CN101891805A

CN101891805A - 一种人肠病毒71型特异性多肽及其应用

Info

Publication number: CN101891805A
Application number: CN201010174403XA
Authority: CN
Inventors: 胡广; 金明飞; 冷启彬; 吴洪流
Original assignee: BEIJING KAIYUENING TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: BEIJING KAIYUENING TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date: 2010-05-18
Filing date: 2010-05-18
Publication date: 2010-11-24
Anticipated expiration: 2030-05-18
Also published as: CN101891805B

Abstract

本发明属于医学免疫领域，公开了一种人肠病毒71型特异性多肽及其应用。本发明的人肠病毒71型特异性多肽的氨基酸序列为SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.1中的氨基酸序列经过取代、缺失或者添加1-10个氨基酸残基而形成的具有引发针对EV71免疫应答的由多肽1衍生的多肽；或者SEQ ID NO.1中长度至少为15个连续氨基酸残基，并具有引发EV71免疫应答功能的多肽片段。本发明提供的多肽可以特异性与肠病毒71型患者血清产生反应，同时不会对脊髓灰质炎病毒产生交叉反应。因此可以用于临床检测、诊断人肠病毒71型的感染。

Description

一种人肠病毒71型特异性多肽及其应用

技术领域

本发明属于医学免疫领域，涉及一种人肠病毒71型特异性多肽及其应用。

技术背景

手足口病的主要病原体有肠道病毒71型(Enterovirus 71，EV71)、柯沙奇病毒A16(Coxsackieviruses A16，CAV16)等，但是引起神经性症状和死亡的主要是EV71。EV71是1969年首次从加利福尼亚患有中枢神经系统疾病的婴儿粪便标本中分离出来的。自1974年首次报道以来，在1975，1978，1997和1998年分别在保加利亚，匈牙利，马来西亚和台湾等国家和地区引起了不同程度的爆发，涉及数十人死亡。值得一提的是，发达国家包括日本、美国等国家尽管偶尔也有零星的病例，但几十年来却没有大规模流行和爆发的报道。2008年3月，我国安徽省阜阳地区开始爆发手足口病疫情，导致23人死亡，3000多人感染。之后，在北京、上海、浙江、广东等地区也相继有EV71感染的报道。到2008年底，中国手足口病感染人数累计达48.9万多，死亡人数达126人。2009年继河南省明泉县报道手足口病感染并有近十例病人死亡后，相继在山东、北京、四川、广西、云南、甘肃、贵州等多个省市流行，患病人数和死亡人数超过了2008年(将近两倍)。从近几年的情况看，我国每隔几年就有局部爆发，患者人数多，分布广，大部分还在不发达地区，给国家和人民带来了巨大损失，同时也影响着国家的经济和社会安全。手足口病等流行性疾病成了民众关注的焦点，有效的控制疫情对国家和社会都有着重要的意义。正因如此，卫生部从去年开始已经将其列入法定丙级传染病，以更好的监控疫情，为防控和治疗提供必要的资料和信息。

EV71是属于微小病毒科(picornaviridae)中的肠病毒群(enterovirus)。微小病毒科的病毒包括很多引起人和动物疾病的病毒如口蹄疫病毒、肠道病毒以及引起肝炎的甲型肝炎病毒(HAV)。其中肠病毒属的病毒包括脊髓灰质炎病毒(Polioviruses；具有3种型别)、柯沙奇病毒(A型23种型别、B型6种型别)、埃可病毒(Echoviruses；具有31种型别)及肠病毒(Enteroviruses 68～72型)。脊髓灰质炎病毒同EV71病毒是同一病毒属；据发明人的分析，二者的全序列蛋白组的相似性可达70％左右，它们之间极有可能存在交叉免疫反应。而目前全世界很多国家包括我国都实行全民接种脊髓灰质炎病毒疫苗，这样用传统全病毒检测抗体的方法检测人肠病毒71型的检测可能会出假阳性。因此筛选一种可以有效区分人肠病毒71型感染的多肽可以方便快速准确的检测人肠病毒71型的感染。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的上述不足，提供一种可以有效区分人肠病毒71型感染的多肽；本发明的另一目的是提供该多肽在制备预防或者治疗EV71感染的药物组合物中的应用。本发明的又一目的是提供编码该多肽的核苷酸序列。

本发明的目的可通过如下技术方案实现：

一种人肠病毒71型特异性多肽，选自下述(a)～(f)中的任一种：

(a)氨基酸序列为SEQ ID NO.1的多肽1；

(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或者添加1-10个氨基酸残基而形成的具有引发EV71免疫应答功能的由多肽1衍生的多肽；

(c)多肽1中至少15个连续氨基酸残基构成的具有引发EV71免疫应答功能的多肽片段；

(d)在(c)中的多肽片段经过取代、缺失或者添加1-3个氨基酸残基而形成的具有引发EV71免疫应答功能的多肽；

(e)一种以上(c)及(d)所述多肽片段以任意先后次序和重复次数组合而成的具有引发EV71免疫应答功能的多肽；

(f)氨基酸序列为SEQ ID NO.7的多肽7与(e)所述多肽或(a)所述的多肽1组合得到的具有引发EV71免疫应答功能的多肽；其中多肽7的序列可以在(e)中任一多肽片段或多肽1之前或者之后，并且中间间隔0-3个任意氨基酸残基。

其中，(c)中所述的多肽片段优选多肽2：SEQ ID NO.2，多肽3：SEQ ID NO.3，多肽4：SEQ ID NO.4，多肽5：SEQ ID NO5；多肽6：SEQ ID NO.6。

(e)所述的多肽优选自多肽2、3、4、5或6中的任意2种、3种、4种或者5种多肽按照任意先后次序组合得到的氨基酸序列。

所述的取代是指用性质相似或者相近的氨基酸进行替换，优选根据表1进行。

表1.优选的氨基酸取代

最初的残基	代表性的取代	优选的取代
			Ala(A)	Val；Ser；Thr	Ser
Glu(E)	Asp；Asn	Asp
			Asp(D)	Asn；Glu	Glu
His(H)	Asn；Asp；Gln	Gln
			Lys(K)	Arg；His	Arg
Asn(N)	Asp；Asp	Asp
			Pro(P)	Thr；Arg；His；Gln	Gln
Gln(Q)	His；Pro	Pro
			Arg(R)	Pro；Thr；Lys	Lys
Ser(S)	Asp；Asn；Ala	Ala

Thr(T)	Pro；Arg；Ala	Ala
			Val(V)	Ala；Ser	Ala

在已知氨基酸序列或核苷酸序列的情况下，可通过本领域的常规蛋白质化学合成方法或通过基因工程方法获得本发明多肽。

与权利要求1所述的多肽特异性结合的抗体。

其中，所述的抗体可以是完整的单克隆抗体、完整的多克隆抗体、抗血清或者具有免疫活性的抗体片段、抗体重链、抗体轻链、嵌合抗体或人源化抗体。所述的抗体可以特异性的与本发明所述的多肽结合。

所述的抗体可以通过本领域内技术人员已知的各种技术进行制备。例如，纯化的本发明多肽，可被施用于动物以诱导多克隆抗体产生；或者通过本领域众所周知的杂交瘤技术制备单克隆抗体；或者通过重组方法将所属抗体的可变区与人抗体的不可边区或恒定区结合而制备嵌合抗体。

本发明所述的多肽在制备检测人肠病毒71型的检测试剂中的应用。

一种检测人肠病毒71型的检测试剂，该检测试剂包括容器以及位于容器内的本发明多肽，对应的抗血清以及其它必要化学物质。该检测试剂可用于检测标本血清是否被EV71感染过。

本发明所述的多肽在制备预防或者治疗EV71感染的药物组合物中的应用。

所述的药物组合物优选疫苗组合物。

所述的疫苗组合物含有免疫有效量的本发明所述多肽以及药学上可接受的载体。

本发明的疫苗组合物优选包含本发明所述多肽，如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.6中的至少一种多肽和药学上可接受的载体，进一步优选序列为SEQ ID NO.1的多肽1和药学上可接受的载体。这些载体包括本身不诱导产生对该组合物的个体有害的抗体的任何载体。合适的载体通常是大的、代谢缓慢的大分子，如多糖、聚乳酸、聚乙醇酸、氨基酸聚合物、脂质凝集物以及无活性的病毒颗粒以及增强组合物效果的佐剂。这些载体是本领域普通技术人员所熟知的。另外，抗原或免疫原可以和细菌类毒素偶联。

其中，所述的增强组合物效果的佐剂包括但并不局限于：1铝盐，如氢氧化铝、磷酸铝、硫酸铝等；2水包油性乳剂配方，如MF69(Novartis Vaccines and Diagnostics)、Syntex adjuvant formulation(SAF)、Freund完全佐剂和不完全佐剂等等。

所述的药物组合物通常还包括稀释剂，如水，盐水，甘油，乙醇等，以及辅助性物质，如润滑剂或者乳化剂、pH缓冲物质等。

所述的免疫有效量指以单剂或者连续剂一部分给予个体的量对治疗或者预防是有效的。该用量根据所治疗的个体健康状况和生理状况、所治疗个体的类别、个体免疫系统合成抗体的能力、所需的保护程度、疫苗的配制、治疗医师对治疗状况的评估及其它相关因素而定。

所述的疫苗组合物可制成注射剂，如液体溶液或混悬液；还可制成在注射前适合配入溶液或者混悬液、液体赋形剂的固体形式。该制剂还可乳化或者包封在脂质体中，与上述药学上可接受的载体结合增强佐剂效果。

所述药物组合物的常规给药方法是从肠胃外(皮下或肌肉)途径通过注射给予免疫原性组合物。适合其它给药方式的其他配方包括口服等。剂量可以是单剂方案或多剂方案。疫苗可以结合其它免疫调节剂一起给予。以本发明多肽计，其用量为每天约100ng/Kg体重-10mg/Kg体重。此外本发明多肽还可与佐剂或其它治疗剂一起使用。

本发明的抗体可用于制备治疗或预防人肠病毒71型感染的药物组合物。所述的组合物包含有a安全有效剂量的本发明多肽、偶联物或其组合物；以及b药学上可以接受的载体或赋形剂。这里载体包括但不限于：盐水、缓冲液、葡萄糖、水、甘油、乙醇、佐剂及其组合。该组合物通过常规方法进行制备。

本发明的有益效果：

本发明提供的多肽可以特异的与肠病毒71型患者血清产生反应，同时不会对脊髓灰质炎病毒产生交叉反应。因此可以用于临床检测、诊断人肠病毒71型的感染。由本发明多肽所制备的试剂盒能特异性的检测出人肠病毒71型，而不会检测到其它类似病毒如脊髓灰质炎病毒。由于该多肽制备的抗体可以有效与人肠病毒71型作用，本发明的多肽还可用于疫苗的制备，所制备的疫苗能只针对人肠病毒71型产生良好的免疫应答。由本发明多肽制备的药物组合物能够有效刺激机体产生专门针对EV71病毒的免疫应答，很好地保护细胞不被EV71病毒感染。编码本发明所述多肽的核苷酸序列，可应用于制备单抗或核酸疫苗等，在诊断和治疗人肠病毒71型感染中发挥积极的作用。

附图说明

图1本发明多肽的SDS-聚丙烯酰胺电泳图。

图2多肽1抗体的ELISA检测结果。

图3抗多肽1的血清对EV71感染的保护作用；

A：细胞对照，加入1∶4阴性对照血清，无病毒；B：加入1∶4阴性对照血清和1百万TCID EV71病毒；C：1∶4倍稀释的抗本发明多肽1的血清和1百万TCID EV71病毒；D：1∶8倍稀释的抗本发明多肽1的血清和1百万TCID EV71病毒；E：1∶16倍稀释的抗本发明多肽1的血清和1百万TCID EV71病。

具体实施方式

实施例1

a多肽的合成

合成SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.6的多肽使用的方法为常规的化学合成方法。

b多肽的筛选

按照每个孔10μg的上述多肽的量溶于100μl包被溶液(每升含1.59g Na₂CO₃，2.93g NaHCO₃)中并包被酶标板，包被12小时，弃去包被液，用去离子水洗涤2两次，每次洗涤均在吸水纸上拍干；每孔加入250μl封阻液(PBS，0.05％Tween-20，5％，脱脂奶粉)室温放置2小时；弃去封阻液，加入用100μl封阻液1∶50稀释的血清，所用血清分别为免疫有EV71 VP1蛋白的鼠抗血清、免疫有PV VP1蛋白的鼠抗血清和未免疫的对照血清；室温放置1小时；弃去液体；用去离子水洗涤5次；加入100μl封阻液1∶5000稀释的生物素标记的抗鼠IgG抗体的二抗，室温放置半个小时；弃去液体，加入100μl封阻液1∶5000稀释的AP-标记的streptavidin，室温放置半个小时；洗涤5次，加入50μl显色液(pH9.8，9.7％二乙醇氨1mg/mL pNPP)；15分钟后用分光光度计测定405nm处的OD值；与对照相比，OD值低于5倍为阴性；高于5倍为阳性；检测结果如表2所示，结果表明本发明多肽可以特异性的和抗EV71VP1抗血清反应而不与抗PVVP1抗血清反应。

表2 多肽的筛选

多肽1

多肽2

多肽3

多肽4

多肽5

多肽6

抗EV71血清1

阳性

抗EV71血清2

阳性

抗PV血清1

阴性

抗PV血清2

阴性

实施例2 多肽的基因工程表达。

SEQ ID NO.8为编码本发明多肽1的核苷酸序列，以该序列合成目的基因，并在两端分别引入BamHI和HindIII的酶切位点。该基因被插入到载体pQE-80L(凯杰生物技术(上海)有限公司)的BamHI和HindIII位点中。载体pQE-80L中含有编码SEQ ID NO.7所述多肽的基因序列。将该能准确表达SEQ ID NO1和SEQ ID NO7融合蛋白的重组载体转化到大肠杆菌BL21(DE3)中，得到的基因工程菌株可用于表达本发明多肽。

表达的条件如下：挑选单克隆接种于10mL的LB培养基中，37℃摇床培养过夜。将该菌液接种于自诱导培养基中，37℃培养8-36小时。收获菌体。

菌体超声破碎后，用Ni-NTA树脂按照常规方法进行亲和层析。洗脱后即可得到本发明多肽。本发明多肽经12％浓度SDS-聚丙烯酰胺电泳分离，并采用考马斯亮蓝-G-250染色，得本发明多肽的SDS-聚丙烯酰胺电泳图谱(如图1)。

实施例3

将多肽1按照每个孔10μg的量溶于100μl包被溶液(每升含1.59g Na₂CO₃，2.93gNaHCO₃)中包被酶标板，包被12小时，弃去包被液，用去离子水洗涤2两次，每次洗涤均在吸水纸上拍干；每孔加入250μl封阻液(PBS，0.05％Tween-20，5％，脱脂奶粉)室温放置2小时；弃去封阻液，加入用100μl封阻液1∶50稀释的血清，其中所用血清分别为被检出EV71感染的病人血清、普通健康人血清、孕妇的血清及对照血清(一已知的健康人血清)；室温放置1小时；弃去液体；用去离子水洗涤5次；加入100μl封阻液1∶5000稀释的生物素标记的抗人IgM抗体的二抗，室温放置半个小时；弃去液体，加入100μl封阻液1∶5000稀释的AP-标记的streptavidin，室温放置半个小时；洗涤5次，加入50μl显色液(pH9.8，9.7％二乙醇氨1mg/mL pNPP)；15分钟后用分光光度计测定405nm处的OD值；与对照相比，OD值低于5倍为阴性(-)；不低于5倍且不高于10倍为阳性(+)；高于10倍为强阳性(++)。结果见表4。结果证明本发明多肽与病人血清反应时均显阳性。而孕妇均显示为阴性。普通的健康人也均显示为阴性；说明本发明多肽能够特异性的检测EV71。

表3 多肽1ELISA检测结果

血清样本

病人1

病人2

病人3

病人4

病人5

病人6

免疫反应

+

++

+

血清样本

健康人1

健康人2

健康人3

健康人4

健康人5

健康人6

健康人7

健康人8

免疫反应

-

血清样本

孕妇1

孕妇2

孕妇3

孕妇4

孕妇5

孕妇6

孕妇7

孕妇8

免疫反应

-

实施例4 抗体的制备

4.1多肽1(80μg/只小鼠)添加Freud完全佐剂(50μl/只小鼠)，将混合物以皮下注射的方法免疫小鼠(6-8周的Balb/c小鼠)。每隔两周免疫一次，共免疫两次，在最后一次免疫14天后取血，分离血清，用于ELISA检测。

4.2多肽1按照每个孔10μg的量溶于100μl包被溶液(每升含1.59g Na₂CO₃，2.93gNaHCO₃)中包被酶标板，包被12小时；弃去包被液，用去离子水洗涤2两次，每次洗涤均在吸水纸上拍干；每孔加入250μl封阻液(PBS，0.05％Tween-20，5％，脱脂奶粉)室温放置2小时；弃去封阻液，加入用100μl封阻液1∶50稀释的血清，其中对照血清为未经免疫的小鼠血清；室温放置1小时；弃去液体；用去离子水洗涤5次；加入100μl封阻液1∶5000稀释的生物素标记的羊抗鼠IgG抗体的二抗，室温放置半个小时；弃去液体，加入100μl封阻液1∶5000稀释的AP-标记的streptavidin，室温放置半个小时；洗涤5次，加入50μl显色液(pH9.8，9.7％二乙醇氨1mg/mL pNPP)；15分钟后终止反应，用分光光度计测定405nm处的OD值；结果见图2。由图2可见，该血清具有很好的免疫效价。

实施例5 基于本发明多肽1的疫苗组合物。

5.1 80μg多肽1溶于50μlPBS(0.8％NaCl，0.02％KCl，0.144％Na2HPO4，0.024％KH2PO4；pH7.4)，加入50μl氢氧化铝佐剂，通过常规的混合法制备成一疫苗组合物。

5.2用5.1中制备的疫苗组合物免疫6-8周的Balb/c小鼠，背部皮下注射，剂量为100μl，2周后再次注射同样剂量的疫苗组合物，再过2周后处死小鼠，取小鼠血，分离血清，用于中和试验。

按不同比例用无血清培养基稀释5.2中制备的血清后与1百万个细胞培养感染剂量(TCID)的EV71病毒液孵育60分钟。将中和后的病毒液与RD细胞一起孵育72小时，观察其对RD细胞的保护作用，结果如图3所示，其中图3C，图3D，图3E与健康细胞对照图3A相比没有明显差异，与病毒对照图3B相比病毒的数量和密度明显偏低，说明图3C，图3D，图3E没有明显病变。可以看出，用该疫苗组合物免疫的小鼠，其抗血清含有的抗体可以较好地中和1百万TCID EV71病毒并保护RD细胞不被感染。

本发明实施例中所用抗体购自Abcam公司；其它化学试剂购自国药集团。

本发明说明书中未详细描述的实验操作同现有技术。

此外应理解，在阅读了本范明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明做各种改动或者修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

序列表

<110>北京凯悦宁科技有限公司

<120>一种人肠病毒71型特异性多肽及其应用

<160>8

<210>1

<211>123

<212>PRT

<213>人工序列

<220>

<223>人肠病毒71型特异性多肽-多肽1；

<400>1

Arg Val Ala Asp Val Ile Glu Ser Ser Ile Gly Asp Ser Val Ser

1 5 10 15

Arg Ala Leu Thr His Ala Leu Pro Ala Pro Thr Gly Gln Asn Thr

20 25 30

Gln Val Ser Ser His Arg Leu Asp Thr Gly Lys Leu Asn Ser His

35 40 45

Ser Thr Ala Glu Thr Thr Leu Asp Ser Phe Phe Ser Arg Ala Gly

50 55 60

Leu Val Gly Glu Ile Pro Asp Ser Arg Glu Ser Leu Ala Trp Gln

65 70 75

Thr Ala Thr Asn Pro Tyr Pro Thr Phe Gly Glu His Lys Gln Glu

80 85 90

Lys Asp Leu Glu Tyr Met Arg Asn Gln Asn Tyr Leu Phe Lys Ala

95 100 105

Asn Pro Asn Tyr Ala Gly Asn Ser Ile Lys Pro Thr Gly Ala Ser

110 115 120

Arg Thr Ala

<210>2

<211>41

<212>PRT

<213>人工序列

<223>人肠病毒71型特异性多肽-多肽2；

<400>2

Arg Val Ala Asp Val Ile Glu Ser Ser Ile Gly Asp Ser Val Ser

1 5 10 15

Arg Ala Leu Thr His Ala Leu Pro Ala Pro Thr Gly Gln Asn Thr

20 25 30

Gln Val Ser Ser His Arg Leu Asp Thr Gly Lys

36 40

<210>3

<211>24

<212>PRT

<213>人工序列

<223>人肠病毒71型特异性多肽-多肽3；

<400>3

Leu Asn Ser His Ser Thr Ala Glu Thr Thr Leu Asp Ser Phe Phe

1 5 10 15

Ser Arg Ala Gly Leu Val Gly Glu Ile

20

<210>4

<211>15

<212>PRT

<213>人工序列

<223>人肠病毒71型特异性多肽-多肽4

<400>4

Pro Asp Ser Arg Glu Ser Leu Ala Trp Gln Thr Ala Thr Asn Pro

1 5 10 15

<210>5

<211>15

<212>PRT

<213>人工序列

<223>人肠病毒71型(EV71)特异性多肽-多肽5

<400>5

Tyr Pro Thr Phe Gly Glu His Lys Gln Glu Lys Asp Leu Glu Tyr

1 5 10 15

<210>6

<211>28

<212>PRT

<213>人工序列

<223>人肠病毒71型特异性多肽-多肽6；

<400>6

Met Arg Asn Gln Asn Tyr Leu Phe Lys Ala Asn Pro Asn Tyr Ala

1 5 10 15

Gly Asn Ser Ile Lys Pro Thr Gly Ala Ser Arg Thr Ala

20 25

<210>7

<211>6

<213>PRT

<213>人工序列

<223>

<400>7

His His His His His His

1 5

<210>8

<211>378

<212>DNA

<213>人工序列

<223>编码人肠病毒71型特异性多肽多肽1的核苷酸序列

<400>8

ggatcccgcg tggcggatgt gattgaaagc agcattggcg atagcgtgag ccgcgcgctg 60

acccatgcgc tgccggcgcc gaccggccag aatacccagg tgagcagcca tcgcctggat 120

accggcaaac tgaatagcca tagcaccgcg gaaaccaccc tggatagctt ttttagccgc 180

gcgggcctgg tgggcgaaat tccggatagc cgcgaaagcc tggcgtggca gaccgcgacc 240

aatccgtatc cgacctttgg cgaacataaa caggaaaaag atctggaata tatgcgcaat 300

cagaattatc tgtttaaagc gaatccgaat tatgcgggca atagcattaa accgaccggc 360

gcgagccgca ccgcgtaa 378

Claims

1.一种人肠病毒71型特异性多肽，选自下述(a)～(f)中的任一种：

(a)氨基酸序列为SEQ ID NO.1的多肽1；

2.根据权利要求1所述的多肽，其特征在于(c)中所述的多肽片段为多肽2：SEQ IDNO.2，多肽3：SEQ ID NO.3，多肽4：SEQ ID NO.4，多肽5：SEQ ID NO5；多肽6：SEQ IDNO.6。

3.根据权利要求1所述的多肽，其特征在于(e)所述的多肽为选自多肽2、3、4、5或6中的任意2种、3种、4种或者5种多肽按照任意先后次序组合得到的氨基酸序列。

4.与权利要求1所述的多肽特异性结合的抗体。

5.根据权利要求4所述的抗体，其特征在于所述的抗体是完整的单克隆抗体、完整的多克隆抗体、抗血清或者具有免疫活性的抗体片段、抗体重链、抗体轻链、嵌合抗体或人源化抗体，所述抗体可以特异性的与本发明所述的多肽结合。

6.权利要求4所述的抗体在制备预防或治疗人肠病毒71型感染的药物组合物中的应用。

7.权利要求1所述的多肽在制备检测人肠病毒71型的检测试剂中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于所述的检测试剂包含容器以及位于容器内的本发明多肽，对应的抗血清以及其它必要化学物质。

9.权利要求1所述的多肽在制备预防或者治疗EV71感染的药物组合物中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于所述的药物组合物是指疫苗组合物。

11.根据权利要求9或10所述的应用，其特征在于所述的药物组合物含有免疫有效量的权利要求1所述多肽以及药学上可接受的载体和/或稀释剂。

12.根据权利要求11所述的应用，其特征在于所述的载体包括具有增强组合物效果的佐剂。

13.编码权利要求1所述多肽的核苷酸序列。