄色固体形式的标题化合物(9.84g，80％)。
制备例86
(3S，4S)-4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-1-甲基-哌啶-3-醇
向(3S，4S)-4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-哌啶-3-醇，盐酸盐(0.028mol，9.8g)和乙酸(12mL)在水(46mL)中的溶液中添加甲醛(24mL，37-41％水溶液)，并在室温下搅拌反应混合物30分钟。添加氰基硼氢钠(0.083mol，5.26g)，搅拌反应混合物3小时。用碳酸氢钠溶液终止反应混合物，用二氯甲烷萃取。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和浓缩，得到标题化合物(8.4g，92％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.63-1.71(m，1H)，2.16-2.21(m，2H)，2.33(s，3H)，2.35-2.38(m，1H)，2.60(br s，1H)，2.80(d，1H)，3.54-3.56(m，1H)，3.75-3.79(m，1H)，6.92(d，1H)，7.48(dd，1H)，8.14(d，1H)，8.30(d，1H)。
制备例87
(R)-[4-((E)-3，8-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-2-硝基-苯基]-(1-甲基-2-吗啉-4-基-乙基)-胺
用氮气将(R)-(4-溴-2-硝基-苯基)-(1-甲基-2-吗啉-4-基-乙基)-胺(0.037mol，12.8g)，(E)-3，8-二氟-11-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基亚甲基)-6，11-二氢-二苯并[b，e]氧杂环庚烷(0.037mol，13.7g)，三苯基膦(0.007mol，2.02g)和乙酸钾(0.074mol，7.29g)在二噁烷/水(3∶1)(450mL)中的混合物脱气三次。向反应混合物添加乙酸钯(II)(0.001mol)，再用氮气脱气三次。在85℃加热所得反应混合物持续16小时。将反应混合物冷却到室温，用水稀释，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用水和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机相，过滤和浓缩。使用己烷中的7％乙酸乙酯作为洗脱剂，在硅胶柱上纯化，得到橙色固体形式的标题化合物(9.1g，48％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)，δ1.26(d，3H)，2.44-2.57(m，6H)，3.66-3.68(m，4H)，3.71-3.78(m，1H)，4.89(br s，1H)，5.63(br s，1H)，6.52(dd，1H)，6.61(d，1H)，6.67(dt，1H)，6.76(s，1H)，6.89(d，1H)，6.95(dt，1H)，7.06-7.10(m，1H)，7.19(dd，1H)，7.29-7.41(m，1H)，7.95(d，1H)，8.35(d，1H，-NH)。
实施例1
(E)-N-((R)-5-((E)-3，8-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1-(1-甲基-2-吗啉-4-基-乙基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基)-氰酰胺
Figure BPA00001160451200551
将(R)-[4-((E)-3，8-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-2-硝基-苯基]-(1-甲基-2-吗啉-4-基-乙基)-胺(0.017mol，9.0g)溶于四氢呋喃(35mL)和异丙醇(90mL)中。添加三乙胺(0.039mol，3.9g)和10％碳上铂(1.5g)并在室温下在50psi(H2)下在Parr振荡器中氢化2小时。经由硅藻土柱塞滤掉催化剂。用二噁烷(35mL)稀释滤出液，添加N-氰基碳酰亚胺二苯酯(0.019mol，4.61g)，并在室温下搅拌48小时。在减压下浓缩反应混合物。使用二氯甲烷中的0.5％甲醇作为洗脱剂，在硅胶柱上纯化，得到灰白色固体形式的标题化合物(6.0g，64％)。LC-MS m/z 528.2[M+H]+。
基本如制备例87和实施例1中所述，使用适当的苯基溴和适当的乙烯基二氧杂硼戊烷，制备以下表格中的以下实施例。
Figure BPA00001160451200561
制备例88
[4-((E)-3，7-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-2-硝基-苯基]-(4-甲基-哌嗪-1-基)-胺
Figure BPA00001160451200571
用氮气将(4-溴-2-硝基-苯基)-(4-甲基-哌嗪-1-基)-胺(0.016mol，5.0g)，(E)-3，7-二氟-11-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基亚甲基)-6，11-二氢-二苯并[b，e]氧杂环庚烷(0.017mol，6.4g)，三苯基膦(0.0028mol，0.74g)和乙酸钾(0.0317mol，3.11g)在二噁烷/水(3∶1)(200mL)中的混合物脱气三次。向反应混合物添加乙酸钯(II)(0.5mmol，113mg)，再用氮气脱气三次。在85℃加热所得反应混合物持续16小时。将反应混合物冷却到室温和用水稀释。用乙酸乙酯萃取混合物，合并有机层，和用水和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机相，过滤和浓缩。从甲醇中结晶原料，过滤和在真空下干燥，得到橙色固体形式的标题化合物(4.2g，55％)。ES-MS m/z 479[M+1]+。
实施例7
(E)-N-(5-((E)-3，7-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1-(4-甲基-哌嗪-1-基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基)-氰酰胺
将[4-((E)-3，7-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-2-硝基-苯基]-(4-甲基-哌嗪-1-基)-胺(0.008mol，3.96g)溶于四氢呋喃(150mL)中。添加三乙胺(0.018mol，1.84g)和10％碳上铂(1.3g)并在室温下在50psi(H2)下在Parr振荡器中氢化3小时。经由硅藻土柱塞滤掉催化剂，并添加吡啶(150mL)和N-氰基碳酰亚胺二苯酯(0.009mol，2.17g)。在室温下搅拌16小时然后加热至70℃持续8小时。在减压下浓缩反应混合物。使用己烷中的60％丙酮作为洗脱剂，在硅胶柱上纯化，得到灰白色固体形式的标题化合物(1.8g，43％)。LC-MS m/z 499.2[M+H]+。
基本如制备例88和实施例7中所述，使用适当的苯基溴和适当的乙烯基二氧杂硼戊烷，制备以下表格中的以下实施例。
Figure BPA00001160451200581
实施例10
5-((E)-3，8-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基-氰酰胺
在(E)-N-(5-((E)-3，8-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1-(4-甲基-哌嗪-1-基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基)-氰酰胺(实施例9)的最后纯化期间分离标题化合物作为副产物。LC-MS m/z 401.3[M+H]+。
制备例89
[4-((E)-3，7-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-2-硝基-苯基]-(1-甲基-氮杂环丁烷-3-基)-胺
用氮气将密封管中的(4-溴-2-硝基-苯基)-(1-甲基-氮杂环丁烷-3-基)-胺(709μmol，203mg)，(E)-3，7-二氟-11-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基亚甲基)-6，11-二氢-二苯并[b，e]氧杂环庚烷(723μmol，268mg)在甲醇(1.0mL)/四氢呋喃(3.0mL)(1∶3溶剂比)中的混合物吹扫五分钟。添加甲醇钠(1.42mmol，77mg)，四(三苯基膦)钯(35μmol，41mg)并在70℃加热一夜。用乙酸乙酯稀释，用10％碳酸氢钠洗涤两次，用无水硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩，得到377mg橙色油残余物。用二氯甲烷中的5％甲醇作为洗脱剂淋洗，在12g硅胶柱上纯化，得到标题化合物(199mg，62％)。LC-MS m/z 450.0[M+H]+。
实施例11
(E)-N-(5-((E)-3，7-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1-(1-甲基-氮杂环丁烷-3-基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基)-氰酰胺
Figure BPA00001160451200592
将[4-((E)-3，7-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-2-硝基-苯基]-(1-甲基-氮杂环丁烷-3-基)-胺(4.23mmol，1.90g)，三乙胺(9.31mmol，1.30mL)溶于四氢呋喃(20mL)中，添加5％碳上铂(200mg)并在35℃氢化(50psi)一小时。滤掉催化剂，用吡啶(20mL)冲洗，添加N-氰基碳酰亚胺二苯酯(4.65mmol，1.11g)并在氮气下在室温下搅拌一夜。用乙酸乙酯稀释，用5％碳酸氢钠水溶液洗涤两次，用无水硫酸钠干燥，过滤，并在真空中浓缩，得到大约3g橙色油。用二氯甲烷中的5％甲醇作为洗脱剂淋洗，在80g硅胶柱上纯化，得到约930mg的黄色半固体。溶于最低量甲醇中并静置。形成白色固体。30分钟之后，滤掉固体并用甲醇冲洗，得到白色固体形式的标题化合物(815mg，41％)。LC-MS m/z470.2[M+H]+。
基本如制备例89和实施例11中所述，使用适当的苯基溴和适当的乙烯基二氧杂硼戊烷，制备以下表格中的以下实施例。
Figure BPA00001160451200601
制备例90
[4-((E)-3，7-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-2-硝基-苯基]-((7S，8aS)-六氢-吡咯并[2，1-c][1，4]噁嗪-7-基)-胺
用氮气将(4-溴-2-硝基-苯基)-((7S，8aS)-六氢-吡咯并[2，1-c][1，4]噁嗪-7-基)-胺(0.011mol，4.0g)，(E)-3，7-二氟-11-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基亚甲基)-6，11-二氢-二苯并[b，e]氧杂环庚烷(0.012mol，4.76g)，三苯基膦(0.0031mol，0.8g)和甲醇钠(0.03mol，1.6g)在四氢呋喃/甲醇(3∶1)(120mL)中的混合物脱气三次。向反应混合物添加乙酸钯(II)(1.0mmol，240mg)，再用氮气脱气三次。在70℃加热反应混合物4小时。将反应混合物冷却到室温，经由硅藻土柱塞过滤，在减压下浓缩滤出液得到标题化合物(5.0g，粗品)。
实施例14
(E)-N-(5-((E)-3，7-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1-((7S，8aS)-六氢-吡咯并[2，1-c][1，4]噁嗪-7-基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基)-氰酰胺
Figure BPA00001160451200612
将[4-((E)-3，7-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-2-硝基-苯基]-((7S，8aS)-六氢-吡咯并[2，1-c][1，4]噁嗪-7-基)-胺(0.009mol，5.0g)溶于四氢呋喃(40mL)中。添加三乙胺(0.009mol，0.9g)和10％碳上铂(1.0g)并在室温下在50psi(H2)下在Parr振荡器中氢化3小时。经由硅藻土柱塞滤掉催化剂，向滤出液中添加吡啶(40mL)和N-氰基碳酰亚胺二苯酯(0.009mol，2.35g)。在室温下搅拌16小时，然后在60-70℃加热8小时。在减压下去除溶剂。将所得残余物溶于二氯甲烷中，用水和饱和碳酸氢钠溶液洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和在减压下浓缩。使用二氯甲烷中的1％甲醇作为洗脱剂，在硅胶柱上纯化，得到标题化合物(1.9g，36％)。LC-MS m/z 526.4[M+H]+。
基本如制备例90和实施例14中所述，使用适当的苯基溴和适当的乙烯基二氧杂硼戊烷并在约70℃下加热4至16小时，制备以下表格中的以下实施例。
Figure BPA00001160451200621
Figure BPA00001160451200631
制备例91
(3S，4S)-4-(4-((E)-(3-氟二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11(6H)-亚基)甲基)-2-硝基苯基氨基)-1-甲基吡咯烷-3-醇
Figure BPA00001160451200652
将(3S，4S)-4-(4-溴-2-硝基苯基氨基)-1-甲基吡咯烷-3-醇(17.6mmol，5.55g)，(E)-2-((3-氟二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11(6H)-亚基)甲基)-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊烷(16.0mmol，5.62g)，三苯基膦(2.87mmol，0.75g)，和K2CO3(44.7mmol，6.18g)在110mL二噁烷∶水(3∶1)中混合。通过用氮气鼓泡五分钟使混合物脱气，添加乙酸钯(II)(0.48mmol，322mg)，并在氮气下在82℃加热3.5小时。冷却至室温，用水和二氯甲烷稀释，然后经过硅藻土垫。分离各相，用二氯甲烷萃取水相两次。合并有机相，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，在真空中去除溶剂。溶于4∶1 CH2Cl2/MeOH中，使用相同溶剂经过二氧化硅柱塞。浓缩滤出液，并用甲醇研磨。通过过滤收集所得固体，得到红色固体形式的标题化合物(4.12g，56％)：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.23(dd，J＝9.9，5.6Hz，1H)，2.38(s，3H)，2.28-2.26(m，1H)，2.70(d，J＝3.5Hz，2H)，3.36(dd，J＝9.8，7.1Hz，1H)，3.91-3.87(m，1H)，4.01(br s，1H)，5.00-4.80(m，1H)，5.70-5.50(m，1H)，6.52(dd，J＝10.3，2.6Hz，1H)，6.68-6.64(m，1H)，6.78-6.75(m，2H)，7.01(d，J＝7.7Hz，1H)，7.08(d，J＝7.5Hz，1H)，7.24-7.22(m，1H)，7.35(dt，J＝1.5，1.2Hz，lH)，7.42(dd，J＝8.7，6.6Hz，1H)，7.47(d，J＝7.4Hz，1H)，7.94(s，1H)，8.00(d，J＝6.2Hz，1H)。
实施例26
(E)-N-(5-((E)-(3-氟二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11(6H)-亚基)甲基)-1-((3S，4S)-4-羟基-1-甲基吡咯烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-亚基)-氰酰胺
向(3S，4S)-4-(4-((E)-(3-氟二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11(6H)-亚基)甲基)-2-硝基苯基氨基)-1-甲基吡咯烷-3-醇(3.10mmol，1.43g)在异丙醇(85mL)和三乙胺(9.3mmol，1.30mL)中的溶液中添加5％Pt/C(420mg)，并在50psi下氢化1.5小时。经硅藻土柱塞滤过，用异丙醇(50mL)洗涤。添加氰基碳酰亚胺二苯酯(3.1mmol，0.74g)并在室温下搅拌一夜，然后加热回流3小时。去除溶剂，用二氯甲烷中的0％至20％甲醇的梯度淋洗，通过柱层析纯化残余物，得到浅棕色固体形式的标题化合物(955mg，57％)。[α]D 23+13.8(c 0.17，CH3OH)，ESI MS m/z 482[M+H]+。
按照基本如制备例91和实施例26所述的方法，使用适当的乙烯基溴和乙烯基二氧杂硼戊烷并在约80至85℃加热3至16小时，制备以下实施例。使用5％或10％碳上铂或碳上钯还原约1-4小时。
Figure BPA00001160451200671
Figure BPA00001160451200681
*在Suzuki偶联反应中使用乙酸钾。
实施例32
(E)-N-(5-((E)-3-氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1-((3S，4S)-4-羟基-1-甲基-1-氧-吡咯烷-3-基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基)-氰酰胺
Figure BPA00001160451200682
向(E)-N-(5-((E)-(3-氟二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11(6H)-亚基)甲基)-1-((3S，4S)-4-羟基-1-甲基吡咯烷-3-基)-lH-苯并[d]咪唑-2(3H)-亚基)氰酰胺(0.27mmol，130mg)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中添加间氯过氧苯甲酸(0.43mmol，93mg)，在室温下搅拌一夜。将溶液装载在二氧化硅上并用二氯甲烷中的0至20％甲醇淋洗，通过闪蒸层析纯化，得到标题化合物(135mg，100％)。LC-MS m/z 498.2[M+H]+。
实施例33
顺丁烯二酸(E)-N-(5-((E)-(3-氟二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11(6H)-亚基)甲基)-1-((3S，4S)-4-羟基-1-甲基吡咯烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-亚基)氰酰胺
Figure BPA00001160451200691
在50℃将乙腈(60mL)中的(E)-N-(5-((E)-(3-氟二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11(6H)-亚基)甲基)-1-((3S，4S)-4-羟基-1-甲基吡咯烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-亚基)氰酰胺(7.10mmol，3.42g)加热30分钟，立即添加(Z)-2-丁烯二酸(7.10mmol，837mg)。几分钟之后，悬浮液变得均匀，然后开始形成沉淀。将所得悬浮液冷却至室温。通过过滤收集固体，用乙腈(50mL)洗涤，在真空烘箱中在50℃干燥2小时，得到标题化合物(4.1g，97％)。LC-MS m/z 488.2[M+H]+。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：2.80(s，3H)，3.77-3.72(m，8H)，4.66-4.63(m，1H)，4.96-4.91(m，1H)，5.16-5.10(m，1H)，5.72-5.67(m，1H)，5.89-5.82(m，1H)，6.00(s，2H)，6.59(dd，J＝2.6，10.5Hz，1H)，6.80-6.76(m，1H)，6.86(s，1H)，6.94-6.90(m，2H)，7.02(s，1H)，7.22(td，J＝7.5，1.3Hz，1H)，7.30(d，J＝8.8Hz，1H)，7.36(td，J＝7.5，1.3Hz，1H)，7.61-7.57(m，2H)。
替代程序：
将(E)-N-(5-((E)-(3-氟二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11(6H)-亚基)甲基)-1-((3S，4S)-4-羟基-1-甲基吡咯烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-亚基)-氰酰胺(145mg)溶于乙腈(5mL)中，加热至50℃，得到不透明溶液。将2-丁烯二酸(35mg)溶于THF(300μL)中，缓慢加入到乙腈中，形成透明溶液。将溶液冷却至室温，同时搅拌得到沉淀物。继续搅拌该溶液一夜。快速过滤所得固体，在40℃在真空下干燥2小时。在随后TGA(热解重量分析)热谱图中观察到残余乙腈，将材料进一步干燥一夜。
制备例92
(3R，4R)-4-[4-((E)-3，7-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-2-硝基-苯基氨基]-1-甲基-哌啶-3-醇
Figure BPA00001160451200701
用氮气将(3R，4R)-4-(4-溴-2-硝基-苯基氨基)-1-甲基-哌啶-3-醇(0.009mol，3.0g)，(E)-3，8-二氟-11-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基亚甲基)-6，11-二氢-二苯并[b，e]氧杂环庚烷(0.01mol，3.7g，1.1当量)，三苯基膦(0.002mol，0.61g)和甲醇钠(0.02mol，1.2g)在四氢呋喃/甲醇(3∶1)(150mL)中的混合物脱气三次。向反应混合物中添加乙酸钯(II)(0.8mmol，183mg)，再用氮气脱气三次。在70℃加热反应混合物16小时。将反应混合物冷却到室温，经由硅藻土柱塞过滤，在减压下浓缩滤出液得到标题化合物(6.6g，粗品)。
实施例34
(E)-N-(5-((E)-3，7-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1-((3R，4R)-3-羟基-1-甲基-哌啶4-基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基)-氰酰胺
Figure BPA00001160451200702
将(3R，4R)-4-[4-((E)-3，7-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-2-硝基-苯基氨基]-1-甲基-哌啶-3-醇(0.009mol，4.48g)溶于四氢呋喃(100mL)中。添加三乙胺(0.018mol，1.83g)和10％碳上铂(2.2g)并在室温下在50psi(H2)下在Parr振荡器中氢化4小时。经由硅藻土柱塞滤掉催化剂。向滤出液中添加吡啶(100mL)和N-氰基碳酰亚胺二苯酯(0.009mol，2.16g)。在室温下搅拌16小时然后在60-70℃加热8小时。在减压下去除溶剂。将残余物溶于二氯甲烷中，用水和饱和碳酸氢钠溶液洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和在减压下浓缩。使用二氯甲烷中的5％甲醇作为洗脱剂，在硅胶柱上纯化，得到灰白色固体形式的标题化合物(1.2g，26％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.66-1.8(m，1H)，1.75-1.78(m，1H)，1.87-1.90(m，1H)，2.03(br s，1H)，2.24(s，3H)，2.81(br s，1H)，2.96(br s，1H)，3.99(br s，1H)，4.31(br s，1H)，5.09(s，1H)，5.36(br s，1H)，5.46(br s，1H)，6.68(dd，1H)，6.82-6.87(m，3H)，6.99(d，1H)，7.09(s，1H)，7.26-7.35(m，3H)，7.62(t，1H)，12.49(br s，1H)。
实施例35
(E)-N-(5-((E)-3，7-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1-((3S，4S)-3-羟基-1-甲基-哌啶4-基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基)-氰酰胺
Figure BPA00001160451200711
将4-[4-((E)-3，7-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-2-硝基-苯基氨基]-1-甲基-哌啶-3-醇(0.012mol，5.97g)溶于四氢呋喃(50mL)中。添加三乙胺(0.024mol，2.44g)和10％碳上铂(2.9g)并在室温下在50psi(H2)下在Parr振荡器中氢化4小时。经由硅藻土滤掉催化剂。向滤出液中添加吡啶(50mL)和N-氰基碳酰亚胺二苯酯(0.012mol，2.88g)。在室温下搅拌16小时然后在60-70℃加热8小时。在减压下去除溶剂，将残余物溶于二氯甲烷中，用水和饱和碳酸氢钠溶液洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和在减压下浓缩。使用二氯甲烷中的5％甲醇作为洗脱剂，在硅胶柱上纯化残余物，得到灰白色固体形式的标题化合物(1.7g，27％)。LC-MS m/z 514.4[M+H]+。
按照基本如制备例92和实施例34和35所述的方法，使用适当的苯基溴和乙烯基二氧杂硼戊烷并在约80至85℃加热3至16小时，制备以下实施例。使用5％或10％碳上铂或碳上钯还原约1-4小时。
Figure BPA00001160451200721
实施例40
(E)-N-(5-((E)-3，7-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1-((R)-1-甲基-2-吗啉-4-基-乙基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基)-脲
Figure BPA00001160451200731
通过用二噁烷(20mL)稀释12M盐酸(10mL)，制备4M氯化氢在二噁烷中的溶液。在室温下向(E)-N-((R)-5-((E)-3，7-二氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1-(1-甲基-2-吗啉-4-基-乙基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基)-氰酰胺(0.005mol，3.0g)中缓慢添加该溶液，并搅拌48小时。用4N氢氧化钾水溶液终止反应混合物，用二氯甲烷萃取并用饱和碳酸氢钠溶液洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤和在减压下浓缩。使用二氯甲烷中的1％甲醇作为洗脱剂，在硅胶柱上纯化，得到灰白色固体形式的标题化合物(1.2g，38％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(E，Z)-N异构体的混合物。主要异构体：δ1.44(d，3H)，2.23-2.26(m，2H)，2.32-2.33(m，1H)，2.63(dd，1H)，2.77-2.82(m，1H)，3.29-3.46(m，5H)，4.77-4.82(m，1H)，5.35-5.44(br d，2H)，6.65(dd，1H)，6.89(dt，3H)，7.13(s，1H)，7.1(s，1H)，7.21-7.28(m，2H)，7.31-7.42(m，1H)，7.55-7.62(m，1H)，9.95(s，1H)。次要异构体：δ1.39(d，3H，E，Z-异构体)，2.23-2.26(m，2H)，2.32-2.33(m，2H)，2.88-3.0(m，1H)，3.29-3.46(m，5H)，4.80-4.99(m，1H)，5.35-5.44(br d，2H)，6.65(dd，1H)，6.89(dt，3H)，7.13(s，1H)，7.1(s，1H)，7.21-7.28(m，2H)，7.31-7.42(m，1H)，7.55-7.62(m，1H)，9.95(s，1H)。
实施例41
(E)-N-(5-((E)-3-氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1-((3S，4S)-4-羟基-1-甲基-吡咯烷-3-基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基)-脲
Figure BPA00001160451200741
向三氟乙酸(30mL)和水(6.0当量，100mmol，1.81mL)在冰浴中的混合物中添加顺丁烯二酸(E)-N-(5-((E)-(3-氟二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11(6H)-亚基)甲基)-1-((3S，4S)-4-羟基-1-甲基吡咯烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-亚基)氰酰胺(16.73mmol，10.00g)。将所得悬浮液加热至室温并搅拌2小时。用乙酸乙酯(250mL)稀释该溶液，在冰浴中冷却混合物30分钟，用5N氢氧化钠处理至pH＝11。用盐水洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥，和在减压下浓缩。用乙酸乙酯中的2.5至5％甲醇淋洗，通过柱层析纯化残余物，得到白色固体。在40℃下在真空烘箱中干燥一夜，得到标题化合物(6.74g，81％)。LC-MS m/z 500.2[M+H]+。
基本按照如实施例40或41中所述，使用适当的氰基胍制备以下实施例。
Figure BPA00001160451200742
Figure BPA00001160451200761

Claims (20)

1.一种下式的化合物
其中，
R1和R2各自独立地表示氢或氟；
L表示-(CH2)2-、-CH(CH3)-CH2-或直接键接；
R3表示氢或下式的基团：
Figure FPA00001160451100012
R4表示-CN或-C(O)NH2，
或其药学可接受盐。
2.根据权利要求1的化合物或盐，其中R1表示氢，R2表示氢或氟。
3.根据权利要求1的化合物或盐，其中R1表示氢或氟，R2表示氢。
4.根据权利要求1的化合物或盐，其中R1和R2各自独立地表示氢。
5.根据权利要求1至4任一项的化合物或盐，其中L表示-CH(CH3)-CH2-或直接键接。
6.根据权利要求1至5任一项的化合物或盐，其中R3表示下式的基团：
Figure FPA00001160451100021
7.根据权利要求1至6任一项的化合物或盐，其中R4表示-CN。
8.根据权利要求1至6任一项的化合物或盐，其中R4表示-C(O)NH2。
9.根据权利要求1的化合物或盐，其中，
R1和R2各自独立地表示氢或氟；
L表示-CH(CH3)-CH2-或直接键接；
R3表示氢或下式的基团：
Figure FPA00001160451100022
R4表示-CN或-C(O)NH2。
10.根据权利要求1至9任一项的化合物或盐，选自：(E)-N-(5-((E)-3-氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1-(1-甲基-氮杂环丁烷-3-基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基)-氰酰胺；(E)-N-(5-((E)-(3-氟二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11(6H)-亚基)甲基)-1-((3S，4S)-4-羟基-1-甲基吡咯烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-亚基)氰酰胺；(E)-N-(5-((E)-(3-氟二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11(6H)-亚基)甲基)-1-((3S，4S)-4-羟基-1-甲基吡咯烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-亚基)氰酰胺马来酸酯；(E)-N-[5-((E)-3-氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1-((3S，4S)-4-羟基-1-甲基-吡咯烷-3-基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基]-脲；(E)-N-(5-((E)-3-氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1-((R)-1-甲基-2-吗啉-4-基-乙基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基)-脲；和(E)-N-(5-((E)-3-氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1-((7S，8aR)-六氢-吡咯并[2，1-c][1，4]噁嗪-7-基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基)-脲。
11.根据权利要求10的化合物，其为(E)-N-(5-((E)-(3-氟二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11(6H)-亚基)甲基)-1-((3S，4S)-4-羟基-1-甲基吡咯烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-亚基)氰酰胺，或其药学可接受盐。
12.根据权利要求10的盐，其为(E)-N-(5-((E)-(3-氟二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11(6H)-亚基)甲基)-1-((3S，4S)-4-羟基-1-甲基吡咯烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-亚基)氰酰胺马来酸酯。
13.根据权利要求10的化合物，其为(E)-N-(5-((E)-3-氟-6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷-11-亚基甲基)-1-((R)-1-甲基-2-吗啉-4-基-乙基)-1，3-二氢-苯并咪唑-2-亚基)-脲，或其药学可接受盐。
14.根据权利要求1至13任一项的化合物或盐，用于治疗。
15.根据权利要求1至13任一项的化合物或盐，用于治疗充血性心脏衰竭、糖尿病性肾病、慢性肾病、高血压、低钾血症、心肌心律不齐、Bartter氏综合症、原发性或继发性高醛甾酮症或Conn氏综合症。
16.一种治疗或预防充血性心脏衰竭、糖尿病性肾病、慢性肾病、高血压、低钾血症、心肌心律不齐、Bartter氏综合征、原发性或继发性高醛甾酮症或Conn氏综合症的方法，包括向有需要的患者给予有效量的根据权利要求1至13任一项的化合物或盐。
17.根据权利要求16的方法，用于治疗充血性心脏衰竭、高血压、糖尿病性肾病或慢性肾病。
18.根据权利要求1至13任一项的化合物或盐的用途，用于制备治疗充血性心脏衰竭、糖尿病性肾病、慢性肾病、高血压、低钾血症、心肌心律不齐、Bartter氏综合征、原发性或继发性高醛甾酮症或Conn氏综合症的药物。
19.根据权利要求18的用途，用于制备治疗充血性心脏衰竭、高血压、糖尿病性肾病或慢性肾病的药物。
20.一种药物组合物，包括根据权利要求1至13任一项的化合物或盐，以及一种或多种药学可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
CN200880121527.2A 2007-12-19 2008-12-09 6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷衍生的非类固醇矿皮质激素受体拮抗剂 Expired - Fee Related CN101903377B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US1477607P 2007-12-19 2007-12-19
US61/014776 2007-12-19
PCT/US2008/085997 WO2009085584A1 (en) 2007-12-19 2008-12-09 6h-dibenz0 [b, e] oxepine derived nonsteroidal mineralocorticoid receptor antagonists

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101903377A true CN101903377A (zh) 2010-12-01
CN101903377B CN101903377B (zh) 2014-07-09

Family

ID=40430143

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN200880121527.2A Expired - Fee Related CN101903377B (zh) 2007-12-19 2008-12-09 6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷衍生的非类固醇矿皮质激素受体拮抗剂

Country Status (34)

Country Link
US (1) US7994164B2 (zh)
EP (2) EP2537845B1 (zh)
JP (1) JP5562866B2 (zh)
KR (1) KR101254382B1 (zh)
CN (1) CN101903377B (zh)
AR (1) AR069554A1 (zh)
AU (1) AU2008343524B2 (zh)
BR (1) BRPI0820805A2 (zh)
CA (1) CA2710409C (zh)
CL (1) CL2008003600A1 (zh)
CO (1) CO6300953A2 (zh)
DK (1) DK2235007T3 (zh)
DO (1) DOP2010000185A (zh)
EA (1) EA017668B1 (zh)
EC (2) ECSP10010266A (zh)
ES (2) ES2396605T3 (zh)
GT (1) GT201000179A (zh)
HK (1) HK1144284A1 (zh)
HR (1) HRP20120916T1 (zh)
IL (1) IL206353A (zh)
MA (1) MA31910B1 (zh)
MX (1) MX2010006911A (zh)
MY (1) MY150474A (zh)
NZ (1) NZ586300A (zh)
PE (1) PE20091057A1 (zh)
PL (1) PL2235007T3 (zh)
PT (1) PT2235007E (zh)
RS (1) RS52594B (zh)
SI (1) SI2235007T1 (zh)
TN (1) TN2010000292A1 (zh)
TW (1) TWI431010B (zh)
UA (1) UA100131C2 (zh)
WO (1) WO2009085584A1 (zh)
ZA (1) ZA201004257B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102060670A (zh) * 2011-01-04 2011-05-18 常州大学 一种2-溴-6-氟苯甲醇的制备方法
CN107074842A (zh) * 2014-11-21 2017-08-18 伊莱利利公司 用于治疗肾病的1,2‑苯并噻唑化合物

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8242140B2 (en) 2007-08-03 2012-08-14 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
JP5623289B2 (ja) 2007-12-19 2014-11-12 ベーリンガーインゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウイルスポリメラーゼインヒビター
EP2406252B1 (en) * 2009-03-12 2015-05-20 Eli Lilly and Company Mineralocorticoid receptor antagonist and methods of use
EP3238781B1 (en) 2010-05-10 2019-07-31 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for the treatment of fluid accumulation in and/ or under the retina
JP6180930B2 (ja) 2010-06-16 2017-08-16 アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル 創傷治癒過程における再上皮化を刺激するための方法及び組成物
MX2015015163A (es) 2013-05-02 2016-02-22 Pfizer Derivados de imidazo-triazina como inhibidores de pde10.
AR099416A1 (es) 2014-02-28 2016-07-20 Lilly Co Eli Terapia combinada para la hipertensión resistente
EA029518B1 (ru) 2014-06-30 2018-04-30 Астразенека Аб Бензоксазиноновые амиды в качестве модуляторов минералокортикоидного рецептора
US20180280414A1 (en) 2015-10-13 2018-10-04 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment of choroidal neovascularisation
ES2973248T3 (es) 2016-07-26 2024-06-19 Inst Nat Sante Rech Med Antagonista del receptor mineralocorticoide para el tratamiento de la osteoartritis
CN109069502B (zh) * 2016-09-24 2021-08-06 山东亨利医药科技有限责任公司 含盐皮质激素受体拮抗剂的药物组合物及其用途
JP2023518168A (ja) 2020-03-11 2023-04-28 アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル 対象が中心性漿液性脈絡網膜症を有するか、または有する危険性があるかどうかを決定する方法。
WO2023031277A1 (en) 2021-08-31 2023-03-09 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for the treatment of ocular rosacea

Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4072756A (en) 1973-05-17 1978-02-07 Sandoz Ltd. Tricyclo piperidino ketones and soporific compositions thereof
SE426341C (sv) * 1980-02-14 1985-09-23 Fagersta Ab Sett att forhindra korrosion i en forbrenningsanleggnings kylare och skorsten vid kylning av rokgaser
FR2603713B1 (fr) 1986-09-10 1992-07-24 Canon Kk Derive nouveau de 5h-dibenzo(a,d)cycloheptane-(ene)ylidene, son procede de production et support electrophotographique photosensible le contenant
US4999363A (en) * 1988-06-09 1991-03-12 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Tricyclic compounds
GB8914061D0 (en) 1989-06-19 1989-08-09 Wellcome Found Agents for potentiating the effects of antitumour agents and combating multiple drug resistance
US5378701A (en) 1991-12-27 1995-01-03 Kyowa Hakko Kogyo Tricyclic compounds
CO4980885A1 (es) 1997-12-29 2000-11-27 Ortho Mcneil Pharm Inc Compuestos de trifenilpropanamida utiles en el tratamiento de inflamaciones y metodos para preparar dicho compuesto
EP1154997A4 (en) 1999-01-26 2002-11-04 Dana Farber Cancer Inst Inc PHARMACEUTICALLY ACTIVE COMPOUNDS AND METHODS OF USE
AU2002352772B2 (en) * 2001-11-21 2006-10-26 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Chemokine receptor antagonists and methods of use thereof
TW200400816A (en) * 2002-06-26 2004-01-16 Lilly Co Eli Tricyclic steroid hormone nuclear receptor modulators
SI1697350T1 (sl) 2003-12-19 2008-12-31 Lilly Co Eli Modulatorji jedrnega receptorja tricikličnih steroidnih hormonov
US7482344B2 (en) 2003-12-19 2009-01-27 Eli Lilly And Company Tricyclic steroid hormone nuclear receptor modulators
TWI350168B (en) 2004-05-07 2011-10-11 Incyte Corp Amido compounds and their use as pharmaceuticals
MX2007001129A (es) * 2004-07-28 2007-04-19 Irm Llc Compuestos y composiciones como moduladores de receptores nucleares de hormonas esteroidales.
GEP20125565B (en) 2004-11-10 2012-07-10 Incyte Corp Lactam compounds and their pharmaceutical use
RS20090208A (en) 2006-10-31 2010-06-30 Pfizer Products Inc. Pyrazoline compounds as mineralocorticoid receptor antagonists
EP2142194A1 (en) 2007-03-29 2010-01-13 N.V. Organon Mineralocorticoid receptor antagonists
PE20091339A1 (es) 2007-12-21 2009-09-26 Glaxo Group Ltd Derivados de oxadiazol con actividad sobre receptores s1p1
GB0725102D0 (en) 2007-12-21 2008-01-30 Glaxo Group Ltd Compounds
WO2009094157A1 (en) 2008-01-25 2009-07-30 Arena Pharmaceuticals, Inc. Dihydro- 1h- pyrrolo [1,2-a] indol-1-yl carboxylic derivatives which act as s1p1 agonists
EP2406252B1 (en) 2009-03-12 2015-05-20 Eli Lilly and Company Mineralocorticoid receptor antagonist and methods of use

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102060670A (zh) * 2011-01-04 2011-05-18 常州大学 一种2-溴-6-氟苯甲醇的制备方法
CN107074842A (zh) * 2014-11-21 2017-08-18 伊莱利利公司 用于治疗肾病的1,2‑苯并噻唑化合物

Also Published As

Publication number Publication date
BRPI0820805A2 (pt) 2015-06-16
EP2537845A1 (en) 2012-12-26
JP2011507868A (ja) 2011-03-10
RS52594B (en) 2013-04-30
PL2235007T3 (pl) 2013-03-29
KR20100082866A (ko) 2010-07-20
NZ586300A (en) 2012-06-29
CN101903377B (zh) 2014-07-09
PE20091057A1 (es) 2009-07-20
EA017668B1 (ru) 2013-02-28
WO2009085584A1 (en) 2009-07-09
EP2537845B1 (en) 2014-03-19
CO6300953A2 (es) 2011-07-21
EP2235007B1 (en) 2012-10-31
EP2235007A1 (en) 2010-10-06
CA2710409A1 (en) 2009-07-09
HRP20120916T1 (hr) 2012-12-31
IL206353A (en) 2014-06-30
ES2396605T3 (es) 2013-02-22
UA100131C2 (uk) 2012-11-26
KR101254382B1 (ko) 2013-04-15
AR069554A1 (es) 2010-02-03
AU2008343524A1 (en) 2009-07-09
CA2710409C (en) 2012-11-06
DK2235007T3 (da) 2012-12-17
CL2008003600A1 (es) 2010-02-19
HK1144284A1 (en) 2011-02-11
ZA201004257B (en) 2011-11-30
MX2010006911A (es) 2010-10-05
MA31910B1 (fr) 2010-12-01
IL206353A0 (en) 2010-12-30
DOP2010000185A (es) 2010-09-15
US7994164B2 (en) 2011-08-09
TW200930721A (en) 2009-07-16
PT2235007E (pt) 2013-01-22
MY150474A (en) 2014-01-30
ECSP10010266A (es) 2010-07-30
US20090163472A1 (en) 2009-06-25
JP5562866B2 (ja) 2014-07-30
SI2235007T1 (sl) 2013-01-31
TWI431010B (zh) 2014-03-21
TN2010000292A1 (en) 2011-11-11
EA201070762A1 (ru) 2010-12-30
ES2459318T3 (es) 2014-05-09
AU2008343524B2 (en) 2012-03-08
GT201000179A (es) 2012-04-16
ECSP12012048A (es) 2012-08-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101903377B (zh) 6H-二苯并[b，e]氧杂环庚烷衍生的非类固醇矿皮质激素受体拮抗剂
DK2770997T3 (en) SUBSTITUTED 2- (4-HETEROCYCLYLBENSYL) isoindolin-1-ON-ANALOGS AS POSITIVE allosteric modulators OF THE muscarinic acetylcholine receptor M1
TW201718493A (zh) 作為magl抑制劑的胺基甲酸1,1,1-三氟-3-羥基丙烷-2-基酯衍生物及胺基甲酸1,1,1-三氟-4-羥基丁烷-2-基酯衍生物
EA035108B1 (ru) Бициклические производные дигидрохинолин-2-она
CN107922412A (zh) 作为atx抑制剂的二环化合物
TW201016708A (en) Novel fused aminodihydrothiazine derivative
JP2022554169A (ja) Ｒａｆキナーゼの阻害剤
CN103443074A (zh) 杂环胺衍生物
AU2017208119B2 (en) 6,7,8,9-tetrahydro-5H-pyrido[2,3-d]azepine dopamine D3 ligands
CN101754960A (zh) 四氢吡喃并色烯γ-分泌酶抑制剂
CN102333773A (zh) 盐皮质激素受体拮抗剂及使用方法
CN101243075A (zh) 新颖的2,3-二氢吲哚化合物
WO2014192868A1 (ja) 環状アミノメチルピリミジン誘導体
WO2014179226A1 (en) Substituted 1-benzylquinoxalin-2 (1h)-one analogs as positive allosteric modulators of muscarinic acetylcholine receptor m1
CA2868713A1 (en) Aromatic ring compound
Yeo Kinetic resolution by lithiation of substituted 1, 2-dihydroquinolines and dihydrobenzoxazines
CN105593212B (zh) 作为醛固酮合酶抑制剂的苯基-二氢吡啶衍生物
BR112016011048B1 (pt) Processo para preparar um composto e composto
BR122023011034B1 (pt) Processo para fabricar compostos pirimidinilciclopentano

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20140709

Termination date: 20161209