CN101862478B - 一种具有药物温敏控释作用支架的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种具有药物温敏控释作用支架的制备方法，所述支架的制备方法，将具有药物温敏控释作用涂层以旋涂、浸涂或喷涂的方式涂敷到支架表面上。本发明还提供了一种具有药物温敏控释作用涂层的制备方法。本发明制备方法简单，可操作性强。用本发明的方法制备的具有药物温敏控释作用的涂层具有良好的温度敏感性和药物控释功能。使用本发明方法制备的具有药物温敏控释作用的支架可使支架周围的组织细胞药物浓度高，而血液中药物浓度低。而使用现有的药物洗脱支架，其支架周围的组织细胞药物浓度低，而血液中药物浓度高。本发明方法制备的具有药物温敏控释作用的支架较现有的药物洗脱支架具有显著优势。
Description
【技术领域】
本发明涉及一种支架的制备方法，具体地说，是关于一种具有药物温敏控释作用支架的制备方法。
【背景技术】
在介入治疗领域，对于血管、气管、食道、尿道、胆道等器官的狭窄部位，通常植入支架来扩张狭窄部位，有效的维持管腔畅通。支架在未扩张状态下被导入管腔内，并定位于狭窄处，扩张并置于此处。随后人们将聚合物携带一些药物以旋涂、浸涂或喷涂的方式涂敷到支架表面上，制备得到药物洗脱支架。药物洗脱支架也称之为药物释放支架，通过包被于金属支架表面的聚合物携带药物，当支架置入管腔内病变部位后，药物自聚合物涂层中通过洗脱方式释放药物。用上述方法制备得到支架对药物释放无法控制。
中国专利文献CN：1568166公开了一种制备具有血液相容性抗增生，抗炎涂层支架方法。但是关于制备具有药物温敏控释作用涂层的方法，目前还未见报道。
【发明内容】
本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种具有药物温敏控释作用涂层的制备方法。
本发明的再一的目的是，提供一种具有药物温敏控释作用支架的制备方法。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：
一种具有药物温敏控释作用涂层的制备方法，该方法包括以下步骤：
a，温敏聚合物与可降解疏水聚合物的两亲嵌段共聚物制备：将温敏聚合物与可降解疏水聚合物按照1∶1-1∶8(摩尔比)配比制备两亲嵌段共聚物；
b，具有药物温敏控释作用涂层的制备：将聚合物载体材料溶解在溶剂中形成浓度范围1％～30％溶液，再将疏水性药物溶解在上述溶液中配制成涂层溶液，将步骤a的两亲嵌段共聚物溶解在上述涂层溶液中，制备得到具有药物温敏控释作用涂层，
所述的疏水性药物与聚合物载体材料的质量比是1∶1～1∶100，温敏两亲嵌段共聚物与聚合物载体材料的质量比是100∶5～1∶100。
步骤a所述的两亲嵌段共聚物是聚-N-异丙基丙烯酰胺，聚-N-异丙基丙烯酰胺-羟甲基丙烯酰胺，聚-N-异丙基丙烯酰胺-丙烯酸分别与聚丙交酯、聚己内酯、聚(丙交酯-乙交酯)、聚(丙交酯-己内酯)或聚(丙交酯-乙交酯-己内酯)共聚形成的无规或嵌段共聚物。
步骤b所述的可降解聚合物载体材料是指聚丙交酯、聚己内酯、聚(丙交酯-乙交酯)、聚(丙交酯-己内酯)或聚(丙交酯-乙交酯-己内酯)。
步骤b所述的疏水性药物选自阿霉素、山奈酚、长春新碱、喜树碱、表鬼臼毒素、紫杉醇、5-氟尿嘧啶一种或其混合物。
步骤b所述的溶剂是三氯甲烷、二氯甲烷、丙酮、四氢呋喃或二氧六环。
为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：
一种具有药物温敏控释作用支架的制备方法，将具有药物温敏控释作用涂层以旋涂、浸涂或喷涂的方式涂敷到支架表面上。
所述的支架是胆管支架或气管支架或血管支架。
本发明优点在于：
本发明制备方法简单，可操作性强。
用本发明的方法制备的具有药物温敏控释作用的涂层具有良好的温度敏感性和药物控释功能。
使用本发明方法制备的具有药物温敏控释作用的支架可使支架周围的组织细胞药物浓度高，而血液中药物浓度低。而使用现有的药物洗脱支架，其支架周围的组织细胞药物浓度低，而血液中药物浓度高。本发明方法制备的具有药物温敏控释作用的支架较现有的药物洗脱支架具有显著优势。
【附图说明】
图1：具有药物温敏控释作用支架涂层制备示意图。
图2：具有药物温敏控释作用支架的药物控释原理示意图。
图3：两亲嵌段共聚物(以下修改同)LCST检测结果。
图4：载药两亲嵌段共聚物胶束对QBC细胞存活率影响(24h)。
图5：载药两亲嵌段共聚物胶束对QBC细胞存活率影响(48h)。
图6A：阿霉素胶束(100μg/ml)，山奈酚胶束(100μg/ml)和空白胶束(400μg/ml)Hoechst凋亡染色结果图。
图6B：阿霉素阳性药物(5μg/ml)，山奈酚阳性药物(40μg/ml)和对照组hoechst凋亡染色结果图。
图7：各处理方式抑制裸鼠荷瘤生长体积作用的比较。
图8：各处理组抑制裸鼠荷瘤重量增长作用的比较。
图9：以PET为载基的阿霉素温敏药物控释(4*4mm2)对QBC细胞存活率影响(24h)。
图10：以PET为载基的阿霉素温敏药物控释(4*4mm2)对QBC细胞存活率影响(48h)。
图11：不同时间载药两亲嵌段共聚物胶束对QBC细胞存活率比较(0h vs24h vs 48h)。
【具体实施方式】
下面结合附图对本发明提供的具体实施方式作详细说明。
实施例1
一，温敏聚合物与可降解疏水聚合物的两亲嵌段共聚物制备
(1)将NIPAm与NHMAAm以7mmol∶1mmol的比例混合，溶入10ml四氢呋喃(THF)中，再往溶液中加入0.04mmol过氧化苯甲酰(BPO)作为引发剂，0.08mmol巯基乙醇为链转移剂，溶液通N2气20min；
(2)然后在N2的保护下置入70℃恒温水浴中，电磁搅拌反应7小时；
(3)反应液冷却后，抽滤除去杂质；
(4)8-10倍体积的乙醚为沉淀剂，经多次溶解、沉淀，真空干燥得白色粉末。
(5)将制备的羟甲基丙烯酰胺与N-异丙基丙烯酰胺共聚与聚己内酯(PCL)按照1∶4(摩尔比)配比，120℃反应24小时得到所需两亲温敏共聚物P-(NIPAAm-co-NHMAAm)-b-PCL
二，具有药物温敏控释作用涂层的制备
称取100mg聚己内酯(PCL))配制成重量百分比浓度为1-10％的三氯甲烷的有机溶液，以1∶1-1∶10的药物/聚己内酯比例称取阿霉素，将阿霉素置于上述溶液中，混和并搅拌。以20∶1-10∶1的两亲嵌段共聚物/聚己内酯比例称取两亲嵌段共聚物，将两亲嵌段共聚物置于上述溶液中混和并搅拌、漩涡形成均匀的混合溶液。
三，具有药物温敏控释作用支架的制备
取胆管支架(8.5-11.5F，圣诞树支架，材料聚四氟乙烯材料制成，外涂特氟隆膜，购于美国Wilson-Cook医学公司)，将上述具有药物温敏控释作用涂层以旋涂方式涂敷到上述支架表面上。室温空气干燥一段时间，然后真空干燥，灭菌。具有药物温敏控释作用支架的示意图见图1。
体外释放实验
体外释放试验表明这种药物涂层可以在1-3个月内实现稳定的持续均匀药物释放，并且没有出现突释现象。
体外生物评价
MTT活性实验表明，这种药物涂层可以有效的杀死胆管癌细胞，药物涂层支架与细胞共培养24小时后，细胞存活率为30-60％。
实施例2
用本发明的方法制备的具有药物温敏控释作用的涂层和支架优点说明，请参看图2，图2是具有药物温敏控释作用支架的药效释放原理示意图。图中的1：小颗粒表示药物；2：均匀涂层表示PCL涂层；3：表示温敏部分；4：表示两亲共聚物中的PCL部分。需要说明的是目前的药物洗脱支架更多的是直接用疏水的聚合物如聚乳酸，聚己内酯等作为涂层装载药物，而这种涂层对药物释放无法控制。本发明利用合成的温敏共聚物与聚己内酯作为混合药物涂层载体，在水的作用下，亲水的温敏链段会迁移到涂层外部，而共聚物中己内酯链段与聚己内酯会通过疏水相互作用，使两亲共聚物被“截留”在涂层内，从而在药物涂层最外层形成了一层温敏控释层，通过调节温敏共聚物与聚己内酯的比例可以有效的调控药物涂层的释放行为。
实施例3
一，温敏聚合物与可降解疏水聚合物的两亲嵌段共聚物制备
(1)将NIPAm与NHMAAm以5mmol∶1mmol的比例混合，溶入10ml四氢呋喃(THF)中，再往溶液中加入0.04mmol过氧化苯甲酰(BPO)作为引发剂，0.10mmol巯基乙醇为链转移剂，溶液通N2气20min；
(2)然后在N2的保护下置入70℃恒温水浴中，电磁搅拌反应7小时；
(3)反应液冷却后，抽滤除去杂质；
(4)8-10倍体积的乙醚为沉淀剂，经多次溶解、沉淀，真空干燥得白色粉末。
(5)将制备的共聚物与聚己内酯(PCL)按照1∶6(摩尔比)配比，180℃反应24小时得到所需两亲温敏共聚物P-(NIPAAm-co-NHMAAm)-b-PCL
二，具有药物温敏控释作用涂层的制备
称取100mg聚己内酯(PCL))配制成重量百分比浓度为1-10％的三氯甲烷的有机溶液，以1∶10-1∶20的药物/聚己内酯比例称取阿霉素，将阿霉素置于上述溶液中，混和并搅拌。以10∶1-1∶1的两亲嵌段共聚物/聚己内酯比例称取两亲嵌段共聚物，将两亲嵌段共聚物置于上述溶液中混和并搅拌、漩涡形成均匀的混合溶液。
三，具有药物温敏控释作用支架的制备
取胆管支架(8.5-11.5F，圣诞树支架，材料聚四氟乙烯材料制成，外涂特氟隆膜，购于美国Wilson-Cook医学公司)，将上述具有药物温敏控释作用涂层以旋涂方式涂敷到上述支架表面上。室温空气干燥一段时间，然后真空干燥，灭菌。
体外生物评价
MTT活性实验表明，这种药物涂层可以有效的杀死胆管癌细胞，药物涂层支架与细胞共培养48小时后，细胞存活率为10-20％。
实施例4
一，温敏聚合物与可降解疏水聚合物的两亲嵌段共聚物制备
具体方法同实施例1，其中聚-N-异丙基丙烯酰胺与聚丙交酯(PLA)按照1∶1(摩尔比)配比。
二，具有药物温敏控释作用涂层的制备
称取100mg聚丙交酯(PLA)配制成重量百分比浓度为10-15％的四氢呋喃的有机溶液，以1∶20-1∶30的药物/聚丙交酯比例称取喜树碱，将喜树碱置于上述溶液中，混和并搅拌。以1∶1-1∶15的两亲嵌段共聚物/聚丙交酯比例称取两亲嵌段共聚物，将两亲嵌段共聚物置于上述溶液中混和并搅拌、漩涡形成均匀的混合溶液。
三，具有药物温敏控释作用支架的制备
取气管支架(MTN气管支架，镍钛合金材料，南京微创医疗科技有限公司)，将上述具有药物温敏控释作用涂层以浸涂的方式涂敷到上述支架表面上。室温空气干燥一段时间，然后真空干燥，灭菌。
体外生物评价
MTT活性实验表明，这种药物涂层可以有效的杀死癌细胞，药物涂层支架与细胞共培养72小时后，细胞存活率为0.5-5％。
实施例5
一，温敏聚合物与可降解疏水聚合物的两亲嵌段共聚物制备
具体方法同实施例1，其中聚-N-异丙基丙烯酰胺-羟甲基丙烯酰胺与聚(丙交酯-乙交酯)(PLGA)按照1∶4(摩尔比)配比。
二，具有药物温敏控释作用涂层的制备
称取100mg聚(丙交酯-乙交酯)(PLGA)配制成重量百分比浓度为20-30％的丙酮的有机溶液，以1∶30-1∶40的药物/聚(丙交酯-乙交酯)(PLGA)比例称取山奈酚，将山奈酚置于上述溶液中，混和并搅拌。以1∶15-1∶30的两亲嵌段共聚物/聚(丙交酯-乙交酯)(PLGA)比例称取两亲嵌段共聚物，将两亲嵌段共聚物置于上述溶液中混和并搅拌、漩涡形成均匀的混合溶液。
三，具有药物温敏控释作用支架的制备
取胆管支架(8.5-11.5F，圣诞树支架，材料聚四氟乙烯材料制成，外涂特氟隆膜，购于美国Wilson-Cook医学公司)，将上述具有药物温敏控释作用涂层以喷涂的方式涂敷到上述支架表面上。室温空气干燥一段时间，然后真空干燥，灭菌。
体外生物评价
Hochst 33258染色结果表明，QBC细胞呈现核染色质浓缩、凋亡小体出现等典型的细胞凋亡特征，而未载药组及对照组细胞无形态学变化，所发荧光较均匀。
实施例6
一，温敏聚合物与可降解疏水聚合物的两亲嵌段共聚物制备
具体方法同实施例1，其中聚-N-异丙基丙烯酰胺-丙烯酸与聚(丙交酯-己内酯)(PGA)按照1∶8(摩尔比)配比。
二，具有药物温敏控释作用涂层的制备
称取100mg聚(丙交酯-己内酯)(PGA)配制成重量百分比浓度为30-35％的四氢呋喃的有机溶液，以1∶40-1∶50的药物/聚(丙交酯-己内酯)(PGA)比例称取5-氟尿嘧啶，将5-氟尿嘧啶置于上述溶液中，混和并搅拌。以1∶30-1∶45的两亲嵌段共聚物/聚(丙交酯-己内酯)(PGA)比例称取两亲嵌段共聚物，将两亲嵌段共聚物置于上述溶液中混和并搅拌、漩涡形成均匀的混合溶液。
三，具有药物温敏控释作用支架的制备
取气管支架(MTN气管支架，镍钛合金材料，南京微创医疗科技有限公司)，将上述具有药物温敏控释作用涂层以旋涂的方式涂敷到上述支架表面上。室温空气干燥一段时间，然后真空干燥，灭菌。
实施例7
一，温敏聚合物与可降解疏水聚合物的两亲嵌段共聚物制备
具体方法同实施例1，其中聚-N-异丙基丙烯酰胺与聚(丙交酯-乙交酯-己内酯)(PGLC)按照1∶3(摩尔比)配比。
二，具有药物温敏控释作用涂层的制备
称取100mg聚(丙交酯-乙交酯-己内酯)(PGLC)配制成重量百分比浓度为35-40％的二氧六环的有机溶液，以1∶50-1∶60的药物/聚(丙交酯-乙交酯-己内酯)(PGLC)比例称取山奈酚，将山奈酚置于上述溶液中，混和并搅拌。以1∶45-1∶60的两亲嵌段共聚物/聚(丙交酯-乙交酯-己内酯)(PGLC)比例称取两亲嵌段共聚物，将两亲嵌段共聚物置于上述溶液中混和并搅拌、漩涡形成均匀的混合溶液。
三，具有药物温敏控释作用支架的制备
取血管支架(HT3634-140-2000，线性聚酯，购于微创医疗器械(上海)有限公司)，将上述具有药物温敏控释作用涂层以喷涂的方式涂敷到上述支架表面上。室温空气干燥一段时间，然后真空干燥，灭菌。
实施例8
一，温敏聚合物与可降解疏水聚合物的两亲嵌段共聚物制备
具体方法同实施例1，其中聚-N-异丙基丙烯酰胺-丙烯酸与聚丙交酯(PLA)按照1∶4(摩尔比)配比。
二，具有药物温敏控释作用涂层的制备
称取100mg聚丙交酯(PLA)配制成重量百分比浓度为40-45％的二氯甲烷的有机溶液，以1∶90-1∶100的药物/聚丙交酯(PLA)比例称取紫杉醇，将紫杉醇置于上述溶液中，混和并搅拌。以1∶80-1∶100的两亲嵌段共聚物/聚丙交酯(PLA)比例称取两亲嵌段共聚物，将两亲嵌段共聚物置于上述溶液中混和并搅拌、漩涡形成均匀的混合溶液。
三，具有药物温敏控释作用支架的制备
取胆管支架(8.5-11.5F，圣诞树支架，材料聚四氟乙烯材料制成，外涂特氟隆膜，购于美国Wilson-Cook医学公司)，将上述具有药物温敏控释作用涂层以旋涂的方式涂敷到上述支架表面上。室温空气干燥一段时间，然后真空干燥，灭菌。
实施例9
材料取自实施例1，
红外光谱(FTIR)分析仪检测两亲共聚物组成
采用KBr压片法制样，在配置DTGS检测器和KBr分束器的BrukerEQUINOX55型傅立叶变换红外光谱仪上进行分析。仪器的分辨率优于0.5cm-1，扫描次数，扫描范围为400-4000cm-1。红外谱图证明了P(NIPAAm-co-HMAAm)-b-PCL嵌段共聚物的存在。
两亲嵌段共聚物低临界溶解温度(LCST)的检测
(1)称取一定量的P-(NIPAAm-co-NHMAAm)-b-PCL样品溶于蒸馏水中，配制成5mg/ml的溶液，用恒温槽恒温。
(2)紫外分光光度计在自制的循环水恒温加热套恒温下，每一温度下恒温20min，测定450nm固定波长的透光率。
(3)根据温度-透光率曲线，把透光率突变中点所对应得温度定为聚合物的低临界溶液温度LCST。
两亲共聚物LCST检测结果见图3，在图3中我们可以看到P(NIPAAm-co-HMAAm)-OH预聚物和P(NIPAAm-co-HMAAm)-b-PCL嵌段共聚物之间的LCST变化。P(NIPAAm-co-HMAAm)-b-PCL嵌段共聚物形成的胶束的LCST为38℃左右，低于P(NIPAAm-co-HMAAm)-OH的LCST。主要是因为形成嵌段共聚物后预聚物的羟基大量消失及疏水段加入的协同效应。
从图3中还可以看出用更为亲水的羟甲基丙烯酰胺与N-异丙基丙烯酰胺共聚可以有效的提高温敏共聚物的LCST到40℃左右，而进一步引入疏水的可降解的聚己内酯后，LCST降低到38℃，此温度在胆道温度范围内。
实施例10
体外研究
MTT法检测载药胶束对胆管癌细胞的抑制情况
检测载药两亲嵌段共聚物胶束对QBC细胞存活率影响
1、实验分组：
两亲嵌段共聚物胶束：阿霉素(M(Doxorubicin)材料来源于实施例1)
山奈酚(M(Kaemferol)材料制备方法同实施例1)
阳性药物组：阿霉素(Doxorubicin)
山奈酚(Kaemferol)
空白载体组
空白对照组
2、设定浓度：空白载体组、载药组：0、25、50、100、200、400μg/ml
阳性药物组：阿霉素：5μg/ml
山奈酚：40μg/ml
3、设定时间：0，24h，48h
MTT法检测温敏载药胶束对胆管癌细胞的杀伤
4、结果
图4和图5说明单纯的空白胶束对QBC肿瘤细胞几乎无杀伤作用，载阿霉素胶束对QBC细胞的杀伤随浓度的增加而增大，随时间的增加对QBC细胞的抑制作用增强；
Hoechst染色检测胆管癌细胞凋亡情况
(1)实验原理：
细胞凋亡时产生最显著的变化是染色体固缩，DNA裂解使细胞核形态发生变化。Hoechst 33258是一种亲脂性物质，为特异性DNA染料。它能跨膜进入活细胞，优先结合到DNA上Adenosine-Thymidine(A-T)富集区域。在凋亡细胞中，细胞膜对Hoechst 33258的摄取增高，并且由于染色体高度浓缩，Hoechst 33258与之结合增强。正常细胞和早中期凋亡细胞均可被Hoechst染色，但是正常细胞核的Hoechst着色的形态呈圆形，淡蓝色，内有较深的蓝色颗粒；凋亡细胞的细胞核由于浓集而呈亮蓝色，或核呈分叶，碎片状，边集；死细胞则不被染色，由此可检测出凋亡。
(2)实验步骤：
①将对数生长期细胞1×104细胞/ml接种于24孔培养板，不同浓度的药物(100、400μg/ml)处理72h。
②1500rpm离心5min，去培养基，PBS洗2遍，1500rpm离心5min，去上清。
③加入细胞固定液(甲醇∶乙酸＝3∶1)，4℃固定10min。
④去固定液，PBS洗2遍，1500rpm离心5min去上清。
⑤加入5μg/ml Hoechst 33258，染色10min。
⑥356nm紫外激发，荧光显微镜下观察并拍照。
(3)结果见图6A，图6B。
图为Hochst 33258染色结果图，从图中可以观察到阳性药物组、载药微粒组、载药胶束组作用72h后，QBC细胞呈现核染色质浓缩、凋亡小体出现等典型的细胞凋亡特征，高浓度组比低浓度组更明显。空白载体组及对照组细胞无形态学变化，所发荧光较均匀。
实施例11
体内研究
一，建立人胆管癌荷瘤鼠模型
(1)5-6周龄裸鼠饲养，胆管癌QBC细胞以1×107细胞/只(PBS稀释成0.2ml)接种于裸鼠前腋皮下。
(2)4周后，取腋下肿瘤剪碎研磨，以1×107细胞/只(PBS稀释成0.2ml)接种于裸鼠前腋皮下，建立肿瘤模型。
(3)接种后每天观察有无肿瘤形成及注射点有无破溃红肿，经过3-7天可见接种部位皮下出现灰白色结节，并逐渐长大，形或椭圆形，突于体表。
(4)肿瘤接种两周后给药。载药两亲性共聚物胶束组采用瘤体注射方式(20mg/kg)；温敏控释药物涂层体系直接植入皮下组织(4*4mm2)。
(5)隔周称重并记录，观察裸鼠的生存状态。
(6)用药2周后拔眼球取血并脱臼处死，摘取肿瘤。
(7)称取肿瘤瘤重量、测量肿瘤大小；血样3500rpm离心15min分离血清，于4℃保存待用测定血药浓度；部分肿瘤保存在10％中性甲醛溶液中待用HE染色实验；部分肿瘤保存在-80℃待用测定肿瘤内药物浓度。)
将裸鼠随机分为6组：载阿霉素胶束组；阿霉素温敏控释组；阿霉素温敏控释组；空白材料支架组；模型组；手术对照组，每组6只。
二，各组制备
阿霉素温敏控释组方法：见实施例1
阿霉素非温敏控释组方法：阿霉素与PCL混匀后直接涂敷于支架材料表面即可。
空白材料支架组方法：即将表面未涂敷任何材料的PET材料修剪成1×1mm大小后植入裸鼠荷瘤皮下。
手术对照组方法：单纯手术切开，未植入任何材料。
模型组方法：仅仅建模，不切开与植入材料。
成瘤后采用直接注射或直接置入方法置入各材料组，检测裸鼠肿瘤体积及称重，计算各组抑瘤率并绘制各组肿瘤生长曲线，比较各组体内抑瘤作用的差异
三，结果
肿瘤的生长情况，36只裸鼠全部存活，精神状态良好。药物治疗前后动物体重变化情况见表1，药物作用前后肿瘤的体积变化情况见表2，肿瘤重量及药物对肿瘤的抑制情况见表3。肿瘤体积生长曲线见图7，各组肿瘤重量见图8。从以上实验结果可以看出，阿霉素胶束组、阿霉素温敏控释组、阿霉素非温敏控释组均能明显抑制裸鼠腋下肿瘤的生长(p＜0.05)，阿霉素温敏控释组对肿瘤的抑制效果更好(p＜0.01)，抑制率达34.79％；空白载体组对裸鼠肿瘤生长没有明显影响(p＞0.05)；从治疗前后的体重变化来看，阿霉素非温敏控释组的毒性较于其他载药组毒性大，裸鼠体重明显下降(p＜0.05)。
表1 药物治疗前后动物体重变化情况
| 治疗前体重(g) | 治疗后体重(g) | |
| 阿霉素胶束组(M(Dox)) | 21.5±1.23 | 18.7±2.6 |
| 阿霉素温敏控释组(T(Dox)) | 19.8±0.45 | 17.3±2.18 |
| 阿霉素非温敏控释组(UT(Dox)) | 19.3±1.05 | 15.7±3.15* |
| 空白载体组(BC) | 19.7±1.67 | 18.1±2.75 |
| 手术对照组(OC) | 20.5±1.32 | 19.3±2.96 |
| 模型组(MC) | 20.7±1.09 | 19.7±2.08 |
表2 药物作用前后肿瘤的体积变化情况
| 治疗前瘤体积(mm3) | 治疗后瘤体积(mm3) | |
| 阿霉素胶束组(M(Dox)) | 60.33±11.86 | 613.50±108.16* |
| 阿霉素温敏控释组(T(Dox)) | 57.33±8.69 | 502.11±51.27** |
| 阿霉素非温敏控释组(UT(Dox)) | 58.17±10.13 | 678.57±67.53* |
| 空白载体组(BC) | 63.45±16.70 | 801.08±126.55 |
| 手术对照组(OC) | 61.17±13.83 | 705.83±117.72 |
| 模型组(MC) | 67.83±11.99 | 744.67±110.06 |
*p＜0.05，**p＜0.01，与模型组比较
表3 药物作用对肿瘤重量增长的抑制情况
| 肿瘤重量(g) | 肿瘤抑制率(％) | |
| 阿霉素胶束组(M(Dox)) | 1.51±0.19* | 21.49 |
| 阿霉素温敏控释组(T(Dox)) | 1.26±0.13** | 34.79 |
| 阿霉素非温敏控释组(UT(Dox)) | 1.67±0.11* | 13.59 |
| 空白载体组(BC) | 2.08±0.31 | - |
| 手术对照组(OC) | 1.75±0.29 | - |
| 模型组(MC) | 1.94±0.23 | - |
*p＜0.05，**p＜0.01，与模型组比较
实施例12
0％，10％，20％，30％Doxorubicin与0％ 10％20％ 30％Kaemferol对QBC细胞存活率影响
一，方法
①收集对数增长期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100ul，铺板时待测细胞密度调整为103-104个/孔，分为0％，10％，20％，30％组、空白载体组和空白对照组等；
②5％CO2，37℃孵育，至细胞贴壁，加入浓度梯度的药物涂层材料等；
③5％CO2，37℃孵育24、48小时，倒置显微镜下观察。
④每孔加入20μl MTT溶液(5mg/ml，即0.5％MTT)，继续培养4h。
⑤终止培养，小心吸去孔内培养液。
⑥每孔加入150μl二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪OD 490nm处测量各孔的吸光值。
⑦同时设置调零孔即空白组(培养基、MTT、二甲基亚砜)，对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜)。0％ 10％20％ 30％Doxorubicin与0％ 10％20％ 30％Kaemferol制备同实施例9
二，结果
温敏控释药物对细胞有杀伤作用，并且随着温敏控释介质的增加，其细胞存活率抑制作用增强；同样的，阿霉素载药组对细胞的抑制作用大于山奈酚载药组。请见图9，图10和图11。图9，图10和图11说明以PET为载基的温敏控释药物对细胞有杀伤作用，并且随着温敏控释介质的增加，其对细胞存活率抑制作用增强。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。
Claims (6)
1.一种具有药物温敏控释作用涂层的制备方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：
a，温敏聚合物与可降解疏水聚合物的两亲嵌段共聚物制备：将温敏聚合物与可降解疏水聚合物按照1∶1-1∶8摩尔比配比制备两亲嵌段共聚物；
所述的两亲嵌段共聚物是聚-N-异丙基丙烯酰胺，聚-N-异丙基丙烯酰胺-羟甲基丙烯酰胺，聚-N-异丙基丙烯酰胺-丙烯酸分别与聚丙交酯、聚己内酯、聚(丙交酯-乙交酯)、聚(丙交酯-己内酯)或聚(丙交酯-乙交酯-己内酯)共聚形成的嵌段共聚物，
b，具有药物温敏控释作用涂层的制备：将可降解聚合物载体材料溶解在溶剂中形成浓度范围1％～30％溶液，再将疏水性药物溶解在上述溶液中配制成涂层溶液，将步骤a的两亲嵌段共聚物溶解在上述涂层溶液中，制备得到具有药物温敏控释作用涂层，
所述的疏水性药物与可降解聚合物载体材料的质量比是1∶1～1∶100，温敏两亲嵌段共聚物与可降解聚合物载体材料的质量比是100∶5～1∶100。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤b所述的可降解聚合物载体材料是指聚丙交酯、聚己内酯、聚(丙交酯-乙交酯)、聚(丙交酯-己内酯)或聚(丙交酯-乙交酯-己内酯)。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤b所述的疏水性药物选自阿霉素、山奈酚、长春新碱、喜树碱、表鬼臼毒素、紫杉醇、5-氟尿嘧啶一种或其混合物。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤b所述的溶剂是三氯甲烷、二氯甲烷、丙酮、四氢呋喃或二氧六环。
5.一种具有药物温敏控释作用支架的制备方法，其特征在于：将权利要求1-4任一方法所述制备得到的具有药物温敏控释作用涂层以旋涂、浸涂或喷涂的方式涂敷到支架表面上。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述的支架是胆管支架或气管支架或血管支架。
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Citations (3)
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|---|---|---|---|---|
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|---|---|---|---|---|
| US5720976A (en) * | 1996-01-30 | 1998-02-24 | Korea Advanced Institute Of Science And Technology | Thermosensitive liposome and process for preparing the same |
| CN1738659A (zh) * | 2003-01-22 | 2006-02-22 | 株式会社钟化 | 生物体留置用支架 |
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